农吉利碱凝胶剂及其制备方法
【专利摘要】农吉利碱凝胶剂及其制备方法，属于农吉利碱制剂【技术领域】。其每一千克凝胶剂中含有：农吉利碱1.2g、卡波姆-940?5～10g、甘油50～150ml、氮酮10～50ml、无水乙醇200～300ml、尼泊金甲酯5～10g和蒸馏水余量，并用三乙醇胺调pH至中性。本发明将农吉利碱制备成凝胶剂，用于治疗鳞状细胞癌，可避免经口服或静注、肌内注射给药带来的全身毒副作用，达到局部治疗疾病，提高患者的生活质量的目的。另外，本发明通过单因素考察和正交设计，筛选了凝胶剂的辅料，使农吉利碱更加稳定，更能发挥其效果。
【专利说明】农吉利碱凝胶剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于农吉利碱制剂【技术领域】，具体涉及农吉利碱凝胶剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]农吉利碱(Monocrotaline, Crotaline),又称农吉利甲素、野百合碱、猪屎豆碱、大叶猪屎豆碱、可洛他林，是临床常用、试验研究较多、研究较为透彻的抗癌中药成分，分子式为C16H23NO6，在结构上与美国已进入II期临床的主治急性淋巴白血病的N-O-去甲天荠菜碱(indicine-N-oxide, III)相似，同为双稠吡咯环生物碱(pyrrolizidine alkloids,Pas)，是一种活性的烷基化成分，能干扰细胞的有丝分裂而具有抗肿瘤作用。农吉利碱对多种实验性肿瘤有抑制作用，临床主要试用于SCC和BCC，疗效确切。据报道，农吉利碱能靠形成化学键的方式与癌细胞蛋白质或血清蛋白质形成大分子复合物。
[0003]农吉利碱来源广泛，易于获取。豆科猪屎豆属属植物农吉利(C.sessiliflora)、假地蓝(C.ferruginea Gran)、小猪屎豆(C.nana)、大叶猪屎青(C.assamica)等全草中均含有农吉利碱，并且含量相对较高，其中在农吉利全草中约0.02%，种子中约0.4%。中国药典77版收载了农吉利药材和盐酸农吉利碱注射液。药材用法用量为:15~30g,必要时可增至60g，外用鲜品捣烂或干品研细末醋调外敷；注射液采用肿瘤基底部注射或肌内注射，药材和注射液均用于治疗皮肤癌。
[0004]但是，农吉利碱属于吡咯里西啶类生物碱(PA)，目前PA是已知的最重要的植物性肝毒成分，被称为肝毒吡咯里西啶生物碱，除可引起造血功能受抑、白细胞和血小板下降、骨髓抑制和胃肠道反应、泌尿系统刺激等症状外，最明显的毒性是肝脏毒，它对肝脏具有蓄积的、不可逆的，强烈的毒性作用，可引起肝细胞出血性坏死、肝巨细胞症及静脉闭塞症等。其肝功能损害与用药剂量有关，超过1000mg以上，即可出现肝大、腹水、黄疸等。显然，农吉利碱口服或静注、肌内注射给药副作用较大，因此77版药典以后未予收载农吉利碱及制剂。但事实上，农吉利碱原形药物毒性较弱，而是在经过肝脏转化成代谢产物后引起肝毒性。因此，在民间仍常用农吉利鲜草浆或干品粉末外敷用于治疗SCC和BCC，毒性小并且效果良好。
[0005]中草药外敷治疗皮肤肿瘤是一种常见的安全有效的治疗方式，具有很多优点，如:药物直达病所，奏效迅速；廉便效验，易于推广；可减缓药物毒性和不良反应；可弥补内治法疗效的不足。近几十年来，国内采用单纯中医中药治疗皮肤癌取得了很大进展。如用20%蟾酥膏外敷，用皮癌净(含砷制剂)外敷，用三品一条枪(含砷剂)外敷，用五妙水仙膏外敷等。以上中药单用即可有效治愈早、中期皮肤癌，为皮肤癌的治疗开辟了一条新的途径，也为中医中药的全面开发利用提供了新的证据。
[0006]根据疾病的特定需要与药物性质，利用现代制药技术研制和开发能将药物制成稳定性好、使用携带方便的中药抗皮肤癌新制剂，对皮肤癌的临床治疗具有重要的现实意义。
[0007]经皮给药系统(transdermal drug delivery system, TDDS)是指在完整的皮肤表面给药，使药物以恒定速度通过皮肤各层进入体循环，产生治疗作用，实现疾病治疗或预防的一类新型制剂。其优点是药物吸收可以避免胃肠道降解和肝脏的首过效应；可以产生恒定、可控的血药浓度；给药方便，提高了患者用药的顺应性，特别适合于儿童、老人或口服有困难的患者。美国医药界认为，今后10~15年内，有1/3的现用药将采用透皮吸收制剂。根据世界医药市场专家的预测，口服、注射和TDDS三大给药剂型将形成“三分天下”的市场态势，药品市场中将有1/3的药品采用TDDS。
