专利名称:医治动物用的制剂和方法
本发明涉及中间白细胞素-2(IL-2)在兽医学的一种新应用，特别涉及将IL-2用于控制动物与紧张有关的疾病(即因外界不利影响引起的非特发性疾病)，或提高动物对疫苗的免疫应答，或者促进其增重。
供食用的牲畜，特别是牛易受装运和喂料场条件的不利影响，这包括由于过度拥挤、断奶、运输和有时遇到的恶劣天气，以及一般非自然环境造成的紧张状态。一种熟知为“船热”的综合症有时也称为“牛呼吸病综合症”(BRDS)，与其说是一种特殊的疾病，还不如说是病症状综合症，其特征是免疫力抑制，易死于由一种或多种病毒，病原菌引起的感染。
其他动物对紧张状态也易发生不利反应，例如猪，虽然通常不象牛那样地装运，但它们对断奶或在恶劣的气候条件就会发生负呼吸反应。而且，这种症状学并不能借助于实验动物模型试验。迄今还未发现对牲畜因紧张引起失调的综合治疗方法。病畜一般用抗菌素治疗。最近有些厂商提供干扰素制剂，用于治疗船热。
一般常规采用疫苗来预防农场牲畜、比赛用动物和家庭玩赏动物的疾病，现已作了和正在作大量努力，试图将这一做法扩大到治疗这些动物身上所发生的更广泛的疾病系列。例如在动物身上使用狂犬病疫苗现已视为极普通的事，目前正致力于获得合适的疫苗，从使动物对其他疾病产生免疫力。
在自动免疫接种的过程中，经常遇到的问题是，疫苗中所用抗原的免疫力不是以将抗体效价提高到足够水平，使能不断地对接触致病传染物提供免疫性保护，或者在此后一段延续时期内始终保持在这些水平。另一问题则在于疫苗可能不足以诱发由细胞产生的免疫力，而这种免疫力是抵抗细菌和病毒感染的基本免疫防线。由失去活性的胸膜肝炎嗜血杆菌(HPP)(与猪的呼吸系统疾病有关)制成的疫苗是这类“弱”动物疫苗中声名狼籍的一种。
为了获得较强的体液和/或细胞的免疫应答，通常使用一种含有佐剂(免疫强化剂)配方的疫苗，这种物质将增强患者对疫苗的免疫应答。最常用的疫苗佐剂是油制剂和明矾。佐剂的作用机理现尚不清楚，亦不能预测一种特殊的佐剂制品对某一给定实例是否足够有效。
为促使供食用的饲养动物增重，已作了种种努力。凡属安全而有效的方法也往往是昂贵的，例如提高动物的营养质量等。因此，有人设法通过给动物喂食能促进其新陈代谢变化的激素或其他物质，促使动物更有效地利用其正常食物链，来缩短这一直接途径。施用己烯雌酚(DES)来增加火鸡和牛的重量是其中一例。虽然这一药物对于促使动物增重显然是十分成功的，但却存在严重缺点，即残留在动物肉类或由动物制得的其他商品中的己烯雌酚将足以在消费人群中产生问题。因此已制定出各种条例来控制这类添加物的应用。
另一例子是将抗菌素掺入饲料中，以减少临床症状不明显的感染和疾病，从而增进动物健康和有助于增重。但如此使用抗生素所带来的问题是它可能在动物体内引起耐药菌的繁殖，然后又可能经食物链传递给消费者。而用抗菌素来控制这类耐药菌的感染将是行不通的。
有关人的中间白细胞素-2(h IL-2)的生物活性可找到大量背景资料h IL-2可从伴刀豆球蛋白-A(ConA)刺激的脾细胞的上清液中取得，最近也可利用重组体技术获得，它在体外具有几个可测得的活性。首先，h IL-2是一种T-细胞生长因子，若将其加到细胞毒或辅助T-细胞系列的培养物中，通过胸腺嘧啶核甙的摄取即可测得。对于成熟的胸腺细胞，它是促有丝分裂的，并刺激有毒的细胞敏感性(例如淋巴因子-活化-杀伤细胞)(LAK)。也已证明，h IL-2能取代无胸腺小鼠脾细胞培养物中的辅助T细胞(Watson，J，et al.，Immuno logical Rev(1980)51∶257-258)，特别在IL-2和抗原存在时，可产生特种T辅助细胞，后者有助于抗体的敏感性。据推测，这种情况可能是由于在这些无胸腺裸鼠的脾细胞培养物内依赖于抗原的辅助T-细胞的成熟过程中，h IL-2起了作用。
