新型GLP-1受体调节剂的制作方法

本发明涉及结合胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体的化合物，其合成方法，及其治疗应用和/或预防性应用的方法。本发明涉及适于用作GLP-1受体的调节剂(modulator)、和诸如GLP-1(7-36)和GLP-1(9-36)的肠促胰岛素肽的增效剂的化合物，以及基于肽(诸如如艾塞那肽和利拉鲁肽)的疗法。

发明背景

胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)属于七次跨膜(seven-transmembrane)的G蛋白偶联受体的B1族，并且其天然激动剂配体是肽激素胰高血糖素样肽-1(GLP-1)。GLP-1是通过其从高血糖素原的选择性酶切产生的肽激素，所述高血糖素原即GLP-1的激素原前体，其在肠的内分泌细胞中、内分泌胰腺α细胞(胰岛)中、和脑中高度表达(Kieffer T.J.和Habener,J.F.Endocrin.Rev.20:876-913(1999)；Drucker,D.J.,Endocrinology 142:521-7(2001)；Holst,J.J.,Diabetes Metab.Res.Rev.18:430-41(2002))。GLP-1的初始作用在胰岛的胰岛素分泌细胞中被观察到，在该处其刺激葡萄糖依赖的胰岛素分泌。之后，发现了GLP-1的多种另外的抗糖尿病作用，包括对胰β细胞生长的刺激和对其细胞凋亡的抑制(Drucker,D.J.,Endocrinology 144:5145-8(2003)；Holz,G.G.和Chepurny O.G.,Curr.Med.Chem.10:2471-83(2003)；List,J.F.和Habener,J.F.,Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.286:E875-81(2004))。

激活时，GLP-1受体与G蛋白的α-亚基偶联，随着之后腺苷酸环化酶的激活和cAMP水平的升高，从而增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌。因此，GLP-1是降低血糖和保护糖尿病患者的胰腺β-细胞的受关注的治疗靶点。胰高血糖素在糖尿病的医疗实践中已使用了数十年，并且一些用于多种治疗适应症的胰高血糖素样肽正处于研发中。为治疗患有糖尿病的患者，正在研发GLP-1的类似物和衍生物。

发明概述

本发明涉及适于用作GLP-1受体的增效剂或调节剂的化合物；其制备方法和其使用方法，例如在GLP-1受体激活介导的恶性病况的治疗中使用，或在医学上需要GLP-1受体的调节或增强的治疗时使用。

本发明的某些实施方案包括具有式I-R或式I-S的结构的化合物，或其药物可接受的异构体、对映异构体、外消旋体、盐、同位素、前药、水合物或溶剂化物：

其中

A为含有一个、两个或三个杂原子的5元、6元或7元的杂环基，其中各个这种杂原子独立地选自O、N和S，且其中这种杂环基的任何环原子任选地被一个或多个R4取代；

B为芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基；

C为芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基，且当C为芳基时，A和C可在A的5元、6元或7元杂环基与C的芳基之间一起形成稠合二环系统；

Y1和Y2均不存在，或者Y1或Y2之一为–NH-或–O-且另一个Y1或Y2不存在；

Z为–C(O)-或–S(O)2-；

各个R1独立地为H或C1-4烃基；

R2为–OH、-O-R8、-N(R1)-SO2-R7、-NR41R42、–N(R1)-(CRaRb)m-COOR8、-N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)(R40)、-N(R1)-(CRaRb)m-N(R1)C(O)O(R8)、-N(R1)-(CRaRb)m-N(R1)(R40)、-N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)-杂环基或-N(R1)-(CRaRb)m-杂环基，所述杂环基可任选地被R7取代(单取代或多取代)；

各个R3和R4独立地为H、卤素、烃基、被R31取代的烃基(单取代或多取代)、烃氧基、卤代烃基、全卤代烃基、卤代烃氧基、全卤代烃氧基、芳基、杂环基、-OH、-OR7、-CN、-NO2、-NR1R7、-C(O)R7、-C(O)NR1R7、-NR1C(O)R7、-SR7、-S(O)R7、-S(O)2R7、-OS(O)2R7、-S(O)2NR1R7、-NR1S(O)2R7、-(CRaRb)mNR1R7、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR7、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR7或-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mCOOR8；或者在相同碳原子上的任意两个R3或R4基团一起形成氧代；

各个R31独立地为H、卤素、羟基、-NR41R42或烃氧基；

各个R40独立地为H、R7、可任选地被R7取代(单取代或多取代)的烃基，或者R40和R1和与它们相连的N原子一起形成可任选地被R7取代(单取代或多取代)的3元至7元的杂环基；

各个R41和R42独立地为R40、-(CHR40)n-C(O)O-R40、-(CHR40)n-C(O)-R40、-(CH2)n-N(R1)(R7)、芳基或杂芳基，任何所述芳基或杂芳基可任选地被R7取代(单取代或多取代)；或者任意两个R41和R42可和与它们相连的N原子一起形成可任选地被R7取代(单取代或多取代)的3元至7元的杂环基；

W1不存在或为–L1-(CRaRb)m-L1-R6；

各个L1，从式I-R或式I-S结构的近端至远端，独立地不存在，或为-C(O)O-、-S(O2)-、-S(O)-、-S-、-N(R1)-C(O)-N(R1)-、-N(R1)-C(O)-O-、-C(O)-或-S(O2)-NR1-；

各个Ra和Rb独立地为H、卤素、烃基、烃氧基、芳基、芳烃基、杂环基、杂环基烃基(任何所述烃基、烃氧基、芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基可任选地被R7、-(CHR40)mC(O)OR40、-(CHR40)mOR40、-(CHR40)mSR40、-(CHR40)mNR41R42、-(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)m-NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)-(CHR40)mC(O)OR40或-(CHR40)m-S-S-R40取代(单取代或多取代))；或者任意两个Ra和Rb和与它们相连的碳原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的环烃基或杂环基；或者R1和Ra或Rb中的任一个以及与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基；

R5为R7、-(CRaRb)m-(CRaRb)m-R7或-(-L3-(CRaRb)r-L3-R7，其中任意两个相邻的-(CRaRb)m或(CRaRb)r基团的碳原子可一起形成双键(-(C(Ra)＝(C(Ra)-)或三键(-C≡C-)；

R6为H、烃基、芳基、杂芳基、杂环基、杂环烃基，其中的任何基团可任选地被R7或-(CRaRb)m-L2-(CRaRb)m-R7取代(单取代或多取代)；

各个R7独立地为R10；选自环烃基、芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基的环部分，其中该种环部分任选地被R10取代(单取代或多取代)；或者当碳原子连有两个R7基团时，该两个R7基团一起形成氧代或硫代，或者一起形成选自环烃基、芳基、杂环基或杂环基的环部分，其中该种环部分任选地被R10单取代或多取代；

各个R10独立地为H、卤素、烃基、卤代烃基、全卤代烃基、-(CRaRb)mOH、-(CRaRb)mOR8、-(CRaRb)mCN、-(CRaRb)mNH(C＝NH)NH2、-(CRaRb)mNR1R8、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mC(O)R8、-(CRaRb)mC(O)OR8、-(CRaRb)mC(O)NR1R8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mC(O)OR8、-(CRaRb)mNR1C(O)R8、-(CRaRb)mC(O)NR1S(O)2R8、-(CRaRb)mSR8、-(CRaRb)mS(O)R8、-(CRaRb)mS(O)2R8、-(CRaRb)mS(O)2NR1R8或-(CRaRb)mNR1S(O)2R8；

各个R8独立地为H、烃基、芳基、-(CRaRb)m-L2-(CRaRb)m-R1或-(-L3-(CRaRb)r-)s-L3-R1；

L2，从式I-R或式I-S结构的近端至远端，独立地不存在，或为–O-、-OC(O)-、-NR1-、-C(O)NR1-、-N(R1)-C(O)-、-S(O2)-、-S(O)-、-S-、-C(O)-或-S(O2)-N(R1)-；

各个L3独立地不存在，或为-O-或–N(R1)-

各个m独立地为0、1、2、3、4、5或6；

各个n独立地为0或1或2；

p为0、1、2或3；

q为0、1、2或3；

各个r独立地为2、3或4；以及

各个s独立地为1、2、3或4。

在某些实施方案中，提供了包含本发明化合物，连同至少一种药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

在某些实施方案中，提供了本发明化合物的使用方法，包括制备药物。

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物和第二药物的药物组合。在多种这类实施方案中，第二药物为胰高血糖素受体、GIP受体、GLP-2受体、PTH受体或胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体的激动剂或调节剂。在多种这类实施方案中，第二药物为艾塞那肽、利拉鲁肽、他司鲁肽、阿必鲁肽、利西拉肽或其他胰岛素调节肽。在多种实施方案中，第二药物在医学上为治疗II型糖尿病所需要的。在多种实施方案中，第二药物为双胍、磺酰脲类、美格列奈(meglitinide)、噻唑烷二酮、α-葡萄糖苷酶抑制剂、胆汁酸螯合剂、和/或多巴胺-2激动剂，而且在更多特定的实施方案中，为二甲双胍(一种双胍)或西格列汀(DPPIV抑制剂)。

在某些实施方案中，提供了激活、增强、或激动GLP-1受体的方法，包括使受体接触本发明的化合物、药物组合物或药物组合。

在某些实施方案中，提供了治疗在医学上需要GLP-1受体的激活、增强或激动的对象的恶性病况的方法，其中这种方法包括对这类对象施用本发明的化合物、药物组合物或药物组合。在多种这类实施方案中，在医学上需要GLP-1受体的选择性激活、增强或激动。在多种这类实施方案中，恶性病况包括I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖症、食欲过盛、饱腹感不足或代谢紊乱。

在某些实施方案中，本发明提供包括本发明的化合物在内的某些化合物的合成方法。在某些其他实施方案中，本发明提供某些与这些合成方法有关的中间体化合物。

发明详细描述

某些实施方案包括具有式I-R或式I-S的手性结构(具有所表明的手性)的化合物，或其药物可接受的异构体、对映异构体、外消旋体、盐、同位素、前药、水合物或溶剂化物：

本发明的某些实施方案包括具有式I-R或式I-S的结构的化合物，或其药物可接受的异构体、对映异构体、外消旋体、盐、同位素、前药、水合物或溶剂化物：

其中A、B、C、Y1、Y2、Z、R1、R2、R3、R4、R5、W1、n、p和q如上文所定义。

在某些实施方案中，化合物具有式I-R的结构或其药物可接受的异构体、对映异构体、盐、同位素、前药、水合物或溶剂化物。在其他实施方案中，化合物具有式I-S的结构或其药物可接受的异构体、对映异构体、盐、同位素、前药、水合物或溶剂化物。

在某些实施方案中，化合物可以基本上是对映异构纯的。

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且A为5元或6元的杂芳基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供了其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且A为5元、6元或7元非芳香杂环基的化合物。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供每一种结构I-R/S(1)-(29)的化合物，其中苯基的R4为H。

在某些实施方案中，本发明提供每一种结构的I-R/S(1)-(29)的化合物，其中A基团(即，5元、6元或7元杂环基)未被R4取代，或者被R4取代，其中R4为烃基、卤代烃基、烃氧基、-NR1R7(其中R1和R7独立地为氢或烃基)，或者被两个在一起形成氧代的R4基团取代。

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且C为芳基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供每一种结构的I-R/S(30)-(32)的化合物，其中q为零。

在某些实施方案中，本发明提供每一种结构的I-R/S(30)-(32)的化合物，其中q为一、二或三。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(30)的化合物，其中q为一，且R5为-(CRaRb)m-L2-(CRaRb)m-R7或–(-L3-(CRaRb)r-)s-L3-R7。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(33)的化合物，其中R7为H或烃基，且L2为O。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(30)的化合物，其中R5为R7。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(35)的化合物，其中R7为卤素、烃基、卤代烃基、全卤代烃基、烃氧基、-(CRaRb)mOH、-(CRaRb)mOR8、-(CRaRb)mCN、-(CRaRb)mNH(C＝NH)NH2、-(CRaRb)mNR1R8、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mC(O)R8、-(CRaRb)mC(O)OR8、-(CRaRb)mC(O)NR1R8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mC(O)OR8、--(CRaRb)mNR1C(O)R8、-(CRaRb)mC(O)NR1R8、-(CRaRb)mSR8、-(CRaRb)mS(O)R8、-(CRaRb)mS(O)2R8、-(CRaRb)mS(O)2NR1R8、-(CRaRb)mNR1S(O)2R8。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(35)的化合物，其中R7为选自环烃基、芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基的环部分，其中该种环部分任选地被卤素、-OH、-CN、烃基、烃氧基、卤代烃基或全卤代烃基取代(单取代或多取代)。

在某些实施方案中，本发明提供了式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且C为杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(36)-(44)中每一种的化合物，其中R7为卤素、烃基、卤代烃基、全卤代烃基、烃氧基、-(CRaRb)mOH、-(CRaRb)mOR8、-(CRaRb)mCN、-(CRaRb)mNH(C＝NH)NH2、-(CRaRb)mNR1R8、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR8、-(CRaRb)mC(O)R8、-(CRaRb)mC(O)OR8、-(CRaRb)mC(O)NR1R8、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mC(O)OR8、-(CRaRb)mNR1C(O)R8、-(CRaRb)mC(O)NR1R8、-(CRaRb)mSR8、-(CRaRb)mS(O)R8、-(CRaRb)mS(O)2R8、-(CRaRb)mS(O)2NR1R8、-(CRaRb)mNR1S(O)2R8。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(36)-(44)中每一种的化合物，其中R7为选自环烃基、芳基、芳烃基、杂环基或杂环基烃基的环部分，其中该种环部分任选地被卤素、-OH、-CN、烃基、烃氧基、卤代烃基或全卤代烃基取代(单取代或多取代)。

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且B为芳基或芳烃基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供每一种结构的I-R/S(45)-(48)的化合物，其中W1不存在。

这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(49)的化合物，其中R3为卤素、烃基、被R31取代的烃基、烃氧基、卤代烃基、全卤代烃基、卤代烃氧基、全卤代烃氧基、芳基、杂环基、-OH、-OR7、-CN、-NO2、-NR1R7、-C(O)R7、-C(O)NR1R7、-NR1C(O)R7、-SR7、-S(O)R7、-S(O)2R7、-OS(O)2R7、-S(O)2NR1R7、-NR1S(O)2R7、-(CRaRb)mNR1R7、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR7、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR7或-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mCOOR8。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(45)-(49)中每一种的化合物，其中R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在，Z为–C(O)-且B为杂环基或杂环基烃基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(50)-(62)中每一种的化合物，其中W1不存在。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(50)-(62)中每一种的化合物，其中W1不存在且R3为卤素、烃基、被R31取代的烃基、烃氧基、卤代烃基、全卤代烃基、卤代烃氧基、全卤代烃氧基、芳基、杂环基、-OH、-OR7、-CN、-NO2、-NR1R7、-C(O)R7、-C(O)NR1R7、-NR1C(O)R7、-SR7、-S(O)R7、-S(O)2R7、-OS(O)2R7、-S(O)2NR1R7、-NR1S(O)2R7、-(CRaRb)mNR1R7、-(CRaRb)mO(CRaRb)mR7、-(CRaRb)mNR1(CRaRb)mR7或-(CRaRb)mNR1(CRaRb)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(50)-(62)中每一种的化合物，其中W1不存在，p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(1)-(62)中每一种的化合物，其中R2为–OH、-N(R1)-(CRaRb)m-COOH或-N(R1)-SO2-R7；其中R1为H；其中Ra和Rb独立地为H、烃基、烃氧基、-(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)OR40、-(CHR40)mNR41R42、-(CHR40)mSR40、任选地被R7取代的芳基，或者其中R1和Ra或Rb中的任一个以及与它们相连的碳原子一起形成杂环基；R8为烃基；且m为1或2。

