作为TNF－α抑制剂的环状肼衍生物的制作方法

专利名称：作为TNF－α抑制剂的环状肼衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型的肼衍生物、其制备方法、用途和含有这些衍生物的药物制剂。
1.在第一个实施方案中，本发明提供的新型肼衍生物是通式(I)的化合物 其中W代表O，S，CO，NR5，(CR3R4)m，或者CR11；X代表CO，NR6，(CH2)n，CR12，或者CHR13；Y代表CO，NR7，(CH2)p，或者CHR14；Z代表CO，CS，SO2，或者CH2m代表0或者1；n和p每个分别表示0，1或者2；R1代表低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基、芳基或芳基-低级烷基；R2代表低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基，或通式为V-芳基、V-杂环基，或-(CH2)q-CH＝CR8R9的基团；R3，R4，R5，R6和R7每个分别代表氢、任选取代的低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基、芳基、芳基-低级烷基、杂环基或杂环基-低级烷基；或者R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成3-8元环；或者R5和R6，或R5和R7与它们所连接的氮原子一起形成3-8元环；或者R11和R12与它们所连接的sp2碳原子一起形成稠合的低级环烯基、芳基或杂芳环；或者R5与R13或R14之一一起代表低级亚烷基，其中一个CH2基团被一个杂原子任选取代；或者R6或R7与R3或R4之一一起代表低级亚烷基，其中一个CH2基团被一个杂原子任选取代；或者R3和R4一起代表低级亚烷基，其中一个CH2基团被一个杂原子任选取代；V代表一个间隔基；R8和R9一起代表低级亚烷基，其中一个CH2被一个杂原子任选取代；q代表1或者2；另有如下限制条件(i)至少W，X和Y中之一代表前述这些取代基的一种杂原子或者CO，(ii)当W代表O时，Z代表CO，或者SO2或者CS；(iii)W，X，Y和Z不都是CO；(iv)W，X，和Y不分别是NR5，NR6和NR7；和以上化合物适合药用的盐。
2.在另一根据1.优选的实施方案中，本发明提供的新型肼类衍生物也是通式(Ia)的化合物 其中W代表O，S，CO，NR5或者(CR3R4)m；X代表NR6或-(CH2)n-；Y代表CO，NR7或者-(CH2)p-；Z代表CO，SO2或者CH2；m代表0或者1；n和p每个分别代表0，1或者2；R1代表低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基，芳基或者芳基-低级烷基；R2代表低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基或者通式为V-芳基，V-杂环基或者-(CH2)q-CH＝CR8R9；R3，R4，R5，R6和R7每个分别代表氢，低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基，芳基，芳基-低级烷基，杂环基或者杂环基-低级烷基；或者R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成的3-8元环；或者R5和R6，或R5和R7与它们所连接的氮原子一起形成的3-8元环；V代表一个间隔基；R8和R9一起代表低级亚烷基，其中一个CH2被一个杂原子任选取代；q代表1或者2；另有如下限制条件(i)至少W，X和Y中之一代表一种杂原子或者CO；(ii)当W代表O时，Z代表CO或者SO2；(iii)W，X，和Y不分别是NR5，NR6和NR7；和以上化合物适合药用的盐。
本发明提供的肼类衍生物是细胞中释放的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制剂。可被用作药物，特别是用于治疗炎症性和自身免疫性疾病(如，风湿性关节炎、肠道炎症性疾病、多发性硬化症和牛皮癣)、骨关节炎、呼吸性疾病(如，哮喘和慢性梗阻性肺病)、肿瘤、恶病质、心血管性疾病(如充血性心力衰竭)、发热、出血和脓血症的药物。
与结构上相关的异羟肟酸衍生物相比，本发明所提供的肼类衍生物对基质金属蛋白质酶(MMP)族，如胶原酶、溶基质素、白明胶酶，仅显示出弱的抑制活性。
此处所用的术语“低级烷基”，单独出现，或以“低级环烷基-低级烷基”、“芳基-低级烷基”或“杂环-低级烷基”等结合状态出现的，表示直链或支链烷基，含有8以下，优选是4以下碳原子，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。
与低级烷基有关的术语“任选取代”表示一种烷基，可以被如羟基、氨基、氨基-低级烷基、单-或二(低级烷基)氨基、低级烷基硫代、低级烷氧羰基或低级烷氧基取代。
术语“低级环烷基”，单独出现，或以“低级环烷基-低级烷基”结合状态出现的，表示含3-7碳原子的环烷基，例如环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。环丙基甲基，2-环丁基-乙基和3-环己基-丙基都是低级环烷基-低级烷基的例子。
术语“低级烯基”表示含2-7碳原子的烯基，例如烯丙基，乙烯基和丁烯基。
术语“低级环烯基”表示含4-8碳原子的环烯基，例如环戊烯，环己烯和环庚烯。
术语“低级炔基”表示含2-7碳原子的炔基，例如丙炔基或者丁炔基。
术语“低级亚烷基”表示含2-6个碳原子的亚烷基，例如二亚甲基，三亚甲基，四亚甲基等。因此，R3和R4，或R8和R9与它们所连接的碳原子一起，可以代表一个环丙烷，环丁烷，环戊烷，环己烷或者四氢吡喃环。类似的，R6或R7与R3或R4之一与它们所连接的碳原子和氮原子，可以代表如吡咯烷，哌啶，或者哌嗪环。
术语“芳基”，单独或者以结合状态出现，如“芳基-低级烷基”的，表示被下列基团任选取代的苯基或者萘基卤素，例如氟，氯，溴或者碘，低级烷基，低级烷氧基，三氟甲基，羟基，低级烷氧基羰基，硝基，苯基或者类似基团，例如苯基，1-萘基，2-甲基苯基，4-甲氧基苯基，2，4-二氟苯基，4-硝基苯基和4-甲氧基羰基苯基。苄基，4-氯苄基，4-溴苄基，3-羟基苄基，4-甲氧基苄基，4-硝基苄基，2-苯基乙基，3，4-二甲氧基-苯乙基等都是芳基-低级烷基类的典型例子。
术语“杂芳基”表示一个5元或者6元的芳香杂环，含有一个或多个杂原子，选自氮，硫和氧和/或一个SO或者SO2基团，其被例如卤素、低级烷基、低级烷氧基和/或氧和/或任选的稠和苯环任选取代。
术语“杂环基”，单独或者以“杂环基-低级烷基”结合形式，表示一个4-，5-，6-或者7-元的饱和或者部分不饱和的或者5-或者6-元的芳香杂环，其通过一个C原子或者仲N原子(例如-NH-)结合，含有一个或者多个杂原子，选自氮，硫和氧和/或一个SO或者SO2基团，其被例如卤素，低级烷基，低级烷氧基和/或氧和/或任选的稠合苯基任选取代。这样的杂环基的实例包括吡咯烷基，吡咯啉基，吡唑啉基，哌啶基，N-甲基哌啶基，吗啉基，噻吗啉基S，S-二氧化物，六氢氮杂卓基，四氢吡喃基，四氢硫代吡喃基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，恶唑基，异恶唑基，oxetanyl，咪唑烷基，二氧戊环基，吡咯基，吡啶基，嘧啶基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并噻唑基，吲哚基，异吲哚基，例如，苯二甲酰亚氨基，喹啉基和异喹啉基。
术语“杂原子”表示氮，硫或者氧或者一个SO或者SO2，其中氮被下列基团任选取代例如低级烷基，氨基-低级烷基，单-或二-(低级烷基)氨基-低级烷基，芳基-低级烷基，杂环基-低级烷基，芳基，杂环基，低级烷基羰基，氨基-低级烷基羰基，芳基-低级烷基羰基，芳基羰基，杂环基羰基，低级烷氧基羰基，芳基-低级烷氧基羰基，芳氧基羰基，杂-环氧基羰基，低级烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂环基磺酰基，或者任何其它N-保护基。
酸性的式(I)或式(Ia)化合物与碱可形成适合药用的盐，例如与碱金属氢氧化物，如氢氧化钠和氢氧化钾，碱土金属氢氧化物，例如氢氧化钙，氢氧化钡和氢氧化镁等。碱性的式(I)或式(Ia)化合物可与无机酸形成适合药用的盐，例如与氢卤酸，如盐酸和氢溴酸，硫酸，硝酸和磷酸；也可以与有机酸，例如乙酸，酒石酸，琥珀酸，富马酸，马来酸，苹果酸，水杨酸，柠檬酸，甲磺酸和对甲苯磺酸形成适合药用的盐。
虽然此处呈现的化学式显示的是分别有各自立体化学式的化合物，但本发明不仅包含了所述的立体异构体，也包括了相应的消旋体和非对映异构体混合物。而且，当V所代表的间隔基中存在烯烃双键时，如-CH2-CH＝CH-，可以是(E)或者(Z)构型，优选的是(E)构型。
根据1或2，上述式(I)或式(Ia)化合物其它的实例见下文。
3.在根据1的化合物中，包括了W，X，Y和Z的环优选具有如下的式(a)～式(u)中的一种结构，其中R3，R4，R5，R6，R7，R11，R12和R13的定义如前述 上述包括了W，X，Y和Z的环的式(s)的实例是 和 4.根据2的优选的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环，具有如上述的式(a)-(q)的结构，并且其中R3，R4，R5，R6和R7的定义如前述，。
5.根据1或3的优选的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环，具有如上述的式(a)，(b)，(j)，(m)(r)，(s)或(u)的结构。
6.根据1-5的更优选的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环，具有如上述的式(a)，(i)或(m)的结构。
7.在实施例1-6中，V所代表的间隔基可以是，例如，式-(CH2)r-U-(CH2)s-的基团，其中r和s每个分别代表0，1，2或3，并且其中U不存在，或代表-CH＝CH-，-C≡C-，-S-，-O-，-NH-，-NHCO-，-CONH-，-SO2-，-NHSO2-，-SO2NH-，-NHCONH-或者-NHSO2NH-。
8.关于实施例1-7，其中R1代表低级烷基，特别是异丁基的式(I)或式(Ia)的化合物是优选的。
9.实施例1-8中，优选的式(I)或式(Ia)的化合物的实例中，R2代表低级环烷基-低级烷基，特别是3-环己基丙基，或者，其中R2代表通式为-(CH2)3-芳基，或-CH2-CH＝CH-芳基，特别是其中“芳基”代表未取代的苯基的基团，或者其中R2代表苯基苄基。
在上述实施例1-6中，优选的式(I)或(Ia)的化合物的实例中，R3R4与它们所连接的碳原子一起形成的“3-8元环”中，优选饱和的，未取代的3-8元碳环，其中一个CH2被一个杂原子任选取代，杂原子的定义如前所述。R5和R6，或R5和R7与它们所连接的氮原子一起形成的3-8元环中，优选饱和的，未取代的3-8元碳环。
10.优选的式(I)或(Ia)化合物的实例的具体结构如下(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，(E)-N-(六氢-2，6-二氧代-1-嘧啶基)-2(R)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，2(R)-[4-环己基-1(S)-(羟基氨基甲酰基)丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，(E)-N-(四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺，(E)-2(R)-[1(S)(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，以及2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺。
其它优选的式(I)化合物有2(R)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-[2-(甲基硫)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，3-[2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4，5]癸烷-8-羧酸苄酯；N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺；N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧噻吩并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-甲氧基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，以及1-(8-乙酰基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺。
根据本发明提供的方法，前述实施例1-10的这种新型肼类衍生物的制备方法为从如下通式的化合物中脱去R10代表的保护基 其中R1，R2，W，X，Y和Z的定义如前述，R10代表保护基。并且，如果需要，可将所得到的式(I)或式(Ia)化合物转化成适合药用的盐。
可选择的，其中W代表NR5，R5代表H的前述新型肼衍生物，及其适合药用的盐的制备方法为从如下通式的化合物中脱去R10和P代表的保护基 其中R1，R2，X，Y和Z的定义如前述，每个R10和P代表一个保护基并且，如果需要，可将得到的式(I)或式(Ia)化合物转化为一种适合药用的盐。
在式(II)或(XLIV)化合物中，R10代表的保护基可以是任何常规的保护基，但优选四氢吡喃基，4-甲氧基苄基，苄基，或三(低级烷基)硅烷基，特别是叔丁基二甲基硅烷基。
可根据本质上已知的方法，脱去式(II)或(XLIV)化合物中的R10代表的保护基。例如，在一种低级醇，例如甲醇中，可用一种磺酸，例如甲磺酸或对-甲苯磺酸处理，可脱去四氢吡喃基。或者用氯化氢处理进行脱保护。4-甲氧基苄基的脱除可用，例如，三氟乙酸进行。在一种催化剂，例如钯作用下，在一种低级醇，如甲醇中进行氢化，可以用于脱去苄基。在水中或低PH的介质中，一个三(低级烷基)硅烷基可以除去，式(II)或式(XLIV))中每种化合物都可在其制备介质中进行脱去保护基(即在原位进行脱除)。
用已知方法，用适当的酸或碱处理，可将式(I)或式(Ia)化合物转化为适合药用的盐。
