专利名称：速激肽受拮剂2－(r)－(1－(r)－(3,5－二(三氟甲基)苯基)乙氧基)－3－(s)－(4－氟 ...的制作方法
技术领域：
本发明概要本发明涉及新的多晶型物化合物2(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉。
本发明还涉及含有该新的多晶型化合物作为活性成分的药用制剂，以及在治疗某些疾病中该化合物及其制剂的应用。
本发明新的多晶型物为速激肽受体拮抗剂，可用于治疗或预防中枢神经系统疾病、炎症、疼痛或偏头痛、哮喘和呕吐。
与其他已知形式的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉相比，在药用制剂中的热动力学稳定性和适用性方面本发明多晶型物具有其优点。
本发明背景P物质的神经肽受体(神经激肽-1；NK-1)广泛地分布于哺乳动物的神经系统(尤其是脑和脊神经节)、循环系统和外周组织(尤其是十二指肠和空肠)，并且与调节许多不同的生物过程有关。这包括嗅觉、视觉、听觉和疼痛感觉的知觉、运动控制、胃的蠕动、血管舒张、分泌唾液和排尿。P物质(这里也称为“SP”)属于速激肽类天然出现的十一肽，后者被如此称谓是因为其能迅速促进血管外平滑肌组织的收缩。速激肽是按保留的羧基末端系列Phe-X-Gly-Leu-Met-NH2进行区分的。除SP之外，已知的哺乳动物速激肽包括神经激肽A和神经激肽B。通用名称以NK-1、NK-2和NK-3分别表示SP的受体、神经激肽A和神经激肽B。
P物质为在哺乳动物体内产生的药学上有活性的神经肽，它可以起血管舒张药、抑制药、刺激唾液分泌的作用，并可产生增加毛细管渗透性。根据剂量和动物疼痛应答性，它也能够在动物中产生止痛和痛觉过敏。
速激肽受体拮抗剂在疼痛、头痛(尤其是偏头痛)、阿耳茨海默氏病、多发性硬化症、缓减吗啡戒除症状、心血管的变化、浮肿(如热损伤引起的浮肿)、慢性炎症(如风湿性关节炎)、哮喘/支气管反应过度和其他呼吸疾病(包括过敏性鼻炎)、肠炎症(包括溃疡性结肠炎和Chrohn氏症)、眼损伤和眼炎症、增生的玻璃体视网膜病、过敏性肠综合症以及膀胱功能疾病(包括膀胱炎和膀胱逼肌反射过强)等方面应用已被详述。
人们还提出，速激肽受体拮抗剂还可用于以下疾病抑郁症、精神抑郁症、慢性阻塞性气道疾病、超敏感性疾病(如对毒物常春藤)、血管痉挛疾病(如绞痛和Reynauld氏病)、纤维性和胶原疾病(如硬皮病和嗜酸性片吸虫病)、反射交感性营养不良(如肩/手综合症)、癖嗜病(如酒精中毒)、与紧张有关的体节疾病、神经病、神经痛、与免疫增强或抑制有关的疾病(如全身性红斑狼疮)、眼科疾病(如结膜炎和春季结膜炎等)、皮肤疾病(如接触性皮炎、特应性皮炎、荨麻疹和其他湿疹样皮炎)。
为了提供P物质和其他速激肽受体拮抗剂已进行了多方面的努力，以便更有效地治疗以上所述各种病症和疾病。在PCT出版物WO94/00440、EPO出版物0,577,394以及PCT出版物WO 95/16679中公开了某些吗啉和硫代吗啉类化合物作为P物质拮抗剂。尤其是化合物2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉已作为PCT出版物WO 95/16679实施例75的标题化合物被公开。该化合物随后被证明是本申请称为II型的多晶型物。
药用化合物的形态是重要的，它涉及到合适剂量形式的研究，因为在进行临床和稳定性研究中如果化合物的形态不能保持恒定，那么应用和测定的准确剂量一批与另一批无从比较。一旦药用化合物作为产品应用，那么了解在各个剂型中应用的化合物的多晶型是重要的，以便保证生产过程应用相同形态的药物，以及在各个剂型中含有相同剂量的药物。因此，保证化合物是单一的多晶型或是一些多晶型的已知混合物是绝对必要的。此外，在药用制剂中，某些多晶型可能具有增加的热动力学稳定性，因此与其他多晶型相比是更合适的。本申请中的多晶型化合物具有相同的化学结构，但以不同的结晶排列。
图1为I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的粉末X射线衍射图。
图2为II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的粉末X射线衍射图。
本发明的详细说明本发明涉及新的多晶型化合物2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉以及制备该多晶型物的方法。
化合物2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉具有下式结构，
它为速激肽受体拮抗剂，可用于治疗炎症、疼痛或偏头痛、哮喘和呕吐，该特定的多晶型物(这里称为I型)与该化合物的其他晶型比较具有优良的特性，与其他多晶型物相比它在热力学上更稳定，因此更适合包括在药用制剂中。
本发明还涉及制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括在选自乙醇、2-丙醇、乙腈和乙酸异丙基酯的溶剂中使II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉平衡。
本发明也涉及制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括将任选形态组成的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉样品加热至215～230℃范围；然后将该样品恢复至室温。
尤其是加热2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉可以在敞口锅中于氮气氛下在差示扫描量热池中进行，并且可以将2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉加热至约215～230℃，然后冷至室温。优选地，起始的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的形态组成为II型。
此外，本发明还涉及大规模制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的另一方法，该方法包括将任选形态组成的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉混悬在甲醇/水溶液(优选比例为2/1V/V)中；加入I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的晶种；
生成的混合物于约0～50℃搅拌一段时间，以充分生成I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉；和收集生成的I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉。
同样，本发明还涉及制备形态学上均匀的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括任一上述的方法。
本发明化合物，即2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的新多晶型物为速激肽受体拮抗剂，可用于治疗炎症、疼痛或偏头痛、哮喘和呕吐。因此，本发明也涉及含有所述多晶型物作为活性成分的药用制剂，以及在治疗某些疾病中该多晶型物及其制剂的应用。
I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉为无水的和非吸湿性的，并且作为纯的固体和在水醇溶液中具有高度的热稳定性。
II型为无水的结晶物质，熔点254℃，它可由2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉化学合成中直接经重结晶得到。粉末X-射线衍射(XRPD)粉末X-射线衍射研究已广泛用于阐明分子结构、结晶和多晶型现象。用装有3kw X-射线发生器(CuKα1放射)和NaI(Ti)闪烁检测器的Philips APD 3720型粉末衍射仅记录粉末X-射线(XRPD)。从3°～45°(2θ)进行测定，样品保持在环境温度，结果见图1和2。
I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的特征在于，其粉末X-射线衍射图在约12.0，15.3，16.6，17.0，17.6，19.4，20.0，21.9，23.6，23.8和24.8°(2θ)处具有关键的反射。
II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的特征在于，其粉末X-射线衍射图在约12.6，16.7，17.1，17.2，18.0，20.1，20.6，21.1，22.8，23.9和24.8°(2θ)处具有关键的反射。
上述XRPD图确证，二个样品具有不同的晶型。I型和II型均具有结晶物质的强峰特征。差示扫描量热法[DSC]I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉和II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的差示扫描量热法表明，在其热特性方面它们没有明显的区别。在相同的温度下二者得到的差示热分析图均具有单一的熔融吸热作用。
尤其是I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的差示扫描量热法(DSC)曲线显示单一的熔融吸热，峰温度为255.8℃，外推开始温度为254.7℃，热函为105J/g。而II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的DSC曲线也显示单一的熔融吸热，峰温度为255.6℃，外推开始温度为254.4℃，热函为107J/g。NMRI型和II型的质子与碳核磁共振谱表明，从II型到I型的转化中没有化学改变。溶解度在0℃于2/1(v/v)甲醇/水中测定I型的溶解度为0.9±0.1mg/ml。在0℃于2/1(v/v)甲醇/水中测定II型的溶解度为1.3±0.2mg/ml。溶解度的比值为1.4，这表明，I型是较稳定的多晶型物。与II型相比，I型更稳定(0.2kca/mol)。蒸汽压当用克努森逸出技术进行测定时发现，在升高的温度下I型和II型的蒸汽压是相同的。
速激肽拮抗作用测定本发明的化合物，2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)-苯基)乙氧基-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氟-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啡的I型多晶型物，在对需要这种治疗的哺乳动物治疗胃肠道紊乱，中枢神经系统障碍，炎症，疼痛或偏头痛，哮喘和呕吐时，对拮抗速激肽，特别是P物质和神经激肽有效。可通过如下测定法证明这种活性。
A.在COS中的受体表达为了在COS中瞬时表达克隆的人神经激肽-1受体(NK1R)，将对于人NK1R的cDNA克隆进入表达载体pCDM9，此载体是通过将氨苄青霉素抗性基因(来自BLVESCRIPT SK+的核苷酸1973-2964)插入Sac II位点而从pCDM 8(INVITROGEN)获得。应用IBI GENEZAPPER(IBI，New Haven，CT)，以260V和950μF，在800μl转染缓冲液(135mM NaCl，1.2mM CaCl2，1.2mM MgCl2，2.4mM K2HPO4，0.6mM KH2PO4，10mM葡萄糖，10mM HEPESpH7.4)中，借助于电穿孔法，达到将20μg此质粒DNA转染进入1千万个COS细胞的目的。将此细胞在10％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，100U/ml青霉素-链霉素，和90％DMEM培养基(GIBCO.GrandIsland，NY)中，37℃，5％CO2中培育3天，然后进行结合测定。