在某些实施方案中，本发明提供以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中A为5元杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中A为6元杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中A为含有一个或两个氮原子的6元杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中A为嘧啶基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中A为吡啶基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中B为芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中B为苯基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中B为杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中B为噻吩基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–OH。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–N(R1)(CRaRb)mCOOR8。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为-N(R1)SO2R7。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NHCH2COOH。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NH(CHRb)COOH，其中Rb为任选地被R7、-(CHR40)mOR40、-(CHR40)mSR40、-(CHR40)mNR41R42、-(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)m-NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)OR40或-(CHR40)m-S-S-R40取代的烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NH(CRaRb)mCOOH，其中Ra和Rb独立地为H、任选地被R7取代的烃基、-(CHR40)mOR40、-(CHR40)mSR40、-(CHR40)mNR41R42、-(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)m-NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)-(CHR40)mC(O)NR41R42、-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)OR40或-(CHR40)m-S-S-R40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NR1(CHRb)mCOOH，其中R1和Rb一起形成杂环基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NR1(CRaRb)mCOOH，其中R1和一个Rb一起形成杂环基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中任意两个Ra和Rb与和它们相连的碳一起形成环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中R2为–NH(CRaRb)mCOOH，其中Ra和Rb中的一个为H，且Ra和Rb中的另一个为被R7取代的芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中p为1或2，且各个R3独立地为烃基、烃氧基、-OH、全卤代烃基或-C(O)R8。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中p为1且各个R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中q为1且R5为-(CRaRb)m-L2-(CRaRb)m-R7，并且在更多的特定实施方案中q为1且R5为-(CH2)m-L2-(CH2)m-R7。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(63)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(64)的化合物，其中B为苯基或噻吩基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为烃基，q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(64-1)的化合物，其中B为苯基或噻吩基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基(-CH2苯基)、苯乙基(-CH2CH2苯基)或苯乙烯基(-CH＝CH苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基(-CH2苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙基(-CH2CH2苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基(-CH＝CH苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为烃基，q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为–N(R1)(CRaRb)mCOOR8。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中R2为–N(R1)(CRaRb)mCOOR8。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中R1为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中m为2，R1为氢，Ra和Rb每次出现时为氢，且R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中m为2，单个的Ra(即，两个中的一个)为氢，Rb每次出现时为氢，且R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中m为1且R1、Ra、Rb和R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中m为1，Ra为烃基且R1、Rb和R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中m为1，Ra为甲基且R1、Rb和R8为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基(-CH2苯基)、苯乙基(-CH2CH2苯基)或苯乙烯基(-CH＝CH苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基(-CH2苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙基(-CH2CH2苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基(-CH＝CH苯基)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)、(67-1)、(68)和(68-1)的化合物，其中q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为烃基，q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C6烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为C1-4烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67-1)-(68-1)的化合物，其中芳烃基为苄基、苯乙基或苯乙烯基，p为1，R3为叔丁基，q为1且R5为环丙基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)-(68)的化合物，其中m为2，R1为氢，Ra和Rb每次出现时为氢，且R8为氢。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(69)-(70)的化合物，其中p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)-(68)的化合物，其中m为1且R1、Rb和R8为氢。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)-(68)的化合物，其中m为2，单个的Ra(即，两个中的一个)为氢，Rb每次出现时为氢，且R8为氢。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为任选地被R7取代的烃基，其中烃基包括例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基的直链和支链烃基，以及例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基的环烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为甲基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为杂环或杂环基烃基，其中任一种可任选地被R7取代。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为杂环，例如吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻二唑基、噁二唑基、咪唑啉基、六氢嘧啶基、二氮杂环庚烷基、三嗪基、咪唑基、吡咯烷基、呋喃基、四氢呋喃基、四氢-2H-吡喃基、二氧杂环戊烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基、吲哚基、二氢吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、硫代萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基，其中任一种可任选地被R7取代。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为芳基或芳烃基，其中任一种可任选地被R7取代。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为芳基或芳烃基，例如苯基或苄基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为被R7取代的芳基或杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为被羟基取代的苯基或苄基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为–CH(OH)C6H5。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mC(O)OR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mC(O)OH。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mOR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mOH。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-CH2OH。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mSR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mSR40，其中R40为H或烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mNR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mNR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mC(O)NR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mC(O)NR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-CH2C(O)NH2或–CH2CH2C(O)NH2。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mNR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mC(O)N(R1)(CH2)mNR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)NR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mC(O)N(R1)(CH2)mC(O)NR41R42。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)mC(O)N(R1)(CHR40)mC(O)OR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)mC(O)N(R1)(CH2)mC(O)OR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CHR40)m-S-S-R40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中Ra为-(CH2)m-S-S-R40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中，Ra基团中，R1、R40、R41和R42为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中，Ra基团中，m为1。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中，Ra基团中，m为2。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(71)-(74)的化合物，其中p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)-(68)的化合物，其中m为1，Rb为氢且R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(67)-(68)的化合物，其中m为2，第二个(CRaRb)基团的Rb为氢且第二个(CRaRb)基团的R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(78)的化合物，其中R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中R7不存在。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中R7为羟基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中R7不存在，p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(75)-(86)的化合物，其中R7为羟基，p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为–N(R1)-SO2-R8。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(87)-(88)的化合物，其中R1为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(87)-(88)的化合物，其中R1为氢且R8为任选地被R7取代(单取代或多取代)的烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为-OH。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为–N(R1)(R42)。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41和R42独立地为R40、-(CHR40)n-C(O)OR40、-(CHR40)n-C(O)R40、-(CH2)nN(R1)(R7)、芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基任选地被R7取代(单取代或多取代)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为任选地被R7取代(单取代或多取代)的烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为-(CHR40)nC(O)OR40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为-(CHR40)nC(O)R40。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为-(CH2)nN(R1)(R7)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为任选地被R7取代(单取代或多取代)的芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41为氢且R42为任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂芳基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41和R42和与它们相连的N原子一起形成3元至7元的任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(91)-(92)的化合物，其中R41和R42和与它们相连的N原子一起形成吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻二唑基、噁二唑基、咪唑啉基、六氢嘧啶基、二氮杂环庚烷基、三嗪基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基或吡啶基，其中任一种可任选地被R7取代(单取代或多取代)。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为–N(R1)(CRaRb)mCON(R1)(R40)。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(94)的化合物，其中m为1，Rb为氢且R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(94)的化合物，其中m为2，第二个(CRaRb)基团的Rb为氢且第二个(CRaRb)基团的R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(95)-(98)的化合物，其中R1和Ra和与它们相连的原子一起形成任选地被R7取代(单取代或多取代)的氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中p为1且R3为烃基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中p为1且R3为叔丁基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中q为1且R5为烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中q为1且R5为C7烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中R7不存在或为羟基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中R7不存在或为羟基，p为1，R3为烃基，q为1且R5为C4-8烃氧基。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中R1为氢。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中R40为R7。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(93)-(104)的化合物，其中R40为R7，R7为-(CRaRb)mS(O)2R8，且R8为-(CRaRb)m-L2-(CRaRb)m-R1。

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为-N(R1)(CRaRb)mN(R1)C(O)O(R8)。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为-N(R1)(CRaRb)mN(R1)(R7)。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为-N(R1)(CRaRb)mCON(R1)杂环基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65)-(66)的化合物，其中R2为-N(R1)(CRaRb)m-杂环基，所述杂环基可任选地被R7取代。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(65-1)-(66-1)的化合物，其中R2如结构I-R/S(69)至I-R/S(112)中的每一种所示。本文中这类化合物被称为I-R/S(69-1)至I-R/S(112-1)。例如，结构I-R/S(67-1)-(68-1)描述当R2为–N(R1)(CRaRb)mCOOR8时的结构I-R/S(65-1)-(66-1)。类似地，结构I-R/S(69-1)至I-R/S(112-1)对应于结构I-R/S(69)至I-R/S(112)，但以结构I-R/S(69)至I-R/S(112)的特定R2基团作为结构I-R/S(65-1)-(66-1)的R2基团。

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1和Y2不存在且Z为–S(O)2-。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(95)的化合物，其中A为嘧啶基，B为苯基且C为苯基。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1不存在，Y2为–O-且Z为–C(O)-。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中Y1为NH，Y2不存在且Z为–C(O)-。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供式I-R和/或式I-S的化合物，其中C为芳基且A和C在A的5元、6元或7元杂环基与C的芳基之间一起形成稠合二环系统。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供结构I-R/S(99)的化合物，其中Y1不存在且Z为–C(O)-。这类实施方案的代表性化合物包括以下结构的其中XA和XB中的一个或两个为氮的化合物(其中表示R型和S型化合物中的一种或两种)：

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物，连同至少一种药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物和第二药物的药物组合物。在某些这类实施方案中，第二药物为GLP-1激动剂或DPPIV抑制剂。

在某些实施方案中，本发明提供用于制备药剂的本发明化合物的使用方法。

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物和第二药物的药物组合。在多种这类实施方案中，第二药物为胰高血糖素受体、GIP受体、GLP-2受体、PTH受体或胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体的激动剂或调节剂。在多种这类实施方案中，第二药物为艾塞那肽、利拉鲁肽、他司鲁肽、阿必鲁肽、利西拉肽或其他胰岛素调节肽。在多种这类实施方案中，第二药物为DPPIV抑制剂，例如西格列汀。在多种这类实施方案中，第二药物在医学上表明可用于治疗II型糖尿病。在多种组合中，第二药物为钠-葡萄糖共转运载体(SGLT)抑制剂，例如SGLT1抑制剂和/或SGLT2抑制剂。在多种这类实施方案中，第二药物为例如二甲双胍的双胍，例如格列本脲、格列吡嗪、格列齐特和格列美脲的磺酰脲类，例如瑞格列奈和那格列奈的美格列奈(meglitinide)，例如吡格列酮和罗格列酮的噻唑烷二酮，例如阿卡波糖和米格列醇的α-葡萄糖苷酶抑制剂，例如考来维仑的胆汁酸螯合剂，和/或例如溴隐亭的多巴胺-2激动剂。

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物和第二药物的药物组合物，其中第二药物为二甲双胍。

在某些实施方案中，本发明提供包含本发明化合物和第二药物的药物组合物，其中第二药物为西格列汀。

在某些实施方案中，提供了胰高血糖素样肽1的激活、增强或激动方法，其包括使受体接触有效量的本发明的化合物、药物组合物或药物组合。

在其他实施方案中，提供了通过使受体接触有效量的发明化合物以及GLP-1肽GLP-1(9-36)和GLP-1(7-36)、接触有效量的药物组合物或药物组合来激活或激动GLP-1受体的方法，其中GLP-1受体在活哺乳动物中处理(disposed)；在某些实施方案中，其中这类哺乳动物为人类。

在某些实施方案中，提供了治疗在医学上需要GLP-1受体的激活、增强或激动的对象的恶性病况的方法，其通过按照足以为患者提供有益作用的频率或持续时间向对象施用有效量的发明化合物来进行治疗。在其他实施方案中，提供了治疗在医学上需要GLP-1受体的激活、增强或激动的患者的恶性病况的方法，其通过按照足以为患者提供有益作用的频率或持续时间对患者施用有效量的发明化合物来进行治疗，其中所述恶性病况包括I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖症、食欲过盛、饱腹感不足或代谢紊乱。在某些实施方案中，所述对象为患者或人类。在某些实施方案中，所述人类经受选自I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖症、食欲过盛、饱腹感不足的代谢紊乱的疾病或病况的病痛，或存在患上这些疾病或病况的风险。在某些这类实施方案中，所述疾病为I型糖尿病或II型糖尿病。

在某些实施方案中，如在本文中更充分所说明，本发明提供某些化合物的合成方法，包括本发明的化合物。在某些其他实施方案中，本发明提供某些与本文中说明的这些合成方法有关的中间体化合物。

在某些实施方案中，提供了使用本发明化合物以制备适于治疗其中医学上需要GLP-1受体的激活或抑制的病况或恶性病况的药物的方法。在某些实施方案中，所述恶性病况包括I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖症、食欲过盛、饱腹感不足和代谢紊乱。优选地，所述疾病为I型糖尿病或II型糖尿病。

在某些实施方案中，所述方法另外包括向对象施用选自双胍、肽类GLP-1激动剂和DPPIV抑制剂的第二药物，其中这类第二药物为药物组合物的成分或第二药物组合物的成分。在某些这类实施方案中，第二药物可以是二甲双胍、艾塞那肽或西格列汀。

如说明书和附加的权利要求书中使用的，单数形式“一种”、“一个”和“所述”包括复数指称，除非文中另外明确指明。

如本文中使用的，“个体”(作为治疗的对象)意指哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物包括，例如，人类；非人类的灵长目动物，例如，猿和猴；牛；马；绵羊；和山羊。非哺乳动物包括，例如，鱼和鸟。

“受体”，如本领域所熟知的，为生物分子实体，其通常包含特异性地结合生物体内一类结构的配体或结合单一的自身(native)配体的蛋白质，所述结合使受体将结合信号转导为另一种生物作用，例如对已发生结合事件的细胞发出信号，使该细胞以某些方式改变其功能。转导的实例为结合配体的受体使活细胞细胞质中的“G-蛋白”活性改变。无论是否为天然存在，结合受体并使其激活进行信号转导的任何分子被称为“激动剂”或“激活剂”。无论是否为天然存在，结合受体但并未使信号转导发生，并可以阻断激动剂的结合及其后续信号转导的任何分子被称为“拮抗剂”。某些分子在受体的天然配体结合位点之外的位置与受体结合，且这类变构结合分子可以增强、激活或激动(agonize)受体，并且可以加强天然配体或共同给予的配体的效果。

本文中使用的术语“GLP-1化合物”、“GLP-1激动剂”、“GLP-1激活剂”、“GLP-1抑制剂”、“GLP-1拮抗剂”、“GLP-1增效剂”或“GLP-1调节剂”指通过某些方式与GLP-1受体相互作用的化合物。其可以是激动剂、增效剂或激活剂，或者其可以是拮抗剂或抑制剂。本发明的“GLP-1化合物”可以对GLP-1受体族的作用有选择性。

本文中使用的术语“基本上”意指完全地或几乎完全地；例如，“基本上不含”一种成分的组合物不含有该成分或含有痕量的该成分且其存在不影响组合物相应功能性质，或者，化合物是“基本上纯的”意指化合物仅存在可忽略的痕量的杂质。

基本对映异构纯或基本非对映异构纯意指一种对映异构体相对于其他对映异构体或非对映异构体的对映异构富集或非对映异构富集水平为至少约80％，且更优选地大于80％、85％、90％、95％、98％、99％、99.5％或99.9％。

“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”在本文中的含义指与病况或疾病有关的症状的缓解，或指对这些症状的进一步发展或恶化的抑制，或指对疾病或病况的预防或预防治疗。

当用于描述本发明的化合物在为患有由GLP-1介导的病况或病症的患者提供治疗的用途时，词语“有效量”是指本发明的化合物作为激动剂或作为拮抗剂有效地结合至个体的组织中GLP-1受体的量，其中所述GLP-1与该病况相关，其中这种结合达到足够对患者产生有益的治疗效果的程度。类似地，如在本文中使用的，本发明化合物的“有效量”或“治疗有效量”指的是全部或部分地缓和与所述病况或病症相关的症状，或者停止或减缓那些症状的进一步进展或恶化，或者防止或预防所述病况或病症的化合物的量。特别是，“治疗有效量”指的是通过作为GLP-1活性的激动剂发挥作用而以必要的剂量和持续时间有效地达到所需的治疗结果的量。治疗有效量也是其中本发明的化合物的有益治疗效果胜过任何毒性或有害作用的量。例如，在治疗由GLP-1受体的激活介导的病症情况下，本发明的GLP-1受体激动剂的治疗有效量为足以控制病症、减轻病症的进展或缓解病症的症状的量。可以如此被治疗的病症的实例包括但不限于，II型糖尿病。

除非特别指出了具体的立体化学或异构形式，本发明意欲包括所有手性的、非对映体的、外消旋形式的结构。在本发明中使用的化合物可以包括以任意富集程度富集的或离析的如描述中显而易见的在任意或所有不对称原子处的旋光异构体。可以合成外消旋的和非对映体的混合物，以及单个旋光异构体从而几乎不含它们的对映体或非对映体伴体，且它们都在本发明的某些实施方案的范围内。

由于手性中心的存在导致的异构体包含称作“对映体”的一对不可重叠的异构体。纯化合物的单一对映体为旋光性的，即，它们能够旋转平面偏振光的平面。单一对映体是按照Cahn-1ngoId-PreIog系统命名的。一旦确定四个基团中的优先次序，则使分子定向以使得最低优先级的基团指向远离观察者。然后，如果以顺时针进行其他基团的降序排列，则分子被命名为(R)构型，且如果以逆时针进行其他基团的降序排列，则分子被命名为(S)构型。在路线14的实例中，Cahn-Ingold-Prelog优选次序为A>B>C>D。所述排序最低的原子D远离观察者定向。

“分离的旋光异构体”指的是已经从相同分子式的相应旋光异构体中基本被纯化出来的化合物。优选地，分离的异构体为至少约80重量％纯，且优选为至少80重量％或甚至至少85重量％纯。在其他实施方案中，分离的异构体按重量计算为至少90重量％纯或至少98重量％纯，或者至少约99重量％纯。

“分离的光学异构体”意指已基本从相应的同式的光学异构体纯化的化合物。优选地，分离的异构体为至少约80％纯，且优选为至少80％或甚至至少85％纯。在其他实施方案中，分离的异构体按重量计算为至少90％纯或至少98％纯，或者至少约99％纯。