在体外试验中，IL-2也显示出能对B细胞群有直接作用，在纯化及活化的B细胞群中，IL-2将增强细胞增值和免疫球蛋白M(IGM)及免疫球蛋白G(Ig G)的分泌(Mingari，M.C.，etal.，Nature(1984)312641;Mittler，R.，et al.，J.Immunol.(1985)1342393-2399;muraguchi，A.，et al.，J.Exp.Med.(1985)161181-197)。
尚不清楚这些活体外的活性如何转化成活体内的一个具体机制，从而设置一道免疫防线。然而，就这类体外的研究而言，有人已对各种形式的IL-2之间的交叉反应性进行了研究。举例来说，雷德而门(Redelman，D)等证明，h IL-2能支持从兔子和老鼠身上得到的活化T淋巴细胞，并且大致与内生的IL-2形式对其支持程度相同(见Redelman D;et al，J Immunol Meth(1983)56359-370)。鲁塞梯等(见Ruscetti，F.W.et al，Blood(1981)57379-393)首先证明，h IL-2不仅能对人的T细胞，而且也能对来自其他灵长类，马、荷兰猪、猫大鼠和小白鼠的外周血淋巴细胞或脾细胞起生长因子的作用。卡特等(Carter.J.Fed Proc(1985)441290)揭示了h IL-2能够增进体外牛的细胞毒性淋巴细胞的生长和维持。
道尔等(Doyle，M.Ver al J Bio Resp Mod(1985)496-109)报道了体外淋巴细胞增殖的研究，他们将固有的h IL-2活性与从人和动物淋巴细胞中得到的h IL-2的重组体形式的活性作了比较，结果发现，固有的IL-2和重组体的IL-2对动物细胞显示出相同的活性范围。
有一些有关体内试验的数据也同样有效。业已证明，由于对异种红细胞的反应而使体内的IL-2活性能够恢复无胸腺裸鼠的免疫活性，(见StOEtter，H.，et，Eur J Immunol(1980)10719-722)。此外，还可发现有关交叉物种反应性的资料。列德等(Reed.S.G)及(Reed S.G.et al J Immunol(1984)1333333)揭示了h IL-2能够在受到寄生虫感染的老鼠中重新建立脾细胞的敏感性;而法拉等指出(Farrar，J.J Immunol Rer(1982)63158)，在体内注射h IL-2将会刺激无胸腺裸鼠的脾内T细胞。
总之，已经知道h IL-2在体内的某种行为方式将产生一种卓有成效的免效应答，包括对特定抗原的反应，同时在体外的研究表明，h IL-2的交叉物种反应性是变化多端的(以前有关h IL-2的活体内交叉物种研究仅以鼠类作为实验对象)。
然而，由于不完全明白体内IL-2活性的本质，也不清楚IL-2参与免疫应答的机理，所以目前还不可能预测其对具体疾病、其他治疗或预防的方案，或者对新陈代谢的效用。因此，在该技术领域：
内还未出现细微的迹象可以表明h IL-2能成功地减少牲畜中与紧张有关的综合症的发病率，提高疫苗的功效，或促进动物增重。
本发明的一个方面是提供一种含有IL-2的制剂，用以保护动物可预防因紧张而诱发的综合症，或用于增强疫苗对动物的免疫应答，或者促进动物增重。
