细胞组分的同时纯化的制作方法

细胞组分的同时纯化的制作方法
【专利摘要】本发明提供了从同一样品纯化不同细胞组分的方法和装置。
【专利说明】细胞组分的同时纯化
[0001]相关专利申请的交叉引用
[0002]本申请要求美国临时专利申请号61/555，689和61/555，708的优先权，这两份申请均于2011年11月4日递交，且各通过引用纳入本文。
【背景技术】
[0003]目前基于等电聚焦的蛋白质、肽段、核酸、细胞器和细胞分级分离技术有两大缺陷。首先，样品在固定或有限的PH范围内分离，导致不同样品的分级分离效果未能达到最优。其次，样品分级分离所需的PH梯度是由化学品(两性电解质)建立的，导致分级分离的样品受到化学品污染和(潜在的)对下游分析的干扰。
【专利附图】

【附图说明】
[0004]图1A和IB分别说明质子和氢氧根注射器，其中包含和通道相邻的小隔室，所述隔室中浸有Pt电极，且将所述隔室与所述通道隔开的双极膜。
[0005]图2说明可能的电解质及其与质子注射器的相互作用。
[0006]图3说明用于控制质子/氢氧根注射器装置的系统的实施方式。
[0007]图4说明用于质子/氢氧根注射器装置中的集成式一次性通道的实施方式。可根据需要安排供流体与质子/氢氧根注射器隔室接触的狭缝。例如，在一些实施方式中，腔体中的狭缝为1-1000微米，而在一些实施方式中，腔体中的狭缝为约100微米。可设计狭缝的数目和大小以按需要生成分级PH梯度。例如，可任选如图4所示的纤维素或其他亲水膜，其起到覆盖未使用的狭缝的作用和/或可任选地覆盖双极膜从而样品组分对所述双极膜具有亲和性。在一些实施方式中，可使用亲水涂层代替亲水膜来覆盖双极膜并阻止样品组分与之结合。可利用其它狭缝来从所述通道提取样品或将样品注射进入所述通道。
[0008]图5A-C说明pH分级梯度(stepgradient)的生成以及使用该梯度对目标分子的分离。图中，双极膜(2)生成较大pH差异，从而使样品中不需要的组分(I)离开目标分析物聚焦。第二双极膜(4)生成以目标分析物(3)的pi为中心的较小pH差异。可任选地在所述腔体的通道(5)内收集目标分析物(3)。
[0009]图6说明pH分级梯度的生成以及利用该梯度对多种目标分子的分离。该实施方式可用于后续应用以进行电泳或其他应用。
[0010]图7说明一个实施方式，其中从同一样品纯化不同的细胞组分(核酸、蛋白质等)。
[0011]图8说明一个实施方式，其中分离并纯化不同的亚细胞区室。
[0012]图9说明一个实施方式，其中根据混合物中不同细胞类型的pi将其分离并随后将其收集。虽然图中所示的细胞是经腔体内的旁侧通道进行分离，但也可选择在根据Pi分离细胞之后立刻将细胞泵出某一末端(图示的左端或右端)，且基本不含其他细胞类型。
[0013]图10显示对两种不同pi的不同肽段的分离。
[0014]图1lA-B显示对肽段和dsDNA的分离。图1lA显示时间=O时的情况。图1lB显示时间=15分钟(即施加电流后15分钟)时的情况,这导致DNA与肽段分离。[0015]图12显示一个系统的示意图，该系统聚集细胞、诱导其裂解并利用合适配体捕获其 mRNA。

【发明内容】

[0016]在一些实施方式中，提供了一种从生物样品纯化至少一种细胞组分的方法。在一些实施方式中，所述样品包含一个或多个细胞。在一些实施方式中，所述方法包括向腔体中提供包含来自一个或多个细胞的细胞裂解物的样品；并使用一个或多个质子注射器和/或氢氧根注射器在所述腔体中生成pH梯度或pH梯级(pH step)，从而根据细胞组分的等电点(Pl)将至少两种细胞组分于不同位置定位在所述腔体中，由此从不同细胞组分纯化至少一种细胞组分。
[0017]在一些实施方式中，所述方法包括检测至少两种组分中的至少一种的存在或量。
[0018]在一些实施方式中，所述方法包括收集至少不同两种组分中的至少一种，从而从同一生物样品中纯化至少一种组分。
[0019]在一些实施方式中，所述方法包括从同一生物样品中分别收集两种不同细胞组分，从而从同一生物样品中纯化所述两种组分。
[0020]在一些实施方式中，这些组分在腔体内部沿一条路径移动，并通过腔体中的孔口分别收集至少一些组分。在一些实施方式中，这些组分在腔体内部沿一条路径向下移动，并通过腔体中与所述组分移动路径垂直的多个孔口分别收集组分。在一些实施方式中，这些孔口(如狭缝或其他开口 )位于腔体内以对应这些组分的Pl。
