专利名称：制备雌甾氨基酸酯的中间体化合物及其合成方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，特别是一种制备雌留氨基酸酯的中间体化合物及其合成方 法。
背景技术：
2-甲氧基雌二醇(2-ME)作为激素类化合物是雌二醇在体内的代谢终产物。近几 年发现其具有非常广谱的抗肿瘤活性，美国国家癌症研究所(NCI)研究2-ME对60种肿瘤 细胞作用结果显示，2-ME对绝大多数肿瘤细胞明显的抑制作用。研究还表明2-ME与雌激素 受体亲和力低，只作用于增值活跃的细胞，而对静止细胞无作用，因此对正常细胞和组织无 副作用。2-ME作用机制上与传统抗肿瘤药物不同，可以抑制一些新生血管的生长，阻止血管 肿瘤的生长，使其缺少分裂所需的必要的营养而衰亡。但是，2-ME在抗肿瘤方面也有自身的 缺陷，阻碍其在临床上的广泛应用，如水溶性差，导致生物利用度低等等。根据研究2-ME的构效关系可知若在母核A环及B环进行结构修饰，将会使其抗 肿瘤活性降低，所以在母核C环及D环上的修饰就成为了改善2-ME活性及水溶性的主要研 究方向，其中D环上的修饰相对而言更具有吸引力。文献报道，17位羟基被F取代后，其化合 物抗肿瘤活性消失，而当被亚甲基取代后，其化合物保持与2-ME相当的抗肿瘤活性(Abby Ho等，2006)，因此通过2-ME类似物17位上进行结构修饰，更有希望得到既保持或增强抗肿 瘤活性又增加其水溶性的新的抗肿瘤化合物，从而提高其生物利用度，但如何制备出这种 抗肿瘤化合物未见有报道。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明之目的就是提供一种制备雌留氨基 酸酯的中间体化合物及其合成方法，可有效解决制备保持或增强抗肿瘤活性，又增加其水 溶性的新的抗肿瘤化合物雌留氨基酸酯制备时中间体化合物的制备问题。本发明解决的技术方案是，该化合物是由氨基酸或小分子肽类和留体母核制成， 所说的雌甾氨基酸酯的中间体化合物的分子结构通式为
权利要求
1. 一种雌留氨基酸酯的中间体化合物，其特征在于，该化合物是由氨基酸或小分子肽 类和留体母核制成，所说的雌留氨基酸酯的中间体化合物的分子结构通式为所说的雌甾氨基酸酯的中间体化合物及甾体母核的结构通式中=R1为N-苄氧羰 基-β -丙氨酸残基、N-苄氧羰基-L-丙氨酸残基、N-苄氧羰基-D-丙氨酸残基、N-苄氧羰 基-L-苯丙氨酸残基、N-苄氧羰基-D-苯丙氨酸残基、N-苄氧羰基-L-亮氨酸残基、N-苄 氧羰基-D-亮氨酸残基、N-苄氧羰基-L-异亮氨酸残基、N-苄氧羰基-D-异亮氨酸残基、 N-苄氧羰基-L-赖氨酸残基、N-苄氧羰基-D-赖氨酸残基、N-苄氧羰基-L-精氨酸残基、 N-苄氧羰基-D-精氨酸残基、N-苄氧羰基-L-组氨酸残基、N-苄氧羰基-D-组氨酸残基、 N-苄氧羰基-L-天冬氨酸残基、N-苄氧羰基-D-天冬氨酸残基、N-苄氧羰基-L-半胱氨酸 残基、N-苄氧羰基-D-半胱氨酸残基、N-苄氧羰基-L-缬氨酸残基、N-苄氧羰基-D-缬氨酸 残基、N-苄氧羰基-L-脯氨酸残基、N-苄氧羰基-D-脯氨酸残基、N-苄氧羰基-L-色氨酸残 基、N-苄氧羰基-D-色氨酸残基、N-苄氧羰基-L-酪氨酸残基、N-苄氧羰基-D-酪氨酸残 基、N-苄氧羰基-L-丝氨酸残基、N-苄氧羰基-D-丝氨酸残基、N-苄氧羰基-L-天冬酰胺 残基、N-苄氧羰基-D-天冬酰胺残基、N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺残基、N-苄氧羰基-D-谷 氨酰胺残基、N-苄氧羰基-L-苏氨酸残基、N-苄氧羰基-D-苏氨酸残基中的一种，以上各 种残基均为其对应的N-苄氧羰基氨基酸去掉羧基上的羟基后的结构；或者R1为Cbz-R，其 中Cbz为苄氧羰基，R为由β -丙氨酸、L-丙氨酸、L-苯丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、 L-赖氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-缬氨酸L-色氨酸、L-酪氨 酸、L-丝氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-苏氨酸中的2-4个组成的小分子肽类的残基， 此肽类残基为其对应的小分子肽去掉羧基上的羟基及伯胺上的一个H后的基团，且伯胺去 掉H后与Cbz中的羰基以酰胺键相连接；&为1 6个碳原子的直连或支链的烷基或含有1 2个杂原子的1 6个碳原子的 直连或支链的烷基，杂原子为N，0，S中的一种或两种，且&基团中不含有羟基、羧基、氨基 中的任一个基团；民为H或10个碳以内的碳氢化合物或含有1 2个杂原子的10个碳以 内的碳氢化合物，其中杂原子为N，0，S中的一种或两种，且民基团中不含有羟基、羧基、氨 基中的任一个基团。