前述方法中被用作起始物质的式(II)和(XLIV)化合物是新型的，并形成本发明的另一个目的。
式(I)或(Ia)、(II)和(XLIV)的化合物，可用多种路径进行制备，见下文反应方案A，B，C，D，E，F，G，H，I，J，K和L。
其中Z代表CO或SO2的式(II)化合物，可按反应方案A的方法制备，其中，R1，R2，W，X和Y定义如前所述，Z代表CO或SO2，tBu代表叔丁基，且P表示任何用常规的氨基保护基，例如苄基，苄氧基羰基，9-芴基甲氧羰基，苯二甲酰亚氨基等保护的氨基。反应方案A
反应方案A中，第一个步包括式(III)化合物与式(IV)肼化合物或与该肼的酸(如盐酸)加成盐的缩合，得到式(V)酰肼。这种缩合是在已知的肽偶合反应条件下进行。例如，可以活化酯的方法，或用本质上己知的用于肽偶合的偶合剂，例如在1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐存在下的1-羟基苯并三唑。
在下一步反应中，式(V)化合物与式(VI)化合物进行反应，得到式(VII)化合物。式(V)化合物与式(VI)化合物按照常规方法进行反应，适宜在反应条件下是惰性的有机溶剂中，在有机碱存在下，在约0℃～约室温下进行反应。适当的溶剂包括卤代烃，例如二氯甲烷。吡啶和三(低级烷基)胺，例如三乙基胺，可被用作适当的有机碱。
在下一步反应中可能需要进行的式(VII)化合物的N-脱保护反应，也可按本质上已知的方法进行。例如，可通过氢化反应脱去苄基氧羰基，可用哌啶进行处理脱去芴基甲基氧羰基，用肼水合物处理，可将苯二甲酰亚氨基转化为氨基。
如上所得的式(VIII)化合物随后进行环化，得到式(IX)化合物。这种环化反应是在一种碱，例如N-乙基吗啉存在下，通过与光气反应进行的，反应温度是约0℃～约室温。该反应适宜在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如芳香烃，如苯，甲苯或二甲苯中进行。
式(IX)化合物进行脱酯化得到式(X)化合物的反应也按已知方法进行，通常是在室温下，用三氟乙酸在有机溶剂中进行处理进行的，所述有机溶剂在反应条件下为惰性，例如一种卤代烃，如二氯甲烷。
在反应方案A的最后一步中，通过与O-保护的式(XI)的羟胺缩合，将式(X)化合物转为式(II)化合物。按照本质上已知的肽偶合反应的方法，使用常规的偶合剂，例如1-羟基苯并三唑，在1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)碳化二亚胺盐酸盐存在下进行该缩合反应。
可以制备其中Z代表CH2的式(II)化合物，例如，如反应方案A所述，但使用如下通式的化合物P(W-X-Y)CHO(XII)其中W，X，Y和P的定义如前述，来代替式(VI)化合物，然后用碱金属氰基氢硼化物还原反应产物。式(V)化合物与式(XII)化合物的反应，在对甲苯磺酸和分子筛存在下，可以很方便地进行。该反应产物的还原，优选在一种低级醇，例如甲醇中进行。氰基氢硼化钠是优选的碱金属氰基氢硼化物。
可以制备其中Z代表CO的式(II)化合物，例如，如反应方案A所述，但用如下的通式化合物P-(W-X-Y)-Z-OH (XXX)其中W，X，Y和P的定义如前述，来代替式(VI)化合物，在已知的肽偶合反应条件下进行反应。
其中W代表(CR3R4)m，m代表1，X代表NR6，Y代表-(CH2)p-，Z代表CO的前述式(IX)化合物，也可以用前述式(V)化合物与如下的通式化合物进行反应而制备 其中W代表(CR3R4)m，m代表1，Y代表-(CH2)p-，且R60为除氢之外任何前述的R6的值，或者代表一个保护基，在碱，例如吡啶或一种三(低级烷基)胺(如三乙基胺)存在下，反应产物很容易进行环化反应，得到通式如下的化合物
其中R1，R2，R60，W，Y和tBu的定义如前述，并且脱去R60表示的任何保护基。
此外，通式如下的化合物 其中R1，R2，R60，W，X，Y，Z和tBu的定义如前述，可以用通式如下的化合物 其中R1，R2和tBu的定义如前述，与通式如下的化合物反应来制备 其中W，X，Y和Z的定义如前述，在一种硅烷基化试剂，如三甲硅氯，、一种碱和氯化亚铜存在下，或者在氰化银和碱的甲苯溶液存在下，在约70℃很容易进行该反应。
前述式(IX)化合物，其中W代表(CR3R4)m，m代表1，X代表-(CH2)n-，Y代表NR7，Z代表SO2，也可以通过将前述式(V)化合物与通式如下的化合物反应而得 其中P代表羟基保护基，如通过氢化反应可脱去的基团，例如苄基，通过水解反应可脱去的基团，例如甲基或乙基，或者用氟化物处理可脱去的基团，例如2-(三甲基硅烷基)乙基，在碱，例如吡啶或三(低级烷基)胺，如三乙基胺存在下，可以方便地将通式如下的反应产物 其中R1，R2，tBuO和P*的定义如前述，与通式如下的化合物进行缩合反应Br-X-W-CO2P*(XVIII)其中W和P*的定义如前述，且X代表-(CH)n，适当的方法是在碱的存在下，将所产生的通式如下的化合物脱去保护 其中R1，R2，W，X，P*和tBu的定义如前述，例如通过氢化反应，并且环化所产生的通式如下的化合物 其中R1，R2，W，X和tBu的定义如前述，尤其是通过羧基的活化，例如酰氯或混合的酸酐或活化的酯形式，得到通式如下的化合物 其中R1，R2，W，X和tBu的定义如前述，如果需要，可与通式如下的化合物进行反应R71-Br (XXI)
其中R71可以是上述除氢之外的R7的任何基团，在碱，例如碱金属碳酸盐，例如碳酸钾存在下，很容易得到通式如下的化合物 其中R1，R2，W，X，R71和tBu定义如前述。
前述式(IX)化合物，其中W代表NH，X代表-(CH2)n，Y代表NR7，并且Z代表SO2，也可以通过将前述式(XVII)化合物与通式如下的化合物反应来制备Br-X-CO2P (XXII)其中X和P*的定义如前述，在碱存在下，所产生的化合物脱去保护，例如通过氢化，很容易将得到的通式如下的化合物 其中R1，R2，X和tBu的定义如前述，转化为通式如下的化合物 其中R1，R2，X和tBu的定义如前述，可通过羧基的活化，例如酰氯，酸酐或活化的酯形式，与叠氮化钠或二苯基磷酰基叠氮反应，并加热式(XXIV)化合物，很容易得到一种通式如下的化合物 其中R1，R2，X和tBu的定义如前述，如果需要，通过与前述式(XXI)化合物反应，其可被N-取代。
还有一种制备式(IX)化合物的方法，所述化合物中W代表(CR3R4)m，m代表1，X代表-(CH2)n-，Y代表NR7，Z代表SO2，该方法包括前述式(V)化合物与通式如下的化合物进行反应CISO2Y-X-W-CO2P*(XXV)其中W，X，Y和P*的定义如前述，在碱，如吡啶或三(低级烷基)胺，例如三乙基胺存在下，很容易将得到的通式如下的化合物进行脱保护 其中R1，R2，W，X，Y，P*和tBu的定义如前述，例如，将所产生的通式如下的化合物进行氢化和环化 其中R1，R2，W，X，Y和tBu的定义如前述，可通过羧基的活化，例如以酰氯，混合酸酐或活化的酯形式，很容易得到一种通式如下的化合物 其中R1，R2，W，X，Y和tBu的定义如前述。
其中W代表NH，X代表-(CH)2-，Y代表-(CH2)p-，Z代表SO2的式(IX)的化合物，也可以通过转变通式如下的化合物而制备 其中R1，R2，X，Y和tBu的定义如前述，得到通式如下的化合物 其中R1，R2，X，Y和tBu的定义如前述，可通过羧基的活化，例如以酰氯，酸酐或活化的酯形式，与叠氮化钠或二苯基磷酰基叠氮反应，并加热式(XXIX)化合物，得到通式如下的化合物 其中R1，R2，X，Y和tBu的定义如前述。反应方案B 关于反应方案B，可以制备许多式(II)的化合物，其中Z代表CO；Y代表NR7，其中R7是H；R1，tBu和P*的定义如前述，R2的定义如前述，并且含有一个易受肼攻击的基团，例如酰胺；W代表CR11和X代表CR12，其中任何一个中的CR11和CR12与它们所连接的sp2碳原子一起形成一个稠合的低级环烯基、芳基或杂芳基环；或者W代表(CR3R4)m，其中m代表1，R3和R4定义如前述，X代表(CH2)n，其中n代表0。
可按照与前述反应方案A中类似的方法，或者，可选择的，可以通过将式(III)化合物与一个取代的式(XXXI)肼类化合物反应，来制备式(V)的化合物。如上所述，这种缩合是在已知的肽偶合反应条件下进行的。如果需要，用前述的已知方法，可将式(Va)化合物进行N-脱保护，可得到式(V)化合物，例如用氢化方法可除去苄基氧羰基。
式(V)化合物与式(XXXII)化合物的异氰酸酯反应，得到式(XXXIII)化合物。这种反应按常规方式进行，适宜在反应条件下呈惰性的有机溶剂中，在有机碱存在下，于室温左右进行。适当的溶剂包括二甲基甲酰胺，或芳香烃，例如甲苯，或者卤代烃，例如二氯甲烷；或其混合物。适当的碱的实例包括三乙基胺、吡啶，2，6-二甲吡啶和N-乙基吗啉。吡啶也可用作溶剂。
然后可以将式(XXXIII)化合物进行环化，得到式(IX)化合物。这种环化作用可以在式(XXXIII)化合物中自然地逐渐进行，或者将式(XXXIII)化合物置于有机溶剂中，在有机碱存在下，通过加热该溶液而进行反应。该反应适宜在在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如芳烃，如苯，甲苯或二甲苯中进行。适当的有机碱的例子是三乙基胺和四甲基胍。
如前所述，可用常规的方法除去存在于R1或R2的保护基，然后将式(IX)化合物转化为式(II)化合物，可按照前述反应方案A中的类似方法进行。反应方案C 有关反应方案C，可以制备许多个式(II)的化合物，其中，Z代表CS；W代表(CR3R4)m，其中，m代表1；X代表(CH2)n，其中，n代表0；Y代表NR7，其中，R7代表H；R1，R2，tBu和P*的定义如前述。
第一步，按照前述反应方案A中的类似方法制备的式(V)化合物，与式(XXXIV)化合物异硫氰酸盐反应，得到式(XXXV)化合物。该反应按照常规的方式，在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如芳香烃，如苯，甲苯或二甲苯中，在有机碱，如三乙基胺或四甲基胍存在下进行。
所产生的式(XXXV)化合物，用碱，例如三乙基胺处理，在有机溶剂，如甲苯中，在升温下经环化反应得到一个式(IX)化合物。
然后，按照反应方案A中类似的方法，可将环化的式(IX)化合物用转化为式(II)化合物。反应方案D 有关反应方案D，可以从式(XXXVI)化合物制备式(XXXVII)化合物。在这种情况下，Z代表CO；W代表(CR3R4)m，其中，m代表1，R3和R4一起代表低级亚烷基，其中一个或多个CH2被氮原子任选取代，氮原子本身也可以被取代；X代表(CH2)n，其中，n代表0；Y代表NR7，其中R7代表H；而R1，R2和tBu的定义如前述。
可以按照前述反应方案B中制备式(IX)化合物的类似方法，制备起始的式(XXXVI)化合物。如图所示，在W位置存在的杂原子是氮原子，其在式(XXXVI)化合物中是未被取代的，而式(XXXVII)化合物中是被取代。
在适宜的有机碱，例如吡啶存在下，可通过式(XXXVI)化合物与，例如酰氯或磺酰氯反应，进行氮原子的官能团化反应；或者在如前所述的已知的肽偶合反应条件下进行缩合反应；或者通过还原氨化反应进行，例如，先与一种醛反应，然后经催化还原或用氢化物还原剂，例如氰基氢硼化钠处理来进行。
按照前述反应方案A中的类似方法，可将式(XXXVII)化合物转化为式(II)化合物。反应方案E
可用反应方案E所述方法合成式(I)或(Ia)化合物，其中，Z代表CH2；W代表NR5，其中R5代表H；X代表-(CH2)n，其中n代表0；Y代表-(CH2)p-，其中，p代表1；R1，R2，tBu和P的定义如前述。
首先，将式(V)化合物环化，得到式(XXXVIII)化合物。这种环化是在有机溶剂中，在碱存在下，在约0℃～约室温条件下，用光气处理式(V)化合物的溶液实现的。该反应适宜在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如四氢呋喃中进行。适当的碱的实例是碳酸钠。
如上所得的式(XXXVIII)化合物可被烷基化得到式(XL)化合物。这种烷基化反应首先是用适当的碱处理在有机溶剂中的式(XXXVIII)化合物的溶液，然后加入式(XXXIXX)的二溴化物。适当的溶剂的实例是二甲基甲酰胺，适当的碱的实例是氢化钠。
用N-保护的式(XLI)的氨基化合物处理在有机溶剂中的所得的式(XL)的溴化物溶液，同时加热，得到式(XLII)化合物。
式(XLII)化合物经脱酯化反应和随后进行的偶合反应，经过式(XLIII)化合物，得到可按照反应方案A中的类似方法制备的式(XLIV)化合物，这些反应方法都类似于。除去R10基团的步骤也可用于除去保护基P。反应方案F 反应方案F说明了式(II)化合物的合成，其中，Z代表CH2；W代表NR5，其中R5代表H；X代表-(CH2)n-，其中，n代表0；Y代表CO；R1，R2和tBu的定义如前述。
可以按照前述反应方案E中类似的方法制备起始的式(XXXVIII)化合物。
如上所获的式(XXXVIII)化合物然后可被烷基化，得到式(IX)化合物。首先通过用适当的碱处理在有机溶剂中的式(XXXVIII)化合物溶液，然后加入式(XLV)的溴化物，可实现该烷基化反应。适当的溶剂的例子是二甲基甲酰胺，适当的碱的例子是氢化钠。
可以按照前述反应方案A中类似的方法，将式(IX)化合物转为式(II)化合物。反应方案G 反应方案G说明了式(II)化合物的合成，其中，Z代表CO；Y代表NR7；X代表-(CH2)n-，其中n代表0；W代表(CR3R4)m，其中，m代表1；R1，R2，R3，R4，tBu和P*的定义如前述。
可以按照前述反应方案E中类似的方法制备起始的式(XXXVIII)化合物。
然后，可以在有机碱存在下，通过在有机溶剂中的式(XXXVIII)化合物溶液与式(XLVI)化合物反应，可获得式(IX)化合物。适当的溶剂可以用芳香烃，例如甲苯，适当的有机碱可以是三乙基胺。
可以按照前述反应方案A中类似的方法，将式(IX)化合物转为式(II)化合物。反应方案H 反应方案H中表明了式(II)化合物的制备方法，其中，Z代表CS；Y代表NR7，其中，R7代表Me；X代表-(CH2)n-，其中，n代表1；W代表-(CR3R4)m-，其中，m代表0；R1，R2，R3，R4，tBu和P*的定义如前述。
第一步将式(V)化合物环化得到式(XLVII)化合物。该环化反应是在碱存在下，如碳酸钠，在约0℃～约室温条件下，通过与硫光气反应进行的。该反应适宜在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如四氢呋喃中进行。
上述反应所得的式(XLVII)化合物与式(XLVI)化合物进行反应，得到化合物式(IX)。该步骤是在合适的惰性有机溶剂，例如甲苯中，在碱，例如三乙基胺存在下，加温进行的。