本发明的另一个方面是提供一种方法，用于使动物预防因紧张而诱发的综合症，或用于增强疫苗对动物的免疫应答，或者促进动物增重。这一方法包括对动物施用有效量的IL-2。
当h IL-2用作疫苗的佐剂时，则对人及动物均有效。因此本发明的其它一个方面是一种用于增强疫苗对人体的免疫应答的含有h IL-2的制剂。就方法而言，则本发明的这一个方面也是一种用于增强疫苗对人体的免疫应答的方法，它包括对人体施用h IL-2，并作为接种方案的一部分。
以下将对附图作一简要说明，其中图1表明h IL-2的氨基酸排列顺序。
图2和图3为剂量及所得敏感度曲线，表明在C.1节中所述实施例中所描述的淋巴细胞增殖试验结果。
图4表明h IL-2对牛和猪身上T-淋巴细胞的影响。
在本发明中，h IL-2系指一种多肽，它显现出具有该蛋白质特性的活性谱。尤其是这种蛋白质必须能刺激依赖于h IL-2的溶细胞素和辅助T细胞素的增殖(参见Gillis S.et al，J Immunol(1979)12020272032;Waston J.JExp Med(1979)1501510-1519)。图1表示固有的h IL-2的氨基酸排列顺序。这种基本的氨基酸排列顺序可以从自然资源中的固有的蛋白质获得，也可从进行重组合制得衍生物。对图中排列顺序进行适当改进如对其中的基本氨基酸进行删除、增加、取代或变换之类的适当变更，而未对活性造成严重损伤的其它基本排到顺序当然也包括在上述定义范围内。例如，业已证实用中性氨基酸取代位置125处的半胱氨基酸可得到一种具有极好稳定性和令人满意的反应性的突变蛋白质(参见美国专利第4，518，549号;Doyle，M.V.，et al.Supra.)。
此外，如同其他蛋白质那样，h IL-2可以以中性或盐的形式存在，并可含有具有糖基化、磷酸化和乙酰化性质的伴生非蛋白质部分。这类变更只要未对其生物活性造成损害，也包括在上述定义范围内。
正如塞莱塔等描所述的，此处“IL-2”也包括牛的IL-2(Cerretti et al.，P.N.A.S;833223-3227，1986)。
在本发明中，“紧张诱发的综合症”这一术语系指免疫抑制状态，处于这种状态的动物易死于由一种或一种以上细菌和病毒引起的感染，易于减重或出现全身健康状况恶化现象。
“船热”或“牛的呼吸系统疾病综合症”(BRDS)被定义为负症状学，它包括抑郁、免疫抑制、重量减轻、呼吸系统疾病、病毒或细菌感染以及健康状况全面恶化和死亡。在运送牛的途中，或在喂料场中饲养的牛易出现上述症状。所述的疾病是根据流行病学定义的，而不是按照一个描述感染过程或一组具体的新陈代谢参数的模型而定义的，使处于与船运的紧张条件下和喂料场饲养有关的具体环境中的动物保持健康状态是判断防御所述疾病效力的准则。疾病的某些参数是公认的。病的特征是突然发作，一般在处于紧张状态生活后两周之内发作，症状可能表现为呼吸困难、咳嗽、流眼泪和鼻涕、食欲不振和迅速减重、发热、肺音增加和普遍的精神抑郁。从受感染的动物中已分离出各种细菌和病毒培养物，包括SPP巴斯德菌、SPP嗜血杆菌、牛的传染性鼻气管炎、副流感病毒以及牛的呼吸合胞体病毒。处于前述环境条件中的动物，其中40-50%将受到这种疾病的侵袭，所造成的死亡率一般为暴露群体的2-5%。
这里所用的术语“佐剂”的普通意义是指增强对特种抗原免疫应答的能力。这种能力表现为由免疫产生的保护作用显著增加。体液免疫力的增强作用一般表现为升高到抗原的抗体效价显著增加(通常大于10%)。
