饱和脂肪链醇rgd五肽双酯化合物及其合成方法和应用的制作方法

专利名称：饱和脂肪链醇rgd五肽双酯化合物及其合成方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及饱和脂肪链醇和寡肽缀合而得的酯类化合物，尤其涉及饱和脂肪链醇 与RGD肽的羧端缀合而得的饱和脂肪链醇RGD五肽酯类化合物，本发明还涉及该饱和脂肪 链醇RGD五肽酯化合物的合成方法以及该饱和脂肪链醇RGD五肽酯化合物作为抗血栓剂、 药物载体或药物靶向制剂材料的应用，属于生物医药领域
背景技术：
在未来的5年到10年基因治疗会有可把基因传送至细胞的理想载体。从生物制 剂的立场看，基因转导系统就是药物释放系统(DDS)。有多种化学合成的小分子构建的基因 转导系统受到关注，其中阳离子脂质构成的基因转导系统是关注热点。阳离子脂质在药学 领域遍用于构建脂质体运载小分子(包括多肽)药物。与在DDS中一样，在基因转导系统 中阳离子脂质体有明显好处，例如可通过电荷吸附与DNA形成复合物并有效避免被细胞内 溶酶体降解、可将DNA高效导入细胞、对DNA的尺寸没有限制、操作简便等。阳离子脂质的 基本构造如下，包括高级脂肪链构成的疏水臂和亲水的阳离子头。 阳离子脂质的基本构造细胞黏附在细胞黏附性疾病(癌转移、血栓形成、化学致炎和骨质疏松)的发展过 程中起关键作用。调节性糖蛋无例如RGD肽与整合素受体有很强的结合能力，可参与细胞 黏附过程。例如RGD肽与血小板、肿瘤细胞及骨基表面的GP Ilb/IIIa受体特异性结合可 干预血栓、癌转移和骨质疏松的发展过程。RGD肽的这种作用赋予了含RGD序列的化合物一 种重要性质，即含RGD序列的化合物可以向血栓、癌转移和骨质疏松的患病部位富集。在这 样一个前提下，把RGD肽与高级脂肪链缀合，便可以获得靶向药质体。

发明内容
本发明目的之一是提供一类饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物；本发明目的之二是提供一种合成上述饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物的 方法；本发明目的之三是将饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物应用于抗血栓剂、药 物载体或药物靶向制剂材料；本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的
一类饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物，其结构式为通式I所示 其中，ηι是7、9或11 ;n2是9、11或13 ；AA选自苯丙氨酸，丝氨酸或缬氨酸；本发明的目的之二是提供一种合成上述饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物 的方法。本发明的目的之二是通过以下技术方案来实现的(1)按照现有液相接肽技术分别合成保护基保护的RGDSE、RGDVE和RGDFE ；(2)将 CH3 (CH2) 8CH20H、CH3 (CH2) 10CH2OH 或 CH3 (CH2) 12CH20H 中的任意一种以及 CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一种各自与保护基保护的 RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端偶联，脱去保护基，即得。本发明结合了下述认识或依据完成了上述技术方案把基因传送至细胞的理想载 体(基因转导系统)是基因治疗的关键任务之一，从生物制剂的立场看基因转导系统与药 物释放系统(DDS)具有等同性，虽然有多种化学合成的小分子构建的基因转导系统都受到 关注但是格外看好阳离子脂质构成的基因转导系统，阳离子脂质体可通过电荷吸附与DNA 形成复合物并有效避免被细胞内溶酶体降解，阳离子脂质体可将DNA高效导入细胞，阳离 子脂质体对DNA的尺寸没有限制，以及含RGD序列的化合物可以向血栓、炎症、癌转移和骨 质疏松的患病部位富集。本发明人基于上述认识，把CH3 (CH2) 8CH20H、CH3 (CH2) 10CH2OH 或 CH3 (CH2) 12CH20H 中的 任意一种以及CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一种各自与保护 基保护的RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端偶联，使制得的分子获得四种性能， 即依赖于饱和脂肪链醇烷基链的疏水性、依赖于RGD肽的胍基和α -氨基质子化形成的阳 离子性质和亲水性和依赖于RGD肽对GP Ilb/IIIa受体特异亲和作用获得的靶向性。这样 一来，把RGD五肽与饱和脂肪链醇缀合制得的分子便成为饱和脂肪链醇RGD五肽双酯。在大鼠血栓形成模型上的评价表明，本发明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物具 有优秀的口服抗血栓活性，可作为抗血栓剂应用；在水相检测了本发明饱和脂肪链醇RGD 五肽双酯化合物自组装成为纳米颗粒的性能，试验结果表明，本发明饱和脂肪链醇R⑶五 肽双酯化合物具有优秀的自组装性能，可作为制备微乳、脂质体等的制剂材料；因为本发明 饱和脂肪链醇RGD五肽双酯的抗血栓活性来自RGD肽对GPIIb/IIIa受体特异亲和作用，所 以这种抗血栓活性又表征了本发明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物的靶向性，所以本发 明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物可作为靶向制剂材料。本发明的又一目的是提供一种含有本发明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物的 药用组合物，该药用组合物由治疗上有效剂量的本发明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物 与药学上可接受的赋型剂或者辅加剂组成；即将有效量的本发明化合物与药学上可接受 的载体或稀释剂配合后，按本领域常规的制剂方法将其制备成任意一种适宜的药物组合 物。通常该组合物适合于口服给药和注射给药，也适合其他的给药方法。该组合物可以是 片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、栓剂，或口服液等液体制剂形式。根据不同的给药方法， 本发明药物组合物可以含有0. 1% -99%重量，优选10-60%重量的本发明化合物。
本发明所涉及到的氨基酸的缩略术语的说明R(Arg)精氨酸G(Gly):甘氨酸D(Asp)天冬氨酸E(Glu)谷氨酸F(Phe):苯丙氨酸；S(Ser):丝氨酸；V(Val)缬氨酸


图1本发明饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物的合成路线图；i)DCC，HOBt，NMM ； ii)4N HCl-EtOAc ；iii)H2, Pd/C，4N HCl/EtOAc ；iv)H2, Pd/C ；其中 AA = Phe，Val 或 Ser。图2由透射电镜描述的本发明代表性化合物在水相组装的纳米球。图3由扫描电镜描述的本发明代表性化合物组装的纳米球。