可以按照前述反应方案A中类似的方法，将式(IX)化合物转为式(II)化合物。反应方案I 有关反应方案I中的化合物的合成方法如上所示，Z代表CO；Y代表NR7；X代表CO；W代表NR5，R*的定义如前述R5和R7，且其中，R5与R7的定义相同，R1，R2和tBu的定义如前述。
起始的式(XXXVIII)化合物可以用前述反应方案E中类似的方法制备。
将式(XXXVIII)化合物用式(XLVIII)的异氰酸酯化合物处理，得到式(IX)化合物。该反应是在反应条件下为惰性的溶剂，例如二甲基甲酰胺中，用适当的碱，例如氢化钠进行处理，然后加入式(XLVIII)化合物进行的。
用本质上已知的方法，按需要对式(IX)的化合物进行N-脱保护。例如，用氢化的方法脱去苄基。
然后，用前述反应方案A中的类似方法将式(IX)化合物转换为式(II)化合物。反应方案J 反应方案J示出了若干个式(II)化合物的合成，其中，Z代表CO；Y代表-(CH2)p-，其中，p代表0；X代表NR6；W代表NR5，R1，R2和tBu的定义如前述。
起始的式(XXXVIII)化合物可以用前述反应方案E中类似的方法制备。
将所得的式(XXXVIII)化合物与取代的式(XLIX)的肼化合物进行反应，得到式(L)化合物。此步反应是在适宜的惰性溶剂，例如芳香烃，如甲苯中，在升温下进行的。
随后，将式(L)化合物环化得到式(IX)化合物。该环化反应是将式(L)化合物在一种有机溶剂中，在碱性条件下与光气反应，在约0℃～约室温下进行。该反应适宜在反应条件下为惰性的有机溶剂，例如四氢呋喃中进行。适当的碱的实例是碳酸钠。
可用前述反应方案A中的类似方法将式(IX)化合物转换为式(II)化合物。反应方案K 式(II)化合物可用反应方案K所示的方法合成，其中，Z代表CO；Y代表CO；X代表-(CH2)n-，其中，n代表0；W代表NR5，其中，R5的定义如前述；R1，R2和tBu的定义如前述。
式(V)化合物与取代的式(LI)的异氰酸酯缩合得到式(LII)化合物。该反应是在适当的碱，例如吡啶存在下进行，吡啶也可用作溶剂。
随后，式(LII)化合物的溶液与草酰氯反应，得到式(IX)化合物。该反应可在适宜的惰性溶剂，如卤代烃，例如二氯甲烷中进行，在碱，例如吡啶存在下，在约0℃～约室温下进行。
可用前述反应方案A中所述的类似方法将式(IX)化合物转为式(II)化合物。反应方案L 反应方案L示出了式(II)化合物的合成方法，其中，Z代表SO2Y代表NR7，其中，R7代表H；X代表-(CH2)n，其中，n代表0；W代表(CR3R4)m，其中，m代表1，R3和R4代表H；R1，R2，tBu和P*的定义如前述。
式(V)的酰肼化合物与式(LIII)的氯化物反应，得到式(LIV)化合物。该反应是在适当的惰性溶剂，例如二氯甲烷中，在碱，例如吡啶存在下进行。
然后，用前述常规的方法脱除保护基P*，得到式(LV)化合物。当保护基是甲基时，可用氢氧化锂进行水解的方法，在反应条件下为惰性的的溶剂，例如甲醇和四氢呋喃混合液中进行脱保护。
随后，将式(LV)化合物环化得到式(IX)化合物，反应是在已知的肽偶合反应条件，例如使用在例如二甲基甲酰胺中的1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐进行。
将式(IX)化合物转为式(II)化合物可用前述反应方案A中所述的类似方法。
如式(I)，(Ia)和(II)化合物及其相应的环状和链状前体所示，N，Z，Y，X，W和CO形成的环中，N，Z，Y和X之间的键是单键。W和X之间的键可以是单键或双键，或是芳香体系的一部分。特别是当W是CR11和X是CR12，并且R11和R12与它们所连接的sp2碳原子一起形成低级环烯基，芳基或杂芳基环时，W和X之间的键为双键或者是芳香系统一部分的键。
带有上述双键和W和X之间芳香烃键的化合物可用方案B和C所述方法制备，特别是，当其中Z是CO或CS，Y是NH时。其中Z是SO2，Y是NR7的化合物的制备，可以通过将V与试剂(XXV)进行反应，其中，X-W是在CR12和CR11形成的环中，Y是NR7，得到(XXVI)，然后经过环化得到(XXVII)。
与其它Y和Z结合的相应的化合物的制备方法，类似于前述反应方案中的化学描述。例如，当化合物中Z是CO，Y是NR7时，可将反应方案A中所示的化合物(V)与一个结构式为HOOCWXY(P)(XXXa)的试剂反应，在该试剂中，Y是NR7，且X-W位于CR12和CR11所形成的环中，然后再脱去Y上的保护基，得到如反应方案J所示的化合物式(L)。然后将式L化合物按反应方案J的方法环化，环化过程包括CO基团，得到式(IX)化合物。
制备式(II)化合物，其中Z代表CH2，Y代表CO，并且X和W一起形成双键，该双键是经CR12和CR11，稠合低级环烯基、芳基或杂芳环的部分。例如，如反应方案L所示，式Cl(或Br)ZYXWCOOP*(比较式LIII)，其中Z是CH2，Y是CO，并且X和W一起形成稠合低级环烯基，芳基或杂芳环部分的双键，通过与式(V)的酰肼进行氯或溴酮反应，得到式(LIV)化合物。反应在适宜的惰性溶剂，如二氯甲烷中，在碱，如三乙基胺存在下，或用无机碱，如碳酸氢钠，在极性惰性溶剂，如二甲基甲酰胺中进行反应。反应的其余步骤如前所述。
制备式(II)化合物，基中Z代表CH2，Y代表NR7，并且X和W一起形成双键，该双键经CR12和CR11，是稠合低级环烯基，芳基或杂芳环的一部分。例如，如反应方案L所示，通过式BrZYXWCOOP*(比较式LIII)溴化物，与式(V)酰肼的反应，其中Z是CH2，Y是NR7，并且X和W形成稠合低级环烯基，芳基或杂芳环部分的双键，得到式(LIV)化合物。反应在适宜的惰性溶剂，如二氯甲烷中，在碱，如三乙基胺存在下，或用无机碱，如碳酸氢钠，在极性惰性溶剂，如二甲基甲酰胺中进行反应。反应的其余步骤如前所述。
关于已知的起始化合物，其中一些可从商业途径购入。其它一些已知的起始化合物和它们的类似物可用本领域已知技术制备。可从商业途径购入得到的化合物和其它合成的化合物及其类似物以如下方式提供式(III)化合物用下述公开的专利申请的方法制备EP-A-0497192、EP-A-0574758，也可用如下方法制备Beckett et al，Synlett 1993，137和Pratt et al，Synlett 1998，531。
式(VI)化合物，其中，Z代表SO2，可从商业途径购入(例如2-苯二甲酰亚氨基乙烷磺酰氯，Asta Tech，Inc.目录号N88865)，或从市售的磺酸类物质中得到(例如2-(2-吡啶基)乙烷磺酸，Aldrich目录号30，392-5)用本领域众所周知的技术，例如用PCl5处理的方法，或者用下述文献提供的方法改良而得Atwell G.J.，Cain B.F.和Denny W.A.，J.Med.Chem.1977，20，128-134；和Kricheldorf H.R.和Schultz J.，Synthesis 1976，11，739-741。
其中Z代表CO的式(VI)化合物，可从商业途径获得(例如Fmoc-Leu-Cl，Advanced ChemTech Product目录号FL2353；Fmoc-Phe-Cl，Advanced ChemTech Product目录号FF2427)，或者用下述文献提供的方法改良而得Gopi et al，Tetrahedron Letters 1998，39(52)，9769-9772和Schmidt et al，Synthesis 1988，6，475-477。
其中Z代表CO的式(XXX)和(XXXa)化合物，可从商业途径获得(例如Fmoc-Gly-OH，Aldrich目录号33，528-2；3-苯二甲酰亚氨基丙酸，Lancaster Synthesis目录号13，535)。
(XII)化合物式可从商业途径获得(例如Tyger Scientific Inc.目录号342)，或用下述专利公开的方法制备WO-9309136，或者用下述文献提供的方法改良而得Wen J.J.和Crews M.C.，Tetrahedron Asymmetry 1998，9(11)，1855-1858；和Prabhakaran et al，J.Am.Chem.Soc.1988，110(17)，5779-5784。
式(XIII)化合物可从亚甘氨酸制备(Aldrich目录号22，000-0)，采用下述文献提供的方法EP-A-0 774464，或者用下述文献提供的方法改良而得Bernard et al，Tetrahedron 1996，52(29)，9793-9804；Cheng S.Bioorg.Med.Chem.1996，4(5)，727-737；WO-940621；Kirth et al，Tetrahedron 1992，48(8)，1407-1416；Barton et al，I.Med.Chem.1990，33(6)1600-1606；和Epton et al，Polymer 1982，23(5)，771-773。
式(XV)化合物可用下述文献提供的方法改良而得Yoon et al，Chem.Commun.1998，24，2703-2704；Altural B.org.Prep.Proceed.Mt.1991，23(2)，147-151；Lalezari I.J.，Heterocyclic Chem。1985，23(3)，741-743；Wright et al J.Med.Chem.1969，12(3)，379-381；Jacobsen et al，Aust.J.Chem.1979，32(1)，153-160和161-165。
式(XVI)化合物可用下述文献提供的方法改良而得Takimoto et alChemical Abstracts 98178868；Ratier M.Synth.Commun。1989，19(1-2)，285-291；Burgess et al，Org.Syn.1973，53 1857。式(XXII)化合物采用下述方法改良而得Konecny et al Chemical Abstracts 12182730。
式(XXV)和(LIII)化合物可用下述文献提供的方法改良而得Unterhalt B.和Hanewaker G.A.，Arch.Pharm.(Weinheini Ger.)，1989，322(6)，389-390。
化合物式(XXXII)可用下述文献提供的方法改良而得Nowick et al，J.org.Chem.1992，57(26)，7364；和Eckert和FORster，Angew。Chem。mt。Ed。Engl。，1987，26(9)，894；或可从商业途径获得(例如(s)-(-)-2-异氰酰基-4-甲基戊酸甲酯，TCI-US目录号10467；(S)-(-)-2-异氰酰基-3-甲基丁酸甲酯，Aldrich目录号42，980-5)。式XXXII的其它化合物可用实施例中提供的方法制备，起始物是商业途径可得的环氨基酸酯类(例如2-氨基噻吩-3-羧酸甲酯，Maybridge目录号GK02784；2-氨基-1-环己烯-1-羧酸甲酯，Acros目录号29276-0010)。
式(XXXIV)化合物可从商业途径中获得(例如L-2-异硫氰酰基-3-甲基丁酸甲酯，Transwld目录号M3056；L-2-异硫氰酰基-4-甲基戊酸甲酯，Transwld目录号M3058)；或用下述文献提供的方法改良而得Floch和Sticzay，Chem.Zvesti.，1980，34(3)，389和Floch and Kovac，Chem.commun.，1975，40(9)，2845。
式(XXXIX)化合物可从商业途径获得(例如1，2-二溴乙烷，Aldrich目录号D4，075-2)。
式(XLI)化合物可从商业途径获得(例如苄基胺，Adrich目录号18，570-1)。
式(XLV)化合物可从商业途径获得(例如2-溴乙酸胺，Aldrich目录号30，127-2)。
式(XLVI)化合物可从商业途径获得(例如肌氨酸乙酯，Aldrich目录号25，508-4；N-苄基甘氨酸乙酯，Aldrich目录号B22，270-4)。
式(XLIX)化合物可从商业途径获得(例如N-甲基肼，Aldrich目录号M5，000-1；N-苄基肼二盐酸，Aldrich目录号B2，285-2)。
式(XLVIII)和(LI)化合物可从商业途径获得(例如异氰酸苄基酯，Aldrich目录号22，726-9)。
如前所述，本发明提供的肼类衍生物抑制哺动物细胞中的TNF-α。这可从下述体外试验得到证实将THP1细胞在用10％抗生素和胎牛血清补充的RPMI 1640培养基中培养，经离心收获，并在上述所提供的培养基中用20mM HEPES缓冲剂稀释为5×105细胞/ml。将部分(200μ1)细胞悬浮液涂到96孔培养板上，在37℃培养0.5小时，然后加入受试化合物。将后者溶于二甲亚砜(DMSO)中至贮存浓度为1.2mM，然后用磷酸缓冲剂盐水/lO％DMSO溶液稀释，稀释到化合物的终浓度为10-5-10-9M，每种浓度试验两次。细胞与受试化合物在37℃共同培养0.5小时，然后将LPS(细菌脂多糖)加至浓度为2mg/ml，在含5％CO2及95％相对湿度的大气下，37℃培养3小时，在260g离心10分钟后，除去每部分的上层清液，用ELISA方法估算TNF-α的量(R&D Systems Europe L7td。，Abingdon，England)。从量-效曲线中计算出可起到约50％抑制LPS-诱导的TNF-α释放的受试化合物浓度(IC50)。
