专利名称：8-位取代的苯并氮杂作为类toll受体调节剂的制作方法
8-位取代的苯并氮杂萆作为类TOLL受体调节剂本申请根据35 U. S. C. § 119要求2005年8月19日提交的美国临 时专利申请60/710,004的权益，其全文通过引用结合到本文中。发明背景发明领域本发明涉及用于调节免疫功能的方法和组合物。更具体地讲，本 发明涉及用于调节TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导的组合物和方法。现有技术描述免疫系统刺激，包括先天免疫和适应性免疫之一或二者的刺激， 是一种能够导致宿主保护性或不利生理后果的复杂现象。近年来，人 们逐渐对先天免疫下的机理产生兴趣，相信其引发和支持适应性免 疫。这种兴趣部分由目前发现一系列高保守图式识别受体蛋白质引 起，这种蛋白质被称为类Toll受体(TLRs)，相信这种受体与病原体相 关性分子图式(PAMPs)的受体的先天免疫相关。因此，用于调节先天 免疫的组合物和方法最令人感兴趣，因为它们可影响包括自身免疫、 炎症、过敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病(GvHD)、感染、癌 症和免疫缺陷的病症的治疗方法。类Toll受体(TLRs)为I型跨膜蛋白质，这种蛋白质允许生物体(包 括哺乳动物)检测微生物，并引发先天免疫反应(Beutler, B.， Nature 2004， 430:257-263)。它们包含同源胞质域和富亮氨酸胞外域，并且一 般生成同源二聚体，同源二聚体感觉胞外(或内化)信号，随后通过衔 接分子如MyD88(髓样分化因子88)引发信号转导级联系统。在TLR的胞质域中有这种高同源性，以至于最初有人提出，对于所有的TLR 均存在相似的信号传导途径(Re, F.， Strominger， J. L.， Immunobiology 2004， 209:191-198)。实际上，所有的TLR均可激活NF-kB和MAP 激酶；然而，由TLR激活衍生的细胞因子/趋化因子释放分布似乎对 各TLR是唯一的。此外，TLR刺激的信号传导途径非常类似于细胞 因子受体IL-1R诱导的途径。这可能是由于这些受体共有的同源物， 即TIR(Toll/IL-lR同源结构)域。 一旦在TLR中激活TIR域并且征集 MyD88，就会激活丝氨酸/苏氨酸激酶的IRAK族，最终促进Ik-B降 解并激活NF-kB(MeansT. K.，等人，Life Sci. 2000， 68:241-258)。尽 管似乎设想此级联允许胞外刺激以增加胞内事件，但有证据表明一些 TLR迁移到细胞内体，在内体也可引发信号传导。此过程允许与被吞 没微生物紧密接触，并且适应这些受体在先天免疫反应中担当的角色 (Underhill， D. M., etal.， Nature 1999， 401:811-815)。此过程也可能 允许受损组织(例如，在炎性疾病中)或凋亡细胞释放的宿主核酸通过 内体呈递触发反应。在哺乳动物中，有与此快速反应协同的11种TLR。 数年前曾提出一种假设(Janeway， C. A., Jr.， Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 1989, 54:1-13)，先天免疫反应通过微生物导致的TLR激 活模型引发适应性免疫反应，现在这已得到证实。因此，由不同族感 染生物体呈递的病原体相关性分子图式(PAMP)产生先天免疫反应，包 括某些细胞因子、趋化因子和生长因子，随后引发精确适应性免疫反 应，以通过抗原呈递适应感染性病原体，从而制造抗体并产生细胞毒 素T细胞。格兰氏阴性菌脂多糖(LPS)—直被看作是诱导哺乳动物类似于败 血性休克的炎症反应的辅助物质和免疫刺激物质，也是一种药理学工 具。利用基因方法，i口、另寸出TLR4为LPS的受体。LPS是TLR4的激 动剂的这一发现说明TLR调节可用于疫苗和人类疾病的治疗 (Aderem, A.; Ulevitch， R.丄，Nature 2000， 406:782-787)。现在已认 识到，各种TLR激动剂可激活B细胞、嗜中性粒细胞、肥大细胞、7嗜酸性粒细胞、内皮细胞和数种上皮细胞，并且调节某些类型细胞的 增殖和凋亡。
至今，有些类似的TLR7和TLR8被表征为在内体分室中发现的 单条RNA的受体，因为被认为对病毒攻击的免疫反应重要。咪*莫 特， 一种^皮批准的局部抗病毒/4元癌症药物，最近纟皮描述成TLR7激动 剂，已证明这种激动剂对某些皮肤疾病有临床效果(Miller R. L., et al., Int. J. Immunopharm. 1999, 21:1-14)。这种小分子药物被描述成ssRNA 的结构片莫拟。TLR8最初描述于2000(Du， X., etal.， European Cytokine Network 2000 (Sept.), 11(3):362-371),并且很快被归属与病毒感染先 天免疫反应有关(Miettinen, M， et al., Genes and Immunity 2001 (Oct.), 2(6):349隱355)。
最近报告具有抗病毒活性的某些咪唑并喹啉化合物是TLR7和 TLR8的配体(Hemmi H.， et al.(2O02) Nat. Immunol. 3:196-200; Jurk M.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。咪唑并喹啉是具有抗病毒性质和抗 肿瘤性质的免疫细胞的有效合成活化剂。最近，Hemmi等人用野生型 巨噬细胞和MyD88-缺陷的鼠净艮告，两种咪唑并喹啉，咪喹莫特和瑞 喹莫德(R848),诱导肿瘤坏死因子(TNF)和白介素-12(IL-12)，并且只 在野生型细胞中激活NF-kB,与通过TLR激活一致(Hemmi H.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:196-200)。自TLR7缺乏而其他TLR不缺乏
咪唑并喹啉诱导脾B细胞剂量依赖性增生，并且在野生但不是11^7-/-鼠的细胞中激活细胞内信号传导级联。荧光素酶分析确定，人胚胎肾 细胞中的人TLR7但不是TLR2或TLR4的表达导致响应瑞唤莫德 NF-kB激活。Hemmi等人的发现提示，这些咪唑并查啉化合物为能够 通过TLR7诱导信号传导的TLR7的非天然配体。最近报告R848也是 人TLR8的配体(Jurk M., et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。
发明概述本文所述组合物用于调节体外和体内免疫反应。已发现此类组合 物用于多种临床应用，如用于治疗包括不需要的免疫活性的病症的方 法，包括炎性和自身免疫疾病。
更具体地讲，本发明的一个方面提供一种式I的化合物
及其代谢物、溶剂化物、互变异构体以及药学上可接受的盐和前药，
其中Y、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5a、 1151)和1151;如下限定。
本发明还涉及一种药物组合物，该组合物包含式I的化合物或其 溶剂化物、药学上可接受的前药、代谢物或药学上可接受的盐。
本发明的化合物可有利与其他已知的治疗剂组合使用。因此，本 发明还涉及一种药物组合物，该组合物包含治疗有效量的式I的化合 物或其溶剂化物、药学上可接受的前药、代谢物或药学上可接受的盐 以及第二治疗剂。
本发明还提供调节TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导的方法，所 述方法包括使表达TLR7和/或TLR8的细胞与有效量的式I的化合物 或其溶剂化物、药学上可接受的前药、代谢物或药学上可接受的盐接 触。在一个方面，所述方法抑制TLR7-和/或TLR8-介导的免疫刺激信 号传导。
本发明还提供调节患者TLR7-和/或TLR8-介导的免疫刺激的方 法，所述方法包括给予有TLR7-和/或TLR8-介导的免疫刺激发展或有 这种风险的患者有效量的式I的化合物或其溶剂化物、药学上可接受 的前药、代谢物或药学上可接受的盐，以抑制或促进患者TLR7-和/ 或TLR8-介导的免疫刺激。本发明还提供治疗可由调节TLR7-和/或TLR8-介导的细胞活性 治疗的病症或疾病的方法，所述方法包括给予有所述病症或疾病发展 或有这种风险的温血动物如哺乳动物(例如人)有效量的式I的化合物 或其溶剂化物、代谢物、药学上可接受的前药或药学上可接受的盐， 以治疗所述病症或疾病。
本发明还提供一种调节哺乳动物免疫系统的方法，所述方法包括 给予哺乳动物有效量的式I的化合物或其溶剂化物、代谢物、药学上 可接受的前药或药学上可接受的盐，以调节所述免疫系统。
本发明还提供在为有此类疾病或病症的哺乳动物(例如人)治疗所 述疾病或病症中用作药物的式I的化合物或其溶剂化物、药学上可接 受的前药或药学上可接受的盐。本发明还提供式I的化合物或其溶剂 化物、代谢物、药学上可接受的前药或药学上可接受的盐在制备药物 中的用途，所述药物用于治疗有此类疾病的哺乳动物(例如人)的所述 疾病禾口病症。
本发明还提供试剂盒，所述试剂盒包含一种或多种式I的化合物 或其溶剂化物、代谢物、药学上可接受的前药或药学上可接受的盐。 试剂盒还可包含第二化合物或包含第二药剂的制剂。
本发明的其他优点和新颖特征将部分在以下说明中阐明，部分在 详查以下说明时对本领域的技术人员显而易见，或者通过实施本发明 认识。本发明的优点可通过在附加权利要求书中特别指出的手段、组 合、组合物和方法实现和获得。
附图简述
附图结合本文并形成本说明书的一部分，图示本发明的非限制实 施方案，并与说明一起用于解释本发明的原理。在附图中
图1显示合成化合物7的反应方案。 图2显示合成化合物8的反应方案。 图3显示合成化合物12的反应方案。图4显示合成化合物24的反应方案。
发明详述
在某些方面，本发明提供用于调节TLR7-和/或TLR8-介导的信号 传导的组合物和方法。更具体地讲，本发明的一个方面提供一种式I 的化合物
及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药学上可接受的盐及前药， 其中
Y为CF2CF3、 CF2CF2RS或芳基或杂芳环，其中所述芳基和杂芳 环用一个或多个独立选自烯基、炔基、Br、 CN、 OH、 NR6R7、 C(-O)R8、 NR6S02R7、 (C-C6烷基)氨基、R6OC(=0)CH=CH2-、 SR6和S02R6的基 团取代，并且其中所述芳基和杂芳环任选另外用 一个或多个独立选自 F、 Cl、 CF3、 CF30-、 HCF20-、烷基、杂烷基和ArO-的基团取代；
R1、 W和R"虫立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、 环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂 烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个 独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(O)R6、 C(-O)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代，或者
R3和R4与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的碳环， 其中所述碳环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(O)OR6、 OC(=Q)R6、 C(=0)NRV、(C誦C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6 和502116的基团取代；