B.在CHO中稳定表达为了建立表达此克隆的人NK1R的稳定细胞系，将此cDNA亚克隆进入载体pRcCMV(INVITROGEN)，应用IBI GENEZAPPER(IBI)，以300V和950μF，在800μl以0.625mg/ml鲱鱼精子DNA补充的转染缓冲液中，借助于电穿孔法，达到将20μg此质粒DNA转染进入CHO细胞的目的。将此转染的细胞在CHO培养基[10％胎牛血清，100U/ml青霉素-链霉素，2mM谷氨酰胺，1/500次黄嘌呤-胸苷(ATCC)，90％IMDM培养基(JRH BIOSCIENCES，Lenexa，KS)，0.7mg/ml G418(GIBCO)中，37℃，5％CO2中培育直至出现集落为止。分离出每个集落，并使其繁殖。挑选出具有最高数量人NK1R的细胞克隆，供随后的应用如药物筛选。
C.应用COS或CHO的试验方案对于在COS或CHO细胞甲表达的人NK1R的结合试验，是基于用125I-P物质(125I-SP，来源于DU PONT，Boston，MA)作为放射性标记的体配，此配体同未标记的P物质或任何其它的配体，竞争结合于人NK1R。用非酶溶液(SPECIALTY培养基，Lavallete，NJ)使COS或CHO单层培养细胞分离，并再悬浮于适量的结合缓冲液(50mM Tris pH7.5，5mM MnCl2，150mM NaCl，0.04mg/ml杆菌肽，0.004mg/ml亮抑酶肽，0.2mg/ml BSA，0.01mM亚磷酰胺)中，致使200μl细胞悬浮将产生大约10000cpm的125I-SP比结合(大约50000个细胞对200000个细胞)。在此结合试验中，将200μl细胞加入一个试管中，此试验装有20μl1.5-2.5nM的125I-SP和20μl未标记的P物质或任何其它待测化合物。将此试管在4℃或室温下缓慢振荡温育1小时。用预先以0.1％聚乙烯亚胺浸湿的GF/C滤器(BRANDEL，Gaithersburg，MD)，使结合的放射活性与未结合的放射活性分开。用3ml漂洗缓冲液(50mM Tris pH7.5，5mMMnCl2，150mM NaCl)洗此滤器3次，并用γ-计数器测定它的放射活性。
还可以通过测定IP3的降解产物-单磷酸肌醇的积累，在表达人NK1R的CHO细胞内测定NK1R对磷脂酶C的激活作用。将CHO细胞接种在12-孔板内，每孔250000个细胞。在CHO培养基中培养4天之后，以0.025μCi/ml3H-肌醇对细胞加样，并孵育过夜。通过用磷酸缓冲盐水漂洗，除去细胞外的放射性活性。以最后浓度0.1mM对每个孔加入LiCl，并随之加入或不加入待测样品，再在37℃继续孵育15分钟。以最后浓度0.3nM对每个孔加入P物质，以便激活人NK1R。37℃温育30分钟之后，移去培养基，加入0.1N HCl。在4℃超声波处理每个孔，并用CHCl3/甲醇(1∶1)提取。将其水相对1ml的DowexAG 1X8离子交换柱加样。先用0.1N甲酸，随后用0.025M甲酸铵-0.1N甲酸洗柱。用0.2M甲酸铵-0.1N甲酸洗脱-磷酸肌醇，并用β计数器作定量测定。
还可以借助于Lei等人，英国药学杂志，105，261-262(1992)中公布的试验法，证明本发明化合物的活性。
本发明的化合物，对于治疗各种各样以存在过度速激肽，特别是P物质活性为特征的临床病症是有效的。
因此，例如速激肽以及尤其是P物质的活性过度，会牵涉到中枢神经系统的许多疾病。所述疾病包括情感病症，如抑郁或尤其是抑郁症，例如单次发作性或复发的抑郁症和精神抑郁病或两极神经细胞症，例如I型两极神经细胞症和II型两极神经细胞症，以及循环性精神病；焦虑症，如有或没有广场恐怖症的恐慌症，没有恐慌病历史的广场恐怖症，特定的恐怖症如特定的动物恐怖症、社交恐怖症，强迫观念与行为的疾病，紧张症，包括外伤后的紧张症和急性紧张症，以及一般的焦虑症；精神分裂症和其他的精神疾病，如精神分裂症样疾病，情感分裂症，妄想症，暂时的精神症，分享精神症(shared psychotic disorders)和妄想或幻觉型精神病；谵妄，痴呆，以及遗忘和其他认识神经变性疾病，如阿耳茨海默氏病、老年性痴呆、阿耳茨海默氏型痴呆、血管型痴呆和其他型痴呆，如由于HIV病、头部外伤型、帕金森氏病、亨廷顿氏病，皮克氏病、克罗伊茨费尔特-雅各布病或由于多种病因学引起的痴呆；帕尔森氏病和其他椎体外运动疾病如药物引起的运动疾病，例如精神抑制药引起的帕金森神经机能障碍、精神抑制药引起的毒性综合症、精神抑制药引起的急性肌张力障碍、精神抑制药引起的急性静坐恐怖、精神抑制药引起的迟发运动障碍和药物引起的体位震颤；由于应用酒精、苯丙胺(或苯丙胺类似药)、咖啡因、大麻、可卡因、致幻剂、吸入剂和气溶胶推进剂、尼古丁、阿片、phenylglycidine衍生物、镇静药、催眠药和抗焦虑药而产生的与物质有关的疾病，与物质有关的疾病包括依赖和滥用、中毒、脱瘾、醉酒谵妄、脱瘾谵妄、持久性痴呆、精神病、情感病症、焦虑、性功能障碍和失眠；癫痫；唐氏综合症；脱神经髓鞘病如MS和ALS以及其他神经病理学疾病如外周神经病，例如糖尿病性神经病和化疗引起的神经病，以及带状疱疹后神经痛、三叉神经痛、节性神经痛或肋间神经痛和其他神经痛；由于急性和慢性大脑血管损伤引起的大脑血管病如大脑血管硬塞、蛛网膜下出血或大脑水肿。
速激肽以及尤其是P物质的作用还涉及伤害感受性和疼痛。因此本发明化合物可用于预防或治疗其中以疼痛为主的疾病和病症，包括软组织和外周损伤如急性外伤、骨关节炎、类风湿性关节炎、肌肉骨骼疼痛，尤其是外伤后疼痛，脊柱疼痛，肌筋膜疼痛综合症，头痛，外阴切口术疼痛和烧伤；深位和内脏疼痛，如心脏疼痛、肌肉疼痛、眼疼痛、口和面部疼痛，例如牙痛、腹部疼痛、妇科疼痛，例如痛经，阵痛；与神经和根部损伤有关的疼痛，如与外周神经疾病有关的疼痛，例如神经卡压(nerve entrapment)疼痛和肽神经丛抽出术疼痛，切断术疼痛，外周神经痛，三叉神经痛、非典型的面部疼痛，神经根损伤以及蛛网膜炎；与癌有关的疼痛(通常称作为的癌疼痛)；中枢神经系统疼痛，如由于脊柱索或脑干损伤的疼痛；下后背疼痛；坐骨神经痛；关节强硬性脊椎炎，痛风；以及瘢痕疼痛。
速激肽以及尤其是P物质的拮抗剂还可用于治疗呼吸系统疾病，特别是与过量粘液分泌有关的疾病如慢性阻塞性气道疾病、支气管肺炎、慢性支气管炎、囊性纤维化和哮喘，成人呼吸窘迫综合症，支气管痉挛；炎症如肠炎，牛皮癣，纤维变性，骨关节炎，类风湿性关节炎，瘙痒和晒伤；过敏反应如湿疹和鼻炎；超敏反应疾病如对毒物常春滕的超敏反应；眼科疾病如结膜炎，春天结膜炎等；与细胞增生有关的眼科疾病如增生的玻璃体视网膜病；皮肤科疾病如接触性皮炎，特应性皮炎，荨麻疹，以及其他湿疹样皮炎。
速激肽以及尤其是P物质的拮抗剂也可用于治疗肿瘤，包括乳房肿瘤、神经节胚细胞瘤和小细胞癌如小细胞肺癌。
速激肽以及尤其是P物质的拮抗剂还可用于治疗胃肠(GI)疾病，包括GI道炎症如胃炎、胃十二指肠溃疡，胃癌、胃淋巴瘤、与内脏神经元控制有关的疾病，溃疡性结肠炎，节段性回肠炎，过敏性肠综合症和呕吐，包括急性、延缓性或早现呕吐如由化疗、放射、毒素、病毒或细菌感染、妊娠、前庭疾病(如运动疾病、眩晕、头昏和梅尼埃尔氏病)、外科手术、偏头痛、颅间压变动、胃食管反流疾病、胃酸过多性消化不良、食物或钦酒过度放纵、胃酸过多、胃灼热或反胃、烧心(例如发作性夜发的或进餐引起的烧心)以及消化不良引起的呕吐。
速激肽以及尤其是P物质拮抗剂也可用于治疗许多其他疾病，包括与紧张有关的躯体疾病；反射性交感神经营养障碍如肩/手综合症；有害的免疫反应如移植组织排异反应，以及与免疫增强或抑制有关的疾病如全身性红斑狼疮；由细胞因子化疗导致的血浆外渗，膀胱功能的疾病如膀胱炎、膀胱逼肌反射亢进和失禁；纤维变性和胶原蛋白疾病如硬皮病和嗜酸性片吸虫病；由血管舒张和血管痉挛引起的血流疾病如心绞痛、血管性头痛、偏头痛和Reynaud氏病；以及归因于或涉及上述任一疾病的疼痛或伤害感受性，尤其是偏头痛中的疼痛传导。
本发明化合物在治疗上述疾病的合并症状，尤其是治疗合并的手术后疼痛和手术后恶心与呕吐也是有效的。
本发明化合物尤其可用于治疗呕吐，包括急性、延缓性或早现呕吐如化疗、放射、毒素、妊娠、前庭疾病、运动、外科手术、偏头痛以及颅间压变动引起的呕吐。更特别的是，本发明化合物可用于治疗由抗肿瘤(细胞毒素)剂(包括通常用于癌化疗的药物)所引起的呕吐。
上述化疗剂的实例包括烷化剂如氮芥、吖丙啶类化合物、烷基磺酸酯类和其他具有烷基化作用的化合物如亚硝基脲、顺铂和达卡巴嗪；抗代谢药物如叶酸、嘌呤或嘧啶拮抗剂；核分裂抑制剂如长春花碱类鬼臼素衍生物；以及细胞毒抗菌素。
化疗剂的具体实例例如己由D.J.Stewart在“Nausea andVomitingRecent Research and Clinical Advances”(Eds.J.Kucharczyk等，CRC Press Inc.，Boca Raton，Florida，USA(1991)，p177-203，特别是p188)中叙述。通常应用的化疗剂有顺铂、达卡巴嗪(DTIC)、放线菌素。氮芥、链佐星、环磷酰胺、卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、阿霉素、柔红霉素、丙卡巴肼、红裂霉素、阿糖胞苷、依托伯甙、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、长春碱、长春新碱、博来霉素和苯丁酸氮芥[R.J.Gralla等，CancerTreatment Reports，68(1)，163-172(1984)]。
本发明化合物也可用于治疗由放射(包括放射治疗，例如在癌的治疗中应用的放射治疗)或放射病所引起的呕吐；以及治疗手术后恶心和呕吐。
为了治疗某些疾病，需要将本发明化合物与其他药学上有效的药物一起应用。人们明白，本发明化合物可以与另一治疗药物一起作为并用制剂同时应用、独立应用或按序应用以减轻呕吐。所述并用制剂例如可以是两合包装形式。
另一方面，本发明提供了本发明化合物与5-HT3拮抗剂(如奥坦西隆、格雷西隆、tropisetron或zatisetron)或其他抗呕吐药物(如地塞米松)或多巴胺拮抗剂(如甲氧氯普胺)并用。此外，本发明化合物可以与抗炎的皮质类甾醇(如地塞米松)并用。此外，如以上所述，本发明化合物还可以与化疗药物如烷化剂、抗代谢药物、核分裂抑制剂或细胞毒抗菌素一起并用。一般来讲，在所述合并应用中应用已知治疗药物通用的有效剂量形式是合适的。
当用由顺铂引起呕吐的雪鼠模型(ferret model)进行试验(F.D.Tattersall等，Eur.J.pharmacol.，(1993)250，R5～R6)时，发现本发明化合物可以减弱由顺铂引起的干呕和呕吐。
本发明化合物尤其还可用于治疗疼痛或伤害感受性和/或炎症以及与此有关的病症如神经病，例如糖尿病性神经病和化疗引起的神经病，带状疱疹后和其他的神经痛，哮喘，骨关节炎，类风湿性关节炎和头痛(包括偏头痛)，急性或慢性压力头痛，线束头痛，颞下领疼痛，以及下颌骨窦道疼痛。本发明还提供了将本发明化合物用于治疗的方法。
另一方面，本发明还提供了将本发明化合物用于制备治疗或预防与速激肽(尤其是P物质)过量的有关生理疾病药物。
本发明也提供了治疗或预防与速激肽(尤其是P物质)过量有关生理疾病的方法，该方法包括给需要治疗的患者施用速激肽减少量的本发明化合物或含的本发明化合物的组合物。
为了治疗某些疾病，需要将本发明化合物与其他药学上有效药物一起应用。例如，为了治疗呼吸系统疾病如哮喘，可以将本发明化合物与支气管扩张药如β2-肾上腺素能受体拮抗剂或作用于NK-2受体的速激肽拮抗剂一起应用。给患者同时施用、按序施用或并用本发明化合物和支气管扩张药。为了治疗需要拮抗神经激肽-1和神经激肽-2的疾病，包括与支气管收缩和/或气道中血浆外渗有关的疾病如哮喘、慢性支气管炎、气道疾病，或膀胱纤维变性，可以将本发明化合物与作用于神经激肽-2受体的速激肽拮抗剂或作用于神经激肽-1和神经激肽-2受体的速激肽受体拮抗剂一起应用。
同样，本发明化合物可以与白三烯拮抗剂如白三烯D4拮抗剂(例如选自于欧洲专利说明书0480717和0604114、US专利4,859,692和5,270,324中的化合物)一起应用。该合并应用尤其可用于治疗呼吸系统疾病如哮喘、慢性支气管炎和咳嗽。
因此，本发明提供了治疗呼吸系统疾病如哮喘的方法，该方法包括给需要治疗的患者施用有效剂量的本发明化合物和有效剂量的支气管扩张药。本发明还提供了含有本发明化合物、支气管扩张药以及药学上适用载体的组合物。
人们明白，为了治疗或预防偏头痛，可以将本发明化合物与其他抗偏头痛药物如麦角胺类或5-HT1激动剂，尤其是sumatriptan或rizatriptan一起应用。同样，为了治疗行为痛觉过敏，可以将本发明化合物与N-甲基D-天冬氨酸(NMDA)拮抗剂如dizocilpine一起应用。为了治疗或预防下尿道炎症，尤其是膀胱炎，可以将本发明化合物与抗炎剂如缓激肽受体拮抗剂一起应用。本发明也提供了含有本发明化合物、支气管扩张药和药学上适用载体的组合物。