具体实施例方式为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它 们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。实施例IRGDFE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备1) Boc-Arg (N02)-Gly-OBzl 的制备称取0. 867g (2. 7mmol) Boc-Arg (N02)于 IOOml 茄瓶中，用 3ml 无水 DMF 溶解，再加 适量无水THF。然后，加入0. 367g(2. 7mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt)，并使完全溶解。冰 浴下加入0. 615g(2. 9mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)，搅拌10分钟左右，得到反应液(I)， 待用。将0. 961g(2. 8mmol)Tos 'Gly-OBzl用5ml无水DMF溶解，然后加入Iml N-甲基吗啉 (NMM)JfpH 8-9，得到反应液(II)。冰浴下把反应液(II)加入反应液(I)中，先冰浴下搅 拌lh，再室温搅拌24h，TLC (氯仿甲醇=10 1)显示Boc-Arg (NO2)消失。滤除二环己 基脲(D⑶)，滤液吹去DMF。残留物用50ml氯仿溶解。得到的溶液依次用5% NaHCO3水溶 液、饱和NaCl水溶液、5% KHSO4水溶液和饱和NaCl水溶液洗。氯仿层用无水Na2SO4干燥。 6小时后过滤，滤液减压浓缩至干，得到1. lg(86.88%)标题化合物，为无色固体。[a]2°D =-4. 31 (c = 2，CH3OH) ；Mp 72-73°C ；ESI—MS (m/z) 467 [M+H] +2) Boc-Arg (N02) -Gly-OH 的制备将1. Ig(2. 3mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 溶于 IOml 甲醇。冰浴下将得 到的溶液用NaOH (2N)水溶液调pH12并搅拌2h，TLC (氯仿甲醇=5 1)显示 Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl消失。反应混合物用饱和KHSO4调pH = 7，减压浓缩除甲醇。残留 物用饱和KHSO4调pH = 2，用乙酸乙酯萃取3次。合并乙酸乙酯相，用无水Na2SO4干燥。过 滤，滤液减压浓缩至干，得0. 792g(90% )标题化合物，为无色固体。[a ]2°d = _2. 1644 (c = 1，CH3OH) ；Mp 99-99°C ；ESI—MS (m/z) 375 [Μ—ΗΓ3) Boc-Glu (OBzl) _0 (CH2) 13CH3 的制备按照Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法由 4. 95g(14. 2mmol)Boc-Glu(OBzl)和
53g(14. 6mmol)肉豆蔻醇(十四醇)得到6. 68g(89% )标题化合物，为无色蜡状物。[a]2°D =-17. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mp 37-38°C ；ESI-MS (m/z) 534 [M+H] +4) Boc-Glu-O (CH2) 13CH3 的制备将3.74g (7mmol)Boc-Glu(OBzl)-O(CH2)13CH3 用甲醇溶解，加 Pd/C 0. 748g (20 % )，并向反应液中加无水甲酸5-6滴，通H2 (0. 02Mba)，室温搅拌至原料点消 失。滤除Pd/C、滤液减压浓缩，得到2. 67g(86%)标题化合物，为透明油状物。[a]2°D =-23. 36 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 466 [M+Na] +5) Boc-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备将2. 12g (4. 7mmol) Boc-Glu-O (CH2)13CH3 用无水 THF 溶解，冰浴下加入 0. 646g(4. 7mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt)，并使完全溶解。然后加入1. 035g(5. Ommo 1) 二环己基羰二亚胺(DCC)，反应混合物冰浴搅拌10分钟，得对应的活泼酯溶液(I)，待用。将0. 907g(4. 8mmol)月桂醇(十二醇)用无水THF溶解，然后加入Iml N-甲基吗 啉(NMM)JfpH 8-9，得到反应液(II)。冰浴下把反应液(II)加入反应液(I)中，得到的反 应混合物室温搅拌24h。TLC (展开剂CHCl3 MeOH = 30 1)显示有产物点生成，反应基 本完全。滤除二环己基脲(D⑶)，反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除 不溶物。得到的溶液依次用5% NaHCO3水溶液、饱和NaCl水溶液洗、5% KHSO4水溶液洗和 饱和NaCl水溶液洗。酯层用无水Na2SO4干燥、过滤、滤液减压浓缩至干，得到2. 67g(91% ) 标题化合物，为无色蜡状物。[a]2°D = -39. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mp 38-39 °C ； ESI-MS (m/ z)612[M+H] +6) HCl · Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备将0. 688g(l. Immo 1)Boc-Glu(OC12H25)-O(CH2) 13CH3 溶解在 5ml 氯化氢-乙酸乙 酯(4N)溶液中，室温搅拌2小时，TLC(展开剂CHCl3 MeOH = 15 1)显示原料点消 失，减压浓缩除去乙酸乙酯，残留物反复用少量乙醚进行减压浓缩以除去氯化氢，最后 0.610g(99%)标题化合物，为凝胶状物，直接用于下一步反应。[a]2°D = -27.43(c= 1， CH3OH) ；Mp 71-720C ；ESI-MS(m/z)512[M+H] +7) Boc-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 265g (Immol) Boc-Phe 和 0. 135g(Immol)HCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 74g(100% )标题化合物，为淡黄色蜡状 物。[a ]2°d = -11. 83 (c = 1，CH3OH) ；Mp 42-43 °C ；ESI-MS (m/z) 759 [M+H]+8) HCl · Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 74g(0. 9mmol) Boc-Phe-Glu (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3制得0. 680g(99% )标题化合物，为黄色油状物，直接用 于下一步反应。[a ]2°d = "20. 83 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 659 [M+H]+9) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 323g (Immol) Boc-Asp (OBzl)和 0. 680g(0. 9mmol)HCl · Phe-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 90g(95% )标题化合物，为淡黄 色油状物。[a J20d = -14. 60 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z)964[M+H] +10) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按HCl 'Glu(OC12H25) -0 (CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 90g(0. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHjI^O. 87g(99% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于下 一步反应。[a ]2CID = -11. 70(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS(m/z)864[M+H] +11) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 374g(Immol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 879g(0. 9mmol)HCl .Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 1. 170g(98% )标题化合 物，为无色固体。[a ]2Cid =-75. 06(c = 1，CH30H) ；Mp 140_142°C;ESI_MS(m/z) :1222[M+H] +12) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 [RGDFE (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3]的制 备将0. 5g (0. 48mmol) Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) -O (CH2) 13CH3置于IOOml茄形瓶中，用甲醇溶解。加0.10g Pd/C (20 % )、通H2 (0. 02Mba)，室温搅拌 至原料点消失。滤除Pd/C、滤液减压浓缩至干，加5ml氯化氢-乙酸乙酯(4N)溶液，室温搅 拌2小时，TLC显示原料点消失，减压浓缩除去乙酸乙酯，残留物反复用少量乙醚进行减压 浓缩以除去氯化氢气。最后加少量乙醚将残留物研磨成0.37g(93%)标题化合物，为无色 固体粉末。[a ]2Cid = -18. 13 (c = 1，CH3OH) ；Mp 181_182°C ；ESI-MS (m/z) 987 [M+H] +实施例2RGDSE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备1)Boc-Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)_0(CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 335g(l. lmmol)Boc-Ser (Bzl)和 0. 610g(l. ImmoDHCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 816g(93% )标题化合物，为淡黄色蜡 状物。[a ]2°d = -17. 40 (c = 1，CH3OH) ；Mp 37-39 °C ；ESI-MS (m/z) 789 [M+H] +2)HCl · Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)_0(CH2) 13CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 816g(0. 8mmol)Boc-Ser (Bzl) -Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHji^O. 680g(99% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于下一步 反应。[a J20d = -13. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 689 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 305g(0. 94mmol)Boc-Asp (OBzl)和 0. 671g(0. 92mmol)HCl · Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 897g(97% )标题化合物， 为淡黄色油状物。[a ]2°d = "22. 26 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 994 [M+H]+4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 897g(0. 9mmol) Boc-Asp (OBzl )-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHjS^O. 860g(99% )标题化合物，为淡黄色油状物，直 接用于下一步反应。[a J20d = -14. 50 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z)894[M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 354g(0. 94mmol)Boc-Arg(N02) -Gly 和 0. 860g(0. 92mmol)HCl .Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-0(CH2) 13CH3得 0. 952g(82% ) 标题化合物，为无色固体。[α J20d = -36. 96 (c = 1，CH3OH) ；Mp 117-120 °C ； ESI-MS (m/ ζ)1252[M+H]+6) Arg-Gly-Asp-Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) -O (CH2) 13CH3 [RGDSE (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3] 的制备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 48mmol)
7Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 制得 0. 32g(93 % )标 题化合物，为无色固体粉末。[a ]2°d = -15. 50 (c = 1，CH3OH) ；Mp 142-143 °C ； ESI-MS (m/ z)927[M+H] +实施例3RGDVE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备1) Boc-Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 246g (1. lmmol) Boc—Val 禾口 0. 610g(l. lmmol)HCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 760g(96% )标题化合物，为淡黄色蜡 状物。[a J20d = -30. 23 (c = 1，CH3OH) ；Mp 41. 1-42. 5 °C ；ESI-MS (m/z) 711 [Μ+Η] +2) HCl · Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 760g (0. 8mmol) Boc-Val-Glu (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3制得0.671g(99% )标题化合物，为黄色油状物，直接用 于下一步反应。[a J20d = -9. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI—MS (m/z) 610 [Μ+Η] +3) Boc-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 343g (lmmol) Boc-Asp (OBzl)和 0. 