R2和R8独立选自H、 OR6、 NR6R7、烷基、烯基、炔基、杂烷基、 环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、 炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一 个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(-O)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C-C6烷基)氨基、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团 取代；
R5a、 1^和115°独立为H、 F、 Cl、 Br、 I、 OMe、 CH3, CH2F、 CHF2 或CFs并且
RS和R"独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环 烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所迷烷基、烯基、炔基、杂烷 基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独 立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C广C6烷基)絲、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基团取代，或者
R6和R7与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂环， 其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-Q烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6 和S02RS的基团取代。
在某些实施方案中，R1、 113和114分别为氢。
在某些实施方案中，R5a、 RSb和R^分别为氢。
在所述式I化合物的某些实施方案中，W为OR6。在某些实施方 案中，R"为烷基，如(1-4C)烷基。在特定实施方案中，116为乙基。
在所述式I化合物的某些实施方案中，W为NR6117。在某些实施 方案中，W和I^独立为H、烷基如(1-6C)烷基、或杂烷基如(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基。在特定实施方案中，W和I^独立为H、乙基、丙基
或CH2CH2OCH3。
在所述式I化合物的某些实施方案中，Y为芳基，如苯基。在某 些实施方案中，所述芳基用C—0)rS取代，如在对-rsc(o)苯基中。 在某些实施方案中，R8为OR6、服&7或杂环烷基。在某些实施方案 中，116和117独立为H或烷基，^。(l-6C)烷基。在某些其他实施方案中， 116和f与它们连接的氮原子一起形成4-6元氮杂环烷基环，如吡咯烷 基。在特定实施方案中，Y为
在所述式I化合物的某些实施方案中，Y为CF2CF3。 本文所用术语"烷基"是指具有1至12个碳原子(包括1至10个碳 原子、1至6个碳原子和1至4个碳原子)的饱和线形或支链单价烃基， 其中烷基可任选独立用 一个或多个下述取代基取代。烷基的实例包括 C!-C!2烃部分，如但不限于甲基(Me, -CH3)、乙基(Et, -CH2CH3)、 l-丙基(n-Pr，正丙基，-CH2CH2CH3)、 2-丙基(i-Pr，异丙基，-CH(CH3)2)、
1- 丁基(n-Bu,正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、 2-甲基-l-丙基(i-Bu，异丁 基，-CH2CH(CH3)2)、 2-丁基(s-Bu,仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、 2隱 曱基-2-丙基(t-Bu ，叔丁基，-C(CH3)3) 、 l-戊基(正戊基， -CH2CH2CH2CH2CH3) 、 2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3) 、 3-戊基 (-CH(CH2CH3)2)、 2-曱基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、 3-甲基-2-丁基 (-CH(CH3)CH(CH3)2)、 3-甲基-l-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、 2-曱基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、 l曙己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、 2隱己 基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3) 、 3- i|(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、
2- 甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3) 、 3-甲基-2-戊基 (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、 4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2) 、 2-曱基-3-戊基 (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、 2，3-二甲基-2-丁基(誦C(CH3)2CH(CH3)2)、 3，3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、 1-庚基和l-辛基。
本文所用术语"烯基"是指具有2至10个碳原子(包括2至6个碳 原子和2至4个碳原子)且具有至少一个双键的线形或支链单价烃基， 包括但不限于乙烯基、丙烯基、l-丁-3-烯基、l-戊-3-烯基、l-己-5-烯 基等，其中烯基可任选独立用一个或多个本文所述取代基取代，并且 包括具有"顺式"和"反式"取向或者"E"和"Z"取向的基团。术语"烯基" 包括烯丙基。
本文所用术语"炔基"是指2至12个碳原子(包括2至10个碳原 子、2至6个碳原子和2至4个碳原子)的包含至少一个畚键的线形 或支化单价烃基。实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔 -2-基等，其中炔基可任选独立用 一个或多个本文所述取代基取代。
本文所用术语"碳环"、"碳环基"或"环烷基"可互换使用，是指具 有3至12个碳原子(包括3至10个碳原子和3至6个碳原子)的饱和 或部分不饱和环状烃基。术语"环烷基，，包括单环和多环(例如二环和三 环)环烷基结构，其中多环结构4壬选包括稠合到饱和或部分不饱和环烷 基或杂环烷基环或芳基或杂芳基环的饱和或部分不饱和环烷基。环烷 基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。 二环碳环具有例如排成二环[4,5]、 [5,5、[5,6]或[6,6]系统的7-12个环 原子，具有排成二环[5,6]或[6，6]系统的9或IO个环原子，或排成桥连 系统，如二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。环烷基 可任选独立在一个或多个可取代位置用一个或多个本文所述取代基 取代。此环烷基可任选用例如一个或多个独立选自d-Cs烷基、CrC6 烷氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、M、单(C广C6)烷基氨基、二(C广C6)
烷基氨基、C2-Q;烯基、C2-C6炔基、d-C6囟代烷基、C广Ce卣代烷氧
基、氨基(d-C6)烷基、单(CrC6)烷基氨基(d-C6)烷基和二(C广C6)烷基 氨基(CV Cs)烷基的基团取代。术语"环烯基"是指具有3至10个碳原子(包括3至6个碳原子)且 在碳环内具有至少一个双键的部分不饱和环状烃基。
术语"杂烷基"是指1至12个碳原子(包括1至6个碳原子和1至 4个碳原子)的饱和线形或支链单价烃基，其中至少 一个碳原子用选自 N、 O或S的杂原子代替，并且其中所述基团可以为碳基团或杂原子 基团(即，杂原子可出现于基团的中间或末端)。杂烷基可任选独立用 一个或多个本文所述取代基取代。术语"杂烷基"包括烷氧基和杂烷氧 基。
本文所用术语"杂环烷基"、"杂环"和"杂环基"可互换使用，是指3 至8个环原子的饱和或部分不々包和碳环基团，其中至少一个环原子为 选自氮、氧和硫的杂原子，其余环原子为C,其中一个或多个环原子 可任选独立用一个或多个下述取代基取代。该基团可以为碳基团或杂 原子基团。术语"杂环"包括杂环烷氧基。该术语还包括包含稠合到芳 族基团的杂环的稠合环系统。"杂环烷基"也包括其中杂环基团与芳族 或杂芳族环稠合的基团。杂环烷基环的实例包括但不限于吡咯烷基、 四氢呋喃基、二氢吹喃基、四氢p塞汾基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、 四氢p塞喃基、哌啶子基、吗啉代、硫吗啉代(thiomorpholino)、缘嚼烷 基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷 基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂草基、 二氮杂草基、硫氮杂草基、1,2,3,6-四氢吡咬基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉 基、P引咮啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1,3-二氧 戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢 噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0] 己烷基、3-氮杂二环[4丄0]庚烷基、氮杂二环[2.2.2]己烷基、3H-巧I咮 基喹嗪基和N-吡啶基脲。在此定义范围内也可包括螺部分。如果可能， 由上列基团衍生的前述基团可C-连接或N-连接。例如，由吡咯衍生 的基团可以为吡咯-l-基(N-连接)或吡咯-3-基(C-连接)。此外，由咪唑 衍生的基团可以为咪唑-l-基(N-连接)或咪唑-3-基(C-连接)。其中2个环碳原子用氧代(=0)部分取代的杂环基团的实例为1,1-二氧代-硫吗
啉基。本文杂环基可不取代，或如规定用不同基团在一个或多个可取
代位置取代。例如，此杂环基可4壬选用例如一个或多个独立选自C,-C6 烷基、C广C6烷氧基、卤素、羟基、絲、硝基、氨基、单(C广C6)烷基 氨基、二(C广C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C广C6卤代烷基、
C广Q卣代烷氧基、氨基(C广C6)烷基、单(C广C6)烷基氨基(d-C6)烷基或
二(d-C6)烷基氨基(C,-C6)烷基的基团取代。
术语"芳基"是指具有单环(例如苯基)、多环(例如联苯)或其中至少
一个为芳族的多个稠合环(例如，1,2,3,4-四氪萘基、萘基等)的单价芳
族碳环基团，该基团任选用一个或多个独立选自例如卣素、低级烷基、 低级烷氧基、三氟甲基、芳基、杂芳基和羟基的取代基取代。