人们明白，为了治疗或预防疼痛或伤害感受性，可以将本发明化合物与其他的镇痛剂如对乙酰氨基酚(扑热息痛)、阿斯匹林或其他NSAID[尤其是阿片类镇痛药(特别是吗啡)]一起应用。具体的抗炎药包括双氯芬酸、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、萘普生、吡罗昔康和舒林酸。与本发明化合物一起应用的合适的阿片类针痛药包括吗啡、可待因、双氢可待因、双乙酰基吗啡、氢可酮、氢吗啡酮、左啡诺、羟吗啡酮、afenantil、丁丙诺啡、布托诺啡、芬太尼、舒芬太尼、哌替啶、美沙酮、纳布啡、存丙氧芬和喷他佐辛；或它们的药学上适用的盐。这些阿片类镇痛药优选的盐包括吗啡硫酸盐、吗啡盐酸盐、吗啡酒石酸盐、可待因磷酸盐、可待因硫酸盐、双氢可待因二酒石酸盐、双乙酰基吗啡盐酸盐、氢可酮二酒石酸盐、氢吗啡酮盐酸盐、左啡诺酒石酸盐、羟吗啡酮盐酸盐、afenantil盐酸盐、丁丙诺啡盐酸盐、布托诺啡酒石酸盐、芬太尼柠檬酸盐、哌替啶盐酸盐、美沙酮盐酸盐、纳布啡盐酸盐、右丙氧芬盐酸盐、右丙氧芬萘磺酸(2-萘磺酸(1∶1)-水合物)以及喷他佐辛盐酸盐。
因此，又一方面，本发明提供了含有本发明化合物和镇痛剂以及至少一种药学上适用载体或赋形剂的药用组合物。
再一方面，本发明提供了含有本发明化合物和镇痛药作为并用制剂的产品，在治疗和预防疼痛或伤害感受性中该产品可以同时应用，独立地应用或按序应用。
人们明白，为了治疗或预防抑郁症和/或焦虑症，可以将本发明化合物与抗抑郁剂或抗焦虑剂并用。用于本发明合适的抗抑郁剂包括去甲肾上腺素类再吸收抑制剂和选择性5-羟色胺，它们包括去甲肾上腺素再吸收抑制剂、选择性5-羟色胺再吸收抑制剂、单胺氧化酶抑制剂、可逆的单胺氧化酶抑制剂、5-羟色胺和去甲肾上腺素再吸收抑制剂、促皮质释放因子(CRF)拮抗剂、α-肾上腺素受体拮抗剂和非典型的抗抑郁剂。用于本发明的另一类抗抑郁剂为去甲肾上腺素能的和特定的5-羟色胺能的抗抑郁剂如mirtazapine。去甲肾上腺素再吸收抑制剂合适的实例包括阿米替林、氯米帕明、多塞平、米帕明、曲米帕明、阿莫沙平、地昔帕明、马普替林、去甲替林、瑞波西汀和普罗替林以及它们药学上适用的盐。合适的选择性5-羟色胺再吸收抑制剂的实例包括氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀和舍曲林以及它们的药学上适用的盐。合适的单胺氧化酶抑制剂的实例包括异卡波肼、苯乙肼、反苯环丙胺和司来吉兰以及它们的药学上适用的盐。合适的可逆的单胺氧化酶抑制剂的实例包括吗氯贝胺和它的药学上适用的盐。合适的5-羟色胺和去甲肾上腺素再吸收抑制剂的实例包括venlafaxine和它的药学上适用的盐。合适的促皮质释放因子(CRF)拮抗剂的实例包括在国际专利说明书WO94/13643、WO 94/13644、WO 94/13661、WO 94/13676和WO94/13677中叙述的化合物。合适的非典型抗抑郁剂的实例包括安非他酮、lithium、奈法唑酮、西布曲明、曲唑酮和维洛沙秦以及它们药学上适用的盐。用于本发明的其他抗抑郁药包括adinozolam、阿拉丙酯、amineptine、阿半替林/氯氮组合物、atipamezole、azamianserin、巴嗪普令、fefuraline、二苯美仑、binodaline、比培肼醇、溴法罗明、安非他酮、卡罗沙酮、cericlamine、氰帕明、西莫沙酮、西肽普兰、氯美醇、氯伏胺、氯尼尔、地阿诺、地美替林、二苯西平、度硫平、屈昔多巴、乙非辛、setazolam、依托哌酮、非莫西汀、酚加宾、非唑拉明、氟曲辛、咪唑克生、茚达品、茚氯秦、伊普吲哚、左丙替林、litoxetine、洛非帕明、美地沙明、美他帕明、美曲吲哚、米安色林、milnacipran、minaprine、mirtazapine、montirelin、nebracetam、奈福泮、尼亚拉胺、诺米芬新、norfluoxetine、orotirelin、奥沙氟生、匹那西泮、pirindole、苯噻啶、利坦色林、咯利普兰、sercloremine、司普替林、西布曲明、舒布硫胺、舒必利、替尼沙秦、托扎啉酮、thymoliberin、噻萘普汀、替氟卡宾、托芬那辛、托非索泮、toloxatone、托莫西汀、维拉必利、维喹啉、齐美利定和zometapine以及它们药学上适用的盐，以及St.John氏草本植物(贯叶连翘)或它的萃取物。优选的抗抑郁剂包括选择性的5-羟色胺再吸收抑制剂，尤其是氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀和舍曲林以及它们药学上适用的盐。
用于本发明的合适的抗焦虑药包括苯并二氮类和5-HT1A激动剂或拮抗剂(尤其是5-HT1A部分激动剂)以及促皮质释放因子(CRF)拮抗剂。除了苯并二氮类之外，其他合适的抗焦虑剂为非苯并二氮类镇静-睡眠药如唑吡旦；情感稳定剂如氯巴占、加巴喷丁、拉莫三嗪、loreclezole、oxcarbamazepine、司替戊醇和氨己烯酸；以及巴比土酸盐类。用于本发明合适的苯并二氮类包括阿普唑仑、氯氮、氯硝西泮、chlorazepate、地西泮、哈拉西泮、lorezepam、奥沙西泮和普拉西泮以及它们药学上适用的盐。用于本发明合适的5-HT1A激动剂或拮抗剂，尤其是5-HT1A部分激动剂包括丁螺环酮、氟噁克生、吉吡隆、伊沙匹隆和吲哚洛尔以及它们药学上适用的盐。合适的促皮质释放因子(CRF)拮抗剂包括在国际专利说明书WO94/13643、WO 94/13644、WO 94/13661、WO 94/13676和WO94/13677中叙述的化合物。用于本发明的另一类抗焦虑剂为具有毒蕈碱样胆碱能活性的化合物。该类中合适的化合物包括ml毒蕈碱样胆碱能受体拮抗剂，如在欧洲专利说明书0709093，0709094和0773021以及国际专利说明书WO 96/12711中所述的化合物。用于本发明的另一类抗焦虑剂为作用在离子通道上的化合物。该类合适的化合物包括卡马西平、拉莫三嗪和丙戊酸酯以及它们药学上适用的盐。
因此，又一方面，本发明提供了含有本发明化合物和抗抑郁剂或抗焦虑剂以及至少一种药学上适用载体或赋形剂的药用组合物。
用于与本发明化合物并用的合适的抗精神病药包括吩噻嗪、硫葸、杂环的二苯氮、丙基苯基酮、二苯基丁基哌啶和吲哚酮类抗精神病药。合适的吩噻嗪类实例包括氯丙嗪、美索达嗪、硫利达嗪、醋奋乃静、氟奋乃静、奋乃静和三氟拉嗪。合适的硫葸类实例包括氯普噻吨和替沃噻吨。合适的二苯氮类实例包括氯氮平和olanzapine。丙基苯基酮类的实例为氟哌啶醇。二苯基丁基哌啶类的实例为匹莫齐特。吲哚酮类的实例为吗茚酮。其他抗精神病药包括洛沙平、舒必利和risperidone。人们明白，当与本发明化合物并用时，抗精神病药可以为药学上适用盐的形式，例如氯丙嗪盐酸盐、美索达嗪苯磺酸盐、硫利达嗪盐酸盐、醋奋乃静马来酸盐、氟奋乃静盐酸盐(庚酸盐、癸酸盐)、三氟拉嗪盐酸盐、替沃噻吨盐酸盐、氟哌啶酶癸酸盐、洛沙平琥珀酸盐和吗茚酮盐酸盐。奋乃静、氯普噻吨、氯氮平、olanzapine、氟哌啶醇、匹莫齐特和risperidone通常应用非盐的形式。
用于与本发明化合物并用的其他抗精神病药包括多巴胺受体拮抗剂，尤其是D2、D3和D4多巴胺受体拮抗剂，以及毒蕈碱样ml受体激动剂，D3多巴胺受体拮抗剂的实例是化合物PNU-99194A。D4多巴胺受体拮抗剂的实例是PNU-101387。毒蕈碱样ml受体激动剂的实例是xanomeline。
用于与本发明化合物并用的另一类抗精神病药为5-HT2A受体拮抗剂，其实例包括MDL 100907和fananserin。用于与本发明化合物并用的还有5-羟色胺多巴胺拮抗剂(SDAs)，据信它们合并了5-HT2A和多巴胺受体拮抗剂的活性，其实例有olanzapine和ziperasidone。
因此，又一方面，本发明提供了含有本发明化合物和抗精神病药以及至少一种药学上适用载体或赋形剂的药用组合物。
可以给患者同时施用，按序施用或并用本发明化合物和其他药学上有效的药物。人们明白，当并用本发明药物时，本发明化合物和其他药学上有效的药物可以在同一药学上适用的载体中，并同时施用。它们也可以在各自的药用载体中(如通常的口服剂型)，并同时施用。术语“并用”还指提供独立的剂型并且按序施用的情况。
本发明化合物的药理学研究提供了以低的剂量应用它们的可能，从而可将不需要的副作用的危害减至最小。
以能提供最佳药学效果的剂量将本发明化合物给需要所述治疗的病体(动物和人)施用。人们明白，用于任一特定用途所需的剂量将随病体而改变，不仅与选择的具体化合物或组合物有关而且也与给药途径、需治疗疾病的性质、病体的年龄和病情、与病体并用的药物或特殊的膳食以及与熟悉本技术领域专业人员了解的其他因素有关，需要的合适剂量最后应由主治医生决定。
在治疗与速激肽过量有关的疾病中，合适的剂量一般为约0.001～50mg/kg体重/天，可以单次或多次剂量。优选的剂量为约0.01～25mg/kg体重/天，更好约0.05～10mg/kg体重/天。例如，在治疗有关疼痛感觉的神经递质疾病中，合适的剂量为约0.001～25mg/kg体重/天，优选0.005～10mg/kg体重/天，尤其为约0.01～5mg/kg体重/天。化合物可以按每天1～4次施用，优选每天施用1次或2次。在治疗呕吐中，合适的剂量为约0.001～10mg/kg体重/天，优选0.005～5mg/kg体重/天，尤其为约0.01～1mg/kg体重/天。化合物可以按每天1～4次施用，优选每天施用1次或2次。在治疗或预防中枢神经系统的疾病中，合适的剂量为约0.001～10mg/kg体重/天，优选约0.005～5mg/kg体重/天，尤其为约0.01～1mg/kg体重/天。化合物可以按每天1～4次施用，优选每天施用1或2次。
人们明白，用于任一治疗所需的本发明化合物的剂量不仅将随所选用的具体化合物而改变，而且也与给药的途径、需治疗疾病的性质、病体的年龄和病情有关，并且最终应由主治医生决定。
本发明的药用组合物可以药用制剂(例如以固体、半固体或液体)形式应用，该组合物含有一个或多个作为活性成分的本发明化合物以及适用于外用、经肠或非经胃肠道给药的有机或无机载体或赋形剂。可以将活性成分与例如药学上常用的无毒的载体混合，以便制成片剂、小丸剂、胶囊剂、栓剂、溶液剂、乳剂、混悬液剂以及适用的任一其他剂型。可以应用的载体有水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯树胶、明胶、甘露糖醇、淀粉糊、三硅酸镁、滑石、玉米淀粉、角蛋白、胶态硅酸、马铃薯淀粉、尿素和适用于制备固体、半固体和液体剂型的其他载体，此外还可应用辅助剂、稳定剂、增稠剂、着色剂和香料。在药用组合物中含有的有效化合物其剂量对所述疾病的突起或病症应能足以产生所需的效果。
为了制备固体剂型(如片剂)，将活性成分与药用载体如常用的制片成分(例如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙或树胶)和其他药用稀释剂(如水)混合，得到含有本发明化合物或其药学上适用的无毒盐均匀混合物的固体预制剂组合物。在提到该预制剂组合物是均匀时，是指活性成分均匀地分布在该组合物中，因此该组合物可以容易地再分成同样有效的单位剂量形式如片剂、小丸剂和胶囊剂。可以将该固体预制剂组合物再分成以上所述含有约0.1～500mg本发明活性成分的单位剂量形式。可以将该新组合物的片剂或小丸剂进行包衣，或者再进行调合以便提供具有长效作用的剂型。例如，片剂或小丸剂可以构成内层剂量成分或外层剂量成分，将外层剂量成分包在内层剂量成分的外面。两层之间可以用能抗在胃中崩解的肠衣层隔开，并允许内层成分完整进入十二指肠以延缓释放。许多材料均可以用作为该肠衣层或包衣，所述材料包括多种聚合酸和聚合酸的混合物以及虫胶、十六烷醇和醋酸纤维素。
口服或经注射给药的本发明新组合物的液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆剂、水或油混悬液、乳剂(以适用的油(如棉子油、芝麻油、椰油或花生油)或适用于静脉的增溶或者乳化剂制得)、酏剂和类似的药用剂型。水混悬液剂合适的分散剂或混悬剂包括合成或天然的胶如西黄蓍胶、阿拉伯树胶、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。
口吸入剂或鼻吸入剂组合物包括在药学上适用的水或有机溶剂或它们的混合液中的溶液剂或混悬浮剂以及粉剂。液体或固体组合物可以含有如以上所述合适的药学上适用的赋形剂。该组合物优选经口或鼻呼吸道途径给药，以生产局部或全身的效果。在灭菌的药学上适用溶剂中的组合物可以用惰性气体喷入。喷入溶液可以由喷入装置直接吸入，或者该喷入装置可以与面罩，帐篷状物或脉动的正压呼吸机连接。从输送该组合物的装置中以合适的方式经口或鼻给予吸入溶液剂、混悬液剂或粉剂组合物。