2.权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在于，制 备步骤是(1)、在_5°C 15°C，将氨基酸或小分子肽类溶解于质量浓度为8% -10%的氢氧化 所说的留体母核的分子结构通式为钠水溶液或者碳酸氢钠饱和溶液中，每Iml的质量浓度为8 %-10 %的氢氧化钠水溶液溶解 2. 5mmol的氨基酸或小分子肽类或者每Iml碳酸氢钠饱和溶液中溶解0. 2mmol氨基酸或小 分子肽类，得溶解液，边搅拌边用氨基酸或小分子肽类摩尔数的1-1. 5倍量的氯甲酸苄酯 以1滴/3-10秒的速度滴加到溶解液中进行反应，若将氨基酸或小分子肽类溶解于质量浓 度为8% -10%的氢氧化钠水溶液中时，在溶解液中需滴加氢氧化钠水溶液保持PH = 8 9，滴完，置于10°C -30°C下，搅拌反应至用茚三酮为显色剂显色至无紫色，或做薄层检测， 薄层检测的目的在于，测定溶液是否反应完全，只有反应完全后，才可进行下一步的操作， 以下同，测得溶液完全反应后，再每次用反应溶液体积0. 5-1. 3倍量的乙醚洗涤3次，弃去 乙醚，得水相，水相用质量浓度为30% -40%的浓盐酸调PH为1-3，出现乳白色固体，对出现 乳白色固体后的液体每次用与乙醚同量的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用每次与 乙醚同量的蒸馏水洗涤2次、饱和食盐水洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥6- 小时，抽滤， 滤液减压浓缩，用体积比为1 2-5的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过层析 柱纯化或过柱色谱纯化，得化合物甲；0)、在10-30°〇，将摩尔比为1-1.2 1的化合物甲和甾体母核的混合物溶解于反应溶 剂中，每IOOml反应溶剂中溶解2mm0l-5mm0l留体母核，边搅拌边先后加入缩合剂1，3_ 二 环己基碳二亚胺和催化剂4- 二甲氨基吡啶，留体母核和1，3_ 二环己基碳二亚胺的摩尔比 为1 1-1.5 ;4-二甲氨基吡啶和1，3_ 二环己基碳二亚胺的摩尔比为1 30-100，搅拌反 应IOmin后，补加上述缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺量的0. 4-0. 8倍量的另备的缩合剂1， 3-二环己基碳二亚胺，以使留体母核完全反应，搅拌10-20小时，做薄层检测，过滤，滤液减 压浓缩，用体积比为1 2-5的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过柱色谱纯化， 或用乙酸乙酯溶解，过滤，弃去固体，滤液减压浓缩，用甲醇或无水乙醇重结晶纯化，纯化后 即得雌留氨基酸酯的中间体化合物，其分子结构通式为
3.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在-5°C，将IOmmol的β -丙氨酸溶解于4. Oml质量浓度为10 %的氢氧化钠水溶液中，得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/4秒的速度滴加到溶解液中进行 反应，并滴加质量浓度为10%的氢氧化钠水溶液保持PH为8，滴完，置于10°C下，搅拌反应 15小时，用茚三酮为显色剂显色无紫色，再用5ml/次的乙醚洗涤3次，弃去乙醚，得水相， 水相用质量浓度为30%的浓盐酸调PH至3，出现乳白色固体，对出现乳白色固体后的液体 用5ml/次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用5ml/次的蒸馏水洗涤2次、5ml的饱 和食盐水洗涤1次，再用无水硫酸镁干燥10小时，抽滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，以 体积比为1 3的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过层析柱纯化，得白色固体 N-苄氧羰基-β-丙氨酸；O)、在10°C，将3. 2mmol的N-苄氧羰基-β -丙氨酸和3. Ommol的2-甲氧基-3-苄 氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶于75ml 二氯甲烷中，边搅拌边先后加入3. Ommol缩 合剂1，3-二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4-二甲氨基吡啶，搅拌反应lOmin，补 加1.5mm0l缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺，以使2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三 烯-17 β -醇完全反应，搅拌10小时，做薄层检测，过滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，用 体积比为1 3的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过柱色谱纯化，得雌留氨基 酸酯的中间体化合物2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-1，3，5 (10)-雌三烯-17- (N-苄氧 羰基)-β-丙氨酸酯。