本文所用术语"杂芳基"是指5-、 6-或7-元环且包括5-10个原子的 稠合环系统(至少 一个为芳族)的单价芳族基团，该基团包含至少 一个 且最多4个选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的实例为吡咬基、咪唑 基、嘧啶基、p比哇基、三唑基、吡漆基、四唑基、呋喃基、p塞吩基、 异嗯唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异唾啉基、 p引咮基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、。引。秦基、2,3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑 基、三唑基、噻二唑基、p塞二p坐基、呔咱基、苯并吹咱基、苯并p塞吩 基、苯并噻唑基、苯并嗨唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘咬基和呋喃 并吡咬基(furopyridinyl)。在此定义范围内也可包括螺部分。杂芳基任 选用一个或多个独立选自例如卣素、低级烷基、低级烷氧基、卣代烷 基、芳基、杂芳基和羟基的取代基取代。
术语"卤素"表示氟、溴、氯和碟。
术语"氧代"表示=0。
通常，式I化合物的各个部分或官能团可任选由一个或多个取代 基取代。适用于本发明的取代基的实例包括但不限于氧代、囟素、氰 基、硝基、三氟甲基、二氟曱氧基、三氟甲M、叠氮基、-NR"S02R'、-S02NR'R"、 -C(O)R'、國C(O)OR'、 -OC(O)R'、 -NR"C(O)OR'、 -NR"C(O)R'、 -C(O)NR'R"、 -NR'R"、 -NR"'C(O)N'R" 、 -NR'"C(NCN)NR'R" 、 -OR'、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，其中 R'、 R"和R"'独立为H、烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、烯基、炔 基、芳基或杂芳基。
应了解，在连续使用两个或多个基团以限定连接到 一个结构的取 代基的情况下，将第一命名的基团认为是末端，而将最后命名的基团 认为是连接到所述结构。因此，例如，芳基烷基通过烷基连接到所述 结构。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心；因此，此化合物
作为单独(R)-或(S)-立体异构体或其混合物制备。除非另外指明，说明
书和权利要求书中特定化合物的描述和命名旨在包括其两种单独的 对映异构体、非对映异构体混合物、外消旋或其他化合物。因此，本 发明也包括所有此类异构体，包括式I的非对映异构体混合物、纯非 对映异构体和纯对映异构体。可通过本领域的技术人员已知的方法， 例如色谱法或分级结晶，根据物理化学差异将非对映异构体混合物分 离成单独的非对映异构体。可将对映异构体分离，可通过与适合光学 活性化合物(例如，醇)反应将^f映异构体混合物转化成非对映异构体 混合物，分离非对映异构体并将单独非对映异构体转化(例如水解)成 相应的纯对映异构体。对映异构体也可用手性HPLC柱分离。测定立 体化学和分离立体异构体的方法在本领域已知(讨论于"Advanced Organic Chemistry"， 4th edition, Chapter 4，丄March, John Wiley and Sons, New York, 1992)。
在本文所示结构中，在未^见定任何特定手性原子的立体化学时， 则指所有立体异构体，并且所有立体异构体均作为本发明的化合物被 包含。在由表示特定构型的实楔线或虚线指定立体化学结构时，也就 如此纟见定和确定了这种立体异构体。单一立体异构体，例如实质不含其立体异构体的对映异构体，可 通过用光学活性拆分剂用一种方法(如形成非对映异构体)拆分外消旋
混合物获得(Eliel， E. and Wilen ， S. Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons， Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr.， 113(3):283-302)。本发明的手性化合物 的外消旋混合物可由任何适合方法分离，包括(l)用手性化合物形成 离子、非对映异构盐，并由分级结晶或其他方法分离；(2)用手性衍生 化剂形成非对映异构化合物，分离非对映异构体，并转化成纯立体异 构体；和(3)直接在手性条件下分离实质纯或浓化的立体异构体。参阅 Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology, Irving W. Warner, Ed.， Marcel Dekker, Inc., New York(1993)。
在方法(l)下，形成非对映异构盐可使对映异构纯手性碱(如二甲 氧基马钱子碱、奎宁、麻黄碱、马钱子碱、a-甲基-P-苯基乙基胺(苯异 丙胺)等)与携带酸官能团(如羧酸和磺酸)的不对称化合物反应。可通过 分级结晶或离子色谱诱导非对映异构盐分离。为了分离氨基化合物的 光学异构体，加入手性羧酸或^黄酸(如樟脑石黄酸、酒石酸、扁桃酸或乳 酸)可使非对映异构盐形成。
或者，通过方法(2)，使待拆分基质与手性化合物的一种对映异构 体反应生成非对映异构对(E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994， p. 322)。形成非对映异
生物)反应，随后分离非对映异构体，并水解得到纯或浓化对映异构体。 测定光学纯度的一种方法包括在碱存在下制备外消旋混合物的手性 酉旨，例如薄荷酯(如(-)氯甲酸薄荷酯)或Mosher酯，乙酸a-曱氧基-a-(三 氟甲基)苯基酯(Jacob III, (1982) J. Org. Chem. 47:4165)，并分析存在 两种阻转异构对映异构体或非对映异构体的NMR谱。阻转异构体化 合物的稳定非对映异构体可按照分离阻转异构萘基异喹啉的方法通 过正相和反相色谱法(WO 96/15111)分离。利用方法(3),可用手性固定相由色谱分离两种对映异构体的外消旋混合物(Chiral Liquid Chromatography (1989) W.丄Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr. 513:375-378)。利用区分具有不对称 碳原子的其他手性分子的方法，如旋光和圓二色性，可区分浓化或纯 化的对映异构体。
除了式I的化合物外，本发明还包括此类化合物的溶剂化物、药 学上可接受的前药、药物活性的代谢物、溶剂化物和药学上可接受的 盐。
术语"溶剂化物"是指一种分子与 一种或多种溶剂分子的聚集物。 "药学上可接受的前药"是可在生理条件下或通过溶剂分解转化成 特定化合物或转化成此类化合物的药学上可接受的盐的化合物。前药 包括其中氨基酸残基或两种或多种(例如二、三或四种)氨基酸残基的 多肽链通过酰胺键或酯键共价结合到本发明化合物的游离氨基、鞋基 或羧酸基团的化合物。氨基酸残基包括但不限于一般由三字母符号指 定的20种天然氨基酸，也包4舌磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸、磷酸酪氨 酸、4-羟基月甫氨酸、羟基赖氨酸、demosine、 isodemosine、 y-羧基谷氨 酸盐、马尿酸、八氢吲哚-2-甲酸、抑胃酶氨酸、1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酸、青霉胺、鸟氨酸、3-曱基组氨酸、正缬氨酸、p-丙氨酸、"氨基 丁酸、瓜氨酸、高胱氨酸、高丝氨酸、曱基丙氨酸、对苯曱酰基苯基 丙氨酸、苯基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、肌氨酸、蛋氨酸砜和叔丁基甘 氨酸。本发明的前药的具体实例包括共价结合到磷酸盐残基或缬氨酸 残基的式I的化合物。
前药的其他类型也包含在内。例如，可将游离羧基衍生化为酰胺 或烷基酯。作为另一实例，可将含游离羟基的本发明的化合物衍生化 为前药，可通过使羟基转化成如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲 基氨基乙酸酯或磷酰基氧基曱氧基羰基的基团来衍生，如Advanced Drug Delivery Reviews, (1996)19:115所概述。也可包括羟基和氨基的 氨基甲酸酯前药，羟基的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。也包括羟基衍生化为(酰基氧基)甲基醚和(酰基氧基)乙基醚，其中酰基可以为任选 用包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者酰基
为上述氨基酸酯。此类型前药描述于J.Med. Chem., (1996)39:10。更 具体的实例包括用以下基团代替醇基团的氢原子，如(d-C6)烷酰基氧 基甲基、l-((C! -Q)烷酰基氧基)乙基、l-甲基-l-((C广C6)烷酰基氧基) 乙基、(C广C6)烷氧基羰基氧基甲基、、N-(C广C6)烷氧基羰基氨基甲基、 琥珀酰基、(d-C6)烷酰基、a-氨基(d-Ct)烷酰基、芳基酰基和a-氨基 酰基或a-氩基酰基-a-氨基酰基，其中各a-氨基酰基独立选自天然L-氨基酸、P(0)(OH)2、 ^(0)(0(。1-<:6)烷基)2或糖基(基团由半缩醛型糖 类去掉羟基产生)。
可使游离胺衍生为酰胺、》黄酰胺或膦酰胺。所有这些前药部分可 结合包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团。例如，前药可通过用 以下基团代替胺基团中的氢原子生成，如R-羰基、RO-羰基、NRR'-羰基(其中R和R'分别独立为(CVdo)烷基、(C3-C7)环烷基、节基，或 者R-羰基为天然a-氨基酰基或天然a-氨基酰基-天然a-氨基酰基)、 -C(OH)C(O)OY(其中Y为H、 (C广C6)烷基或苄基)、-C(OYo)Y"其中 Y0为(C广Ct)烷基，Y,为(C广Q0烷基、羧基(C广C6)烷基、氨基(C广C4) 烷基或单-N-或二-N,N-(C广C6)烷基氨基烷基)、-C(Y2)Y3(其中丫2为H 或甲基、Y3为单-N-或二-N,N-(d-C6)烷基氨基)、吗啉代、哌啶-l-基或 p比咯烷-基。
对于前药衍生物的其他实例，参阅，例如，a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard， (Elsevier, 1985)和Methods in Enzymology, Vol. 42， p. 309-396， edited by K. Widder， et al.(Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development ， edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs" by H. Bundgaard p. 113-191(1991); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, (1992); 8:1-38 d) H. Bundgaard， et al.， Journal of Pharmaceutical Sciences, (1988) 77:285;禾口 e) N. Kakeya,etal.， Chem. Pharm. Bull, (1984)32:692，各文献明确通过引用结合到 本文中。