本发明配方的最方便施用方法是通过肌肉注射或作为持续释放的制剂，当然也可以采用其他施用方法。防止在消化期间引起水解的特殊口服配方是必需的;静脉内注射则由于技术水平的关系或在施用时需十分谨慎而往往是不经济的。因此优先使用的是采用适合肌肉注射的配方，特别是能持续释放的配方。
标准配方或是可注射的液体或是能溶于合适的液体中作为注射用的悬浮液或溶液的固体。合适的赋形剂有水、生理食盐水、葡萄糖、甘油和乙醇等。也可添加无毒的辅助物质，如润湿剂、缓冲剂或乳化剂。一个特定的有用的配方是含有有效量的洗涤剂，如0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)，有助于溶解和抑菌作用。
业已知道该技术领域：
中有各种方法可有助于长期稳定性和缓慢释放。举例来说，将h IL2与亲水性聚合物如聚乙二醇(PEG)结合，可提高h IL-2的稳定性和半衰期。这种称为“PEG复合的h IL2”(“PEG Ylated“h IL-2”的PEG-h IL-2复合物对于施用单一的h IL-2持续作用剂量特别有用。
正如该技术领域：
的熟练人员所知，持续和连续释放的配方种类繁多。持续释放的非肠胃道用药的一个典型制剂是一种可注射的微囊配方，经一次注射后，它将以大约10-10单位/公斤·天的控制速率释放h IL-2重组体或可溶性h IL-2，如PEGYlated h IL-2(纯2h IL-2的比活性大约为3-6×10单位/毫克)。所述的微形胶囊配方是一种由直径为20-100微米的球状粒子组成的可自由流动的粉末，可以通过肌肉注射或用普通的皮下注射针进行皮下注射，而胶囊本身是通过将0.5-5%H IL-2用聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(DL-PLG)赋形剂包封制成胶囊。后者是一种生物可降解的且生物相容的聚酯。也可使用其他有关持续释放的标准配方。
当h IL-2用作疫苗佐剂时，通常与疫苗分开施用，虽然某些情况下，将别是在持续或连续释放型情况下，可以与疫苗一起施用。若h IL-2与疫苗结合在一起，则施用的制剂应含有免疫原、一种药学上可接受的疫苗载体以及免疫强化量的h IL-2，其中所述的免疫原物能有效地诱发对给定病原体或抗原的特有反应。最好在接种后5至30天内连续施用h IL-2，其连续5至14天则更好，施用剂量约为10-10单位/公斤·天。所述的术语“连续”系指真正连续施用，如通过持续释放剂量的形式以及间歇地大剂量施用h IL-2(或半衰期较长的h IL-2形式，如PEGy lated h IL-2)来实现，所提供的药物动力学模型与真正连续服用所得到的模型极为相似。到目前为止，采用每天肌肉注射所得的数据表明，优先用的剂量是10-10单位/公斤·天。疫苗通常是按制造商的指示施用的。其它佐剂或可与疫苗也可与h IL-2一起施用。
h IL-2主要用于增强被认为作用较“弱”的动物或人的疫苗所提供的保护(所谓“弱”系指根据剂量、程度和/或持续时间所提供的减弱保护)。这类疫苗可以菌苗为例，如博代杆菌苗、大肠杆菌苗、嗜血杆菌苗、钩端螺施体病菌苗、牛摩拉克菌苗、巴斯德菌苗、胎儿弧菌苗，以及减毒后活的或已被杀死的病毒制品，如牛的呼吸道疾病疫苗(传染性的牛鼻气管炎、副流感和呼吸合胞体的病毒)、牛病毒性腹泻疫苗、马的流感疫苗、猫的白血病疫苗、猫的呼吸病疫苗(鼻气管炎-腔内炎-肺炎病毒)、犬的细小病毒疫苗、传染性胃肠炎疫苗、以及假性狂犬病疫苗。