4.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在_3°C，将IOmmol的L-苯丙氨酸溶解于4. Oml质量浓度为9%的氢氧化钠水溶液 中，得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/5秒的速度滴加到溶解液中进行反 应，并滴加质量浓度为9%的氢氧化钠水溶液保持PH为8，滴完，置于15°C下，搅拌反应15 小时，做薄层检测，测得溶液完全反应后，再用5ml/次的乙醚洗涤3次，弃去乙醚，得水相， 水相用质量浓度为35%的浓盐酸调PH至2，出现乳白色固体，对出现乳白色固体后的液体 用5ml/次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用5ml/次的蒸馏水洗涤2次、5ml的饱和 食盐水洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥15小时，抽滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，以体 积比为1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过柱色谱纯化，得N-苄氧羰 基-L-苯丙氨酸；(2)、在15°C，将3. 2謹ol的N-苄氧羰基-L-苯丙氨酸和3. (tomol的16 α -乙基-2-甲 氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶于75ml 二氯甲烷中，边搅拌边先后加入 3. Ommol缩合剂1，3_ 二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌反应 lOmin，补加1.8mm0l缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺，以使16 α -乙基-2-甲氧基_3_苄氧 基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇完全反应，搅拌15小时，做薄层检测，过滤，滤液减压浓 缩，得到淡黄色油状物，用体积比为1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过 柱色谱纯化，得雌留氨基酸酯的中间体化合物16 α乙基-2-甲氧基-3-苄氧基-17β_羟 基-1，3，5 (10)-雌三烯-17- (N-苄氧羰基)-L-苯丙氨酸酯。
5.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在2°C，将IOmmol的L-亮氨酸溶解于4. Oml质量浓度为8%的氢氧化钠水溶液中， 得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/6秒的速度滴加到溶解液中进行反应， 并滴加质量浓度为8%的氢氧化钠水溶液保持PH为9，滴完，置于20°C下，搅拌反应15小 时，用茚三酮为显色剂显色无紫色，再用5ml/次的乙醚洗涤3次，弃去乙醚，得水相，水相用质量浓度为37%的浓盐酸调PH至1，出现乳白色固体，对出现乳白色固体后的液体用5ml/ 次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用5ml/次的蒸馏水洗涤2次、5ml的饱和食盐水 洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥18小时，抽滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，以体积比为 1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过柱色谱纯化，得N-苄氧羰基-L-亮氨酸；(2)、在20°C，将3. 2謹ol的N-苄氧羰基-L-亮氨酸和3. (toimol的16 α - (N，N- 二甲基) 氨甲基-2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶于75ml氯仿中，边搅拌边 先后加入3. Ommol缩合剂1，3_ 二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶， 搅拌反应lOmin，补加2. Immol缩合剂1，3_ 二环己基碳二亚胺，以使16 α-(N, N- 二甲基) 氨甲基-2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇完全反应，搅拌10小时，做 薄层检测，过滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，再用乙酸乙酯溶解，过滤，弃去固体，滤液 减压浓缩，得到淡黄色固体，用无水乙醇重结晶，得雌留氨基酸酯的中间体化合物16 α-(N， N- 二甲基)氨甲基-2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-1，3，5 (10)-雌三烯-17- (N-苄氧 羰基)-L-亮氨酸酯。