上述试验过程中测得下列化合物A-S的IC50值是147-1450nMol化合物A(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺化合物B(E)-N-(六氢-2，6-二氧代-1-嘧啶基-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺化合物C2(R)-[4-环己基-1(S)-(羟基氨基甲酰基)丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺化合物D(E)-N-(四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S二氧化物；化合物E2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺对甲苯磺酸盐化合物F2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺化合物G2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基戊酰胺化合物H2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-[2-(甲基硫)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺化合物I2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺化合物J2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺化合物K(E)-2(R)-[1(S)-(羟氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺化合物L(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺化合物M3-[2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]4-甲基戊酰氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4，5]癸-8-羧酸苄基酯化合物NN-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺化合物ON-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧噻吩并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺化合物P2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-甲氧基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺化合物Q2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺化合物R1-(8-乙酰基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺化合物S2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺
本发明提供的肼类衍生物(例如式(I)及(Ia)化合物及其适合药用的盐)，可以药物制剂形式用作药物，该药物制剂可以是口服剂，如以片剂、包衣片、糖衣片、硬胶囊和软胶囊、溶液、乳液、悬浮液的形式。也可以直肠给药，如以栓剂形式，或非肠道给药，例如以注射剂形式。
肼类衍生物的药物制剂的制备，可以与治疗惰性的无机或有机载体复配。例如可用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石粉，硬脂酸或其盐作为片剂、包衣片、糖衣片、硬胶囊的载体。合适的软胶囊的载体有植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多羟基化合物等。一般软胶囊中，选择所需的载体，取决于非载体的活性成份的性质。适于制备溶液剂和糖浆剂的载体有水，多羟基化合物，蔗糖，转化糖，葡萄糖等。制备注射液适当的载体包括，水，醇，多羟基化合物，甘油，植物油等。天然的和固体的油类、蜡、脂肪、半液状多羟基化合物等是制备栓剂的合适载体。
该药物制剂也可含有防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香味剂、用于调节渗透压的盐、缓冲液、掩蔽剂或抗氧化剂。还可以含有其它有治疗活性的物质。
含有上述肼衍生物和治疗上可接受的载体的药物，以及这些药物的制备方法也是本发明的目的。该方法包括将式(I)或式(Ia)化合物或其适合药用的盐与治疗惰性的载体制备成药物制剂，如果需要，还可加入一种或多种其它治疗活性物质。
本发明另一目的包括本发明提供的肼类衍生物在治疗炎症性和自身免疫性疾病(例如风湿性关节炎、肠道炎症性疾病、多发性硬化症和牛皮癣)、骨关节炎、呼吸性疾病(如，哮喘和慢性梗阻性肺病)、肿瘤、恶病质、心血管性疾病(如充血性心力衰竭)、发热、出血和脓血症中的应用。使用剂量的范围很宽，可根据每一患者个体需要调整。一般情况下，成人剂量为每日约1-20mg/kg，优选的剂量约为3-5mg/kg，如果需要，也可以超出剂量上限用药。每日剂量可一次性给药或分次给药。
以下是本发明的实施例。实施例1(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺将0.234g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)-氨基甲酰-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺在3ml甲醇中的溶液用0.010g一水合对甲苯磺酸处理。混合物在室温下搅拌2小时并蒸去溶剂。残存物用乙醚研磨，过滤并干燥，得到0.122g(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS403(M＋H)+.
HPLC用含20％溶剂B的溶剂A梯度洗脱5分钟，增至含90％溶剂B时洗脱10分钟以上；流速为1ml/分钟。保留时间8.87分钟，溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号LUNA3uC8作为起始物质的(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下(i)将253.3g氢2(R)-异丁基琥珀酸4-叔丁基酯在2升无水四氢呋喃中的溶液冷却至-70℃，同时在氮气下搅拌。滴加1.2升2M二异丙氨化锂在四氢呋喃中的溶液，将该混合物在-70℃搅拌30分钟。然后滴加282g肉桂酰溴在2升无水四氢呋喃的溶液，将反应混合物逐渐降至室温。搅拌过夜后四氢呋喃被蒸除，残存物用乙酸乙酯和2M盐酸溶液分层，再用2M盐酸溶液、水和饱和氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯相，然后用无水硫酸镁干燥。溶剂被蒸除得到胶状固体。将其悬浮于2升己烷中，并滤除固体(收获177.3g).己烷溶液用109g环己基胺处理，混合物在室温下被静置1小时，然后在4℃保持16小时。过滤收集所形成的固体，然后溶于2.5升甲基叔丁基醚和1.5升2M盐酸中，得到透明溶液。有机相用水和饱和氯化钠溶液洗涤两次，随后用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂后，得到189.8g固体(收获2)，合并两次所得固体，得到267.1g(E)-2(R)-[1(R)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酸，为淡乳白色固体。
(ii)将步骤(i)所得的化合物溶于2.5升无水四氢呋喃中，搅拌下冷却至-78℃，然后用2小时的时间滴加860ml 2M二异丙基氨化锂的四氢呋喃溶液。在-78℃搅拌0.5小时后，滴加330ml甲醇。混合物逐渐降至室温，然后搅拌过夜。蒸除四氢呋喃，残存物用乙酸乙酯和2M盐酸溶液分层，乙酸乙酯相连续用盐酸溶液，水各洗两次，并用饱和氯化钠溶液洗一次，然后用硫酸镁干燥。蒸除溶剂后，得到橙色油状物，其含有1(S)，2(R)和1(R)，2(R)E-2-[1-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-戊酸异构体混合物。将前述异构化过程重复三次，得到基本上富含1(S)，2(R)异构体的混合物。将粗品溶于2500ml己烷中，用89ml叔丁基胺处理该溶液。在4℃静置后，过滤并干燥沉淀的盐。得到210.3g淡乳白色固体，用前述方法，可将其转为酸，得到(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酸，为黄色固体。
(iii)在氮气下，将20g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酸在200ml二甲基甲酰胺中的溶液冷却至0℃，并用11.8g五氟苯酚和12.3g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物在0℃搅拌2.5小时，然后用19.8g肼盐酸盐和33ml三乙基胺处理。混合物升至室温，然后搅拌过夜。蒸发得到残存物，将其溶于乙酸乙酯并用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。蒸发得到固体，用用乙醚/己烷(1∶1)洗涤，并干燥得到12.1g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS361(M＋H)+.
(iv)将1.0g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在10ml二甲基甲酰胺中的溶液，加入1.24g N-(9-芴甲基氧羰基)-甘氨酸和0.80g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐。将混合物在室温搅拌过夜并蒸去溶剂。将残存物溶于乙酸乙酯中，用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后蒸除溶剂，用乙醚研磨，得到1.54g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-[N-(9-芴基甲基氧羰基)-甘氨酸基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS640(M＋H)+.
(v)将1.54g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-[N-(9-芴基甲基氧羰基)-甘氨酸基]-4-甲基戊酰肼在20ml二氯甲烷中的溶液用1.0ml哌啶处理，混合物在室温下搅拌1.5小时并蒸去溶剂。残存物通过硅胶填充的减压柱色谱，用甲醇/二氯甲烷(1∶9)洗脱，得到0.83g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS418(M＋H)+.
(vi)将0.83 g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2’-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼在50ml二氯甲烷中的溶液在氮气下冷却至0℃并加入0.76ml N-乙基吗啉和1.34ml 1.93M光气的甲苯溶液。将混合物升至室温并搅拌3小时。混合物用乙酸乙酯稀释并用2M盐酸水溶液和饱和盐水洗涤。有机相用无水硫酸镁干燥，并蒸去溶剂。残存物用乙醚研磨得到0.783g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS444(M＋H)+.
(vii)将0.783g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺在20ml二氯甲烷中的溶液用10ml三氟乙酸处理。混合物在室温搅拌4小时并蒸去溶剂，通过加入三倍量的甲苯，并蒸除，以除去微量的三氟乙酸，得到0.805g(E)2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-戊酰胺，为白色固体。
MS388(M＋H)+.
(viii)将0.805g(E)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺在3ml二甲基甲酰胺中的溶液用0.487g邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺。混合物在氮气下冷却至0℃并用0.439g1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物升至室温和搅拌过夜。蒸发得到残存物，溶于乙酸乙酯并依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥，蒸发得到残存物，使用用乙酸乙酯洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.234g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色泡沫状物质。
MS487(M＋H)+
MS417(M＋H)+HPLC用含5％至90％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.14分钟。溶剂AH2O/0.1％IFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的(E)-N-(六氢-2，6-二氧代-1-嘧啶基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，制备方法如下(i)与实施例1中步骤(i)-(iv)所述方法类似，但用3-N-苯二甲酰亚氨基丙酸代替N-(9-芴基甲基氧羰基)-甘氨酸，得到(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-2′-[3-(N-苯二甲酰亚氨基丙酰基)]戊酰肼，为白色固体。
MS562(M＋H)+.
(ii)将3.74 g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-2′-[3-(N-苯二甲酰亚氨基丙酰基)]戊酰肼的30ml乙醇溶液用0.6ml肼水合物处理，将混合物在室温搅拌过夜。溶剂被蒸除，残存物用乙酸乙酯稀释，过滤除去形成的白色沉淀，有机层用2M盐酸水溶液洗两次，用饱和盐水洗一次。用无水硫酸镁干燥并蒸发得到1.36g(E)-2′-(3-氨基丙酰基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼，为固体形式。
MS432(M＋H)+.
(iii)与实施例1中步骤(vi)-(viii)所述方法类似，但用(E)-2′-[3-氨基丙酰基]-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼，得到(E)-N-(六氢-2，6-二氧代-1-嘧啶基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS501(M＋H)+
MS411(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间11.44分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPBDSC18.
