专利名称：一种酯肽的制备方法
技术领域：
本发明涉及化学合成肽领域，特别涉及一种酯肽的制备方法。
背景技术：
FK224是Fujisawa(Originator)研发的一种环肽类物质,动物体内试验显示其具有强大的NK-1和NK-2受体拮抗效应，对两种受体的作用强度相似。但在用离体平滑肌进行的试验中，其对NK-2受体的亲和力比对NK-1受体低。临床试验表明:FK224可抑制由吸入缓激肽引起的哮喘支气管收缩，但对NKA诱发的支气管收缩则不起作用。FK224是一个七肽化合物，其结构如式I所示:
权利要求
1.一种结构如式I所示的酯肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:取羧基端具有第一保护基的Asp的侧链羧基与氨基树脂发生脱水缩合反应，获得第一树脂； 步骤2:在所述第一树脂的氨基端逐步偶联allo-Thr, D-Phe, Leu, N-甲基-2，3-脱氢-Tyr，氨基端具有第二保护基、侧链具有第三保护基的Thr，获得第二树脂； 步骤3:取第一脱除剂去除所述第二树脂中所述Thr的第三保护基，取所述Thr的侧链羟基与氨基端具有第四保护基的Ser的羧基发生脱水反应，获得第三树脂； 步骤4:取第二脱除剂分别去除所述第三树脂中所述Asp的第一保护基以及所述第三树脂中所述Ser的第四保护基，将所述Asp的羧基与所述Ser的氨基通过偶联剂发生脱水缩合反应连接成环，获得第四树脂； 步骤5:去除所述第四树脂中所述Thr的第二保护基，将3- (2-戊基)-苯丙酸与所述Thr的氨基端发生脱水缩合反应，获得肽树脂； 步骤6:取所述肽树脂裂解、沉淀获得粗肽，所述粗肽经纯化后，即得；
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一保护基为OAll;所述第二保护基为Fmoc ;所述第三保护基为trt ;所述第四保护基为Trt。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氨基树脂选自Rinkamide树脂、Rink amide MBHA 树脂、Rink amide-AM 树脂或 Sieber 树脂。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氨基树脂的替代度为0.1 1.0mmol/g。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述第一脱除剂为TFA与DCM的混合溶液。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4中所述第二脱除剂为Pd(Ph3P)4、苯硅烷和DCM的混合溶液。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4中所述偶联剂为HOBt与HOAt中的任意一种与DIC的混合溶液。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤6中所述裂解所用裂解液为三氟乙酸、苯甲硫醚、苯甲醚、1，2-乙二硫醇和水的混合溶液，所述混合溶液中三氟乙酸、苯甲硫醚、苯甲醚、1,2-乙二硫醇和水的体积比为86-96:2-5:1-4:1-3:0_2。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤6中所述沉淀所用溶剂为无水乙醚，以g/mL计，所述粗肽与所述无水乙醚的质量体积比为1:8 12。
10.一种结构如式I所示的酯肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:取Fm0c-Asp-OAll的侧链羧基与氨基树脂发生脱水缩合反应，获得第一树脂； 步骤2:在所述第一树脂的氨基端逐步偶联Fmoc-al1-Thr (tBu)-0H、Fmoc-D_Phe-0H、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-N-Me-2, 3-dehydro-Tyr (Boc) -OH、Fmoc-Thr (trt) -OH,获得第二树脂； 步骤3:取第一脱除剂去除所述第二树脂中所述Fmoc-Thr (trt)的侧链保护基trt,取所述Thr的侧链羟基与所述Trt-Ser (tBu) -OH的羧基发生脱水反应，获得第三树脂； 步骤4:取第二脱除剂去除所述第三树脂中所述Asp的保护基0A11，取所述第一脱除剂脱除所述第三树脂中所述Ser的保护基Trt，将所述Asp的羧基与所述Ser的氨基通过偶联剂发生脱水缩合反应连接成环，获得第四树脂； 步骤5:去除所述第四树脂中所述Thr的保护基FmocJf 3- (2-戊基)-苯丙酸与所述Thr的氨基端发生脱水缩合反应，获得肽树脂； 步骤6:取所述肽树脂裂解、沉淀获得粗肽，所述粗肽经纯化后，即得；
全文摘要
本发明涉及化学合成肽领域，具体涉及一种酯肽的制备方法。该方法通过逐步偶联、将Asp的羧基与Ser的氨基通过偶联剂发生脱水缩合反应连接成环、去除Thr的保护基后将3-(2-戊基)-苯丙酸与Thr的氨基端发生脱水缩合反应后，经裂解、沉淀、纯化后获得结构如式Ⅰ所示的酯肽。该方法具有定向合成的特点，对相关杂质的分析较发酵方法有更强的可溯性和可控性，且在合成阶段可将相关杂质降低到一定的限度，在提高产品纯度的基础上，降低了纯化的难度和提高了产品的收率。本发明工艺的监测只需要通过简单的Kaiser检测，操作简单，对设备要求不高。式Ⅰ
文档编号C07K1/04GK103073619SQ20121036997
公开日2013年5月1日 申请日期2012年9月28日 优先权日2012年9月28日
发明者陈友金, 刘建, 马亚平, 袁建成 申请人:深圳翰宇药业股份有限公司