[0021]在一些实施方式中，使用电泳移动这些组分。在一些实施方式中，在所述腔体内通过泵送流体来移动这些组分。
[0022]在一些实施方式中，所述至少两种组分用电泳在腔体内定位。
[0023]在一些实施方式中，使一个或多个细胞裂解并随后将其加入腔体中以生成细胞裂解物。
[0024]在一些实施方式中，一个或多个细胞在腔体内裂解。在一些实施方式中，细胞裂解的方式是通过生成足够高或足够低的PH值以使一个或多个细胞裂解。
[0025]在一些实施方式中，所述至少一种或两种组分选自细胞核、DNA、RNA、肽和蛋白质。
[0026]在一些实施方式中，所述不同组分是不同亚细胞隔室和/或细胞器。
[0027]在一些实施方式中，所述裂解物来自单一细胞。
[0028]在一些实施方式中，使对目标细胞组分具有亲和性的试剂连接至腔体中的某一位置并使细胞裂解物的组分移向该试剂或经过该试剂，从而使目标细胞组分与该试剂结合。在一些实施方式中，所述目标细胞组分是RNA且所述试剂包含寡核苷酸。在一些实施方式中，所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
[0029]还提供了一种装置或系统，所述装置或系统用于从生物样品捕获细胞、细胞组分或病毒。在一些实施方式中，所述装置或系统包含:用于沿轴线容纳含有生物样品的溶液的腔体，其中所述腔体包含位于该腔体表面的一个或多个狭缝或其他开口，所述狭缝或其他开口与一个或多个质子注射器或氢氧根注射器连通，且其中所述腔体包含连接至该腔体内某一位置的试剂，其中所述试剂对目标细胞组分、细胞或病毒具有亲和性；用于在所述注射器中，且任选地沿所述腔体内轴线施加电场的电源；一个或多个质子注射器或氢氧根注射器，其用于通过注射离子流来沿所述腔体内的所述轴线建立PH梯度，其能够在一个pH梯度中形成一个或多个PH梯级；以及控制器，所述控制器控制所述一个或多个离子源，以调节PH梯度从而诱导带电组分、细胞或病毒沿所述腔体内的轴线定位。在一些实施方式中，所述试剂包含寡核苷酸。在一些实施方式中，所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
[0030]还提供了一种方法，所述方法用于从混合物中的至少一种其它细胞类型分离一种或多种目标细胞类型或病毒和/或从混合物浓缩目标细胞类型或病毒。在一些实施方式中，所述方法包括向腔体中添加混合物和缓冲溶液；并使用一个或多个质子和/或氢氧根注射器生成pH梯度或pH梯级，从而根据所述细胞或病毒的等电点(pi)使细胞在该腔体内定位。
[0031]在一些实施方式中，所述方法还包括检测该腔体内某一位置处的细胞或病毒的存
在或量。
[0032]在一些实施方式中，所述方法进一步包括根据一种或多种细胞或病毒的pi来收集所述一种或多种细胞或病毒。
[0033]在一些实施方式中，所述方法还包括根据不同细胞或病毒的两个或更多个不同pi分开收集一种或多种细胞或病毒。
[0034]在一些实施方式中，使所述细胞或病毒沿腔体内部的一条路径向下移动，且由该腔体中的孔口分开收集至少一些所述细胞或病毒。在一些实施方式中，使所述细胞或病毒沿腔体内部的一条路径向下移动，并且由该腔体中与所述细胞或病毒路径垂直的多个孔口分开收集所述细胞或病毒。在一些实施方式中，这些孔口在腔体内的定位对应于所述细胞或病毒的Pi。
[0035]在一些实施方式中，使用电泳使细胞或病毒自腔体移动。在一些实施方式中，通过在腔体内泵送流体使细胞或病毒自腔体移动。
[0036]在一些实施方式中，通过电泳使细胞或病毒在所述腔体内定位。
[0037]在一些实施方式中，所述方法还包括检测定位在所述腔体内的一种或多种目标细胞类型或病毒。
[0038]在一些实施方式中，所述方法还包括从所述腔体分离一种或多种目标细胞类型或病毒，由此从混合物中的至少一种其他细胞类型分离所述目标细胞类型或病毒。
[0039]在一些实施方式中，所述方法包括从所述混合物浓缩细胞类型或病毒。
[0040]在一些实施方式中，所述细胞类型是细菌。
[0041]在一些实施方式中，所述pH梯级或pH梯度从所述混合物的至少一种细胞中分离
出病毒。