"药物活性代谢物"为通过指定化合物或其盐在体内代谢产生的药 理学活性产物。化合物的代谢物可用本领域已知的常规技术鉴定，其 活性用如本文所述的检验方法测定。
化合物的前药和活性代谢物可用本领域已知的常规技术鉴定。
除非另外指明，"药学上可接受的盐"包括保持指定化合物的游离 酸和碱的生物学效力且不在生物学上或在其他方面不合乎需要的盐。 本发明的化合物可具有足够酸性、足够碱性或两种官能团，因此可与 多种无机或有机碱和无机和有机酸的任何一种反应生成药学上可接 受的盐。药学上可接受的盐的实例包括由本发明的化合物与无机或有 机酸或无机碱反应制备的盐，这些盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢 盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏 磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸 酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸酸、丙 炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马 酸盐、马来酸盐、丁炔-l,4-二酸盐、己炔-l,6-二酸盐、苯曱酸盐、氯 苯甲酸盐、曱基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯曱酸盐、甲氧基 苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯 基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、"羟基丁酸盐、乙醇酸 盐、酒石酸盐、曱磺酸盐、丙石黄酸盐、萘-l-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁 桃酸盐。由于本发明的单一化合物可包括多于一个酸性或碱性部分， 因此本发明的化合物可包括单一化合物中的单、二或三盐。
如果本发明的化合物为碱，则可由本领域可利用的任何适合方法 制备所需的药学上可接受的盐，例如用酸性化合物处理游离碱，尤其 用无机酸处理，如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有机 酸处理，如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁^)匕酸、富马酸、丙二酸、丙酮 酸、草酸、乙醇酸、水杨酸，吡喃糖苷酸(pyranosidylacid)如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、a-轻基酸如柠檬酸或酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或谷 氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如对甲苯磺酸或乙磺酸等。
如果本发明的化合物为酸，则可由任何适合方法制备所需的药学 上可接受的盐，例如用无机或有机碱处理游离酸。适合的无机盐的实 例包括用碱金属和碱土金属(如锂、钠、钾、钡和4丐)生成的盐。适合 的有机碱盐的实例包括例如铵、二千基铵、千基铵、2-羟基乙基铵、 双(2-羟基乙基)铵、苯基乙基千基胺、二节基乙二胺等盐。酸性部分 的其他盐包括例如用普鲁卡因、奎宁和N-甲基葡糖胺生成的盐与用碱 性氨基酸如甘氨酸、乌氨酸、组氨酸、苯基甘氨酸、赖氨酸和精氨酸 生成的盐。
本发明还提供不必为药学上可接受的盐但可作为中间体制备和/ 或纯化式I的化合物和/或分离式I化合物的对映异构体的式I化合物 的盐。
利用本领域可用技术且使用易得原料，可用如方案I所述的反应
路线和合成方案制备本发明的化合物，或者根据实施例和图1-4所述 的方法或者使用本领域已知的方法合成本发明的化合物。<formula>formula see original document page 22</formula>方案I在方案I中，在70-90°C DMF中利用或不利用吡咯烷(J. Org. Chem.， (1986), 51(26)， 5106-5110),通过用二甲基甲酰胺缩二曱醇处 理从式I的烷基芳烃制备式II的化合物。可在室温或接近室温的 THF/pH 7.2磷酸緩沖液中用Nal04使粗中间体(未显示)分裂成式II的 醛。在70-110。C(l-16小时)温度甲苯中用磷叶立德使式II的醛烯化， 以得到式III的化合物。可在乙酸中用铁粉由式III的化合物制备式IV 的化合物。可使反应在9(TC左右进行约3-14小时。
应注意到，制备本文所述式I的化合物可能需要保护远处的官能 团。保护需要根据官能性质和制备方法所用条件而变化，并且可很容 易由本领域的技术人员确定。这种保护/脱保护方法为本领域的技术人 员所熟悉。
本发明的化合物可用于多种应用。例如，在某些方面，本发明提 供用于调节TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导的方法。在需要响应适 合TLR7和/或TLR8配体或TLR7和/或TLR8信号传导激动剂改变 TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导时，本发明的方法有用。
本文所用术语"TLR7和/或TLR8配体"、"用于TLR7和/或TLR8 的配体"和"TLR7和/或TLR8信号传导激动剂"是指通过TIR8域以外 的TLR7和/或TLR8域直接或间接与TLR7和/或TLR8作用且诱导 TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导的式I化合物以外的分子。在某些 实施方案中，TLR7和/或TLR8配体为天然配体，即天然发现的TLR7 和/或TLR8配体。在某些实施方案中，TLR7和/或TLR8配体是指TLR7 和/或TLR8天然配体以外的分子，例如由人类活动制备的分子。
本文所用与TLR7和/或TLR8受体相关的术语"调节，，是指介导患 者药效反应，可通过(i)抑制或激活受体，或(ii)直接或间接影响受体活 性的正常调节。调节受体活性的化合物包括激动剂、拮抗剂、混合激 动剂/拮抗剂以及直接或间接影响受体活性调节的化合物。
术语"激动剂"是指与受体(例如TLR)组合能够产生细胞反应的化 合物。激动剂可以为直接结合到受体的配体。或者，通过例如(a)与直接结合到受体的另一种分子形成复合体或(b)另外改变另一种化合物 以便另一种化合物直接结合到所述受体，激动剂可与受体间接结合。 可将激动剂称为特定TLR的激动剂(例如TLR7激动剂和/或TLR8激 动剂)。
本文所用术语"拮抗剂"是指与激动剂或逆激动剂竟争结合到受 体，从而阻止激动剂或逆激动剂作用于受体的化合物。然而，拮抗剂 对组成性受体活性没有作用。更具体地讲，拮抗剂是分别在TLR7或 TLR8受体处抑制TLR7或TLR8活性的化合物。
"抑制"是指生物活性可测降低。因此，在本文中"抑制"或"抑制作 用"可以为正常活性水平的百分率。
在本发明的一个方面，治疗可由调节患者TLR7-和/或TLR8-介导 的细胞活性治疗的病症或疾病的方法包括给予所述患者有效治疗所 述病症或疾病的量的式I的组合物。术语"TLR7-和/或TLR8-介导的" 是指由TLR7和/或TLR8功能产生的生物或生物化学活性。
可由本发明方法治疗的病症和疾病包括但不限于癌症、免疫复合 物相关性疾病、炎性疾病、免疫缺陷、移植排斥、移植物抗宿主疾病、 过敏、哮喘、感染及脓毒。更具体地讲，用于治疗包括自身免疫、炎 症、过敏、译喘、移植排斥和GvHD的病症的方法一般利用响应适合 TLR7和/或TLR8配体或信号传导激动剂抑制TLR7-和/或TLR8-介导 的信号传导的式I的化合物。或者，用于治疗包括感染、癌症和免疫 缺陷的疾病的方法一般利用响应适合TLR7和/或TLR8配体增强 TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导的式I的化合物。在某些情况下， 可用组合物响应TLR7和/或TLR8配体或信号传导激动剂抑制或促进 TLR7-和/或TLR8-介导的信号传导。在其他情况下，可用组合物在患 者中抑制或促进TLR7-和/或TLR8-介导的免疫刺激。
除非另外指明，本文所用术语"治疗"是指哺乳动物(如人)的疾病 病症的至少緩解，包括但不限于调节和/或抑制这些疾病病症，和/或 减轻这些术语适用的疾病病症或者此疾病或病症的一种或多种症状。除非另外指明，本文所用术语"治疗"是指以上定义的"治疗"的治疗行 为。
本文所用术语"自身免疫疾病"、"自身免疫病症"和"自身免疫"是 指免疫介导的对宿主组织或器官的急性或慢性伤害。该术语包括细胞 和抗体介导的自身免疫现象以及器官特异和器官非特异自身免疫。自
身免疫疾病包括胰岛素依赖性糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑 狼疮、多发性硬化、动脉硬化和炎性肠疾病。自身免疫疾病还包括但 不限于关节强硬性脊推炎、自身免疫溶血性贫血、贝赫切特综合征、 古德帕斯彻综合征、格雷夫斯病、急性热病性多神经炎、桥本甲状腺 炎、自发性血小板减少、重症"几无力、恶性贫血、结节性多动脉炎、 多肌炎/皮肤肌炎、原发性胆道硬化、银屑病、结节病、硬化性胆管炎、
斯耶格伦综合征、全身性硬化症(硬皮病和肢端硬皮综合征(CREST syndrome))、高安氏动脉炎(Takayssu，s arteritis)、颞动脉炎和韦格纳肉 芽肿。自身免疫疾病也包括某些免疫复合物相关性疾病。
本文所用术语"癌"和"胂瘤"是指其中在患者中存在可测量量的宿 主起源的异常复制细胞的病症。癌可以是恶性癌或良性癌。癌或肿瘤 包括但不限于胆道癌、脑癌、乳腺癌、子宫颈癌、绒毛膜癌、结肠癌、 子宫内膜癌、食道癌、胃癌、上皮内瘤、白血病、淋巴瘤、肝癌、肺 癌(例如，小细胞和非小细胞)、黑素瘤、成神经细胞瘤、口腔癌、卵 巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肾癌、肉瘤、皮肤癌、睾丸癌、 甲状腺癌以及其他癌和肉瘤。癌可以为原发性或转移性。
本文所用术语"免疫复合物相关性疾病"是指任何具有免疫复合物 (包含抗体和由抗体特异结合的抗原的任何缀合物)产生和/或组织沉积 特征的疾病，包括但不限于系统性红斑狼疮(SLE)和相关结締组织疾 病、类风湿性关节炎、丙肝和乙肝相关性免疫复合物疾病(例如，冷球 蛋白血病)、贝赫切特综合征、自身免疫肾小球肾炎和与存在LDL/抗 -LDL免疫复合物相关的血管病变。本文所用术语"免疫缺陷"是指一种疾病或病症，其中患者的免疫 系统不以正常能力起作用，或者有用提高患者的免疫反应例如以消除 患者的肿瘤或癌(例如，脑、肺(例如小细胞和非小细胞)、卯巢、乳腺、 前列腺、结肠的肿瘤以及其他癌和肉瘤)或感染。免疫缺陷可以是获得 的，或者可以是先天的。
本文所用术语"移植排斥"是指由宿主以外的源产生的对组织或器 官的免疫介导的超急性、急性或慢性伤害。因此，该术语包括细胞和 抗体介导的排斥以及同种异体移植和异种移植两者的排斥。
"移植物抗宿主疾病"(GvHD)是移植的骨髓对抗患者自身组织的 反应。GVHD最常见于血髓给体与患者不相关或者给体与患者相关但 不完全匹配的情况。GVHD有两种形式 一种早期形式被称为急性 GVHD，在移植后不久出现白细胞增多时发生， 一种为晚期形式，被 称为慢性GVHD。
Th2介导的特应性疾病包括但不限于遗传过敏性皮炎或特应性湿 渗、嗜曙红细胞增多、哞喘、过敏、过敏性鼻炎和奥曼综合征(Ommen，s syndrome)。
本文所用术语"过敏"是指只寸物质(过敏原)的获得的过敏性。过敏 病症包括湿渗、过敏性鼻炎或鼻炎、花粉症、哞喘、荨麻渗和食物过 敏及其他特应性病症。