674g(lmmol)HCl · Val-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 932g(97% )标题化合物，为淡黄色 油状物。[a J20d = -30. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 916 [Μ+Η]+4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按HCl 'Glu(OC12H25) -0 (CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 932g (lmmol) Boc-Asp (OBzl) -V al-Glu (OC12H25)-0(CH2)13CH3制得0. 860g(99% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于下 一步反应。[a J20d = -23. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 816 [Μ+Η]+ 5) Boc-Arg (Ν02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 396g(lmmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 880g (lmmol) HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC12H25)-0 (CH2) 13CH3 得 0. 92g(76% )标题化合物， 为无色固体。[a J20d = -15. 50 (c = 1，CH3OH) ；Mp 128_129°C ；ESI-MS (m/z) 1174 [Μ+Η]+6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 [RGDVE(OC12H25)-O(CH2)13CH3]的制 备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制备方法，由 0. 5g (0. 48mmol) B oc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 制得 0. 37g(93%)标题化合物， 为无色固体粉末。[a J20d = -24. 00 (c = 1，CH3OH) ；Mp 177_178°C ；ESI-MS (m/z) 939 [Μ+Η] +实施例4RGDFE0 (CH2) nCH3 的制备1) Boc-Glu-O (CH2) nCH3 的制备按Boc-Glu-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 5. 47g (IOmmol) Boc-Glu (OBzl) -0 (CH2) nCH3 制得 4. 3g(95% )标题化合物，为透明油状物。[a ]2°D = -41. 56 (c = LCH3OH) ；ESI-MS (m/ z)438[M+Na] +2) Boc-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 4. 3g (IOmmol) Boc-Glu-O (CH2) nCH3 和 1.69g (IOmmol)正癸醇(十醇)制得5.70g(99% )标题化合物，为透明油状物。[a]2°D =-21. 10(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 556 [Μ+Η] +3) HCl · Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备
按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 5. 70g(IOmmol) B0c-Glu(OCltlH21)-O(CH2)11CH3制得4. 98g(99% )标题化合物，得油状物，直接用于下一步反 应。[a ]2°D = -4. 0(c = 1，CH3OH) ；Mp 71_72°C ；ESI-MS(m/z) :456[M+H] +4) Boc-Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 912g (3. 4mmol) Boc-Phe 和 1.66g(3. 3mmol)HCl · Glu (OCltlH21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 21g (93% )标题化合物，为淡黄色油状 物。[α ] 2CID = "20. 30 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 703 [M+H]+5) HCl · Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 21g(3. Immol) B0c-Phe-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得1. 97g(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于 下一步反应。[a]2°D = -13. 83 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 603 [M+H] +6) Boc-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. Olg (3. lmmol) Boc-Asp (OBzl)和
1.97g(3. OmmoDHCl · Phe-Glu(OC10H21)-0(CH2) nCH3 得 2. 651g(95% )标题化合物，为淡黄 色油状物。[a J20d = -51. 03 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 908 [M+H] +7) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按HCl *Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 65g(2. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3制得2. 40g (90 % )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于下 一步反应。[a J20d = -12. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 808 [M+H] +8) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. 09g(2. 8mmol) Boc-Arg (N02) -Gly 和