旋光对映体有时被称为旋光异构体，因为纯的旋光对映体在特定方向上旋转平面偏振光。如果光顺时针旋转，则旋光对映体被标记为“(+)”或“d”以代表顺时针，其相对物使光逆时针旋转并标记为“(-)”或“l”以代表逆时针。

术语“外消旋物”和“外消旋混合物”经常可互换地使用。外消旋物是两个旋光对映体的等量混合物。外消旋物被标记为“(±)”，因为其不具有光学活性(即，不会在任意方向上旋转平面偏振光，因为其组成旋光对映体彼此抵消)。

应该理解的是，由于绕酰胺键连接的受限旋转(如下所示)的化学性质(即，共振赋予C-N键某些双键特性)，有可能观察到分离的旋转异构体物质，且甚至在一些情况下分离出这样的物质，其实例如下所示。还应该理解的是，某些结构要素，包括空间体积或在酰胺氮上的取代基，可以将旋转异构体的稳定性提高到化合物可以作为单一的稳定旋转异构体分离并长期地存在的程度。因此，本发明包括本发明的化合物的任何可能的稳定的旋转异构体，其在治疗I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖、食欲过盛、饱腹感不足或代谢紊乱中具有生物活性。

本发明优选的化合物具有在芳香环上取代基的特定空间排列，其与由化合物分类表明的结构活性关系有关。通常这样的取代排列是通过编号体系表示的；然而，在不同的环系统之间的编号体系通常是不一致的。在六元环芳香系统中，空间排列由普通命名法指定，如下所示，“对”表示1,4-取代，“间”表示1,3-取代，以及“邻”表示1,2-取代。

涵盖在权利要求中的所有结构为“化学上可行的”，其意思是由权利要求所列举的任选的取代基的任意组合或子组合所显示的结构在物理上能够以至少某种稳定性存在，该稳定性可通过结构化学原理和实验来确定。化学上不可行的结构不在所要求保护的化合物集合的范围内。此外，所示的原子的同位素(例如，对于氢为氘和氚)也包括在本发明的范围内。

一般而言，“取代的”指的是在本文中定义的有机基团，在该基团中包含在其中的与氢原子的一个或多个键被与非氢原子的一个或多个键所取代，所述非氢原子例如，但不限于卤素(即，F、Cl、Br和I)；诸如羟基、烃氧基、芳氧基、芳烃氧基、氧代(羰基)、羧基的基团包括：羧酸、羧酸盐和羧酸酯(carboyxlate esters)中的氧原子；诸如巯基、烃基硫醚和芳基硫醚基、亚砜基、砜基、磺酰基和磺酰胺基的基团中的硫原子；诸如胺、羟胺、腈、硝基、N-氧化物、酰肼、叠氮化物和烯胺的基团中的氮原子；和其他各种基团中的其他杂原子。可以连接到取代的碳(或其他)原子上的取代基的非限制性的实例包括：F、Cl、Br、I、OR’、OC(O)N(R’)2、CN、CF3、OCF3、R’、O、S、C(O)、S(O)、亚甲二氧基、亚乙二氧基、N(R’)2、SR’、SOR’、SO2R’、SO2N(R’)2、SO3R’、C(O)R’、C(O)C(O)R’、C(O)CH2C(O)R’、C(S)R’、C(O)OR’、OC(O)R’、C(O)N(R’)2、OC(O)N(R’)2、C(S)N(R’)2、(CH2)0-2NHC(O)R’、(CH2)0-2N(R’)N(R’)2、N(R’)N(R’)C(O)R’、N(R’)N(R’)C(O)OR’、N(R’)N(R’)CON(R’)2、N(R’)SO2R’、N(R’)SO2N(R’)2、N(R’)C(O)OR’、N(R’)C(O)R’、N(R’)C(S)R’、N(R’)C(O)N(R’)2、N(R’)C(S)N(R’)2、N(COR’)COR’、N(OR’)R’、C(＝NH)N(R’)2、C(O)N(OR’)R’、或C(＝NOR’)R’，其中R’可以为氢或碳基部分(carbon-based moiety)，以及其中所述碳基部分本身可以被进一步取代。

取代的烷基、烯基、炔基、环烷基和环烯基以及其他取代的基团也可以包括其中与氢原子的一个或多个键被与碳原子或与杂原子的一个或多个键(包括双键或三键)取代的基团，所述杂原子包括，但不限于羰基(氧代)、羧基、酯、酰胺、酰亚胺、氨基甲酸酯(urethane)和脲基中的氧；和亚胺、羟基亚胺、肟、腙、脒、胍和腈中的氮。

取代的环基团包括取代的芳基、杂环基和杂芳基基团。取代的环基团可以由一个或多个取代基在任意可用的环位置取代。在一些实施方案中，取代的环基团上的两个取代基可以和与它们相连的环一起形成环，使得两个环稠合在一起。例如，苯并二氧戊环基是由两个取代基在苯基上一起形成的稠合环系统。

这类取代的环状基团也包括其中与氢原子的键被与碳原子的键取代的环和稠合环系统。因此，取代的芳基、杂环基和杂芳基还可以被如在本文中所定义的烷基、烯基、环烷基、芳基、杂芳基和炔基(这些基团本身可以进一步被取代)取代。

式I-R或I-S的连接基团(例如，L1和L2)是可以由通式代表的部分结构，例如-N(R1)-C(O)-，其从左向右读取。因此，-N(R1)-C(O)-连接部分的氮原子可以连接至式I-R或I-S的结构的近端，-N(R1)-C(O)-连接部分的羰基碳原子将连接至式I-R或I-S的结构的远端。

如本文中所用，术语“杂原子”指的是非碳和非氢的原子，其能够与碳形成共价键，且没有其他的限制。典型的杂原子为N、O和S。当指的是硫(S)时，除非特别指明其氧化状态，应该理解的是所述硫可以为已发现的任何氧化状态，因此包括亚砜(R-S(O)-R’)和砜(R-S(O)2-R’)；因此，术语“砜”仅涵盖砜形式的硫；术语“硫醚”仅涵盖硫醚(R-S-R’)形式的硫。当使用如“选自O、NH、NR’和S的杂原子”或“[变量]为O、S...”的词语时，它们应该被理解为包括所有的硫醚、亚砜和砜氧化态的硫。

烃基包括直链和支链的烃基和环烃基，其含有1至约20个碳原子，且通常含有1至12个碳(C1-C12烃基)，或者，在一些实施方案中，含有1至8个碳原子(C1-C8烃基)，或者，在一些实施方案中，含有1至4个碳原子(C1-C4烃基)。就环烃基而言，这类基团含有3-20个碳原子。直链烃基的实例包括，但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基。支链烃基的实例包括，但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基。本文中使用的烃基可任选地包括一个或多个其他取代基。代表性的被取代的烃基可以被上文列出的任何基团(例如，氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代、烃氧基和卤素基团)取代一次或多次。

环烃基为形成环结构的烃基，其可以是被取代的或未被取代的，其中环是完全饱和的、部分不饱和的、或完全不饱和的，其中，如果存在不饱和，环内π-电子的共轭不产生芳香性。环烃基的实例包括，但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在一些实施方案中，环烃基3至8元环，而在其他实施方案中，环碳原子的个数为3至5、3至6或3至7。环烃基还包括多环的环烃基(例如，但不限于降冰片基、金刚烷基、冰片基、莰烯基、异莰烯基和蒈烯基)，和稠环(例如，但不限于萘烷基)等。环烃基也包括被上文定义的直链或支链烃基取代的环。代表性的被取代的环烃基可以被任何上文列出的基团单取代，或取代一次或多次，所述上文列出的基团例如，但不限于氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代、烃氧基和卤素基团。

术语“碳环的”和“碳环”表示其中环原子为碳的环结构。在一些实施方案中，碳环为3至8元环，而在其他实施方案中，环碳原子的个数为4、5、6或7。除非明确表明相反的含义，碳环可以被多达N个(其中N为碳环的大小)例如氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代、烃氧基和卤素基团的取代基取代.

(环烃基)烃基也用环烃基烃基表示，为烃基的氢键或碳键被与上文定义的环烃基的键取代的上文定义的烃基。

烯基包括上文定义的直链、支链和环状的烃基，只是至少有一个存在于两个碳原子之间的双键。因此，烯基含有2至约20个碳原子，且通常含有2至12个碳，或者，在一些实施方案中，含有2至8个碳原子。实例包括，但不限于-CH＝CH2、-CH＝CH(CH3)、-CH＝C(CH3)2、-C(CH3)＝CH2、-C(CH3)＝CH(CH3)、-C(CH2CH3)＝CH2、-CH＝CHCH2CH3、-CH＝CH(CH2)2CH3、-CH＝CH(CH2)3CH3、-CH＝CH(CH2)4CH3、乙烯基、环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁二烯基、戊二烯基和己二烯基等。

术语“环烯基”在单独的或在组合中表示其中环结构内存在至少一个双键的环状烯基。环烯基包括含有至少一个在两个相邻碳原子之间的双键的环烃基。因此，例如，环烯基包括但不限于环己烯基、环戊烯基和环己二烯基，以及例如金刚合金的多环系统和/或桥环系统。

(环烯基)烃基为烃基的氢键或碳键被与上文定义的环烯基的键取代的上文定义的烃基。

炔基包括直链和支链的烃基，只是有至少一个存在于两个碳原子之间的三键。因此，炔基含有2至约20个碳原子，且通常含有2至12个碳，或者，在一些实施方案中，含有2至8个碳原子。实例包括，但不限于–C≡CH、-C≡C(CH3)、-C≡C(CH2CH3)、-CH2C≡CH、-CH2C≡C(CH3)和-CH2C≡C(CH2CH3)等。

芳基为不含杂原子的芳香烃类。因此芳基包括，但不限于苯基、基、庚搭烯基、联苯基、引达省基、芴基、菲基、苯并菲基、芘基、并四苯基、基、亚联苯基、蒽基和萘基。在一些实施方案中，芳基在基团的环部分中含有6-14个碳。短语“芳基”包括含有稠环的基团，例如稠合的芳香-脂肪环系统(例如，茚满基、四氢化萘基等)，并且也包括含有其他基团的被取代的芳基，所述其他基团包括，但不限于与环原子之一结合的烃基、卤素、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代或烃氧基。代表性的被取代的芳基可以是被单取代的，或是被取代多于一次的，例如，但不限于2、3、4、5或6取代的苯基或萘基，其可以被包括但不限于上文列出的那些基团取代。

芳烃基为烷基、烯基或炔基的氢原子被上文定义的芳基取代的上文定义的烷基、烯基或炔基。代表性的芳烃基包括苄基(-CH2苯基)、苯乙基(-CH2CH2苯基)和苯乙烯基(-CH＝CH苯基)，以及例如4-乙基-茚满基的稠合(环烃基芳基)烃基。芳基部分和烷基、烯基、炔基部分或二者任选地被其他基团取代，包括但不限于烃基、卤素、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代或烃氧基。

杂环基或杂环基团包括含有3个或更多个环成员，其中的一个或多个环成员为杂原子(例如，但不限于N、O、S或P)的芳香和非芳香环部分。在一些实施方案中，杂环基包括3至20个环成员，而其他这类基团含有3至15个环成员，例如，包括含有5、6或7个环成员的单环系统。至少一个环含有杂原子，但不必多环系统中的各个环均含有杂原子。例如，二氧杂环戊烷基环系统和苯并二氧杂环戊烷基环系统(亚甲二氧苯基环系统)均为本文含义内的杂环基。命名为C2-杂环基的杂环基可以是含两个碳原子和三个杂原子的5元环，含两个碳原子和四个杂原子的6元环，等等。同样地，C4-杂环基可以是含一个杂原子的5元环，含两个杂原子的6元环，等等。碳原子数加上杂原子数总计等于环原子的总数。

术语“杂环基”包括稠环物种，所述稠环物种包括含有稠合芳香和非芳香基团的那些稠环物种。该术语也包括含有杂原子的多环系统和/或桥环系统，例如，但不限于奎宁环基和7-氮杂二环[2.2.1]庚烷，并且也包括含有取代基的杂环基，所述取代基包括但不限于烃基、卤素、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代或烃氧基，其与环成员中的一个相连。本文定义的杂环基可以是杂芳基或者是部分饱和或完全饱和的含有至少一个环杂原子的环状基团。杂环基包括，但不限于吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻二唑基、噁二唑基、咪唑啉基、六氢嘧啶基、二氮杂环庚烷基、三嗪基、咪唑基、吡咯烷基、呋喃基、四氢呋喃基、四氢-2H-吡喃基、二氧杂环戊烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基、吲哚基、二氢吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、硫代萘基(thianaphthalenyl)、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基。杂环基可以被取代。代表性的被取代的杂环基可以是被单取代的，或是被取代多于一次的，包括但不限于含有至少一个被例如上文列出的那些取代基单、二、三、四、五、六或更多次取代的杂原子的环，所述上文列出的那些取代基包括但不限于烃基、卤素、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代和烃氧基，而且在杂环的同一个碳原子上有两个取代基的情况下，包括氧代(＝O)和硫代(＝S)。

杂芳基为包含5个以上环原子的芳族环部分，其中，至少一个环原子为杂原子，例如，但不限于N、O和S。命名为C2杂芳基的杂芳基可以为具有2个碳原子和3个杂原子的5元环，具有2个碳原子和4个杂原子的6元环等等。同样的，C4-杂芳基可以为具有1个杂原子的5-元环，具有2个杂原子的6-元环等等。碳原子的数目加上杂原子的数目的总和等于环原子的总数。杂芳基基团包括，但不限于，例如，吡咯基、吡唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基(pyrazyl)、吡嗪基(pyrazinyl)、嘧啶基、噻二唑基、咪唑基、噁二唑基、噻吩基(thienyl)、三唑基、四唑基、三嗪基、噻唑基、噻吩基(thiophenyl)、噁唑基、异噁唑基、苯并噻吩基(benzothiophenyl)、苯并呋喃基、吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、硫杂萘基(thianaphthalenyl)、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹噁啉基和喹唑啉基基团。术语“杂芳基”和“杂芳基基团”包括稠合环化合物，例如，其中至少一个环，但不必须所有环，为芳族环，包括四氢喹啉基、四氢异喹啉基、吲哚基和2,3-二氢吲哚基。所述术语还包括含有连接到环原子之一上的其他基团的杂芳基，所述其他基团包括，但不限于，烃基、卤素、氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫代或烃氧基基团。代表性的取代的杂芳基基团可以被例如上面列举的那些基团取代一次或多次。

芳基和杂芳基的其他实例包括，但不限于苯基、联苯基、茚基、萘基(1-萘基、2-萘基)、N-羟基四唑基、N-羟基三唑基、N-羟基咪唑基、蒽基(1-蒽基、2-蒽基、3-蒽基)、噻吩基(2-噻吩基、3-噻吩基)、呋喃基(2-呋喃基、3-呋喃基)、吲哚基、噁二唑基(1,2,4-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基)、噻二唑基(1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基)、异噁唑基、喹唑啉基、芴基、呫吨基、异茚满基(isoindanyl)、二苯甲基、吖啶基、噻唑基、吡咯基(2-吡咯基)、吡唑基(3-吡唑基)、咪唑基(1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、三唑基(1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-2-基、1,2,3-三唑-4-基、1,2，4-三唑-3-基)、噁唑基(2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基)、噻唑基(2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基)、吡嗪基、哒嗪基(3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-哒嗪基)、吡唑并[1,5-α]吡啶基、喹啉基(2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉基、6-喹啉基、7-喹啉基、8-喹啉基)、异喹啉基(1-异喹啉基，3-异喹啉基、4-异喹啉基、5-异喹啉基、6-异喹啉基、7-异喹啉基、8-异喹啉基)、苯并[b]呋喃基(2-苯并[b]呋喃基、3-苯并[b]呋喃基、4-苯并[b]呋喃基、5-苯并[b]呋喃基、6-苯并[b]呋喃基、7-苯并[b]呋喃基)、异苯并呋喃基、2,3-二氢-苯并[b]呋喃基(2-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、3-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、4-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、5-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、6-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、7-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基))、苯并[b]噻吩基(2-苯并[b]噻吩基、3-苯并[b]噻吩基、4-苯并[b]噻吩基、5-苯并[b]噻吩基、6-苯并[b]噻吩基、7-苯并[b]噻吩基)、2,3-二氢-苯并[b]噻吩基(2-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、3-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、4-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、5-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、6-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、7-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基))、吲哚基(1-吲哚基、2-吲哚基、3-吲哚基、4-吲哚基、5-吲哚基、6-吲哚基、7-吲哚基)、吲唑基(1-吲唑基、3-吲唑基、4-吲唑基、5-吲唑基、6-吲唑基、7-吲唑基)、苯并咪唑基(1-苯并咪唑基、2-苯并咪唑基、4-苯并咪唑基、5-苯并咪唑基、6-苯并咪唑基、7-苯并咪唑基、8-苯并咪唑基)、苯并噁唑基(1-苯并噁唑基、2-苯并噁唑基)、苯并噻唑基(1-苯并噻唑基、2-苯并噻唑基、4-苯并噻唑基、5-苯并噻唑基、6-苯并噻唑基、7-苯并噻唑基)、苯并[d]异噁唑基、咔唑基(1-咔唑基、2-咔唑基、3-咔唑基、4-咔唑基)、5H-二苯并[b,f]氮杂基(5H-二苯并[b,f]氮杂-1-基、5H-二苯并[b,f]氮杂-2-基、5H-二苯并[b,f]氮杂-3-基、5H-二苯并[b,f]氮杂-4-基、5H-二苯并[b,f]氮杂-5-基)、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂(10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂-1-基、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂-2-基、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂-3-基、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂-4-基、10,11-二氢-5H-二苯并[b,f]氮杂-5-基)等。

