专利名称：苯并三唑衍生物及其制法与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及苯并三唑衍生物及其制备方法与在制备抗癌药物中的应用。
背景技术：
近年来，大量的研究揭示了苯并三唑衍生物的多种生物学活性和临床应用潜能， 因此它们是一类重要的潜在性治疗药物。例如，IH-苯并三唑具有消炎，抗病毒等重要的药 理学活性。4，5，6，7_四溴-IH-苯并三唑(TBB)是一种非常好的蛋白激酶CK2的抑制剂，它 通过与核苷的变构结合位点的作用来发挥其作用。甾体C-17苯并噁唑对前列腺肿瘤细胞 的生长有抑制作用。一种苯并三唑与二价铜离子形成的配合物，[2-(4，5-二氢-IH-咪唑 基)-1Η-苯并三唑]-二氯铜，表现出很强的超氧化物歧化酶(SOD)的活性，而且对七种人 体肿瘤细胞株有抑制作用。人们合成了一系列的[4-(2氢-1，2，3-苯并三唑基)苯氧基]链 烷酸，并测试了它们作为过氧化物酶增殖体激活受体(PPARy)激动剂的生物活性。PPARy 对多种肿瘤细胞和体内肿瘤模型的生长都具有抑制作用或者诱导其凋亡作用。3-(1Η-苯并 [d] [1,2,3]三唑)-l-(4-甲氧基苯基)-l-丙酮-苯甲酸(BmOB)能通过增加氧化压，同时 伴随线粒体损伤来抑制人肝癌细胞的增殖。苯并三唑及其衍生物虽然在自然界中不存在，但是由于其具有抗肿瘤，抗真菌，消 炎，抗抑郁等广泛生物活性，因此对其作为潜在药物先导化合物的研究具有较大的潜力。
发明内容
本发明的目的在于提供一类苯并三唑衍生物以及它们的制备方法与用途。本发明的技术方案如下一类苯并三唑衍生物，其特征是它有如下通式
R式中A = H 或 OCH3 ；R = H 或 OH 或 OCH3 ；R，= H 或 OH 或 OCH3
上述的苯并三唑衍生物由下法制备IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇的制备:在IOml的1-庚醇溶液中加入788mg的邻硝基氯苯，缓慢滴加1. 2ml的水合胼，于 110-120°C下反应5h，加入40%的氢氧化钠溶液中和反应液，减压蒸馏，用IM的盐酸调pH 至3. 2-3. 5之间，过滤出沉淀物，用5%的冰氯化钠溶液洗涤，再用二氯甲烷/甲醇重结晶， 得到白色晶体IH-苯并[d] [1,2, 3]-三唑-1-醇。6-甲氧基-IH-苯并[d] [1，2，3]-三唑-1-醇的制备方法与IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇的类似，只不过其所用的反应物不是邻 硝基氯苯，而是938mg的1-氯-4-甲氧基-2-硝基苯，反应得到的6-甲氧基-IH-苯并[d] [1，2，3]-三唑-1-醇也为白色晶体。IH-苯并[d][l，2，3]_三唑的制备:在IOml的乙酸溶液中加入541mg 1，2_苯二胺，再加入25ml IM的亚硝酸钠水溶 液，于70-80°C反应lh，用40%的氢氧化钠溶液或者IM的盐酸调pH至4. 4-4. 6。过滤，用 5%的冰氯化钠溶液洗涤沉淀物，用二氯甲烷/甲醇重结晶，得到白色晶体IH-苯并[d] [1， 2，3]_三唑。一种制备本发明的苯并三唑衍生物的方法，它是在二氯甲烷中加入IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇，或6-甲氧基-IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇，或IH-苯并[d] [1， 2，3]_三唑，然后再加入苯甲酸或者羟基或甲氧基取代的苯甲酸，并加入1-(3_ 二甲氨基丙 基)-3_乙基碳二亚胺盐酸盐(EDOHCl)作为催化剂，按物质的量之比为1 1 1.2(苯 并三唑化合物苯甲酸或取代苯甲酸EDC · HCl)的原料比反应，室温反应24h，减压条件下 去除反应溶剂，柱层析纯化得到本发明的苯并三唑衍生物。上述制法中所述的柱层析的洗脱液为乙酸乙酯石油醚=1 1的溶液。本发明的苯并三唑衍生物，对人口腔上皮癌细胞，肺癌细胞与胃癌细胞有较强的 抗增殖活性，因此，本发明的苯并三唑衍生物可在制备抗肿瘤细胞增殖的药物中应用。