本文所用术语"啤喘"是指一种呼吸系统疾病，其特点是炎症、呼 吸道变窄并且呼吸道对吸入剂的反应性增加。哮喘是经常性的，虽然 不排除与特应性或过敏症状有耳关系。例如，哞喘可能由暴露于过敏原、 暴露于冷空气、呼吸感染和活动突发。
本文所用术语"感染"和相当术语"感染性疾病"是指其中在患者血 液或正常无菌组织或正常无菌腔室中存在可测量量的感染性生物体 或感染物的病症。感染性生物体和感染物包括病毒、细菌、真菌和寄 生虫。此术语包括急性和慢性感染及脓毒。本文所用术语"脓毒，，是指在血液(败血症)或其他身体组织中存在 细菌(菌血症)或其他感染性生物体或其毒素。
本发明还提供在为有此类疾病或病症的哺乳动物(例如人)治疗上 述疾病或病症中用作药物的式I的化合物或其代谢物、溶剂化物、互 变异构体或药学上可接受的前药或盐。本发明还提供式I的化合物或 其代谢物、溶剂化物、互变异构体或药学上可接受的前药或盐在制备 药物中的用途，所述药物用于为有此类疾病的哺乳动物(例如人)治疗 上述疾病和病症。
本发明还包括含式I的化合物的药物组合物和治疗可通过调节
TLR7-和/或TLR8-介导的细胞活性治疗的病症和疾病的方法，所述方 法通过给予需要的患者一种包含式I的化合物或其代谢物、溶剂化物、 互变异构体或药学上可接受的前药或盐的药物组合物进行。
为了用式I的化合物或其纟容剂化物、代谢物、互变异构体或药学 上可接受的前药或盐治病性治疗(包括预防性治疗)包括人的哺乳动 物， 一般根据标准药物规范配制成药物组合物。本发明的这一方面提 供一种药物组合物，该组合物包含如前所述的式I的化合物或其溶剂 化物、代谢物、互变异构体、药学上可接受的前药或盐以及药学上可 接受的稀释剂或载体。
为了制备本发明的药物组合物，将治疗或预防有效量的式I的化 合物或其溶剂化物、代谢物、互变异构体或药学上可接受的前药或盐 (单独或与本文所述其他治疗剂一起)与例如药学上可接受的载体根据 常规药物混合技术紧密混合，以产生一定剂量。载体可根据给药(例如 口服或肠胃外)所需的制剂形式采取多种形式。适合载体的实例包括任 何及所有溶剂、分散介质、佐剂、包衣料、抗菌和抗真菌剂、等渗和 吸收延迟剂、甜味剂、稳定剂(用于促进长期储存)、乳化剂、粘合剂、 增稠剂、盐、防腐剂、溶剂、分散介质、包衣料、抗菌和抗真菌剂、 等渗和吸收延迟剂、增香剂及为了制备特定治疗组合物所需的混杂物 质，如緩冲剂和吸收剂。此类介质和剂与药物活性物质的使用在本领域是熟知的。除了常规介质或剂与式I的化合物不相容外，其在治疗 组合物和制剂中的使用均为本发明所包含。也可将辅助活性成分加入 本文所述的组合物和制剂中。
本发明的组合物可以为适用于口服使用(例如，作为片剂、锭剂、 硬或软胶嚢、水性或油性混悬剂、乳剂、可分散粉剂或颗粒剂、糖浆 剂或酏剂)、局部使用(例如，作为乳膏剂、软膏剂、凝胶或水性或油 性溶液或混悬剂)、吸入给药(例如，作为精细粉剂或液体气雾剂)、吹 入给药(例如，作为精细粉剂)或肠胃外给药(例如，作为无菌水或油溶 液用于静脉、皮下或肌内给药或作为栓剂用于直肠给药)的形式。例如， 口服使用的组合物可包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、增香剂和 /或防腐剂。
适用于片剂制剂的药学上可接受的赋形剂包括例如惰性稀释剂，
如乳糖、碳酸钠、磷酸钓或碳酸4丐；粒化剂和崩解剂，如玉米淀粉或 藻酸(algenic acid);粘合剂，如淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸 或滑石粉；防腐剂，如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；和抗氧化剂，如抗 坏血酸。片剂可不包衣，或者用本领域熟知的常规包衣剂和方法包衣， 以改进其崩解和随之活性成分在胃肠道内的吸收，或者改善其稳定性 和/或外观。
适合口服使用的组合物可以为其中活性成分与惰性固体稀释剂 (例如碳酸钙、磷酸钙或高呤土)混合的硬明胶胶嚢的形式，或者作为 其中活性成分与水或油(如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合的软明胶胶嚢。
含水混悬剂 一般包含细粉状活性成分与 一种或多种悬浮剂，如羧 曱基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基曱基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡 咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂，如印磷脂或环氧烷与 脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或环氧乙烷与长链脂肪 醇的缩合产物(例如十七(亚乙氧基)鲸蜡醇 (heptadecaethyleneoxycetanol))、或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或环氧乙烷与 衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯脱水山梨糖 醇单油酸酯)。含水混悬剂也可包含一种或多种防腐剂(如对羟基苯甲 酸乙酯或丙酯)、抗氧化剂(如抗坏血酸)、着色剂、增香剂和/或甜味剂 (如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。
油性混悬剂可通过在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油) 或在矿物油(如液体石蜡)中悬浮活性成分配制。油性混悬剂也可包含 增稠剂，如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。也可加入如上所述的甜味剂和增 香剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如抗坏 血酸防腐。
适合通过加水制备含水混悬剂的可分散粉末和颗粒一般包含活 性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂。适合的分散 剂或湿润剂和悬浮剂由以上已>|是到的那些作为示例。也可存在其他赋 形剂，如甜味剂、增香剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以为水包油型乳剂形式。油相可以为植 物油(如橄榄油或花生油)或矿物油(例如液体石蜡)或任何这些油的混 合物。适合的乳化剂可以为例如天然胶(如阿拉伯胶或黄艮胶)、天然 磷脂(如大豆、卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脱 水山梨糖醇单油酸酯)和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物(如聚氧乙烯 脱水山梨糖醇单油酸酯)。乳剂也可包含甜味剂、增香剂和防腐剂。
糖浆剂和酏剂可用甜味剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜 或蔗糖配制，并且也可包含緩和剂、防腐剂、增香剂和/或着色剂。
药物组合物也可以为无菌可注射的水性或油性混悬剂的形式，可 根据已知方法用 一种或多种以上已提到的适合分散剂或湿润剂和悬 浮剂配制。对于胃肠外制剂，载体通常包含无菌水、含水氯化钠溶液、
1,3-丁二醇或任何其他适合的无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂。可 包含帮助分散的其他成分。当然，在无菌水待用并且保持为无菌时，也必须使组合物和栽体无菌。也可以制备可注射混悬剂，在此情况下 可利用适合的液体载体、悬浮剂等。
可通过混合活性成分与适合的非刺激性赋形剂制备栓剂，所述赋 形剂在常温为固体，但在直肠温度为液体，因此在直肠中将融化释放 药物。适合的赋形剂包括例如可可豆脂和聚乙二醇。
局部用药制剂，如乳膏剂、软膏剂、凝胶和水性或油性溶液或混 悬剂， 一般用本领域熟知的常》见方法配制活性成分与常规局部用药可 接受的媒剂或稀释剂获得。
由吹入给药的组合物可以为包含例如30pm或更小平均直径的颗 粒的精细粉末剂型，粉末可自身包含单独活性成分或用 一种或多种生 理可接受的载体(如乳糖)稀释。然后，可方便地将用于吹入的粉末保 持在包含例如l-50mg活性成分的嚢中供涡轮吸入器使用，如用于已 知剂色甘酸钠的吹入。
用于吸入给药的组合物可以为常规加压气雾剂的形式，这种形式 布置成将活性成分分散为含微细固体或液体微滴的气雾剂。可使用常 规气雾剂抛射剂，如挥发性氟化烃或烃，并且可很方便地将气雾剂装 置布置成能够分散计量活性成分。
用于透皮给药的组合物可以为本领域的技术人员熟知的透皮皮 肤贴剂形式。
其他递药系统可包括定时释药、延迟释药或緩释递药系统。此类 系统可避免化合物重复给药，为患者和医生增加便利。这些递药系统 的很多类型可以利用，并且为本领域的技术人员所熟悉。它们包括聚 合物基系统，如聚(丙交酯-乙交酯)、共聚草酸酯、聚己内酯、聚酯酰 胺、聚原酸酯、聚羟基丁酸和聚酐。含药物的前述聚合物的微嚢描述 于例如美国专利5,075,109中。递药系统也可包括非聚合物系统，这 些系统为脂类，包括甾醇(如胆甾醇)、胆甾醇酯和脂肪酸或中性脂 肪如甘油单酯、二酯和三酯；水凝胶释药系统；硅橡胶系统；肽基系 统；蜡包衣料；利用常规粘合剂和赋形剂的压制片剂；部分融合的植
30入物等。具体实例包括但不限于(a)其中本发明的剂以基质内形式包 含的腐蚀系统，如美国专利4,452,775、 4,675,189和5，736,152所述， 和(b)其中活性组分以控制速率从聚合物渗透的扩散系统，如美国专利 3,854,480、 5,133,974和5,407,686所述。此外可使用基于泵的硬件递 药系统，其中一些适用于植入。
关于制剂的其他资料，参见 Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Volume 5， Chapter 25.2， Pergamon Press 1990，此文献明确通过引用结合到本文 中。
与 一种或多种赋形剂组合制备单一剂型的本发明化合物的量当 然要根据要治疗的患者、疾病或病症的严重性、给药速率、化合物的 处置和开方医生的判断变化。然而，在单剂量或分开剂量中，有效剂 量为约0.001至约100mg/kg体重/天，例如约0.5至约35mg/kg体重/ 天。对于70kg的人，这将是约0.0035至2.5g/天，例如约0.05至约 2.5g/天。在某些情况下，低于前述范围下限的剂量可能足够，而在其 他情况下，可使用更大量剂量而不产生任何有害副作用，其条件为首 先将此较大剂量分成供一天给药的数个小剂量。关于给药途径和剂量 方案的其4也资泮+， 参见Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Volume 5， Chapter 25.3, Pergamon Press 1990，此文献明确通过引用结合到本文中。
根据熟知的医学原理，用于治疗或预防的式I化合物的剂量大小 当然要根据病症的性质和严重性、动物或患者的年龄和性别以及给药 途径而变化。应了解，对于任^T特定患者的具体剂量和给药频率可以 变化，并且取决于多种因素，包括具体式I化合物的活性、物种、患 者的年龄、体重， 一般健康状况、性别和饮食、给药方式和时间、排 泄率、药物组合以及特定病症的严重性，然而可由本领域的^支术人员 按常规确定。在一些实施方案中，式I的化合物可与另一种治疗剂组合("组合 治疗")给予个体患者(例如，在同一制剂或在单独制剂中)。式I的化合 物可与另一种治疗剂混合给药，或者可在单独的制剂中给药。当在单