为预防动物得船热病而使用h IL-2时，其施用方式取决于装运和喂养场条件。最好是连续施用，并在装运前开始，或至少应在抵达喂养场后立即施用，并需延续一段时间，如14-30天或更长些。而且，所述的“连续”系指真正连续施用，例如可通过持续释放剂量的形式，以及间歇地大剂量施用h IL-2(或半衰期较长的h IL-2形式，如PEGylated h IL-2)来实现，它们的药物动力学模型与真正连续服用所得到的模型极为相似。每天施用的剂量大约为10-10单位/公斤·天，一般最好在大约10-10单位/公斤·天的范围内。若剂量超过10单位/公斤·天时，将对牛产生不希望有的副作用。
对于其他牲畜因紧张而诱发的综合症或呼吸窘迫综合症，施用的方式和用量取决于动物(例如猪、山羊、绵羊等)的种类和大小，以及综合症的严重程度。然而，这类综合症的有效剂量范围可能与船热所施用的量相同。
h IL-2可以单独施用，也可作为所用疫苗的补充，以预防与紧张有关的疾病。
若用于促使动物增重时，则一般需延长IL-2的施用期(例如包括动物整个喂养期)，而施用的剂量一般为10-10单位/公斤·天。
以下实施例是用于进一步支持或说明本发明，而不是对其加以限制。
实施例1 体外活性业已证明，h IL-2重组体使牛和猪的外周血单核细胞(PBMC)显现出的体外活性(见Frong，Susan，etal，Vet Immunol and Immunopathol(1986)1191-100)。其中所用的h IL-2被称为去一丙氨酰-r IL-2丝氨酸125，少了一个起始位置丙氨酸，在位置125处有一丝氨酸，而不是半胱氨酸，它对牛和猪的未活化PBMC是促有丝分裂的，并能使来自两个物种的ConA活化的PBMC维持长期的生长。图2和图3中曲线分别表示牛和猪ConA活化的PBMC对去一丙氨酰-r IL-2丝氨酸125的剂量的效应。而且，预先用去一丙氨酰-r IL-2丝氨酸125培养1至5天的牛和猪的PBMC对肿瘤细胞靶显现出更强的细胞毒性。
另外，斯科特及其同等(资料正在印刷中)在对淋巴细胞胚种遗传的测定中，已经证明牛和猪的外周血淋巴细胞对人类重组体L-2是有效应的。将氚一胸苷(每小时18个胍冲)结合至培养4天的淋巴细胞培养物中，测定结果以培养物的每分钟蜕变数(DPM)之几何平均数(Gx)的以10为底的对数表示，并用非线性回归分析法作图，即得图4，由此可确定淋巴细胞的胚种遗传。X轴表示有丝分装原稀度和h IL-2浓度，以单位表示。所得结果表明，h IL-2对牛和猪细胞的效果与业已知道能刺激胚种遗传的植物血凝素PHA和ConA的作用相似。
实施例2 细胞产生的免疫力之增强既然呼吸疾病主要由细胞(T细胞)的免疫系统所控制，h IL-2这种增强牲畜中细胞免疫应答的能力体现了其对抵御这些病症的功效。体内注射h IL-2重组体能使小牛血中淋巴细胞胚种遗传的过程增强。
具体来说是将重量为135～225公斤(出生3-5个月)的八只小牛任意分成四组，每组2只，在持续一个月内，每周按如下方式对它们进行注射1，2和3组接受的肌肉注射量分别为104，105和106单位/公斤;而第4组仅接受赋形剂，然后对淋巴细胞的刺激作用进行评价。结果表明，只有注射剂量为105和106单位/公斤的小牛，其淋巴细胞活性经重组体h IL-2处理后得以提高、这是由此段期间每次注射前所作的胚种遗传测定所证实。但接受剂量为105单位/公斤的小牛，在最后一次施用IL-2以后，不到两周其淋巴细胞活性就回复到正常水平;与此同时接受106单位/公斤注射剂量的小牛，其淋巴细胞活性在这段期间始终保持在增高的水平。