具体实施例方式实施例一 IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇的制备在IOml的1-庚醇溶液中加入788mg的邻硝基氯苯，缓慢滴加1. 2ml的水合胼，于 110-120°C下反应5h，加入40%的氢氧化钠溶液中和反应液，减压蒸馏，用IM的盐酸调pH 至3. 2-3. 5之间，过滤出沉淀物，用5%的冰氯化钠溶液洗涤，再用二氯甲烷/甲醇重结晶， 得到白色晶体1H-1，2，3-苯并三唑-1-醇。产率95%。Mp :155-157°C。实施例二 6-甲氧基-IH-苯并[d] [1，2，3]_三唑-1-醇的制备制备方法同实例一，用938mg的1_氯_4_甲氧基_2_硝基苯代替邻硝基氯苯，得 到的白色晶体即为6-甲氧基-1H-1，2，3-苯并三唑-1-醇。产率90%。Mp :169_171°C。实施例三IH-苯并[d] [1，2，3]-三唑的制备在IOml的乙酸溶液中加入541mg 1,2-苯二胺，再加入25ml IM的亚硝酸钠水溶 液，于70-80°C反应lh，用40%的氢氧化钠溶液/IM的盐酸调pH至4. 4-4. 6。过滤，用5% 的冰氯化钠溶液洗涤沉淀物，用二氯甲烷/甲醇重结晶，得到白色晶体IH-苯并[d][l，2， 3]-三唑。产率90%。Mp:98-100°C。
制备
实施例四3，5_ 二羟基苯甲酸-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑-1-醇酯(化合物1)的 将337mg实施例一得到的产物与385mg 3，5_ 二羟基苯甲酸加入到30ml 二氯甲烷 中，加入575mg EDC -HCl作为催化剂，在室温下反应24h。将反应体系旋干，石油醚/乙酸乙 酯=1 1进行柱层析纯化得到白色晶体即为最终产物。产率75%。Mp:193-194°C.ESI MS 272. 1 ([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 8. 11 (d, J = 8. lHz，lH，Bt Ar-H), 7. 60-7. 57 (m, 1H, Bt Ar-H)，7.46-7. 41 (m，2H，Bt Ar-H), 7. 46 (d, J = 2. 2Ηζ,2Η, Ar-H) ,6. 90 (d, J = 2. 2Hz, 1Η,Ar-H). Anal. Calc for C13H9N3O4 :C，57. 57 ；Η，3· 34 ；N, 15. 49% · Found :C，57. 42 ； Η，3· 61 ；N, 15. 32% ·实施例五3，5-二甲氧基苯甲酸-IH-苯并[d] [1，2，3]三唑-1-醇酯(化合物2)
的制备 制备方法同实施例四，以3，5- 二甲氧基苯甲酸代替3，5- 二羟基苯甲酸，得到白 色晶体即为最终产物。产率:84%o Mp :162-163°C . ESI MS :300· 1([Μ+Η]+). 1H NMR(CDCl3, δ ppm) :8. 10 (d, J = 8. 2Hz, 1Η, Bt Ar-H)，7. 58-7. 54 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 45-7. 40 (m, 2Η, BtAr-H), 7. 36 (d, J = 2. 2Ηζ，2Η，At-H)，6. 86 (d, J = 2. 2Hz, 1Η, Ar-H), 3. 98(s，6H，OCH3). Anal. Calc for C15H13N3O4 :C,60. 20 ；H, 4. 38 ；N, 14. 04 % . Found :C,60. 26 ；H, 4. 16 ；N, 14. 28% .实施例六3，4，5-三甲氧基苯甲酸-IH-苯并[d][l，2，3]三唑醇酯(化合物 3)的制备 制备方法同实施例四，以3，4，5-三甲氧基苯甲酸代替3，5- 二羟基苯甲酸，得到白 色晶体即为最终产物。产率:85%o Mp :175-176°C . ESI MS :330· I([I^H]+)-1H-WR(CDCl3) δ 8. 12 (1Η, d, J = 8. 4Hz, Bt Ar-H), 7. 60-7. 54 (1Η, m, Bt Ar-H), 7. 52 (2Η, s, Ar-H), 7· 50-7. 43(2H，m，Bt Ar_H)，4· 00 (3Η，s，OCH3)，3· 97 (6Η，s，OCH3) · 13C-WR(CDCl3) δ :162·4， 153. 4(2C)，144. 2，143. 6，128. 9，128. 7，124. 8，120. 6，119. 1，108. 4，108. 1 (2C)，61. 1， 56. 5(2C). EIMS (m/z) 212(100 % ), 197(56 % ), 195(27 % ), 119(12 % ),91(9% ). Anal. Calc forC16H15N305 :C，58. 36 ；H, 4. 59 ；N, 12. 76. Found :C，58. 65 ；H, 4. 62 ；N, 12. 64.