杂环基烃基基团为其中烷基、烯基或炔基的氢或碳键被与如上所定义的杂环基的键取代的如上所定义的烷基、烯基或炔基。代表性的杂环基烃基包括，但不限于呋喃-2-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-2-基甲基(α-皮考基)、吡啶-3-基甲基(β-皮考基)、吡啶-4-基甲基(γ-皮考基)、四氢呋喃-2-基乙基和吲哚-2-基丙基。杂环基烃基基团可以在杂环基部分、烷基部分、烯基或炔基或者两者上被取代。

杂芳基烃基为其中烷基、烯基或炔基上的氢或碳键被与如上所定义的杂芳基的键取代的如上所定义的烷基、烯基或炔基。杂芳基烃基、烯基或炔基基团可以在杂芳基部分、烷基部分或者两者上被取代。

如在本文中使用的术语“环系统”表示包含1个、2个、3个或更多个环的部分，其可以被非环基团或被其他环系统或者被两者取代，其可以为完全饱和的、部分不饱和的、完全不饱和的或芳族的，且当所述环系统包含多于单一环的环系统时，所述环可以为稠合的、桥接的或螺环的。如在本领域内所公知的，“螺环的”表示其中两个环在单一的四面体碳原子(tetrahedral carbon atom)上稠合的一类结构。

如本文中所用，术语“单环、双环或多环的芳香或部分芳香环”指的是包括具有4n+2个π电子的不饱和环或者其部分还原的(氢化的)形式的环系统。所述芳香或部分芳香的环可以包括额外的本身不为芳族的或部分芳族的稠合环、桥接环或螺环。例如，萘和四氢萘都为本文所称的“单环、双环或多环的芳香环或部分芳香环”。此外，例如，苯并-[2.2.2]-双环辛烷也是本文所称的“单环、双环或多环的芳香环或部分芳香环”，包含与桥连的双环系统稠合的苯环。完全饱和的环其中没有双键，并且根据本文所称的杂环子的存在与否而为碳环或杂环的。

当宣称两个“R”基团连接在一起或一起形成环时，意味着它们可以与它们所连接的碳原子或非碳原子(例如，氮原子)一起形成环。通常，它们互相连接以形成3元至7元环，或5元至7元环。非限制性具体实例为环戊基、环己基、环庚基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吡咯基、吡啶基。

如上所定义的，术语“烃氧基”指的是连接到烃基基团(包括环烃基)上的氧原子。直链烃氧基的实例包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、正戊氧基、正己氧基、正庚氧基、正辛氧基、正壬氧基等。支链烃氧基的实例包括，但不限于，异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戍氧基、异己氧基等。环烃氧基的实例包括，但不限于，环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。

术语“芳氧基”和“芳基烃氧基”分别指的是连接到氧原子上的芳基和在烃基部分连接到氧原子上的芳烃基。其实例包括但不限于苯氧基、萘氧基和苄氧基。

如在本文中所使用的术语“酰基”指的是包含羰基部分的基团，其中该基团通过羰基碳原子键合。所述羰基碳原子也连接到另一碳原子，其可以为烃基、芳基、芳烃基、环烃基、环烃基烃基、杂环基、杂环烃基、杂芳基、杂芳基烃基基团等的一部分。在其中所述羰基碳原子连接到氢上的特定情况中，该基团为“甲酰基”，其为如在本文中所定义的术语的酰基。酰基可以包括连接到羰基基团上的0至约12-20个额外的碳原子。本文所称的酰基可以包含双键或三键。丙烯酰基为酰基的实例。本文所称的酰基也可以包含杂原子。烟酰基(吡啶基-3-羰基)基团为本文所称的酰基的实例。其他的实例包括乙酰基、苯甲酰基、苯乙酰基、吡啶乙酰基、肉桂酰基和丙烯酰基等。当包含连接到羰基碳原子上的碳原子的基团包含卤素时，该基团称作“卤代酰基”基团。实例为三氟乙酰基。

术语“胺”包括具有，例如式N(基团)3的伯胺、仲胺和叔胺，其中各个基团可以独立地为H或非H，例如烃基、芳基等。胺包括但不限于R-NH2，例如，烃基胺、芳基胺、烃基芳基胺；独立地选择各个R的R2NH，例如二烃基胺、二芳基胺、芳烃基胺、杂环基胺等；以及独立地选择各个R的R3N，例如三烃基胺、二烃基芳基胺、烃基二芳基胺、三芳基胺等。术语“胺”也包括本文中使用的铵离子。

“氨基”是-NH2、-NHR、-NR2、-NR3⁺形式的取代基(其中各R独立地选择)和其各质子化的形式。因此，被氨基取代的任何化合物可以视为胺。

“铵”离子包括未取代的铵离子NH4⁺，但是除非另外指出，其还包括胺的任何质子化的或季铵化的形式。因此，三甲基胺盐酸盐和四甲基氯化铵同时为本文所称的铵离子和胺。

术语“酰胺”(或“酰氨基”)分别包括C-和N-酰胺基团，即-C(O)NR2和-NRC(O)R基团。因此，其酰胺基包括，但不限于，氨基甲酰基(-C(O)NH2)和甲酰胺基团(-NHC(O)H)。“酰胺(甲酰氨基)”基团为式C(O)NR2的基团，其中，R可以为H、烃基、芳基等。

术语“羰基”指-C(O)-基团。

“卤代”、“卤素”和“卤化物”包括氟、氯、溴和碘。

术语“全卤代烃基”是指其中所有氢原子被卤素原子替换的烃基基团。全卤代烃基包括，但不限于，-CF3和-C(CF3)3。术语“卤代烃基”是指其中一些但不需要全部氢原子被卤素原子替换的烃基。卤代烃基基团包括，但不限于，-CHF2和-CH2F。

术语“全卤代烃氧基”指所有氢原子被卤素原子取代的烃氧基。全卤代烃氧基包括，但不限于-OCF3和–OC(CF3)3。术语“卤代烃氧基”指一些氢原子被卤素原子取代但不一定所有氢原子被卤素原子取代的烃氧基。卤代烃氧基包括但不限于–OCHF2和–OCH2F。

在本文中使用的术语“包含”、“包括”、“具有”和“含有(composed of)”为开放式术语，并且不排除额外的成分或组分的存在。在所称的成分中，使用“包含”、“包括”、“具有”或“含有”表示不管包含、具有、包括或含有什么成分，其并不必定是包括该词的句子的主题涵盖的唯一成分。

正如本领域所公知的，“盐”包括有机化合物，例如，以离子形式与抗衡离子组合的羧酸、磺酸或胺。例如，其阴离子形式的酸可以与阳离子例如，金属阳离子，如钠、钾等；与铵盐，如NH4⁺或各种胺的阳离子，包括四烃基铵盐如四甲基铵；或其他阳离子，如三甲基硫等形成盐。“药学上可接受的”或“药理学上可接受的”盐是由已经批准用于人类消费的并且通常是无毒的离子形成的盐，例如，氯盐或钠盐。“两性离子”为内盐，例如可以在具有至少两个可离子化的基团(一个形成阴离子，而另一个形成阳离子，其用于彼此平衡)的分子内形成的内盐。例如，氨基酸(如甘氨酸)可以以两性离子形式存在。“两性离子”属于本文所称的盐。本发明的化合物可以采取盐的形式。术语“盐”包括作为本发明的化合物的游离酸或游离碱的加成盐。盐可以为“药学上可接受的盐”。术语“药学上可接受的盐”指的是提供药物应用的效用范围内毒性特性的盐。但是，药学上不可接受的盐可以具有例如高结晶度的性能，其在本发明的实施中是有效用的，例如，如在本发明的化合物的合成、纯化或配制过程中的效用。

合适的药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。无机酸的实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳族、芳脂族(araliphatic)、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，其实例包括，甲酸、乙酸、丙酸、丁二酸、羟基乙酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天门冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、亚甲基双羟萘酸(扑酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、三氟甲磺酸、2-羟基乙磺酸、对甲苯磺酸、磺胺酸、环己基氨基磺酸、硬脂酸、海藻酸、β-羟基丁酸、水杨酸、半乳糖二酸和半乳糖醛酸。药学上不可接受的酸加成盐的实例包括，例如，高氯酸盐和四氟硼酸盐。

本发明化合物合适的药学上可接受的碱加成盐包括，例如，金属盐，包括碱金属盐、碱土金属盐和过渡金属盐，例如，如钙盐、镁盐、钾盐、钠盐和锌盐。药学上可接受的碱加成盐还包括由碱性胺制备的有机盐，例如，如N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺(N-甲基葡萄糖胺)和普鲁卡因。药学上不可接受的碱加成盐的实例包括锂盐和氰酸盐。尽管药学上不可接受的盐通常不用作药物，这样的盐可以用作，例如，式I化合物合成过程中的中间体，例如，在其通过重结晶的纯化过程中。所有这些盐可以通过使例如，合适的酸或碱与式I的化合物反应而以常规的方式由式I的相应化合物制备。术语“药学上可接受的盐”指的是无毒的无机或有机酸和/或碱加成盐，参见例如Lit等人，SaltSelection for Basic Drugs(1986),Int J.Pharm.,33,201-217，其通过引用的方式并入至本文中。

“水合物”是以与水分子的组合物存在的化合物。该组合物可以包括化学计量的量的水，例如单水合物或二水合物，或者可以包括任意量的水。在本文中使用的术语“水合物”指的是固体形式，即，在水溶液中的化合物虽然可以为水合的，但是其不是如在本文中使用的术语的水合物。

“溶剂化物”为类似的组合物，除了使用水以外的溶剂代替水。例如，甲醇或乙醇可以形成“醇化物”，其也可以为化学计量或非化学计量的。在本文中使用的术语“溶剂化物”指的是固体形式，即，在溶剂的溶液中的化合物虽然为溶剂化的，但是它不是如在本文中使用的术语的溶剂化物。

如本领域所公知的，“前药”是可以给予患者的物质，其中该物质在体内通过在患者体内的生物化学物质(例如，酶)的作用转化为活性的药物成分。前药的实例包括羧酸基团的酯，其可以通过内源的酯酶(如在人类和其他哺乳动物的血液中发现的)被水解。

“同位素”是本领域公知的，是指具有相同数量质子但具有不同数量中子的原子。例如，碳12，碳的最普遍的形式，具有6个质子和6个中子，而碳14具有6个质子和8个中子。

此外，本发明的特征和方面是通过马库什基团的形式描述的，本领域的普通技术人员将认识到，本发明也因此是以通过马库什基团的任意单个成员或成员的亚组来描述的。例如，如果X被描述成选自溴、氯和碘，则完全描述了X为溴和X为溴和氯的权利要求。此外，在本发明的特征和方面通过马库什基团的形式描述的情况下，本领域的普通的技术人员将认识到，本发明也因此是通过马库什基团的任意单个成员的组合或成员的亚组来描述的。因此，例如，如果X被描述成选自溴、氯和碘和Y被描述成选自甲基、乙基和丙基，则完全描述了X为溴和Y为甲基的权利要求。

本发明的GLP-1化合物、其药物可接受的盐或可水解的酯可以与药物可接受的载体结合，以提供适用于治疗本文指出的哺乳类物种(更优选人类)中的生物病况或病症的药物组合物。在这些药物组合物中使用的具体载体可以根据需要的施用类型(例如，静脉内的、口服的、局部的、栓剂的或胃肠外的施用类型)而变化。

在口服液剂型(例如，混悬剂、酏剂和溶液剂)的组合物的制备中，可以使用典型的药物介质，例如水、二醇类、油类、醇类、调味剂、防腐剂、着色剂等。类似地，当制备口服固体剂型(例如，粉剂、片剂和胶囊剂)时，可以使用例如淀粉、糖类、稀释剂、制粒剂、润滑剂、粘结剂、崩解剂等的载体。

本发明实施方案的另一方面提供本发明化合物的组合物，所述本发明化合物单独存在，或与另一GLP-1激动剂结合，或者与另一种治疗剂或第二药物结合，或者与GLP-1激动剂和另一种治疗剂或第二药物结合。GLP-1受体激动剂的非限定性实例包括艾塞那肽、利拉鲁肽、他司鲁肽、阿必鲁肽、利西拉肽和其混合物。

在一个实施方案中，GLP-1激动剂为艾塞那肽或Byetta例如，在第5,424,286号；第6,902,744号；第7,297,761号等美国专利中描述了艾塞那肽，其各自的内容通过引用整体并入本文。

在一个实施方案中，GLP-1激动剂为利拉鲁肽(又称为NN-2211和[Arg34,Lys26]-(N-ε-(γ-Glu(N-α-十六酰基))-GLP-1(7-37))，包括序列HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWKVRGRG且可从Novo Nordisk(丹麦)或Scios(费利蒙，加利福尼亚州，美国)购得。参见，例如，Elbrond等人,2002,Diabetes Care.八月；25(8):1398404；Agerso等人,2002,Diabetologia.二月；45(2):195-202)。

在一个实施方案中，GLP-1激动剂为他司鲁肽(CAS登录号275371-94-3)，并且可以从Hoffman La-Roche购得。参见，例如，第7,368,427号美国专利，其内容通过引用整体并入本文。

在一个实施方案中，GLP-1激动剂为阿必鲁肽(得自GlaxoSmithKline)。

在另一实施方案中，GLP-1激动剂为利西拉肽(得自Sanofi-Aventis/Zealand Pharma)。

第二药物的非限定性实例如上文所公开。在多种这类实施方案中，第二药物为艾塞那肽、利拉鲁肽、他司鲁肽、阿必鲁肽、利西拉肽或其他胰岛素调节肽。在多种这类实施方案中，第二药物为DPPIV抑制剂。在多种这类实施方案中，第二药物在医学上表明可用于治疗II型糖尿病。在多种这类实施方案中，第二药物为双胍、磺酰脲类、美格列奈(meglitinide)、噻唑烷二酮、α-葡萄糖苷酶抑制剂、胆汁酸螯合剂和/或多巴胺-2激动剂。

在另一实施方案中，第二药物为二甲双胍。

在另一实施方案中，第二药物为西格列汀。

如在本文中所述，本发明的化合物包括立体异构体、互变异构体、溶剂化物、水合物、盐(包括药学上可接受的盐)及其混合物。包含本发明的化合物的组合物可以通过常规的技术制备，例如，如在如下文献中所述：Remington，The Science and Practice of Pharmacy,19th Ed.,1995，其以引用的方式并入本文。该组合物可以以常规的形式呈现，例如，胶囊、片剂、气雾剂、溶液、悬浮液或局部应用形式。

典型的组合物包括本发明的化合物和药学上可接受的赋形剂，该赋形剂可以为载体或稀释剂。例如，活性化合物通常与载体混合，或者被载体稀释，或者被封装在载体(其可以为安瓿、胶囊、扁囊、纸或其他包装物)中。当活性化合物与载体混合时，或者当载体起到稀释剂的作用时，其可以为作为活性化合物的媒介、赋形剂或介质的固态、半固态或液态物质。活性化合物可以被吸附到粒状的固态载体上，例如，包含在扁囊中。合适的载体的一些实例为水、盐溶液、醇、聚乙二醇、多羟基乙氧基化的蓖麻油、花生油、橄榄油、明胶、乳糖、石膏粉、蔗糖、糊精、碳酸镁、糖、环糊精、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、白明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸或纤维素的低级烷基醚、硅酸、脂肪酸、脂肪酸胺(fatty acid amine)、脂肪酸单甘油酯、脂肪酸二甘油酯、脂肪酸季戊四醇酯、聚氧化乙烯、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。类似地，载体或稀释剂可以包括本领域中已知的任何缓释材料，例如，单独的或与蜡混合的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

制剂可以与不会不利地与活性化合物反应的助剂混合。这样的添加剂可以包括润湿剂、乳化剂和悬浮剂、影响渗透压的盐、缓冲剂和/或着色物质、防腐剂、甜味剂或调味剂。如果需要，所述组合物还可以进行灭菌。

