两面针叶抗炎镇痛活性部位，其制备方法及其用途
【专利摘要】公开了两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备方法，包括如下步骤：A.浸润：将两面针叶粗粉用40％或以上浓度的醇溶液，以2～12倍(V/W)的量浸泡8～12小时使之溶胀；B.提取：用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的两面针叶粗粉加热回流2次或2次以上，醇溶液用量为两面针叶粗粉的10～25倍(V/W)，每次提取时间为1～4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，过滤，取滤液，得药液比重为1.02～1.20；C.大孔树脂处理：将B步骤中上清液通过大孔树脂吸附，用10倍柱体积的10％的醇溶液洗脱，继之用50～85％的醇溶液洗脱，至碘-碘化钾反应呈阴性，收集醇洗脱液，所述大孔树脂选自AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20和HPD-100；D.干燥：将C步骤获得的醇洗脱液减压干燥或喷雾干燥，即得。
【专利说明】两面针叶抗炎镇痛活性部位，其制备方法及其用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药活性部位，其制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002]炎症是一种常见多发病，是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御性反应，是机体对各种炎性刺激引起组织损害而产生的一种基本病理过程，也是机体对损伤或感染产生的一种重要的保护性反应。体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、痈、肺炎、肝炎、肾炎等)都属于炎症性疾病。疼痛是机体受到来自内外环境的伤害性刺激时出现的一种伴有情绪反应的病理生理过程，它对于机体的影响是多方面的，既是机体受到伤害性刺激后的一种防御反应，也是多种疾病的一种症状。
[0003]抗炎镇痛药是一类具有抗炎、解热、镇痛及抗风湿作用的常用药物，抗炎镇痛药物是临床治疗中仅次于抗感染药物的第二大类药物，在临床用药中占有重要地位。目前，全球止痛药市场总销售额估计在400亿~450亿美元之间，疼痛治疗药物市场仍然明显没有满足临床需求。在人类对镇痛药物的探索研究中，中药、天然药已越来越凸显其药效良好、无成瘾性、不良反应少及资源丰富等优势，引起人们的重视。
[0004]中医学治疗痛证已有几千年的历史，在《黄帝内经》中就对病因、病机、病位、证候、预后等方面进行了系统论述。在复杂多样的天然产物化学成分中，一些化学成分如生物碱、黄酮类、苷类、挥发油及有机酸等，往往具有较强的镇痛作用。
[0005]两面针Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.为芸香科(Rutaceae)花椒属植物，别名野花椒、入地金牛、蔓椒、双面针，为广西道地大宗主产药材之一，因质量好，产量大而著称，是中医药家首选常用之药物，广泛应用于中医处方、中成药及精细化工产品中。全国使用两面针为原料药材的中成药就高达63种之多，如“三九胃泰”、“金鸡胶囊”、“金鸡片”、“金鸡颗粒”、“复方两面针含片”、“两`面针止痛片”、“正骨水”等；还有日用化工产品“两面针中药牙膏”。
[0006]两面针法定入药部位为根，有行气止痛、活血化瘀、祛风通络之功效。临床上常用于气滞血瘀引起的跌扑损伤、风湿痹痛、胃痛、牙痛，毒蛇咬伤；外治汤火烫伤。
[0007]实际生产中，非药用部位叶在规范化种植生产中一直被当成废弃物白白地浪费掉；假如以现代科学实验为依据，结合民间传统用药习惯，开发出两面针叶抗炎镇痛的活性部位制剂或护肤品，从两面针的年产量看，其经济价值也是相当可观的。
【发明内容】
[0008]本申请的一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备方法，其包括如下步骤:
[0009]A.浸润:将两面针叶粗粉用40%或以上浓度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小时使之溶胀；
[0010]B.提取:用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的两面针叶粗粉加热回流2次或2次以上，醇溶液用量为两面针叶粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取时间为I~4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，过滤，取滤液，得药液比重为1.02~1.20 ;
[0011]C.大孔树脂处理:将B步骤中上清液通过大孔树脂吸附，用10倍量10%的醇溶液洗脱，继之用50~85%的醇溶液洗脱，至碘-碘化钾反应呈阴性，收集醇洗脱液，所述大孔树脂选自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ；
[0012]D.干燥:将C步骤获得的醇洗脱液减压干燥或喷雾干燥，即得。
[0013]本申请的另一实施方案提供了采用上述制备方法制备的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0014]本申请的另一实施方案提供了药物组合物，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0015]本申请的另一实施方案提供了保健品，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0016]本申请的另一实施方案提供了化妆品，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0017]本申请的另一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备用于抗炎镇痛的药物中的用途。
[0018]本申请的另一实施 方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备保健品中的用途。
[0019]本申请的另一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备化妆品中的用途。
【具体实施方式】
[0020]本申请的一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备方法，其包括如下步骤:
[0021]A.浸润:将两面针叶粗粉用40%或以上浓度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小时使之溶胀；
[0022]B.提取:用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的两面针叶粗粉加热回流2次或2次以上，醇溶液用量为两面针叶粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取时间为I~4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，过滤，取滤液，得药液比重为1.02~1.20 ;
[0023]C.大孔树脂处理:将B步骤中上清液通过大孔树脂吸附，用10倍量10%的醇溶液洗脱，继之用50~85%的醇溶液洗脱，至碘-碘化钾反应呈阴性，收集醇洗脱液，所述大孔树脂选自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ；
[0024]D.干燥:将C步骤获得的醇洗脱液减压干燥或喷雾干燥，即得。
[0025]在某些实施方案中，所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。在更优选的实施方案中，所述醇为乙醇。
[0026]在某些实施方案中，可用慢速渗漉或微波提取替代回流提取。在该实施方案中，醇溶液用量为生药量的10倍至40倍(v/w)。