[0042]在一些实施方式中，所述目标细胞是真核细胞或原核细胞。在一些实施方式中，所述目标细胞是肿瘤细胞。在一些实施方式中，所述目标细胞是B-淋巴细胞或T-淋巴细胞。在一些实施方式中，所述混合物是来源于人的生物样品。
[0043]在一些实施方式中，所述样品是血液、粪便或尿液样品。在一些实施方式中，所述样品是废水样品。
[0044]在一些实施方式中，使对目标细胞或病毒具有亲和性的试剂连接至腔体中的某一位置并使混合物的组分移向该试剂或经过该试剂，从而使目标细胞或病毒与该试剂结合。[0045]定义
[0046]“亲和试剂”表示特异性结合目标分子的分子。示例性的亲和试剂包括，例如抗体、抗体片段或适体(aptamer)。当目标分子是核酸时,亲和试剂可以是,例如互补核酸。
[0047]“标记物”或“可检测部分”指可通过分光镜、光化学、生物化学、免疫化学、化学或其他物理手段检测到的成分。例如，有用的标记物包括32P、荧光染料、高电子密度试剂、酶(例如，ELISA中所常用)、生物素、地高辛或半抗原以及可被检测的蛋白质或其他实体(，例如通过将放射性标记物整合至肽中或用于检测与肽特异性反应的抗体)。所述标记物可整合至例如抗体和/或其他蛋白质的任何位置。可使用本领域所已知的用于使抗体接合所述标记物的任何方法，如使用如下文献中所述的方法:Hermanson，《生物结合技术》(Biocon jugate Techniques) 1996,圣迭戈的学术出版社有限公司(Academic Press, Inc.)。或者，利用高亲和相互作用的方法也可以达到相同效果，其中一对结合伴侣(bindingpartner)中的一员能够结合另一员，例如生物素和链霉亲和素。因此，例如，亲和试剂可直接标记有同位素、发色团、发光团、色原体，或者被间接标记，例如通过生物素，该生物素随后可被链霉亲和素复合体(任选包含荧光、放射性或可被直接检测的其它部分)结合。因此，生物素化的抗体视为如本文所用的“带标记抗体”。
[0048]在提及亲和试剂和目标分子时，短语“特异性(或选择性)结合”或“与……特异性(或选择性)免疫反应”或“对……具有结合特异性”表示所述亲和试剂和目标分子间的结合作用，通过这种结合作用确定蛋白质和/或其他生物物质的异质群体存在下的所述目标分子的存在。因此，举例来说，在免疫测定条件下，抗体在样品中结合特定蛋白质而不以显著量结合样品中的其他蛋白质。这类条件下与抗体的特异性结合可能需要就抗体对特定蛋白质的特异性来选出的抗体。例如，可选择针对某一蛋白质产生的抗体来获得不与其他蛋白质而与该蛋白质特异性免疫反应的抗体。可使用多种免疫测定形式来选择与特定蛋白质特异性免疫反应的抗体。 例如，常规采用固相ELISA免疫测定、Western印迹或免疫组织化学法来选择与某一蛋白质特异性免疫反应的单克隆抗体。关于可用于确定特定免疫反应性的免疫测定形式和条件的描述，请参见Harlow和Lane《抗体,实验室手册》(Antibodies, ALaboratory Manual),纽约的冷泉港出版社(Cold Spring Harbor Publications), (1998)。通常而言，特异性或选择性反应应是背景信号或噪音的至少两倍，更通常而言是背景的多于10至100倍。
[0049]术语“生物样品”涵盖从生物体获得的多种样品类型。该术语涵盖体液如血液、唾液、血清、血浆、尿液和生物来源的其它液体样品，固体组织样品如活检样品或组织培养物或来源于其中的细胞及其子代。该术语涵盖获得后经过任何方法处理的样品，如试剂处理、溶解、沉降或对某些组分的富集。该术语涵盖临床样品，也包括细胞培养物中的细胞、细胞上清液、细胞裂解物、血清、血浆、其他生物液体和组织样品。该术语不限于人类来源或医学相关的样品，并因此可包括例如基于植物、基于原核生物或生物来源的其它样品。
[0050]术语“抗体”表示多肽包含骨架区(如来自免疫球蛋白基因)或其片段，其特异性结合并识别抗原或所需靶标。通常，“可变区”包含所述抗体(或其功能等价物)的抗原结合区域并控制结合的特异性和亲和性。参见Paul《基础免疫学》(Fundamental Immunology)(2003)。