用作起始物的2(R)-[4-环己基-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下将0.240g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺(按实施例1方法制备)在10ml乙酸的溶液，在0.075g氧化铂(IV)存在下氢化2小时，过滤除去催化剂，溶剂被蒸除得到0.280g 2(R)-[4-环己基-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺粗品，为白色固体。
MS495(M＋H)+．
MS453(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.34分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERSIL 5UBDS.
MS419(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.17分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺的制备方法如下
(i)将0.7g 2，6-二氧代-4-吗啉羧酸苄酯在20ml二氯甲烷中的溶液用1.0g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼(制备方法见实施例1)处理。将混合物在室温搅拌1小时，然后用0.53g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物在室温下再搅拌3小时，然后用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机相，蒸发得到残存物，用乙酸乙酯/己烷(3∶7)洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到1.16g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(4-苄基氧羰基-2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺，为白色固体。
MS592(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)-(viii)，但用2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(4-苄基氧羰基-2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺替换(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，得到2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(4-苄基氧羰基-2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺，为白色固体。
MS635(M＋H)+(iii)在0.020g 10％钯-碳存在下，将0.178g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(4-苄基氧羰基-2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺在5ml异丙醇中的溶液氢化4小时。滤除催化剂，蒸除溶剂，得到0.072g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺，为白色固体。
MS503(M＋H)+
MS473(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.05分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3-二氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺制备方法如下(i)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，从(E)-2(R)-[1(S)-叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼开始制备，得到(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
(ii)将0.269g 2-(三甲基硅烷基)乙基-1-异氰酰基-1-环己烷羧酸酯和0.403g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在6ml 5∶1的二氯甲烷和二甲基甲酰胺混合物中的溶液，用0.15ml N-甲基吗啉处理并在室温下搅拌2小时，然后将溶液用5％柠檬酸溶液，然后用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，残存物经用己烷/乙酸乙酯(2∶1)己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化。所得的产物溶于5ml四氢呋喃中并加入1.6ml 1.0M四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液，混合物在室温下搅拌1.5小时，然后用乙酸乙酯稀释，依次用5％柠檬酸和盐水洗涤，干燥并蒸去溶剂，残存物用乙醚研磨，得到0.25g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3-二氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺，为白色固体。
MS555(M＋H)+.
(iii)将0.25g(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3-二氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺在5ml含0.025g 10％钯-碳催化剂的甲醇中的溶液，在氢气氛下振摇2小时。滤除催化剂，得到0.25g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3-二氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺的甲醇溶液，可直接用于下一步制备。
MS557(M＋H)+.
MS447(M＋H)+.
HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.31分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将19g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酸在220ml二甲基甲酰胺中的溶液冷却至0℃，依次加入9.22g氨基甲酸苄酯，8.43g 1-羟基苯并三唑，7.05ml N-甲基吗啉和11.7gl-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺。混合物升至室温，搅拌过夜。溶剂被蒸除，残存物分配于乙酸乙酯和5％柠檬酸溶液中。用5％碳酸氢钠和饱和氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯层。用无水硫酸镁干燥后，蒸除乙酸乙酯，残存物溶于200ml甲醇，加入2.5g 10％钯-碳，混合物在氢气氛下振摇4小时，然后滤除催化剂。甲醇被蒸除。残存物中加入己烷，搅拌并过滤，得到17.41g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS362(M＋H)+
(ii)将0.517g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼在5ml二氯甲烷中的溶液，用0.302g(S)-(+)-2-异氰酰基-3-甲基丁酸甲酯和0.3ml N-乙基吗啉处理。混合物在室温搅拌4小时，然后溶液用5％柠檬酸溶液，饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂。残存物溶于含0.2ml三乙基胺的5ml甲苯中，混合物加热回流24小时。冷却溶液，用乙酸乙酯稀释，用5％柠檬酸溶液，饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并蒸去溶剂。残存物用乙醚研磨，得到0.468g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS510(M＋H)+(iii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，但用所得到的邻苄基羟胺代替邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，从0.468g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺起，得到0.219g 2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS537(M＋H)+
MS445(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.90分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(6，8-二氧代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛-7-基)戊酰胺制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和(iii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和1-异氰酰基-1-环丁烷羧酸乙酯开始制备。
MS535(M＋H)+
MS421(M＋H)+HPLC用含5％至90％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.44分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基-4-甲基-N-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基]戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和甲基2-异硫氰酰基乙酸甲酯开始制备。
MS505(M＋H)+
MS495(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.14分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的N-(4(S)-苄基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-2R-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-2-异氰酰基-3-苯基丙酸甲酯。
MS579(M＋H)+实施例112(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2.5-二氧代-1-咪唑烷基戊酰胺制备方法类似于实施例3，从0.306g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(l(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基戊酰胺开始制备，得到0.073g 2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基戊酰胺，为白色固体。
MS461(M＋H)+HPLC用含5％至90％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.90分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基戊酰胺，制备方法类似于实施例7，步骤(ii)和实施例1，步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和甲基(2S，3S)-2-异氰酰基-3-甲基戊酰酯开始制备。
MS545(M＋H)+.
MS479(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.38分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-[2-(甲基硫)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-(-)-2-异氰酰基-4-(甲基硫)丁酸甲酯开始制备。
MS563(M＋H)+.
MS433(M＋H)+.
HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.67分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
作为起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(4，4-二甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-(1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和2-异氰酰基-2-甲基丙酸乙酯开始制备。
MS517。
MS447(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.27分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N(4(R)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(R)-(-)-2-异氰酰基-3-甲基丁酸甲酯开始制备。
MS531(M＋H)+.实施例152(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺制备方法类似于实施例3，从0.435g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺开始制备，得到0.20g 2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS435(M＋H)+.
HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.53分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
作为起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-(1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-(+)-2-异氰酰基-3-叔丁氧基丙酸甲酯开始制备。
MS519(M＋H)+
MS463(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.83分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
作为起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基)-N(4(S)-异丙基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和L-2-异硫氰酰基-3-甲基丁酸甲酯开始制备。
MS547(M＋H)+
MS461(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.07分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丁基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-(-)-2-异氰酰基-4-甲基戊酸甲酯开始制备。
MS545(M＋H)+实施例182(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丁基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺制备方法类似于实施例3，从0.415g 2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丁基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺开始制备，得到0.192g 2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丁基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS477(M＋H)+.
HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.67分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
作为起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丁基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和L-2-异硫氰酰基-4-甲基戊酸甲酯开始制备。
MS561(M＋H)+
MS505(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.40分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的1-[2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-(-)-(2)-异氰酰基戊二酸二乙基酯开始制备。
MS589(M＋H)+
MS459(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.96分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼和(2S，3S)-2-异氰酰基-3-甲基戊酸甲基酯开始制备。
MS543(M＋H)+.
MS433(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.41分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼和(S)-(+)-2-异氰酰基-3-叔丁氧基丙酸甲酯开始制备。
MS517(M＋H)+.
MS546(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.56分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的3-[2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4，5]癸-8-羧酸乙酯的制备方法如下(i)将3.68g 1，4，4-三乙酯基哌啶(用S.Huybrechts和G.J.Hoomaert，Synthetic Communications，11(1)，17-23(1981)提供的方法制备)在5ml乙醇中的溶液用0.499g氢氧化钠在2.5ml水中的溶液处理。将混合物在室温搅拌过夜，然后蒸除乙醇溶剂，用乙醚提取水中的残存物二次，然后滴加浓盐酸，使其酸化。用乙醚提取水中的残存物四次，合并提取物，用饱和氯化钠溶液洗涤三次，用无水硫酸镁干燥。蒸除乙醚后，得到2.50g 1，4-二乙酯基哌啶-1-羧酸，为油状物。
MS274(M＋H)+(ii)将1.25g 1，4-二乙酯基哌啶-4-羧酸在10ml无水四氢呋喃中的溶液冷却至冰点，并先后用0.7ml N-乙基吗啉和0.7ml氯甲酸异丁酯处理。混合物在冰点搅拌20分钟，然后加入0.59g叠氮化钠在7ml水中的溶液。混合物在冰点搅拌15分钟，然后在室温继续搅拌30分钟。混合物加入20ml甲苯后振摇，然后用水洗涤甲苯提取物，并用饱和氯化钠溶液洗。用无水硫酸镁干燥后，甲苯溶液的体积减少至原体积的一半。然后在100℃加热1小时，蒸除甲苯，得到1.148g 1，4-二乙酯基-4-异氰酰基哌啶，为油状物。
MS271(M＋H)+(iii)制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和(iii)，从2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和1，4-二乙酯基-4-异氰酰基哌啶开始制备，得到3-[2-(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸乙酯，为白色固体。
MS636(M＋H)+
MS608(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.95分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的3-[2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯的制备方法如下(i)按照S.Huybrechts和G.J.Hoornaert，Synthetic Communications，11(1)，17-23(1981)中公开的制备1，4，4-三乙酯基哌啶的类似方法，但用氯甲酸苄基酯代替氯甲酸乙酯，得到4，4-二乙酯基哌啶-1-羧酸苄酯，为油状物。
MS364(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例22中步骤(i)和(ii)，从4，4-乙酯基哌啶-1-羧酸苄酯开始制备，得到4-乙酯基-4-异氰酰基哌啶-1-羧酸苄酯，为油状物。
MS332(M)+；IR2256(异氰酸酯)(iii)制备方法类似于实施例6中步骤(ii)，从2(R)-[1(S)-[(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和4-乙酯基-4-异氰酰基哌啶-1-羧酸苄酯开始制备，得到3-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄基酯，为白色固体。
MS649(M＋H)+.
