NC-1和BxPC-1细胞系中的迀移和细胞侵袭。细胞在不同浓度的PJ中培养20小时，在用Calcein AM着色之后进行拍照。在不存在PJ的情况下培养的细胞用作对照。图6A和图6B分别示出了 PANC-1和BxPC-1细胞系中的侵袭细胞的荧光。正如荧光指数读数所半定量的，PJ以剂量依赖的方式减少了细胞侵袭。结果表示成三次重复试验的平均值土 SEM，*表示P〈0.05，并且林表示P〈0.01，对应各自的DMSO处理对照。
[0080]伤口愈合试验表明图6C和图6D中分别示出的PANC-1和BxPC-1细胞系中的细胞迀移。当细胞达到融合状态时，在各孔上划出单个伤口。在用多种浓度的PJ孵育20小时之后，使用显微镜观察到伤口闭合区。这些结果支持细胞侵袭调查结果:增加的PJ浓度以增加的剂量依赖方式防止细胞迀移。因此，这表明PJ有效地阻碍PANC-1和BxPC-3中的迀移和新陈代谢。
[0081]本发明公开了通过在两种细胞系中诱导细胞凋亡、细胞周期停滞和下调NF-κ B活性而抑制增殖、生长、迀移和侵袭的PJ。
[0082]这种陈述得到各种实验的支持，例如，MTS和集落形成试验，其中PJ在两种细胞系中抑制细胞增殖和集落形成。除此之外，已测试出，对于PANC-1和BxPC-3而言，PJ有效地以剂量依赖方式诱导细胞凋亡。此外，对细胞周期分布的流式细胞仪分析表明，对于PANC-1和BxPC-3细胞而言，PJ诱导细胞周期停滞在S期。这些数据共同表明PJ在这些癌细胞系中抑制细胞生长，诱导细胞凋亡并且诱导细胞周期停滞，并且因此可以证明是一种有效的抗肿瘤剂。
[0083]蛋白印迹分析评估半胱天冬酶和PARP蛋白的表达。实验数据还证实，PJ同时导致PANC-1和BxPC-3两者中例如Bcl_xL和存活素的抗细胞凋亡蛋白的表达减少，并且还导致例如活化型半胱天冬酶3、活化型半胱天冬酶9和活化型PARP的促细胞凋亡蛋白的表达增加。因此，本发明公开了 PJ的细胞凋亡性能通过双机制来诱导产生，从而证实PJ可以被视为有力的抗癌营养食品。
[0084]NF-κ B在许多细胞过程中发挥重要作用，包括细胞增殖、抗细胞凋亡侵袭和血管生成，所有这些细胞过程对于癌症的发生和发展而言至关重要。通过使用化学照度NF- K BELISA试剂盒，我们已证实，随着PJ浓度在两种细胞系中增加，P65活性显著降低，如图5A和图5B所示。由于已知VEGF和MMP9涉及负责细胞迀移和侵袭的NF- κ B的下游信号处理，所以评估了两种细胞系的VEGF和ΜΜΡ9的相对表达。研宄表明，VEGF和ΜΜΡ9的表达响应于在两种PANC-1和BxPC-3细胞系中PJ浓度增加而显著降低，如图5C和图所不O
[0085]本发明中公开的油棕提取物还表现出抑制细胞侵袭和迀移的性能。当前研宄表明，PJ在两种PANC-1和BxPC-3细胞中造成细胞侵袭和迀移以剂量依赖的方式减少，如图6所示。这进一步支持PJ可用于治疗癌症。
[0086]因此，本发明公开了从油棕获得的提取物用作治疗胰腺癌的多方位化疗剂。这种消耗的有益效果可能潜在地涉及抑制细胞增殖和生长，以及诱导细胞周期停滞和细胞凋亡。本研宄中也已经部分阐述发生这些活动的机制，最重要的机制是明显下调NF-κ B通道。
[0087]本发明中公开的组合物可以提供作为具有药用载体的化合物。本发明进一步公开了使用治疗有效量的组合物来制备用于通过给药于有需求的个体而预防或抑制个体中胰腺癌的生长的药物。该组合物可以附带或不附带常规的化疗或放疗或手术，或者可以口服给药或者作为食品增补剂给药。
[0088]本领域的技术人员应当理解的是，本文中实验和研宄的方法描述成范例，并且因此结果绝非旨在限制或约束本发明的范围，并且不应当理解成提供必须专门按顺序利用以实施本发明的条件、参数、试剂、化学品或起始材料。因此，应当理解的是，在所附权利要求书的范围内，可以使用不同于权利要求书中专门描述并阐述的实验的等效方法来实施本发明。
【主权项】
1.一种抑制胰腺癌细胞增殖和集落生成的组合物，其中所述组合物包括植物提取物。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述植物提取物来源于油棕。3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述植物提取物来源于植物液。4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述植物液进一步包含酚类。5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物用于预防胰腺癌及其相关疾病。6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述胰腺癌来自PANC-1细胞系。7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述胰腺癌来自BxPC-3细胞系。8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物诱导细胞凋亡。9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物调控基因表达。10.根据权利要求8所述的组合物，其中所述细胞凋亡与抑制细胞存活蛋白有关。11.根据权利要求8所述的组合物，其中所述细胞凋亡与抑制抗细胞凋亡蛋白有关。12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述抗细胞凋亡蛋白是存活素。13.根据权利要求9所述的组合物，其中所述调控的基因表达与Bcl-2族有关。14.根据权利要求9所述的组合物，其中所述基因表达与下调Bcl-XL表达有关。15.根据权利要求8所述的组合物，其中所述细胞凋亡与增加促细胞凋亡蛋白表达有关。16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述促细胞凋亡蛋白是活化型半胱天冬酶-3或半胱天冬酶-9或聚(ADP-核糖)多聚酶。17.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物诱导细胞周期停滞在S期。18.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物抑制NF-κB活性。19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述NF-K B活性抑制是通过下调p65亚单位活性。20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述下调与减少血管内皮生长因子的基因表达有关。21.根据权利要求19所述的组合物，其中所述下调与减少基质金属蛋白酶9的基因表达有关。22.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物减少细胞侵袭。23.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物减少细胞迀移和新陈代谢。24.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物可以提供为具有药用载体的化合物。25.使用治疗有效量的根据权利要求1所述的组合物来制备用于通过给药于有需求的个体而预防或抑制个体中胰腺癌的生长的药物的用途。26.根据权利要求25所述的用途，其中所述组合物附带或不附带常规化疗或放疗或手术。27.根据权利要求25所述的用途，其中所述组合物可以口服给药或者作为食品增补剂给药。
【专利摘要】本发明涉及一种抑制癌细胞增殖的组合物，其中所述组合物包含油棕提取物。所述组合物通过抑制集落形成、诱导细胞凋亡、调节基因表达、诱导抗侵袭效果并且诱导细胞周期停滞在S期而用于预防胰腺癌。本发明还公开了一种抑制NF-KB活性并且减少细胞侵袭、细胞迁移和新陈代谢的组合物。本发明进一步公开了使用治疗有效量的组合物来抑制胰腺癌的生长。
【IPC分类】A61K31/05, A61K36/889, A61P35/00
【公开号】CN104981248
【申请号】CN201380072771
【发明人】史密特·维·甘普塔, 普拉莫德·科斯拉, 纪祥明, 拉维加德维·沙姆巴沙穆提, 谭友爱
【申请人】马来西亚棕榈油协会
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2013年12月3日
【公告号】US20150320822, WO2014092532A1