实施例七苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑醇酯(化合物4)的 制备将413mg实施例二得到的产物与305mg苯甲酸加入到30ml 二氯甲烷中，加入 575mgEDOHCl作为催化剂，在室温下反应24h。将反应体系旋干，石油醚/乙酸乙酯= 1 1进行柱层析纯化得到白色晶体即为最终产物。产率81%。Mp :96-97°C .ESI MS 270. 1 ([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) :8· 26-8. 24 (m，2Η，Ar_H)，8· 02 (d，J = 8·4Ηζ，1Η， BtAr-H)，7. 78-7. 74 (m, 1H, Ar-H)，7. 60-7. 57 (m, 2H, Ar-H)，7. 46-7. 42 (m, 1H, Bt Ar-H)， 7. 10-7. 05 (m, 2H, Bt Ar-H)，3. 92 (s, 3H, OCH3). Anal. Calc for C14H11N3O3 :C，62. 45 ；H, 4. 12 ； N, 15. 61% · Found :C，62. 35 ；Η，4· 02 ；N, 15. 76% ·实施例八4-羟基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d][l，2，3]三唑醇酯(化合 物5)的制备 制备方法同实施例七，以4-羟基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为最终产 物。产率78%。Mp :185-186°C . ESI MS 286. 1([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 8. 05 (d, J = 8·2Ηζ，1Η，Bt Ar-H), 7. 95 (d, J = 8. 4Hz，2H，Ar_H)，7. 49-7. 44 (m，1H，Bt Ar-H), 7. 18-7. 13(m，2H，Bt Ar-H), 7. 21 (d, J = 8. 4Hz, 2H, Ar-H), 3. 95 (s, 3H, Bt OCH3). Anal. Calc forC14H1 凡04 :C, 58. 95 ；H, 3. 89 ；N, 14. 73% · Found :C，58. 81 ；H, 3. 78 ；N, 14. 85% ·实施例九3，5-二羟基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑醇酯 (化合物6)的制备制备方法同实施例七，以3，5_ 二羟基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为最终 产物。产率:72%o Mp 205-206°C · ESI MS 302. I(MJ+)-1H NMR(CDCl3, δ ppm) 8. 01 (d, J = 8. 4Hz，lH，Bt Ar-H), 7. 45-7. 41 (m, 1H, Bt Ar-H), 7. 36 (d, J = 2. 3Hz,2H, Ar-H), 7. 12-7. 07(m，2H，Bt Ar-H), 7. 20 (d, J = 8. 5Hz，2H，Ar-H), 6. 85 (d, J = 2. 3Hz, 1H, Ar-H)， 3. 91 (s，3H，Bt OCH3). Anal. Calc for C14H11N3O5: C, 55. 82 ；H, 3. 68 ；N, 13. 95 % . Found :C, 56. 02 ；H, 3. 78 ；N, 13. 78% ·实施例十3，4，5-三羟基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑醇酯 (化合物7)的制备 制备方法同实施例七，以3，4，5_三羟基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为 最终产物。产率68%。Mp 208-2090C . ESI MS 318. 1([M+H]+). 1H NMR(CDCl3, δ ppm) 7. 99 (d, J = 8. 5Hz, 1H, Bt Ar-H)，7. 58 (s, 2H, Ar-H)，7. 49-7. 45 (m, 1H, Bt Ar-H)，7. 36 (d, J = 2. 2Hz,2H, Ar-H)，7. 21-7. 15 (m, 2H, Bt Ar-H)，3. 95 (s, 3H, Bt OCH3). Anal. Calc for C14H11N3O6 :C, 53. 00 ；H, 3. 49 ；N, 13. 24% · Found :C，53. 07 ；H, 3. 62 ；N, 13. 05% ·实施例十-