为了治疗以上所述临床病症和疾病，本发明化合物可以经口服、局部给药、非经胃肠道给药、吸入喷雾剂或经直肠给予单位剂量剂型，该单位剂量剂型含有常用的无毒的药学上适用的载体、辅助剂和媒介物。这里所用的术语非经胃肠道给药包括皮下注射、静脉注射、肌内注射、胸内注射或输注。
以下面的实施例详述制备本发明多晶型物的方法。给予下面实施例的目的在于详述本发明，不应认为是对本发明范围或实质的限制。
实施例1(S)-(4-氟苯基)甘氨酸经手性合成步骤A3-(4-氟苯基)乙酰基-4-(S)-苄基-2-噁唑烷酮将装有接头、氮气进入管、温度计和磁搅拌棒的烘干的1L三颈烧瓶通氮气冲洗，并加入5.09g(33.0mmol)4-氟苯基乙酸的100ml无水乙醚溶液。该溶液冷却至-10℃并用5.60ml(40.0mmol)三乙胺处理，随后用4.30ml(35.0mmol)三甲基乙酰氯处理。立即形成白色沉淀。所得的混合物于10℃搅拌40分钟，然后冷却至-78℃。
将装有接头和磁搅拌棒的烘干的250ml圆底烧瓶通氮气冲洗，并加入5.31g(30.0mmol)4-(S)-苄基-2-噁唑烷酮的40ml无水THF溶液。该溶液在干冰/丙酮浴中搅拌10分钟，然后缓慢地加入18.8ml1.6M正丁基锂的己烷溶液。10分钟后，经套管将锂化的噁唑烷酮溶液加到三颈烧瓶内的混合物中。将得到的混合物移出冷却浴，并使温度升至0℃。加入100ml饱和氯化铵水溶液使反应中止，转移到1L烧瓶中，并真空除去乙醚和THF。浓缩的混合物在300ml二氯甲烷和50ml水之间分配，并分离两层。有机层用200ml 2N稀盐酸、300ml饱和碳酸氢钠的水溶液洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。在400g硅胶上快速层析，用3∶2v/v己烷/乙醚作为洗脱剂，得到8.95g油状物，该油状物在静置中慢慢固化。用10∶1己烷/乙醚重结晶，得到7.89g(83％)标题化合物，为白色固体，mp64～66℃。质谱(FAB)m/Z 314(M+H，100％)，177(M-ArCH2CO+H，85％).1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ2.76(dd，1H，J＝13.2，9.2)，3.26(dd，J＝13.2，3.2)，4.16-4.34(m，4H)，4.65-4.70(m，1H)，7.02-7.33(m，9H).元素分析计算值，C18H16FNO3C，69.00；H，5.15；N，4.47；F，6.06；测定值C，68.86；H，5.14；N，4.48；F，6.08.步骤B3-((S)-叠氮基-(4-氟苯基))乙酰基-4-(S)-苄基-2-噁唑烷酮将装有接头、氮气进入管、温度计和磁搅拌棒的烘干的1L三颈烧瓶通氮气冲洗，并加入58.0ml 1M二(三甲基甲硅烷基)氨基化钾的甲苯溶液和85ml THF，冷却至-78℃。将装有接头和磁搅拌棒的烘干的250ml园底烧瓶通氮气中洗，并加入7.20g(23.0mmol)3-(4-氟苯基)乙酰基-4-(S)-苄基-2-噁唑烷酮的40ml THF溶液。该酰基噁唑烷酮溶液在干冰/丙酮浴中搅拌10分钟，然后以便混合物的内温保持低于-70℃速率经套管转移到二(三甲基甲硅烷基)氨基化钾溶液中。酰基噁唑烷酮烧瓶用15ml THF清洗，清洗液经套管加到反应混合物中，所得的混合物于-78℃搅拌30分钟。将装有接头和磁搅拌棒的烘干的250ml园底烧瓶通氮气中洗，并加入10.89g(35.0mmol)2，4，6-三异丙基苯基磺酰基叠氮化物的40ml THF溶液。该叠氮化物溶液在干冰/丙酮浴中搅拌10分钟，然后以使混合物的内温保持低于-70℃的速率经套管转移到反应混合物中。2分钟后，加入6.0ml冰醋酸使反应中止，移去冷却浴，混合物于室温搅拌18小时。中止的反应混合物在300ml乙酸乙酯和300ml 50％饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机层，经硫酸镁干燥并真空浓缩。在500g硅胶上快速层析，用2∶1v/v，然后用1∶1v/v己烷/二氯甲烷作为洗脱剂，得到5.45g(67％)标题化合物，为油状物。红外光谱(净样，cm-1)2104，1781，17021H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ2.86(dd，1H，J＝13.2，9.6)，3.40(dd，1H，J＝13.2，3.2)，4.09-4.19(m，2H)，4.62-4.68(m，1H)，6.14(s，1H)，7.07-7.47(m，9H) 元素分析计算值，C18H15FN4O3C，61.01；H，4.27；N，15.81；F，5.36；测定值C，60.99；H，4.19；N，15.80；F，5.34.步骤C(S)-叠氮基-(4-氟苯基)乙酸5.40g(15.2mmol)3-((S)-叠氮基-(4-氟苯基)乙酰基-4-(S)-苄基-2-噁唑烷酮的200ml 3∶1v/v THF/水溶液在冰浴中搅拌10分钟。将1.28g(30.4mmol)氢氧化锂一水合物一次加入，所得的混合物在冷却下搅拌30分钟。反应混合物在100ml二氯甲烷和100ml 25％饱和碳酸氢钠水溶液之间分配，并分离两层。水层用2×100ml二氯甲烷洗涤，并用2N稀盐酸酸化至pH2。得到的混合物用2×100ml乙酸乙酯萃取；合并萃取液，用50ml饱和氯化钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到2.30g(77％)标题化合物，为油状物，该油状物不需进一步纯化即可应用于下一步。红外光谱(净样，cm-1)2111，1724。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ5.06(s，1H)，7.08-7.45(m，4H)，8.75(br s，1H)。步骤D(S)-(4-氟苯基)甘氨酸2.30g(11.8mmol)(S)-叠氮基-(4-氟苯基)乙酸、250mg 10％钯-炭催化剂和160ml 3∶1v/v水/乙酸的混合物在氢气氛下搅拌18小时。反应混合物经硅藻土过滤，烧瓶和滤饼用约1L 3∶1v/v水/乙酸充分洗涤。滤液真空浓缩至约50ml体积。加入300ml甲苯，混合物经浓缩得到固体。将该固体混悬在1∶1v/v甲醇/乙醚中，过滤和干燥，得到1.99g(100％)标题化合物。1H-NMR(400MHz，D2O+NaOD)δ3.97(s，1H)，6.77(app t，2H，J＝8.8)，7.01(appt，2H，J＝5.6).拆分步骤A′4-氟苯基乙酰氯于40℃ 150g(0.974mol)4-氟苯基乙酸和1ml N，N-二甲基甲酰胺的500ml甲苯溶液用20ml亚硫酰氯处理，并加热至40℃。在1.5小时内滴加另外的61.2ml亚硫酰氯。加完后将该溶液于50℃加热1小时，真空除去溶剂，残余的油状物在减压(1.5mmHg)下蒸馏，得到150.4g(89.5％)标题化合物，bp＝68-70℃。步骤B′2-溴-2-(4-氟)苯基乙酸甲基酯150.4g(0.872mol)4-氟苯基乙酰氯和174.5g(1.09mol)溴的混合物用石英灯于40～50℃照射5小时。将反应混合物滴加到400ml甲醇中，该溶液搅拌16小时。真空除去溶剂，残余的油状物在减压(1.5mmHg)下蒸馏，得到198.5g(92％)标题化合物，bp＝106-110℃。步骤C′甲基(±)-(4-氟苯基)甘氨酸24.7g(0.1mol)2-溴-2-(4-氟)苯基乙酸甲基酯和2.28g(0.01mol)苄基三乙基氯化铵的25ml甲醇溶液用6.8g(0.105mol)叠氮化钠处理，所得的混合物于室温搅拌20小时。将反应混合物过滤；滤液用50ml甲醇稀释，并在0.5g 10％Pd/C存在下于50psi氢化1小时。溶液经过滤并真空除去溶剂。残余物在10％碳酸钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。有机相用水、饱和氯化钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到9.8g标题化合物，为油状物。步骤D′(S)-(4-氟苯基)甘氨酸甲基酯58.4g(±)-4-氟甲基甘氨酸甲基酯的110ml 7∶1v/v乙醇/水溶液与28.6g(0.0799mol)O，O′-(+)-二苯甲酰基酒石酸((+)-DBT)(28.6g，0.0799mol)的110ml 7∶1乙醇/水溶液混合，所得的溶液于室温下老化。结晶完成后加入乙酸乙酯(220ml)，所得的混合物冷却至-20℃并过滤，得到32.4g(S)-(4-氟苯基)甘氨酸甲基酯，(+)-DBT盐(ee＝93.2％)。将母液真空浓缩，通过在乙酸乙酯和碳酸钠水溶液之间分配释出游离碱。所得游离碱的110ml 7∶1v/v乙醇/水溶液与28.6g(0.0799mol)O，O′-(-)-二苯甲酰基酒石酸((-)-DBT)(28.6g，0.0799mol)的110ml 7∶1v/v乙醇∶水溶液混合，所得的溶液于室温下保持。结晶完成后加入乙酸乙酯(220ml)，所得的混合物冷却至-20℃并过滤，得到47.0g(R)-(4-氟苯基)甘氨酸甲基酯，(-)-DBT盐(ee＝75.8％)。母液再利用，并加入(+)-DBT，得到第二批7.4g(S)-(4-氟苯基)甘氨酸酯，(+)-DBT盐(ee＝96.4％)。两批(S)-氨基酯(39.8g)在200ml 7∶1v/v乙醇/水中混合，加热30分钟并冷至室温。加入乙酸乙酯，冷却并过滤，得到31.7g(S)-(4-氟苯基)甘氨酸酯，(+)-DBT盐(ee＞98％)。经手性HPLC测定对映体过量百分率(ee％)(CrownpakCR(+)5％ MeOH的HClO4水溶液，pH2，1.5ml/分，40℃，200nm)。17.5g(S)-(4-氟苯基)甘氨酸酯，(+)-DBT盐和32ml 5.5N HCl(32ml)的混合物加热回流1.5小时。将反应混合物真空浓缩，残余物溶于40ml水中。水溶液用3×30ml乙酸乙酯洗涤，并分离两层。水层的pH用氢氧化铵调至7，并过滤析出的固体，得到7.4g标题化合物(ee＝98.8％)。
实施例23-(S)-(4-氟苯基)-4-苄基-2-吗啉酮步骤AN-苄基(S)-(4-氟苯基)甘氨酸于0℃将1.87g(11.05mmol)(S)-(4-氟苯基)甘氨酸和1.12ml(11.1mmol)苯甲醛在11.1ml 1N氢氧化钠水溶液和11ml甲醇中的溶液用165mg(4.4mmol)硼氢化钠处理。移去冷却浴，所得的混合物于室温搅拌30分钟。向反应混合物中加入第二份苯甲醛(1.12ml(11.1mmol))和硼氢化钠165mg(4.4mmol)，并连续搅拌1.5小时。反应混合物在100ml乙醚和50ml水之间分配，并分离两层。分出水层并过滤除去少量不溶物。滤液用2N稀盐酸酸化至pH5，过滤出析出的固体，用水，然后用乙醚充分清洗，得到1.95g标题化合物。1H-NMR(400MHz，D2O+NaOD)δ3.33(AB q，2H，J＝8.4)，3.85(s，1H)，6.79-7.16(m，4H).步骤B3-(S)-(4-氟苯基)-4-苄基-2-吗啉酮1.95g(7.5mmol)N-苄基(S)-(4-氟苯基)甘氨酸、3.90ml(22.5mmol)N，N-二异丙基乙基胺、6.50ml(75.0mmol)1，2-二溴乙烷和40ml N，N-二甲基甲酰胺的混合物于100℃搅拌20小时(温热时所有固体溶解)。将反应混合物冷却并真空浓缩。残余物在250ml乙醚和100ml 0.5N硫酸氢钾溶液之间分配，并分离两层。有机层用100ml饱和碳酸氢钠水溶液，3×150ml水洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。在125g硅胶上快速层析，用3∶1v/v己烷/乙醚作为洗脱剂，得到1.58g(74％)标题化合物，为油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.65(dt，1H，J＝3.2，12.8)，3.00(dt，1H，J＝12.8，2.8)，3.16(d，1H，J＝13.6)，3.76(d，1H，J＝13.6)，4.24(s，1H)，4.37(dt，1H，J＝13.2，3.2)，4.54(dt，1H，J＝2.8，13.2)，7.07-7.56(m，9H).
