3?质谱（LC-MS)
[0201] (1)测试仪器：Finnigan LCQ LS/MS ;
[0202] ⑵测试溶剂：甲醇；
[0203] (3)测试结果：Impurity F质谱谱图见图6,详细数据如下：
[0204] [M+H]+= 225. 1，[M+Na] += 247. 1，Impurity F 的分子式为：C 9H13N403、分子量为 M =224. 09,测试结果与理论值一致。
[0205] 实施例三杂质A (Impurity A)的制备：
[0206]
[0207] 制备过程：于250mL三颈瓶中依次加入多索茶碱7. 52g(28. 15mmol)、20%氢氧化 钠水溶液15. OmL，缓慢加热至80°C、保温反应3小时，HPLC监控反应结束。加入无水乙醇 50.0 mL，冰水浴冷却，盐酸调pH = 8,析出大量固体。过滤，干燥，得Impurity A粗品。经 乙酸乙酯两次重结晶，得Impurity A计5. 41g，收率79. 8%。
[0208] 实施例四杂质C(Impurity C)的制备：
[0209]
[0210]制备过程：于250mL三颈瓶中依次加入多索茶碱9. 10g(50. 0mmol)、N，N-二甲基甲 酰胺80.0 mL、溴乙醛缩二甲醇7. 3mL(60mmol)和粉末状无水碳酸钾20. 71g(150mmol)，缓慢 升至120°C，持续搅拌反应5h，HPLC监测几乎无原料剩余。冷却，过滤，滤液减压浓缩DMF。 向其中加入无水甲醇30.0 mL，室温搅拌0. 5h，析出乳白色固体。滤出固体用甲醇重结晶，得 Impurity C 计 5. 42g，收率 41. 2%。
[0211] 实施例五杂质D (Impurity D)的制备：
[0212]
[0213] 制备过程：于250mL三颈瓶中依次加入多索茶碱9. 50g(50.0 mmol)、N，N-二甲基甲 酰胺80.0 mL、溴乙醛缩二乙醇9. 0mL(60mmol)和粉末状无水碳酸钾20. 72g(150mmol)，缓慢 升至120°C，持续搅拌反应5h，HPLC监测几乎无原料剩余。冷却，过滤，滤液减压浓缩DMF。 向其中加入无水乙醇30.0 mL，室温搅拌0. 5h，析出乳白色固体。滤出固体用甲醇重结晶，得 Impurity D 计 6. 82g，收率 46. 2%。
[0214] 实施例六杂质E (Impurity E)的制备：
[0215]
[0216]制备过程：于250mL三颈瓶中依次加入茶碱4. 10g (22. 2mmol)、N, N-二甲 基甲酰胺30.0 mL，搅拌状态下依次加入无水碳酸钾6. 22g (44. 8mmol)、溴乙酸甲醋 2. 8mL(30.0 mmol)，逐渐升温至30°C，反应3h，HPLC监测无原料剩余。过滤，向滤液中加 入水50.0 mL，用乙酸乙酯萃取（30. 0mLX4)，合并有机层，蒸馏水洗有机层3次，有机层干 燥，过滤、浓缩得白色固体计3. 10g。白色固体溶于甲醇40.0 mL中，加入氢氧化钠水溶液 (1. 91g/10.0 mL)，45°C下反应lh。冰水浴下用盐酸甲醇调节pH至3~4,析出大量白色固 体，搅拌〇. 5h，抽滤，干燥得Impurity E计1. 91g，收率36%。
[0217] 实施例七杂质G (Impurity G)的制备：
[0218]
[0219]制备过程：于250mL三颈瓶中依次加入茶碱4. 10g (22. 2mmol)、N, N-二甲 基甲酰胺30.0 mL，搅拌状态下依次加入无水碳酸钾6. 22g (44. 8mmol)、溴乙酸乙醋 2. 8mL (30.0 mmol)，逐渐升温至30°C，反应3h，HPLC监测无原料剩余。过滤，向滤液中加入水 50.0 mL，用乙酸乙酯萃取（30.0 mLX 4)，合并有机层，用蒸馏水洗有机层3次，有机层干燥， 过滤、浓缩、干燥，得Impurity G计2. 92g，收率49. 5%。
[0220] 实施例八
[0221] 取杂质A与杂质B，茶碱对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号： 100121-199903,供含量测定用，纯度100%计）通过高效液相色谱仪，采用DAD检测器，确定 其最大吸收波长均为274nm，与多索茶碱的最大吸收波长相一致。与原标准中多索茶碱的最 大吸收波长为273nm相差lnm，因此在检测时仍采用标准中规定的273nm。
[0222] 采用杂质定位项有关物质检测的流动相，用液相色谱法对三种杂质进行具体的方 法学研宄：三种杂质与主峰均能很好分离，且三种杂质之间亦能很好分离，且分离度符合 要求，三种杂质的主要研宄结果见表十三：
[0223] 表十三：多索茶碱注射液中三个杂质主要信息表
[0224]
[0225] 以上所述实施例仅仅是本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进 行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作 出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种多索茶碱注射液，其特征在于，制备所述多索茶碱注射液所用的多索茶碱按如 下合成路线发生如下反应：在甲醇中醋酸乙烯酯（II)与溴素发生加成反应、并同时醇解，生成溴乙醛缩二甲醇 (III) ;溴乙醛缩二甲醇（III)经二氯甲烷萃取后，直接在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇 发生缩醛交换，生成新的缩醛，即溴甲基二氧五环（IV)，该过程先通过分馏，逐渐除去低 沸点的溶剂及新产生的甲醇，以便促进反应的顺利进行，再经减压蒸馏收集溴甲基二氧五 环（IV);以N，N-二甲基甲酰胺为溶剂、在无水碳酸钾作用下，茶碱（V)与溴甲基二氧五环 (IV) 顺利发生取代反应，即可生成多索茶碱（I);最后经乙醇重结晶，即可获得药用要求的 合格产品。