本发明属于治疗兽病药，特别是涉及一种以中草药为原料制备的用于治疗猪蓝耳病病的中药水剂。本发明还涉及该口服液的制备方法。
背景技术：
猪蓝耳病（PRRS）又称“猪高热病”是由猪繁殖与呼吸综合症病毒变异株引起的一种高致病性传染病，该病于上世纪90年代传入我国，2006年夏季，该病在我国南方大部分地区爆发与流行，造成大批生猪死亡，防控形势异常严峻。主要以育肥猪的高烧持续不退，以母猪的繁殖呼吸障碍为主要特征的传染病，常可继发感染其他病原；主要特点为全群发病，发病率在50%以上，病死率在30-100%，给猪场及养猪户造成严重的经济损失。该病体温一般39.5℃—41.5℃，精神沉郁，被毛粗乱，食欲废绝，全身皮肤发红耳后耳缘发绀，腹部下、四肢等多处皮肤呈紫红色。呼吸困难呈腹式呼吸，有的咳嗽，气喘或呈不规则的呼吸，流鼻涕，喜卧，眼分泌物增多，有的有泪斑，尿量少、浑浊，有的腹泻，便秘，粪便呈球状；该病经权威部门鉴定为猪蓝耳病变异病毒引起的高致病性蓝耳病。世界动物卫生组织将其列为法定的动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。该病传染快，治愈率低。不传染人，不是人畜共患病。
当今医学领域对该病尚没有一个完备的治疗方案，即使有也只是重护理轻治疗治标不治本，未能解决实质性问题，进而忽视了相关内脏器官功能的平衡与协调关系。如：搞好防暑降温、改善饲养环境，消毒，驱虫，黄芪多糖饮水增强机体抵抗力，用抗生素消除并发症，纠正酸中毒，强化基础免疫等；如超剂量使用抗生素，死亡率会更高，特别是磺胺类药超剂量使用可引起急性肾肿大及多脏器衰竭；此外饲养管理水平较高，通风降温设备完善，免疫、治疗规范的大中猪场发病率相对较低，有的即使发病，控制起来也相对容易；而小规模的专业户、散养户发病率死亡率相对较高，尤其是少部分从未接受过免疫注射的病猪。
目前本病尚无有效的治疗措施，主要靠疫苗来免疫接种，我国已有正式批准的PRRS灭活疫苗，并列入政府强制免疫疫种，然而PRRS弱毒疫苗的返祖毒力增强及疫苗的安全性问题日益引起人们的关注，灭活疫苗安全性高，但免疫效果差，需要多次免疫；活疫苗免疫效果较好，但存在散毒和毒力返强的危险。据报道国内外许多猪场在使用PRRS弱毒疫苗后在猪群中引起PRRS的爆发，因此应慎重使用活疫苗；新型抗病毒药如干扰素、免疫球蛋白和转移因子等又存在疗效不确切、成本高等缺陷。因此，本领域试图用中药来治疗该病。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对上述技术不足提供一种能有效地治疗猪无名高热病的中药复方制剂，本发明的目的还提供一种制备该中药复方制剂的方法。
技术方案为：
本发明口服液的药效成分由下列重量份的原料制成：
金银花 5-10份、大青叶5-10份、鱼腥草8-15份、败酱草8-15份、赤芍5-10份、黄芩8-15份、玄参5-10份、黄芪8-15份、薄荷8-15份、芦根5-10份、栀子8-15份、淡竹叶5-10份、佩兰5-10份。
抗猪蓝耳病的中药复方制剂的制备方法，包括以下步骤：
⑴将称好的原料药混合在一起放入粉碎机中粉碎，加热煎煮2次，第1次加10倍量水，第2次加6倍量水，合并2次煎液，用四层纱布过滤，继续加热浓缩，待浓缩液与原药材的重量比为1:1，冷却至40℃；