实施例32-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-苄基吗啉将2.67g(10.0mmol)3-(R)-(4-氟)-苯基-4-苄基-2-吗啉酮的40ml无水THF溶液冷却至-78℃。该冷溶液用12.5ml1.0M L-Selectride的THF溶液处理，保持内部反应温度低于-70℃。所得的溶液冷却搅拌45分钟，向反应液中加入3.60ml(20.0mmol)3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氯。所得冷的黄色混合物搅拌30分钟，加入50ml饱和碳酸氢钠水溶液中止反应。中止反应的混合物在300ml乙醚和50ml水之间分配，并分离两层。有机层经硫酸镁干燥。水层用300ml乙醚萃取；将萃取液干燥并与原有的有机层合并。合并的有机层真空浓缩。在150g硅胶上快速层析，用37∶3 v/v己烷/乙醚作为洗脱剂，得到标题化合物，为固体(产率83％)。
质谱(FAB)m/Z 528(M+H，25％)，270(100％).1H NMR(CDCl3，400MHz，ppm)δ2.50(dt，J＝3.2，12.0，1H)，2.96(app d，J＝12.0，1H)，2.98(d，J＝13.6，1H)，3.74-3.78(m，1H)，3.81(d，J＝2.8，1H)，3.94(d，J＝13.6，1H)，4.19(dt，J＝2.0，12.0)，6.20(d，J＝2.8，1H)，6.99(t，J＝8.4，2H)，7.27-7.38(m，5H)，7.52-7.56(m，2H)，8.09(s，1H)，8.46(s，2H).
实施例4二甲基二茂钛在暗处于0℃ 2.49g(10.0mmol)二氯二茂钛的50ml乙醚溶液用17.5ml 1.4M甲基锂的乙醚溶液处理，同时保持内温低于5℃。所得的黄/橙色混合物于室温搅拌30分钟，缓慢地加入25g冰使反应中止。中止反应的混合物用50ml乙醚和25ml水稀释，并分离两层。有机层经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到2.03g(98％)标题化合物，为对光敏感的固体。二甲基二茂钛以甲苯溶液于0℃可贮存至少2周不会出现化学降解。1H NMR(CDCl3，200 MHz，ppm)δ-0.15(s，6H)，6.06(s，10H)。
实施例52-(R)-(1-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙烯氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-苄基吗啉4.9mmol 2-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-苄基吗啉和2.50g(12.0mmol)二甲基二茂钛的35ml 1∶1v/v THF/甲苯溶液在油浴中于80℃搅拌16小时。将反应混合物冷却并真空浓缩。在150g硅胶上快速层析，用3∶1v/v己烷/二氯甲烷作为洗脱剂，得到标题化合物，为固体(产率60％)。
质谱(FAB)m/Z 526(M+H，75％)，270(100％).1H NMR(CDCl3，400 MHz，ppm)δ2.42(dt，J＝3.6，12.0)，2.90(app d，J＝12.0，1H)，2.91(d，J＝13.6，1H)，3.62-3.66(m，1H)，3.72(d，J＝2.6)，3.94(d，J＝13.6，1H)，4.09(dt，J＝2.4，12.0，1H)，4.75(d，J＝3.2，1H)，4.82(d，J＝3.2，1H)，5.32(d，J＝2.6，1H)，7.09(t，J＝8.8，2H)，7.24-7.33(m，5H)，7.58-7.62(m，2H)，7.80(s，1H)，7.90(s，2H).
实施例62-(R)-(1-(S)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉和2-(S)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉1.83g(3.5mmol)2-(R)-(1-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙烯氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-苄基吗啉和800mg5％铑-氧化铝催化剂在40ml无水乙醇中的混合物于氢气氛下搅拌24小时。将催化剂经硅藻土垫过滤；反应烧瓶和滤饼用200ml乙酸乙酯清洗。滤液真空浓缩，残余物在高真空(1mmHg，室温)下用泵抽干。
残余物再溶于40ml异丙醇；加入800mg 10％钯-炭催化剂，所得的混合物在氢气氛下搅拌24小时。将催化剂经硅藻土垫过滤；反应烧瓶和滤饼用200ml乙酸乙酯清洗。滤液真空浓缩。在50g硅胶上快速层析，用2∶1v/v己烷/乙醚，然后用3∶2v/v乙醚/己烷作为洗脱剂，得到283mg 2-(R)-(1-(S)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉和763mg 2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉，二者均为油状物(总产率为68％)。对于2-(R)-(1-(S)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉质谱(FAB)m/Z 438(M+H，65％)，180(100％).1H NMR(CDCl3，400MHz，ppm)δ1.47(d，J＝6.8，3H)，1.87(br s，1H)，3.03(dd，J＝2.8，12.8)，3.17(dt，J＝4.0，12.4，1H)，3.43-3.47(m，1H)，3.80(dt，J＝3.2，11.6)，4.10(d，J＝2.2，1H)，4.70(q，J＝6.8，1H)，4.87(d，J＝2.2，1H)，6.99-7.03(m，2H)，7.23-7.27(m，2H)，7.63(s，2H)，7.66(s，1H)。对于2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉质谱(FAB)m/Z 438(M+H，75％)，180(100％).1H NMR(CDCl3，400MHz，ppm)δ1.16(d，J＝6.8)，1.80(br s，1H)，3.13(dd，J＝3.2，12.4)，3.23(dt，J＝3.6，12.4)，3.63(dd，J＝2.4，11.2)，4.01(d，J＝2.4，1H)，4.13(dt，J＝3.2，12.0)，4.42(d，J＝2.4，1H)，4.19(q，J＝6.8，1H)，7.04-7.09(m，2H)，7.27-7.40(m，4H)，7.73(s，1H).
实施例72-(R)-( 1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1，2，4-三唑)甲基吗啉步骤AN-甲基羧基-2-氯乙脒腙(chloroacetamidrazone)5.0g(66.2mmol)氯乙腈的35ml无水甲醇溶液冷却至0℃，并用0.105g(1.9mmol)甲醇钠处理。移去冰浴，混合物于室温搅拌30分钟。向反应液中加0.110ml(1.9mmol)乙酸，再加5.8g(64.9mmol)肼羧酸甲酯。于室温搅拌30分钟后，混悬液真空浓缩，并在高真空下放置过夜，得到10.5g(98％)黄色粉末，一部分应用于以下步骤C中。步骤B2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(2-(N-甲基羧基-乙脒腙)吗啉945mg(2.3mmol)(2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基吗啉、447mg(2.7mmol)N-甲基羧基-2-氯-乙脒腙和0.78ml(4.5mmol)N，N-二异丙基乙基胺的17ml乙腈溶液于室温搅拌20小时。反应液真空浓缩，残余物在50ml二氯甲烷和25ml水之间分配。分离有机层，经硫酸镁干燥并真空浓缩。在50g硅胶上快速层析，用50∶1∶0.1二氯甲烷/甲醇/氯氧化铵作为洗脱剂，得到1.12g(90％)标题化合物，为泡沫状物。步骤C2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1，2，4-三唑)甲基吗啉1.01g(1.8mmol)2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(2-(N-甲基羧基乙脒腙)吗啉的15ml二甲苯溶液加热回流2小时。反应液冷却并真空浓缩。在50g硅胶上快速层析，用50∶1∶0.1二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵作为洗脱剂，得到标题化合物，为固体(产率79％)。质谱(FAB)m/Z535(M+H，100％)，277(60％).1H NMR(CDCl3+CD3OD，400MHz，ppm)δ1.48(d，J＝6.8，3H)，2.52(app t，J＝10.4，1H)，2.85-2.88(m，2H)，3.47(d，J＝2.8，1H)，3.63(d，J＝14.4，1H)，3.70(dd，J＝2.0，11.6，1H)，4.24(app t，J＝10.8，1H)，4.35(d，J＝2.8，1H)，4.91(q，J＝6.8，1H)，7.07(appt，J＝8.4，2H)，7.15(s2H)，7.37-7.40(m，2H)，7.65(s，1H)。元素分析计算值，C23H21F7N4O3C，51.69；H，3.96；N，10.48；F，24.88.测定值C，51.74；H，4.04；N，10.50；F，24.59。随后用该方法制得的样品经鉴定为II型多晶型物。它的特征在于，粉末X-射线衍射图关键反射大约在12.6，16.7，17.1，17.2，18.0，20.1，20.6，21.1，22.8，23.9，和24.8°(2θ)。
实施例8二甲基二茂钛在充分搅拌下在1小时内向冷却至-5℃(内温)的二氯二茂钛(Cp2TiCl2)(249g，1.00mol)的甲苯(2.75L)泥浆状物中加入甲基氯化镁(CH3MgCl)(750ml，3.0M THF溶液，2.25mol)，同时保持温度低于8℃。所得的橙黄色泥浆状物于0-5℃持续1小时，或直到不溶的紫红色Cp2TiCl2溶解。进行核磁共振分析以确认反应完全(见下面)，然后反应液倒入6％氯化铵水溶液(700ml)中，同时温度保持在0～5℃。分离两层，有机相用冷水(3×575ml)和盐水(575ml)洗涤，然后用Na2SO4(220g)干燥。经过滤的有机层蒸发至1.5kg(保持内温25℃或更低)。通过1H NMR测定的重量％表明该溶液含有187g产物(90％，12.5重量％的甲苯/THF溶液)。一般，该物质的纯度大于95％，起始物质和一甲基中间物仅为痕量。该溶液可以进一步浓缩到1.0kg，得到18重量％的甲苯溶液，可作较简易的分析。然而，存在少量THF可增加化合物的稳定性。该物质在封闭容器内于0℃在氮气氛下贮存。1H NMRCp2Ti(CH3)2δ6.05(s，10H)，-0.05(s，6H).Cp2TiCl(CH3)δ6.22(s，10H)，0.80(s，3H).Cp2TiCl2δ6.56(s，10H).13C NMR Cp2Ti(CH3)2δ113.20(Cp2)，45.77((CH3)2).Cp2TiClCH3δ115.86(Cp2)，50.37(CH3).Cp2TiCl2δ120.18.
