一种可吸收复合止血粉及其制备方法与流程

本发明属于医药领域，具体为一种可吸收复合止血粉及其制备方法。

背景技术：

随着医疗技术的不断进步，新型医用材料及相关技术得到了良好的发展。其中止血材料的研制和改进有利于改善手术出、渗血的问题，具有重要的意义，已经成为目前医药领域研究的热点。

战伤、创伤急牧和外科手术都会形成出血，该问题亟需解决，正常人体均具有止血功能，缓慢少量的出血可以依靠自身机能止血，但是，对于各种突发性事故中人体动脉出血、脏器等破裂的隐蔽性渗血现象机体不能自行止血，也不能仅靠普通的止血绷带压迫止血，如果病人失血过多，可能会导致休克，甚至会危及生命健康。目前常用的有效止血方法是采用生物相容性的可吸收性材料止血，在外科手术、急牧等止血中提供一种安全有效，使用方便，成本低廉的止血材料显得尤为重要。

目前，临床上使用的止血材料主要有纤维蛋白胶、胶原蛋白、明胶海绵及纤维素止血材料，这些材料在动物实验及临床应用中都取得了不错的效果，但也都存在一些不足：胶原其原料来源于动物组织，是异种蛋白，容易出现排异性，具有潜在的致敏性；明胶吸收速度缓慢，一般4周以上，会增加伤口的感染风险；纤维素类，人体缺乏使其降解的酶，降解时间长，可能会给病人带来感染等副作用。

专利cn201410806354.5公开了一种可吸收性淀粉止血粉及其制备方法，该可吸收性淀粉止血粉是以植物原淀粉和羟乙基淀粉为原料，在ph9-10，45-70℃条件下经司班80、吐温80及植物油乳化分散，三偏磷酸钠交联，乙酸乙酯抽提分液，无水乙醇洗涤，烘箱干燥，灭菌即得。

专利cn201511015505.6公开了一种可吸收胶原止血粉的制备方法，其特征在于包括以下步骤：s1：取哺乳动物跟腱或者皮肤去除毛发，加入脱脂酶、丙酮、乙醇、正丁醇、甲氯中的一种，脱去油脂，冷冻切片；s2：在ph值为1.0～4.5的酸溶液中，加入蛋白酶，在0～25℃温度下酶解1～96小时；离心机离心酶解液取上清液，使用碱溶液调节ph值为5～8，使用盐溶液盐析出胶原蛋白；s3：将盐析出的胶原蛋白装入透析袋中，将透析袋端口密封，在ph1～6的醋酸溶液中进行梯度透析，至透析外液使用硝酸银滴定无沉淀；s4：将透析完成的胶原蛋白凝胶，配置成含胶原蛋白0.5～1.5％wt溶液；s5：喷雾干燥，然后再使用4～100目的筛网进行筛分，制得胶原止血粉；s6：将止血粉进行紫外灯照射交联或高温真空法交联固定，再进行无菌包装，使用辐照或干热灭菌方法灭菌后使用。

专利cn201410384076.9公开了一种具有抗菌促愈合活性的复合止血粉的制备方法：(1)将溶菌酶溶解于ph＝5～8的磷酸缓冲溶液中得到溶菌酶溶液，加入埃洛石纳米管，得溶菌酶和埃洛石的复合悬液，悬液超声处理，使埃洛石纳米管均匀分散并充分吸附溶菌酶，再将混合体系经离心沉降、洗涤和冷冻干燥，得到负载溶菌酶的埃洛石纳米管；(2)将壳聚糖溶于乙酸水溶液中配制成壳聚糖溶液，并将ph调节为6，然后加入步骤(1)制得的负载溶菌酶的埃洛石纳米管，搅拌5～15min，加入氢氧化钠溶液将ph调为7制得悬浊液，或是加入有机沉淀剂制得悬浊液，或是加入交联剂制得悬浊液；(3)将步骤(2)得到的悬浊液离心分离，沉淀用去离子水洗涤后，重复离心分离和去离子水洗涤的操作2～5次，将沉淀冷冻干燥，即得。

现有技术中的止血粉存在以下缺陷：

1、改性淀粉类止血粉，需要使用多种有毒化学试剂，存在潜在残留毒性问题；

2、胶原类止血粉来源于动物，是异种蛋白，容易出现排斥性，具有潜在的致敏性，且吸收速度缓慢，一般需要4周以上；

3、大部分止血粉仅有止血作用，无抑菌作用和促进伤口愈合、抑制疤痕形成作用。

技术实现要素：

针对现有技术中存在的缺陷，本发明提供一种可吸收复合止血粉，该止血粉不含毒性化学剂，具有抑菌、促进伤口愈合、抑制疤痕形成的作用，收撒涂敷后能使止血粉在创面均匀快速吸收血液中的水分，不会形成“白芯”，是一种使用方便、高效无副作用、止血效果极佳的止血粉。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：

