黄连素在制备治疗b细胞淋巴瘤的药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及黄连素的一种新用途，具体地说，涉及黄连素在制备治疗B细胞淋巴 瘤的药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 黄连素（berberine，C2tlH18ClNO 4)是一种古老的中药，能对抗多种病原微生物，临床 上主要用于治疗细菌性痢疾及肠胃炎。现在越来越多的研宄表明，黄连素对免疫系统、心血 管系统、神经系统等方面的疾病可以起到不同程度的改善作用，例如，相关研宄报道黄连素 具有抗心律失常、降低血压、正性肌力、保护缺血性脑损伤、降血糖、抗炎、抑制血小板聚集、 抗溃疡、解热等作用。由于黄连素还具备毒副作用轻、可长期使用的优势，提示其具有广阔 的临床应用前景。
[0003] B细胞淋巴瘤是B细胞发生的实体肿瘤，其分型众多，包含弥漫性大B细胞淋巴瘤 (diffuse large B cell lymphoma，DLBCL)和 Burkitt 淋巴瘤。DLBCL 和 Burkitt 淋巴瘤 均属于侵袭性淋巴瘤且易复发，其中DLBCL是最常见的多发淋巴瘤。
[0004] 目前关于黄连素在治疗B细胞淋巴瘤，尤其是DLBCL和Burkitt淋巴瘤方面的作 用还未见报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供黄连素的新用途，以拓展黄连素的应用范围。
[0006] 本发明提供了黄连素在制备治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用。
[0007] 作为本发明的一个优选例，所述的B细胞淋巴瘤是弥漫性大B细胞淋巴瘤或 Burkitt淋巴瘤。
[0008] 本发明提供了黄连素在制备药物中的应用，所述的药物用于抑制动物体内B细胞 淋巴瘤的生长。
[0009] 本发明提供了黄连素在制备药物中的应用，所述的药物用于抑制动物体内B细胞 淋巴瘤体积的增大。
[0010] 本发明还提供了黄连素在制备药物中的应用，所述的药物用于抑制B细胞淋巴瘤 细胞株的增殖。
[0011] 作为本发明的一个优选例，所述的B细胞淋巴瘤细胞株是人Burkitt淋巴瘤细胞 株Raji、人Burkitt淋巴瘤细胞株Namalwa或DLBCL淋巴瘤细胞株SU-DHL-4。
[0012] 本发明优点在于：
[0013] 1、提供了黄连素在制备治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用。本发明通过实验证 实了黄连素有抑制B淋巴瘤细胞株增殖及荷瘤小鼠淋巴瘤生长的作用，且抑制作用十分显 著，提示黄连素可作为治疗B细胞淋巴瘤的有效药物，且其药物安全性已经受到了长期的 验证，因此本发明为临床B细胞淋巴瘤的治疗提供了一种新的方案。
[0014] 2、提供了黄连素用于制备抑制动物体内B细胞淋巴瘤生长的药物中的应用，尤其 是抑制动物体内B细胞淋巴瘤体积的增大。
[0015] 3、提供了黄连素在制备抑制B细胞淋巴瘤细胞株增殖的药物中的应用，可用于B 细胞淋巴瘤细胞株的筛选和耐药性等研宄。
【附图说明】
[0016] 图I. Berberine抑制小鼠移植肿瘤的肿瘤生长曲线。
【具体实施方式】
[0017] 下面对本发明提供的【具体实施方式】作详细说明。
[0018] 1、材料和方法
[0019] I. 1 试剂
[0020] Berberine 购自 Sigma-Aldrich 公司。
[0021] 1.2细胞培养
[0022] 人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji和Namalwa，DLBCL淋巴瘤细胞株SU-DHL-4均购自 美国标准生物品收藏中心（American Type Culture Collection)，以3X105/ml密度接种 于10 %热灭火胎牛血清的RPMI1640培养基中，置37 °C、5 % CO2，95 %湿度的培养箱中培养， 每48h换液，试验采用对数生长期细胞。
[0023] L 3细胞增殖毒性检测
[0024] 将密度为3 X IO5Ail的对数生长期细胞悬液接种于96孔板中。Berberine终浓 度分别设置为1，5,10,50,100 y M处理细胞，设置不加药空白组，每个药物浓度设置三组 复孔。48h后每孔加入20yl MTT(5mg/ml)，继续培养4h后，2000rpm离心5min，弃上清。 每孔加入200 yl DMSO使结晶充分溶解。酶标仪测定在490nm波长下吸光光度值。计算 Berberine处理细胞的增殖抑制率：生长抑制率=(1 一药物处理组吸光度值/对照组吸光 度值）X 100%。
[0025] 1. 4淋巴瘤小鼠模型的建立
[0026] 4周龄雌性BALB/c裸鼠购买自上海实验动物中心，饲养于屏障设施动物层流室， 饲养条件为：温度24~26°C，相对湿度40~60%。室内采用人工照明，自由采食，饲料和 水均经高温消毒处理。每只裸鼠的右侧肩部皮下接种5X IO6Namalwa细胞，接种细胞后每两 天观察肿瘤生长情况，约10天左右在注射部位可见肿瘤形成。根据实验设计将荷瘤小鼠进 行随机分组，分为两组即对照组和berberine治疗组，其中对照组注射相同量的生理盐水， berberine治疗组腹腔注射相同量的berberine，剂量为10mg/kg/2day。所有小鼠均观察 21天，肿瘤的体积计算公式为V = 0. 5ab2。
[0027] 2、结果
[0028] 2. I Berberine显著抑制淋巴瘤细胞增殖
[0029] 用MTT法分别检测不同浓度berberine (1，5,10, 50,100 y M)单药对Burkitt淋巴 瘤细胞株Raji和Namalwa，DLBCL淋巴瘤细胞株SU-DHL-4的作用，结果提示随着药物浓度 增加，berberine对以上淋巴瘤细胞株增殖的抑制作用逐渐增强。
[0030]表1 Berberine对淋巴瘤细胞株的抑制率
[0031]
【主权项】
1. 黄连素在制备治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的B细胞淋巴瘤是弥漫性大B细胞淋 巴瘤或Burkitt淋巴瘤。
3. 黄连素在制备药物中的应用，其特征在于，所述的药物用于抑制动物体内B细胞淋 巴瘤的生长。
4. 黄连素在制备药物中的应用，其特征在于，所述的药物用于抑制动物体内B细胞淋 巴瘤体积的增大。
5. 黄连素在制备药物中的应用，其特征在于，所述的药物用于抑制B细胞淋巴瘤细胞 株的增殖。
6. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的B细胞淋巴瘤细胞株是人Burkitt 淋巴瘤细胞株Raji、人Burkitt淋巴瘤细胞株Namalwa或DLBCL淋巴瘤细胞株SU-DHL-4。
【专利摘要】本发明涉及黄连素在制备治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用。本发明应用三种B细胞淋巴瘤细胞株进行体外实验，另外建立了B细胞淋巴瘤小鼠模型并进行了体内实验，证实了黄连素有抑制B淋巴瘤细胞株增殖及荷瘤小鼠淋巴瘤生长的作用，且抑制作用十分显著，提示黄连素可作为治疗B细胞淋巴瘤的有效药物，且其药物安全性已经受到了长期的验证，因此本发明为临床B细胞淋巴瘤的治疗提供了一种新的方案。
【IPC分类】A61P35-00, A61K31-4375
【公开号】CN104739831
【申请号】CN201510167823
【发明人】赵维莅, 王黎, 郑重, 薛雯, 张翼飞, 宁光
【申请人】上海交通大学医学院附属瑞金医院
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年4月10日