实施3 船热的治疗从田纳西州几处地方共购进200头小母牛，然后运到科罗拉多的研究用喂料场。动物的平均重量为180公斤，将其任意(重量和品种)分成Ⅰ至Ⅳ四个组。
将h IL-2重组体(去一丙氨酰-r IL-2丝氨酸125)配制在0.05% SDS溶液中，动物一抵达喂料场就立即接受肌肉注射。以后每天都对所有动物进行注射，每周5次，持续两周。四组动物所用剂量的原始记录如下组 IL-2剂量(单位/公斤·天)Ⅰ 2×104(高剂量)Ⅱ 2×103(中等剂量)Ⅲ 2×102(低剂量)Ⅳ 对照组(稀释剂)动物不接受与BRDS有关的标准接种。在抵达喂料场后的最初几天，出乎意外地遇到了大雪和严寒的天气，因此喂以早些时候的青贮饲料。由全然不知道实验治疗内容的人每天观察动物的健康状况，并每隔一定时间对动物称重。表1列出21天的治疗结果。
表1死亡率死亡数/总数对照组 21/50低剂量 20/50 P＝0.839中等剂量 26/50 P＝0.316高剂量 14/50 P＝0.142发病率生病或死亡数/总数对照组 43/50低剂量 42/50 P＝0.779中等剂量 43/50 P＝1.000
高剂量 38/50 P＝0.202疾病严重性各组严重性评分的日平均值(评分0-3;死亡＝4)对照组 1.76低剂量 1.79 P＝0.950中等剂量 1.93 P＝0.395高剂量 1.38 P＝0.052研究期间的发病率和死亡率较之预期的为高。如上表所示，某些组的发病率和死亡率分别高达85%和50%。着手研究的最初两天就已观察到病畜。导致该研究中出现如此严重的牛呼吸病综合症可能有下列原因大雪和严寒的气候;动物体重轻(平均为400磅)和兽皮薄(来自田纳西州);各个组是由来自几个地方的牛放在一起构成的(因此，它们不是“新”的，在运达科罗拉多之前许多牛早已在牲口销售棚内看到);以及动物是喂食早些时候贮存的青贮饲料，因此可能吃得差些。
根据观察动物健康状况的人员临床诊断，施用高剂量IL-2组的牛看上去始终较好，这一点为表1中的数据所支持，表中高剂量IL-2组的死亡率、发病率和疾病的严重性均为有所减少。
在任何情况下，高剂量组的情况均较对照组好。虽然这些差异的统计有效位数(P值)刚好勉强够格(利用P＜0.05的严格定义)，但所有结果都是一致的。
表中未列出的其他一些测定数据也支持高剂量组较为有效的倾向。例如，在研究过程中该组动物发生死亡的时间较之对照组动物迟得多。
21天后，幸存动物的平均重量并没有差异，然而由于高剂量组内幸存动物较多，因此各组付出的总重量有显著区别。
实例4用作猪疫苗佐剂的功效将12只肥猪分成6组，每组2只，试验表明h IL-2重组体能增强无活化的HPP菌苗的效力。其中第1组为h IL-2佐剂对照组;第2组为菌苗对照组;第3组在试验开始时(0天)和试验第21天分别注射一次h IL-2，剂量为103单位/公斤;第四组在每次接种后都要在连续5天中每天接受103单位/公斤的注射剂量;第5组在试验开始和第21天分别接受一次注射，剂量为105单位/公斤;第6组在每次接种后都要在连续5天中每天接受105单位/公斤的注射剂量。
在试验开始和第21天，分别给2至6组的猪施用含有以福尔马林灭活的HPP的乳化油剂佐剂，药物从颈部肌肉处注入。到了第41天各组猪都受到了挑战，即从猪鼻内引入血清1型HPP，将这些猪在71天内全部杀死，尸体作了解剖。通过目视检查确定肺部受到侵袭的范围，特别注意肺的损伤。在71天中定期对期对猪称重-增重的快慢可衡量动物全面健康状况。结果如下尸体解剖 体重平均增加速率(公斤/天)组 (肺部侵袭的范围) 0-41天 41天-71天1 24.57% 0.69 0.302 6.100% 0.69 ＊3 25.58% 0.62 0.274 12.12% 0.55 0.865 13.19% 0.62 0.396 0.0% 0.58 0.88＊在受到血清1型HPP挑战后5天死去。