[0051]示例性的免疫球蛋白(抗体)结构单元包括四聚体。每个四聚体由相同的两对多肽链构成，每对包含一条“轻”链(约25kD)和一条“重”链(约50-70kD)。每条链的N末端确定约100至110或更多个氨基酸构成的可变区，其主要负责抗原识别。术语可变轻链(Vl)和可变重链(Vh)分别指这些轻链和重链。
[0052]“同种型”是由重链恒定区确定的抗体类别。免疫球蛋白基因包括K、λ、α、Y、δ、ε和μ恒定区基因。轻链被归类为K或λ。重链被归类为Y、μ、α、δ或ε，这进而确定了同种型类别，分别为IgG, IgM, IgA, IgD和IgE0
[0053]抗体可以完整免疫球蛋白形式或任何包含特定抗原结合活性的多种已充分表征片段的形式。可通过多种肽酶消化生成这类片段。胃蛋白酶在铰链区中二硫键以下消化抗体产生Fab的二聚体F(ab) ’ 2，Fab本身是通过二硫键连接到Vh-ChI的轻链。可在温和条件下还原F(ab) ’ 2以打断铰链区中的二硫键，由此将F(ab) ’ 2 二聚体转化为Fab’单体。Fab’单体本质上是Fab附带有部分铰链区(参见《基础免疫学》(Fundamental Immunology)(Paul主编，第三版，1993))。虽然根据对完整抗体的消化定义了多种抗体片段，但技术人员会理解，这类片段可使用化学方法或重组DNA方法从头合成。因此，本文所用术语抗体也包括通过修饰整个抗体而生成的抗体片段，或使用重组DNA的方法从头合成或使用噬菌体展示文库鉴定的那些抗体片段(参见例如McCafferty等，Nature 348:552-554(1990))。
[0054]“目标分析物”或“目标分子”可包括生物分子或生物来源的分子。目标分子包括但不限于:蛋白质、多核苷酸、代谢物、病毒和病毒样颗粒及细胞。蛋白质的示例包括但不限于:抗体、酶、生长调节物、凝血因子和磷蛋白。多核苷酸的示例包括DNA和RNA。病毒的示例包括包膜病毒和无包膜病毒。
[0055]术语“核酸”和“多核苷酸”在本文中可交换使用以表示脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其单链或双链形式的聚合物。该术语涵盖包含已知核苷酸类似物或经修饰的主链残基或连接的核酸，其可以是合成的、自然产生和非自然产生的，其与参比核酸具有相似结合性质，且以与参比苷核酸相似的方式代谢。这类类似物的示例包括但不限于:硫代磷酸(酯)、氨基磷酸(酯)、甲基膦酸(酯)、手性甲基膦酸(酯)，2-0_甲基核糖核苷酸和肽核酸(PNA)。
[0056]术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可交换使用以表示氨基酸残基的聚合物。该术语可用于表示其中一个或多个氨基酸残基是相应天然产生氨基酸的人造化学模拟物的氨基酸聚合物，以及天然产生的氨基酸聚合物和非天然产生的氨基酸聚合物。
[0057]在所附权利要求中，术语“一个”或“一种”旨在表示“一个或多个/ 一种或多种”。在述及步骤或元件时，其前导术语“包含”或其变化形式例如“含有”和“包括”旨在表示其它步骤或元件的增加是可任选且不被排除的。
【具体实施方式】
[0058]如本文中更详细的描述，提供允许从装置内腔体中的样品分离目标物(如细胞或病毒、细胞器或其他细胞组分)的方法和装置，其中任选联合使用I)用于移动目标物的电场，和2)采用质子或氢氧根注射器对腔体分区中的溶液pH值的电控制。所述方法利用目标物电荷的PH依赖性，例如通过将分区附近溶液的pH值设置为等于或接近感兴趣目标物的Pl，以使带电目标物定位至该特定分区。一些实施方式中，在腔体内施加电场，处于目标物的Pl时，该目标物变为不带电并因此在电场中不再移动。下文描述了利用这一方面的多种实施方式。
[0059]所述装置可具有多种构造。腔体可包含一个或多个(如1、2、3、4、5个或更多个)质子或氢氧根注射器，所述注射器通过双极膜与所述腔体分隔，其中所述注射器包含电极，由此允许水分子的电水解和腔体内某一区域中pH的局部控制。参见例如，图2。在一些方面中，所述装置包含具有第一和第二电极的至少一个腔体，其能够使带电目标物在电场中移动。
[0060]术语“腔体”和“通道”在本文中同义使用。这些术语涵盖长度远大于宽度(如10xU00xU000x)的容器，其允许沿腔体的长轴设置多个注射器。在不限制本发明范围的前
提下，这里指出构建了具有如下尺寸的腔体。
[0061]