2.40g(2. 8mmol)HCl .Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 3. Og (90% )标题化合物， 为无色固体。[a J20d = -19. 36 (c = 1，CH3OH) ；Mp 137_139°C ；ESI-MS (m/z) 1166 [M+H]+9) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDFEO (CH2) nCH3]的制备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 53mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 制得 0. 38g(91 % )标 题化合物，为无色固体粉末。[a]2°D = -20. 63 (c = 1，CH3OH) ；Mp 187-188 °C ； ESI-MS (m/ z)931[M+H] +实施例5RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的制备l)Boc-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. Olg(3. 4mmol)Boc-Ser (Bzl)和 1. 66g(3. 3mmol)HCl · Glu(OC10H21)-O(CH2)11CH3 得 2. 406g(97% )标题化合物，为淡黄色油 状物。[a ]2°d = "17. 86 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 733 [M+H]+2) HCl · Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 406g(3. 2mmol)Boc-Ser (Bzl) -Glu(OCltlH21)-O(CH2)11CH3制得2. lg(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于下一步反 应。[a ]2CID =-12. 93(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 633 [M+H]+3) Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. 03g(3. lmmol) Boc-Asp (OBzl)和2. Ig (3. ImmoDHCl · Ser (Bzl)-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 708g(92% )标题化合物，为 淡黄色油状物。[α ]2°d = "47. 20 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 938 [M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制备按HCl *Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 708g(2. 8mmol) Boc-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3制得2. 40g (90% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接 用于下一步反应。[a]2°D = -13. 66 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 838 [M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. 05g(2. 7mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 2. 40g(2. 7mmol)HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 得 2. 96g(90 % ) 标题化合物，为无色固体。[a]2°D = -14. 36 (c = 1，CH3OH) ；Mp 112-113 °C ； ESI-MS (m/ ζ)1196[Μ+Η]+6) Arg-Gly-Asp-Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3] 的制备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 48mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 制得 0. 32g(93 % )标 题化合物，为无色固体粉末。[a J20d = -15. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mpl52_154°C ； ESI-MS (m/ z)871[M+H] +实施例6RGDVE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的制备1) Boc-Val-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 747g (3. 4mmol) Boc-Val 和 1. 66g(3. 3mmol)HCl · Glu (OCltlH21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 103g(95% )标题化合物，为淡黄色油 状物。[a ]2Cid = -31. 63 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 655 [M+H] +2) HCl · Val-Glu (OBzl) -0 (CH2) nCH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 103g (3. 2mmol) B0c-Val-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得1. 80g(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于 下一步反应。[a ]2°D = -9. 0(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 555 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Val-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 1. Og (3. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和 1. 80g(3. OmmoDHCl · Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 得 2. 597g(99% )标题化合物，为淡黄 色油状物。[α ] 2°d = "37. 80 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 860 [M+H]+4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 597g(3. Ommol) Boc-Asp (OBzl PVaI-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得2. 30g(90% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于 下一步反应。[a]2°D = -18. 93 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 760 [M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 396g(Immol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 880g (Immol) HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 0. 92g(76% )标题化合物， 为无色固体。[a J20d = -26. 73 (c = 1，CH3OH) ；Mp 126_128°C ；ESI-MS (m/z) 1118 [M+H]+6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDVE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3]的制备
