小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌剂的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌剂的应用。 申请人:进行的实验显示，小花棘豆中的黄酮类化学成分提取物及其药物制剂可以有效抑制常见的病菌微生物，例如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等。
【专利说明】小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌剂的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及小花棘豆的黄酮提取物的药学用途，属于医药领域。
【背景技术】
[0002]目前食品加工及贮藏过程极易受到大肠埃希杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌及霉菌等多种细菌的危害，对食品质量和消费者健康不利。为了杀灭和抑制病菌滋生，现多采用添加苯甲酸钠、山梨酸钾等化学防腐剂等成分抑制有害微生物生长，但这些化学防腐剂对人体有潜在的危害。
[0003]同时，在医药领域由于抗生素的滥用导致了耐药菌株的剧增，细菌的耐药性和耐药感染已成为目前亟待解决的问题，其解决方法除了合理用药以外，新抗菌药物的筛选也十分重要。
[0004]小花棘豆(OxytropisglabraDC)是豆科(Leguminosae)棘豆属(Oxytropis)植物，在新疆分布广泛，是一种重要的蒙药及哈药原料。黄酮类化合物是小花棘豆的有效成分之一，国内外研究认为黄酮类化合物具有抗炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用，但到目前为止，并未有小花棘豆黄酮制剂抑菌作用的研究报道和专利申请。
【发明内容】
[0005] 申请人:进行的长期研究发现，小花棘豆的黄酮提取物具有广泛抑制各种常见细菌的效果，并且其耐药菌少、药源丰富，不良反应少，应用简便。
[0006]基于上述发现， 申请人:完成了本发明的技术方案。
[0007]首先，本发明公开了小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌剂的应用。
[0008]其中，上述应用所针对的细菌涵盖了目前常见的病菌微生物，包括但不限于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等， 申请人:通过实验证实针对多种微生物细菌，小花棘豆的黄酮提取物效果均优于传统的苯甲酸钠、山梨酸钾等，并具有良好的安全性。
[0009]其中，小花棘豆的黄酮提取物可以从市场上购买，也可根据文献的记载自行提取，例如小花棘豆总黄酮提取工艺及不同生长期总黄酮含量(罗杨等，江苏农业科学，2011.03)、鄂尔多斯草原小花棘豆黄酮含量及化感作用的研究(罗杨，北京林业科学，2011)等均研究了小花棘豆的黄酮提取物的提取工艺。
[0010]优选的，小花棘豆的黄酮提取物的制备方法包括下述步骤:
[0011]I)将小花棘豆原料在有机溶剂中通过微波提取、过滤、浓缩后得到小花棘豆总提取物；
[0012]2)小花棘豆总提取物过聚酰胺树脂层析柱进行用10%~100%的乙醇洗脱梯度洗脱，收集80 %~100 %的乙醇洗脱液浓缩干燥后得到小花棘豆的黄酮提取物。
[0013]在上述方法中，所用的有机溶剂优选为乙醇，微波提取参数可根据需要进行调整。
[0014]本发明优选的微波提取参数为微波功率300W，甲醇浓度100%，提取时间120s，物料比1: 20。聚酰胺树脂分离纯化的参数为:上样浓度2.0mg/mL，上柱流速为3BV/h，解吸附乙醇浓度为80%~100%，流速为3BV/h。
[0015]本发明的提取方法并不仅限于上述参数，适当调整微波功率、提取时间、物料比、上样浓度、流速等都是本领域技术人员可以理解的，这种调整只影响产率。
[0016]由于小花棘豆的黄酮提取物具有理想的杀灭和抑制细菌的能力，本发明还公开了一种具有抑菌效果的药物组合物，包括小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌活性成分，和药学上任意可用的辅料。
[0017]上述的辅料，与药物组合物的剂型显著相关，本领域技术人员可根据具体的制剂需要，调整辅料的类型和用量。具体的制剂类型可以是片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液剂等可口服给药的剂型，在这些剂型中，将小花棘豆的黄酮提取物与一种或多种润滑剂、崩解剂、稳定剂、溶解助剂、糖衣或胃溶或肠溶包衣等药用辅料组合，这些辅料都是本领域标准的药用辅料，此处不予赘述。