上述结果表明，疫苗接种后每天接受h IL-2注射的组(第4组和第6组)在受到挑战后其体重增加速率较之采用其他疗法的组高得多。以上结果也表明，这两个组的肺病理学也显著减轻，意味着每天施用h IL-2的接种方式可对挑战提供更强的保护。受到挑战后所有动物对HPP都表现出较高的抗体效价。
以后又进行第二次研究，目的在于证实h IL-2(去-丙氨酰-h IL-2丝氨酸125)用作HPP接种佐剂的功效。第二次研究的原始记录与上述第一次研究的相似使动物接种，其中部分动物接受h IL-2治疗，而其余动物则免去此种治疗，然后再使所有动物都受到致病力强的HPP挑战。衡量佐剂功效的主要指标包括感染后临床症状和体重增加情况，以及尸体剖验时所发现的肺部受到侵袭的范围。将这第二次的研究结果列表如下尸体剖验所得的肺部 平均日增重量(公斤/天)组(N) 受侵范围的平均百分数 挑战前 挑战后对照组(2) 34 0.37 0.31只用HPP(3) 19 0.34 0.62HPP+IL-2(3)105单位/公斤.天 01 0.29 0.84HPP+IL-2(2)104单位/公斤.天 00 0.43 0.75未受到挑战(2) / 0.36 0.83第二次研究的数据证实了第一次研究中施用h IL-2的注射剂量为105单位/公斤.天时所观察到的效力，并将这一发现扩大到较低的剂量-104单位/公斤.天。104单位/公斤。天的h IL-2注射剂量所产生的保护效果与施用高剂量时所观察到的结果相似。
实施例5 用作狗疫苗佐剂的功效在h IL-2首次治疗时，以及在hHL-2的5天疗程(每天注射)开始后的7天，对狗注射阴孔
血蓝素(KLH)。从狗身上取出血清，进行用与酶键合的免疫吸收剂测定(ELISAs)，以确定抗体对KLH的免疫应答。在施用h IL-2的狗中观察到Ig G抗体对KLH的免疫应答明显地随剂量加大而增强。这种增强是所用的KLH免疫原特有的。
实施6 对增加体重的效用下述试验表明，h IL-2重组体的施用不同剂量和方式对在正常环境下饲养的幼猪体重增加的影响。
将48只体重为15-20公斤，健康状况正常的断奶后幼猪分成8组，每组6只。按下列要求用h IL-2或对照制剂对小猪进行肌肉注射组 剂量(单位/公斤) 施用方法1 低剂量(103) 每周一次，持续4周2 中等剂量(104) 每周一次，持续4周3 高剂量(105) 每周一次，持续4周4 低剂量(2×102) 每天一次，每周注射5天，持续4周5 中剂量(2×103) 每天一次，每周注射5天，持续4周6 高剂量(2×104) 每天一次，每周注射5天，持续4周7 高剂量赋形剂 每天一次，每周注射5天，对照组 持续4周8 生理食盐水对照组 每周一次，持续4周实验开始时(时间为零)，对每只幼猪称体重，以后每周称一次，持续6-8周。将饲料消耗量和疾病的临床印象也记录下来。接受h IL-2疗程的动物，其体重的增加显著地高于对照组的动物，而且健康状况也较好。
权利要求
1.一种用来使动物预防因外界不利影响引起的非特发性综合症，或用于增强动物对疫苗的免疫应答，或者促使动物增重的制剂，其特征在于该制剂包括ⅠL-2。
2.根据权利要求
1所述的制剂，其中IL-2是h IL-2。