独的制剂中给药时，式I的化合物与另一种治疗剂可基本同时或顺序 给药。
除了本发明的化合物外，这种组合治疗可包括常规手术或放射治
疗或化学治疗。此类化学治疗可包括一种或多种以下抗肿瘤剂种类 (i)抗增殖活性/抗肿瘤药物及其组合；(ii)细胞生长抑制剂；(iii)癌细胞 侵入抑制剂；(iv)生长因子功能抑制剂；(v)抗血管形成剂；(vi)血管损 伤剂；(vii)反义治疗药；(viii)基因治疗剂；(ix)干扰素；和(x)免疫治疗剂。
可与题述方法中式I化合物组合给药的用于治疗呼吸疾病的治疗 剂包括但不限于P-肾上腺素能药物，包括支气管扩张药，包括沙丁胺 醇、硫酸异丙肾上腺素、硫酸奥西那林、硫酸特布他林、乙酸吡布特 罗和沙美特罗、福莫特罗；类固醇，包括丙酸倍氯米松、氟尼缩松、 氟替卡松、布地奈德和曲安奈德。与治疗呼吸疾病结合使用的抗炎药 物包括类固醇，如丙酸倍氯米松、曲安奈德、氟尼缩松和氟替卡松。 其他抗炎药物包括色甘酸盐，如色甘酸二钠。获准成为支气管扩张药 的其他呼吸药物包括抗胆碱能药，包括异丙托溴铵。抗组胺药包括但 不限于苯海拉明、卡比沙明、氯马斯汀、茶苯海明、美吡拉敏、曲吡 那敏、氯苯那敏、溴苯那敏、羟嗪、赛克力*、美克洛，秦、氯环力嗪、 异丙溱、多西拉敏、氯雷他定和特非那定。具体的抗组胺药包括氮卓 汀(rhinolast)(Astelin⑧)、claratyne(Claritin ) 、 claratyne D(Claritin D )、 telfast(Allegra )、 Zyrtec⑧和伯克纳。
在一些实施方案中，式I的化合物与Y-千扰素(IFN-力、皮质甾类 如泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、可的松、地塞米松、 倍他米松等或其组合作为组合治疗给药用于治疗间质性肺病，例如特 发性肺纤维变性。在一些实施方案中，式I的化合物与一种已知治疗剂在组合疗法
中给药用于治疗CF。治疗CF使用的治疗剂包括但不限于抗生素；抗 炎剂；DNAse(例如，重组人DNAse;阿法链道酶、氯化钾和氯化钠 溶液；阿法链道酶)；溶粘蛋白剂(例如，N-乙酰基半胱氨酸； MucomystTM; Mucosil );减充血剂；支气管扩张剂(例如，茶碱、异 丙托溴铵)等。
在本发明的另一个实施方案中提供包含用于治疗上述疾病的物 质的制品或"试剂盒"。在一个实施方案中，试剂盒包括容器，容器包 含式I的组合物或其代谢物、溶剂化物、互变异构体或药学上可接受 的盐或前药。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗TLR7-和/或 TLR8-介导的疾病的试剂盒。在另一个实施方案中，本发明提供适用 于可由选择性调节患者免疫系统治疗的病症或疾病的试剂盒。试剂盒 可进一步包含在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。适合的容 器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可用多种材料制成， 如玻璃或塑料。容器容纳治疗病症有效量的式I的化合物或其药物制 剂，并且可具有无菌入口(例如，容器可以为具有塞子的静脉注射液袋 或瓶，塞子可被皮下注射针头穿透)。标签或包装说明书标明用组合物 治疗所选择的病症。在一个实施方案中，标签或包装说明书标明可用 包含式I化合物的组合物例如治疗可由调节TLR7-和/或TLR8-介导的 细胞活性治疗的疾病。标签或包装说明书也可标明可用组合物治疗其 他疾病。作为选择或另外，试剂盒可进一步包含第二容器，第二容器 包含药学上可接受的緩冲剂，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐緩沖盐 水、林格氏液和葡萄糖溶液。A人商业和用户的观点，可进一步包含其 他所需物质，包括其他緩沖剂、稀释剂、滤器、针头和注射器。
试剂盒还可包含式I化合物和(如果存在)第二药物制剂的给药说 明。例如，如果试剂盒包括含有式I化合物的第一组合物和第二药物 制剂，则试剂盒还可以包含第一和第二药物组合物同时、顺序或单独 给予需要的患者的说明。在另一个实施方案中，试剂盒适用于式I化合物的固体口服剂型 的递药，例如片剂或胶嚢。这种试剂盒包括例如一些单位剂量。这种 试剂盒可包括具有以预期使用顺序导向的剂量的卡。这种试剂盒的实 例为"泡罩包装"。泡罩包装在包装工业上熟知，并且广泛用于包装药 物单位剂型。如果需要，可提供记忆帮助，例如，以数字、字母或其 他标志形式，或者使用日程说明，指定其中能够给予剂量的治疗曰程 中的天数。
根据一个实施方案中，试剂盒包含(a)其中含有式I的化合物的第 一容器；和任选的(b)其中含有第二药物制剂的第二容器，其中第二药 物制剂包含第二化合物，第二化合物可有效治疗可由选择性调节 TLR7-和/或TLR8-介导的细胞活性治疗的病症或疾病。作为选择或另 外，试剂盒可进一步包含第三容器，第三容器包含药学上可接受的緩 冲剂，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐緩冲盐水、林格氏液和葡萄糖 溶液。从商业和用户的观点，可进一步包含其他所需物质，包括其他 緩沖剂、稀释剂、滤器、针头和注射器。
在试剂盒包含式I化合物的药物制剂和包含第二治疗剂的第二制 剂的某些其他实施方案中，试剂盒可包含容纳单独制剂的容器，如分 开的瓶或分开的箔小包装；然而，也可在单一不分开的容器中容纳单 独的组合物。通常，试剂盒包含单独组分给药的说明。在单独组分以 不同剂型给药(例如，口服和胃肠外)，以不同用药间隔给药时，或者 在处方医生需要滴入组合的单独组分时，试剂盒形式特别有利。
实施例
为说明本发明包含以下实施例。然而，应了解，这些实施例并不 限制本发明，只意味建议实施本发明的方法。本领域的技术人员应认 识到，可很容易地改变所述化学反应制备本发明的一些其他化合物，
通过对本领域技术人员显而易见的修改，例如，适当保护干扰基团，利用本领域已知的所述那些以外的其他适合试剂，和/或常规改变反应 条件，可成功地合成本发明的非示例性化合物。作为选择，应认为本 文公开或本领域已知的其他反应也可用于制备本发明的其他化合物。 在下述实施例中，除非另外指明，所有温度均为摄氏度。试剂购
自供应商，如Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI或Maybridge，
使用无需纯化，除非另外指明。
下述反应一般在氮或氩正压下或利用干燥管(除非另外说明)在无 水溶剂中进行，反应烧瓶通常配有橡胶塞，用于通过注射器引入底物 和试剂。玻璃器亚经烘箱干燥和/或加热干燥。
柱色谱在具有硅胶柱的Biotage系统(制造商Dyax Corporation) 或在氧化硅SepPak柱体(Waters)上进行。在以400MHz操作的Varian 仪器上记录NMR语图。'H NMR谱作为CDCl3溶液获得(以卯m 报告)，用氯仿作为参比标准(7.2Sppm)。在报告峰多重性时，使用以 下略语s(单峰)、d(二重峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(增宽)、dd(双 二重峰)、dt(双三重峰)。给出时，偶合常数以赫兹(Hz)报告。
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b氮杂草-4-甲酸乙酯
(7)
合成化合物(7)的反应方案显示于图1中。 步骤A:制备2，2，3，3，3-五氟丙酸钾
将五氟丙酸(20.5g， 183mmol)緩慢加入KOtBu(29.9g, 183mmo1) 在乙醚(400mL)的0。C溶液中。30分钟后，移去冰浴。在室温4觉拌4
实施例1小时后，过滤悬浮体，并用乙醚(200mL)洗涤滤饼。使用前，在真空 下将细的白色固体放置16小时。
步骤B:制备l-甲基-4-(全氟乙基)苯(2):
所用方法自Syn. Comm.， (1988)18(9):965-972改造。将碘化铜 (129g， 679腿o1)、 l-碘-4-甲基苯(l)(74g, 339mmol)和2,2,3,3，3-五氟 丙酸钾(120g, 594mmol)的混合物溶于DMF(500mL)，并且加热到 12(TC经历30分钟，然后在160。C加热4小时，随后使混合物冷却到 室温。加入水(200mL)和乙醚(2O0mL),搅拌30分钟后，将固体过滤， 并用乙醚洗涤。将相分离，有^/L层用盐水/水(3x250mL)洗涤。将有机 层干燥，浓缩得到深色油l-甲基-4-(全氟乙基)苯(66g， 92%)。
步骤C:制备l-甲基-2-硝基-4-(全氟乙基)苯(3):
利用硫酸和硝酸，由l-甲基-4-(全氟乙基)苯(1.95g， 9.28mmol)制 备，如EP 0418175所述(1.45g, 61%)。
步骤D:制备(E)-N，N-二甲基-!2-(2-硝基4-(全氟乙基)苯基)乙烯胺
(4):
将二曱基甲酰胺缩二甲醇(4.96g， 39.2mmol)加入到l-曱基-2-确基 画4-(全氟乙基)苯(10.0g， 39.2mmol)和吡咯烷(2.79g， 39.2mmol)在曱苯 (250mL)的溶液中。将混合物加热到回流16小时。冷却到室温后，将 混合物在真空下浓缩，并且将得到的油立即用于下一步反应。
步骤E:制备2-硝基-4-(全氟乙基)苯甲醛(5):
将NaI04(29.3g, 137.2mmol)加入到粗(E)隱N,N-二曱基-2-(2-硝基 -4-(全氟乙基)苯基)乙烯胺(12.2g， 39.2mmol)在THF(300mL)和pH 7.2 磷酸盐缓冲液(300mL)的溶液中。2.5小时后，移出等分部分( 0.3mL)， 过滤并干燥。此样品的质子NMR表明反应完全。除去固体，用EtOAc 洗涤滤饼。将滤液用盐水(2xl00mL)洗涤，干燥并浓缩。浓缩物通过 快速层析(100%己烷到5。/。EtOAc)纯化，得到2-硝基-4-(全氟乙基)苯甲 醛(5.4g, 52%)。步骤F:制备(E)-2-(氰基甲基)-3-(2-硝基-4-(全氟乙基)苯基)丙烯 酸乙酯(6):
将a-氰曱基乙氧羰亚乙基三苯基膦(8.55g, 22.1mmol)加入到2-硝 基-4-(全氟乙基)苯曱醛(5.4g, 20.1mmol)在曱苯(150mL)的溶液中。将 混合物加热到75。C经历30分钟。使反应冷却，并在真空下除去溶剂。 浓缩物通过快速层析(100。/。己烷到20。/。EtOAc)纯化，得到(E)-2-(氰基 曱基)-3-(2-硝基-4-(全氟乙基)苯基)丙烯酸乙酯(6.0(^, 79%)。
步骤G:制备(lE，4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-笨并lbl氮杂草-4-甲酸乙酯(7):
将铁粉(2.30g， 41.2mmol)加入到(E)-2-(氰基甲基)-3-(2-硝基-4-(全 氟乙基)苯基)丙烯酸乙酯P.60g， 6.87mmol)的溶液中。将混合物加热 到90。C经历5小时。冷却后，在真空下除去乙酸，将所得半固体溶于 50%K2CO3(100mL^。 EtOAc(100mL)。过滤混合物以除去不溶物质， 并将相分离。水相用EtOAc(2xl00mL)萃取。将合并的有机相干燥， 浓缩。浓缩物通过快速层析(100。/。CH2Cl2到2。/。MeOH)纯化，得到 (1E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酸乙酯(1.8g ， 74%)。
'H NMR (CDOb) 5 1.39 (t, 3H), 2.95 (s， 2H), 4.32 (q, 2H), 5.12 (br s， l-2H), 7.22-7.27 (m, 2H)， 7,47-7.51 (m, 2H), 7,80 (s, 1H).