给药的途径可以为有效地将本发明活性化合物输送到适当的或所需的作用位点的任何途径，例如，经口、经鼻、肺部、口含、皮下、皮内、经皮或肠胃外，如直肠、长效药(depot)、皮下、静脉内、尿道内、肌内、鼻内、眼用溶液或软膏，优选经口途径。

至于肠胃外给药，载体通常包括无菌水，尽管也可以包含助溶的或起到防腐剂作用的其他成分。此外，还可以制备可注射的悬浮液，在该情况下，可以采用合适的液体载体、悬浮剂等。

至于局部给药，可以使用温和的、保湿的基质(例如软膏或乳膏)配制本发明的化合物。

如果固态载体被用于经口给药，制剂可以被制成片状，以粉末形或小药丸形式置入硬明胶胶囊中，或者其可以为锭剂或糖锭剂的形式。如果使用液态载体，制剂可以为糖浆、乳液、软明胶胶囊或无菌注射液(例如，水性或非水性液体悬浮液或溶液)的形式。

可注射剂型一般包括水性悬浮液或油悬浮液，其可以使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂制备。可注射剂型可以为使用溶剂或稀释剂制备的溶液相或悬浮液的形式。可接受的溶剂或媒介包括无菌水、林格氏液或等渗的盐水溶液。或者，可以使用无菌油作为溶剂或悬浮剂。优选地，油或脂肪酸为非挥发性的，包括天然的或合成的油、脂肪酸、单-、双-或三-甘油酯。

对于注射剂，制剂还可以为适合用如上所述的适当溶液重构的粉末。它们的实例包括，但不限于，冷冻干燥的、旋转干燥的或喷雾干燥的粉末、无定形粉末、颗粒、沉淀物或微粒物。对于注射剂，制剂可以任选地包含稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、生物利用率调节剂及其组合。这些化合物可以被配制用于通过注射(例如通过快速推注或连续输注)的肠胃外给药。用于注射的单元剂型可以在安瓿瓶中或在多剂量容器中。

通过利用本领域公知的方法可以将本发明的制剂设计成在给予患者后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。因此，所述制剂还可以配制成用于受控的释放或用于缓慢释放。

本发明包括的组合物可以包括，例如，胶束或脂质体，或者某些其他包封形式，或者可以以延长释放的剂型给药以提供长期储存和/或递送效果。因此，所述制剂可以被压制成小粒或圆柱，并作为长效注射剂(depot injection)肌肉内或皮下植入。这样的植入物可以采用已知的惰性材料如聚硅酮和生物可降解的聚合物，例如，聚丙交酯-聚乙交酯。其他生物可降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。

对于经鼻给药，制剂可以包含本发明的化合物，其溶解或悬浮在液体载体(优选水性载体)中用于气溶胶应用。载体可以包含添加剂，例如增溶剂如丙二醇、表面活性剂、吸收促进剂如卵磷脂(磷脂酰胆碱)或环糊精或防腐剂如对羟基苯甲酸酯类。

对于肠胃外应用，特别适合的是注射溶液或悬浮液，优选具有溶解在多羟基化蓖麻油中的活性化合物的水性溶液。

剂型可以为每日给药或一日多次(例如每天两次或三次)给药。或者，如果是处方医师给出的建议，剂型可以为少于每天一次的更低频率给药，例如，每两天一次，或每周一次。

本发明的实施方案还包括本发明化合物的前药，其在给药后通过代谢或其他生理过程经历化学转化，然后变为药理活性物质。通过代谢或其他生理过程的转化包括，但不限于，通过酶学(例如，特定的酶催化)和非酶学的(例如，一般或特定的酸或碱诱导的)化学转化将前药转化为药理活性物质。一般而言，这样的前药为本发明的化合物的功能性衍生物，其在体内容易地转化为本发明的化合物。选择和制备合适的前药衍生物的常规方法记载在如下文献中：例如，Design of Prodrugs(前药的设计)，ed.H.Bundgaard,Elsevier,1985。

在另一实施方案中，提供了制备本文所述的化合物的组合物的方法，包括将本发明的化合物与药学上可接受的载体或稀释剂一起配制。在某些实施方案中，药学上可接受的载体或稀释剂适合于经口给药。在某些实施方案中，所述方法还可以包括将所述组合物配制成片剂或胶囊的步骤。在其他实施方案中，所述药学上可接受的载体或稀释剂适合于肠胃外给药。在某些实施方案中，所述方法进一步包括将所述组合物冻干以形成冻干制剂的步骤。

本发明的化合物在治疗上可以结合i)一种或多种其他GLP-1调节剂和/或ii)一种或多种其他类型的治疗剂或第二药物使用，所述其他GLP-1调节剂和其他类型的治疗剂或第二药物可以以相同的剂型口服施用、以不同的口服剂型(例如，连续地或不连续地)施用、或通过一同注射或分别注射(例如，连续地或不连续地)施用。组合治疗剂的实例包括二甲双胍、西格列汀(MK-0431，Januvia)—一种二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂类的口服抗高血糖药(抗糖尿病药)以及艾塞那肽(Byetta)—一种肠促胰岛素拟似物。在其他实施方案中，第二药物为例如二甲双胍的双胍；例如格列本脲、格列吡嗪、格列齐特和格列美脲的磺酰脲类；例如瑞格列奈和那格列奈的美格列奈(meglitinide)；例如吡格列酮和罗格列酮的噻唑烷二酮；例如阿卡波糖和米格列醇的α-葡萄糖苷酶抑制剂；例如考来维仑的胆汁酸螯合剂；和/或例如溴隐亭的多巴胺-2激动剂。

本发明的组合包括来自i)和ii)的化合物在单一制剂中的混合物，以及作为不同制剂的来自i)和ii)的化合物。本发明的一些组合可以作为分离的制剂包装在试剂盒中。在某些实施方案中，将(b)中的两种或多种化合物一起配制，而本发明的化合物单独地配制。

在合适的情况下,可以如最新版本的Physicians’Desk Reference(医生用药指南)所述那样使用其他药物的剂量和制剂，该文献以引用的方式并入本文。

在某些实施方案中，本发明包括与以激动剂或以激活剂或增强剂的形式高亲和力和高特异性地结合GLP-1受体的化合物。在某些实施方案中，本发明的化合物作为GLP-1受体的正向别构调节剂起作用。

在某些实施方案中，本发明提供了使用本发明的化合物激活、增强或激动(即，具有激动效果以起到激动剂的作用)GLP-1受体的方法。所述方法包括使受体与合适浓度的本发明化合物接触，以引起受体的激活。所述接触可以发生在体外，例如，在分析实验中进行以测定本发明化合物的GLP-1受体激活活性，从而完成提交注册申请相关的实验。

在某些实施方案中，激活GLP-1受体的方法也可以在体内实施，即，在哺乳动物例如人类患者或测试动物的活体内。本发明的化合物可以通过如上所述的途径之一(例如经口服)提供给活生物体，或者可以局部地在身体组织中提供。在本发明化合物的存在下，发生受体的激活，并因此可以研究其效应。

本发明的实施方案提供治疗医学上需要GLP-1受体的激活的患者的恶性病况的方法，其中，按照对患者产生有益作用的剂量、频率和持续时间来对该患者施用发明化合物。可以通过任何适合的方式来施用发明化合物，适合的方式的实例于上文中描述。

在某些实施方案中，本发明涉及适用于作为B类GPCR的调节剂或增强剂起作用的化合物。这些化合物可以单独地或在受体配体的存在下具有活性。受体包括肠降血糖素，包括GLP-1(7-36)和GLP-1(9-36)。

由本发明提供的治疗方法包括对患有医学上需要胰高血糖素样肽1受体的激活、增强或激动的恶性病况的对象或患者单独施用本发明的化合物，或结合另一药理学活性试剂或第二药物施用本发明的化合物，所述恶性病况例如I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠期糖尿病、肥胖症、食欲过盛、饱腹感不足或代谢紊乱。

制备化合物的一般合成方法

本发明实施方案的分子的实施方式可以使用本领域技术人员已知的标准合成技术来合成。本发明的化合物可以使用方案1-37中所述的一般合成步骤来合成。

方案1：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)如果Z＝CO，则与酰氯偶联成酰胺：DIEA、DCM，或者与酸偶联成酰胺：EDC、HOBt、DMF或HATU、DMF；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或NEt3、DCM或DMF；(ii)PG1的脱保护，例如，甲酯脱保护：LiOH、二氧六环、水。

可以使用方案1以类似的方式制备其他对映异构体。

方案2：

试剂：(i)Zn(CN)2、Pd(PPh3)4、NMP；(ii)NH2OH、HCl、TEA、EtOH。

方案3：

试剂：PG为保护基；(i)EDC、HOBt、DMF，然后加热；(ii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案3以类似的方式制备其他对映异构体。

方案4：

试剂：PG为保护基；(i)NH2OH、TEA、水或EtOH；(ii)EDC、HOBt、DMF，然后加热；(iii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案4以类似的方式制备其他对映异构体。

方案5：

试剂：X1＝O或S；(i)N-甲基吗啉、氯甲酸异丁酯、THF、DMF；(ii)X1＝氧时，则2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑啉、TEA、DCM；X1＝硫时，则2,4-双(4-甲氧苯基)-1,3,2,4-二硫二磷杂环丁烷-2,4-二硫化物、THF；(iii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案5以类似的方式制备其他对映异构体。

方案6：

试剂：PG为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Z＝CO时，则与酰氯偶联成酰胺：DIEA、DCM，或者与酸偶联成酰胺：EDC、HOBt、DMF或HATU、DMF；Z＝SO2时，则与磺酰氯偶联：DIEA或NEt3、DCM或DMF；(ii)DIEA、1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺、DCM；(iii)KOAc、双-频那醇硼烷、PdCl2(dppf)或Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iv)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(v)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(vi)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案6以类似的方式制备其他对映异构体。

方案7：

试剂：PG为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案7以类似的方式制备其他对映异构体。

方案8：

试剂：PG为保护基；(i)DIEA或TEA、乙腈；(ii)乙酰胺、三氯化硼乙醚、DCM；(iii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案8以类似的方式制备其他对映异构体。

方案9：

试剂：PG为保护基；(i)三氯化硼乙醚、乙酰胺、DCM；(ii)Zn、I2、Pd2(dba)3、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦、DMF；(iii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案9以类似的方式制备其他对映异构体。

方案10：

试剂：PG为保护基；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案10以类似的方式制备其他对映异构体。

方案11：

试剂：PG为保护基；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案11以类似的方式制备其他对映异构体。

方案12：

试剂：PG、PG2和PG3为保护基；(i)Zn、I2、Pd2(dba)3、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦、DMF；(ii)PG2(例如，碳酸叔丁酯)的脱保护，和PG3(例如，SEM)的脱保护：DCM、TFA；(iii)如果Z＝CO，则与酸偶联：碱(DIEA、TEA或NMM)、偶联试剂(EDC、HOBt或DCC、HOBt，或DCC、DMAP或HATU)、溶剂(DMF或DCM)；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或TEA、DCM或DMF；(iv)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案12以类似的方式制备其他对映异构体。

方案13：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)2,4-双(4-苯氧基苯基)-1,3,2,4-二硫二磷杂环丁烷-2,4-二硫化物、DME、THF；(ii)异丙醇；(iii)Zn、I2、Pd2(dba)3、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦、DMF；(iv)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(v)如果Z＝CO，则与酸偶联：碱(DIEA、TEA或NMM)、偶联试剂(EDC、HOBt或DCC、HOBt，或DCC、DMAP或HATU)、溶剂(DMF或DCM)；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或TEA、DCM或DMF；(vi)PG1的脱保护，例如，甲酯脱保护：NaOH、MeOH、水。

可以使用方案13以类似的方式制备其他对映异构体。

方案14：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)Zn、I2、Pd2(dba)3、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦、DMF；(ii)PG2的脱保护，例如，碳酸叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(iii)如果Z＝CO，则与酸偶联：碱(DIEA、TEA或NMM)、偶联试剂(EDC、HOBt或DCC、HOBt，或DCC、DMAP或HATU)、溶剂(DMF或DCM)；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或TEA、DCM或DMF；(iv)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

使用方案14以类似的方式制备其他对映异构体。

方案15：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)1,1,3,3-四甲基胍、THF；(ii)H2、二氧六环；(iii)PG1的脱保护，例如，boc-胺脱保护：DCM、TFA；(iv)如果Z＝CO，则与酸偶联：碱(DIEA、TEA或NMM)、偶联试剂(EDC、HOBt或DCC、HOBt，或DCC、DMAP或HATU)、溶剂(DMF或DCM)；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或TEA、DCM或DMF；(v)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

方案16：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)1,1,3,3-四甲基胍、THF；(ii)H2、二氧六环；(iii)PG1的脱保护，例如，boc-胺脱保护：DCM、TFA；(iv)如果Z＝CO，则与酸偶联：碱(DIEA、TEA，或NMM)、偶联试剂(EDC、HOBt或DCC、HOBt，或DCC、DMAP或HATU)、溶剂(DMF或DCM)；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或TEA、DCM或DMF；(v)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

方案17：

试剂：PG为保护基；(i)3-溴-5-氯-1,2,4-噻二唑、NaHCO3、Pd(dppf)Cl2、水和THF、ACN或二氧六环；(ii)NaHCO3、Pd(dppf)Cl2、水和THF、ACN或二氧六环；(iii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案17以类似的方式制备其他对映异构体。

方案18：

试剂：PG为保护基；(i)NaO^tBu或Cs2CO3、Pd(dppf)Cl2或Pd2(dba)3、2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯、水和THF、ACN或二氧六环；(ii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案18以类似的方式制备其他对映异构体。

方案19：

试剂：PG为保护基；(i)NaO^tBu或Cs2CO3、Pd(dppf)Cl2或Pd2(dba)3、2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯、水和THF、ACN或二氧六环；(ii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案19以类似的方式制备其他对映异构体。

方案20：

试剂：PG为保护基；(i)(a)当R2为NH-(CRaRb)m-COOH时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(b)当R2为NH-SO2-R8时：R8SO2NH2、DCC、DMAP、DCM；(c)当R2为NR41R42时：HNR41R42、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(d)当R2为N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)-杂环基时：HN(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)-杂环基、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(e)当R2为–N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)(R7)时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA，然后HN(R1)(R7)、HATU、DMAP、DCM；(f)当R2为N(R1)-(CRaRb)m-杂环基时：HN(R1)-(CRaRb)m-杂环基、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案20以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

方案21：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)DIEA、1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺、DCM；(ii)KOAc、双-频那醇硼烷、PdCl2(dppf)；(iii)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iv)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(v)PG2(例如，CBZ)的脱保护：Pd/C、H2、EA；(vi)如果Z＝CO，则与酰氯偶联成酰胺：DIEA、DCM，或者与酸偶联成酰胺：EDC、HOBt、DMF或HATU、DMF；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或NEt3、DCM或DMF；(vii)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案21以类似的方式制备其他对映异构体。

方案22：

试剂：PG为保护基；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案22以类似的方式制备其他对映异构体。

方案23：

试剂：PG为保护基；(i)Zn(CN)2、Pd(Ph3)4、NMP；(ii)羟胺、NEt3、EtOH；(iii)EDC、HOBt、DMF，然后加热；(iv)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案23以类似的方式制备其他对映异构体。

方案24：

试剂：PG为保护基；(i)NH4Cl、NaN3、DMF；(ii)CsCO3或K2CO3、DMF、丙酮或乙腈；(iii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案24以类似的方式制备其他对映异构体。

方案25：

试剂：PG为保护基；(i)叔丁醇钠、Pd2(dba)3、二氧六环；(ii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案25以类似的方式制备其他对映异构体。

方案26：

试剂：PG为保护基；(i)NaO^tBu或Cs2CO3、Pd2(dppf)Cl2或Pd2(dba)3、2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯、水和THF、ACN或二氧六环；(ii)Pd/C、H2、EtOH；(iii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案26以类似的方式制备其他对映异构体。

方案27：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)HATU、DMF、DIEA；(ii)PG2的脱保护，例如苄酯脱保护：Pd/C、H2、MeOH；(iii)HNR41R42、HATU、DMF；(iv)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：二氧六环、HCl或DCM、TFA。

可以使用方案27以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

方案28：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(ii)HATU、DIEA、DMF。

使用方案28以类似的方式制备其他对映异构体。

方案29：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)Br-(CRaRb)m-R7、K2CO3、DMF；(iii)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案29以类似的方式制备其他对映异构体。

方案30：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、乙腈、水；(ii)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案30以类似的方式制备其他对映异构体。

方案31：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Pd2(dba)3、2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯、NaOtBu、二氧六环；(ii)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案31以类似的方式制备其他对映异构体。