本发明的可吸收复合止血粉，由以下重量份的原料制备而成：

羧甲基壳聚糖10-30份、海藻酸钠10-30份、羧甲基纤维素钠10-20份、羧甲淀粉钠15-50份、甘露醇30-60份、氯化钙1-5份、蒸馏水2000-4000份。

优选地，所述的可吸收复合止血粉，由以下重量份的原料制备而成：

羧甲基壳聚糖15-25份、海藻酸钠15-25份、羧甲基纤维素钠12-18份、羧甲淀粉钠20-30份、甘露醇40-50份、氯化钙2-3份、蒸馏水2500-3000份。

本发明的可吸收复合止血粉，其制备方法包括以下步骤：

a、按重量份分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、按重量份称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、按重量份称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过60-100目筛，得混合粉末d；

e、按重量份称取氯化钙，粉碎，过60-100目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

本发明的止血粉中，羧甲基纤维素钠和羧甲淀粉钠具有极强的吸水性和膨胀性，能迅速吸收血液中的水分，浓缩血液中的固形成分如血小板、红细胞、凝血酶和纤维蛋白原等到微粒表面，机械封堵血管，同时形成凝胶状基质，具有凝胶阻塞作用，加速自然止血，凝胶中浓缩的凝血因子和血小板增强了正常的凝血反应，增加了止血塞的稳定性；海藻酸钠形成的韧性薄膜润湿状态下与氯化钙发生固化形成原位凝胶，具有防止龟裂作用，同时，凝胶保护了神经末梢从而有效减轻疼痛感；甘露醇溶解时吸热，对创口有舒适感，且具组织脱水作用，提高血浆渗透压，导致组织内水分进入血管内，从而减轻组织水肿；羧甲基壳聚糖与海藻酸钠协同作用快速止血，促进创口愈合，且具广谱抑菌作用，防止创面感染，减少后期疤痕形成；由于添加了氯化钙成分，本发明的止血粉在润湿状态下能够释放出的钙离子，具有促凝血作用，协同增强止血作用；加入甘露醇冻干后的止血粉，粉体细腻，比表面积大，流动性好，易于撒敷。

本发明的有益效果为：

现有的止血粉制备方法中，通常是先使用海藻酸钠与氯化钙形成海藻酸钙，再冻干，粉碎使用，这种方法制备的粉末韧性大，较难粉碎，且不具吸水能力，在创口中遇血液不再形成原位凝胶。本发明止血粉的制备中，摒弃现有技术中将氯化钙溶液与其他成分的溶液混合后冻干成粉的方式，在制备冻干粉之后，再将氯化钙以粉末状态加入，起到多重作用：(1)海藻酸钠粉末状态下加入氯化钙混匀，保留了海藻酸钠的吸水凝胶特性，在创口血液润湿状态下，氯化钙释放出的钙离子与海藻酸钠络合，在创口形成原位凝胶，增强机械封堵作用，亦有利于羧甲基纤维素钠和羧甲淀粉钠凝胶的固定，部分游离的钙离子诱发凝血过程，激活凝血因子，增强止血作用；(2)使用时在创口润湿状态下释放的钙离子能激活凝血因子，诱发凝血；氯化钙增加细菌细胞壁通透性，协同甘露醇使用易使细菌失水死亡；(3)氯化钙粉末可在止血粉贮存过程充当干燥剂，防止止血粉在贮存过程或启封后吸潮。

本发明的可吸收复合止血粉，不含毒性化学剂，具有抑菌、促进伤口愈合、抑制疤痕形成的作用，收撒涂敷后能使止血粉在创面均匀快速吸收血液中的水分，不会形成“白芯”，是一种使用方便、高效无副作用、止血效果极佳的止血粉。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖10g、海藻酸钠10g、羧甲基纤维素钠10g、羧甲淀粉钠15g、甘露醇30g、氯化钙1g、蒸馏水2000g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过60目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过60目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例2

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖15g、海藻酸钠15g、羧甲基纤维素钠12g、羧甲淀粉钠20g、甘露醇30g、氯化钙2g、蒸馏水2500g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过70目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过70目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例3

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖20g、海藻酸钠20g、羧甲基纤维素钠15g、羧甲淀粉钠25g、甘露醇35g、氯化钙3g、蒸馏水2800g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过80目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过80目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例4

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖25g、海藻酸钠25g、羧甲基纤维素钠18g、羧甲淀粉钠30g、甘露醇40g、氯化钙4g、蒸馏水3000g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过90目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过90目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例5

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖30g、海藻酸钠30g、羧甲基纤维素钠20g、羧甲淀粉钠35g、甘露醇45g、氯化钙5g、蒸馏水3500g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过100目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过100目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例6

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖30g、海藻酸钠30g、羧甲基纤维素钠20g、羧甲淀粉钠40g、甘露醇50g、氯化钙5g、蒸馏水3800g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过90目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过90目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例7