实施例94-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸向焦亚硫酸钠(5.76kg，30.3mol)的水(50L)溶液中加入4-氟苯甲醛(7.0kg，56.4mol)，并用甲醇(5L)清洗。加入氰化钠(2.83kg，57.7mol)，并用水(3L)清洗。反应物于25℃搅拌15分钟，然后冷却至8℃。加入苄基胺(6.04kg，56.4mol)的甲醇(11L)溶液。反应物温至34℃并搅拌2小时。加水(23L)并且用乙酸异丙基酯(30L)萃取。有机层用水(2×10L)，随后用饱和氯化钠水溶液(10L)洗涤，然后减压蒸发得到腈化合物。将其溶于二甲基亚砜(50L)中。加入碳酸钾(3.27kg，23.7mol)，并用二甲基亚砜(6L)清洗。加入过氧化氢水溶液(30％，9.43L，83.2mol)，并将其于室温搅拌过夜。用水(120L)稀释并冷至13℃。反应物经过滤，滤饼用水(50L)洗涤。所得的酰胺化合物在滤器上干燥，然后在工业甲基化酒精(38L)中打成泥浆。向其中加入颗粒状氯氧化钠(3.27kg，81.75mol)的水(11L)溶液，并用工业甲基化酒精(6L)清洗。
加热回流(80℃)3.5小时后，将反应物蒸馏至小的体积，同时蒸除工业甲基化酒精。用水(100L)稀释，并用乙酸异丙基酯(30L)萃取。分离两层，水层用浓盐酸酸化至pH 5～6。将析出的固体过滤并用水(2×10L)洗涤，然后收集并真空干燥，得到12.3kg(基于4-氟苯甲醛计算产率为84％)4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸。
实施例104-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸甲酯盐酸盐4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸(12.2kg，47.1mol)在甲醇(37L)中打成泥浆状物，然后将氯化氢气体通过混合物。所得的泥浆于35～45℃搅拌3小时，然后蒸馏浓缩至30～35L。加入甲基-叔丁基醚(20L)，并加入4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸甲酯盐酸盐晶种。晶床形成后，加入甲基-叔丁基醚(20L)。泥浆状物持续1小时，然后过滤。滤饼用甲基-叔丁基醚∶甲醇(95∶5，8.0L)洗涤，然后于30℃真空干燥，得到12.2kg(产率84％)4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸甲酯盐酸盐。
实施例11α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯向10％钯-炭(1.2kg)在异丙醇(50L)的泥浆状物中加入4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸甲酯盐酸盐(12.2kg，39.4mol)。加入甲酸铵(5.0kg，79.4mol)，并将其加热至50℃。用HPLC监测反应的进度。反应物通过Hyflo-Supercel过滤，滤饼用异丙醇(25L)洗涤。滤液蒸发至小的体积并用乙酸异丙基酯(50L)洗涤。残余物溶于异丙基乙酸酯(30L)中，并用5％磷酸钾(40L)，随后用饱和氯化钠水溶液(10L)洗涤。将溶液真空蒸发得到5.79kg(产率87％)外消旋的α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯。HPLC条件-色谱柱ZorbaxRx-C8，25cm×4.6mm；柱温40℃；流动相乙腈0.1％磷酸水溶液(70∶30v/v)；流速1ml/分；检测器；UV 220nm；大约的保留时间α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯2.2分钟；4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸甲酯2.6分钟。1小时后如果剩留下未反应的4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]-苯乙酸甲酯(＞2％)，可以第2次加入10％钯-炭(300g)在异丙醇(2.0L)中打成泥浆，随后加入甲酸铵(1.0kg)。再继续加热直至反应完全。
实施例12(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸将外消旋的α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯(3.32kg，18.2mol)的96％乙醇(5L)溶液过滤，然后向其中加入水(500ml)。再加入二-O-苯甲酰基-D-酒石酸(DBT，1.32kg，3.7mol)的水∶乙醇(1∶7，2.86L)。使结晶混合物冷却至5℃并持续1.5小时。过滤收集产物，用水∶乙醇(1∶7，1.1L)洗涤，空气干燥，然后于50℃真空干燥，得到1.91kg α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯，DBT盐(95.8％ee)。
经减压蒸发从液体中除去溶剂(6.6L)。加入苯甲醛(120ml)，将该溶液搅拌并于50℃加热4小时。过滤溶液，固体用∶乙醇(1∶7，2×150ml)洗涤(手性HPLC显示滤液含有外消旋的α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯)。向滤液中加入二-O-苯甲酰基-D-酒石酸(439g，1.23mol)的水∶乙醇(1∶7，960ml)溶液，然后冷却至5℃并持续1.5小时。过滤收集产物，用水∶乙醇(1∶7，2×1.1L)洗涤，空气干燥，然后于50℃真空干燥，得到1.05kg α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯，DBT盐(95.4％ee)。α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯DBT盐的合并产量为2.96kg(95％ee)。经拆分的α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯，DBT盐在甲基-叔丁基醚(5L)和5.5M盐酸(6.2L)之间分配。水相用甲基-叔丁基醚(5L)洗涤，然后过滤。
α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯DBT盐(2899g，＞95％ee)在5.5M盐酸(6.2L)和上面第2份甲基-叔丁基醚萃取液之间分配。水相用甲基-叔丁基醚(5L)和滤液再萃取。将含水滤液合并，经缓慢蒸除溶剂而浓缩。反应物经冷却并于5℃持续2小时。过滤收集产物并空气干燥30分钟，得到4.055kg(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸，盐酸盐(98.7％ee)。(1)从5.5M盐酸(5L)中重结晶，得到(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸盐酸盐，为湿的滤饼(3.28kg，99.8％ ee)。该湿的滤饼于水(12L)和浓盐酸(375ml)的混合液中加热。加入浓氨水(1.2L)和水(4L)，然后反应物冷却至20℃并持续过夜。过滤收集产物，用水(6×4L)洗涤，空气干燥，然后于50℃真空干燥24小时，得到1.905kg(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸游离碱(＞99.7％ ee，基于外消旋的α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯计算产率为48％)。手性HPLC条件色谱柱Crownpak CR(+)，15cm×4.5nm；柱温40℃；流动相pH2.0高氯酸水溶液∶甲醇(95∶5v/v)；流速1ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间(R)-α-氨基-4-氟苯乙酸2.9分钟；(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸5.6分钟；(R)-α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯7.7分钟；(S)α-氨基-4-氟苯乙酸甲酯14.0分钟。
实施例13(S)-4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸钠盐将(S)-α-氨基-4-氟苯乙酸(1.00kg，5.91mol)在稀氢氧化钠(1M，5.91L)中的溶液过滤，并将其加到10％钯-炭(25g)中。加入苯甲醛(941g，8.87mol)溶液，在氢气氛(50psi)下将其搅拌4小时。通过过滤，滤液在真空下蒸发得到残余物，再用乙醇(2×3L)洗涤。残余物在沸腾的乙醇(1.5L)中打成泥浆，再冷却至15℃。将泥浆过滤，滤饼用冷乙醇(2×500ml)洗涤，再于55℃真空干燥，得到1.83kg(产率92％)(S)-4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸钠盐。
实施例14(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮盐酸盐向1，2-二溴乙烷(4.85kg，25.8mol)和二异丙基乙基胺(419g，3.25mol)的二甲基甲酰胺(14.7L)溶液中加入(S)-4-氟-α-[(苯基甲基)氨基]苯乙酸钠盐(850g，3.02mol)。反应物于90℃加热5小时，再经真空蒸馏浓缩除去二甲基甲酰胺。残余物在乙酸乙酯(3.2L)和水(3.2L)之间分配。水层用第2份乙酸乙酯(2.0L)萃取。溶液经硫酸钠干燥，然后通过二氧化硅垫(1.6kg)过滤。二氧化硅垫用乙酸乙酯(8.0L)洗涤，并将滤液真空蒸发。所得的残余物溶于异丙醇(1.35L)和乙酸乙酯(400ml)的混合液中，再过滤。加氯化氢气体的乙酸乙酯(2.44M，1.34L)溶液，泥浆状物在冰浴中保持1小时。将泥浆状物过滤，滤饼用1∶1异丙醇∶乙酸乙酯(600ml)，随后用甲基-叔丁基醚(600ml)洗涤。该固体经真空干燥得到749g(产率77％，98％ee)(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮盐酸盐。手性HPLC条件色谱柱手性(D)-二硝基-苯甲酰苯基-甘氨酸(共价)正相，25cm×4.6mm；柱温35℃；流动相己烷∶乙醇(99∶1v/v)；流速1ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间(R)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮16分钟；(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮17分钟。