方案32：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)甲酸锂、DIEA、Ac2O、DMF，然后PdCl2(dppf)；(ii)HOBt、EDC、DMF、EtOH；(iii)PG2的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案32以类似的方式制备其他对映异构体。

方案33：

试剂：PG为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Br-(CRaRb)m-R7、K2CO3、DMF；(ii)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iii)PG的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(iv)(a)当R2为NH-(CRaRb)m-COOH时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(b)当R2为NR41R42时：HNR41R42、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案33以类似的方式制备其他对映异构体。

方案34：

试剂：PG1、PG2和PG3为保护基；(i)DIEA、1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺、DCM；(ii)KOAc、双-频那醇硼烷、PdCl2(dppf)；(iii)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iv)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(v)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(vi)(i)(a)当R2为NH-(CRaRb)m-COOH时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(b)当R2为NH-SO2-R8时：R8SO2NH2、DCC、DMAP、DCM；(c)当R2为NR41R42时：HNR41R42、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(d)当R2为N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)-杂环基时：HN(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)-杂环基、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(e)当R2为–N(R1)-(CRaRb)m-CO-N(R1)(R7)时：NH2-(CRaRb)m-COOPG3、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA，然后HN(R1)(R7)、HATU、DMAP、DCM；(f)当R2为N(R1)-杂环基时：HN(R1)-杂环基、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。(vii)PG2(例如CBZ)的脱保护：Pd/C、H2、EA；(viii)如果Z＝CO，则与酰氯偶联成酰胺：DIEA、DCM，或者与酸偶联成酰胺：EDC、HOBt、DMF或HATU、DMF；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或NEt3、DCM或DMF；(ix)PG3的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案34以类似的方式制备其他对映异构体。

方案35：

试剂：PG1和PG2为保护基；(i)HATU、DMF、DIEA；(ii)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：二氧六环、HCl或DCM、TFA；(iii)HNR41R42、HATU、DMF；(iv)PG2的脱保护，例如，苄酯脱保护：Pd/C、H2、MeOH。

可以使用方案35以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

方案36：

试剂：PG为保护基；(i)(a)当R2为NH-(CRaRb)m-COOH时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(b)当R2为NH2-杂环基、NH-SO2-R8时：R8SO2NH2、DCC或EDC、DMAP、DCM；(c)当R2为NR41R42时：HNR41R42、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案36以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

方案37：

试剂：PG为保护基；(i)(a)当R2为NH-(CRaRb)m-COOH时：NH2-(CRaRb)m-COOPG、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA；(b)当R2为NH-SO2-R8时：R8SO2NH2、DCC、DMAP、DCM；(c)当R2为NR41R42时：HNR41R42、HATU、DMF，然后脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案37以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

方案38：

试剂：PG1和PG2为保护基且XA和XB为CR4或N；(i)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(ii)Pd(dppf)Cl2、Na2CO3、THF、ACN、水；(iii)PG2(例如CBZ)的脱保护：Pd/C、H2、EA；(iv)如果Z＝CO，则与酰氯偶联成酰胺：DIEA、DCM，或者与酸偶联成酰胺：EDC、HOBt、DMF或HATU、DMF；如果Z＝SO2，则与磺酰氯偶联：DIEA或NEt3、DCM或DMF；(v)PG1的脱保护，例如，叔丁酯脱保护：DCM、TFA。

可以使用方案38以类似的方式制备其他对映异构体。

方案39：

试剂：(i)HATU、DMF；(ii)水合肼、THF、EtOH；(iii)硫羰基二甲基咪唑、DIEA、THF。

可以使用方案39以类似的方式制备其他对映异构体和非对映异构体。

实施例

通过以下实施例进一步说明本发明。下文的实施例是非限定性的，仅代表本发明的各个方面。

一般方法

NMR谱

¹H NMR(400MHz)和¹³C NMR(100MHz)于氘代氯仿(CDCl3)或二甲基亚砜(d6–DMSO)的溶液中获得。使用MestReNova6.0.3-5604来处理NMR谱。

LCMS数据

使用6种系统中的一种来获得质谱(LCMS)。系统1a：装配有Thompson ODS-A,100A,5μ(50X 4.6mm)柱的Agilent 1100/6110HPLC系统，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B，含5mM乙酸铵的水作为流动相C，以及含5mM乙酸铵的乙腈作为流动相D，流动相流速为1mL/min。方法1：20-100％的流动相B(80-0％的A)流经2.5min，然后保持在100％的B流经2.5min。方法2：5％的流动相B(95％的A)流经1min，5-95％的B流经9min，然后保持在95％的B流经5min。方法3：20-100％的流动相B(80-0％的A)流经2.5min，然后保持在100％的B流经4.5min。方法12：5％的D(95％的C)流经1min，然后5-95％的D流经9min，并保持在95％的D流经5min。系统1b：装配有Agilent Poroshell 120EC-C8,2.7μ(50X 3mm)柱的Agilent 1100/6110HPLC系统，使用含5mM乙酸铵的水作为流动相C，以及含5mM乙酸铵的乙腈作为流动相D，流动相的流速为1mL/min。方法13：5％的D(95％的C)升至95％的D，流经12min，然后保持在95％的D流经2.8min，然后降至5％的D，流经0.2min。系统1c：装配有Agilent Poroshell 120EC-C18,2.7μ(50X 3mm)柱的Agilent1100/6110HPLC系统，使用含5mM乙酸铵的水作为流动相C，以及含5mM乙酸铵的乙腈作为流动相D，流动相的流速为1mL/min。方法14：5％D的(95％C)升至95％的D，流经12min，然后保持在95％的D流经2.8min，然后降至5％的D，流经0.2min。方法15：20％的D(80％的C)升至95％的D，流经3min，然后保持在95％的D 1.8min，然后将至20％的D，流经0.2min。方法16：20％的D(80％的C)升至95％的D，流经3.0min，并保持在95％的D流经3.8min，然后20％的D流经0.2min。系统2：装配有Agilent Zorbax Extend RRHT 1.8μm(4.6x 30mm)柱的Agilent 1200LCMS，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，以及含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B。方法4：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经3.0min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。方法5：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经14min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。系统3：装配有Agilent Zorbax Extend RRHT 1.8μm,(4.6x 30mm)柱的Waters Fractionlynx LCMS系统，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，以及含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B。方法6：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经3.0min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。方法7：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经14min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。系统4：装配有Agilent Zorbax Extend RRHT 1.8μm(4.6x 30mm)柱的Agilent 1260LCMS，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，以及含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B。方法8：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经3.0min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。方法9：5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经14min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.5min。系统5：装配有Waters Xselect CSH C183.5μm(4.6x 50mm)柱的Agilent 1260LCMS，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，以及含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B。方法10：梯度为5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经13.0min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经1.0min。方法11：梯度为5-95％的流动相B以2.5mL/min的流速流经3.0min，然后保持在95％以4.5mL/min的流速流经0.6min。系统6：装配有Acquity UPLC BEH C18,1.7μm(2.1x 50mm)柱或Phenomenex Kinetex C18,1.7μm(2.1x 50mm)柱的Waters Acquity UPLC系统，使用含10mM甲酸铵的水作为流动相A，乙腈作为流动相B，流动相的流速为0.5mL/min。方法17：10％的流动相B(90％的A)流经0.5min，10-95％的B流经3min，然后保持在95％的B流经1.1min，95-10％的B流经0.1min，然后保持0.3min，且总运行时间为5min。方法18：20％的流动相B(80％A)流经0.5min，20-95％的B流经3min，然后保持在95％的B流经1.1min，95-20％的B流经0.1min，然后保持0.3min且总运行时间为5min。方法19：30％的流动相B(70％的A)流经0.5min，30-95％的B流经2.2min，然后保持在95％的B流经1.9min，95-30％的B流经0.1min，然后保持0.3min且总运行时间为5min。方法20：40％的流动相B(60％的A)流经0.5min，40-95％的B流经1.9min，然后保持在95％的B流经2.2min，95-40％的B流经0.1min，然后保持0.3min且总运行时间为5min。方法21：20％的流动相B(80％的A)流经0.5min，20-95％的B流经2.7min，然后保持在95％的B流经1.4min，95-20％的B流经0.1min，然后保持0.3min且总运行时间为5min。方法22：40％的流动相B(60％的A)流经0.5min，40-95％的B流经1.6min，然后保持在95％的B流经2.5min，95-40％的B流经0.1min，然后保持0.3min且总运行时间为5min。

氢化

使用装配有指定CatCart的Thales Nanotechnology H-Cube反应器或使用标准实验室技术来进行氢化反应。

反应条件及缩略词

步骤中使用的吡啶、二氯甲烷(DCM)、四氢呋喃(THF)和甲苯来自Aldrich Sure-Seal瓶或Acros AcroSeal干燥溶剂，并在氮气(N2)下保存。所有反应用磁力搅拌，且温度为外界反应温度。使用了以下缩略词：乙酸乙酯(EA)、1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、三乙胺(TEA)、N-羟基苯并三唑(HOBt)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)、二碳酸二叔丁酯(Boc2O)、N,N-二异丙基乙胺(DIEA)、乙酸(AcOH)、盐酸(HCl)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、叔丁醇(t-BuOH)、氢化钠(NaH)、三乙酰氧基硼氢化钠(Na(OAc)3BH)、乙醇(EtOH)、甲醇(MeOH)、乙腈(ACN)。

纯化

使用装配有Redisep(Teledyne Isco)、Telos(Kinesis)或Grace Resolv(Grace Davison Discovery Sciences)硅胶(SiO2)柱的Combiflash Rf快速纯化系统(Teledyne Isco)进行层析。使用一种或两种系统来进行制备型HPLC纯化。系统1：装配有Waters SunFire Prep C18OBD,5μm(19x 150mm)柱的Varian ProStar/PrepStar系统，使用含0.05％三氟乙酸的水作为流动相A，以及含0.05％三氟乙酸的乙腈作为流动相B。梯度为40-95％的流动相B流经10min，在95％保持5-10min，然后返回至40％，流经2min，流动相流速为18mL/min。使用Varian Prostar部分收集器，通过在254nm UV检测来收集组分，并使用Savant SpeedVac Plus真空泵或Genevac EZ-2来蒸发浓缩。系统2：装配有Agilent Prep-C18,5μm(21.2x 50mm)柱的Waters Fractionlynx系统，使用含0.1％甲酸的水作为流动相A，以及含0.1％甲酸的乙腈作为流动相B。梯度为45-95％的流动相B流经7.5min，在95％保持1min，然后返回至45％，流经1.5min，流动相的流速为28mL/min。通过在254nm UV检测来收集组分，或按重量收集组分，并使用Genevac EZ-2蒸发浓缩。

手性方法

手性方法：通过积分在5μm粒径的Diacel Chiralpak IA,4.6x250mm柱上分离的峰来测定对映体过量。使用的溶剂为“溶剂A”：4:1的(含0.2％TFA的己烷):DCM和“溶剂B”：EtOH。将流速保持在1.0mL/min，梯度如下：使溶剂B从2％升高至10％，流经30min，使溶剂B在10％保持15min。

手性方法2：通过积分在5μm粒径的Daicel Chiralpak IC,4.6x250mm柱上分离的峰来测定对映体过量，该柱运行有76％(含0.2％TFA的异己烷)、19％DCM和5％EtOH的洗脱混合物，流速为1.5mL/min。

制备手性HPLC：使用装配有Daicel Chiralpak IC柱(20x 250mm柱，5μm粒径)的Gilson制备型HPLC系统来进行制备手性HPLC，该柱运行有流速为15mL/min的流动相A(60％(含0.2％TFA的异己烷)和40％DCM)洗脱混合物，并用流动相B(EtOH)以1.5mL/min在柱稀释。通过在254nm UV检测来收集组分，并使用Genevac EZ-2蒸发浓缩。

实验步骤

一般步骤

一般步骤1：腈的制备

用N2使搅拌的溴化物或三氟甲磺酸(1当量)、氰化锌(2当量)和四(三苯基膦)钯(1–5mol％)在干燥NMP中的溶液(0.5–1M)脱气。将反应加热至100℃反应18h，同时在N2下搅拌。将反应混合物冷却并倒入水和DCM中。通过过滤除去固体物质，并用水萃取滤液。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法纯化粗产物。

通用工序2：氨肟的制备

将羟胺(50％的H2O溶液，5当量)和TEA(1.1当量)加入搅拌中的腈(1当量)的EtOH溶液。混合物在80–85℃下加热2–12h，然后浓缩。将得到的固体溶于EA，用水洗涤，然后用Na2SO4干燥，浓缩并在不经过进一步纯化的情况下使用。或者，将盐酸羟胺(2-3当量)加入搅拌中的腈(1当量)和TEA(2-3当量)的DMF或EtOH溶液。混合物在室温至80℃下搅拌最多24h，然后浓缩。将得到的固体溶于EA或DCM，用水或卤水洗涤，然后用Na2SO4干燥，浓缩，并在不经过进一步纯化的情况下使用。

通用工序3：通过酰氯制备酰胺

用适当的酰氯(1.0–1.5当量)处理胺(1当量)和碱(DIEA或TEA)(2–3当量)的DCM溶液(0.06–0.30M)。搅拌反应混合物，直到反应完成。用DCM稀释反应，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法纯化产物。或者，粗反应混合物可以不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤4：酯水解为酸

将NaOH或LiOH(1–3当量)加入搅拌中的酯(1当量)在THF或二氧六环和水中的溶液。使反应混合物在最高60℃下搅拌最多18h。用AcOH或HCl中和反应混合物，然后浓缩或用水稀释。如果用水稀释反应混合物，则加入HCl以将反应混合物酸化至约2的pH值。通过过滤分离得到的沉淀物，得到可以通过层析法、制备型HPLC来纯化，或在不经过纯化的情况下使用的产物。如果浓缩反应混合物，则用DCM或EA稀释粗物质，并用卤水洗涤。浓缩有机层并通过层析法或制备型HPLC纯化，以得到终产物。或者，粗物质可以不经过纯化继续使用。

一般步骤5：通过酸或酰氯制备噁二唑

通过酸制备噁二唑:

将HOBt(2当量)和EDC(2当量)加入酸(1当量)的DMF溶液。搅拌2h后，加入氨肟(2当量)，并使混合物在室温下搅拌最多12h。然后将反应混合物加热至100℃反应最多12h。或者，在室温下搅拌后，用DCM稀释反应混合物，用NaHCO3洗涤，然后用Na2SO4干燥并浓缩。将得到的残留物溶于EtOH，并在微波中在110℃下加热35min。除去溶剂，且通过制备型HPLC纯化终产物。

通过酰氯制备噁二唑：为通过酰氯合成噁二唑，将二氧六环和DIEA(1.5当量)加入搅拌的氨肟(1当量)溶液中，然后加入酰氯(1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌30min，然后在120℃下搅拌最多6h。将反应混合物冷却至室温，用EA稀释并用卤水洗涤。浓缩有机物并通过层析法纯化残留物。

一般步骤6：氨基甲酸叔丁酯的移除

用TFA(0.16–0.33M)或HCl的醚溶液(0.16–0.33M)处理氨基甲酸叔丁酯(1当量)的DCM溶液(0.06M)。反应混合物在室温或30℃下搅拌直到反应完成。除去溶剂并通过层析法或制备型HPLC纯化产物。

一般步骤7：通过肽偶联制备酰胺

用适当的羧酸(1.0–1.5当量)处理胺(1.0当量)和碱(DIEA、TEA或NMM)(0–3.0当量)在DCM或DMF中的溶液(0.08–0.10M)。将偶联试剂加入该混合物。偶联试剂可以是HATU(1.05–2.5当量)，任选地连同DMAP(0.01–1当量)；可以是EDC(1.5当量)，连同HOBt(1.5当量)或DMAP(0.01–1当量)；可以是DCC(1.1当量)与HOBt(1.1当量)；或者是DCC(1.5当量)与DMAP(2.0当量)。搅拌反应混合物直到反应完成。用EA稀释反应，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。产物通过层析法纯化，或者可以不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤8：酯脱保护成为酸，Boc-胺的脱保护，和/或被保护的醇的原脱硅基(protodesilylation)

用TFA(0.16–0.33M)或1-4N HCl的醚或二氧六环溶液(10.0–20.0当量)处理叔丁酯或Boc-胺(1.00当量)的DCM溶液(0.06M)。使反应混合物在室温或30℃下搅拌直到反应完成。除去溶剂并通过层析法或制备型HPLC纯化产物。该步骤也适用于叔丁基、二甲基甲硅烷基保护的醇的原脱硅基。

用1-6N的HCl水溶液(10–100当量)处理甲酯(1.00当量)的二氧六环溶液(0.04–0.08M)。使反应混合物在室温或30℃下搅拌直到反应完成。除去溶剂并通过层析法或制备型HPLC纯化产物。