图2显示合成通式(8)化合物的反应方案。如图2所示制备以下酰胺。
实施例2
合成(1￡，4虹)-2-氨基- ^双(2-甲氧基乙基)-8-(全氟乙基)-3H-苯 并[bj氮杂草4-甲酰胺(9)
37将三曱基铝(0.34mL 2.0M甲苯溶液)力口入到双(2-甲氧基乙基)胺
(92mg， 0.69mmol)(在DCE(3mL)中)。IO分钟后，加入固体(lE,4E)-2-
氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-甲酸乙酯(80mg, 0.23mmo1)，将
容器密封并加热到75。C经历16-20小时。冷却后，用饱和四水合酒石
酸钾钠盐(2mL)猝灭反应，20分钟后，使混合物在CH2Cl2(50mL)和盐
水(50mL)之间分配。将相分离，水相用CH2Cl2(2x20mL)萃取。将合并
的有机相干燥，浓缩。粗物质通过制备TLC(2， 0.5mm板，用具有4-6
滴NR)OH的5-10。/。MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化。
'HNMR (CDC13) (s， 2H),
3.36 (s, 6H)， 3.55-3.74 (m, 8H), 6邻(s, IH)， 7.20 (d 1H), 7.40 (d， 1H)' 7.39 (s' 1H).
实施例3
合成(lE，4E)-2-氨基-N，N-二乙基-8-(全氟乙基)-3H-笨并lb]氮杂草 -4-甲酰胺(10)
o
如实施例2所述制备化合物(9),得到17mg(21。/。)所需产物。
'HNMR (CDCI3) S 1.22-1.27 (迈，卿，1.78(s, 2H)， 3,49-3.56 (边，4H), 5.04 (br s, lh)， 6.98 (s,旧)，7,20 (4 1H), 7.38 (4 1H), 7.48 (s,旧).
实施例4
合成(lE，4E)-2-M-8-(全氟乙基)-N，N-二丙基-3H-苯并[bl氮杂蕈 -4-甲酰胺(11)<formula>formula see original document page 39</formula>
如实施例2所述制备化合物(IO)，得到24mg(28。/。)所需产物。
'HNMR (CDCh) 8 0,85-0.94 (m,卿,1.61-1.71 (m， 4H), 2.77 (s， 2H)， 3.40-3.55 (m， 4H), 6.81 (s, 1H), 7,21 (4 1H), 7.37 (4 1H)， 7,48 (s, 1H).
图3显示合成通式(12)化合物的反应方案。如图3所示制备以下 酰胺。
合成(lE，4E)-2-氨基-N-乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯并bl氮杂草-4-曱 酰胺(15)
步骤A:制备(lE，4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全氟乙基)-3H-笨并lb
氮杂草-4-甲酸乙酯(13):
将Boc肝(1.43g， 6.55mmol)加入到(lE,4E)-2-氨基-8-(全氟乙 基)-3H画苯并[b〗氮杂草-4-甲酸乙酯(7)(2.28g ， 6.55mmo1)在 CH2Cl2(150mL)的溶液中。24小时后，将混合物浓缩，并通过快速层 析(100%己烷到10Q/。EtOAc)纯化，得到(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全 氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂萆-4-甲酸乙酯(l.94g, 66%)。
步骤B:制备(lE，4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全氟乙基)-3H-苯并lb
氮杂草-4-甲酸(14):
将LiOHH20 (42mg， 1.0Ommol)加入到(1E,4E)-2-(叔丁氧基羰 基)-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂萆-4-甲酸乙酯在THF/H20(4:1,10mL)
实施例5的溶液中。4小时后，用10Q/o柠檬酸使混合物成酸性(pH 4)，并用 CH2Cl2(2xl00mL)萃取。将合并的有机相干燥，浓缩。所得物质无需 进一步纯化即可使用。
步骤C:制备(lE，4E)-2-jL^-N-乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯并lb]氮 杂萆-4-甲酰胺(15)
将盐酸乙基胺(41mg ， 0.500mmo1)加入到三乙胺(76mg ， 0.750mmo1)、 PyBOP(143mg, 0.275mmol)和(lE,4E)陽2-(叔丁氧基羰 基)-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-甲酸(105mg， 0.250mmol)在 DMF(4mL)的溶液中。搅拌14小时后，使混合物在EtOAc(50mL)和盐 水(100mL)之间分配。将相分离，有机层用水(3xl00mL)洗涤。将合并 的有机相干燥，浓缩。将粗残余物收入CH2CVTFA( 1:1， 50mL)中， 并且在室温搅拌2小时。在真空下除去挥发物，使残余物在EtOAc和 10%Na2CO3(l:l, 100mL)之间分配。将相分离，水相用EtOAc(2x50mL) 萃取。将合并的有机相干燥，浓缩。浓缩物通过制备TLC(2， 0.5mm 板，用具有4-6滴NH4OH的10%MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化，得到 (化,4￡)-2-氨基-:^乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂蕈-4-曱酰胺(6.5 mg， 8%)。
H NMR (CDCl]) 5 1.26
(t, 2H), 2.94 (s, 2H)' 3,41-3.48 (迈,2H)， 5.15 (br s, 1H)，锡(br s， 1H), 7.16 (s， 1H)> 7.22 (d， 1H)' 7.42 (d, 1H)， 7.47 (s, 1H).
实施例6
合成(lE，4E)画2-氨基-8陽(全氟乙基)-N画丙基國3H-苯并bl氮杂草-4陽曱 酰胺(16)
<formula>formula see original document page 40</formula>用丙基胺代替盐酸乙基胺，如实施例5所述制备化合物(16)，得 到16mg(45。/。)所需产物。
'HNMR(CDCl3)
5 0,99 (s,犯)，1.59-1,68 (in， 2H)， 2.94 (s, 2H)， 3,34-3.92 (m, 2H), 5.19 (br s， 1H), 6.14 (br s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7,42 (d, 1H)， 7.48 (s， 1H).
实施例7
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯并[bj氮杂蕈-4-甲酸 乙酯(24)
合成化合物(24)的反应方案显示于图4中。
步骤A:制备(E)-2-(4-溴-2-硝基苯基)-N，N-二甲基乙蜂胺(18):
将二曱基曱酰胺缩二曱醇(17.52g， 138.2mmol)加入到1-甲基-2-硝基-4-溴苯(17)(29.86g， 138.2mmol)在甲苯(200mL)的溶液中。将混合 物加热到回流14小时。冷却到室温后，将混合物在真空下浓缩，并 且将得到的油立即用于下 一 步反应。
步骤B:制备4-溴-2-硝基苯甲醛(19):
将NaIO4(56.0g, 262mmol)加入到粗(E)-2-(4-溴-2匿硝基苯基)-N,N画 二曱基乙烯胺(35.5g, 131mmol)在THF(300mL)和pH 7.2磷酸盐緩沖 液(300mL)的溶液中。除去固体，用EtOAc(200mL)洗涤滤饼。将滤液 用盐水(2xl00mL)洗涤，干燥并浓缩。浓缩物通过快速层析(5。/。EtOAc/ 己烷到10。/。EtOAc/己烷)纯化，得到4-溴-2-硝基苯曱醛(8.41g, 28%收率)。步骤C:制备(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(氰基曱基)丙烯酸乙酯
(20) :
将a-氰甲基乙氧羰亚乙基三苯基膦(6.10g, 15.7mmol)加入到4-溴-2-硝基苯甲醛(3.45g， 15.0mmol)在甲苯(15mL)的溶液中。将混合物 加热到75。C经历16小时。使反应冷却，并在真空下除去溶剂。浓缩 物通过快速层析(l00%己烷到20。/。EtOAc)纯化，得到米色固体(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(縣甲基)丙烯酸乙酯(2.25g， 44%收率)。
步骤D:制备(lE，4E)-2-氨基-8-溴-3H-苯并W氮杂蕈-4-甲酸乙酯
(21)
将铁粉(1.10g, 19.0mmol)加入到(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(氰基 甲基)丙烯酸乙酯(1.00g， 2.9mmol)在乙酸(25mL)的溶液中。将混合物 加热到90。C经历5小时。冷却后，在真空下除去乙酸，将所得半固体 溶于50%K2CO3(100mL>^ EtOAc(100mL)。过滤混合物以除去不溶物 质，并将相分离。水相用EtOAc(2xl00mL)萃取。将合并的有机相干 燥，浓缩。浓缩物通过快速层析(Biotage40m， 5%MeOH/CH2Cl2>Wt, 得到(lE,4E)-2-氨基-S-溴-3H-苯并[b]氮杂萆-4-曱酸乙酯(0.2g, 57%)。
步骤E:制备(1￡，4￡)-8-溴-2-(叔丁氧基羰基)-311-苯并[1)1氮杂草-4-甲酸乙酯(22):
将Boc酐(140mg，0.640mmol)加入到包含(lE,4E)-2-氨基-8-溴-3H曙 苯并[b]氮杂草-4-甲酸乙酯(198mg，0.640mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中。 在室温搅拌溶液72小时。将反应物浓缩至干，通过柱层析(Biotage 12m, 4:1己烷:EtOAc)纯化，得到白色固体(lE,4E)-8-溴-2-(叔丁氧基 羰基)-3H-苯并[b]氮杂萆-4-曱酸乙酯(245mg, 94%收率)。
步骤F:制备(lE，4E):(叔丁氧基羰基)-S-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯 并bj氮杂草-4-甲酸乙酯(23):
将乙酸4巴(80.5mg , 0.358mmo1)力。入到含K3P04(938mg ， 4.42mmol) 、 4-(吡咯烷-1 -羰基)苯基硼酸(7 85mg ， 3.58mmol)和(1 E,4E)-8-溴-2-(叔丁氧基羰基)-3H-苯并[b]氮杂蕈-4-甲酸乙酯(489mg， U9mmo1)的乙醇溶液(15mL)中。将反应加热到60。C经历2小时，然后冷却至室 温，并浓缩至干。棕色油通过制备LC板(100。/。EtOAc)纯化，得到棕 褐色油(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯并[b]氮杂蕈 -4-甲酸乙酯(277mg, 46%收率)。
步骤G:制备(lE，4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-笨并lb]氮杂 草-4-甲酸乙酯(24)
用1:4 TFA:CH2C12溶液(4mL)稀释(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰 基)-8-(吡咯烷-1-羰基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-甲酸乙酯(110mg ， 0.218mmol)。将反应在室温搅4f 1小时，然后用CH2C12##。有机相 用100/oK2CO3和盐水(30mL)洗涤。CH2C12溶液经过Na2S04干燥，过 滤，浓缩，得到黄色固体(lE,4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯并[b] 氮杂草-4-曱酸乙酯(88mg， 81%收率)。
2H), 3.49-3.52 (ra, 2H)' 3.66-3.69 (m, 2H), 4.30-4.35 (迈,2H), 7.32 (d, 1H), 7.46-7.49 (叫 2H)， 7.60 (d， 2H) 7,67 (d， 2H)， 7,84 (s, 1H).
