本发明涉及药学技术领域，尤其是一种海通叶挥发油在制备抗炎抗氧化药物中的应用。
背景技术：
炎症(inflammation)：具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应为炎症。血管反应是炎症过程的中心环节。非甾体类抗炎药(nsaids)在临床上仍为首选用于炎症，在我国其消耗量仅次于抗感染药。但是，nsaids有诸多的不良反应，尤其对消化系统的影响最大。
临床及实验证实很多中药具有很好的抗炎作用，毒副作用少。近年来，植物挥发油抗炎及抗氧化作用逐渐成研究热点，目前对植物挥发油的抗炎及抗氧化的作用机制不太明确，需要进一步的研究。本论文初步研究海通叶挥发油的抗炎及抗氧化作用，以为后期开发海通药用资源提供理论基础。
技术实现要素：
本发明的目的是提供海通叶挥发油在制备抗炎抗氧化药物中的应用。
本发明是这样实现的：海通叶挥发油在制备抗炎抗氧化药物中的应用。
为了验证本发明的技术效果，进行了如下实验。
1.1实验材料
1.1.1药材来源
海通叶采自贵州大学南区，经贵州大学林学院鉴定为马鞭草科大青属植物clerodendrummandarinorumdiels的叶。
1.1.2实验试剂及仪器
耳原打孔器，醋酸地塞米松乳膏(舒尔迈康药业)，丙酮、正己烷、水杨酸、硫酸亚铁铵、三氯乙酸、铁氰化钾均为分析纯；自制双蒸水，挥发油测定仪等。
1.1.4实验动物
sp级昆明小鼠
1.2实验方法
1.2.1海通叶挥发油的制备
称取海通叶干燥粗粉100g，按《中华人民共和国药典》2010版i部附录xd挥发油测定甲法操作。采用水蒸气蒸馏法最佳提取工艺加12倍量水浸泡12h，蒸馏提取10h，超声80min提取海通叶挥发油，油水先在提取器中粗分离，将蒸出的油水混合物迅速冷却加入过量氯化钠至溶液达到饱和，静置2h，然后用正己烷萃取，无水硫酸钠脱水过夜，低于35℃自然风干，得到淡黄色油状物，精密称重，计算得油率，阴凉避光保存备用。
1.2.2抗炎实验
取昆明种雄性小鼠50只随机分为空白对照组(生理盐水组)、醋酸地塞米松组、给药高、中、低剂量组，每组10只。各组小鼠连续涂擦给药7d，每天一次，末次给药前禁食不禁水12h，末次给药0.5h后，每只小鼠右耳廓前后两面均匀涂二甲苯0.3ml致炎，左耳作对照，1h后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下双侧耳廓，用直径6mm打孔器于耳同一部位冲下两耳耳片，随即用电子天平分别称重，以左右两耳片重量之差表示耳部炎症的肿胀度，并计算肿胀抑制率(％)。
肿胀抑制率(％)＝(空白对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度×100％。
1.2.4不同浓度挥发油溶液的配制
取5支10ml的容量瓶分别加入2.2、4.1、6.4、8.2、10.5mg海通叶挥发油，用无水乙醇溶解，配制成浓度依次为0.22、0.41、0.64、0.82、1.05mg·ml-1，避光，低温保存备用。
1.2.5铁氰化钾还原法测定抗氧化性
取配置好不同质量浓度的挥发油1.2ml，加入2.5mlpbs溶液(ph7.5)，2.5mlk3fe(cn)6。混合物于50℃的恒温反应30min后，加入2.5ml10％三氯乙酸溶液，离心15min(3000raw·min-1)，静置20min取上清液2.5ml，加入2.5ml的水，再加入0.5mlfecl3(1％)混匀。以蒸馏水为参比，在波长700nm条件下测定a，a越大，测样品的还原能力就越强。
1.2.6水杨酸法测定抗氧化性
采用fenton反应法取配置好不同质量浓度的挥发油各1ml于试管中，加入0.0075mol·ml-1硫酸亚铁铵溶液1ml，0.0075mol·ml-1水杨酸-乙醇溶液1.0ml和0.3％和h2o21ml，于水浴30℃反应30min。静置10分钟后于510nm处测定吸光度a1，同时测量空白对照吸光度a0，则自由基清除率为：sc＝[(a0－a1)/a0]×100％式中a0为未加提取液时溶液的吸光度；a1为加提取液后的吸光度。
1.3实验结果
1.3.1抗炎实验
给药组3个剂量组对二甲苯所致小鼠耳肿胀度的抑制率计算结果见表5-1。
表5-1海通叶挥发油对二甲苯所致小鼠耳肿胀度的影响(x±s.n＝10)
注：经t检验，与对照组比较p
醋酸地塞米松组、受试高、中、低剂组与生理盐水对照组比较，均能显著抑制小鼠耳肿胀，但受试品高、中、低剂组的抑制强度均不如醋酸地塞米松组。该实验表明海通叶挥发油有一定的抑制模型动物渗出性急性炎症的作用。
1.3.2铁氰化钾还原法海通叶挥发油抗氧化性测定结果
浓度依次为0.22、0.41、0.64、0.82、1.05mg.ml-1的海通叶挥发油溶液的吸光度值分别为：0.214、0.381、0.462、0.482、0.568，且表明海通叶挥发油抗氧化作用与海通叶挥发油的浓度存在明显的量-效相关性。
1.3.3对oh·自由基的清除能力
加入不质量浓度的海通叶挥发油溶液，浓度依次为0.22、0.41、0.64、0.82、1.05mg.ml-1时的oh·自由基清除率分别为11.2％、15.8％、22.2％、25.6％、30.5％，表明海通叶挥发油对oh·自由基清除能力与海通叶挥发油的用量呈明显量-效相关性。
1.4结论
(1)海通叶挥发油的浓度增加抗炎活性叶随之增强，其浓度与抗炎活性呈一定的量效关系。目前对挥发油抗炎机制尚不明确，中药的抗炎作用机制表现为多种途径，主要有丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的调节功能、干扰花生四烯酸代谢、抑制炎性介质、抗血栓生成等[15]。深入研究挥发油的抗炎作用机制，有助于进一步解释明确中药及其有效成分的药理作用，为挥发油更广泛、更准确地应用于临床提供了一条新思路。
(2)海通叶挥发油的浓度增加抗氧化能力及对oh·自由基的清除能力随之增强，与其浓度也呈一定的量效关系。现代医学研究已经证实，活性氧自由基与衰老、恶性肿瘤、动脉粥样硬化、糖尿病、老年痴呆症以及帕金森综合征等疾病都有关。化学合成的抗氧化剂如bht和bha等虽然能够抑制人体的呼吸酶活性，但是使用过量可致畸、致癌等严重副作用。与现有的技术相比，本发明发现了海通叶挥发油具有抗炎及抗氧化作用，能作为新的抗炎抗氧化药物，为海通资源的综合开发利用提供一些有益的参考依据。本发明材料来源广泛，成本低廉，使用效果好。
具体实施方式
本发明的实施例1：将海通叶挥发油作为唯一活性成分加入药学上可接受的辅剂，制成各种剂型的抑炎抗氧化药物。
本发明的实施例2：将海通叶挥发油作为按照化妆品总质量的5％作为原料加入化妆品的生产中，制备获得具有抑炎抗氧化的化妆品。