(iv)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，从3-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯开始制备，得到3-[2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯，为白色固体。
MS692(M＋H)+实施例24N-[8-(氨基乙酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-3-甲基戊酰胺制备方法类似于实施例7，从0.101g N-[8-[N-(苄基氧羰基)氨基乙酰基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-3-甲基戊酰胺开始制备，得到0.048g N-[8-(氨基乙酰基)-2，4-氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-3-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS531(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.34分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的N-[8-[(N-苄基氧羰基)氨基乙酰基]-2，4-氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-3-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将1.01g 3-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯在15ml甲醇中的溶液用0.432g 10％钯-碳催化剂处理。混合物在氢气氛下摇18小时，滤除催化剂，并蒸除甲醇，残存物用乙醚研磨，得到0.81g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]戊酰胺，为白色固体。
MS515(M＋H)+(ii)搅拌在5ml无水二甲基甲酰胺中的0.257g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]戊酰胺和0.209g N-(苄基氧羰基)甘氨酸的混合物，并冷却至冰点。中用0.225g 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理该混合物，然后在室温下搅拌2天。蒸除溶剂，将残存物分配在水和乙酸乙酯中。依次用水，5％碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯层，用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂。用乙醚研磨残存物，得到0.261g N-[8-[N-(苄基氧羰基)氨基乙酰基]-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]戊酰胺，为白色固体。
MS706(M＋H)+(iii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，但用邻苄基羟胺代替邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到N-[8-[N-(苄基氧羰基)氨基乙酰基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-3-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS755(M＋H)+
MS474(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.39分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA。柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺的制备方法如下(i)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，从3-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯开始制备，得到3-[2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯，为白色固体。
MS692(M＋H)+(ii)将0.13g 3-[2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基戊氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-8-羧酸苄酯在10ml甲醇中的溶液，在氢气氛下振摇3小时，滤除催化剂，蒸除甲醇。得到0.099g 2(R)-[1(S)-(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基-戊酰胺，为白色固体。
MS558(M＋H)+
MS552(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.85分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[8-(甲烷磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-4-甲基戊酰胺，制备方法如下(i)将0.514g 2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基]-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺(4.5)癸-3-基]戊酰胺在10ml无水吡啶中的溶液，搅拌下冷却至0℃，加入0.13ml甲烷磺酰氯。混合物升至室温并搅拌2天。蒸除溶剂，将残存物分配在乙酸乙酯和稀盐酸中。依次用水，饱和氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯层，用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂。残存物通过用5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱的减压色谱纯化，得到0.322g 2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基]-4-苯基丁基]-N-[8-(甲烷磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS593(M＋H)+
(ii)制备方法类似于实施例7中步骤(iii)，从2(R)-[1(S)-叔丁氧基羰基]-4-苯基丁基]-N-[8-(甲烷磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-4-甲胺开始制备，得到2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[8-(甲烷磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS593(M＋H)+
MS614(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.48分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的N-[8-(苯磺酰基)-2，4-氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)制备方法类似于实施例26中步骤(i)，但用苯磺酰氯代替甲磺酰氯，从0.83g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]戊酰胺开始制备，得到0.889g N-[8-(苯磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS655(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，从N-[8-(苯磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺开始制备，得到N-[8-(苯磺酰基)-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]-2(R)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS698(M＋H)+
MS467(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.38分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代-3-喹唑啉基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)制备方法类似于实施例7中步骤(ii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和2-甲氧基羰基苯基异氰酸酯开始制备，得到2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代-3-喹唑啉基)-4-甲基戊酰胺，为无色胶状物。
MS508(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例7中步骤(iii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代-3-喹唑啉基)-4-甲基戊酰胺开始制备，得到2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代-3-喹唑啉基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS557(M＋H)+实施例29N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺制备方法类似于实施例1，从0.3g N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺开始制备，得到0.211g N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS473(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.86分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)在搅拌下，将0.471g 3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯在15ml无水甲苯中的溶液冷却至0℃，加入0.975g 2，6-二甲吡啶，然后加入0.3g三光气。混合物在0℃搅拌1.75小时，然后加入1.066g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼。搅拌混合物，并用4小时升至室温，用乙酸乙酯稀释，然后依次用5％柠檬酸水溶液洗二次，用水，饱和氯化钠溶液各洗一次。蒸发除去溶剂后，黄色的残存物通过用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱的减压色谱纯化。除去溶剂后，得到1.3g无色残存物。
MS546(M＋H)+残存物溶于40ml甲苯中，并加热至90℃，同时加入0.275g 1，1，3，3-四甲基quanidine，55分钟后，冷却混合物，溶液用乙酸乙酯稀释，依次用5％柠檬酸水溶液，水和饱和氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸镁干燥后，蒸除溶剂。将残存物用乙醚研磨，得到1.022g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS514(M＋H)+
(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-4-甲基戊酰胺开始制备，得到N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS557(M＋H)+
MS473(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.00分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，制备方法类似于实施例29中步骤(i)和(ii)，从3-氨基噻吩-4-羧酸甲酯和2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼开始制备，得到白色固体。
MS557(M＋H)+
MS471(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.13分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的N-(1，2，3，4，5，6，7-八氢-2，4-二氧代-3-喹唑啉-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例29中步骤(i)和(ii)，从2-氨基-1-环己烷-1-羧酸酯和2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼开始制备，所得产物为白色固体。
MS555(M＋H)+
MS468(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.57分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例29中步骤(i)和(ii)，从2-氨基烟酸甲酯和2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺开始制备，所得产物为白色固体。
MS552(M＋H)+
MS449(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.33分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A用作起始物的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-N[4(S)-(甲氧基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(S)-2-异氰酰基-3-甲氧基丙酸甲酯开始制备。
MS533(M＋H)+
MS391(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.70分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPBDSC18用作起始物质的(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将1.0 g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在10ml四氢呋喃中的溶液用0.59g碳酸钠处理。混合物冷却至0℃，加入1.73ml 1.93M光气的甲苯溶液。将混合物升至室温，然后搅拌过夜。过滤并蒸发滤液，得到1.15g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮，为透明油状物，静置后结晶。
MS386(ii)将0.5g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮在5ml二甲基甲酰胺中的溶液，缓缓加入到冷却下的(0℃)氢化钠(60％矿物油悬浮液)在10ml无水二甲基甲酰胺中的悬浮液中。混合物升至室温，然后在50-60℃加热，直到氢气停止释放。然后将混合物冷却至0℃，并加入0.293ml二溴乙烷，同时剧烈搅拌。混合物再被升温至室温，然后在70℃加热1小时。蒸除溶剂，将残存物溶于温热的乙酸乙酯中，过滤并蒸发滤液，得到0.616g(E)-2(S)-{1(R)-[4-(2-溴乙基)-5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]恶二唑-2-基]-3-甲基-丁基}-5-苯基-戊-4-烯酸叔丁酯，为透明油状物。
MS436(M-56(tBu))(iii)将0.616g(E)-2(S)-{1(R)-[4-(2-溴乙基)-5-氧代-4，5-二氢-[1，3，4]恶二唑-2-基]-3-甲基-丁基}-5-苯基-戊-4-烯酸叔丁酯在15ml乙腈中的溶液用0.275ml苄基胺处理，并在80℃回流3小时，再加入0.275ml苄基胺至该混合物中，继续回流过夜。将混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。然后用无水硫酸镁干燥有机层，并蒸去溶剂得到油状残余物，通过用用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.255g(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为无色油状物。
MS520(M＋H)+(iv)在0.255g(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺在5ml二氯甲烷中的溶液用2.5ml三氟乙酸处理。混合物在室温搅拌2.5小时，并蒸去溶剂。加入三倍体积的甲苯，并蒸除，以除去所存在的微量的三氟乙酸，得到0.290g(E)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺白色泡沫状物。
MS464(M＋H)+(v)将0.290g(E)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺在3ml二甲基甲酰胺中的溶液用0.362g邻苄基羟胺处理。混合物在氮气下冷却至0℃，并用0.141g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物升至室温并搅拌过夜。蒸发得到的残存物溶于乙酸乙酯中，依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并蒸发得到残存物，通过用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，，得到0.251g(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为油状物。
MS569(M＋H)+
MS403(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.91分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的(E)-2(R)-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下(i)将0.600g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在5ml二甲基甲酰胺中的溶液，缓缓加入到冷却下的(0℃)氢化钠(60％在矿物油中的悬浮物)在10ml无水二甲基甲酰胺中的悬浮液中，将该混合物升至室温，然后在50-60℃加热，直到氢气释放完毕，然后将混合物冷却至0℃，并用0.535g溴乙酰胺处理，同时剧烈搅拌，再将混合物升至室温，然后在70℃加热1小时，再在82℃加热1小时。蒸除溶剂，将残存物溶于乙醇中并用5ml 32％氨水处理。将混合物在室温搅拌48小时，然后蒸除溶剂，残存物溶于乙酸乙酯中，用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发得到0.553g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色泡沫状物。
MS444(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，得到(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS487(M＋H)+实施例362(R)-[4-环己基-1(S)-(羟基氨基甲酰基)丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺在0.015g氧化铂(IV)存在下，将0.134g(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺(制备方法如实施例35所述)在10ml乙酸中的溶液氢化1.66小时。滤除催化剂，蒸发得到的残存物用乙醚研磨得到0.078g 2(R)-[4-环己基-1(S)-(羟基氨基甲酰基)丁基]-4-甲基-N-(2，4-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS411(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.22分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
MS455(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.07分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基]-4-甲基戊酰胺-S，S-二氧化物的制备方法如下
(i)在氮气下，于室温下，将3.0g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在50ml二氯甲烷中的溶液，用0.88ml吡啶和2.73g 2-苯二甲酰亚氨基乙烷磺酰氯处理。该混合物在室温搅拌12小时，并蒸去溶剂。残存物溶于乙酸乙酯中，然后依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发，得到4.9g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-(1，3-二氧代-2-苯二甲酰亚氨基乙烷磺酰基)-4-甲基戊酰肼，为浅黄色泡沫状物。
MS598(M＋H)+(ii)将4.9g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-(1，3-二氧代-2-苯二甲酰亚氨基乙烷磺酰基)-4-甲基戊酰肼在50ml乙醇中的溶液用0.82ml肼水合物处理，并在室温搅拌过夜。将混合物过滤，滤液用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂。残余物通过用甲醇/二氯甲烷(1∶9)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到3.28g灰白色固体。进一步用乙醚研磨纯化，得到1.96g(E)-2′-(2-氨基乙烷磺酰基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS468(M＋H)+(iii)将1.96g(E)-2′-(2-氨基乙烷磺酰基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在100ml二氯甲烷中的悬浮液，在氮气下冷却至0℃，并用1.6ml N-乙基吗啉和2.8ml 1.93M光气的甲苯溶液处理。用2小时将混合物温度升至室温，并蒸去溶剂。残存物溶于乙酸乙酯中，依次用2M盐酸水溶液和饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，并蒸发，得到1.99g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-[四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基]-4-甲基戊酰胺-S，S-二氧化物，为淡黄色固体。
MS468(M＋H)+(iv)制备方法类似于实施例34中步骤(iv)-(v)，但用(E)-2(R)-(1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-[四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基]-4-甲基戊酰胺-S，S-二氧化物代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，得到(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-[四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基]-4-甲基戊酰胺-S，S-二氧化物，为白色固体。
MS543(M＋H)+
MS∶405(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.77分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下(i)在0.500g 5％钯-碳存在下，将5.0g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基)-4-甲基戊酸在150ml异丙醇中的溶液氢化1小时。过滤混合物，并蒸去溶剂，得到4.8g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酸，为黄色油状物。
(ii)将4.8g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基)-4-甲基戊酸在50ml二甲基甲酰胺中的溶液冷却至0℃，并用2.80g五氟苯酚和2.65g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物在0℃搅拌2.5小时，然后加入4.73g肼一盐酸盐和6.97g 4-甲基吗啉。混合物继续在室温下搅拌18小时，然后蒸除溶剂，残存物溶于乙酸乙酯，依次用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液，水和饱和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，并蒸去溶剂。残余物通过用乙酸乙酯/己烷(1∶1)作为洗脱剂的减压硅胶柱色谱纯化，得到2.18g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼，为淡黄色固体。
MS363(M＋H)+(iii)将2.15g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和1.86g N-(苄基氧羰基)-甘氨酸在8ml二甲基甲酰胺中的溶液，冷却至0℃，并加入2.0g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐。混合物在室温搅拌过夜，用乙醚稀释，依次用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液，水及饱和盐水洗涤。有机相用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，得到2.96g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-2′-[N-(苄基氧羰基)-甘氨酸基]-4-甲基戊酰肼，为白色泡沫状物。
MS554(M＋H)+(iv)在0.300g 5％钯-碳存在下，将2.95g 2(R)-1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-2′-[N-(苄基氧羰基)-甘氨酸基]-4-甲基戊酰肼在30ml甲醇中的溶液氢化0.5小时。过滤混合物，并蒸去溶剂，得到2.2g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基丁基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼，为白色泡沫状物。
MS420(M＋H)+(v)制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(viii)，但用2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼和邻苄基羟胺分别代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼和邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS495(M＋H)+
MS329(M＋H)+
MS417(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.33分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下(i)将0.386g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在10ml甲苯中的溶液，用0.185g肌氨酸乙酯盐酸盐和0.42ml三乙基胺处理，在回流温度加热过夜。混合物冷却至室温并蒸去溶剂，然后依次用2M盐酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发，得到0.384g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS458(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，得到(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为白色固体。
MS501(M＋H)+
MS433(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.26分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)戊酰胺的制备方法如下(i)将1.0g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在10ml四氢呋喃中的溶液，用0.59g碳酸钠处理。混合物冷却至0℃，加入0.252ml硫光气。混合物升温至室温，然后搅拌过夜。蒸发得到残存物，溶于乙酸乙酯，用0.5％氢氧化钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机相，蒸发，得到1.02g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-硫酮，为油状物。
(ii)制备方法类似于实施例40中步骤(i)-(ii)，但用(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-硫酮代替(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮，得到(E)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(3-甲基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)戊酰胺，为黄色固体。
MS517(M＋H)+
MS614(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间12.88分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的(E)-N-(3，5-二苄基-六氢-2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将0.737g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在10ml二甲基甲酰胺中的溶液，在氮气下用0.084g氢化钠(60％悬浮于矿物油中)处理，然后于50℃加热0.5小时。将混合物冷却至0℃，滴加0.528ml异氰酸苄酯。混合物升温至室温，然后加热至80℃保温0.5小时。再将混合物冷却至室温，蒸除溶剂，残存物溶于异丙醇中，冷却至0 ℃，并加入数滴乙酸。将混合物搅拌0.5小时，然后冷却，过滤，收集已形成的沉淀物。先用冷的异丙醇，然后用己烷洗涤固体，得到0.703g(E)-N-(3，5-二苄基-六氢-2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-2(R)-[1(S)-(叔丁基氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS653(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例34中步骤(iv)-(v)，但用(E)-N-(3，5-二苄基-六氢-2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-2(R)-[1(S)-(叔丁基氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，得到(E)-N-(3，5-二苄基-六氢-2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为无色油状物。
MS702(M＋H)+
MS420(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.79分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(1-甲基-3，5-二氧代-1，2，4-三唑烷-4-基)戊酰胺的制备方法如下(i)将0.772g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在10ml甲苯中的溶液用0.116ml甲基肼处理，在80℃加热5小时。混合物用乙酸乙酯稀释，依次用水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。然后用无水硫酸镁干燥。蒸发得到0.744g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-2′-[(1-甲基肼基)氨基甲酰基]戊酰肼，为白色泡沫状物。
MS433(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(vlii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-2′-[(1-甲基肼基)氨基甲酰]戊酰肼和邻苄基羟胺分别代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼和邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(1-甲基-3，5-二氧代-1，2，4-三唑烷-4-基)戊酰胺，为白色固体。
MS508(M＋H)+
MS434(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.57分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)戊酰胺的制备方法如下(i)在0.08g氢氧化钯(II)存在下，将0.830g N-(3，5-二苄基-六氢-2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-2(R)-[1(S)-(叔丁基氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺在50ml甲醇和几滴乙酸中的溶液氢化8小时。过滤混合物，蒸发，得到0.588g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)戊酰胺，为白色固体。
MS475(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例34中步骤(iv)-(v)，但用2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，得到2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)戊酰胺，为白色固体。
MS524(M＋H)+
MS462(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.65分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号SYMMETRY 13.