【权利要求】
1.一种从包含一个或多个细胞的生物样品纯化至少一种细胞组分的方法，所述方法包括， 向腔体中提供样品，所述样品包含来自所述一个或多个细胞的细胞裂解物；以及 使用一个或多个质子注射器和/或氢氧根注射器在所述腔体中生成PH梯度或pH梯级，从而来自所述细胞的至少两种组分基于所述组分的等电点(Pl)定位在所述腔体中的不同位置，由此从不同细胞组分纯化出至少一种细胞组分。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括检测所述至少两种组分中的至少一种的存在或量。
3.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括收集所述至少两种不同组分中的至少一种，由此从同一生物样品纯化至少一种组分。
4.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还从同一生物样品分开收集两种不同细胞组分，由此从同一生物样品纯化所述两种组分。
5.权利要求3或4所述的方法，其特征在于，使所述组分沿腔体内部的一条路径移动，并且由所述腔体内的孔口分开收集所述组分中的至少一些。
6.权利要求3或4所述的方法，其特征在于，使所述组分沿腔体内部的一条路径向下移动，并且通过腔体内与所述组分的路径垂直的孔口分开收集所述组分。
7.权利要求6所述的方法，其特征在于，所述孔口定位于所述腔体内对应于所述组分的pi。
8.权利要求5所述的方法，其特征在于，通过电泳使所述组分移动。
9.权利要求5所述的方法，其特征在于，通过泵送腔体内的液体来使所述组分移动。
10.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种组分通过电泳定位。
11.权利要求1所述的方法，其特征在于，使一个或多个细胞裂解并随后提供至所述腔体内以生成细胞裂解物。
12.权利要求1所述的方法，其特征在于，使一个或多个细胞在所述腔体内裂解。
13.权利要求12所述的方法，其特征在于，所述细胞裂解的方式是通过生成足够高或足够低的pH以使所述一个或多个细胞裂解。
14.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种组分选自细胞核、DNA、RNAJi和蛋白质。
15.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述不同组分是不同的亚细胞隔室和/或细胞器。
16.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述裂解物来自单个细胞。
17.权利要求1所述的方法，其特征在于，使对目标细胞组分具有亲和性的试剂连接至腔体中的某一位置并使所述细胞裂解物的组分移向该试剂或经过该试剂，由此使所述目标细胞组分与所述试剂结合。
18.权利要求17所述的方法，其特征在于，所述目标细胞组分是RNA，并且所述试剂包含寡核苷酸。
19.权利要求18所述的方法，其特征在于，所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
20.一种从生物样品捕获细胞、细胞组分或病毒的装置或系统，所述装置包含，腔体，所述腔体用于沿轴线容纳包含生物样品的溶液，其中所述腔体包含位于所述腔体表面的一个或多个狭缝或其他开口，所述狭缝或其他开口与一个或多个质子注射器或氢氧根注射器连通，并且其中所述腔体包含连接至所述腔体内某一位置的试剂，其中所述试剂对目标细胞组分、细胞或病毒具有亲和性； 电源，所述电源用于在所述腔体内于所述注射器中并可任选沿所述轴线施加电场； 一个或多个质子注射器或氢氧根注射器，所述注射器用于通过注射离子流沿所述腔体内的所述轴线建立pH梯度,其能够在一个pH梯度中形成一个或多个pH梯级； 控制器，所述控制器控制所述一个或多个离子源以调节所述PH梯度，从而诱导带电组分、细胞或病毒在所述腔体内沿轴线定位。
21.权利要求20所述的装置或系统，其特征在于，所述试剂包含寡核苷酸。
22.权利要求21所述的装置或系统，其特征在于，所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