6.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在6°C，将IOmmol的L-赖氨酸溶解于4. Oml质量浓度为10%的氢氧化钠水溶液中， 得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/7秒的速度滴加到溶解液中进行反应， 并滴加质量浓度为10%的氢氧化钠水溶液保持PH为8，滴完，置于23°C下，搅拌反应15小 时，用茚三酮为显色剂显色无紫色，再用5ml/次的乙醚洗涤3次，弃去乙醚，得水相，水相用 质量浓度为30%的浓盐酸调PH至3，出现乳白色固体，对出现乳白色固体后的液体用5ml/ 次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用5ml/次的蒸馏水洗涤2次、5ml的饱和食盐水 洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥20小时，抽滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，以体积比为 1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过柱色谱纯化，得N，N ‘-二苄氧羰 基-L-赖氨酸；O)、在23°C，将1.6mmol的N，N ‘_ 二苄氧羰基-L-赖氨酸和1. 5mmol的2-甲氧 基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶于35ml氯仿中，边搅拌边先后加入1. 5mmol 缩合剂1，3_ 二环己基碳二亚胺和0. 045mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌反应lOmin，补 加1. 05mmol缩合剂1，3- 二环己基碳二亚胺，以使2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三 烯-17 β -醇完全反应，搅拌15小时，做薄层检测，基本反应完全，过滤，滤液减压浓缩，得到 淡黄色油状物，用体积比为1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过柱色谱 纯化，得雌留氨基酸酯的中间体化合物2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-1，3，5 (10)-雌 三烯-17-(Ν，Ν ‘_ 二苄氧碳基)-L-赖氨酸酯。
7.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在8°C，将IOmmol的N- β -丙氨酰-L-组氨酸(L-肌肽)溶解于4. Oml质量浓度 为10%的氢氧化钠水溶液中，得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/8秒的 速度滴加到溶解液中进行反应，并滴加质量浓度为10%的氢氧化钠水溶液保持PH为8，滴 完，置于25°C下，搅拌反应12小时，用茚三酮为显色剂显色无紫色，再用7ml/次乙醚洗涤3 次，弃去乙醚，得水相，水相用质量浓度为30%的浓盐酸调PH至3，出现乳白色固体，对出现 乳白色固体后的液体用7ml/次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用7ml/次的蒸馏水洗涤2次、7ml的饱和食盐水洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥22小时，抽滤，滤液减压浓缩， 得淡黄色油状物，以体积比为1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过层析 柱纯化，得无水透明油状物N-苄氧羰基-β -丙氨酰-L-组氨酸；(2)、在25°C，将3. 2mmol的N-苄氧羰基- β -丙氨酰-L-组氨酸和3. Ommol的2-甲 氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶解于75ml无水乙腈中，边搅拌边先后加 入3. Ommol缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌反 应lOmin，补加1.5mm0l缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺，以使2-甲氧基-3-苄氧基-1，3， 5(10)-雌三烯-17 β -醇完全反应，搅拌17小时，做薄层检测，过滤，滤液减压浓缩，得到淡 黄色油状物，再用乙酸乙酯溶解，过滤，弃去固体，滤液减压浓缩，得到淡黄色固体，用甲醇 重结晶，得雌甾氨基酸酯的中间体化合物2-甲氧基-3-苄氧基-17 β-羟基-1，3，5(10)_雌 三烯-17- (N-苄氧羰基-β -丙氨酰)-L-组氨酸酯。
