作为蛋白激酶抑制剂的3,4-二芳基吡唑的亚磺酰氨基衍生物的制作方法
【专利说明】作为蛋白激酶抑制剂的3, 4-二芳基吡唑的亚磺酰氨基衍 生物
[0001] 本申请是申请日为2011年1月19日、申请号为2011800170702、发明名称"作为 蛋白激酶抑制剂的3, 4-二芳基吡唑的亚磺酰氨基衍生物"的专利申请的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及某些可调节蛋白激酶的活性的亚磺酰氨基3, 4-二芳基吡唑化合物。 因此本发明化合物可用于治疗由失控的蛋白激酶活性引起的疾病。本发明还提供制备这些 化合物的方法、包含这些化合物的药用组合物和利用包含这些化合物的药用组合物治疗疾 病的方法。
【背景技术】
[0003] 蛋白激酶（PKs)出现机能失调是多种疾病的标志。
[0004] 大部分致癌基因和原癌基因均与PKs的人癌指定遗传密码有关。PKs的活性增加 也与很多非恶性疾病有关，如良性前列腺增生、家族性腺上皮增生、息肉病、多发性神经纤 维瘤、银肩病、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球性肾 炎和术后狭窄和再狭窄。
[0005] PKs还涉及炎性病症和病毒和寄生虫的并发症。PKs也可在神经变性疾病的发病 和发展中发挥主要作用。
[0006] 有关PKs机能失调或失控的一般参考文献可参见例如Current Opinion in Chemical Biology 1999， 3， 459 - 465 and Carcinogenesis 2008， 29， 1087-191。
[0007] 在本领域已知的几种蛋白激酶中，典型的Ras、Raf、MEK (有丝分裂原激活蛋白 激酶/胞外信号-调节激酶激酶）、ERK (胞外信号-调节激酶）途径在各种依赖细胞环 境（cellular context)的细胞功能的调节中发挥重要作用，包括细胞增殖、分化、生存、无 限增殖化和血管生成（综述见 Peyssonnaux and Eychene, Biology of the Cell, 2001， 93,3-62)。在该途径中，Raf家族成员被募集至质膜，在其上结合装载三磷酸鸟苷（GTP) 的Ras，导致Raf蛋白的磷酸化和激活。然后激活的Rafs磷酸化和激活MEKs，其依次磷酸 化和激活ERKs。在激活时，ERKs从细胞质中易位至细胞核，导致如Elk-I和Myc的转录 因子的活性的磷酸化和调整。已有报道通过诱发无限增殖化、不依赖生长因子的生长、对 抑制生长的信号的不敏感性、侵入和转移的能力，通过刺激血管生成和通过抑制细胞凋亡， Ras/Raf/MEK/ERK 途径有助于致瘤性表型（综述见 Kolch et al.，Exp.Rev. Mol. Med.， 2002，4，1-18)。事实上，在大约30%的所有人体肿瘤中ERK磷酸化增强（Hoshino et al.， Oncogene, 1999，18，813-822)。这可能是该途径的关键成员的过表达和/或突变的结 果。
[0008] 已报道三种Raf丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶同种型Raf-l/c-Raf、B-Raf和A-Raf (综述见 Mercer and Pritchard, Biochim. Biophys. Acta, 2003，1653，25-40)，认为 其基因起因于基因复制。大多数组织中都表达所有三种Raf基因，但存在差别：c-Raf在各 处都高水平地表达，而B-Raf的高水平表达发现于神经元组织中，A-Raf发现于泌尿生殖 组织中。高同源性Raf家族成员具有重叠但独特的生物化学活性和生物学功能（Hagemann and Rapp, Expt. Cell Res. 1999，253，34-46)。正常鼠科动物发育都需要所有三种Raf 基因的表达，但是完成妊娠期需要c-Raf和B-Raf。B-Raf -/-小鼠在E12. 5死亡，原因 是内皮细胞的细胞凋亡增加引起的血管出血（Wojnowski et al, Nature Genet.，1997， 16，293-297)。据报道B-Raf是涉及细胞增殖和致癌性Ras的原始靶标的主要同种型。 激活5种体细胞错义突变已被鉴定为主要是B-Raf，其在恶性皮肤黑素瘤中的出现频率为 66%(Davies et al.，Nature, 2002，417，949- 954)并且还存在于广泛范围的人类癌症 中，包括但不限于乳头状甲状腺瘤（Cohen et al.，J. Natl. Cancer Inst.，2003，95， 625-627)、胆管癌（Tannapfeletal.，Gut, 2003，52，706-712)、结肠和卵巢癌（Davies et al.，Nature, 10 2002，417，949-954)。B-Raf 中最频繁的突变（80%)是位置 600 处 的谷氨酸取代缬氨酸。这些突变增加B-Raf的基础激酶活性，并被认为从上流增值驱动（包 括Ras和生长因子受体的激活）中解除Raf/MEK/ERK信号传导，导致ERK的本质性激活。 突变的 B-Raf 蛋白在 NIH3T3 细胞（Davies etal.，Nature, 2002，15 417，949-954)和 黑色素细胞（Wellbrock et al.，Cancer Res.，2004，64，2338-2342)中转化，并也显 示对黑色素瘤细胞的存活和转化是必要的（Hingorani et al.，Cancer Res.，2003，63， 5198-5202)。作为Raf/MEK/ERK信号串联的关键驱动器，B-Raf代表依赖于该途径的肿瘤 中的可能的干扰点。
[0009] 用于治疗细胞因子介导的疾病（如炎症和关节炎）的取代的吡唑衍生物公开于 G. D. Searle & Co 代表的 W098/52940 和 W000/31063 中。