23.一种用于从混合物中使一种或多种目标细胞类型或病毒与至少一种其他细胞类型分离和/或从混合物浓缩目标细胞类型或病毒方法，所述方法包括， 向腔体中提供所述混合物和缓冲溶液；以及 使用一个或多个质子和/或氢氧根注射器在所述腔体中生成PH梯度或pH梯级，由此基于所述细胞或病毒的 等电点(Pl)使细胞在所述腔体内定位。
24.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法还包括检测所述腔体中某一位置处的细胞或病毒的存在或量。
25.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法还包括基于一种或多种细胞或病毒的Pi收集所述一种或多种细胞或病毒。
26.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法还包括基于不同细胞或病毒的两个或更多个不同Pl分开收集一种或多种细胞或病毒。
27.权利要求25或26所述的方法，其特征在于，使所述细胞或病毒沿所述腔体内部的一条路径向下移动，并且由所述腔体内的孔口分开收集所述细胞或病毒中的至少一些。
28.权利要求25或26所述的方法，其特征在于，使所述细胞或病毒沿所述腔体内部的一条路径向下移动，并且由所述腔体内与所述路径垂直的多个孔口分开收集所述细胞或病毒。
29.权利要求28所述的方法，其特征在于，所述孔口定位于所述腔体内以对应所述细胞或病毒的Pl。
30.权利要求27所述的方法，其特征在于，通过电泳使所述细胞或病毒移动。
31.权利要求27所述的方法，其特征在于，通过泵送腔体内的流体使所述细胞或病毒移动。
32.权利要求23所述的方法，其特征在于，通过电泳使所述细胞或病毒定位。
33.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法还包括检测所述腔体内定位的一种或多种目标细胞类型或病毒。
34.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法还包括从所述腔体分离一种或多种目标细胞类型或病毒，由此从所述混合物中使所述目标细胞类型或病毒与至少一种其他细胞类型分离。
35.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述方法包括从所述混合物浓缩一种细胞类型或病毒。
36.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述细胞类型是细菌。
37.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述生成从所述混合物中使病毒与至少一种细胞分离。
38.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述目标细胞是肿瘤细胞。
39.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述目标细胞是B-淋巴细胞或T-淋巴细胞。
40.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述混合物是来源于人的生物样品。
41.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述样品是血液、粪便或尿液样品。
42.权利要求23所述的方法，其特征在于，所述样品是废水样品。
43.权利要求23所述的方法，其特征在于，使对目标细胞或病毒具有亲和性的试剂连接至腔体中的某一位置并使所述混合物的组分移向该试剂或经过该试剂，由此使所述目标细胞或病毒与该 试剂结合。
【文档编号】C07K14/00GK104023551SQ201280065453
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2012年11月5日 优先权日:2011年11月4日
【发明者】A·保勒斯, C·迪吉斯, R·保格弗, S·班德卡维, A·哈恩-温德加森, A·珀什, E·布罗德, U·司旺 申请人:生物辐射实验室股份有限公司, 泰克尼翁研究发展基金有限公司