(化合物8)的制备4-甲氧基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑-1-醇酯 制备方法同实施例七，以4-甲氧基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为最终产 物。产率83%。Mp :161-162°C . ESI MS 300. 1([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 8. 03 (d, J = 8·3Ηζ，1Η，Bt Ar-H), 7. 92 (d, J = 8. 5Hz, 2H, Ar-H), 7. 47-7. 43 (m, 1H, Bt Ar-H), 7. 15-7. 12(m，2H，Bt Ar-H), 7. 18 (d, J = 8. 5Ηζ，2Η，Ar-H), 4. 02(s，3H，Ar OCH3), 3. 93 (s, 3Η, BtOCH3). Anal. Calc for C15H13N3O4 :C，60. 20 ；H, 4. 38 ；N, 14. 04 % . Found :C，60. 02 ；H, 4. 56 ；N, 13. 92% ·实施例十二 3，5-二甲氧基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑-1-醇 酯(化合物9)的制备 制备方法同实施例七，以3，5_ 二甲氧基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为 最终产物。产率85%。Mp 176-177 0C . ESI MS 330. 1 ([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 7. 98 (d, J = 8. 4Hz，lH，Bt Ar_H)，7. 44-7. 40 (m，1H，Bt Ar-H), 7. 32 (d, J = 2. 2Hz，2H， Ar-H)，7. 10-7. 06 (m, 2H, Bt Ar-H)，7. 18 (d，J = 8. 5Hz，2H, Ar-H) ,6. 82 (d, J = 2. 2Hz，1H, Ar-H)，3. 96 (s,6H, Ar OCH3)，3. 88 (s, 3H, Bt OCH3). Anal. Calc for C16H15N3O5 :C，58. 36 ；H, 4. 59 ；N, 12. 76% · Found :C，58. 55 ；H, 4. 74 ；N, 12. 41% ·实施例十三3，4，5-三甲氧基苯甲酸-6-甲氧基-IH-苯并[d][l，2，3]三 唑-1-醇酯(化合物10)的制备制备方法同实施例七，以3，4，5-三甲氧基苯甲酸代替苯甲酸，得到白色晶体即为 最终产物。产率81%。Mp 182-183 0C . ESI MS 360. 1([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 7. 96 (d, J = 8. 5Hz, 1H, Bt Ar-H)，7. 55 (s, 2H, Ar-H)，7. 46-7. 42 (m, 1H, Bt Ar-H)，7. 32 (d, J =2. 2Hz,2H,Ar-H) ,7. 18-7. 14(m，2H，Bt Ar-H), 4. 02(s，3H，Ar OCH3)，3. 99 (s, 6H, ArOCH3)， 3. 91 (s，3H，Bt OCH3). Anal. Calc for C17H17N3O6 :C, 56. 82 ；H, 4. 77 ;N, 11. 69 % . Found :C, 56. 71 ；H, 4. 88 ；N, 11. 42% ·实施例十四1-(3，5-二羟基苯甲酰基)-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑(化合物11) 的制备 将298mg实施例三得到的产物与385mg 3，5_ 二羟基苯甲酸加入到30ml 二氯甲烷 中，加入575mg EDC -HCl作为催化剂，在室温下反应24h。将反应体系旋干，石油醚/乙酸乙 酯=1 1进行柱层析纯化得到白色晶体即为最终产物。产率78%。Mp:144-145°C.ESI MS 256. 1 ([M+H]+). 1H NMR (CDCl3, δ ppm) 8. 