10
按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25)-0 (CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 48mmol)B oc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 制得 0. 37g (93 % )标题化合物， 为无色固体粉末。[a J20d = -24. 46 (c = 1，CH3OH) ；Mp 187_189°C ；ESI-MS (m/z) 883 [M+H] +实施例7RGDFE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制备
1) Boc-Glu-O (CH2) 9CH3 的制备按照Boc-GIu-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 2. 97g (6. 2mmol) Boc-G1u(0Bz1)-0(CH2)9CH3 制得 2. 84g(95 % )标题化合物，为透明油状物。[a J20d =-20. 56 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 410 [M+Na] +2) Boc-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 2. 84g(7. 3mmol) Boc-GIu-O(CH2)9CH3和 0. 973g(7. 4mmol)正辛醇(八醇)制得3. 568g(97% )标题化合物，为透明油状物。[a]2°D =-29. 73(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 500 [M+H]+3) HCl · Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 3. 568g (7. Immol) Boc-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3制得2. 85g (90 % )标题化合物，为油状物，直接用于下一步反 应。[a ]2CID = -0. 90(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 400 [M+H]+4) Boc-Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 589g (2. 2mmol) Boc-Phe 禾口
0.95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17) -O(CH2)9CH3 得 1. 368g(97% )标题化合物，为淡黄色油状 物。[a ]20d = "18. 13 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 647 [M+H]+5) HCl · Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 368g (2. Immol) B0c-Phe-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1.20g(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于 下一步反应。[a ]2CID = "15. 73 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 547 [M+H]+6) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 678g(2. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和
1.20g (2. OmmoDHCl .Phe-Glu (OC8H17)-0(CH2)9CH3 得 1. 70g(96% )标题化合物，为淡黄色 油状物。[a ] 2Cid = "20. 90 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 852 [M+H]+7) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 70g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl) -Phe-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. 52g(90% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于下 一步反应。[a ]2CID = "10. 50 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 752 [M+H]+8) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 740g(l. 9mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 52g(l. 9mmol)HCl ‘ Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) -0(CH2)9CH3 得 1. 957g(91 % )标题 化合物，为无色固体。[a ]2°D =-21. 56(c = 1，CH3OH) ；Mp 139. 1-141. 2 °C ；ESI-MS (m/ ζ)1110[M+H]+9) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 [R⑶FE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3]的制备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 45mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBz 1)-Ser (Bz 1)-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 制得 0.35g(91 % )标 题化合物，为无色固体粉末。[a]2°D = -20. 20 (c = 1，CH3OH) ；Mpl80-182C ；ESI-MS (m/ z)875[M+H] +实施例8RGDSE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制备1) Boc-Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 656g(2. 2mmol) Boc-Ser (Bzl)和