[0027]可用于本申请的大孔树脂选自AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和HPD-1OO0在某些实施方案中，优选采用DlOl或AB-8大孔树脂。[0028]本申请的另一实施方案提供了采用上述制备方法制备的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0029]本申请的另一实施方案提供了药物组合物，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0030]本申请的另一实施方案提供了保健品，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0031]本申请的另一实施方案提供了化妆品，其包含本申请的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
[0032]本申请的另一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备用于抗炎镇痛的药物中的用途。药物的剂型可以是滴丸、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂或贴膏等。
[0033]本申请的另一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备保健品中的用途。
[0034]本申请的另一实施方案提供了两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备化妆品中的用途。
[0035]本申请的方法操作简单，重复性好，树脂可重复使用，为两面针叶活性部位大批量的工业生产创造了条件。此外，按照本申请的方法制备的两面针叶活性部位(组分)，有效成分含量高，抗炎镇痛活性强。 [0036]本发明制 备的两面针叶抗炎镇痛活性部位的棉球肉芽肿胀实验、二甲苯致耳廓肿胀实验、角叉菜胶足趾肿胀实验、热板法和醋酸扭体法试验结果表明，抗炎镇痛效果显著，急性毒性试验表明，两面针叶活性部位对小鼠无急性毒性。
[0037]实施例
[0038]下面结合两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备方法和药理实验，说明本申请的【具体实施方式】。
[0039]实施例1两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备
[0040]取两面针叶干燥药材200g，粉碎，加1000ml 70%乙醇溶液，搅拌均匀，放置浸泡10小时；然后加入3000ml 70%乙醇溶液加热回流2.5小时，过滤，重复两次，合并提取液。
[0041]将上述提取液减压浓缩，得药液比重为1.13(60°C )的浸膏。
[0042]将上述浸膏的一半减压浓缩成干膏，得18.63克粗提物，另一半浸膏加到装有DlOl大孔树脂的层析柱中，用10倍柱体积的10%的乙醇溶液洗脱，继之用80%乙醇溶液洗脱，至碘-碘化钾反应呈阴性。收集80%乙醇溶液洗脱液，减压回收溶剂，得80%乙醇洗脱物。
[0043]80%乙醇洗脱后用10倍量95%乙醇洗脱，收集95%乙醇溶液洗脱液，减压回收溶剂，得95%乙醇洗脱物。
[0044]在以下的实施例中，除热板法实验外，实验动物分组均按如下步骤进行:各取110只体重为20±2g的昆明种小鼠(由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号=SCXI^i2009-0002)，随机分为11组，每组10只，雌雄各半，设模型组(0.5% CMC-Na, 0.5ml/天)、阿司匹林组0.5g/kg、两面针叶的70%乙醇粗提取物组、80%乙醇洗脱物组，95%乙醇洗脱物组。其中，70%乙醇粗提物组、80%乙醇洗脱物组和95%乙醇洗脱物组均设高、中、低剂量组，对应剂量分别为lg/kg、0.5g/kg、0.25g/kg。[0045]统计学处理:实验数据用SPSS 11.5统计分析软件进行分析，组间比较采用t检验。
[0046]实施例2
[0047]对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
[0048]11组实验小鼠连续灌胃给药7d，末次给药30min后，于小鼠右耳正反面均匀涂抹二甲苯50 μ L/只致炎，左耳为对照，30min后将小鼠颈椎脱臼处死，用直径为6mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圆耳片，精密称量，右耳与左耳质量之差即为肿胀度，并计算小鼠耳廓肿胀抑制率，肿胀抑制率(％)=(模型组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度X 100%。
[0049]两面针叶总提物及各洗脱部位对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响，结果如表1所
/Jn ο
[0050]表1两面针叶总提取物及不同洗脱部位对小鼠耳廓肿胀的影响(J ± S，《=10)
【权利要求】
1.两面针叶抗炎镇痛活性部位的制备方法，其特征在于包括如下步骤: A.浸润:将两面针叶粗粉用40%或以上浓度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小时使之溶胀； B.提取:用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的两面针叶粗粉加热回流2次或2次以上，醇溶液用量为两面针叶粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取时间为I~4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，过滤，取滤液，得药液比重为1.02~1.20 ; C.大孔树脂处理:将B步骤中上清液通过大孔树脂吸附，用10倍柱体积的10%的醇溶液洗脱，继之用50~85%的醇溶液洗脱，至碘-碘化钾反应呈阴性，收集醇洗脱液，所述大孔树脂选自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ； D.干燥:将C步骤获得的醇洗脱液减压干燥或喷雾干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤B中，用慢速渗漉、或微波提取替代回流提取，醇溶液用量为两面针叶粗粉的10至40倍(v/w)，过滤，合并提取液。
4.根据权利要求1-3中任一权利要求所述的方法，其特征在于，在步骤C中，用10倍量10%乙醇洗脱后，继之用80%乙醇洗脱。
5.两面针叶抗炎镇痛活性部位，其按照权利要求1-4中任一权利要求所述的方法制备。
6.根据权利要求5所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位，其为80%乙醇洗脱物。
7.药物组合物，其包含权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
8.保健品，其包含权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
9.化妆品，其包含权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位。
10.权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备用于抗炎镇痛的药物中的用途。
11.权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备保健品中的用途。
12.权利要求5或6所述的两面针叶抗炎镇痛活性部位在制备化妆品中的用途。
【文档编号】A61K36/758GK103800509SQ201210452472
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2012年11月13日 优先权日:2012年11月13日
【发明者】冯洁, 赖茂祥, 莫遗盛 申请人:广西医科大学