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯并[bl氮杂草-4-曱酸乙酯(25)
用4-( 曱氧基羰基)苯基硼酸代替4-(吡咯烷-l-羰基)苯基硼酸，根 据实施例7所述的一般步骤制备化合物(25),得到黄色固体(lE,4E)-2-氨基_8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯并[b]氮杂萆-4-甲酸乙酯(17mg， 0.031mmo1， 54°/。收率)。
'H NMR (CDC13) S 1.39 & 3H), 1,88-1,99 (in, 4H)， 2,98 (s:
实施例8'HNMR (CDCl5) S 1.39 (t^ 3H)， 2.99 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.32 (q, 2H)， 7.33讽1H), 7.46-7.49 (m， 2H), 7.71卿2H)， 7,83 (s,旧)，8.09 (s, 1H), 8.11 (s, 1H).
实施例9
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(4-(曱基氨基甲酰基)苯基)-3H-苯并[bl氮杂 蕈-4-曱酸乙酯(26)
用4-(曱基氨基甲酰基)苯基硼酸代替4-(吡咯烷-1 -羰基)苯基硼酸，
根据实施例7所述的一般步骤制备化合物(26)，得到黄色固体
(1 E,4E)-2-氨基-8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-甲酸乙酯
(lmg, 0.031mmo1， 21%收率)。
'HNMR (CDCb) 5 1.39 (t， 3H), 2.98 (8， 2H), 3,06 (s, 3H)， 4,31-4.36 (q, 2H), 7,33 (dd, 1H), 7.46-7,49 (叫2H), 734 (d, 1H)， 7,47-7.52 (m， 3H), 7.32 (d， 2H) 7.83-7.85 (m, 3H).
实施例10
合成(1￡，4￡)-2-氨基-]\，]\-二丙基-8-(4-(吡咯烷-1-羰基)苯基)-311-苯并IW氮杂草-4-曱酰胺(27)通过与实施例2所述类似的方法用化合物(24)制备化合物(27)，得 到49mg(43。/。)所需化合物。
'HNMR(CDCl3)
S 0.93 (t, 6H)， 1.63-1.71 (m, 4H)， 1.89 (叫2H), 1.98 (m, 2H), 2,83 (s, 2H), 3.40-3,51 (m, 6〖1)， 3.67 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.3 (dd, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.49 " 1H), 7,64 (q, 4H).
用以下试验测定本发明化合物的活性。
实施例11 HEK/TLR试验
用不同浓度的化合物过夜培育人胚胎肾(HEK)细胞，这种细胞稳 定表达不同的人TLR基因，包括TLR7和TLR8以及NFkB-荧光素酶 报道基因。通过在650nm读取吸光度确定诱导的荧光素酶的量。本发 明的化合物具有100pM或更小的MCso，其中MCst^皮定义为见到50% 最大诱导的浓度。
实施例12
TLR7和TLR8的PBMC试验
用具有柠檬酸钠的BD Vacutainer Cell Preparation Tube(细胞制备 管)从人血分离外周血单核细胞(PBMC)。细胞用化合物培育过夜。 TLR8活性通过由ELISA检测上清液中TNFa的量测定。TLR7活性 通过由ELISA(R&D Systems)检测上清液中IFNa的量测定。本发明的 化合物具有100^M或更小的MC5()，其中MC5Q为见到50%最大诱导 的浓度。
前述说明仅为本发明原理的示例。此外，由于许多改进和变化对 本领域的技术人员显而易见，因此本发明不限于上述确切结构和所示 方法。因此，所有适合改进及同等物应在以下权利要求限定的本发明 的范围内。在说明书和以下权利要求中使用时，"包括"和"包含"旨在说明所 述特征、整数、组分或步骤的存在，但它们不排除一个或多个其他特 征、整数、组分、步骤或组的存在或加入。
权利要求
1.一种下式的化合物及其代谢物、溶剂化物、互变异构体和药学上可接受的盐其中Y为CF2CF3、CF2CF2R6或芳基或杂芳环，其中所述芳基和杂芳环用一个或多个独立选自烯基、炔基、Br、CN、OH、NR6R7、C(＝O)R8、NR6SO2R7、(C1-C6烷基)氨基、R6OC(＝O)CH＝CH2-、SR6和SO2R6的基团取代，并且其中所述芳基和杂芳环任选另外用一个或多个独立选自F、Cl、CF3、CF3O-、HCF2O-、烷基、杂烷基和ArO-的基团取代；R1、R3和R4独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代，或者R3和R4与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的碳环，其中所述碳环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代；R2和R8独立选自H、OR6、NR6R7、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代；R5a、R5b和R5c独立为H、F、Cl、Br、I、OMe、CH3，CH2F、CHF2或CF3；并且R6和R7独立选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、杂烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、芳基和杂芳基任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代，或者R6和R7与它们结合的原子一起形成饱和或部分不饱和的杂环，其中所述杂环任选用一个或多个独立选自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基团取代。
2. 权利要求1的化合物，其中112为OR6。
3. 权利要求2的化合物，其中W为烷基。
4. 权利要求3的化合物，其中116为乙基。
5. 权利要求1的化合物，其中112为NR6R7。
6. 权利要求5的化合物，其中116和117独立为H、烷基或杂烷基。
7. 权利要求6的化合物，其中RS和R"独立为H、乙基、丙基或 CH2CH2OCH3。
8. 权利要求1至7中任一项的化合物，其中Y为芳基。
9. 权利要求8的化合物，其中所述芳基用C(0)RS取代。
10. 权利要求9的化合物，其中RS为OR6、 ^6117或杂环烷基。
11. 权利要求10的化合物，其中116和117独立选自H和烷基。
12. 权利要求10的化合物，其中Y为
13. 权利要求1至7中任一项的化合物，其中Y为CF2CF3。
14. 权利要求1至13中任一项的化合物，其中R1、 R3、 R4、 R5a、RSb和R"分别为氬。
15. 权利要求1的化合物，所述化合物选自(1 E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酸乙酯； (1E,4E)-2-氨基-N,N-双(2-甲氧基乙基)-8-(全氟乙基)-3H-苯并[b] 氮杂蕈-4-曱酰胺；(lE,4E)-^氨基-N，N-二乙基-S-(全氟乙基)-!3H-苯并[b]氮杂萆-4-甲酰胺；(lE,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-N,N-二丙基-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酰胺；(1 &犯)_2-氨基-:^-乙基-8-(全氟乙基"H-苯并[b]氮杂萆-4-甲酰胺；(1 E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-N-丙基-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酰胺；(lE,4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-!3H-苯并[b]氮杂蕈-4-甲酸乙酯； (lE,4E)-2-氨基-8-(4-(曱氧基羰基)苯基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酸 乙酯；(lE,4E)-2-氨基-8-(4-(甲基氨基甲酰基)苯基)-3H-苯并[b]氮杂草-4-曱酸乙酯；(lE,4E)-2-氨基-N,N-二丙基-8-(4-(吡咯烷-l-羰基)苯基)-3H-苯并[b] 氮杂草-4-甲酰胺；及其药学上可接受的盐。
16. —种用于治疗TLR7-和/或TLR8-介导的病症的试剂盒，所迷 试剂盒包含a) 包含权利要求1至15中任一项的化合物的第一药物组合物；和b) 任选的使用说明书。
17. 权利要求16的试剂盒，所述试剂盒进一步包含(c)第二药物组 合物，其中所述第二药物组合物包含用于治疗TLR7-和/或TLR8-介导 的病症的第二化合物。
18. 权利要求17的试剂盒，所述试剂盒进一步包含用于对需要的 患者同时、顺序或单独给予所迷第一药物组合物和笫二药物组合物的 说明书。
19. 一种药物组合物，所述组合物包含权利要求1至15中任一项 的化合物与药学上可接受的稀释剂或载体。
20. 权利要求1至15中任一项的化合物，所述化合物用作治疗人 或动物的TLR7-和/或TLR8-介导的病症的药物。
21. 权利要求1至15中任一项的化合物用于制备药物的用途，所 述药物用于治疗人或动物的异常细胞生长病症。
22. —种治疗TLR7-和/或TLR8-介导的病症的方法，所述方法包 括给予需要的患者有效量的权利要求l的化合物。
23. —种调节患者的免疫系统的方法，所述方法包括给予需要的 患者有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明提供用于通过类Toll受体TLR7和/或TLR8调节信号传导的组合物和方法。所述组合物和方法用于治疗自身免疫、炎症、过敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病、感染、脓毒、癌症和免疫缺陷。
文档编号C07D403/10GK101309906SQ200680038096
公开日2008年11月19日 申请日期2006年8月17日 优先权日2005年8月19日
发明者C·T·伊尔里, G·A·多赫蒂, R·D·格罗内伯格, Z·琼斯 申请人:阿雷生物药品公司