瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用

瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，涉及瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用。【背景技术】 瑞诺木素（Reynosin)，mp. 145-146°c，分子式为C15H2Q03，分子量为248. 32,结构式为：
瑞诺木素是从菊科（Compositae)奇蒿Artemisia anomalaS.Moore的地上部分分离得到一种倍半猫内醋类化合物。药理研宄表明，瑞诺木 素对对人塑小细朐肺癌株和人塑结肠癌细朐株的IC50分别为10. 7yM和8. 9yM(对照 品Cisplatin为l.OyM和3.OyM)。通过文献检索，国内尚未见瑞诺木素用于制备抗肿 瘤药物。
【发明内容】
为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，应用瑞诺木素制备抗 肿瘤药物。本发明的技术方案如下：本发明所述的瑞诺木素，其制备方法包括以下步骤： (1)取奇蒿的地上部分粉碎，按固液体积比为5 :1. 5-2加入夹带剂，在压力22-35MPa，温度 35-48°C条件下，通入液态0)2萃取90-180min，在压力7-9MPa，温度30-35°C条件下解析，收 集萃取液；（2)将步骤（1)中得到的萃取液加硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液；（3)将步 骤（2)中得到的脱色液浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脱 纯化，得到瑞诺木素粗品；（4)粗品经过制备型高效液相色谱精制得到高纯度的瑞诺木素。 所述步骤（1)中，夹带剂为甲醇或乙醇溶液。所述步骤（2)中，硅藻土加入量为药材量的 3-4. 5%所述步骤（3)中，石油醚-乙酸乙酯的体积比为3:14。所述步骤（4)中，制备型高效 液相色谱流动相为甲醇-乙腈-水，体积比为19:38:45。瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的 应用。通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察瑞诺木素的抗肿瘤作用，结果表明瑞诺木素对 GLC4肺癌和C0L0结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。本发 明的有益效果通过以下实验得到了验证：实验方法：1、受试提取物：瑞诺木素提取物（1)性 状：结晶，味苦。（2)规格：含瑞诺木素多90%。（3)溶剂：乙醇或甲醇。（4)储存条件：4°C， 密封保存。2、细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株C0L0。3、给药剂量和方法瑞诺木素 组：l〇mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注 给药，隔一天一次，共五天。阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注给药，隔一天一次， 共五天。灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。4、种植瘤模型的建立与给药（1)皮下种 植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2X10 6细胞悬液，注射至小鼠肋下皮下 组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对模型动物存活率 的影响。（2)肺内种植瘤肺转移模型：取2X10 6细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15 天取肺，测量瘤重和肺转移数。（3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。5、结果结果如表1、表 2和表3显示，瑞诺木素组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的作用，可延长实验小 鼠的生存期。 表1瑞诺木素对种植瘤的抑制作用（n=20,i土S)
表2瑞诺木素对肿瘤转移发生率的影响（n=20, ％)
表3瑞诺木素对实验小鼠生存率的影响（n=20, ％)
由表1、表2和表3可以看出，瑞诺木素组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照组 基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。本发明用于制备抗肿 瘤药物时，将瑞诺木素与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射 剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。本发明用于制备抗肿瘤药物时，在 其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其 衍生物中的一种或几种。下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护 的范围并不局限于下列实施方式。【具体实施方式】实施例1瑞诺木素的制备取500g奇蒿的 地上部分粗粉，置于萃取釜中，按固液体积比为5 :2加入甲醇作为夹带剂，在压力22MPa，温 度38°C条件下，通入液态C02，C02流量为4. 5ml/g生药/min，萃取120min，在压力7MPa，温 度32°C条件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液，浓缩至相对 密度为1. 12,上中性氧化铝柱(柱压为6bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-乙酸乙酯3:14洗 脱纯化，得到瑞诺木素粗品；以体积比19:38:45甲醇-乙腈-水为流动相，粗品用流动相溶 解，注入制备型高效液相色谱仪，控制流速为20ml/min，收集目标流分，连续制备，冷冻干燥 得高纯度的瑞诺木素，经HPLC检测，纯度94. 4%。实施例2片剂：瑞诺木素40g，淀粉135g， 鹅去氧胆酸盐25g，制粒，压片制成1000片。服用方法：成人一次1片，一日2次。实施例3 胶囊：瑞诺木素40g，淀粉135g，壳聚糖25g，混匀，制成1000粒。服用方法：成人一次1粒， 一日2次。
【主权项】
1. 结构式如下所示的瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用。2. 如权利要求1所述的瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，瑞诺木素 在肺癌药物中的应用。3. 如权利要求1所述的瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，瑞诺木素 在结肠癌药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种瑞诺木素在制备抗肿瘤药物中的应用，通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察瑞诺木素的抗肿瘤作用，结果表明瑞诺木素对肺癌和结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将瑞诺木素与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
【IPC分类】A61K31/365, A61P35/04, A61P1/00, A61P35/00, A61P11/00
【公开号】CN104940192
【申请号】CN201510263700
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年5月22日