[0008]临床中常用的经皮给药制剂有软膏剂、霜剂、洗剂、擦剂、凝胶剂等。软膏剂和霜剂易造成涂布不均，污染衣物；洗剂和擦剂易挥发、流散，因而临床应用受到一定限制。凝胶剂是常用的经皮给药剂型，具有吸收速度快、生物利用度高、良好的生物相容性、质地均匀、易于涂展和洗除、皮肤给药不妨碍皮肤正常功能的特点。它作为一种含有溶解状态药物的半固体制剂，具有溶胀性、脱水收缩性、透过性和粘合性，能在较长时间内与用药部位紧密粘附，使制剂在静止时保持一定形状，在外力作用下又可流动、变形。在局部外用制剂中，往往利用这些性质来控制药物的释放或其对皮肤的粘附性。目前研究较多的是亲水性凝胶，因其手感好，易洗脱，不污染衣物，广受患者欢迎。
【发明内容】
[0009]针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供农吉利碱凝胶剂及其制备方法的技术方案。
[0010]所述的农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有:
农吉利碱1.2g、卡波姆-940 5~10g、甘油50~150ml、氮酮10~50ml、无水乙醇200~300ml、尼泊金甲酯5~IOg和蒸馏水余量，并用三乙醇胺调pH至中性。
[0011]所述的农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有:农吉利碱1.2g、卡波姆_940 7~8g、甘油80~120ml、氮酮20~40ml、无水乙醇240~260ml、尼泊金甲酯7~9g和蒸馏水余量，并用三 乙 醇胺调pH至中性。
[0012]所述的农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有:农吉利碱1.2g、卡波姆-940 5g、甘油150ml、氮酮50ml、无水乙醇250ml、尼泊金甲酯5g和蒸懼水余量,并用
三乙醇胺调pH至中性。
[0013]所述的农吉利碱凝胶剂的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤:
1)取配方量的卡波姆-940加蒸馏水浸泡，充分溶胀后得到卡波姆胶状物；
2)取配方量的甘油、氮酮、尼泊金甲酯在水浴上搅拌，与卡波姆胶状物混匀成为凝胶基
质；
3)取配方量的农吉利碱，使其溶于配方量的无水乙醇中；
4)将步骤3)得到的药液缓缓加入步骤2)得到的凝胶基质中混匀；
5)采用三乙醇胺调节凝胶pH值至中性，边加蒸馏水边搅拌至足量，得到农吉利碱凝胶剂。
[0014]本发明将农吉利碱制备成凝胶剂，用于治疗鳞状细胞癌，可避免经口服或静注、肌内注射给药带来的全身毒副作用，达到局部治疗疾病，提高患者的生活质量的目的。另外，本发明通过单因素考察和正交设计，筛选了凝胶剂的辅料，使农吉利碱更加稳定，更能发挥其效果。【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1-1为试验例I中农吉利碱的紫外吸收图谱；
图1-2为试验例I中农吉利碱标准曲线图；
图2-1为试验例2中农吉利碱对照品溶液色谱图 ；
图2-2为试验例2中供试品溶液色谱图；
图2-3为试验例2中空白溶液色谱图；
图2-4为试验例2中农吉利碱标准曲线图；
图2-5为试验例2中不同浓度的卡波姆释放量图；
图2-6为试验例2中不同浓度甘油释放量图；
图2-7为试验例2中不同浓度氮酮释放量图；
图2-8为试验例2中正交试验结果图；
图2-9为试验例2中验证实验结果图；
图3-1为试验例3中对照品溶液色谱图；
图3-2为试验例3中供试品溶液色谱图；
图3-3为试验例3中空白溶液色谱图；
图3-4为试验例3中农吉利碱标准曲线图。
【具体实施方式】
[0016]以下结合实施例来进一步说明本发明。
[0017]实施例1:
1)取卡波姆-9405g加蒸馏水浸泡，充分溶胀后得到卡波姆胶状物；
2)取甘油150ml、氮酮50ml、尼泊金甲酯5g在水浴上搅拌，与卡波姆胶状物混匀成为凝月父基质；
3)取农吉利碱1.2g，使其溶于无水乙醇250ml中；
4)将步骤3)得到的药液缓缓加入步骤2)得到的凝胶基质中混匀；
5)采用三乙醇胺调节凝胶pH值至中性，边加蒸馏水边搅拌至足量lOOOg，得到农吉利碱凝胶剂。
[0018]实施例2:
1)取卡波姆-940IOg加蒸馏水浸泡，充分溶胀后得到卡波姆胶状物；
2)取甘油100ml、氮酮25ml、尼泊金甲酯IOg在水浴上搅拌，与卡波姆胶状物混匀成为凝胶基质；
3)取农吉利碱1.2g，使其溶于无水乙醇200ml中；
4)将步骤3)得到的药液缓缓加入步骤2)得到的凝胶基质中混匀；
5)采用三乙醇胺调节凝胶pH值至中性，边加蒸馏水边搅拌至足量lOOOg，得到农吉利碱凝胶剂。
[0019]实施例3:
1)取卡波姆-940Sg加蒸馏水浸泡，充分溶胀后得到卡波姆胶状物；
