生产生物表面活性剂的方法
【专利摘要】本发明涉及一种生产生物表面活性剂(如，枯草菌表面活素)的方法，其包括在包含酒糟作为碳源的液体培养基中培养至少一种生物表面活性剂产生微生物。还描述了在三次采油中使用含有粗制生物表面活性剂的培养液和作为三次采油中的抗细菌组合物的方法。还描述了分离所述生物表面活性剂后使用所述培养液残余物作为肥料的方法以及用于该用途的组合物。
PTA-13451
2013.01.09
【专利说明】生产生物表面活性剂的方法 发明领域
[0001] 本发明涉及一种生产生物表面活性剂（如，枯草菌表面活素）的方法，其包括在包 含酒糟（Vinasse)作为碳源的液体培养基中培养至少一种生物表面活性剂产生微生物。还 描述了在三次采油中使用含有粗制生物表面活性剂的培养液和作为三次采油中的抗细菌 组合物的方法。还描述了分离该生物表面活性剂后使用所述培养液残余物作为肥料的方法 以及用于该用途的组合物。
[0002] 发明背景
[0003] 已经对生物表面活性剂（如，枯草菌表面活素）的生产产生了浓厚的兴趣，因为它 们是非常有力的表面活性剂，能够在非常低的浓度下改变液体的界面张力。此外，许多表面 活性剂具有抗微生物活性。
[0004] 环状脂肽，如枯草菌表面活素，具有环状肽部分和源自脂肪酸的 部分。枯草菌表面活素具有包括D-和L-氨基酸的七个氨基酸的环状肽， Glu-Leu-D-Leu-Val-Asp-D-Leu-Leu,通过C12-C17 P轻基脂肪酸，从N端连接至C端，以形成 环状部分，如以下所示。
[0005] 地衣素（Iichenysin)具有相似的结构，氨基酸序列不同于枯草菌表面活素， Gln-Leu-D-Leu-Val-Asp-D-Leu-Ile,通过C 12-C17 P轻基脂肪酸，从N端连接至C端，以形成 环状部分。
[0006]芬芥素（fengycin)是具有序列 Glu-D-Orn-Tyr-D-Allo-Thr-Glu-D-Ala-Pro-Glu -D-Tyr-Ile的环状脂肽，其中该肽在位置3的酪氨酸苯氧基和位置10的Ile的C-端之间 环化，脂肪酸连接该肽，与N-端形成酰胺。
[0007]
【权利要求】
1. 生产生物表面活性剂的方法，其包括在包含酒糟作为碳源的液体培养基中培养至少 一种生物表面活性剂产生微生物，其中所述培养在PH6至8和25°C至40°C的温度下进行。
2. 权利要求1的方法，其中所述至少一种生物表面活性剂产生微生物选自枯草芽孢 杆菌（Bacillus subtilis)、地衣芽抱杆菌（Bacillus Iicheniformis)、解淀粉芽抱杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)、短小芽抱杆菌（Bacillus pumiIus)、日本甲虫芽抱杆菌 (Bacillus popilliae)、RSA-203 及其混合物。
3. 权利要求2的方法，其中所述至少一种生物表面活性剂产生微生物选自枯草芽孢杆 菌、地衣芽孢杆菌及其混合物。
4. 权利要求2或3任一项的方法，其中所述枯草芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌NRRL B-3383、枯草芽孢杆菌RSA-203或其混合物。
5. 权利要求2和4任一项的方法，其中所述至少一种生物表面活性剂产生微生物包含 枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的混合物。
6. 权利要求1至5任一项的方法，其中所述酒糟是甘蔗酒糟。
7. 权利要求1至6任一项的方法，其中所述酒糟以3至10% w/v的量存在于所述液体 培养基中。
8. 权利要求1至7任一项的方法，其中所述生物表面活性剂选自枯草菌表面活素、伊枯 草菌素、地衣素、芬芥素及其混合物。
9. 权利要求8的方法，其中所述生物表面活性剂是枯草菌表面活素。
10. 权利要求1至9任一项的方法，其中所述温度为30°C至35°C。
11. 权利要求1至10任一项的方法，其中所述pH为6. 5至7. 2。
12. 根据权利要求1至11任一项的方法，其中给所述液体培养基接种至少一种生物表 面活性剂产生微生物的接种物，以提供600_下1. 2至1. 4的初始光密度。
13. 权利要求1至12任一项的方法，其中所述液体培养基进一步包含可异化氮源。
14. 权利要求13的方法，其中所述可异化氮源是铵盐。
15. 权利要求14的方法，其中所述铵盐是硝酸铵。
16. 权利要求1至15任一项的方法，其中所述液体培养基进一步包含至少一种无机盐。
17. 权利要求16的方法，其中所述至少一种无机盐是锰、钠或铁的硫酸盐、氯化物或磷 酸盐，或所述盐的混合物。
18. 权利要求1至17任一项的方法，其中所述培养进一步包括在培养过程中给所述液 体培养基通气，并且收集通气过程中产生的起泡物。
19. 权利要求18的方法，其中在所述培养开始前开始通气。
20. 由权利要求1至19任一项的方法生产的生物表面活性剂。
21. 包含至少一种生物表面活性剂产生微生物和酒糟残余物的组合物，其中所述酒糟 残余物是通过在培养过程中由生物表面活性剂产生微生物分解酒糟而形成的。
22. 权利要求21的组合物，进一步包含至少一种生物表面活性剂。
23. 权利要求22的组合物，其中所述生物表面活性剂选自枯草菌表面活素、地衣素、伊 枯草菌素、芬芥素或其混合物。
24. 权利要求23的组合物，其中所述生物表面活性剂是枯草菌表面活素。
25. 权利要求21至24任一项的组合物，进一步包含微生物食物源。
26. 权利要求21至25任一项的组合物在三次采油中的用途。
27. 权利要求21至25任一项的组合物作为抗细菌组合物保护设备在三次采油或天然 气高压井处理过程中免受腐蚀的用途。
28. 根据权利要求27的用途，其中所述天然气高压井处理是水压裂。
29. 权利要求21至25任一项的组合物作为肥料的用途。
30. 三次采油的方法，其包括：
1. 用包含生物表面活性剂的组合物处理油井，和
2. 用根据权利要求21至25任一项的组合物处理所述油井。
【文档编号】C07K14/195GK104321422SQ201380012425
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2013年1月25日 优先权日:2012年1月27日
【发明者】M·P·布拉尔考斯基, S·A·布鲁克斯, S·M·希恩顿, D·M·莱特, S-H·杨 申请人:Gfs澳大利亚股份有限公司