专利名称：墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法及装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种药材提取方法，特别涉及一种墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法及装置。
背景技术：
墨旱莲(EcliptaeHerba)为菊科一年生草本植物鳢肠(Ecliptae ProstrataL.)的干燥地上部分。中国药典记载，墨旱莲性寒、味甘，归肝、肾经，具有凉血止血，滋阴益肾之功效。中医文献记载，墨旱莲可以乌须黑发，生发。在临床上用于治疗多种出血病症，如咳血、吐血、便血、尿血、崩漏、产后血崩、外伤出血等；用于治疗皮肤性病如脂溢性皮炎，治疗斑秃和尖鋭湿疣，还可治疗冠心病等。现在药理研究表明，三萜皂苷类化合物是墨旱莲中主要的活性成分，分为齐墩果烷型和蒲公英赛烷型，主要有旱莲苷A、B、C、D、刺囊酸、齐墩果酸、熊果酸。具有以下药理作用(I)止血作用；(2)保肝作用；(3)免疫调节作用；(4)抗炎和抗肿瘤作用；(5)抗氧化与抗衰老作用；(6)降血脂作用。墨旱莲药材传统的提取方法是こ醇回流提取。目前，有关于微波提取、超声辅助提取或超临界提取方面的报道。传统提取方法消耗大量溶剂与能量，有效成分提取效率低，増加大生产成本。因此急需寻求ー种低能耗、減少溶剂使用率的绿色提取技术，同时提高药材的利用率。
发明内容
为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了ー种提取、浓缩温度低，时间短，所用提取溶剂能循环使用的墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法。为了实现上述目的本发明采取的技术方案是一种墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，所述方法包括将墨旱莲干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%_80%的こ醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把墨旱莲粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80°C，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。所述提取温度为60-70°C，所述墨旱莲粗提液流速为20-30mL/min，所述回收的溶剂与所述墨旱莲粗提液的流速相等。所述こ醇溶液与所述墨旱莲的加入比例为质量比5-15:1。进ー步还包括，在提取液输送ロ与浓缩罐中设置在线检测ロ，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测墨旱莲总三萜皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出ロ检测到墨旱莲总三萜皂苷浓度低于0. 2mg/mL吋，提取完成。优选的方法包括称取超微粉碎10min的墨旱莲药材粉末100g，置于提取罐中，カロ入体积分数为75%的こ醇溶液IOOOmL, 65°C回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24mL/min，放出300mL提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至lOOOmL，3h后停止回流，浓缩液65°C下浓缩定容至500mL。本发明还提供一种用于墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第二液位计。所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样ロ，所述浓缩罐上设有浓缩液取样ロ。所述提取液取样ロ与浓缩液取样ロ连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是与现有技术相比，本发明減少了提取过程的能耗，溶剂能循环使用，采用低温动态提取与低温真空浓缩エ艺，減少墨旱莲药材在提取过程的损失，墨旱莲总三萜皂苷的提取率明显高于传统こ醇回收提取法。与微波提取、 超声辅助提取或超临界提取相比，本法提取条件温和稳定，设备成本投入较少，能有效降低生产成本，适用于墨旱莲提取的大生产エ艺。
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本发明实施例提供的装置的结构示意图；图2是本发明实施例提供的30min提取液紫外_可见全波长扫描图；图3是本发明实施例提供的45min提取液紫外_可见全波长扫描图；图4是本发明实施例提供的60min提取液紫外_可见全波长扫描图；图5是本发明实施例提供的75min提取液紫外_可见全波长扫描图；图6是本发明实施例提供的90min提取液紫外_可见全波长扫描图；图7是本发明实施例提供的120min提取液紫外_可见全波长扫描图；图8是本发明实施例提供的150min提取液紫外_可见全波长扫描图；图9是本发明实施例提供的180min提取液紫外-可见全波长扫描图；图10是本发明实施例提供的210min提取液紫外-可见全波长扫描图；图11是本发明实施例提供的240min提取液紫外_可见全波长扫描图；图12是本发明实施例提供的300min提取液紫外_可见全波长扫描图；图13是本发明实施例提供的360min提取液紫外-可见全波长扫描图；图14是本发明实施例提供的不同时间点提取液墨旱莲总三萜皂苷含量曲线图15是本发明实施例提供的60min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图16是本发明实施例提供的75min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图17是本发明实施例提供的90min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图18是本发明实施例提供的120min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图19是本发明实施例提供的150min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图20是本发明实施例提供的180min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图21是本发明实施例提供的2IOmin浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图22是本发明实施例提供的240min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图23是本发明实施例提供的300min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图24是本发明实施例提供的360min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；图25是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液墨旱莲总三萜皂苷含量曲线图；图26是本发 明实施例提供的不同提取方法对墨旱莲中总三萜皂苷转移率的影响柱图。图1中I提取罐，2三通阀，3第一药液泵，4浓缩罐，5第一冷凝器，6中转罐，7第ニ药液泵，8第二冷凝器，9循环加热器，10循环冷凝机组，11真空系统，12第一液位计，13提取液样ロ，14浓缩液取样ロ，15第二液位计。
具体实施例方式为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进ー步地详细描述。參见图1，一种用于墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐1，提取罐I连接循环加热器9，提取罐I下部通过第一药液泵3连接浓缩罐4，浓缩罐4连接真空系统11及第一冷凝器5，第一冷凝器5分别连接循环冷凝机组10及中转罐6，中转罐6通过第二药液泵7连接第二冷凝器8，第二冷凝器8连接提取罐I。作为优选，所述提取罐I内设有涡轮式搅拌器。提取罐I内设有第一液位计12。浓缩罐4内设有第二液位计15。提取罐I与第一药液泵3连接的管线上设有三通阀2和提取液样ロ 13，浓缩罐4上设有浓缩液取样ロ 14。提取液取样ロ 13与浓缩液取样ロ 14连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪，以实现在线检测。利用本发明的设备和方法，提取时间短，一般为3-4小吋。在提取罐与浓缩罐设置液位计与感温元件，提取浓缩温度与提取溶剂体积变化值小于5%，墨旱莲粗提液的输送速度与回收溶剂输送速度保持一致，提取体系稳定，可长期处于动态连续状态。利用本发明的装置提取墨旱莲药材中的总三萜皂苷的动态连续循环提取方法如下将墨旱莲干燥地上部分超微粉碎后，将粉末放进提取罐I上端入口中，并从提取罐I上端溶剂入口加入适量提取溶剤。启动循环加热器9，其产生的恒温加热介质在提取罐I外夹套中循环加热，设置提取温度为60-70°C，优选65°C，启动提取罐内设置的涡轮式搅拌器，提取罐I内提取溶剂产生切向和径向运动，使药材粉体呈悬浮状态，提取时所蒸发的溶剂由第二冷凝器8冷凝后回流到提取罐I中，提取30min后，墨旱莲总三萜皂苷的浓度在提取介质中达到平衡状态时，打开提取罐I下端三通阀2，墨旱莲粗提取液通过第一药液泵3输送到浓缩罐4中，调节流速至20-30mL/min，启动浓缩罐4，设定浓缩温度于60_80°C，调节第一液位计12，补充提取罐I中的提取溶剤。同时，启动真空系统11，使浓缩罐4处于真空环境中，调节第二液位计15，使浓缩罐4内溶液体积处于恒定状态，启动低温循环冷凝机组10，设定温度于10°C以下，其产生的冷流体在第一冷凝器5中循环。浓缩罐4蒸发的溶剂在经冷凝后储存于溶剂中转罐6中，打开阀门，溶剂由第二药液泵7经过第二冷凝器8输送到提取罐I中，流速与墨旱莲粗提液输送速度保持一致，开始动态连续循环提取过程，在提取液取样ロ 13与浓缩液取样ロ 14均设置了在线检测ロ，连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪等分析仪器对提取情况进行实时监控，当所测墨旱莲总三萜皂苷含量小于0. 2mg/mL时，停止提取，将浓缩液浓缩至所需浓度。以紫外分光光度法为例，说明墨旱莲总三萜皂苷的在线检测方法从在线检测ロ处实时吸取适量提取液，蒸干，加入IOmL蒸馏水溶解，精密吸取0.3mL供试品溶液于刻度试管中，水浴蒸干，置于分液漏斗中。加こ醚萃取3次(20mL/10mL/5mL),弃去こ醚层。水层加入水饱和正丁醇萃取4次(30mL/20mL/15mL/10mL),合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25mL容量瓶中，甲醇定容，作为供试品溶液。精密吸取0. 3mL供试品溶液于刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醒醋酸溶液0. 2mL和高氯酸0. 8mL,在60°C下水浴反应15min,冰水冷却IOmin以终止反应，精密加入冰醋酸5mL，摇匀，在555nm下測定吸光度，并计算墨旱莲总三萜皂苷含量。下面通过具体的实施例对墨旱莲药材中墨旱莲总三萜皂苷的动态连续循环提取方法进行说明实施例1一种墨旱莲药材中总三萜皂苷的动 态连续循环提取方法，步骤如下称取超微粉碎IOmin的墨旱莲药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为75%的こ醇溶液IOOOmL, 650C回流40min后开始循环提取,调节提取罐溶剂流速为24mL/min,放出300mL提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至lOOOmL，2h后停止回流，浓缩液65 °C下浓缩定容至500mL。实施例2称取超微粉碎5min的墨旱莲药材粉末IOOg置于提取罐中，加入体积分数为70%的こ醇溶液850mL，60°C回流45min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为20mL/min，放出300mL提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至850mL，3h后停止回流，浓缩液75 °C下浓缩定容至500mL。实施例3称取超微粉碎15min的墨旱莲药材粉末IOOg置于提取罐中，加入体积分数为80%的こ醇溶液1150mL，70°C回流30min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为30mL/min，放出300mL提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至850mL，4h后停止回流，浓缩液80 °C下浓缩定容至500mL。以上实施例，可在提取液输送ロ与浓缩罐中设置在线检测ロ，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测墨旱莲总三萜皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出ロ检测到墨旱莲总三萜皂苷浓度低于0. 2mg/mL吋，提取完成。
下面结合一些试验进ー步来说明本发明的效果1.方法与结果1.1墨旱莲中总三萜皂苷的含量測定方法根据上述方法学考察结果，标准曲线、仪器精密度、样品稳定性、重复性、回收率均符合方法学考察要求，故墨旱莲中总三萜皂苷含量的測定方法确定如下照紫外-可见分光光度法(2010版药典附录VA)測定对照品溶液的制备精密称取人參皂苷Re对照品约6mg，置于5mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，精密移取2mL至IOmL量瓶中，加甲醇定容，摇匀，S卩得。标准曲线的制备精密吸取人參皂苷对照品溶液0. lmL、0. 2mL、0. 4mL、0. 5mL、
0.6mL、0. 7mL、0. 8mL分别置于刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛-冰醋酸溶液
0.2mL和高氯酸0. 8mL，在60°C下水浴反应15min，冰水冷却IOmin以终止反应，精密加入冰醋酸5mL，摇勻，照紫外-可见分光光度法，在555nm处测定吸光度，以墨旱莲总三萜皂苷重量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。供试品溶液的制备取墨旱莲药材适量，粉碎过筛(过三号筛)。精密称定墨旱莲粗粉约0.1g,置圆底烧瓶中，加75%こ醇50mL，加热连续回流lh，趁热过滤，回收こ醇至无醇味，用IOmL蒸馏水分次洗涤，转移至分液漏斗中。加こ醚萃取3次(25mL/20mL/20mL)以除去脂溶性杂质，弃去こ醚层。然后用水饱和的正丁醇溶液萃取4次(20111171511117151111710111し)，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25mL容量瓶中，甲醇定容，作为供试品溶液。測定法精密吸取0. 5mL待测溶液至刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛醋酸溶液0. 2mL和高氯酸0. 8mL，在60°C下水浴反应15min，冰水冷却5min以终止反应，精密加入冰醋酸5mL，摇匀得到显色溶液，在' =555nm处测定溶液的吸光度，根据标准曲线方程，计算供试品溶液中含墨旱莲总三萜皂苷的含量。1.1.1墨旱莲中总三萜皂苷的含量測定取批号为20100804墨旱莲药材，粉碎过筛，精密称取药材粉末约lg，按照“1.1”项下供试品的制备方法制备溶液。分别精密吸取0. 5mL待测溶液至刻度试管中，水浴蒸干，按“1.1”项下的显色方法操作，在555nm处测定吸光度。根据标准曲线方程，计算样品溶液中含墨旱莲总三萜皂苷的含量，数据见表I。表I药材含量測定结果
权利要求
1.一种墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括 将墨旱莲干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的こ醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把墨旱莲粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80°C，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。
2.根据权利要求1所述的墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述提取温度为60-70°C，所述墨旱莲粗提液流速为20-30mL/min，所述回收的溶剂与所述墨旱莲粗提液的流速相等。
3.根据权利要求1所述的墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述こ醇溶液与所述墨旱莲的加入比例为质量比5-15:1。
4.根据权利要求1所述的墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在干，还包括，在提取液输送ロ与浓缩罐中设置在线检测ロ，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测墨旱莲总三萜皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出ロ检测到墨旱莲总三萜皂苷浓度低于0. 2mg/mL时，提取完成。
5.根据权利要求1所述的墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括 称取超微粉碎IOmin的墨旱莲药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为75%的こ醇溶液IOOOmL, 65°C回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24mL/min，放出300mL提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至lOOOmL，3h后停止回流，浓缩液65°C下浓缩定容至500mL。
6.一种用于墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，其特征在干，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。
7.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。
8.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第ニ液位计。
9.根据权利要求6-8任一项所述的装置，所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样ロ，所述浓缩罐上设有浓缩液取样ロ。
10.根据权利要求9所述的装置，所述提取液取样ロ与浓缩液取样ロ连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。
全文摘要
本发明公开了一种墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法及装置，所述方法包括将墨旱莲干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的乙醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把墨旱莲粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。该装置包括提取罐，提取罐连接循环加热器，提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，第一冷凝器连接循环冷凝机组及中转罐，中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，第二冷凝器连接提取罐。采取本发明的提取工艺及装置，墨旱莲总三萜皂苷提取率高，溶剂循环使用，消耗量少。
文档编号A61P1/16GK103054923SQ201310002410
公开日2013年4月24日 申请日期2013年1月4日 优先权日2013年1月4日
发明者陈启源, 万玉华, 赖小平, 李耿, 杨广荣, 张榕文 申请人:霸王(广州)有限公司