3.根据权利要求
2所述的制剂，其中HIL-2是h IL-2的水溶性形式。
4.根据权利要求
3所述的制剂，其中h IL-2是聚乙二醇复合的h IL-2(PEGylated h IL-2)。
5.根据权利要求
2、3或4所述的制剂，其中h IL-2是去-丙氨酰-r IL-2丝氨酰125。
6.根据权利要求
1、2、3、4或5所述的制剂，其中IL-2是一种可连续释放的配方形式。
7.根据权利要求
1、2、3、4或5所述的制剂，其中IL-2是一种单持续作用的配方形式。
8.一种使动物预防因外界不利影响引起的非特发性综合症，或用于增强动物对疫苗的免疫应答，或者促使动物增重的方法，其特征在于它包括向动物施用有效量的IL-2。
9.根据权利要求
8所述的方法，其中IL-2是h IL-2。
10.根据权利要求
9所述的方法，其中h IL-2是h IL-2的水溶性形式。
11.根据权利要求
10所述的方法，其中h IL-2是聚乙二醇复合的h IL-2(PEGylated h IL-2)。
12.根据权利要求
9，10或11所述的方法，其中h IL-2是去-丙氨酰-r IL-2丝氨酸125。
13.根据权利要求
8，9，10，11或12所述的方法，其中IL-2是一种可连续释放的配方形式。
14.根据权利要求
8，9，10，11或12所述的方法，其中IL-2是一种单连续作用的配方形式。
15.根据权利要求
13所述的方法，其中IL-2以高于1 103单位/公斤.天和低于106单位/公斤.天的定额连续施用。
16.一种用于增强人体对疫苗免疫应答的制剂，其特征在于它包括h IL-2。
17.根据权利要求
16所述的制剂，其中h IL-2是h IL-2的水溶性形式。
18.根据权利要求
17所述的方法，其中h IL-2是聚乙二醇复合的h IL-2(PEGylated h IL-2)。
19.根据权利要求
16，17或18所述的制剂，其中h IL-2是去-丙氨酰-r IL-2丝氨酸125。
20.根据权利要求
16，17，18或19所述的制剂，其中IL-2是一种连续释放的配方形式。
21.根据权利要求
16，17，18或19所述的制剂，其中IL-2是一种单连续作用的配方形式。
22.一种用于增强人体对苗疫的免疫应答的方法，其特征在于它包括向人体施用h IL-2，并作为接种方式的一部分。
23.根据权利要求
22所述的制剂，其中h IL-2是h IL-2的水溶性形式。
24.根据权利要求
23所述的方法，其中h IL-2是聚乙二醇复合的h IL-2(PEGylated h IL-2)。
25.根据权利要求
22，23或24所述的方法，其中h IL-2是去-丙氨酰-r IL-2丝氨酸125。
26.根据权利要求
22，23，24或25所述的方法，其中IL-2是一种连续释放的配方形式。
27.根据权利要求
22，23，24或25所述的方法，其中IL-2是一种单连续作用的配方形式。
专利摘要
使用IL-2作为有效成分的方法和制剂，用来使动物预防因外界不利影响引起的非特发性综合症，或用于增强动物对疫苗的免疫应答，或者促使动物增重。
文档编号A61K38/20GK86106369SQ86106369
公开日1987年4月1日 申请日期1986年9月20日
发明者杰克H·纳伯格, 奥瑟D·纽厄尔, 迈克尔V·多伊尔, 汤姆森J·怀特 申请人:塞塔斯公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan