细胞毒性苯并二氮杂*衍生物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及新型具有抗增殖活性的苯并二氮杂衍生物，并且更具体地涉及式(I)-(VII)的新型苯并二氮杂化合物。本发明也提供将所述苯并二氮杂化合物连接于细胞结合剂的缀合物。本发明还提供使用本发明的所述化合物或缀合物用于在哺乳动物中抑制异常细胞生长或治疗增殖性病症的组合物及方法。
【专利说明】细胞毒性苯并二氮杂$衍生物
[0001]参考相关申请
[0002]本申请要求提交于2011年2月15日的美国临时申请N0.61/443，062、提交于2011年5月6日的美国临时申请N0.61/483，499和提交于2011年2月15日的美国临时申请N0.61/443，092在35。么.(:.§ 119(e)下的提交日期的权益，其全部内容(包括所有附图、化学式、说明书和权利要求)通过引用并入本文。
发明领域
[0003]本发明涉及新型细胞毒性化合物和包含这些细胞毒性化合物和细胞结合剂的细胞毒性缀合物。更具体地说，本发明涉及新型苯并二氮杂萆化合物、其衍生物、其中间体、其缀合物及其药学上可接受的盐，它们可用作药物，尤其是用作抗增殖剂。
[0004]发明背景
[0005]苯并二氮杂萆衍生物是用于治疗多种病症的有用的化合物，且包括诸如以下的药物:抗癫痫剂(咪唑并[2，l-b] [1，3，5]苯并硫二氮杂萆，美国专利N0.4，444，688 ;美国专利N0.4，062，852)、抗菌剂(嘧啶并[1，2_c] [1，3，5]苯并硫二氮杂萆、GB1476684)、利尿剂和降血压剂(吡咯并(l，2-b) [1，2，5]_苯并硫二氮杂苯5，5 二氧化物，美国专利N0.3，506，646)、降血脂剂(W003091232)、抗抑郁剂(美国专利N0.3，453，266);骨质疏松症(JP2138272)。
[0006] 最近，在动物肿瘤模型中已示出，诸如吡咯并苯并二氮杂苯(PBD)的苯并二氮杂萆衍生物用作抗肿瘤剂(N-2-咪唑基烷基取代的I，2，5-苯并硫二氮杂革-1，1-二氧化物，美国专利N0.6，156，746)、苯并-吡啶并或二吡啶并硫二氮杂-革(W02004/069843)、批咯并[l，2-b] [1，2，5]苯并硫二氮杂萆和吡咯并[l，2-b] [1，2，5]苯并二氮杂$衍生物(W02007/015280)、托马霉素(tomaymycin)衍生物(如，吡咯并[1,4]苯并二氮杂萆)，诸如描述于 W000/12508、W02005/085260、W02007/085930 和 EP2019104 中的那些。也已知苯并二氮杂蕈影响细胞生长和分化(Kamal A.,等人，Bioorg Med Chem.2008年8月15日；16(16):7804-10(和其中引用的文献)；Kumar R,Mini Rev Med Chem.2003 年 6 月；3(4):323-39(和其中引用的文献)；BednarskiJ J，等人，2004 ;AutterA.P，等人，2002NB，等人，2002)，Kamal A.等人，Current Med.Chem.，2002 ；2 ;215_254，Wang J-J.，J.Med.Chem.,2206 ；49:1442-1449, Alley M.C.等人，Cancer Res.2004 ；64:6700-6706, PepperC.J., Cancer Res2004；74:6750-6755, Thurston D.E.和 Bose D.S., Chem Revl994 ；94:433-465 ;和 Tozuka，Z.，等人，Journal ofAntibiotics, (1983) 36 ; 1699-1708。PBD 的一般结构描述于美国公开N0.20070072846。PBD在取代基的数量、类型和位置，在其芳族A环和吡咯并C环，以及在C环的饱和度上存在不同。它们在小沟和交联DNA中形成加合物的能力使它们干扰DNA处理，因此它们可能用作抗增殖剂。
[0007]进入临床的第一种吡咯并苯并二氮杂萆，SJG_136(NSC694501)是一种有效的引起DNA链间交联的细胞毒性剂(A.G Gregson等人，2001，JMed.Chem.,44 =737-748 ；M.C.Alley 等人，2004, Cancer Res.,64:6700-6706 ；J.A.Hartley 等人，2004, CancerRes.,64:6693-6699 ；C.Manin 等人,2005, Biochemistry.,44:4135-4147 ;S.Arnould 等人，2006, Mol.Cancerther.，5:1602-1509)。SJG-136的I期临床评价结果显示:该药物在极低剂量时是有毒的(最大耐受剂量是45 μ g/m2，且观察到几种副作用，包括血管渗漏综合征、外周性水肿、肝脏毒性和疲劳。在所有剂量下在淋巴细胞循环中均观察到DNA损伤(D.Hochhauser 等人，2009，clin.Cancer Res.，15:2140-2147)。因此，需要改进的较低毒
性且仍有治疗活性的苯并二氮杂蕈.衍生物，用于治疗各种增殖性疾病状况，诸如癌症。
发明概要
[0008]现有技术中公开的细胞毒性苯并二氮杂蕈二聚体具有两个亚胺官能团(functionalities),所述亚胺官能团以它们的游离形式或可逆保护形式存在,诸如水合物、烷氧基化物或磺酸盐。这两个亚胺官能团的存在导致DNA的交联(S.G.Gregson等人，2001，J.Med.Chem.，44:737-748)。本发明部分基于以下意外发现:新细胞毒性苯并二氮杂萆衍生物(诸如没有两个亚胺官能团(如，一个亚胺官能团和一个胺官能团)，并因此不能交联DNA的二氢吲哚并苯并二氮杂萆二聚体)的细胞结合剂缀合物；与先前技术公开的能交联DNA的苯并二氮杂萆衍生物相比，该细胞结合剂缀合物显示高得多的体内治疗指数(最大耐受剂量与最低有效剂量的比率)。
[0009]本发明的一个目标是提供包含具有键合至其的反应性基团的能够将该细胞毒性化合物共价连接于细胞结合剂(CBA，参见下文)的连接基团的细胞毒性化合物，其中该细胞毒性化合物由下式中的任一者:
【权利要求】
1.一种细胞毒性化合物，其包含具有键合至其的反应性基团的能够将所述细胞毒性化合物共价连接于细胞结合剂(CBA)的连接基团，其中所述细胞毒性化合物由下式中的任一者:
2.根据权利要求1所述的化合物，其中Y是离去基团，其选自-OR、-OCOR’、-OCOOR’、-OCONR’R”、-NR’ R”、-NR’COR”、-NR’NR’R”、任选取代的5或6元含氮杂环(如，哌啶、四氢吡咯、吡唑、吗啉等)，由-NR’ (C = NH)NRj R”表示的胍基，氨基酸，或由-NRCOP’表示的肽，其中P’是氨基酸或含有2至20个氨基酸单元的多肽、-SR、-S0R’、-S02M、-S03M、-0S03M、卤素、氰基和叠氮基。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中L不存在，或选自任选取代的苯基和任选取代的吡啶基，其中所述苯基和所述吡啶基具有连接基团，所述连接基团具有键合至其的反应性基团，或L是具有连接基团的胺基(即，-N (连接基)-)，所述连接基团具有键合至其的反应性基团，或L是具有I至6个碳原子且具有连接基团的直链、支链或环状的烷基或烯基，所述连接基团具有键合至其的反应性基团。
4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中所述化合物由下式中的任一者表示:
5.根据权利要求4所述的化合物，其中L’、L”或L’’’中的一者是具有键合至其的反应性基团的连接基团，而其它是-H。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中L’是具有键合至其的反应性基团的连接基团，而L”和L”’是-H。
7.根据权利要求5或6所述的化合物，其中A和A’均是-0-，R6是-OMe，且G是-CH-。
8.根据权利要求5、6或7所述的化合物，其中L’由下式表示:
-W，-Rx-V-Ry-J, 其中: r和V相同或不同，且各自独立地不存在或选自-CRT’-、-ο-、-ο-c(= ο)-、-c(=0)_0_、_S_、_S0_、_S02_、_CH2_S_、_CH20_、-CH2NR0- > _0_ (C = 0) O- > _0_ (C = 0)N(Re)-, -N (Re)-、-N(Re) -C ( = 0)-、-C ( = 0) -N(Re)-, -N(Re) -C ( = 0)0-、_N(C( = 0) Re)C ( = 0) -、-N (C ( = 0) Re) -、- (O-CH2-CH2) n-、-SS-或-C ( = 0)-或氨基酸，或具有 2 至 8 个氨基酸的肽； Ri^P Ry相同或不同，且各自独立地不存在或者是具有I至10个碳原子的任选取代的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，具有6至10个碳原子的芳基或具有I至3个选自0、N或A的杂原子的3至8元杂环； Re和Re’相同或不同，且选自-H，具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基或-(CH2-CH2-O)n-Rk,其中Rk是-H，具有I至6个碳原子的直链、支链的环状的烷基，任选地具有仲氨基(如，-NHRltl1)或叔氨基(-NRicilRici2)或5或6元含氮杂环，诸如哌啶或吗啉，其中Rltl1和Rltl2是各自独立地具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基；优选地，R101和Rltl2是各自独立地具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基；η是I至24的整数； J包含键合至其的反应性基团，且选自马来酰亚胺、卤代乙酰氨基、-SH、-SSRd, -CH2SH, -CH(Me) SH、_C(Me)2SH、-NHRcl, -CH2NHRel、-NRelNH2、-COOH 和-COE，其中-COE表示反应性酯，其选自但不限于N-羟基琥珀酰亚胺酯、N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯、硝基苯基(如，2或4-硝基苯基)酯、二硝基苯基(如，2，4- 二硝基苯基)酯、磺基-四氟苯基(如，4-磺基-2，3，`5，6-四氟苯基)酯和五氟苯基酯，且其中Rel是-H或具有I至4个碳原子的取代或未取代的直链或支链的烷基，且， Rd选自苯基、硝基苯基(如，2或4-硝基苯基)、二硝基苯基(如，2或4-硝基苯基)、羧基硝基苯基(如，3-羧基-4-硝基苯基)、吡啶基或硝基吡啶基(如，4-硝基吡啶基)。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中J是-SH、-SSRd、马来酰亚胺或N-羟基琥珀酰亚胺酯。
10.根据权利要求8或9所述的化合物，其中:
Re’ 是-H 或-Me ； Re是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基或-(CH2-CH2-O)n-Rk ； η是2至8的整数；且
Rk 是-H、-Me 或-CH2CH2-NMe2。
11.根据权利要求8-10中任一项所述的化合物，其中V是氨基酸或具有2至8个氨基酸的肽。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中，V是缬氨酸-瓜氨酸、gly-gly-gly或ala-leu-ala-leuo
13.根据权利要求8所述的化合物，其中:
W，是-O-、-N (Re)-或-N (Re) -C ( = O) _ ; Re是-H、具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基或-(CH2-CH2-O)n-Rk ；Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基；
V不存在、为 _ (O-CH2-CH2) n-、-C ( = O) -NH-> -S-、-NH-C ( = O)-; Ry不存在或者是具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基；且 J 是-SH、-SSRd*-C0E。
14.根据权利要求8所述的化合物，其中:
W，是-O-、-N (Re)-或-N (Re) -C ( = O) _ ;
R0 是 _H、—Me 或 _ (CH2_CH2_0) n—Me ； η是2至6的整数； Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基； V和Ry不存在；且 J 是-COE。
15.根据权利要求13或14所述的化合物，其中-COE是N-羟基琥珀酰亚胺酯。
16.根据权利要求8所述的化合物，其中L’由下式表示:
-W，- [CRrR2?] -Y- [Cy] 0_r [CR3”R4”]b_C0E, 其中: R1 R2,,和R3,,各自独立地为-H或-Me ； R4,,是-H、-Me、-SO3H或-SO3If,其中M+是药学上可接受的阳离子； a是0-2的整数，b是0-3的整数；且 Cy是具有N杂原子的任选取代的5元杂环，优选地Cy是
17.根据权利要求8或16所述的化合物，其中r是-Nor)-。
18.根据权利要求8、16或17所述的化合物，其中Re是-(CH2-CH2-O)2_6-Rk，其中Rk是-H，具有I至6个碳原子的直链、支链环状的烷基。
19.根据权利要求8、16、17或18所述的化合物，其中V是-S-或-SS-。
20.根据权利要求8、16、17、18或19所述的化合物，其中L’由下式表示:
-NRe- [CRr R2’’ ] a-S- [CR3’’ R4” ] b_C0E。
21.根据权利要求8、16、17、18或19所述的化合物，其是:
22.根据权利要求8、16、17、18或19所述的化合物，其中L’由下式表示:-NRe- [CRr R2’’ ] a-S-Cy- [CR3’’ R4” ] b_COE。
23.根据权利要求8、16、17、18、19或22所述的化合物，其是:
24.根据权利要求1、2、4或8所述的化合物，其中所述化合物由下式中的任一者表示:
25.根据权利要求24所述的化合物，其中Zs由下式中的任一者表示:
26.根据权利要求24或25所述的化合物，其中Ψ是-N(Re)-。
27.根据权利要求26所述的化合物，其中Re是-(CH2-CH2-O)n-Rk,其中Rk是-H、具有1至6个碳原子的直链、支链环状的烷基。
28.根据权利要求27所述的化合物，其中Rk是-H或-Me，n是4，且q是2。
29.根据权利要求28所述的化合物，其中Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基。
30.根据权利要求28所述的化合物，其中Rx是-(CH2)p-(CRfRg)-,其中Rf和Rg为各自独立地选自-H或具有1至4个碳原子的直链或支链的烷基；且P是0、1、2或3。
31.根据权利要求30所述的化合物，其中Rf和Rg相同或不同，且选自-H和-Me;且P是I。
32.根据权利要求24-31中任一项所述的化合物，其中: N和C之间的双线=表示单键或双键，条件是当其是双键时，X不存在且Y是-H，而当其是单键时，X是-H ;Y是-OH或-SO3M ； M是-H或药学上可接受的阳离子(如，Na+)； V和Y’均是-H ； A和Α’均是-O-；
R6 是 _0Me ;且 Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基。
33.根据权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中所述N和C之间的双线=表示双键。
34.根据权利要求1-31中任一项所述的化合物，其中所述N和C之间的双线=表示单键，X是-H，具有键合至其的反应性基团的连接基团，或氨基保护基；且Y选自-H、-OR、-OCOR'、-SR、-NR’ R’ ’、任选取代的5或6元含氮杂环、-SO3M, -SO2M和硫酸盐-OSO3M。
35.根据权利要求34所述的化合物，其中Y选自-H、-S03M、_0H、-0Me、-0Et或-NHOH。
36.根据权利要求35所述的化合物，其中Y是-H、-SO3M或-0H。
37.根据权利要求34-36中任一项所述的化合物，其中M是-H、Na+或K+。
38.根据权利要求1-37中任一项所述的化合物，其中W当存在时是C= O。
39.根据权利要求1-38中任一项所述的化合物，其中Z和V当存在时是-CH2-。
40.根据权利要求1-39中任一项所述的化合物，其中X’选自-Η、-0Η、任选取代的具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，苯基，具有键合至其的反应性基团的连接基团和氨基保护基。
41.根据权利要求40所述的化合物，其中V是-H、-0H、-Me或具有键合至其的反应性基团的连接基团。
42.根据权利要求41所述的化合物，其中V是-H。
43.根据权利要求1-42中任一项所述的化合物，其中Y’选自-H，氧代基团，具有I至10个碳原子的取代或未取代的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基。
44.根据权利要求43所述的化合物，其中Y’是-H或氧代。
45.根据权利要求44所述的化合物，其中Y’是-H。
46.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物，其中A和A’相同或不同，且选自-O-、-S-、-NR5-,和氧代-(C = O)-ο
47.根据权利要求46所述的化合物，其中A和A’相同或不同，且选自-O-和-S-。
48.根据权利要求47所述的化合物，其中A和A’是-O-。
49.根据权利要求1-48中任一项所述的化合物，其中D和D’当存在时相同或不同，且独立地选自聚乙二醇单元(-OCH2CH2) n，其中η是1-24的整数，氨基酸，具有2至6个氨基酸的肽，或具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，其中所述烷基、烯基和炔基任选被一个或多个独立地选自卤素、-OR、-NR’ COR’、-SR和-COR’的取代基取代。
50.根据权利要求49所述的化合物，其中D和D’是具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基。
51.根据权利要求1、2、4或24所述的化合物，其中: N和C之间的双线=表示双键；
Y是-H ; W是C = O ; RpRyIVj2^R4 和 R/ 是-H; R3或R3’中的一者任选为具有键合至其的反应性基团的连接基团且另一者是-H ；
R6 是 _0Me ；
Z 和 Z’ 是 _CH2 ； xn Y’是-H;且
A 和 A’ 是 _0_。
52.—种缀合物，其包含:细胞毒性化合物和细胞结合剂(CBA)，其中所述细胞毒性化合物包含将细胞毒性化合物共价连接于所述CBA的连接基团，且其中所述细胞毒性化合物由下式中的任一者:
53.根据权利要求52所述的缀合物，其中Y是离去基团，其选自-OR、-OCOR'、-0C00R’、-OCONR’ R”、-NR’ R”、-NR’ COR”、-NR’ NR’ R’、任选取代的5或6元含氮杂环(如，哌啶、四氢吡咯、吡唑、吗啉等)，由-NR’ (C = NH)NR' R”表示的胍基，氨基酸，或由-NRC0P’表示的肽，其中P’是氨基酸或含有2至20个氨基酸单元的多肽、-SR、-SORj、-SO2M, -SO3M, -OSO3M,卤素、氰基和叠氮基。
54.根据权利要求52或53所述的缀合物，其中所述化合物不是下式化合物中的任一者:
55.根据权利要求52或53所述的缀合物，其中L不存在，或选自任选取代的苯基和任选取代的吡啶基，其中所述苯基和所述吡啶基具有连接基团，或L是具有连接基团的胺基(即，-N(连接基团)-)，或L是具有I至6个碳原子且具有连接基团的直链、支链或环状的烷基或烯基。
56.根据权利要求52或53所述的缀合物，其中所述化合物由下式中的任一者表示:
57.根据权利要求56所述的缀合物，其中L’、L”或L”’中的一者是连接基团，而其它是-H。
58.根据权利要求57所述的缀合物，其中L’是连接基团，而L”和L”’是-H。
59.根据权利要求57或58所述的缀合物，其中A和A’均是-0-，&是-0116，且G是 _CH_。
60.根据权利要求57、58或59所述的缀合物，其中L’由下式表示:
-Ψ -Rx-V-Ry-J, 其中: r和V相同或不同，且各自独立地不存在或选自-crt’-、-ο-、-ο-c( = ο)-、-c(=0)_0_、_S_、_S0_、_S02_、_CH2_S_、_CH20_、-CH2NR0- > _0_ (C = 0) O- > _0_ (C = 0)N(Re)-, -N (Re)-、-N(Re) -C ( = 0)-、-C ( = 0) -N(Re)-, -N(Re) -C ( = 0)0-、_N(C( = 0) Re)C ( = 0) -、-N (C ( = 0) Re) -、- (O-CH2-CH2) n-、-SS-或-C ( = 0)-或氨基酸，或具有 2 至 8 个氨基酸的肽； Rx和Ry相同或不同，且各自独立地不存在或为任选取代的具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，具有6至10个碳原子的芳基或具有I至3个选自0、N或S的杂原子的3至8元杂环；Re和Re’相同或不同，且选自-H，具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基或-(CH2-CH2-O)n-Rk,其中Rk是-H，具有I至6个碳原子的直链、支链的环状的烷基，任选地具有仲氨基(如，-NHR101)或叔氨基(-NRicilRici2)或5或6元含氮杂环，诸如哌啶或吗啉，其中Rltl1和Rltl2是各自独立地具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基；优选地，R101和Rltl2是各自独立地具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基；η是I至24的整数；且 J共价连接于CBA，且选自琥珀酰亚胺、乙酰氨基、-S-、-SS-、-CH2S-, -CH (Me) S-、-C (Me CH2NRca^-NRcaN-和-C( = 0)-，其中Rca是-H或具有I至4个碳原子的取代或未取代的直链或支链的烷基。
61.根据权利要求60所述的缀合物，其中J是-S-、-SS-、琥珀酰亚胺或-C(= O)-。
62.根据权利要求60或61所述的缀合物，其中:
Re’ 是-H 或-Me ； Re是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基或-(CH2-CH2-O)n-Rk ； η是2至8的整数；且 Rk 是-H、-Me 或-CH2CH2-NMe2。
63.根据权利要求60-62中任一项所述的缀合物，其中V是氨基酸或具有2至8个氨基酸的肽。
64.根据权利要求63所述的缀合物，其中，V是缬氨酸-瓜氨酸、gly-gly-gly或ala-leu-ala-leuo
65.根据权利要求60所述的缀合物，其中:
W，是-O-、-N (Re)-或-N (Re) -C ( = O) _ ; Re是-H、具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基或-(CH2-CH2-O)n-Rk ； Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基；
V不存在、为 _ (O-CH2-CH2) n-、-C ( = O) -NH-> -S-、-NH-C ( = O)-; Ry不存在或者是具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基；且 J 是 _S_、_SS_ 或 _C ( = O) - ο
66.根据权利要求60所述的缀合物，其中:
W，是-O-、-N (Re)-或-N (Re) -C ( = O) _ ;
R0 是 _H、—Me 或 _ (CH2_CH2_0) n—Me ； η是2至6的整数； Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基； V和Ry不存在；且 J 是-C ( = O) _。
67.根据权利要求60所述的缀合物，其中L’由下式表示: -r -[ovivL-v-ECyL-rEciVR^b-c^ = O)-, 其中: R1 R2,,和R3,,各自独立地为-H或-Me ； R4,,是-H、-Me、-SO3H或-SO3If,其中M+是药学上可接受的阳离子； a是0-2的整数，b是0-3的整数；且 Cy是具有N杂原子的任选取代的5元杂环，优选地Cy是
68.根据权利要求60或67所述的缀合物，其中r是-Nor)-。
69.根据权利要求60、67或68所述的缀合物，其中Re是-(CH2-CH2-O)2_6_Rk，其中Rk是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基。
70.根据权利要求60、67、68或69所述的方法，其中V是-S-或-SS-。
71.根据权利要求60、67、68、69或70所述的缀合物，其中L’由下式表示:
-NRe-[CRr R2’’]a-S-[CR3’’R4’’]b-C( = O)-。
72.根据权利要求60、67、68、69、70或71所述的缀合物，其是:
73.根据权利要求60、67、68、69、70、71或72所述的缀合物，其中所述抗体是huMy9-6。
74.根据权利要求60、67、68、69或70所述的缀合物，其中L’由下式表示:
-NRe-[CRr R2’’]a-S-Cy-[CR3’’R4’’]b-C( = O)-。
75.根据权利要求60、67、68、69、70或74所述的缀合物，其是:
76.根据权利要求60、67、68、69、70、74或75所述的缀合物，其中所述抗体是huMy9-6。
77.根据权利要求56所述的缀合物，其中所述化合物由下式表示:
78.根据权利要求77所述的缀合物，其中T是:
79.根据权利要求77或78所述的缀合物，其中Ψ是-N(IT)-。
80.根据权利要求79所述的缀合物，其中Re是-(CH2-CH2-O)n-Rk,其中Rk是-H、具有I至6个碳原子的直链、支链环状的烷基。
81.根据权利要求80所述的缀合物，其中Rk是-H或-Me，η是4，且q是2。
82.根据权利要求81所述的缀合物，其中Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基。
83.根据权利要求81所述的缀合物，其中Rx是-(CH2)p- (CRfRg) _，其中Rf和Rg各自独立地选自H或具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基；且？是0、1、2或3。
84.根据权利要求83所述的缀合物，其中Rf和Rg相同或不同，且选自H和Me且P是1。
85.根据权利要求77-84中任一项所述的缀合物，其中: N和C之间的双线=表示单键或双键，条件是当其是双键时，X不存在且Y是-H，而当其是单键时，X是-H ;Y是-OH或-SO3M ； M是-H或药学上可接受的阳离子(如，Na+)； V和Y’均是-H ；A和A’均是-O-；
R6 是 _0Me ;且 Rx是具有I至6个碳原子的直链或支链的烷基。
86.根据权利要求52-85中任一项所述的缀合物，其中N和C之间的双线=表示双键。
87.根据权利要求52-84中任一项所述的缀合物，其中N和C之间的双线=表示单键，X是-H，连接基团或氨基保护基；且Y选自-H、-OR、-OCOR'、-SR、-NR’ R”、任选取代的5或6元含氮杂环、-SO3M, -SO2M和硫酸盐-0S03M。
88.根据权利要求87所述的缀合物，其中Y选自-H、-S03M、_0H、-0Me、-0Et或-ΝΗ0Η。
89.根据权利要求88所述的缀合物，其中Y是-H、-SO3M或-0H。
90.根据权利要求87-89中任一项所述的缀合物，其中M是-H、Na+或K+。
91.根据权利要求52-90中任一项所述的缀合物，其中W当存在时是C= O。
92.根据权利要求52-91中任一项所述的缀合物，其中Z和V当存在时是-CH2-。
93.根据权利要求52-92中任一项所述的缀合物，其中X’选自-H，-0H，任选取代的具有I至10个碳原子 的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，苯基，连接基团和氨基保护基。
94.根据权利要求93所述的缀合物，其中V是-H、-OH、-Me或连接基团。
95.根据权利要求94所述的缀合物，其中X’是-H。
96.根据权利要求52-95中任一项所述的缀合物，其中Y'选自-H，氧代基团，具有I至10个碳原子的取代或未取代的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基。
97.根据权利要求96所述的缀合物，其中Y’是-H或氧代。
98.根据权利要求97所述的缀合物，其中Y’是-H。
99.根据权利要求52-98中任一项所述的缀合物，其中A和A’相同或不同，且选自-O-、-S-、-N(R5)-、和氧代(C = O)。
100.根据权利要求99所述的缀合物，其中A和A’相同或不同，且选自-O-和-S-。
101.根据权利要求100所述的缀合物，其中A和A'是-O-。
102.根据权利要求52-101中任一项所述的缀合物，其中D和D'当存在时相同或不同，且独立地选自聚乙二醇单元(-0CH2CH2)n，其中η是1-24的整数，氨基酸，具有2至6个氨基酸的肽，具有I至10个碳原子的直链、支链或环状的烷基、烯基或炔基，其中所述烷基、烯基和炔基任选被一个或多个独立地选自卤素、-OR、-NR’ COR’、-SR和-COR’的取代基取代。
103.根据权利要求102所述的缀合物，其中D和D’是具有I至4个碳原子的直链或支链的烷基。
104.根据权利要求52、53、56或77所述的缀合物，其中: N和C之间的双线=表示双键；
Y是-H ; W是C = O ; RpRyIVj2^R4 和 R/ 是-H; R3或&’中的一者任选为连接基团，而另一者是-H;
R6 是 _0Me ；
Z 和 Z’ 是 _CH2_ ；xn Y’是-H;且
A 和 A’ 是 _0_。
105.根据权利要求52-104中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物包含1-10种细胞毒性化合物，每种细胞毒性化合物包括将所述细胞毒性化合物连接于所述CBA的连接基团，且在所述缀合物上的每种细胞毒性化合物是相同的。
106.根据权利要求52-105中任一项所述的缀合物，其中所述细胞结合剂结合至选自肿瘤细胞、病毒感染细胞、微生物感染细胞、寄生虫感染细胞、自身免疫细胞、活化细胞、骨髓细胞、活化的T细胞、B细胞或黑素细胞的靶细胞；结合至表达⑶4、⑶6、⑶19、⑶20、⑶22、CD30、CD33、CD37、CD38、CD40、CD44、CD56、EpCAM、CanAg, CALLA,或 Her_2 抗原；Her_3 抗原的细胞；或表达胰岛素生长因子受体、表皮生长因子受体和叶酸受体的细胞。
107.根据权利要求106所述的方法，其中所述细胞结合剂是抗体、单链抗体、特异性结合于靶细胞的抗体片段，单克隆抗体，单链单克隆抗体或特异性结合于靶细胞的单克隆抗体片段、嵌合抗体、特异性结合于靶细胞的嵌合抗体片段、结构域抗体、特异性结合于靶细胞结构域抗体片段、淋巴因子、激素、维生素、生长因子、集落刺激因子或营养转运分子。
108.根据权利要求107所述的缀合物，其中所述抗体是表面重构抗体、表面重构单链抗体或表面重构的抗体片段。
109.根据权利要求107所述的方法，其中所述抗体是单克隆抗体、单链单克隆抗体或它们的单克隆抗体片段。
110.根据权利要求107所述的缀合物，其中所述抗体是人源化抗体、人源化单链抗体或人源化抗体片段。`
111.一种药物组合物，其包含根据权利要求52-110中任一项所述的缀合物和药学上可接受的载体。
112.—种抑制哺乳动物中异常细胞生长或治疗增殖性病症、自身免疫性病症、破坏性骨病症、传染性疾病、病毒性疾病、纤维化疾病、神经变性疾病，胰腺炎或肾脏疾病的方法，包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1-51中任一项所述的化合物或权利要求52-110中任一项所述的缀合物及任选地，施用化疗剂。
113.根据权利要求112中任一项所述的方法，其中所述化合物或缀合物是:
114.一种抑制哺乳动物中异常细胞生长或治疗增殖性病症、自身免疫性病症、破坏性骨病症、传染性疾病、病毒性疾病、纤维化疾病、神经变性病症，胰腺炎或肾脏疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的下式化合物及任选地，化疗剂:
115.根据权利要求112-114中任一项所述的方法，其中将所述第二化疗剂相继或连续地施用于所述哺乳动物。
116.根据权利要求112-115中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗下述病症，其选自癌症、风湿性关节炎、多发性硬化、移植物抗宿主病(GVHD)、移植排斥、狼疮、肌炎、感染和免疫缺陷。
117.根据权利要求112-116中任一项所述的方法，其中所述方法用于治疗癌症。
118.根据权利要求116或117所述的方法，其中所述癌症选自乳腺癌、结肠癌、脑癌、前列腺癌、肾癌、胰腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、结直肠癌、胃癌、鳞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、睾丸癌、梅克尔细胞癌、胶质母细胞瘤、神经细胞瘤、淋巴器官的癌症和骨髓恶性肿瘤包括白血病(急性淋巴细胞性白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓性白血病(CML)、急性单核细胞白血病(AMOL)、多毛细胞白血病(HCL)、T-细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL)、巨粒淋巴细胞白血病、成人T细胞白血病)、淋巴瘤(小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、霍奇金淋巴瘤(结节硬化型、混合细胞型、富于淋巴细胞型、淋巴细胞削减型或未削减型和结节性淋巴细胞主导的霍奇金淋巴瘤)、非霍奇金淋巴瘤(所有亚型)、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤、B-细胞前淋巴细胞白血病、淋巴质浆细胞白血病(诸如瓦尔登斯特伦病巨球蛋白血症)、脾边缘带淋巴瘤、浆细胞肿瘤(浆细胞性骨髓瘤、浆细胞瘤、单克隆免疫球蛋白沉积物疾病、重链病)、结节外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、结节边缘区B细胞淋巴瘤(NMZL)、滤泡淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤/白血病、T细胞幼淋巴细胞白血病、T细胞巨粒淋巴细胞白血病、攻击性NK细胞白血病、成人T细胞白血病/淋巴瘤、结节外NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)、肠病型T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、亚顶级NK细胞淋巴瘤、蕈样真菌病/塞扎里综合征、原发性皮肤间CD30-阳性T细胞淋巴增生性病症、原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤、淋巴瘤样丘疹病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤(非特异性)、间变性大细胞淋巴瘤)、多发性骨髓瘤(浆细胞性`骨髓瘤或卡勒病)。
【文档编号】C07D519/00GK103687623SQ201280014480
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年2月15日 优先权日:2011年2月15日
【发明者】李为, M·米勒, N·菲什金, R·V·J·查里 申请人:伊缪诺金公司