MS482(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.88分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.实施例47N-(1-苄基-3.5-二氧代-1，2，4-三唑烷-4-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-戊酰胺制备方法类似于实施例43，但用苄基肼替换甲基肼，得到N-(1-苄基-3，5-二氧代-1，2，4-三唑烷-4-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS496(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.87分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
MS440(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.97分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 306A.
用作起始物质的2(R)-[4-环己基-1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)丁基]-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)在0.05g氧化铂(IV)存在下，将0.500g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基)-4-甲基-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)戊酰胺(制备方法见实施例44，步骤(i))在7ml冰乙酸中的溶液，氢化1.5小时。过滤和蒸发得到残存物，通过用乙酸乙酯/己烷(1∶1)作为洗脱剂的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.129g 2(R)-[4-环己基-1(S)-(叔丁氧羰基)丁基]-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS481(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例34中步骤(iv)-(v)，但用2(R)-[4-环己基-1(S)-(叔丁氧基羰基)丁基]-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-4-甲基戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，得到2(R)-[4-环己基-1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)丁基]-N-(2，4，6-三氧代-1，3，5-三嗪-1-基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS495(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.72分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 300A.
用作起始物质的N-(3-苄基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将0.772g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在10ml甲苯中的溶液，用0.387g N-苄基甘氨酸乙酯和0.278ml三乙基胺处理，在回流温度加热过夜。将混合物冷却，然后用乙酸乙酯稀释，依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。然后用无水硫酸镁干燥，蒸发，得到0.918g N-(3-苄基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色泡沫状物。
MS534(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例34中步骤(iv)-(v)，但用N-(3-苄基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔(丁基氧)羰基)-4-苯基丁-3-烯基]-N-(3-苄基-2-氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，得到N-(3-苄基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为透明油状物。
MS583(M＋H)+
MS496(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.82分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP 308A.
MS462(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.94分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)-氨基甲酰基]乙基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将14.64g 2(R)-[1(R)-(叔丁氧基羰基)-2-苯二甲酰亚氨基-乙基]-4-甲基戊酸环己基胺盐，分配于40ml 1N硫酸和150ml乙酸乙酯中，用饱和氯化钠溶液洗涤有机层三次，然后用无水硫酸镁干燥。蒸发得到的油状物溶于120ml乙醇中，并用7.3ml肼水合物处理。混合物在室温搅拌2小时，滤除所形成的白色沉淀物，将残存物溶于150ml二氯甲烷和15ml乙酸。混合物在室温搅拌1小时，然后过滤，并蒸去溶剂，得到13.62g2(R)-氨基乙基-[1(R)-(叔丁氧羰基)]-4-甲基戊酸乙酸盐，为黄色油状物。
(ii)将12.6g 2(R)-氨基乙基-[1(R)-(叔丁氧基羰基)]-4-甲基戊酸乙酸盐在120ml二氯甲烷中的溶液，在氮气下冷却至-10℃，并用16ml三乙基胺和溶于20ml二氯甲烷中的5.5ml苯酰氯溶液处理。在-10℃搅拌0.5小时后，混合物升温至室温并蒸除溶剂，残存物溶于乙醚并过滤，然后依次用2M盐酸水溶液，水和3×50ml 2％碳酸氢钠水溶液洗涤。用己烷稀释醚层，再用3×50ml 2％碳酸氢钠水溶液洗。将合并的碳酸氢钠水溶液提取物用浓酸盐酸进行酸化，然后用醚洗。随后醚层依次用水(2×)和饱和盐水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。蒸发得到残存物，通过用乙醚/己烷(1∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到1.97g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基戊酸，为透明油状物。
MS364(M＋H)+(iii)将1.9g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基戊酸在3ml无水二甲基甲酰胺中的溶液，在氮气下冷却至0°，并用2.61g肼基甲酸苄酯和1.20g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理。混合物升温至室温，然后搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释混合物，依次用水，2M盐酸，水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发，得到2.68g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-2′-苄基氧羰基-4-甲基戊酰肼，为白色泡沫状物。
MS512(M＋H)+(iv)在0.080g 10％钯-碳存在下，将0.81g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-2′-苄基氧羰基-4-甲基戊酰肼在10ml乙醇中的溶液氢化4小时。滤除催化剂，蒸发，得到0.59g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS378(M＋H)+(v)将0.55g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼在5ml吡啶中的溶液，用0.22ml甲基-(S)-(-)-2-异氰酰基-3-甲基丁酸酯处理，并在室温搅拌2小时。再加入0.044ml异氰酸酯，将该混合物继续搅拌过夜。蒸发该残存物，溶于乙酸乙酯，依次用2M盐酸水溶液，水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥乙酸乙酯层，并蒸去溶剂，得到0.85g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基-2′-[2(S)-(甲基-3-甲基丁酸酯)氨基甲酰基]戊酰肼，为白色泡沫状物。
MS535(M＋H)+(vi)将0.78g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基-2′-[2(S)-(甲基-3-甲基丁酸酯)氨基甲酰基]戊酰肼在20ml甲苯中的溶液用0.2ml三乙基胺处理，加热回流过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，依次用2M盐酸水溶液，水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，得到残存物，通过用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.61g 2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为透油状物。
MS503(M＋H)+(vii)类似于实施例1中步骤(vii)-(viii)的制备方法，但用2(R)-[2-苯甲酰氨基-1(R)-(叔丁氧基羰基)乙基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，得到2(R)-[2-苯甲酰氨基-l(R)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS462(M＋H)+
MS525(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.12分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物质的(E)-N-[3-苄基-4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例49中步骤(i)-(ii)，但用N-苄基-(L)-丝氨酸甲酯替换N-苄基甘氨酸乙酯。
MS613(M＋H)+
MS509(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间11.65分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)在氮气氛下，将1.09g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼五氟苯酚盐在5ml吡啶中的溶液，用0.25ml异氰酸苄酯处理。混合物在室温下搅拌2小时，然后蒸除溶剂，残存物溶于乙酸乙酯中，依次用2M盐酸水溶液，水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂得到黄色油状物。将其溶于乙酸乙酯中，并用0.5％氢氧化钠水溶液洗二次，然后用饱和盐水洗涤。有机层再用无水硫酸镁干燥，蒸发，得到0.946g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-(苄基)氨基甲酰基-4-甲基戊酰肼，为黄色泡沫状物。
MS987(2M＋H)+(ii)在氮气氛下，将0.94g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-(苄基)氨基甲酰基-4-甲基戊酰肼在10ml二氯甲烷中的溶液冷却至0℃，并用0.4ml吡啶和0.174ml草酰氯处理。混合物在0℃搅拌2小时，然后升温至室温过夜。混合物依次用2M盐酸水溶液，水，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。有机部分用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂。将固体残存物用乙酸乙酯重结晶，得到0.69g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS492(M＋H-tBu)+(iii)制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺和邻苄基羟胺分别代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼和邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到(E)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS597(M＋H)+
MS439(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间10.89分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的(E)-N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物，制备方法如下(i)将1.08g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰肼在10ml二氯甲烷中的溶液，在氮气下冷却至0℃，并用0.8ml吡啶和在5ml二氯甲烷中的1.5g N-(氯磺酰基)-甘氨酸甲酯溶液处理。混合物升温至室温并搅拌3小时。然后将混合物用乙酸乙酯稀释，用2M盐酸水溶液和饱和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，通过用己烷/乙酸乙酯(3∶2)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.831g(E)-2-[[2-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰基]肼基]磺酰氨基]乙酸甲酯，为固体形式。
MS512(M＋H)+(ii)将0.431g(E)-2-[[2-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰基]肼基]磺酰氨基]乙酸甲酯在10ml四氢呋喃和5ml甲醇中的溶液，用0.040g氢氧化锂单水合物处理，将混合物搅拌过夜。再加入0.020g氢氧化锂单水合物，继续搅拌4小时。混合物用水稀释，再用2M盐酸水溶液酸化，并用乙酸乙酯提取。乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，得到0.462g(E)-2-[[2-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰基]肼基]磺酰氨基]乙酸甲酯，为油状物。
MS498(M＋H)+(iii)将0.462g(E)-2-[[2-[2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰基]肼基]磺酰氨基]乙酸甲酯在10ml二甲基甲酰胺中的溶液，用0.177g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理，在室温搅拌2.5小时。混合物被蒸除溶剂，残存物溶于乙酸乙酯中，然后用1M盐酸水溶液和饱和盐水洗涤。乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂得到残存物，通过用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.205g(E)-2(R)-[1(S)-[(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-戊酰胺S，S-二氧化物，为白色固体。
MS480(M＋H)+(iv)制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-[(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-戊酰胺S，S-二氧化物代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酸基-4-甲基戊酰肼，得到(E)-N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物，为白色固体。
MS523(M＋H)+实施例55N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物在0.005g 10％钯-碳存在下，将0.049g N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物在10ml甲醇中的溶液氢化2.5小时，滤除催化剂，蒸除溶剂，得到的残存物用乙醚研磨，得到0.033g N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物，为白色固体。
MS441(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.72分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物的制备方法如下制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-[(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-戊酰胺S，S-二氧化物(制备方法见实施例54，步骤(iii))和邻苄基羟胺分别代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酰基-4-甲基戊酰肼和邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到N-(四氢-3-氧代-1，2，5-硫杂二唑-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物，为白色固体。
MS529(M＋H)+
MS507(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间12.35分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERIL C19BDS.
用作起始物的(E)-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下制备方法类似于实施例1中步骤(vi)-(viii)，但用(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺(制备方法见实施例53，步骤(ii))代替(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-2′-甘氨酰基-4-甲基戊酰肼，得到(E)-N-(3-苄基-2，4，5-三氧代-1-咪唑烷基]-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS591(M＋H)+
MS476(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.63分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将1.5g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))在40ml甲苯中的溶液，用1.1g N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-甘氨酸甲酯和1.1ml三乙基胺处理，加热回流过夜。将混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，然后依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。有机相用无水硫酸镁干燥并蒸去溶剂，得到的残存物通过用乙酸乙酯/己烷(3∶1)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.475 g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基1氨基]乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS609(M＋Na)+(ii)将0.150 g(E)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基1氨基]乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺在2ml二氯甲烷中的溶液，用2ml三氟乙酸酐处理，在氮气下在室温搅拌2小时。蒸除溶剂，残存物溶于甲苯，并蒸除甲苯，此过程重复一次，得到0.140g(E)-N-(2-氨基乙基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS431(M＋H)+(iii)将0.140g(E)-N-(2-氨基乙基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺在10ml甲醇中的溶液，加入0.075ml 30％w/v甲醛水溶液，然后在0.010 g 10％钯-碳存在下，氢化过夜。在混合物中再加入0.5ml 30％w/v甲醛水溶液，再加入0.010g10％钯-碳，继续氢化24小时。滤除催化剂，蒸除溶剂，得到0.151g2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基丁基]-N-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS461(M＋H)+
(iv)将0.151g 2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基丁基]-N-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺和0.157g邻苄基羟胺在0.25ml二甲基甲酰胺中的溶液，用0.054mg 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理，在室温搅拌4小时。混合物用乙酸乙酯稀释，然后用5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，并蒸去溶剂，得到残存物，通过用甲醇/二氯甲烷(5∶95)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.061g 2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，为白色泡沫状物。
MS566(M＋H)+
MS516(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.07分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物质的1-(8-乙酰基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)-2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例24中步骤(i)和(ii)，在步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)中，用乙酸代替N-(苄基氧羰基)甘氨酸。
MS600(M＋H)+实施例592(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺制备方法类似于实施例7，从0.13g 2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺开始制备，得到0.086g 2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺，为白色固体。
MS488(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.53分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺，制备方法如下(i)将0.403g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基]戊酰胺，0.145ml 38％甲醛水溶液和0.093g 10％钯-碳催化剂在4ml甲醇中的混合物，在氢气氛下振摇2天，滤除催化剂，并蒸除甲醇，残存物用甲苯进行重蒸发。所得的固体用乙醚研磨，得到0.348g 2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺，为白色固体。
MS529(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例1中步骤(vii)和(viii)，但用邻苄基羟胺代替邻(四氢-2H-吡喃-2(RS)-基)羟胺，得到2R-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(8-甲基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)戊酰胺，为白色固体。
MS578(M＋H)+实施例602(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺制备方法类似于实施例3，从0.097g 2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺开始制备，得到0.067g 2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为灰白色固体。
MS453(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间9.06分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)制备方法类似于实施例7中步骤(1)，从2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基戊酸(根据Broadhurst et.al，欧洲专利申请EP497192 A2 920805.CAN118169601的方法制备)，得到2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(叔丁氧羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS411(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(叔丁氧基羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼和异氰酰基乙酸乙酯开始制备，得到2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS537(M＋H)+
MS453(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.49分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物的2(R)-[2-(2-联苯基)-1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)制备方法类似于实施例7中步骤(i)，从2(R)-[2-(2-联苯基)-1(S)-叔丁氧基羰基)乙基-4-甲基戊酸(制备方法类似Broadhurst et.al，欧洲专利申请，EP497192 A2920805.CAN118169601的方法)开始制备，得到2(R)-[2-(2-联苯基)-1(S)-叔丁氧羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼，为白色固体。
MS411(M＋H)+(ii)制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[2-(2-联苯基)-1(S)-(叔丁氧羰基)乙基]-4-甲基戊酰肼和异氰酰基乙酸乙酯开始制备，得到2(R)-[2-(2-联苯基)-1(S)-((四氢-2(RS)-吡喃氧基)氨基甲酰基]乙基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS537(M＋H)+
MS449(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.78和7.82分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERPEP300A.