⑵在步骤⑴制得的药液中按2:1:1的重量比例一次加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，三种酶的总量占总药液量的2%，以重量体积百分比计算（g∕ml），常温静置12h；
⑶将步骤⑵制得的药液继续加热煎煮30min，加入2倍量的蒸馏水，加热至80℃，再加入8%的含1%壳聚糖的醋酸溶液（w∕v， g∕ml），搅拌均匀常温静置12h后取上清液，调节PH值为6.5，浓缩3倍，用0.45um的滤膜过滤，灌装，灭菌。
本发明基于当今医学对猪蓝耳病发病机理的认识及治疗原则，参考现代药理研究成果按中医理论组方制成的中药制剂。通过调节机体的阴阳平衡及组织营养状况、改善先天禀赋不足、肺失肃降及气道挛急等达到清热解毒、温肺祛痰、清肺止喘、通络止痛、清咽利膈、降气定喘的目的。充分体现了中医药的整体观念和优势，使药效和功能更为全面而标本兼治，从而拓开了中医药辩症施治的具体内涵和应用范围。
中兽医偏正：该病属湿热蕴积、温邪犯肺、阴明邪热、稽留肌肤、逆传心包、虚热不退所致。
热邪为患，炎上，灼肤、灼津，迫血外出，水湿停滞。炎上，则眼结膜潮红，眼分泌物增多；温邪犯肺，则呼吸困难、咳嗽，气喘或呈不规则的呼吸；阴明邪热、稽留肌肤、则全身皮肤发红，发绀，多处皮肤呈紫红。逆传心包，扰心神则嗜睡、精神沉郁，食欲废绝。
方解：金银花、大青叶清热解毒、凉散风热、疏利咽喉，为主药。黄芩、鱼腥草、芦根、败酱草、栀子、玄参有清湿热、泻肺火，治飞热咳嗽、肺炎、肺痈吐脓、用于肺阴亏耗、消痈排脓、散结消肿；黄芩其治在肺，可降肺中之热；栀子治在三焦，善消郁火；黄芪有补气固表、止汗生肌，薄荷、淡竹叶有清热除烦、疏散风热，用于热病烦渴、健胃祛风；佩兰有醒暑化湿，赤芍有清热凉血、活血散瘀；五药合用，气血兼治，清热泄火、凉血消斑。化湿醒脾、散瘀止痛。
功能：适用于湿热蕴积、温邪犯肺、稽留肌肤、逆传心包、虚热不退所致的育肥猪的高烧持续不退，母猪的繁殖呼吸障碍以及精神沉郁，被毛粗乱，食欲废绝，全身皮肤发红、发绀，呼吸困难、咳嗽，气喘、流鼻涕，眼分泌物增多、便秘等症。
本发明可以与药学上可以接受的载体制成各种剂型，如注射用水剂、口服液等剂型。因为生猪爆发该病尤其是病程到了中后期时，基本上不能采食，只能喝水，因此只能采用注射给药的方法或者以口服液的形式给药，口服药液能自饮更好，不能自饮强制灌服；此外采用注射方式给药，生物利用度高，且制得的注射液性状稳定，能有效提高机体免疫力，迅速恢复体能，对该病具有显著的治疗效果。
具体实施方式
实施例1
制成该实施例原料中的药材组成和重量百分比为：
金银花 10份、大青叶10份、鱼腥草8份、败酱草8份、赤芍5份、黄芩8份、玄参5份、黄芪8份、薄荷8份、芦根5份、栀子8份、淡竹叶7份、佩兰10份。
选取上述质量好的原料药，并按重量百分比将选好的原料药称好，备用。
本实施制备成注射液的具体工艺为：
⑴将称好的原料药混合在一起放入粉碎机中粉碎，加热煎煮2次，第1次加10倍量水，第2次加6倍量水，合并2次煎液，用四层纱布过滤，继续加热浓缩，待浓缩液与原药材的重量比为1:1，冷却至40℃；
⑵步骤⑴制得的药液中按2:1:1的重量比例一次加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，三种酶的总量占总药液量的2%，以重量体积百分比计算（g∕ml），常温静置12h；