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖30g、海藻酸钠30g、羧甲基纤维素钠20g、羧甲淀粉钠50g、甘露醇60g、氯化钙5g、蒸馏水4000g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过70目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过70目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例8

本发明的可吸收复合止血粉，原料用量为：

羧甲基壳聚糖20g、海藻酸钠20g、羧甲基纤维素钠15g、羧甲淀粉钠25g、甘露醇45g、氯化钙2.5g、蒸馏水2800g。

本发明的可吸收复合止血粉的制备方法为：

a、分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末，混合均匀，得混合粉末a；

b、称取蒸馏水，一边搅拌一边将步骤a所述的混合粉末加入蒸馏水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、称取甘露醇，加入溶解液b中，搅拌均匀，得溶解液c；

d、将溶解液c进行冷冻干燥，冻干后的样品进行粉碎，过80目筛，得混合粉末d；

e、称取氯化钙，粉碎，过80目筛，与混合粉末d混匀，分装，即得复合止血粉。

实施例9可吸收复合止血粉止血效能测定与比较

一、样品制备：

对照组：市售的arista止血粉。

供试组1：按照本发明实施例3的制备方法制备止血粉用于止血。

供试组2：按照本发明实施例3的原料用量分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠、甘露醇、氯化钙、蒸馏水，将羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末混合均匀，边快速搅拌边加入蒸馏水中，直至溶解完全；将甘露醇加入上述溶液，搅拌均匀至完全溶解；将氯化钙，加入上述溶液，搅拌均匀至完全溶解；将配制好的溶液分装至冻干盘中，进行冷冻干燥；将冻干后的样品进行粉碎，过80目筛；分装，即得止血粉用于止血。

供试组3：按照本发明实施例3的原料用量分别称取羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠、甘露醇、蒸馏水，将羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠粉末混合均匀；称取对应份数的蒸馏水，边快速搅拌边加入蒸馏水中，直至溶解完全；将甘露醇加入上述溶液，搅拌均匀至完全溶解；将配制好的溶液分装至冻干盘中，进行冷冻干燥；将冻干后的样品进行粉碎，过80目筛；分装，得止血粉用于止血。

二、实验材料

实验动物及分组成年健康家兔100只(广西医科大学动物实验中心提供)，体重2.5-3kg，雌雄不限，随机分成4组，每组各25只，每个压迫时间段内各5只。每只家兔两侧肾脏作长1cm，深0.5cm大小出血创面，每组随机用一供试组止血粉对两侧出血创面进行止血。

三、实验方法及观察指标

出血模型制作：3％戊巴比妥钠注射液(30-40mg/kg)沿家兔耳沿静脉注射麻醉，在实验台上固定好家兔，无菌操作逐层开腹，暴露家兔肾脏，用手术刀片随机在肾脏不同位置作二纵向切割伤，长约1cm，深约0.5cm，切口部位血液用称过重量的干燥纱布吸干后，随机用1g本发明的止血粉对出血创面进行止血，以1garista粉对另一侧创面的止血为对照组，用纱布压迫创面，分别压迫10s、20s、30s、40s、50s并记录各时间组的出血量及止血时间。

四、出血指标观察

止血时间肾脏出血创面观察：计算从各供试组及对照组止血粉开始应用于创面至创面血液渗出停止或止血粉颗粒红染面积不再扩大记录为止血时间。

出血量用分析天平预先精确称量供试组和对照组止血前和止血后干燥纱布重量，分别计算出血量(出血量＝(止血后重量-止血前重量)/血液比重)

五、结果

各供试组及对照组外观性状等物理特性比较见表1。

表1各供试组及对照组物理特性比较

由表1可以看出，供试组1性状最好，比表面积大，增强吸附能力。吸水极迅速，形成稳定凝胶。

表2是不同压迫时间内，各供试组及对照组出血量和止血时间的比较。在压迫10s、20s时，肾脏出血量大，出血时间长；压迫时间超过30s后，出血量和出血时间变化比较明显，两者明显缩短，压迫40s、50s后，出血指标变化幅度进一步减小。实验数据表明：各组实验均需压迫30s以上，止血效果才能体现。

表2各供试组及对照组出血量和止血时间的比较

暴露肾脏后，在正常肾脏表面做手术切口后，血液迅速涌出，用干燥纱布吸干血液后，快速洒上1g各组止血粉，出血区止血粉由白色立即变红，干燥纱布持续压迫。20s压迫组，移走纱布，出血创面有少量血液渗出，各组止血粉的红染面积缓慢扩大；30s压迫组，肾脏切口出血基本停止，无明显渗血现象；40s和50s压迫组，移走纱布后，可见本发明的止血粉呈凝胶状黏附于切口表面，出血停止。

通过表2可以看出供试组1的止血效果最优，明显由于供试组4，其次为供试组2，供试组3与对照组4止血效果相似。