0.95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3 得 1. 401g(95% )标题化合物，为淡黄色油状 物。[a ]2°d = "18. 63 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 677 [M+H] +2) HCl · Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 401g(2. Ommol)Boc-Ser (Bzl) -Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. 20g(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于下一步反 应。[a ]2CID =-17. 00(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 577 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 645g(l. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)和
1.20g(l. 9mmol)HCl · Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1.70g(98% )标题化合物，为淡 黄色油状物。[α ] 二 = "53. 63 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 882 [M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl 'Glu(OC12H25) -0(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 70g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) "0(CH2)9CH3制得1. 50g(90% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用 于下一步反应。[a ]2°d = "12. 26 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 782 [M+H]+5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 703g(l. 8mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 50g(l. 8mmol)HCl · Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1. 802g(86 % ) 标题化合物，为无色固体。[α J20d = -15. 46 (c = 1，CH3OH) ；Mp IlO-Ill0C ； ESI-MS (m/ ζ)1140[M+H]+6)Arg-Gly-Asp-Ser(Bzl)-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3[RGDSE(OC8H17)0(CH2)9CH3]的制 备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 43mmol) Boc-Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0(CH2)9CH3 制得 0. 32g(91 % )标题 化合物，为无色固体粉末。[a]2°D = -17. 83 (c = 1，CH3OH) ；Mp 149-152 °C ； ESI-MS (m/ z)815[M+H] +实施例9RGDVE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制备1) Boc-Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 482g (2. 2mmol) Boc-Val 和 0. 95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17) -O(CH2)9CH3 得 1. 284g(98% )标题化合物，为淡黄色油状 物。[α ] 2CID = "47. 63 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 599 [M+H]+2) HCl · Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 284g (2. Immol) B0c-Val-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. IOg(90% )标题化合物，为黄色油状物，直接用于下一步反应。[a ]2°D = -8. 4(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS(m/z)499[M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制备按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 678g(2. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和 1. IOg (2. OmmoDHCl .Val-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1. 60g(96% )标题化合物，为淡黄色油 状物。[a J20d = -44. 16 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z)804[M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制备按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 1. 60g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl) -Val-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1.42g(90% )标题化合物，为淡黄色油状物，直接用于下 一步反应。[a ]2CID = "22. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 704 [M+H] + 5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制备按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制备方法，由 0. 736g(l. 9mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 42g(l. 9mmol)HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-0(CH2)9CH3得 1. 828g(90% )标题化合 物，为无色固体。[α J20d = -15. 10 (c = 1，CH3OH) ；Mp 128_130°C ；ESI-MS (m/z) 1062 [M+H] +6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 [R⑶VE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3]的制备按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制备方法，由 0. 5g(0. 47mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 制得 0. 35g(92% )标题化合物， 为无色固体粉末。[a J20d = -25. 