的三磷酸钠和磷酸 盐缓冲液，余量为去离子水，磷酸盐缓冲液的加入量为使组合物的pH为5. 0。
[0039] 其中，地塞米松呈微粉状，其D50为3. Onm，最大粒径< 30nm，且粒径彡10nm的微 粉颗粒占总量的99%，其中粒径在l-5nm的微粉颗粒量占粒径< 10nm的微粉颗粒总量的 60 %，粒径在5-10nm的微粉颗粒量占粒径< 10nm的微粉颗粒总量的25 %，粒径< lnm的微 粉颗粒量占粒径< l〇nm的微粉颗粒总量的15%。
[0040] 2、注射液制备方法
[0041] 包括以下步骤：
[0042] (1)称取配方量的几丁糖溶于40%体积的去离子水中，并加入配方量的三磷酸 钠，充分搅拌均匀形成几丁糖纳米颗粒溶液；
[0043] (2)将配方量的地塞米松加入几丁糖纳米颗粒溶液中，并加入吐温-80,充分搅拌 均匀；
[0044] (3)向步骤⑵的溶液中加入氯化钠并加入余量去离子水，再加入磷酸盐缓冲液 调节pH至5. 0-8. 0,即得节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液。
[0045] 实施例3
[0046] 1、注射液配方
[0047] -种关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其包括以下组分：0. 8wt%的地塞米 松、1. Owt%的几丁糖、0· 6wt%的氯化钠、1. Owt%的吐温-80、0. 15wt%的三磷酸钠和磷酸 盐缓冲液，余量为去离子水，磷酸盐缓冲液的加入量为使组合物的pH为8. 0。
[0048] 其中，地塞米松呈微粉状，其D50为3. 0-4. Onm，最大粒径< 30nm，且粒径彡10nm 的微粉颗粒占总量的95 %，其中粒径在l-5nm的微粉颗粒量占粒径< lOnm的微粉颗粒总量 的63%，粒径在5-10nm的微粉颗粒量占粒径< lOnm的微粉颗粒总量的22%，粒径< lnm 的微粉颗粒量占粒径< l〇nm的微粉颗粒总量的15%。
[0049] 2、注射液制备方法
[0050] 包括以下步骤：
[0051] (1)称取配方量的几丁糖溶于40%体积的去离子水中，并加入配方量的三磷酸 钠，充分搅拌均匀形成几丁糖纳米颗粒溶液；
[0052] (2)将配方量的地塞米松加入几丁糖纳米颗粒溶液中，并加入吐温-80,充分搅拌 均匀；
[0053] (3)向步骤⑵的溶液中加入氯化钠并加入余量去离子水，再加入磷酸盐缓冲液 调节pH至5. 0-8. 0,即得节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液。
[0054] 二、动物学实验
[0055] 本实验主要研究关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液对创伤性关节炎家兔模型 疗效观察，具体步骤如下：
[0056] (1)选取8~15月龄2.0~3. Okg(早）家兔40只，30只用于造模，10只为正常 对照；
[0057] (2)将30只造模的兔子用戊巴比妥钠麻醉后，选择动物右侧膝关节消毒，按文献 的方法进行半月板切除术，然后将皮肤缝合，当天开始进行青霉素肌注，共7天；
[0058] (3)将30只造模的兔子随机分成A、B、C三组，每组10只，A组兔子用实施例1制 备的注射液给予每次2ml治疗，3天注射一次，连续6周注射；B组兔子用几丁糖注射液给予 每次2ml治疗，3天注射一次，连续6周注射；C组不予治疗；10只对照组为D组，D组的兔 子正常未受伤；
[0059] (4)术后12、14、16周后各取一次动物血液标本检测血样中TNF-α含量。将 TNF- a标准品加缓冲液lmL，调节浓度分别为0· 3、0· 9、2· 7、8· 1、24· 3 μ g/L，各取100 μ L加 入试管中，再依次加入125I-TNF及抗TNF- a血清1〇〇 μ L至标准管中，充分混匀后40°C放 置24h，再加入PR分离剂500 μ L混匀，放置20min，4°C离心，3500r/min离心25min。吸弃 上清，在自动γ计数器上测定沉淀数，绘制标准曲线并计算样品浓度，统计方差分析组间 差异。