一般步骤9：形成三氟甲磺酸

用1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(1.1当量)处理苯酚(1.0当量)的DCM溶液(0.25M)。反应混合物在室温下搅拌直到反应完成。使反应在水和饱和NaHCO3水溶液中搅拌。干燥有机层并浓缩。物质通过层析法纯化，或者在不经过纯化的情况下使用。

一般步骤10：钯催化的偶联反应

将硼酸或硼酸酯(1.0–1.3当量)、卤化物(1.0–1.3当量)、碳酸氢钠或碳酸钠的十水合物(2.0–2.5当量)和二氯[1,1’-双(二叔丁基膦)二茂铁]钯(II)或Pd(dppf)Cl2的溶液混入THF、乙腈或二氧六环(0.1–0.2M)和水(0.25–0.50M)。反应在80至100℃下加热，直到反应完成。用EA稀释反应，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。产物可以通过层析法、制备型HPLC纯化，或者不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤11：钯催化的芳基酰胺化

用N2鼓泡10min使芳基溴化物或三氟甲磺酸(1.00当量)、叔丁醇钠或碳酸铯(1-2当量)和胺(1.0-1.5当量)在二氧六环或THF中的溶液(0.05M)脱气。加入Pd2(dba)3(0.10当量)和2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯(0.15当量)，并在微波反应器中使反应混合物在100-120℃下加热45-60min，或者在最高80℃下常规加热最多18h。用EA稀释反应，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。产物可以通过层析法、制备型HPLC纯化，或者不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤12：酚、咪唑、内酰胺和胺的烃基化

将适当的溴代烷(1.5当量)或对甲苯磺酸酯和CsCO3(1.5-2.0当量)或K2CO3(1.5-2.0当量)之一加入酚中间体的DMF、丙酮或ACN溶液(0.1M)。反应混合物在40-70℃下加热最多18h，然后用DCM稀释并用H2O洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。产物可以通过层析法、制备型HPLC纯化，或者不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤13：形成磺酸酯或磺酰胺

将磺酰氯(2当量)和三乙胺(3当量)加入醇或胺的DCM溶液(0.02M)。反应在室温下搅拌直到反应完成。用DCM稀释反应，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。产物可以通过层析法、制备型HPLC纯化，或者不经过进一步纯化继续进行下一步。

一般步骤14：芳基硝基化物还原为芳胺

将钯碳加入经N2驰放的搅拌中的芳基硝基化物(1当量)的THF溶液。使反应混合物在H2气下反应最多4h。可以使反应混合物通过硅藻土垫来过滤，并浓缩溶剂。粗物质在不经过进一步纯化的情况下继续使用。

一般步骤15：通过还原胺化制备仲胺或叔胺

将胺(0.9-1.1当量)加入搅拌中的醛或酮(0.9-1.0当量)的DCM、1,2-二氯乙烷或THF溶液。在室温下搅拌最多2h后，加入一滴乙酸(任选的)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.5-2.0当量)，并使反应混合物搅拌过夜。在一些情况下，有必要过滤反应混合物，再溶解并加入另外的还原剂以促使反应完成。用NaHCO3淬灭粗反应混合物，并搅拌5min。用DCM萃取水层，而有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法分离终产物。

一般步骤16：2-碘嘧啶的制备

将碘化钠(2当量)加入搅拌中的2-氯嘧啶(1当量)在57％的碘化氢水溶液(1mL)中的溶液。使反应混合物在室温下搅拌，直到起始原料被消耗。用NaHCO3(5mL)淬灭反应混合物，然后用EA(3x 5mL)萃取。合并的有机层用卤水(10mL)洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。粗产物不经过纯化用于后续步骤。

一般步骤17.2-碘吡啶的制备

将碘化钠(6当量)加入搅拌中的2-氯吡啶(1当量)的乙腈(2mL)溶液。将反应混合物加热至40℃，并加入乙酰氯(0.6当量)。搅拌反应混合物直到起始原料被消耗。用NaHCO3(5mL)淬灭反应，并用EA(3x 5mL)萃取。合并的有机层用卤水(10mL)洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。粗产物不经过纯化用于后续步骤。

一般步骤18：Cbz脱保护生成胺或苄酯脱保护生成酸

常规氢化：将Pd/C加入搅拌中的Cbz保护的胺或苄基保护的酯(1.0当量)的EA、THF、EtOH或MeOH溶液(0.01–0.05M)，并使反应在氢气下搅拌直到反应完成。过滤催化剂并除去溶剂。产物通过层析法纯化，或者可以不经过进一步纯化继续进行下一步。

使用H-cube氢化：使Cbz保护的胺或苄基保护的酯(1.0当量)的二氧六环或THF溶液(0.01–0.03M)以1mL/min通过Thales Nanotechnology H-Cube反应器中10％的Pd/C CatCart。蒸出溶剂且产物不经过进一步纯化被带入下一步。

一般步骤19：从芳基溴化物制备芳基酸

将乙酸酐(2当量)加入在N2下搅拌中的烘干甲酸锂(3当量)和DIEA(2当量)的DMF溶液(0.1M)。30分钟后，用N2鼓泡15min使混合物脱气，然后将其加入经过类似脱气的芳基溴化物(1当量)和PdCl2(dppf)(0.1当量)在DMF中的溶液(0.1M)。在微波反应器中使得到的混合物在120℃下加热1h。冷却后，用DCM稀释混合物，并用水洗涤。干燥有机层(Na2SO4)，并浓缩。通过层析法纯化得到的粗物质。

一般步骤20：通过醇的Mitsunobu缩合使酚烃基化

将醇(1.1当量)、三苯基膦(1.1当量)和偶氮二甲酸二异丙酯(1.1当量)加入搅拌中的酚(1当量)的THF溶液。使反应混合物搅拌过夜，浓缩并通过制备型HPLC纯化。

一般步骤21：钯催化的偶联(Sonogashira偶联)

向炔烃(1当量)、碘化物(1.2当量)和二乙胺(5当量)在无水乙醚中的悬浮液(0.2M)加入CuI(0.1当量)，然后加入Pd(PPh3)2Cl2(0.05当量)。在N2下，使反应混合物在室温下搅拌24h。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用饱和氯化铵的水溶液洗涤，然后用卤水洗涤，并用MgSO4干燥。通过硅胶柱层析纯化粗产物。

一般步骤22：形成甲酯或乙酯

将TMS-Cl(4-10当量)加入搅拌中的氨基酸(1当量)在MeOH或EtOH中的悬浮液(0.5M)，并且使混合物在室温下搅拌(RT-回流)4-24h。冷却反应混合物，并浓缩/纯化以得到期望的酯。

一般步骤23：BOC保护

在0℃下将DIEA(1.1当量)和二碳酸二叔丁酯(1.2当量)加入搅拌中的氨基酯(1当量)在DCM中的悬浮液(0.25M)。使反应搅拌4-24h，然后用水洗涤并用MgSO4干燥。通过层析法分离终产物。

一般步骤24：Swern氧化

在-78℃下将DMSO(3.2当量)加入搅拌中的草酰氯(1.6当量)的DCM溶液(0.17M)，并且使反应搅拌10mins。然后通过插管加入醇(1当量)的DCM溶液，并使反应在-78℃下搅拌2h，然后加入DIEA(5当量)。将溶液升温至0℃，另外搅拌60分钟，然后用饱和氯化铵溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。粗产物通过柱层析纯化，或直接使用。

一般步骤25：硼氢化钠还原

在-78℃下将NaBH4(0.7当量)加入搅拌中的酮(1当量)的MeOH溶液(0.17M)。使反应搅拌30min，然后加入饱和氯化铵溶液，并升温至室温。通过减压蒸馏除去MeOH，并用DCM萃取水相。合并的有机萃取物用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法分离终产物。

一般步骤26：形成叔丁酯

在-10℃下，向搅拌中的酸(1当量)在DME(0.5mL)中的悬浮液加入浓硫酸(6当量)，然后加入2-甲基丙-1-烯(100当量)。将混合物密封在压力容器中，并在0℃下搅拌18h。然后将反应冷却至-10℃，并打开容器。将反应升温至RT反应30分钟，该时间内蒸发了全部异丁烯。用EA稀释反应，并在强力搅拌下加入饱和碳酸氢钠，直到pH值为8。分离相，并用EA反萃水相。合并的有机萃取物用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法分离终产物。

一般步骤27：合成硼酸

在-78℃下将丁基锂(1.5当量)加入搅拌中的溴化物(1当量)的THF溶液(0.14M)，并使溶液搅拌20mins。加入硼酸三甲酯(1.1当量)并将反应升温至RT。用水淬灭混合物，并用乙酸乙酯萃取。依次用1N HCl和饱和的卤水(50ml)洗涤合并的有机物，用MgSO4干燥并浓缩。通过层析法分离终产物。

一般步骤28：形成酰肼

将水合肼(10当量)加入搅拌中的甲酯(1当量)在1:1的THF：EtOH中的溶液(0.05M)，并且使该溶液搅拌16h。用水沉淀产物并通过过滤分离。

一般步骤29：形成噁二唑硫酮

将硫羰基二咪唑(1.2当量)加入搅拌中的酰肼(1当量)和DIEA在THF中的溶液(0.027M)，并使该溶液搅拌2h。使混合物升温至45℃再反应1h，然后用AcOH水溶液淬灭并用DCM萃取。有机物通过疏水熔块(frit)干燥，并浓缩。通过层析法分离终产物。

一般步骤30：合成氨基醇

在0℃下将丁基锂(1.1当量，2.4M的己烷溶液)加入搅拌中的二异丙胺(1.15当量)的THF溶液(0.34M)。30mins后，将混合物冷却至-78℃，并用2-((二苯亚甲基)氨基)乙酸叔丁酯(1当量)处理。30mins后，加入三甲基氯硅烷(3当量)，并使混合物升温至室温。将得到的溶液加入搅拌中的醛(1当量)和氯化锌(0.05当量，0.5M的乙醚溶液)在THF中的溶液(0.36M)。16h后，用10％的柠檬酸水溶液淬灭混合物，并再搅拌16h。通过反应混合物的直接强阳离子交换的离子交换层析来分离产物，并在不经过进一步纯化的情况下使用。

代表性化合物的合成

4-(庚氧基)苯腈

使用一般步骤1制备：用N2使搅拌的1-溴-4-(庚氧基)苯(2.0g，7.37mmol)、氰化锌(1.73g，14.74mmol)和四(三苯基膦)钯(76.12mg，0.07mol)在干燥NMP(20mL)中的溶液脱气。将反应加热至100℃反应18h，同时在氮气下搅拌。将反应混合物冷却并倒入水(100mL)和DCM(20mL)中。通过过滤除去固体物质，并用水(3x 20mL)萃取滤液。有机层用MgSO4干燥并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到1.15g(73％)的4-(庚氧基)苯腈，为淡黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C14H19NO的计算值：217.1；测量值218.1[M+H]⁺，tR＝11.14min(方法2)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64–7.50(m,2H),7.05–6.83(m,2H),3.99(t,J＝6.5Hz,2H),1.89–1.69(m,2H),1.58–1.12(m,8H),0.90(dd,J＝9.1,4.5Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz CDCl3)δ162.47,133.91,132.78,132.12,129.13,119.31,115.18,103.58,68.41,31.73,28.98,25.89,22.58,14.07。

(Z)-4-(庚氧基)-N’-羟基苯甲脒

使用一般步骤2制备：将盐酸羟胺(0.96g，13.8mmol)和TEA(2.22g，23.0mmol)加入搅拌中的4-(庚氧基)苯腈(1.0g，4.6mmol)的EtOH(15mL)溶液。将反应加热至85℃反应2h。减压除去溶剂，残留物用水(20mL)稀释，并用DCM(3x 10mL)萃取。减压浓缩合并的有机层。粗物质从异丙醇(20mL)结晶，得到1.05g(91％)的(Z)-4-(庚氧基)-N’-羟基苯甲脒，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C14H22N2O2的计算值：250.2；测量值251.3[M+H]⁺，tR＝1.70min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.45(s,1H),7.59(d,J＝8.6Hz,2H),6.93(t,J＝14.7Hz,2H),5.82–5.48(m,2H),3.97(t,J＝6.5Hz,2H),1.83–1.55(m,2H),1.56–1.05(m,8H),0.87(t,J＝6.7Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz CDCl3)δ159.19,150.53,126.64,125.55,113.87,67.40,31.21,28.62,28.40,25.44,22.02,13.92。

(S)-甲基4-(2-氨基-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯

在0℃下，将氯化亚砜(447.64mg，3.77mmol)缓慢加入(S)-2-氨基-3-(4-(叔丁氧羰基)苯基)丙酸(500.0mg，1.88mmol)的MeOH(20mL)溶液。反应在0℃下搅拌1h，然后升温至室温并搅拌1h。减压除去溶剂。用饱和NaHCO3水溶液(20ml)洗涤反应混合物，并用DCM(3x 10ml)萃取。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到425mg(95％)的(S)-甲基4-(2-氨基-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯的HCl盐。LCMS-ESI(m/z)，C12H15NO4的计算值：237.1；测量值238.0[M+H]⁺，tR＝1.01min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,3H),7.94(d,J＝8.3Hz,2H),7.41(d,J＝8.3Hz,2H),4.37(t,J＝6.8Hz,1H),3.86(s,3H),3.68(s,3H),3.20(dd,J＝11.8,6.8Hz,2H)。

(S)-甲基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯

使用一般步骤3制备：在室温下，将4-(叔丁基)苯甲酰氯(556.6mg，2.83mmol)加入(S)-甲基4-(2-氨基-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯(425.0mg，1.79mmol)在DCM(10mL)和DIEA(463.0mg，3.58mmol)中的溶液。反应搅拌2h，并用DCM和饱和NaHCO3水溶液使反应分层。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到317mg(45％)的(S)-甲基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C23H27NO5的计算值：397.2；测量值398.1[M+H]⁺，tR＝2.31min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97–7.75(m,2H),7.67–7.51(m,2H),7.46–7.26(m,2H),7.14(d,J＝8.3Hz,2H),6.60(d,J＝7.4Hz,1H),5.03(dt,J＝7.4,5.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.68(s,3H),3.28(dd,J＝13.7,5.8Hz,1H),3.18(dd,J＝13.7,5.5Hz,1H),1.24(s,9H)。

(S)-4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸(INT-1)

使用一般步骤4制备：在0℃下，将氢氧化锂一水合物(93.52mg，2.23mmol)加入搅拌的(S)-甲基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯(316.6mg，0.79mmol)在二氧六环(15mL)和水(1mL)中的溶液。2h后，用1M的HCl将溶液中和至pH值为7.0。用DCM(15mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL)使混合物分层。有机层用饱和NaHCO3水溶液(3x 10mL)和卤水(10mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩，得到208mg(69％)的(S)-4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸—INT-1。LCMS-ESI(m/z)，C22H25NO5的计算值：383.2；测量值384.1[M+H]⁺，tR＝2.13min.(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ12.86(s,1H),8.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.87–7.78(m,2H),7.75–7.65(m,2H),7.50–7.35(m,4H),4.72(ddd,J＝10.3,8.0,5.1Hz,1H),3.65(s,3H),3.28–3.05(m,2H),1.29(s,9H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ173.00,167.21,166.29,154.39,143.10,130.85,129.34,129.27,129.21,129.03,127.21,125.39,125.10,53.75,52.04,34.64,30.92,30.88。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤5制备：将HOBt(5.27mg，0.39mmol)和EDC(7.48mg，0.39mmol)加入(S)-4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸—INT-1(10.0mg，0.026mmol)的无水DMF(1mL)溶液。搅拌2h后，加入(Z)-4-(庚氧基)-N’-羟基苯甲脒(9.76mg，0.39mmol)。反应混合物在室温下搅拌2h，用饱和NaHCO3水溶液(5ml)和EA(5mL)分层，并减压浓缩，得到中间体(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(((4-(庚氧基)苯甲脒基)氧基)羰基)苯基)丙酸酯。将中间体溶于DMF(1mL)并加热至100℃反应18h。将反应混合物冷却至室温，并用EA(5mL)和饱和NaHCO3水溶液(5mL)分层。有机层用水(2x 5mL)和卤水(5mL)萃取。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过制备型HPLC纯化棕色油状物，得到4.5mg(29％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O5的计算值：597.3；无观察到的m/z，tR＝12.75min(方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.85(d,J＝8.0Hz,1H),8.09(d,J＝8.3Hz,2H),8.00(d,J＝8.9Hz,2H),7.74(d,J＝8.5Hz,2H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.48(d,J＝8.6Hz,2H),7.12(d,J＝8.9Hz,2H),4.87–4.56(m,1H),4.06(t,J＝6.5Hz,2H),3.67(s,3H),3.32–3.13(m,4H),1.74(dd,J＝14.2,6.5Hz,2H),1.51–1.37(m,2H),1.33(s,4H),1.26(d,J＝20.2Hz,9H),0.88(t,J＝6.9Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ175.00,171.91,167.89,166.27,161.21,154.37,143.68,130.78,130.30,128.76,127.80,127.18,125.07,121.69,118.21,115.07,67.72,53.61,52.05,36.15,34.60,31.20,30.87,28.54,28.39,25.40,22.02,13.93。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)苯基)丙酸(化合物1)