⑶将步骤⑵制得的药液继续加热煎煮30min，加入2倍量的蒸馏水，加热至80℃，再加入8%的含1%壳聚糖的醋酸溶液（w∕v， g∕ml），搅拌均匀常温静置12h后取上清液，调节PH值为6.5，浓缩3倍，用0.45um的滤膜过滤，灌装，灭菌。
实施例2
制成该实施例原料中的药材组成和重量百分比为：
金银花 5份、大青叶5份、鱼腥草8份、败酱草8份、赤芍5份、黄芩15份、玄参10份、黄芪8份、薄荷8份、芦根5份、栀子8份、淡竹叶5份、佩兰10份。
选取上述质量好的原料药，并按重量百分比将选好的原料药称好，备用。
本实施制备成注射液的具体工艺为：
⑴称好的原料药混合在一起放入粉碎机中粉碎，加热煎煮2次，第1次加10倍量水，第2次加6倍量水，合并2次煎液，用四层纱布过滤，继续加热浓缩，待浓缩液与原药材的重量比为1:1，冷却至50℃；
⑵步骤⑴制得的药液中按2:1:1的重量比例一次加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，三种酶的总量占总药液量的2.5%，以重量体积百分比计算（g∕ml），常温静置12h；
⑶将步骤⑵制得的药液继续加热煎煮30min，加入2倍量的蒸馏水，加热至70℃，再加入10%的含1%壳聚糖的醋酸溶液（w∕v， g∕ml），搅拌均匀常温静置12h后取上清液，调节PH值为7，浓缩3倍，用0.45um的滤膜过滤，灌装，灭菌。
实施例3
制成该实施例原料中的药材组成和重量百分比为：
金银花8、大青叶8、鱼腥草8、败酱草草10份、赤芍8份、黄芩9份、玄参5份、黄芪8份、薄荷8份、芦根6份、栀子10份、淡竹叶6份、佩兰6份。
选取上述质量好的原料药，并按重量百分比将选好的原料药称好，备用。
本实施制备成注射液的具体工艺为：
⑴将称好的原料药混合在一起放入粉碎机中粉碎，加热煎煮2次，第1次加10倍量水，第2次加6倍量水，合并2次煎液，用四层纱布过滤，继续加热浓缩，待浓缩液与原药材的重量比为1:1，冷却至60℃.
⑶步骤⑴制得的药液中按2:1:1的重量比例一次加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，三种酶的总量占总药液量的3%，以重量体积百分比计算（g∕ml），常温静置12h；
⑶将步骤⑵制得的药液继续加热煎煮30min，加入2倍量的蒸馏水，加热至60℃，再加入12%的含1%壳聚糖的醋酸溶液（w∕v， g∕ml），搅拌均匀常温静置12h后取上清液，调节PH值为7.5，浓缩3倍，用0.45um的滤膜过滤，灌装，灭菌。
经检验上述1、2、3实施例所制的注射液均符合质量标准，用法与用量：育肥猪0.2ml∕kg，每日2次，连用5d，母猪0.2ml∕kg，每日2次，连用5d，
以下通过临床试验例来进一步阐述本发明药物的有益效果，这些试验例包括本发明注射液的样品稳定性试验、玫瑰花环试验及药敏试验。
1.稳定性试验
将实施例2中制得的注射液置于温度为40℃，相对湿度为75%恒温箱中，第一次取样20支，进行外观性状分析，并测定药物组方中黄芩苷的含量变化，以后每隔30d再取样品20支，进行外观性状分析，共取样4次，结果显示：（表1）
统计分析表明，4次取样样品其外观性状均呈现澄清透明，测定药物组方中黄芩苷的含量为7.14±0.01mg∕ml，4次取样样品药物组方中黄芩苷的含量没有显著差异（P﹥0.05），综上所述，本发明注射液性状稳定，技术路线正确，制备工艺合理可行。