2)取甘油50ml、氮酮10ml、尼泊金甲酯Sg在水浴上搅拌，与卡波姆胶状物混匀成为凝胶基质；3)取农吉利碱1.2g,使其溶于无水乙醇300ml中；
4)将步骤3)得到的药液缓缓加入步骤2)得到的凝胶基质中混匀；
5)采用三乙醇胺调节凝胶pH值至中性，边加蒸馏水边搅拌至足量lOOOg，得到农吉利碱凝胶剂。
[0020]试验例1:农吉利碱凝胶剂的处方前研究
一、实验材料
(一)实验药品和试剂
农吉利碱原料药(纯度> 98%，批号: ZL120222YY，南京泽朗医药科技有限公司)
正辛醇(分析纯，批号:20120401，上海凌峰化学试剂有限公司)
甲醇(分析纯，批号:20100801，衢州巨化试剂有限公司)
蒸馏水(自制)
其他试剂为分析纯
(二)实验器材
UV759S紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)
QYC2102恒温培养摇床(上海福玛实验设备有限公司生产)
JA1003电子天平(上海精密科学仪器有限公司)
KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)
HH-4数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)
二、方法和结果
(一)紫外分光光度法方法学的建立 1.储备液的配置
精密称取48.8mg农吉利碱对照品至50mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，配成0.976mg/mL的储备液，备用。
[0021]2.紫外吸收波长的确定
精密吸取上述储备液0.6mL至IOmL容量瓶，甲醇定容至刻度，在200-500nm波长下扫描最大吸收波长，结果显示，其最大吸收波长位于216nm处，如图1_1所示。
[0022]3.方法学考察 3.1标准曲线绘制
分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL储备液至IOmL容量瓶中，甲醇定容至刻度，于216nm波长下测定吸光度A，建立吸光度A与浓度C的标准曲线，得标准曲线为y=5.9968x+0.0084, r=0.9996。由此可见，农吉利碱在39.04~136.64 μ g/mL范围内，吸光度A与浓度C的线性关系良好，结果见图1-2。
[0023]3.2精密度试验
精密移取0.4,0.8、1.6mL的储备液至IOmL容量瓶，甲醇定容至刻度，在216nm处测定吸光度。分别于一天内连续测6次，根据标准曲线推算浓度，计算精密度，结果见表1-1。结果显示，精密度的RSD均小于1%，表明检测方法可靠，仪器精密度良好。
[0024]表1-1 (n=6)
【权利要求】
1.农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有: 农吉利碱1.2g、卡波姆-940 5~10g、甘油50~150ml、氮酮10~50ml、无水乙醇200~300ml、尼泊金甲酯5~IOg和蒸馏水余量，并用三乙醇胺调pH至中性。
2.如权利要求1所述的农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有:农吉利喊1.2g、卡波姆-940 7~8g、甘油80~120ml、氣丽20~40ml、无水乙醇240~260ml、尼泊金甲酯?~9g和蒸馏水余量，并用三乙醇胺调pH至中性。
3.如权利要求1所述的农吉利碱凝胶剂，其特征在于每一千克凝胶剂中含有:农吉利碱1.2g、卡波姆-940 5g、甘油150ml、氮酮50ml、无水乙醇250ml、尼泊金甲酯5g和蒸懼水余量，并用三乙醇胺调pH至中性。
4.如权利要求1、2或3所述的农吉利碱凝胶剂的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤: 1)取配方量的卡波姆-940加蒸馏水浸泡，充分溶胀后得到卡波姆胶状物； 2)取配方量的甘油、氮酮、尼泊金甲酯在水浴上搅拌，与卡波姆胶状物混匀成为凝胶基质； 3)取配方量的农吉利碱，使其溶于配方量的无水乙醇中； 4)将步骤3)得到的药液缓缓加入步骤2)得到的凝胶基质中混匀； 5)采用三乙醇胺调节凝胶pH值至中性，边加蒸馏水边搅拌至足量，得到农吉利碱凝胶剂。
【文档编号】A61K47/22GK103520092SQ201310518910
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年10月29日 优先权日:2013年10月29日
【发明者】黄绳武, 王俊俊, 蒋杉杉, 赵丹丹, 李雅雅, 章德军 申请人:浙江中医药大学