用作起始物质的2(R)-[1(S)-[(四氢-2(RS)-吡喃氧基)羰基]-4-苯基]-N-[4(RS)-(1(R)-羟基乙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺的制备方法类似于实施例7中步骤(ii)和实施例1中步骤(vii)和(viii)，从2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰肼和(RS)-2-异氰酰基-3(R)-叔丁氧基丁酸甲酯开始制备。
MS533(M＋H)+
MS460(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间7.93分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERSIL C19 BDS.
用作起始物质的(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将0.733g(E)-2(S)-(叔丁氧基羰基)-1(R)-异丁基-5-苯基戊-4-烯基-1，3，4-恶二唑-2(3H)-酮(制备方法见实施例34，步骤(i))和0.467g 1，3-哌嗪-二羧酸[1-(1，1-二甲基乙基)-3-甲基]酯在15ml甲苯中的溶液，用0.53ml三乙基胺处理，然后在回流温度加热过夜，蒸除溶剂，将残存物溶于乙酸乙酯中，然后依次用5％柠檬酸水溶液，5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，然后蒸除溶剂，残余物通过用乙酸乙酯/己烷(1∶3)洗脱的减压硅胶柱色谱纯化，得到0.618g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-7-(叔丁氧基羰基)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS621(M＋H)+(ii)将0.618g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-7-(叔丁氧基羰基)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺在5ml二氯甲烷中的溶液，用5ml三氟乙酸处理，并在氮气下搅拌1小时。蒸发，得到0.776g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色泡沫状物。
MS443(M＋H)+(iii)将0.415g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基)-4-甲基戊酰胺在0.25ml二甲基甲酰胺中的溶液，用0.461g邻苄基羟胺和0.173g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理，在室温搅拌4小时。蒸发得到的残存物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发，得到的残存物用乙醚研磨，得到0.160g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS548(M＋H)+
MS474(M＋H)+HPLC用含5％至95％溶剂B的溶剂A梯度洗脱15分钟以上，流速为1ml/分钟，保留时间8.06分钟。溶剂AH2O/0.1％TFA；溶剂BCH3CN/0.085％TFA.柱型号HYPERSIL C19 BDS.
用作起始物的(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-7-甲基-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺的制备方法如下(i)将0.361g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺(制备方法见实施例63)在10ml甲醇中的溶液，用1ml 40％甲醛水溶液处理，然后在0.03g 10％钯-碳存在下氢化1小时，滤除催化剂，蒸发，得到0.395g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-7-甲基-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺，为透明油状物。
MS459(M＋Na)+(ii)将0.395g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-7-甲基-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羧基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺在0.25ml二甲基甲酰胺中的溶液，用0.400g邻苄基羟胺和0.150g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理，在室温搅拌过夜，蒸发得到的残存物溶于乙酸乙酯中，并用5％碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥并蒸发，得到的残存物用乙醚研磨，得到0.165g(E)-N-(1，2，3，5，6，7，8，8a(RS)-八氢-7-甲基-1，3-二氧代咪唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(苄基氧氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺，为白色固体。
MS564(M＋H)+。
权利要求
1.通式如下的化合物 其中w代表O，S，CO，NR5，(CR3R4)m，或者CR11；X代表CO，NR6，(CH2)n，CR12或者CHR13；Y代表CO，NR7，(CH2)p，或者CHR14；Z代表CO，CS，SO2，或者CH2；m代表0或者1；n和p每个分别表示0，1或者2；R1代表低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基、芳基或芳基-低级烷基；R2代表低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基，或通式为V-芳基、V-杂环基，或-(CH2)q-CH＝CR8R9；R3，R4，R5，R6和R7每个分别代表氢、任选取代的低级烷基、低级烯基、低级环烷基、低级环烷基-低级烷基、芳基、芳基-低级烷基、杂环基或杂环基-低级烷基；或者R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成3-8元环；或者R5和R6，或R5和R7与它们所连接的氮原子一起形成3-8元环；或者R11和R12与它们所连接的sp2碳原子一起形成稠合的低级环烯基、芳基或杂芳环；或者R5与R13或R14之一一起代表低级亚烷基，其中一个CH2基团被一个杂原子任选取代；或者R6或R7与R3或R4之一一起代表低级亚烷基，其中一个CH2团被一个杂原子任选取代；或者R3和R4一起代表低级亚烷基，其中一个CH2基团被一个杂原子任选取代；V代表一个间隔基；R8和R9一起代表低级亚烷基，其中一个CH2被一个杂原子任选取代；q代表1或者2；另有如下限制条件(i)至少W，X和Y中之一代表前述这些取代基的一种杂原子或者CO，(ii)当W代表O时，Z代表CO，或者SO2或者CS；(iii)W，X，Y和Z不都是CO；(iv)W，X，和Y不分别是NR5，NR6和NR7；和以上化合物适合药用的盐。
2.权利要求1所述的通式如下的化合物 其中W代表O，S，CO，NR5或者(CR3R4)m；X代表NR6或-(CH2)n-；Y代表CO，NR7或者-(CH2)p-；Z代表CO，SO2或者CH2；m代表0或者1；n和p每个分别代表0，1或者2；R1代表低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基，芳基或者芳基-低级烷基；R2代表低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基或者通式为V-芳基，V-杂环基或者-(CH2)qCH＝CR8R9的基团；R3，R4，R5，R6和R7每个分别代表氢，低级烷基，低级烯基，低级环烷基，低级环烷基-低级烷基，芳基，芳基-低级烷基，杂环基或者杂环基-低级烷基；或者R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成3-8元环；或者R5和R6，或R5和R7与它们所连接的氮原子一起形成3-8元环；V代表一个间隔基；q代表1或者2；另有如下限制条件(i)至少W，X和Y之一代表一种杂原子或者CO；(ii)当W代表O时，Z代表CO或者SO2；(iii)W，X，和Y不分别是NR5，NR6和NR7；和以上化合物适合药用的盐。
3.权利要求1所述的的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环是式(a)-式(u)中的一种环，其中R3，R4，R5，R6，R7，R11，R12和R13的定义同前述
4.权利要求2所述的的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环是式(a)-式(q)中的一种环，其中，R3，R4，R5，R6和R7的定义同前述
5.权利要求1或3所述的的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环是式(a)，(b)，(j)，(m)，(r)，(s)或(u)中的一种环。
6.权利要求1-5中任一权利要求所述的的化合物，其中包括有W，X，Y和Z的环是式(a)，(j)或(m)中的一种环。
7.权利要求1-6中任一权利要求所述的的化合物，其中V所代表的间隔基可以是通式为-(CH2)r-U-(CH2)s-的基团，其中r和s每个分别代表0，1，2或3，并且其中U不存在，或代表-CH＝CH-，-C≡C-，-S-，-O-，-NH-，-NHCO-，-CONH-，-SO2-，-NHSO2-，-SO2NH-，-NHCONH-或者-NHSO2NH-。
8.权利要求1-7中任一权利要求所述的的化合物，其中R1代表低级烷基。
9.权利要求8所述的的化合物，其中R1代表异丙基。
10.权利要求1-9中任一权利要求所述的的化合物，其中R2代表低级环烷基-低级烷基。
11.权利要求10所述的的化合物，其中R2代表3-环己基丙基。
12.权利要求1-9中任一权利要求所述的的化合物，其中R2代表通式为-(CH2)3-芳基或-CH2-CH＝CH-芳基的基团。
13.权利要求12所述的的化合物，其中芳基代表未取代的苯基。
14.权利要求1-9中任一权利要求所述的的化合物，其中R2代表苯基苄基。
15.权利要求1或2所述的的化合物，选自(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺；(E)-N-(六氢-2，6-二氧代-1-嘧啶基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺；2(R)-[4-环己基-1(S)-(羟基氨基甲酰基)丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺；(E)-N-(四氢-3-氧代-2H-1，2，4-硫杂二嗪-2-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-4-甲基戊酰胺S，S-二氧化物；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，6-二氧代-1-哌嗪基)戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺；(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(1(S)-甲基丙基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)戊酰胺，以及2(R)-[2-(4-联苯基)-1(S)-(羟基氨基甲酰基)乙基]-N-(2，5-二氧代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺。
16.权利要求1所述的化合物，选自2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基-N-[4(S)-[2-(甲基硫)乙基]-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-申基戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-(4(S)-异丙基-5-氧代-2-硫代-1-咪唑烷基)-4-甲基戊酰胺；(E)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基-3-丁烯基]-N-[4(S)-(羟基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺；3-[2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰氨基]-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4，5]癸烷-8-羧酸苄酯；N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺；N-(1，2，3，4-四氢-2，4-二氧代噻吩并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺；2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-N-[4(S)-甲氧基甲基)-2，5-二氧代-1-咪唑烷基]-4-甲基戊酰胺，以及1-(8-乙酰基-2，4-二氧代-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-3-基)-2(R)-[1(S)-(羟基氨基甲酰基)-4-苯基丁基]-4-甲基戊酰胺。
17.权利要求1-16中任一权利所述的化合物或这些化合物适合药用的盐，用作治疗活性物质，特别是在治疗炎症性和自身免疫性疾病、骨关节炎、肿瘤、恶病质、心血管性疾病、发热、出血和脓血症中用作治疗活性物质。
18.权利要求1-16中任一权利所述的化合物及这些化合物适合药用的盐的制备方法，该方法包括从如下通式的化合物中脱去R10代表的保护基 其中，R1，R2，W，X，Y和Z的定义同权利要求1或2所述，R10代表一个保护基；并且，如果需要，将所得的式(I)或(Ia)的化合物转化为适合药用的盐。
19.权利要求1-16中任一权利所述的化合物，其中W代表NR5，R5代表H，及这些化合物适合药用的盐的制备方法，该方法包括从如下通式的化合物中脱去R10和P代表的保护基 其中，R1，R2，X，Y和Z的定义同权利要求1或2所述，R10和P各自代表一个保护基；并且，如果需要，将所得的式(I)或(Ia)的化合物转化为适合药用的盐。
20.权利要求18给出的式(II)化合物。
21.权利要求19给出的式(XLIV)化合物。
22.一种包含有权利要求1-16中任一权利所述的一种化合物，或其适合药用的盐，及治疗惰性的载体物质的药物。
23.一种治疗炎症性和自身免疫性疾病、骨关节炎、呼吸性疾病、肿瘤、恶病质、心血管性疾病、发热、出血和脓血症的药物，含有权利要求1-16中任一权利所述的一种化合物，或其适合药用的盐，及治疗惰性的载体物质。
24.一种药物，特别是一种治疗炎症性和自身免疫性疾病、骨关节炎、呼吸性疾病、肿瘤、恶病质、心血管性疾病、发热、出血和脓血症的药物的制备方法，包括将权利要求1-16中的一个化合物或其适合药用的盐，与治疗惰性的载体物质，并且如果有需要，与一种或多种其它治疗活性物质一起，制成药物制剂服用形式。
25.权利要求1-16中任一权利所述的化合物或其适合药用的盐在治疗疾病，特别治疗炎症性和自身免疫性疾病、骨关节炎、呼吸性疾病、肿瘤、恶病质、心血管性疾病、发热、出血和脓血症中的应用。
26.权利要求1-16中任一权利所述的化合物或其适合药用的盐在制备一种药物中的应用，该药物包含有权利要求1-16中任一权利所述的化合物，用于治疗疾病，特别治疗炎症性和自身免疫性疾病、骨关节炎、呼吸性疾病、肿瘤、恶病质、心血管性疾病、发热、出血和脓血症。
27.根据权利要求18或19的方法，或与其相同的方法所制备的权利要求1-16中任一权利所述的化合物或其适合药用的盐。
28.本发明上文中所述的所有内容，特别是有关新化合物，制备方法、药物制剂和用途。
全文摘要
式(Ⅰ)肼类衍生物,其中W代表O,S,CO,NR
文档编号C07D471/04GK1330640SQ99814323
公开日2002年1月9日 申请日期1999年12月2日 优先权日1998年12月11日
发明者迈克尔·约翰·布罗德赫斯特, 威廉·亨利·约翰逊, 达里尔·西蒙·沃尔特 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司