实施例153-(4-氟苯基)-4-苯基甲基-2-吗啉酮的外消旋作用/拆分于室温向3-(4-氟苯基)-4-苯基甲基-2-吗啉酮(即N-苄基-4-氟苯基-1，4-噁嗪-2-酮)(10g)的乙酸异丙基酯(110ml)溶液中加入(-)-3-溴樟脑-8-磺酸((-)-3BCS)(12g)的乙腈(24ml)溶液。2～3分钟后开始结晶，泥浆状物于室温搅拌1小时。加入三氟乙酸(7ml)，混合物于65℃搅拌3天。将混合物冷却至0～5℃，持续1小时，收集固体，用异丙基乙酸酯洗涤，并于40℃真空干燥，得到N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(-)-3BCS盐产量17.24g，(S)异构体ee为98.6％。剩余液体的手性组分经测定为79％(R)，21％(S)。该液体于65℃搅拌3天，然后冷却至0～5℃。收集固体，用乙酸异丙基酯洗涤并真空干燥，得到又一批量N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(-)-3BCS盐产量0.84g，(S)异构体ee为98.6％。剩余液体的手性组分经测定为64％(R)，36％(S)。将液体真空蒸发，残余物溶于含有三氟乙酸(1ml)的乙酸异丙基酯(20ml)中，并于65℃搅拌20小时。混合物冷却至0～5℃保持1小时，并收集固体，用异丙基乙酸酯洗涤并真空干燥，得到又一批量N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(-)-3BCS盐产量2.2g，(S)异构体ee为99.2％。(-)-3BCS盐的总重量20.28g，产率97％。保留(-)-3BCS盐的样品(0.5g)，剩余部分转变成游离碱。该盐在乙酸异丙基酯(50ml)和含有0.88氨溶液(3ml)的水(100ml)之间分配。分离两层，水相用乙酸异丙基酯(25ml)萃取。合并的有机相用水(25ml)洗涤。将有机相浓缩至残余物，并用乙酸异丙基酯洗涤，得到3-(S)-(4-氟苯基)-4-苯基甲基-2-吗啉酮(即N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮)，为游离碱产量8.7g，回收率93％，(S)异构体ee为98.4％。
基本上按照前面的方法，但应用以下的量和反应条件，制备又一批量N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(-)-3 BCS盐N-苄基-3-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(外消旋物)(4.96g)；(-)-3 BCS的乙腈溶液(1.85M；9.4ml)；三氟乙酸(2.1ml)；和乙酸异丙基酯(55ml)。混合物于90℃搅拌6天，然后冷却至0～5℃并保持1小时。收集固体N-苄基-3-(S)-(4-氟苯基)-1，4-噁嗪-2-酮(-)-3BCS盐，并用乙酸异丙基酯(20ml)洗涤。产量9.40g(90％)；(S)异构体ee为99.6％。剩余液体的手性组分经测定为88％(R)，12％(S)。
实施例16(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯搅拌的(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮盐酸盐(2.30kg，7.15mol)的乙酸乙酯(22L)混悬液用10％碳酸氢钠水溶液(22L)处理。所得的有机溶液依次用10％碳酸氢钠水溶液(11L)和水(2×11L)洗涤，然后用4A分子筛(1L)干燥过夜。将溶液蒸发，然后用四氢呋喃(2×3L)洗涤以除去痕量的乙酸乙酯。所得的游离碱(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮溶于四氢呋喃(19L)中，并冷却至-75℃。向其中加入L-Selectride(三-仲丁基硼氢化锂，6.74L，1.06M，7.15mol)，同时保持温度低于-70℃。将反应物保持15分钟，然后加入3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氯(2.57kg，9.29mol)，同时保持温度低于-70℃。用HPLC监测反应。加入乙酸(205ml)的四氢呋喃(800ml)溶液使反应中止，将反应物温至环境温度过夜。溶液经真空浓缩，所得的油状物用己烷(36L)稀释。反应物依次用水(17L)，10％碳酸氢钠水溶液(3×8.5L)和水(2×8.5L)洗涤，然后用4A分子筛(1L)干燥过夜。反应物经HPLC分析含有2.44kg(产率65％)(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯。该批与另一批在此之前制备的(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯(0.59kg，于7L己烷中测定)合并。合并的两批溶液通过20μm滤器过滤，然后用己烷(9L)稀释。粗品(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯溶液(测定为3.03kg，5.74mol)用盐酸的乙醚溶液(9.6L，1.0M)处理，得到白色沉淀(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯盐酸盐(生成盐酸盐为了除去三-仲丁基甲硼烷残余物(来源于L-Selecreide))。过滤收集固体，用己烷(2×8L)洗涤，然后在氮气下干燥。产物的盐酸盐通过在甲苯(36L)和10％碳酸氢钠水溶液(13ml)的混合液中捣成泥浆而破碎。所得的有机溶液用10％碳酸氢钠水溶液(13L)和水(2×18L)洗涤。测定甲苯溶液含有3.00kg(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)-苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯(按面积计80％，对甲苯已修正)。甲苯溶液用4A分子筛(1L)贮藏。HPLC条件色谱柱Zorbax RX-C8，25cm×4.6mm，流动相乙腈∶0.1％磷酸水溶液(75∶25v/v)；流速1.5ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间己还原的(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮1.6分钟；(S)-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉酮3.3分钟；(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯9.2分钟。
实施例17(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉将(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯(1.60kg，3.02mol)的甲苯溶液蒸发，然后通氮气吹洗。加入四氢呋喃(1.6L)，随后加二甲基二茂钛的甲苯溶液(8.35重量％，1.73kg试剂，8.31mol)(如下所述方法制备)。反应物通氮气搅动25分钟，然后加热至80℃。于80℃在暗处持续5小时，然后冷至环境温度并保持过夜。通过真空蒸馏将该批的溶剂转换成庚烷，同时保持温度低于20℃(加入126L庚烷，同时伴有120L蒸馏液)(将反应混合物溶剂转换成庚烷，并用碳酸氢盐缓冲的过氧化物处理，以便析出钛残余物)。向冷却(7℃)的混合物中加入水(22L)、碳酸氢钠(2.0kg)，然后加30％过氧化氢(3.5L)。反应物于环境温度搅拌过夜。两相分配，同时大量的钛残余物保留在水相中。水相用庚烷(10L)反萃取，将合并的有机相过滤，用水(2×4L)洗涤，然后浓缩。粗产物通过溶于热甲醇(17L)中，冷至环境温度，然后加水(1.8L)而重结晶。该物质于0℃经过滤分离。滤饼用10％甲醇水溶液(2L，0℃)洗涤，然后固体在氮气氛下于环境温度干燥(1.45kg 94重量％纯的(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉)。
二甲基二茂钛试剂可按以下方法制备。向冷却(-8℃)的、充分搅拌的二氯二茂钛(3.35kg，13.5mol)在甲基-叔丁基醚(13.4L)的泥浆状物中加入甲基锂(590g，26.9mol)的乙醚(4.38％ w/w，13.5kg)溶液，同时保持温度低于5℃。所得的泥浆于0-5℃持续1小时。加入水(8L)使反应中止，同时保持温度为0～8℃。有机相用冷水(4×3L)洗涤。当保持温度于25℃或更低时，有机层通过蒸馏，同时加入甲苯(24L)使溶剂转换成甲苯。通过1H NMR测定的重量％表明，该溶液含有1.75kg二甲基二茂钛(产率63％，8.35重量％的甲苯溶液)。该物质在氮气氛下于0℃贮存。随后用1H NMR跟踪反应进程。(250MHz，CDCl3，在脉冲波之间延迟10秒)。
Cp2TiMe2(ppm)6.05(s，10H)，-0.05(s，6H)；Cp2TiClMe6.22(s，10H)，0.80(s，3H)；Cp2TiCl2 6.56(s，10H).
二甲基二茂钛试剂还可按以下方法制备。在10分钟内，向冷却至-5℃并充分搅拌的二氯二茂钛(Cp2TiCl2)(6.0g，24.1mmol)在甲苯(72ml)的泥浆状物中滴加甲基氯化镁(CH3MgCl)(19.8g，19.2ml，3.0M THF溶液，57.6mmol，2.4相当量)，同时保持温度低于5℃。当氯化镁析出时形成了粘稠的泥浆。所得的泥浆于0-5℃保持50分钟，期间不溶的红色Cp2TiCl2溶解。中止了反应的样品经NMR测定证明反应完成。将0.2ml样品倒入1ml水和1ml CDCl3。氯仿层直接用于NJR分析。二甲基二茂钛于6.0ppm(Cp基团)和-0.2ppm(CH3基团)处有共振谱。一甲基化合物于0.2-0.3ppm处有低磁场共振谱、二氯二茂钛于6.5ppm处有共振谱。然后在10分钟内加入10％氯化铵水溶液(20ml)使反应中止，并保持温度低于10℃。分离两层，有机相用冷水(3×20ml)和盐水(20ml)洗涤，再经Na2SO4(20g)干燥。过滤的有机层真空浓缩至大约一半体积。溶液的总重量为43g，NMR分析表明含11.2重量％二甲基二茂钛(4.8g，产率96％)。THF含量为2％，但是，少量THF存在可增加试剂的稳定性。该物质于0℃在氮气氛下贮存。
另外，二甲基二茂钛试剂可按以下方法制备。在1小时内，向冷却至-5℃(内温)并充分搅拌的二氯二茂钛(249g，1.00mol)在甲苯(2.75L)的泥浆状物中加入MeMgCl(750ml，3.0M THF溶液，2.25mol)，同时保持温度低于8℃。所得的橙黄色泥浆于0-5℃持续1小时，或直至不溶的紫红色Cp2TiCl2溶解。NMR分析证明反应己完成(见下面)，然后将其加入6％氯化铵水溶液(700ml)使反应中止，同时保持0～5℃。有机相用冷水(3×575ml)和盐水(575ml)洗涤，然后用Na2SO4(220g)干燥。过滤的有机层蒸发至1.5kg(保持内温25℃或更低)。经1H NMR测定的重量％表明，该溶液含有187g产物(90％，12.5重量％的甲苯/THF溶液)。一般，该物质的纯度大于95％，同时只伴有痕量起始物质和一甲基中间体。该溶液可以进一步浓缩至1.0kg，得到18重量％甲苯溶液，可进行较简易的分析。然而，少量THF的存在可增加该试剂的稳定性。该物质在封闭容器内于0℃在氮气氖下贮存。1H NMR Cp2TiMe2δ6.05(s，10H)，-0.05(s，6H).Cp2TiClMeδ6.22(s，10H)，0.80(s，3H).Cp2TiCl2δ6.56(s，10H).13CNMR Cp2TiMe2δ113.20(Cp2)，45.77(Me2).Cp2TiClMeδ115.86(Cp2)，50.37(Me).Cp2TiCl2δ120.18.