36 (d, J = 8. 4Hz, 1Η, Bt Ar-H), 8. 19-8. 16 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 73-7. 69 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 55-7. 51 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 46 (d, J = 2. 3Hz, 2H, At-H) ,6. 95 (d, J = 2. 3Hz,lH, Ar-H). Anal. Calc for C13H9N3O3 :C,61. 18 ；H, 3. 55 ；N, 16. 46% · Found :C，61. 26 ；H, 3. 42 ；N, 16. 39% ·实施例十五1-(3，4，5-三羟基苯甲酰基)-IH-苯并[d] [1,2,3]三唑(化合物12)
的制备 制备方法同实施例十四，以3，4，5_三羟基苯甲酸代替3，5_二羟基苯甲酸，得到白 色晶体即为最终产物。产率:75%o Mp :157-158°C . ESI MS :272· 1([Μ+Η]+). 1H NMR(CDCl3, δ ppm) :8. 35 (d, J = 8. 3Hz, 1Η, Bt Ar-H)，8. 16-8. 13 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 78-7. 75 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 59-7. 55 (m, 1Η, Bt Ar-H)，7. 27 (s, 2H, At-H) · Anal. Calc for C13H9N3O4 :C，57. 57 ； H, 3. 34 ；N, 15. 49% · Found :C，57. 51 ；H, 3. 51 ；N, 15. 58% ·实施例十六苯并三唑衍生物对三种人肿瘤细胞的抗增殖活性研究(1)肿瘤细胞的培养在含有5%胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养人口腔上皮 KB癌细胞，肺癌H460癌细胞以及胃癌MKN45癌细胞。将处于对数生长期的癌细胞以5000 个细胞每毫升的密度培养在24号的培养皿中。(2)加药往培养的肿瘤细胞中加入不同浓度的化合物，继续培养72小时。使用亚甲基蓝法去评价测试药物对上述肿瘤细胞生长的影响，通过与阳性对照组的比较，得到化 合物对上述三种肿瘤细胞的50%抑制浓度(IC5tl)。此处所用的药性对照组药物为阿霉素。
本发明的苯并三唑衍生物对及阳性对照组对KB，H460以及MKN45癌细胞的抑制 IC50值如下表所示。
权利要求
一类苯并三唑衍生物，其特征是它有如下通式式中A＝H或OCH3；R＝H或OH或OCH3；R’＝H或OH或OCH3。FSA00000181603100011.tif
2.一种制备权利要求1所述的苯并三唑衍生物的方法，其特征是它是在二氯甲烷中 加入IH-苯并[d] [1，2，3]-三唑-1-醇，或6-甲氧基-IH-苯并[d] [1，2，3]-三唑-1-醇， 或IH-苯并[d][l，2，3]_三唑，然后再加入苯甲酸或者羟基或甲氧基取代的苯甲酸，并加入 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC · HCl)作为催化剂，按物质的量之比 为苯并三唑化合物苯甲酸或取代苯甲酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸 盐=1 1 1.2的原料比反应，室温反应24h，减压条件下去除反应溶剂，柱层析纯化得到 苯并三唑衍生物。
3.根据权利要求2所述制法，其特征是所述的柱层析的洗脱液为乙酸乙酯石油醚 =1:1的溶液。
4.权利要求1所述的苯并三唑衍生物在制备口腔上皮癌细胞，肺癌细胞以及胃癌细胞 的抗增殖性药物中的应用。
全文摘要
一类苯并三唑衍生物，其特征是它有如下通式式中A＝H或OCH3；R＝H或OH或OCH3；R’＝H或OH或OCH3。本发明的苯并三唑衍生物，对人口腔上皮癌细胞，肺癌细胞与胃癌细胞有较强的抗增殖活性。因此，本发明的苯并三唑衍生物可在制备抗肿瘤细胞增殖的药物中应用。本发明公开了其制法。
文档编号C07D249/18GK101928254SQ20101022290
公开日2010年12月29日 申请日期2010年7月9日 优先权日2010年7月9日
发明者付杰, 张志明, 朱海亮 申请人:南京大学