大戟属中的二萜类化合物及其药物组合物和其在制药中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及从高山大戟中分离获得的1个新的巨大戟烷型二萜(1)和1个惕各烷型二萜(2)以及从大果大戟中分离获得的2个巨大戟烷型二萜(3,4)及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。体外抗肿瘤活性筛选表明，本发明化合物具有明显的抑制肿瘤细胞增殖活性，可以和药学上可接受的载体结合制成临床上可接受的药物剂型，用于治疗各类癌症。本发明为研制新的抗肿瘤药物提供先导化合物，对开发利用药用植物资源具有重要价值。
【专利说明】大戟属中的二萜类化合物及其药物组合物和其在制药中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】,涉及大戟属植物高山大戟和大果大戟中分离得到的3个巨大戟烷型二萜和I个惕各烷型二萜类化合物及其制备方法和用途。上述化合物对肿瘤细胞株具有明显的抑制作用，可作为研制新的抗肿瘤药物的先导化合物，也可以作为研制治疗各种临床常见多发癌症的药物。
技术背景 [0002]肿瘤是一种常见病、多发病，其中恶性肿瘤是目前危害人类健康最严重的一类疾病。近年来手术切除和放射治疗效果大有驻足不前之势，因此作用于全身的化学药物治疗得到人们越来越多的重视。然而，化疗药物在杀灭癌细胞的同时，对人体正常细胞也产生毒副作用，这种无法回避的有时是十分严重的毒副作用，大大限制它的广泛应用和疗效的发挥，更何况占肿瘤绝大部分的实体癌，迄今化疗效果尚多不理想，因此，在抗恶性肿瘤药物的研究中，研究和开发毒副作用低、选择性高的抗恶性肿瘤药物已成为亟待解决的问题。
[0003]大戟属(Euphorbia)是大戟科中最大的一个属，该属植物具有重要的药用价值，其中不少种在国内外都有着悠久的药用历史。《中华本草》藏药卷记载高山大戟(E.stracheyi)的块根具有缓泻、解毒等作用，主治胆病、肠胃积滞等症。《西藏经济植物》记载大果大戟(E.wallichii)全草入药，具有泻水、消肿、散结、杀虫之效，可退热、祛寒、破瘀、利胆、催吐等。现代研究表明大戟属植物中含有结构丰富多样的萜类代谢产物。然而现有技术中未见有可从大戟属植物中提取上述具有明显的抑制肿瘤细胞增殖活性的3个巨大戟烷型和I个惕各烷型二萜类化合物的报道。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种从大戟属植物中，具体是从藏药高山大戟和大果大戟中提取得到二萜类化合物，并将其用于制备抗肿瘤药物。
[0005]为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案:
[0006]如下结构式所示的二萜类化合物，
[0007]
【权利要求】
1.如下结构式所示的二萜类化合物，
2.制备权利要求1所述的二萜类化合物的方法，步骤依次如下: (1)提取:干燥的大戟属植物地上部分用醇溶剂提取，所得提取液浓缩后得粗浸膏，粗浸膏加水混悬均匀后用乙酸乙酯萃取，所得萃取液浓缩后得到乙酸乙酯浸膏； (2)分离:上述浸膏经MCI柱色谱脱色处理后，采用硅胶或RP- 18柱层析梯度洗脱进行粗分，所得极性较小的部分再分别采用硅胶、Sephadex LH - 20,RP - 18柱色谱和HPLC制备等色谱技术反复分离纯化，薄层层析检测，得化合物纯品。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(1)所用的大戟属植物为高山大戟、大果大戟,也可以采用其他大戟属植物。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中脱色、粗分、进一步纯化中所采用的色谱填料为MC1、硅胶、Sephadex LH - 20,RP - 18，也可以为其他色谱填料；所用的洗脱溶剂为乙醇-水、甲醇-水、石油醚-乙酸乙酯、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-甲醇，或其他溶剂组合。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:高山大戟干燥全草粉碎后用90%乙醇室温下冷浸24h，过滤，合并提取液，减压回收乙醇得粗浸膏，加水混悬均匀后用乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯浸膏，浸膏经聚酰胺、MCI串联20:80 — 100:0的甲醇-水梯度洗脱，合并相同流分，得5部分Fl-F5;取F4经硅胶柱10:1 — 3:2的氯仿-乙酸乙酯梯度洗脱得到4小部分F4a - F4d，取F4c经S印hadex LH-20柱色谱氯仿:甲醇=1:1纯化后经HPLC甲醇:水=82:18半制备得化合物I ;取F5经硅胶柱10:1 — 2:3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱得到3小部分F5a - F5c，取F5a经HPLC甲醇:水=92:8半制备得化合物2 ； 大果大戟的干燥地上部分，粉碎后用90 %乙醇室温下冷浸24h，过滤，合并提取液，减压回收乙醇得粗浸膏，加水混悬均匀，用乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯浸膏，浸膏经MCI脱色即95%乙醇洗脱后，用硅胶柱1:0 - 1:1的氯仿-丙酮梯度洗脱进行粗分，合并相同流分，得8部分Fl -F8 ;F1经Sephadex LH-20柱色谱氯仿:甲醇=1:1纯化后经RP-18柱色谱3:7 — 10:0的甲醇-水梯度洗脱得到5小部分Fla-Fle，取Fld经硅胶柱氯仿:乙酸乙酯=6:1纯化后经HPLC甲醇:水=9:1半制备得化合物3和4。
6.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1化合物和药学上可接受的载体。
7.权利要求1所述的二萜类化合物在制备治疗癌症或肿瘤药物中的应用。
8.权利要求5所述的药物组合物在制备治疗癌症或肿瘤药物中的应用。
9.如权利要求7或8所述的应用，其特征在于所述的癌症为宫颈癌、肝癌、肺腺癌。
10.权利要求1所述 的二萜类化合物在制备治疗宫颈癌、肝癌、肺腺癌药物中的应用。
【文档编号】A61P35/00GK103936590SQ201410186274
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年5月5日 优先权日:2014年5月5日
【发明者】杨大松, 李晓莉, 杨永平, 彭维兵, 刘可春 申请人:中国科学院昆明植物研究所, 山东省科学院生物研究所