56 (c = 1，CH3OH) ；Mp 193_194°C ；ESI-MS (m/z) 827 [M+H] +试验例1本发明化合物静脉给药的抗血栓活性试验1)给药剂量阿斯匹林和本发明化合物(本发明实施例1-9所制备)在给药前分别配制成生理 盐水溶液。分为三组，空无对照组、阿斯匹林组和试验组，其中，空无对照组静脉给予生理 盐水(剂量为3ml/kg)、阿斯匹林组静脉给予阿斯匹林的生理盐水溶液(剂量为12mg/kg， 66umol/kg)、试验组静脉给予本发明化合物的生理盐水溶液(剂量为lOnmol/kg)。2)大鼠手术与器械SD大鼠(雄性，180 210g)按1. 2g/kg剂量腹腔注射乌拉坦溶液进行麻醉。麻 醉大鼠仰卧位固定，分离右颈总动脉，左侧静脉端，各自于近心端夹动脉夹，近心端和远心 端分别穿入手术线，将远心端的手术线结扎，准备插管。3)插管插管为硅烷化过的聚乙烯胶管，分三段，中段为聚乙烯胶管，长60. Omm,内径 3. 5mm ；两端为相同的聚乙烯管，管长100. Omm,内径1. Omm，外径2. Omm该管的一端拉成尖管 (用于插入大鼠颈动脉或静脉)，外径为1.0mm。将编好号的EP管中分别装入6cm长的黑色 手术线，称重；然后取出丝线，按照编号放入准备好的插管的中段较粗的插管中。用注射器通过尖管端将管中注满肝素生理盐水溶液(50IU/kg)，然后将插管的静 脉端插入大鼠左侧颈静脉，将计算量的肝素缓缓注入大鼠体内，然后注入计算量的本发明 药物。夹闭右侧颈动脉，动脉远心端结扎，将插管的动脉端插入分离好的大鼠右颈动脉，打 开动脉夹，使血液开始循环。并同时开始计时。此过程中插管中央的粗管中的丝线上会因 为血液循环而产生血栓。4)血栓称重计时开始15分钟后，剪断动静脉插管，停止循环，用眼科镊小心取出丝线，在滤纸上轻轻蘸掉血滴，放入事先称重好的EP管中，精确称重并记录。计算出血栓的湿重。每个 药品重复10次给药。统计各组的血栓湿重(Z±SD),并做t检验。5)结果结果列入表1。结果表明，在lOnmol/kg剂量下本发明的化合物有很好的抗血栓活 性。可见，本发明化合物都是优秀的抗血栓剂。表1本发明化合物经静脉给药的抗血栓活性 η = 10 ；NS =生理盐水；a与生理盐水组相比，P < 0. 01 ；试验例2本发明化合物RGDSE(OCiqH21)O(CH2)11CH3 口服给药的量效关系1)大鼠手术与器械SD 大鼠(雄性，180 210g)按 10nmol/kg、lnmol/kg、0. lnmol/kg 禾口 0. 01nmol/kg 剂量口服RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3, 30min后按1. 2g/kg-1剂量腹腔注射乌拉坦溶液进行麻 醉。麻醉大鼠仰卧位固定，分离右颈总动脉，于近心端夹动脉夹，近心端和远心端分别穿入 手术线，将远心端的手术线结扎，准备在远心端插管。2)插管插管为硅烷化过的聚乙烯胶管，分三段，中段为聚乙烯胶管，长60. 0mm,内径 3. 5mm ；两端为相同的聚乙烯管，管长100. 0mm,内径1. 0mm，外径2. Omm该管的一端拉成尖管 (用于插入大鼠颈动脉或静脉)，外径为1.0mm。将编好号的EP管中分别装入6cm长的黑色 手术线，称重；然后取出丝线，按照编号放入准备好的插管的中段较粗的插管中。打开大鼠右侧动脉夹，用注射器通过尖管端将管中注满肝素生理盐水溶液 (50IU · kg—1)，然后将插管的动脉端插入大鼠右侧颈总动脉，将计算量的肝素缓缓注入大鼠 体内。3)血栓称重
计时开始15分钟后，剪断动静脉插管，停止循环，用眼科镊小心取出丝线，在滤纸 上轻轻蘸掉血滴，放入事先称重好的EP管中，精确称重并记录。计算出血栓的湿重。每个 药品重复12次给药。统计各组的血栓湿重(X±SD)，并做t检验。4)结果经口 服给药，在 10nmol/kg、lnmol/kg、0. lnmol/kg 和 0. 01nmol/kg 剂量下， RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3剂量依赖地发挥抗血栓作用。结果见表2。表 2 口 服给予 RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的量效关系 η = 12 ； IOnmol 与 Inmol 比较，P < 0. 05 ；0. Inmol 与 0. Olnmol 比较，P < 0. 01试验例3本发明化合物在水相中组装成为纳米球试验1)本发明9种阳离子药质体(实施例1-9所制备的化合物)按照10_5mOl/l的浓 度配置成为水溶液，在激光散射纳米粒度仪(ZetaPlus JEM-1230)上连续测定8天，观察粒 径大小及其稳定性，结果见表3和表4。得到的数据表明，这9种阳离子药质体在水相中可 以自组装成为稳定的纳米球，因而是优秀的微乳和脂质体药物的制备材料。表3本发明的9种阳离子药质体在水中自组装成为纳米球的粒径 表4本发明的9种阳离子药质体在水中自组装成为纳米球的粒径稳定性 2)按照扫描电镜的测定要求，配置9种阳离子药质体的水溶液，置于铜网上挥 发干后测定本发明的化合物在水相组装的纳米球的图。结果表明，由这9种阳离子药 质体组装的纳米球在扫描电镜下可以看到均勻的粒状态。这里给出的是代表性化合物 RGDFE (OC10H21)O(CH2)13CH3 的透射电镜图(图 2)3)按照扫描电镜的测定要求，配置9种阳离子药质体的水溶液，冷冻干燥后测定 本发明的化合物的微观结构和粒径。结果表明，由这9种阳离子药质体组装的纳米球在扫 描电镜下可以看到均勻的粒状态。这里给出的是代表性化合物RGDFEO(CH2)13CH3的扫描 电镜图(图3)
权利要求
饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物，其结构式为通式I所示通式I其中，n1＝7、9或11；n2＝9、11或13；AA选自苯丙氨酸，丝氨酸或缬氨酸F200910084801XC0000011.tif
2.一种制备权利要求1的饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯的方法，包括(1)分别合成保护基保护的以下寡肽RGDSE、RGDVE、RGDFE；(2)将CH3 (CH2) 8CH20H、CH3(CH2)10CH2OH 或 CH3(CH2)12CH2OH 中的任意一种以及 CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一种各自与保护基保护的 RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端相偶联，脱去保护基，即得。
3.—种药物组合物，其特征在于由治疗或预防上有效量的权利要求1所述的饱和脂 肪链醇和RGD五肽的双酯化合物和药学上可接受的载体或辅料所组成。
4.权利要求1所述的饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物在制备抗血栓药物中的用途。
5.权利要求1所述的饱和脂肪链醇和RGD五肽的双酯化合物在制备微乳或脂质体药物 载体的制剂材料中的用途。
全文摘要
本发明公开了饱和脂肪链醇RGD五肽双酯化合物及其合成方法和应用。将CH3(CH2)8CH2OH、CH3(CH2)10CH2OH或CH3(CH2)12CH2OH中的任意一种以及CH3(CH2)6CH2OH、CH3(CH2)8CH2OH或CH3(CH2)10CH2OH中的任意一种各自与保护基保护的RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的谷氨酸羧端相偶联，脱去保护基，即得本发明化合物。本发明化合物除具有优秀的口服抗血栓活性外，还具有优秀的自组装性能，可作为制备微乳、脂质体等药物载体的制剂材料或靶向制剂材料。
文档编号A61K38/08GK101891801SQ20091008480
公开日2010年11月24日 申请日期2009年5月22日 优先权日2009年5月22日
发明者彭师奇, 赵明, 齐爱平 申请人:首都医科大学