2. 如权利要求1所述多索茶碱注射液的有关物质，其特征在于，所述有关物质包括杂 质A"、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质A、杂质G、茶碱。3. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质A"按如下合成路 线发生如下反应：取多索茶碱30.(^(112.6臟〇1)，加入20%氢氧化钠水溶液601^，缓慢加热至801：、在 持续保温反应3小时，HPLC监控反应结束；加入无水乙醇200mL，冰水浴冷却下以盐酸调pH =8,析出大量固体，过滤；滤液减压浓缩，所得粗品经乙酸乙酯柱层析（或乙酸乙酯重结 晶），得杂质A"。4. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质B按如下合成路线 发生如下反应：取多索茶碱10. 〇g(37. 5mmol)，加入35mL水后加热溶解，再加入2M盐酸约6mL，调pH值为1，反应回流8h，TLC监测无原料剩余，浓缩剩约IOmL溶剂，加入20mL四氢呋喃分散， 抽滤得白色固体，用少量四氢呋喃淋洗得杂质B。5. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质C按如下合成路线 发生如下反应：将7H-茶碱9.Og(50.Ommol)溶于N，N-二甲基甲酰胺80mL，然后将溴乙醛缩二甲醇 7. 3mL(60mmol)和粉末状无水碳酸钾20. 7g(150mmol)依次加入混合液中，缓慢升至120°C， 持续搅拌反应5h，TLC监测几乎无原料剩余；冷却，抽滤去除无机盐，滤液减压浓缩DMF，向 其中加入无水甲醇30mL，室温搅拌0. 5h，析出乳白色固体；滤出固体用甲醇重结晶，得杂质 Co6. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质D按如下合成路线 发生如下反应：取7H-茶碱9.Og(50.Ommol)，溶于N,N-二甲基甲酰胺80mL，搅拌状态下依次加入溴乙 醛缩二乙醇9. 0mL(60mmol)，粉末状无水碳酸钾20. 7g(150mmol)，逐渐升温至120°C，反应 5h，TLC监测无原料剩余，冷却后抽滤，滤液减压蒸出DMF，向浓缩后的反应液中加入无水乙 醇30mL，室温搅拌0. 5h，析出乳白色固体，抽滤后用甲醇重结晶得杂质D。7. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质E的合成方法为：取7H-茶碱4. 0g(22. 2mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺30mL，搅拌状态下依次加入无水 碳酸钾6. 2g(44. 8mmol)，溴乙酸甲醋2. 8mL(30.Ommol)，逐渐升温至30°C，反应3h，TLC监 测无原料剩余，抽滤除去无机盐，向滤液中加入水50mL，用乙酸乙醋萃取（30mLX4)，合并 有机层，蒸馏水洗有机层3次，干燥，浓缩得白色固体3.Og;白色固体溶于40mL甲醇，加入 氢氧化钠水溶液（I. 9g/10mL)，45°C下反应lh，冰水浴下用盐酸甲醇调节pH至3-4,析出大 量白色固体，搅拌0. 5h，抽滤，干燥得杂质E。8. 如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质A按如下合成路线 发生如下反应：取有关物质B4.Og(18.Ommol)，加入30mL甲醇，冰水浴下缓慢加入硼氢化钠 I.Ig(29.Ommol)，加料完毕，逐渐升至室温反应2h，TLC监测无原料剩余，冰水浴下用2M盐 酸调节pH为3-4,再用饱和碳酸钠溶液调节pH至8-9,减压蒸除甲醇，用水-乙酸乙酯萃取， 合并有机层，干燥，浓缩得乳白色固体，乙醇重结晶，得杂质A。9.如权利要求2所述的有关物质的合成方法，其特征在于，所述杂质G按如下合成路线 发生如下反应：取7H-茶碱4. 0g(22. 2mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺30mL，搅拌状态下依次加入无水 碳酸钾6. 2g(44. 8mmol)，再加入溴乙酸乙醋2. 8mL(30.Ommol)，逐渐升温至50°C，反应4h， TLC监测无原料剩余，抽滤除去无机盐，向滤液中加入水50mL，用乙酸乙醋萃取（30mLX4)， 合并有机层，用蒸馏水洗有机层3次，干燥，浓缩得杂质G。
【专利摘要】本发明涉及一种制备多索茶碱注射液所用的多索茶碱的合成方法，还提供了分离和合成包括杂质A、杂质A”、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质G等在内用于多索茶碱注射液有关物质测定的对照品的合成方法。
【IPC分类】A61K9/08, A61P11/06, A61K31/522, C07D473/08, C07D405/06
【公开号】CN104958300
【申请号】CN201510295604
【发明人】吴光彦
【申请人】黑龙江福和华星制药集团股份有限公司
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2013年11月3日
【公告号】CN103837612A