8.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、在10°C，将IOmmol的D-丙氨酸溶解于4. Oml质量浓度为8%的氢氧化钠水溶液中， 得溶解液，边搅拌边用Hmmol的氯甲酸苄酯以1滴/9秒的速度滴加到溶解液中进行反应， 并滴加质量浓度为8%的氢氧化钠水溶液，保持PH为8，滴完，置于下，搅拌反应15小 时，做薄层检测，测得溶液完全反应后，再用5ml/次的乙醚洗涤3次，弃去乙醚，得水相，水 相用质量浓度为30%的浓盐酸调PH至3，出现乳白色固体，对出现乳白色固体后的液体用 5ml/次乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用5ml/次蒸馏水洗涤2次、5ml的饱和食盐水 洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥12小时，抽滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，以体积比为 1 3的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过层析柱纯化，得N-苄氧羰基-D-丙 氨酸；(2)、在27°C，将3. 2mmol的N-苄氧羰基-D-丙氨酸和3. Ommol的2-乙氧基-3-苄 氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β醇溶于75ml 二氯甲烷中，边搅拌边先后加入3. Ommol缩 合剂1，3_ 二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌反应lOmin，补加 1. 8mmol的缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺，以使2-乙氧基_3_苄氧基-1，3，5 (10)-雌三 烯-17 β醇完全反应，搅拌18小时，做薄层检测，过滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，用 体积比为1 3的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过柱色谱纯化，得雌留氨基 酸酯的中间体化合物2-乙氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-1，3，5 (10)-雌三烯-17- (N-苄氧 羰基)-D-丙氨酸酯。
9.根据权利要求1所述的制备雌留氨基酸酯的中间体化合物的合成方法，其特征在 于，(1)、0°C下，将IOmmolD-缬氨酸溶于50ml此温度下的碳酸氢钠饱和溶液中，得溶解液， 边搅拌边用Ilmmol的氯甲酸苄酯以1滴/10秒的速度滴加到溶解液中进行反应，滴完，置 于30°C下，搅拌反应15小时，做薄层检测，测得溶液完全反应后，再用50ml/次的乙醚洗涤 3次，弃去乙醚，得水相，水相用质量浓度为30%的浓盐酸调PH至3，出现乳白色固体，对出 现乳白色固体后的液体用50ml/次的乙酸乙酯萃取3次，合并，合并液依次用50ml/次的蒸 馏水洗涤2次、50ml的饱和食盐水洗涤1次，再以无水硫酸镁干燥7小时，抽滤，滤液减压浓 缩，得淡黄色油状物，以体积比为1 3的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶剂为流动相，过 层析柱纯化，得N-苄氧羰基-D-缬氨酸；O)、在30°C，将3. 2mmol的N-苄氧羰基-D-缬氨酸和3. Ommol的2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三烯-17 β -醇溶于75ml 二氯甲烷中，边搅拌边先后加入3. Ommol缩 合剂1，3- 二环己基碳二亚胺和0. 09mmol催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌反应lOmin，补加 1. 5mmol的缩合剂1，3-二环己基碳二亚胺，以使2-甲氧基-3-苄氧基-1，3，5 (10)-雌三 烯17 β-醇完全反应，搅拌10小时，做薄层检测，过滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，用 体积比为1 4的乙酸乙酯和石油醚配制的混合溶液为流动相过柱色谱纯化，得雌留氨基 酸酯的中间体化合物2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-1，3，5 (10)-雌三烯-17- (N-苄氧 羰基)-D-缬氨酸酯。
全文摘要
本发明涉及制备雌甾氨基酸酯的中间体化合物及其合成方法，有效解决制备保持或增强抗肿瘤活性，又增加其水溶性的新抗肿瘤化合物雌甾氨基酸酯制备时中间体化合物的制备问题，将氨基酸或小分子肽类溶解于氢氧化钠水溶液或者碳酸氢钠饱和溶液中，用氯甲酸苄酯滴加，至用茚三酮显色至无紫色或做薄层检测，用乙醚洗涤，弃乙醚，水相用盐酸调pH，出现乳白色固体，用乙酸乙酯萃取，合并液用蒸馏水、饱和食盐水洗涤，以无水硫酸镁干燥，抽滤，浓缩，纯化；将化合物甲和甾体母核的混合物溶解于反应溶剂中，加入缩合剂和催化剂，补加另备的缩合剂，做薄层检测，过滤，浓缩，纯化，本发明方法简单，操作方便。
文档编号C07J1/00GK102127137SQ20101058237
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月10日 优先权日2010年12月10日
发明者张崇威, 张振中, 张红岭, 张超锋, 施秀芳, 郭丽芳 申请人:郑州大学