[0060] (5)结果：四组家兔关节情况为C组< Β组< Α组< D组。造模后12周，Α组、Β 组、C组血浆及关节冲洗液TNF-a含量均明显高于D组（p < 0.01)，且12、14、16、18周各 个时间点的TNF- α含量，C组显著高于B组、A组和D组，A组各时间点的TNF- α含量均较 B组低（p < 0.05)，见表1。
[0061] 表1家兔不同时间点血浆、关节液中TNF- α含量结果
[0062]
[0064] 对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种 相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围 之内。
【主权项】
1. 一种关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其包括以下组分：〇. 3-0. 8wt %的地 塞米松、I. 0-1. 5wt %的几丁糖、0? 6-1. Owt %的等渗调节剂、L 0-2. Owt %的表面活性剂、 0. 03-0. 15wt%的交联剂和pH调节剂，余量为去离子水，pH调节剂的加入量为使组合物的 pH 为 5. 0-8. 0。2. 根据权利要求1所述的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其包括以下组分： 0? 5-0. 7wt%的地塞米松、L 2-1. 4wt%的几丁糖、0? 8-1. Owt%的等渗调节剂、2. Owt%的表 面活性剂、〇. 10-0. 15wt%的交联剂和pH调节剂，余量为去离子水，pH调节剂的加入量为使 组合物的pH为5.0-7. 0。3. 根据权利要求2所述的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其特征在于：地塞米 松呈微粉状，其D50为3. 0-4. Onm，最大粒径< 30nm，且粒径彡IOnm的微粉颗粒占总量的 90-99 %，其中粒径在l-5nm的微粉颗粒量占粒径< IOnm的微粉颗粒总量的60-65 %，粒径 在5-10nm的微粉颗粒量占粒径彡IOnm的微粉颗粒总量的20-25%。4. 根据权利要求2所述的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其特征在于：等渗调 节剂为氯化钠，表面活性剂为吐温-80。5. 根据权利要求1-4任一项所述的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，其特征在 于：交联剂为三磷酸钠，PH调节剂为磷酸盐缓冲液。6. -种如权利要求5所述的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液的制备方法，其特征 在于：包括以下步骤： (1) 称取配方量的几丁糖溶于40%体积的去离子水中，并加入配方量的交联剂，充分 搅拌均匀形成几丁糖纳米颗粒溶液； (2) 将配方量的地塞米松加入几丁糖纳米颗粒溶液中，并加入表面活性剂，充分搅拌均 匀； (3) 向步骤（2)的溶液中加入等渗调节剂并加入余量去离子水，再加入pH调节剂调节 pH至5. 0-8. 0,即得节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液。
【专利摘要】本发明属于医药技术领域，具体涉及一种关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液及其制备方法，其包括以下组分：0.3-0.8wt％的地塞米松、1.0-1.5wt％的几丁糖、0.6-1.0wt％的等渗调节剂、1.0-2.0wt％的表面活性剂、0.03-0.15wt％的交联剂和pH调节剂，余量为去离子水，pH调节剂的加入量为使组合物的pH为5.0-8.0。本发明制备的关节腔用地塞米松几丁糖纳米注射液，能够有效缓解并治疗关节炎引起的疼痛，治疗效果显著。
【IPC分类】A61P29/00, A61P19/02, A61K31/573, A61K9/08, A61K31/722
【公开号】CN105232453
【申请号】CN201510728474
【发明人】吴剑英, 陈晚华, 张军东, 常臻, 卜冰倩, 周庆玮, 周晓惠
【申请人】上海昊海生物科技股份有限公司
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年10月30日