HPLC条件色谱柱Zorbax RX-C8，25cm×4.6mm；流动相乙腈∶0.1％磷酸水溶液(65∶35 v/v)；流速1.5ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉17.2分钟；(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)-苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯18.9分钟。
实施例18(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉含有2.99kg(5.67mol)(2R-顺式)-3，5-二(三氟甲基)苯乙酸3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基酯[即(4-苄基-2-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氧基)-3-(S)(4-氟苯基)-1，4-噁嗪]的甲苯溶液在100L烧瓶中蒸发。烧瓶通氮气吹洗，然后加入四氢呋喃(25L)，随后加二甲基二茂钛的甲苯/THF溶液(12.5重量％，4.2kg试剂，20.2mol)。橙黄色溶液通氮气25分钟，然后加热至80℃。反应液在暗处于80℃持续4小时，并冷却至环境温度。加入甲醇(11.6L)和水(1.9L)，混合物于40℃加热过夜，析出钛残余物，为绿色固体。冷至环境温度后，过滤除去固体，滤饼用甲苯洗涤，将所得的母液蒸发。粗产物溶于热甲醇(30L)中，冷却至环境温度，再在3小时内加入水(3.4L)进行重结晶。于0℃通过过滤分出该物质，滤饼用0℃的10％甲醇水溶液(2L)洗涤，固体在氮气氖下于环境温度干燥，得到2.55kg(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉(85％)。
实施例19[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉4-甲基苯磺酸盐(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉(1082g，纯度94％，1.94mol)的1∶1乙酸乙酯∶乙醇(13L)溶液与10％钯-炭(165g)混合。所得泥浆状物通氢气(40psi，20-25℃)12小时。通过氢气摄取和HPLC监测反应。将容器排气，过滤除去催化剂。催化剂用1∶1乙酸乙酯∶乙醇(6L)，随后用乙酸乙酯(2L)洗涤后，含有粗品[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉的合并的有机相真空浓缩。第二批用1078g(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉(1.93mol)为起始原料制备。所得的粗品[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉真空浓缩，并与第一批合并。合并的两批粗品[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉用甲基-叔丁基醚(2×3L)洗涤，以便除去残留的乙酸乙酯和乙醇，然后溶于甲基-叔丁基醚(3L)中。溶液经分析含有1348g(3.09mol，产率80％)[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉(为游离碱)。另一法为60g乙烯醚、650ml甲基叔丁基醚(MTBE)和18g 5％钯-氧化铝于40℃在40psi氢气医下搅拌12小时。测得产率为87％，91∶9比率的非对映体。在反应终点，通过Solka-Floc过滤除去催化剂，然后滤液浓缩至140ml。
第一批用温(40℃)的对甲苯磺酸一水合物(575g，3.03mol)的甲基-叔丁基醚(3.2L)溶液处理。在加入期间[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉的对甲苯磺酸盐开始结晶。将该批冷至环境温度，并加入己烷(24L)。将该批保持2小时，然后经过滤收集产物。固体用4∶1己烷∶甲基-叔丁基醚(2×2.5L)洗涤，然后在氮气氛下干燥(1761g(1655g校正纯度)[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉4-甲基苯磺酸盐，纯度为94重量％，产率70％)。另一法为，在20分钟内于35℃向第二批溶液中加入16.0g p-TsOH一水合物的64ml MTBE溶液。结晶的对甲苯磺酸盐为稠泥浆。然后在1小时内加入520ml己烷，泥浆在环境温度下搅拌2小时。将泥浆过滤，用2×60ml 1∶4 MTBE∶己烷洗涤，经抽真空干燥得到51.9g含0.9％不需要非对映体的对甲苯磺酸盐(产率75％)。HPLC条件色谱柱Zorbax RX-C18，25cm×4.6mm；流动相乙腈∶0.005M庚磺酸钠水溶液，0.002M磷酸二氢钾，0.0005M磷酸氢二钠(75∶25，v/v)；流速1.5ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉4.5分钟；N-苄基[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉25.0分钟；(2R-顺式)-2-[[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙烯基]氧基]-3-(4-氟苯基)-4-(苯基甲基)吗啉30.0分钟。HPLC条件色谱柱ZorbaxRX-C18，25cm×4.6mm；流动相乙腈∶0.005M庚磺酸钠水溶液，0.002M磷酸二氢钾，0.0005M磷酸氢二钠(60∶40 v/v)；流速1.5ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉9.0分钟；非对映体[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉11.0分钟(甲基位置差向异构)。
实施例20[2R-[2a(R*)，3a]]-5-[[2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮向[2R-[2a(R*)，3a]]-2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)吗啉4-甲基苯磺酸盐(1254g，2.06mol)、N-甲基羧基-2-氯乙脒腙(375g，2.26mol)和二甲基甲酰胺(10L)的溶液中加入磨成粉状的碳酸钾(682g，4.93mol)。反应保持在15～25℃并持续2.5小时。反应物用1∶1己烷∶甲基-叔丁基醚(10L)和10.9％氯化铵水溶液(11L)稀释。两相分配，水相用1∶1己烷∶甲基-叔丁基醚(2×8L)，随后用1∶2己烷∶甲基叔丁基醚(8L)反萃取。合并的有机相用水(2×15L)洗涤，然后真空浓缩。所得的物质溶于二甲苯(20L)中，并加热回流(137℃)。溶液保持回流3小时，再冷却至环境温度，随后结晶出[2R-[2a(R*)，3a]]-5-[[2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮。将该批物质保持过夜，然后过滤。滤饼用二甲苯(2L)，再用己烷(2×2L)洗涤，然后于30℃真空干燥3天，得[2R-[2a(R*)，3a]]-5-[[2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮[即2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉]696g，产率为63％。
另一法，标题产物可从胺TsOH盐(1.90kg，3.12mol)；N-甲基羧基-2-氯乙脒腙(516.3g，3.12mol)；K2CO3(1.08kg，2.5相当量)；和DMSO(15.6L)制备于20℃向胺盐和粉状K2CO3的DMSO(7.8L)混悬液中加入N-甲基羧基-2-氯乙脒腙的DMSO(7.8L)溶液。首先将该溶液的一半快速加入，用冰水浴轻微冷却，然后剩余的一半在1小时内加入。加完后，通过LC检查反应，加入冷水(15L)和甲基叔丁基醚(MTBE)(30L)溶液使反应中止。分离有机层，并依次用水、饱和NaHCO3、盐水(20L/次)洗涤。水层用另外的MTBE(15L)反萃取。将合并的MTBE溶液浓缩至油状物。所得的粗产物溶于二甲苯(25L)和二异丙基乙基胺(6.25L)，并加热回流(约135℃)，通过LC监测反应。反应进行4～6小时完成，反应溶液冷至室温过夜，并过滤得到标题产物(预计1.33kg，约80％，一般纯度为98.5A％)。所得粗产物溶于热甲醇(13.3L)中，加炭133g，然后过滤，炭用热甲醇(3.3L)洗涤。甲醇溶液冷至室温，然后滴加水(7L)。于室温搅拌2小时后，将混悬液过滤以便分出纯化的产物(即2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉)，为白色结晶状化合物(预计1.20kg，回收率90％，一般纯度为99.5A％。HPLC条件色谱柱ZorbaxRX-C8，25cm×4.6mm；流动相(A)乙腈，(B)0.1％磷酸水溶液；线性梯度在10分钟内40∶60 A∶B～70∶30 A∶B；流速1.5ml/分；检测器UV 220nm；大约的保留时间烷基化的中间物5.7分钟；[2R-[2a(R*)，3a]]-5-[[2-[1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮8.2分钟。随后用该方法制得的样品鉴定为II型多晶型物。它的特征在于，粉末X-射线衍射图关键反射大约为12.6，16.7，17.1，17.2，18.0，20.1，20.6，21.1，22.8，23.9，和24.8°(2θ)。
实施例21制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉于25℃将II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉在乙酸异丙基酯中涡动，制得I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉，随后经过滤分离所得的固体。
同样地，于25℃将II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉在乙醇、2-丙醇、水、甲醇/水混合液或乙腈中涡动，也可制得I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉，随后经过滤分离所得的固体。
实施例22制备I型晶种2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-3-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的样品置于小铝锅内，未封闭的锅置于差示扫描量热池设备中。将样品从环境温度加热至230℃，然后冷却回到室温。所得固体在大规模制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉中用作晶种是合适的。
实施例23制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉(566g)和5.7L甲醇加到22L烧瓶中。混合物加热回流(65℃)，在此期间使全部固体溶于溶液中。将溶液冷却至50℃，并用大约200mg I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉引晶，冷却至45℃，在此期间晶床形成。混合物冷却至26℃，在此期间在1小时内加入2.8L水。混合物于室温保持2小时，然后加热至70℃保持2小时，以确保所有II型物完成转化为I型。将混合物冷却过夜，再使其冷至0℃，于0℃保持70分钟，然后于-3℃过滤。收集的物质在滤器上用氮气帷蓬干燥过夜，并干燥包装，得549g(97％)。
实施例24制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉(II型)(14.5kg)和158L甲醇加到中试规模的反应容器中。混合物加热至50℃，在此期间全部化合物溶解。通过观察孔加入活性炭(Darco G-60)(1.5kg)的6kg甲醇泥浆状物，并用另一份2L甲醇冲洗。将该批反应物加热回流(62℃)并持续1小时。然后冷却至60℃，并通过14″SS闪光滤器(Sparkler filter)过滤。循环10分钟后，在视镜中观察没有异常，将循环管线物输回反应器。然后通过闪光滤器，再通过顺序组装的10μ和0.6μ滤器，最后收集到容器中。将管线物转运，向最后的反应器中加入50L作为冲洗。循环冲洗10分钟，以便清洗循环管线并加热至室温以上。然后通过滤器转运到接收容器中。通过常压蒸馏从210L浓缩到170L。样品表明已达到希望的浓度，88g/L(14.9kg，无损失)。将浓缩物冷却至50℃。并用300g纯的I型2-(R)-(1-(R)-3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉引晶。形成十分光亮的晶种层，但结晶甚至在45℃几乎没有析出。使该稀的泥浆于45℃保持1小时，外观上仍没有什么变化。使该稀的泥浆冷至25℃过夜，得到溶解了60.5g/L化合物的泥浆状物。湿滤饼样品表示仅含有I型结晶。然后于3小时内通过液面下进料管加入83.6kg水(占甲醇体积33％)。样品表明，在上清液中有0.1重量％所需化合物，并且所有的结晶均为I型。将该批反应物冷至0℃保持2小时。然后以一次性将该批移至大规模生产的过滤器上。用约15kg甲醇/水(2/1)滤饼洗液洗涤容器，又得到产品约500-1000g。剩余的15kg滤饼洗液经喷嘴装入过滤器。收集217.8kg母液和洗涤剂(含0.1重量％所需化合物)。湿滤饼(14.8kg)用排气量为0.2SCFM的真空机在27.5″真空下于50℃干燥过夜。12小时后，TG(热解重量分析)表明损失为0.0％。该批得到总重量为12.82kg的标题化合物。
实施例25含有本发明化合物的典型药用组合物A每粒含有5mg活性成分的硬胶囊剂成分 每粒胶囊的量(mg)活性成分 5乳糖 194硬脂酸镁 1胶囊(1号) 200将活性成分过60号筛成为粉末，然后将乳糖和硬脂酸镁通过60号压滤布成为粉末。各成分混合约10分钟，并装入1号硬明胶胶囊。B片剂典型的片剂含有活性成分(5mg)、预明胶化的淀粉USP(82mg)、微晶纤维素(82mg)和硬脂酸镁(1mg)。
虽然本发明进行了叙述并以某些具体的实施方案进行了详细的说明，但是熟悉本技术领域的专业人员明白，可以对方法和方案进行各种修改、变化、改进、取代、删除或增添，但不偏离本发明的实质和范围。例如，作为变化，不同于上述具体剂量的有效剂量可以是适用于哺乳动物，以用上述本发明化合物治疗哺乳动物任一适应症。同样，根据所选择的具体有效化合物或是否应用药用载体，以及剂型和给药方式，观察到的特定药理学反应可以改变，这些预期的结果变化或不同，根据本发明的目的和实践，是可以预料到的。因此，本发明由权利要求的范围确定，所述权利要求的解释得合理的宽。
权利要求
1.化合物2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的I型多晶型物。
2.权利要求1所述多晶型物，其基本特征在于，粉末X射线衍射图表明在约12.0、15.3、16.6、17.0、17.6、19.4、20.0、21.9、23.6、23.8和24.8°(2θ)处有关键的反射。
3.含有药学上适用载体和有效剂量的权利要求1所述多晶型物的药用组合物。
4.一种在哺乳动物中拮抗受体位点上P物质的作用或阻滞神经激肽-1受体的方法，该方法包括给该哺乳动物施用权利要求1所述多晶型物，其剂量能有效拮抗哺乳动物中受体位点上P物质的作用。
5.治疗或预防以下疾病的方法糖尿病性神经病、外周神经病、与AIDS有关的神经病、化疗引起的神经病以及神经痛，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
6.治疗或预防哺乳动物呕吐的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
7.治疗或预防哺乳动物中枢神经系统疾病的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
8.治疗或预防哺乳动物抑郁症的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用的有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
9.治疗或预防哺乳动物抑郁症的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用权利要求1所述多晶型物和抗抑郁剂，它们一起应用可以有效地减轻其病症。
10.治疗或预防哺乳动物焦虑症的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
11.治疗或预防哺乳动物焦虑症的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用权利要求1所述多晶型物和抗焦虑剂，它们一起应用可以有效地减轻其病症。
12.治疗或预防哺乳动物精神分裂症的方法，该方法包括给需要治疗的哺乳动物施用有效剂量的权利要求1所述多晶型物。
13.治疗或预防哺乳动物精神分裂症的方法，该方法包括给需要处理的哺乳动物施用权利要求1所述多晶型物和抗精神病药，它们一起应用可以有效地减轻其病症。
14.制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括将II型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉在选自乙醇、2-丙醇、乙腈和乙酸异丙基酯的溶剂中进行平衡。
15.按权利要求14所述方法生产的产品。
16.制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括将任选形态组成的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的样品加热至温度215～230℃，然后使样品恢复到环境温度。
17.权利要求16所述方法，其中起始的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉形态组成为II型。
18.制备I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的方法，该方法包括将任选形态组成的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉混悬在甲醇/水的混合液中；加入I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的晶种；于约0～50℃搅拌得到的混合物一段时间，以充分生成I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉；收集生成的I型2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉。
19.权利要求18所述方法，其中起始2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟)苯基-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑)甲基吗啉的形态组成为II型。
20.按权利要求19所述方法生产的产品。
全文摘要
本发明涉及新的多晶型化合物2－(R)－(1－(R)－(3,5－二(三氟甲基)苯基)乙氧基)－3－(S)－(4－氟)苯基－4－(3－(5－氧代－1H,4H－1,2,4－三唑)甲基吗啉,它为速激肽受体拮抗剂,可用于治疗或预防中枢神经系统疾病、炎症、疼痛或偏头痛、哮喘和呕吐。本发明多晶型物在药用制剂中的热动力学稳定性和适用性均优于其他已知形式的2－(R)－(1－(R)－(3,5－二(三氟甲基)苯基)乙氧基)－3－(S)－(4－氟)苯基－4－(3－(5－氧代－1H,4H－1,2,4－三唑)甲基吗啉。
文档编号A61P11/06GK1261882SQ98806703
公开日2000年8月2日 申请日期1998年7月1日 优先权日1997年7月2日
发明者L·克罗克, J·麦考利 申请人:麦克公司