[0010] 用于治疗癌症的羟基芳基-吡挫衍生物公开于Cancer Research Institute代表 的 TO03/055860 和 Pfizer Inc.代表的 W007/105058 中。
[0011] 用于治疗高增殖性疾病（如癌症）的嘧啶基-吡唑衍生物公开于SmithKline Beecham Corporation代表的W007/24843中。尽管有这些进展，但目前对所述疾病的有效 治疗剂仍存在着需求。
【附图说明】
[0012] 本发明还通过下文所述的附图进行示例性说明。
[0013]图1指缓冲液中的稳定性研宄并显示化合物2号（式（I)化合物的代表性化合 物）在pH 7. 4的PBS缓冲液中的稳定性。
[0014] 图2指血浆中的稳定性研宄并显示化合物2号（式⑴化合物的代表性化合物） 的新鲜小鼠血浆中向2号化合物母体的转化。
【发明内容】
[0015] 现在本发明人已公开下述的式（I)化合物为激酶抑制剂，因此可作为抗肿瘤剂用 于治疗中。
[0016] 因此，本发明的第一个目的是提供式（I)代表的亚磺酰氨基3, 4-二芳基吡唑化合 物及其药学上可接受的盐： 其中：
m是0-6的整数； R1 是氢、三氯甲基、三氟甲基、卤素、氰基、OH、OR9、NR10R11、NR12COR13、COOH、C00R14、 CONR15R16或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C2-C8)链烯基、（C 2-C8)炔基、 (C3-C8)环烷基、（C 3-C8)环烯基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，其中： R9和R14彼此各自独立地是任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C 8)环烷 基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，和 R10、Rll、R12、R13、R15和R16彼此各自独立地是氢或任选取代的选自直链或支链的 (Q-Q)烷基、（C3-C8)环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，或者与它们的或者R10和R11、 R12和R13以及R15和R16键合的原子结合在一起，可形成任选取代的杂环基或杂芳基，其 任选含有一个另外的选自S、0、N和NH的杂原子或杂原子基团； X是-CH或N ; R2 是氢、卤素、NR17R18、SR19 或 S02R19,其中： R17和R18彼此各自独立地是氢或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C 8) 环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，或者与其R17和R18键合的氮原子结合在一起，可形 成任选取代的杂环基或杂芳基，其任选含有一个另外的选自S、0、N和NH的杂原子或杂原子 基团；或者R17是氢和R18是C0R20,其中： R20是OR21、NR22R23或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C2-C 8)链烯基或 (C2_C8)炔基、（C3-C8)环烷基、（C 3-C8)环烯基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，其中： R21是任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C8)环烷基、杂环基、芳基和杂 芳基的基团；和 R22和R23彼此各自独立地是氢或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C 8) 环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的基团，或者与其R22和R23键合的氮原子结合在一起，可形 成任选取代的杂环基或杂芳基，其任选含有一个另外的选自S、0、N和NH的杂原子或杂原子 基团；和 R19是任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C8)环烷基、杂环基、芳基和杂 芳基的基团； R3、R4、R5和R6彼此各自独立地是氢、卤素、三氟甲基、三氯甲基、氰基、OR24、NR25R26 或者是任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基和（C3-C8)环烷基的基团，其中： R24是任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基和（C3-C8)环烷基的基团，和 R25和R26彼此各自独立地是氢或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C 8) 环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的基团；或者与其R25和R26键合的氮原子结合在一起，可形 成任选取代的杂环基或杂芳基，其任选含有一个另外的选自S、0、N和NH的杂原子或杂原子 基团； R7是任选取代的选自直链或支链的（CfC8)烷基、（C2-C 8)链烯基、（C2-C8)炔基、（C3-C8) 环烷基、（C3-C8)环條基、杂环基、芳基和杂芳基的基团： R8 是 C0R27 或 CHR280C0R29,其中： R27是氢或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C2-C8)链烯基或（C 2-C8)炔基、 (C3-C8)环烷基、（C3-C8)环烯基、杂环基、芳基和杂芳基的基团或者基团0R30,其中： R30是任选取代的选自直链或支链的（CrC8)烷基、（C 2-C8)链烯基、（C2-C8)炔基、 (C3-C8)环烷基、（C3-C8)环烯基、杂环基、芳基和杂芳基的基团： R28是氢或任选取代的直链或支链的（Ci-Q)烷基； R29是任选取代的选自直链或支链的（CrC8)烷基、（C 2-C8)链烯基、（C2-C8)炔基、 (C3-C8)环烷基、（C3-C8)环烯基、杂环基、芳基和杂芳基的基团或者基团NR31R32,其中： R31和R32彼此各自独立地是氢或任选取代的选自直链或支链的（Q-Q)烷基、（C3-C 8) 环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的基团；或者与其R31和R32键合的氮原子结合在一起，可形 成任选取代的杂环基或杂芳基，其任选含有一个另外的选自S、0、N和NH的杂原子或杂原子 基团。