2．玫瑰花环试验
玫瑰花环试验是体外测定动物细胞免疫功能的一种方法，也是T淋巴细胞计数的一个重要手段，由于动物的T淋巴细胞表面有红细胞受体，因此红细胞可以粘附到T淋巴细胞的周围而形成玫瑰花样的细胞团，在红细胞中以绵羊红细胞最为常用，B淋巴细胞由于没有红细胞受体，所有不能形成玫瑰花环。PRRS病毒广泛存在患病猪的胸腺、脾脏、肠系膜淋巴结、支气管、肺脏、肝脏等器官的淋巴组织中，其中以肺脏淋巴结检出率最高，说明PRRS病毒严重侵袭患病猪的免疫系统，PRRS病毒可与巨噬-单核细胞、组织细胞相伴随，导致患病猪体能下降，形成免疫抑制，故该病也称免疫抑制性疾病。而免疫抑制所导致的临床症状与血液循环和B细胞和T细胞的减少呈显著正相关；因此，机体抵抗PRRS病毒侵袭的关键在于细胞免疫水平的高低，特别是T细胞功能的正常发挥，通过玫瑰花环试验可以判断具体的免疫能力。
材料和方法：
材料：⑴选取体况差异不明显的三元杂交仔猪30头，体重10kg左右，公母各半，试验猪均由泰兴市乐振牧业有限公司提供；⑵本发明实施例1制得的注射液，⑶市售的生理盐水、黄芪多糖注射液，黄芪甲苷含量1.0 mg∕ml ，药品购自泰兴市第二人民医院西药房。
方法：随机将30头试验猪分为3组，第1组空白对照组注射生理盐水，第2组对照组注射黄芪多糖注射液，第3组试验组注射实施例1制得的注射液，上述各组均采用颈部肌肉注射，每只2ml，每日2次，连用5d，第6天进行前腔静脉采血，与绵羊红细胞结合后镜检计数，计算公式：玫瑰花环%=玫瑰花环数÷计数的淋巴细胞总数×100%
各组的玫瑰花环试验结果（表2）
上述结果显示：试验组的玫瑰花环率44.8±4.2%最高，空白对照组的玫瑰花环率32.5±3.3%最低，对照组的玫瑰花环率38.5±3.5%中等，试验组的玫瑰花环率显著高于空白对照组和对照组，综上所述，本发明注射液能显著增强机体的免疫力。
3.药敏试验
材料和方法：
材料：⑴选取泰兴市某猪场已确诊为PRRS的患病猪120头，所选患病猪体况、精神状态相近；⑵分别取用本发明实施例1、实施例2、实施例3、实施例4制得的注射液，⑶市售的生理盐水、黄芪多糖注射液，黄芪甲苷含量1.0 mg∕ml ，药品购自泰兴市第二人民医院西药房。
方法：随机将120头试验猪分为6组，第1试验组（空白对照组）注射生理盐水，用法用量：0.2ml∕kg，每日1次，连用7d；第2试验组（对照组）注射黄芪多糖注射液，用法用量：0.2ml∕kg，每日1次，连用7d；第3、4、5、6试验组分别注射实施例1、2、3、4制得的注射液，用法用量：0.2ml∕kg，每日2次，连用7d，上述各组均采用颈部肌肉注射，每只2ml，每日2次，连用7d，
药效学判断标准：痊愈 7d内临床症状消失，粪便颜色、采食量等各项生理指标恢复正常；有效 7d内临床症状消失，粪便等性状正常，食欲恢复较差；无效 7d内临床症状未消失，食欲差，病情还在不断发展、变化、甚至死亡。
临床药敏试验结果（表3）
上述结果显示：用药7d后，本发明注射液在治疗PRRS的疗效较对照组显著，药物有效率在75%以上，治愈率在60 %以上；患病猪经治疗后，症状消失，粪便颜色、采食量等各项生理指标恢复正常，精神状态逐渐恢复，连续用药或加大剂量效果更佳。
结论
本发明的中药注射液，在治疗PRRS方面效果明显，见效快、疗程短、保护率高、无毒副作用。