[0018]例如，当上述制剂是口服给药的液体组合物时，例如乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂等，是将组合物与增溶剂、湿润剂、悬浮剂、甜味剂、风味剂、芳香剂、防腐剂等药用辅料组合使用。
[0019]优选的，在所述药物组合物中，所述辅料为环糊精(赋形剂)，其用量(质量百分比)为小花棘豆的黄酮提取物3~5%，β-环糊精95~97%。
[0020]为了便于使用，可以将药物组合物加入到水中配制成溶液，在此情形下，药物组合物的浓度为 0.005 g/mL ~0.020g/mL, pH 为 5.0 ~6.0。
[0021]通过上述改进，本发明的技术方案具有如下优点:
[0022]I)抗菌谱广，耐药菌少；
[0023]2)药源丰富，可就地取材；
[0024]3)作用广泛，除抗病原微生物作用外，还具有免疫调节等药理作用；
[0025]4)不良反应少，应用简便。
【具体实施方式】
[0026]实施例1:小花棘豆黄酮的提取制备
[0027]称取小花棘豆样品，按照物料比l:20g/mL的比例加入体积分数100%的甲醇微波提取120s，微波功率300W，温度45°C，提取完成后过滤，滤液采用旋转蒸发仪浓缩，恒温干燥箱干燥，得到小花棘豆总提取物；将小花棘豆总提取物用水充分溶解；向层析柱中加入1/3体积的95%乙醇，然后将聚酰胺树脂用乙醇转移至层析柱中，加入100%的乙醇溶液(V/V)，体积为树脂体积的3倍，流速为I倍树脂体积/min，然后用去离子水洗至无醇味后进行小花棘豆总提取物水溶液的梯度洗脱，其中上样浓度2.0mg/mL，上柱流速为3BV/h，用10%~100%的乙醇洗脱，收集80%~100%的乙醇洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，冷冻干燥仪干燥，
[0028]得到棕黄色粉末即为小花棘豆黄酮提取物。
[0029]实施例2:含有小花棘豆黄酮提取物的药物制剂，可按照下列比例配置
[0030]I)按照以下比例配制:小花棘豆黄酮提取物含量3%，赋形剂环糊精含量97% ；
[0031]2)按照以下比例配制:小花棘豆黄酮提取物含量4%，赋形剂环糊精含量96% ；
[0032]3)按照以下比例配制:小花棘豆黄酮提取物含量5%，赋形剂环糊精含量95%。实施例3:含有小花棘豆黄酮提取物的药物制剂的溶液，可按照下列比例配置
[0033]I)取实施例3配置I的药物制剂，加入到水中，稀释到浓度为0.005g/mL的小花棘豆黄酮抑菌剂溶液，使用食品级醋酸调节抑菌液的pH至5.0 ;
[0034]2)取实施例3配置2的药物制剂，加入到水中，稀释到浓度为0.010g/mL的小花棘豆黄酮抑菌剂溶液，使用食品级醋酸调节抑菌液的pH至5.4 ;
[0035]3)取实施例3配置I的药物制剂，加入到水中，稀释到浓度为0.020g/mL的小花棘豆黄酮抑菌剂溶液，使用食品级醋酸调节抑菌液的pH至6.0 ;
[0036]实施例4:小花棘豆黄酮提取物的抑菌实验
[0037]分别取实施例4配置1、2、3的小花棘豆黄酮抑菌剂溶液，浸润直径为6mm的滤纸片，在涂布有有害微生物菌液的平板上进行抑菌试验，37°C下培养24h，测定对各种有害菌的抑菌圈直径，统计最大与最小值；以含有同样活性成分用量的苯甲酸钠、山梨酸钾为阳性对照，同样统计最大与最小值。
[0038]表1:配置I供试物对有害微生物的抑制效果
[0039]
【权利要求】
1.小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌剂的应用。
2.根据权利要求1的应用，其特征在于小花棘豆的黄酮提取物的制备方法包括下述步骤:1)小花棘豆原料在有机溶剂中通过微波提取、过滤、浓缩后得到小花棘豆总提取物；.2)小花棘豆总提取物过聚酰胺树脂层析柱进行用10%~100%的乙醇洗脱梯度洗脱，收集.80 %~100 %的乙醇洗脱液浓缩干燥后得到小花棘豆的黄酮提取物。
3.根据权利要求1的应用，其特征在于抑制的病菌微生物包括金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌。
4.一种具有抑菌效果的药物组合物，其特征在于包括小花棘豆的黄酮提取物作为抑菌活性成分，和药学上任意可用的辅料。
5.根据权利要求4的药物组合物，其特征在于所述辅料为β-环糊精，其用量为小花棘豆的黄酮提取物3~5%，β-环糊精95~97%。
6.根据权利要求4的药物组合物，其特征在于剂型为溶液，浓度为0.005g/mL~.0.020g/mL, pH 为 5.0 ~6.0。
【文档编号】A61P31/04GK104069155SQ201410302341
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年6月27日 优先权日:2014年6月27日
【发明者】王帅, 马春晖, 贾琦珍, 张玲, 陈根元 申请人:塔里木大学