[0017] 本发明还提供制备式（I)代表的亚磺酰氨基3, 4-二芳基吡唑化合物的方法，其通 过由标准合成转化组成的工艺过程制备。
[0018] 本发明还提供一种治疗由失控的蛋白激酶活性引起和/或与其相关的疾病的方 法，所述蛋白激酶尤其是RAF家族、不同同种型的蛋白激酶C、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、 STLK-2、DDR-2、Aurora A、Aurora B、Aurora C、Bub-l、Chkl、Chk2、HER2、MEKl、MAPK、EGF-R、 PDGF-R、FGF-R、IGF-R、PI3K、weel 激酶、Src、Abl、Akt、MAPK、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nek、 Cdk/细胞周期蛋白激酶家族，包括PLK-1和PLK-3，该方法包括给予有需要的哺乳动物有效 量的以上定义的式（I)代表的取代的3, 4-二芳基吡唑化合物。
[0019] 本发明一优选的方法是治疗由失控的蛋白激酶活性引起和/或与其相关的疾病， 所述疾病选自：癌症、细胞增殖性疾病、病毒感染、自身免疫和神经变性疾病。
[0020] 本发明另一优选的方法是治疗特定类型的癌症，包括但不限于癌，如膀胱癌、乳腺 癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌（包括小细胞肺癌）、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫 颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌（包括鳞状细胞癌）；淋巴谱系的造血肿瘤，包括白血 病、急性淋巴性白血病、急性成淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、何杰金氏 淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤（Burkett's lymphoma);骨髓 谱系的造血肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞白血 病；间叶细胞源性肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和周围神经系统肿瘤，包括星形 细胞瘤、成神经细胞瘤、胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨 肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
[0021] 本发明的另一优选的方法是治疗特异性细胞增殖性疾病，例如良性前列腺增生、 家族性腺上皮增生息肉病、多发性神经纤维瘤、银肩病、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌 细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球性肾炎和术后狭窄和再狭窄。
[0022] 本发明的另一优选的方法是治疗病毒感染，尤其是预防HIV-感染个体的AIDS的 发展。
[0023] 另外，本发明方法还提供肿瘤血管生成和转移的抑制作用以及治疗器官移植排斥 和宿主抗移植物疾病。
[0024] 在再一优选的实施方案中，本发明的方法还包括使有需要的哺乳动物接受放射疗 法或化学疗法并联合给予至少一种细胞抑制剂或细胞毒药物。
[0025] 另外，本发明提供一种抑制RAF家族蛋白活性的体外方法，其包括使该蛋白与有 效量的式（I)化合物接触。
[0026] 本发明还提供一种药用组合物，其包含一或多种式（I)化合物或其药学上可接受 的盐，以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。
[0027] 本发明进一步提供一种药用组合物，其包含式（I)化合物并结合已知的抗癌疗 法，如放射治疗或化学药物治疗法并联合细胞抑制剂或细胞毒性药物、抗生素类药物、烷化 剂、抗代谢药物、激素类药物、免疫药物、干扰素类药物、环加氧酶抑制剂（如C0X-2抑制 剂）、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒末端转移酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体 药物、抗-HER药物、抗-EGFR药物、抗血管生成剂（例如血管生成抑制剂）、法尼基转移酶抑 制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞循环抑制剂、其它cdks抑制剂、微管蛋白粘合剂、 拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。
[0028]另外，本发明提供一种产品或试剂盒，其包含如上定义的式（I)化合物或其药学 上可接受的盐，或者其药用组合物和一或多种化学治疗剂，其作为一种组合制剂供同时、单 独或连续用于抗癌治疗中。
[0029] 在又一方面，本发明提供用作药物的如上定义的式（I)化合物或其药学上可接受 的盐。优选地，本发明提供用作前药的如上定义的式（I)化合物