使用一般步骤4制备：将1N的NaOH(1mL)加入(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)苯基)丙酸酯(4.52mg，0.008mmol)的MeOH(2mL)溶液。反应混合物在50℃下搅拌3h。通过制备型HPLC纯化得到的混合物，得到0.36mg(8％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)苯基)丙酸。LCMS-ESI(m/z)，C35H41N3O5的计算值：583.7；无观察到的m/z，tR＝12.59min(方法2)。

(S)-甲基2-氨基-3-(4-氰基苯基)丙酸酯

在0℃下，经1h将氯化亚砜(818.1mg，6.89mmol)缓慢加入(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-氰基苯基)丙酸(1.0g，3.44mmol)的MeOH(20mL)溶液。将反应升温至室温并搅拌1h。减压除去溶剂。用饱和NaHCO3水溶液(20ml)洗涤反应混合物，并用DCM(3x 10ml)萃取。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到789mg(97％)的(S)-甲基2-氨基-3-(4-氰基苯基)丙酸酯的HCl盐。LCMS-ESI(M/z)，C11H12N2O2的计算值：204.1；测量值205.0]M+H]⁺，tR＝3.25min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.69(s,3H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.51(t,J＝8.8Hz,2H),4.37(t,J＝6.7Hz,1H),3.68(s,3H),3.23(qd,J＝14.4,7.7Hz,2H)。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-氰基苯基)丙酸酯

使用一般步骤3制备：在室温下，将4-(叔丁基)苯甲酰氯(981.3mg，4.99mmol)加入(S)-甲基2-氨基-3-(4-氰基苯基)丙酸酯(789.2mg，3.32mmol)在DCM(15mL)和DIEA(1.29g，9.96mmol)中的溶液。使反应搅拌2h，并用DCM和饱和NaHCO3水溶液使反应分层。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到1.06g(88％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-氰基苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C22H24N2O3的计算值：364.2；测量值365.3[M+H]⁺，tR＝3.55min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.85–7.60(m,4H),7.49(dd,J＝15.1,8.4Hz,4H),4.85–4.60(m,1H),3.65(s,3H),3.30–3.23(m,1H),3.18(dd,J＝13.7,10.6Hz,1H),1.29(s,9H)。

(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯(INT-2)

使用一般步骤2制备：将盐酸羟胺(572.2mg，8.22mmol)和TEA(1.38g，13.7mmol)加入搅拌中的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-氰基苯基)丙酸酯(1.0g，2.74mmol)的EtOH(15mL)溶液。将反应加热至85℃反应2h。减压除去溶剂，并用水(20mL)稀释残留物，并用DCM(3x 10mL)萃取。减压浓缩合并的有机层。粗物质从异丙醇(20mL)结晶，得到1.04g(95％)的(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯(INT-2)，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)：计算得到的C22H27N3O4：397.2；测量值398.1[M+1]⁺，tR＝2.26min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ10.19(s,1H),9.57(s,1H),8.78(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.58(d,J＝8.2Hz,2H),7.48(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(d,J＝8.3Hz,2H),4.79–4.49(m,1H),3.65(s,3H),3.15(dt,J＝13.6,6.0Hz,2H),1.75(d,J＝13.6Hz,1H),1.29(s,9H)。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤5制备：将HOBt(312.3mg，2.31mmol)和EDC(442.75mg，2.31mmol)加入4-(庚氧基)苯甲酸(400.0mg，1.54mmol)的无水DMF(6mL)溶液。搅拌2h后，加入(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)-丙酸酯—INT-2(673.3mg，1.69mmol)。反应混合物在室温下搅拌2h，用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和EA(15mL)分层，并减压浓缩，得到中间体(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N-((4-(庚氧基)苯甲酰基)氧基)甲脒基)苯基)丙酸酯。将中间体溶于DMF(10mL)并加热至100℃反应18h。将反应混合物冷却至室温，并用EA(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(50mL)分层。有机层用水(2x 10mL)和卤水(10mL)萃取。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化棕色油状物，得到710mg(77％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O5的计算值：597.3；无观察到的m/z，tR＝12.80min(方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.84(d,J＝8.0Hz,1H),8.08(t,J＝17.2Hz,2H),7.97(dd,J＝18.2,8.5Hz,2H),7.74(d,J＝8.5Hz,2H),7.50(dd,J＝18.6,8.3Hz,4H),7.18(d,J＝8.9Hz,2H),4.85–4.63(m,1H),4.09(dd,J＝13.8,7.3Hz,2H),3.67(s,3H),3.24(ddd,J＝23.8,15.7,7.3Hz,4H),2.08(s,4H),1.74(dd,J＝14.1,6.9Hz,2H),1.42(dd,J＝13.6,6.3Hz,2H),1.30(d,J＝14.5Hz,9H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ174.05,170.87,133.81,165.14,161.43,153.21,140.51,129.70,128.85,128.78,126.06,125.84,123.93,123.39,114.36,114.25,66.86,52.66,50.88,34.32,33.47,30.06,29.74,27.33,27.24,24.23,20.89,12.80。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸(化合物2)

使用一般步骤4制备：将1N的NaOH(10mL)加入(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸酯(710.0mg，1.19mmol)的MeOH(20mL)溶液。反应混合物在50℃下搅拌3h。通过层析法(DCM/MeOH)纯化得到的混合物，得到218mg(31％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C35H41N3O5的计算值：583.3；无观察到的m/z，tR＝12.16min(方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.69(d,J＝8.3Hz,1H),8.16–8.02(m,2H),7.98(d,J＝8.3Hz,2H),7.74(d,J＝8.5Hz,2H),7.53(d,J＝8.3Hz,2H),7.47(d,J＝8.5Hz,2H),7.18(d,J＝9.0Hz,2H),4.70(ddd,J＝10.8,8.4,4.5Hz,1H),4.09(t,J＝6.5Hz,2H),3.30(dd,J＝13.8,4.2Hz,1H),3.17(dd,J＝13.8,10.7Hz,1H),1.74(dd,J＝14.5,6.7Hz,2H)1.42(dd,J＝13.8,6.1Hz,2H),1.37-1.14(m,14H),0.87(t,J＝6.9Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ175.16,173.00,167.96,166.19,162.55,154.18,142.11,131.08,129.95,129.89,127.14,126.92,125.01,124.39,115.49,115.37,67.98,53.72,36.19,34.58,31.19,30.89,28.46,28.37,25.36,22.01,13.92。

依次使用一般步骤5和4，从(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯—INT-2制备化合物3–11和13–61。

依次使用一般步骤5、6和4，从(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯—INT-2制备化合物62–66。

(S)-2-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酰胺基)乙酸(化合物67)

使用一般步骤7和8制备：在室温下，将HOBt(3.52mg，0.027mmol)和EDCI(4.88mg，0.027mmol)加入(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酸—化合物2(10.0mg，0.017mmol)的无水DMF(1mL)溶液。2h后，加入2-氨基乙酸叔丁酯(3.49mg，0.027mmol)，并使反应混合物在室温下搅拌2h。LCMS分析显示完全转化为中间体。用NaHCO3水溶液(5ml)和DCM(1mL)使反应混合物分层，收集有机层并在真空下浓缩，然后再溶解于1mL DCM和0.1mL TFA。将混合物加热至30℃反应3h。通过HPLC纯化最终的化合物，得到9.6mg(88％)的(S)-2-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)丙酰胺基)乙酸。LCMS-ESI(m/z)，C37H44N4O6的计算值为640.3；无观察到的m/z，tR＝11.51min(方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ：8.60(d,J＝8.4Hz,1H),8.47(t,J＝5.7Hz,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,2H),7.96(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.17(d,J＝8.8Hz,2H),4.83(d,J＝8.1Hz,1H),4.09(t,J＝6.4Hz,2H),3.94–3.69(m,2H),3.34(s,2H),3.26(d,J＝13.5Hz,1H),3.15–3.01(m,1H),1.83–1.65(m,2H),1.50–1.15(m,16H),0.87(t,J＝6.7Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ：175.12,171.58,171.13,167.99,166.02,162.54,154.10,142.44,131.16,130.02,129.89,127.23,126.81,124.91,124.25,115.50,115.36,67.97,54.23,40.10,37.12,34.57,31.19,30.88,28.46,28.37,25.36,22.02,13.93。

依次使用一般步骤7和8，从化合物5制备化合物68。

使用一般步骤7，从(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯(化合物2)制备化合物69。

依次使用一般步骤7和8，从(S,Z)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(N’-羟基甲脒基)苯基)丙酸酯(化合物2)制备化合物70。

依次使用一般步骤7、1、2、5和4，从2-氨基-2-(4-溴苯基)乙酸甲酯盐酸盐制备化合物71和72。

依次使用一般步骤7、9、1、2、5和4，从(S)-甲基2-氨基-4-(4-羟基苯基)丁酸酯氢溴酸盐制备化合物73和74。

依次使用一般步骤7、9、1、2、5和4，从(S)-甲基3-氨基-4-(4-羟基苯基)丁酸酯盐酸盐制备化合物75。

4-(庚氧基)苯甲酰肼

将1,1’-羰基二咪唑(559mg，3.45mmol)加入搅拌的4-(庚氧基)苯甲酸(679mg，2.87mmol)的THF(5mL)溶液。在室温下搅拌2h后，将该溶液加入搅拌的水合肼(0.729mL，5.75mmol)在THF(2mL)中的混合物，并再搅拌2h。将反应混合物倒在水(20mL)上并搅拌30min。通过过滤收集得到的沉淀物，用水(2x 10mL)洗涤，然后用乙腈(3mL)洗涤，得到0.54g(71％)的4-(庚氧基)苯甲酰肼，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C14H22N2O2的计算值：250.3；测量值251.0[M+H]⁺，tR＝2.05min.(方法4)。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯甲酰基)肼-羰基)苯基)丙酸酯(INT-3)

将4-甲基吗啉(0.15mL，1.36mmol)和氯甲酸异丁酯(0.09mL，0.71mmol)加入搅拌中的(S)-4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸—INT-1(260mg，0.68mmol)的THF(5mL)溶液。在室温下搅拌2h后，加入4-(庚氧基)苯甲酰肼(187mg，0.75mmol)并且再继续搅拌2h。将反应混合物倒在NaHCO3(50mL)上，并用DCM(3x 20mL)萃取。合并的有机物用MgSO4干燥，并浓缩。通过柱层析(含100％EA的异己烷)纯化粗产物，得到297mg(71％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯甲酰基)肼羰基)苯基)丙酸酯—INT-3，为灰白色泡沫。LCMS-ESI(m/z)，C36H45N3O6的计算值：615.8；测量值616.0[M+H]⁺，tR＝2.89min.(方法4)。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基)丙酸酯

将2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑啉(41.8mg，0.25mmol)加入搅拌中的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯甲酰基)肼羰基)苯基)丙酸酯—INT-3(127mg，0.21mmol)和TEA(0.09mL，0.62mmol)在DCM(4mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌18h，然后升温至40℃反应1h。将反应混合物冷却至室温，用NaHCO3(15mL)稀释，震摇，通过疏水熔块分离并蒸发浓缩，得到120mg(95％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基)丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O5的计算值：597.8；测量值598.0[M+H]⁺，tR＝3.25min.(方法4)。

使用(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基)丙酸酯和一般步骤4制备化合物76。

2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮(INT-4)

在氮气下，将苯基三甲基三溴化铵(842mg，2.24mmol)加入搅拌中的1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮(500mg，2.13mmol)的THF(8.5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h，减压抽滤，并用THF洗涤捕获的固体。浓缩合并的溶液，得到919mg(100％)的2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮(INT-4)，为黄色油状物。LCMS-ESI(m/z)，C15H21BrO2的计算值：313.2；测量值313.0[M+H]⁺，tR＝2.12min.(方法4)。

(S)-2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯

将2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮—INT-4(166mg，0.45mmol)的乙腈(1mL)溶液加入(S)-4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸—INT-1(190mg，0.50mmol)和TEA(75.0μl，0.54mmol)在乙腈(4mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌18h，然后倒在0.5M的柠檬酸上(30mL)，并用EA(3x 25mL)萃取。合并的有机物用MgSO4干燥，过滤并浓缩。用Et2O(10mL)研磨碎残留物，并浓缩滤液，得到159mg(49％)的(S)-2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C37H45NO7的计算值：615.8；测量值616.0[M+H]⁺，tR＝2.76min.(方法4)。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-2-基)苯基)丙酸酯

将乙酰胺(763mg，12.9mmol)和(S)-2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯甲酸酯(159mg，0.26mmol)的混合物加入三氟化硼乙醚(33.3μl，0.27mmol)。反应混合物在140℃下搅拌1h。使反应混合物冷却至室温，用EA(15mL)稀释，并用NaHCO3(3x 15mL)和卤水(15mL)萃取。合并的有机物用MgSO4干燥，过滤并浓缩。残留物从Et2O(5mL)重结晶，过滤并用Et2O洗净。浓缩滤液，得到55mg(16％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-2-基)苯基)丙酸酯，为橙色油状物。LCMS-ESI(m/z)，C37H44N2O5的计算值：596.8；测量值597.0[M+H]⁺，tR＝3.11min.(方法4)。

使用一般步骤4，从(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-2-基)苯基)丙酸酯制备化合物77。

2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基4-(庚氧基)苯甲酸酯

在室温下，将TEA(1.24mL，8.87mmol)逐滴加入搅拌中的4-(庚氧基)苯甲酸(2.0g，8.46mmol)在乙腈(30mL)中的混合物。反应混合物在室温下搅拌1h，倒在0.05M的柠檬酸(100mL)和EA(10mL)上，然后搅拌10min。通过过滤分离沉淀物，用水(30mL)和异己烷(2x 10mL)洗涤，然后在空气中晾干，得到3.8g(98％)的2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基4-(庚氧基)苯甲酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C22H25BrO4的计算值：433.3；测量值455.0/457.0[M+Na]⁺，tR＝3.21min.(方法4)。

4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑

将溶于DCM(10mL)的2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基4-(庚氧基)苯甲酸酯(1.0g，2.3mmol)和乙酰胺(4.91g，83.0mmol)加入三氯化硼乙醚络合物(0.322mL，2.5mmol)。将反应混合物加热至50℃然后加热至140℃反应16h，蒸出DCM。将反应混合物冷却，用乙腈稀释，并在室温下搅拌1h。通过过滤分离沉淀物，得到273mg(23％)的4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑，为棕色固体。LCMS-ESI(m/z)，C22H24BrNO2的计算值：414.3；测量值414.0[M+H]⁺，tR＝3.00min.(方法4)。

(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-4-基)苯基)丙酸酯

将碘(20.2mg，0.08mmol)加入在DMF(1.5mL)中搅拌的锌(104mg，1.59mmol)。颜色消失后，加入(R)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙酸酯(175mg，0.53mmol)和另外的碘(20.2mg，0.08mmol)。30min后，通过鼓入N2使混合物脱气，然后用4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑(220mg，0.53mmol)、Pd2dba3(12.2mg，0.01mmol)和二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦(10.9mg，0.03mmol)处理，然后用THF(1mL)处理。将反应混合物加热至50℃反应2h，冷却至室温并通过柱层析(15-95％EA梯度的异己烷)纯化，得到188mg(65％)的(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-4-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C31H40N2O6的计算值：536.6；测量值537.0[M+H]⁺，tR＝3.72min.(方法11)。

使用一般步骤8、7，然后使用一般步骤4，从(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噁唑-4-基)苯基)丙酸酯和4-(叔丁基)苯甲酸制备化合物78。

2-(4-溴苯基)-4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑

将4-溴硫代苯甲酰胺(0.95g，4.38mmol)和异丙醇(10mL)加入搅拌中的2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮—INT-4(1.37g，4.38mmol)的EtOH(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。通过过滤分离固体，用EtOH(5mL)洗涤，然后溶于DCM(10mL)和NaHCO3(20mL)并在室温下搅拌1h。通过过滤分离固体，用水(2x 10mL)和乙腈(2x 4mL)洗涤，然后干燥，得到1.02g(52％)的2-(4-溴苯基)-4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑，为白色微晶固体。LCMS-ESI(m/z)，C22H24BrNOS的计算值：429.1；测量值430.0[M+H]⁺，tR＝3.20min.(方法4)。

(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙酸酯

将二碘(44mg，0.17mmol)加入搅拌中的锌(228mg，3.49mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液。当颜色褪去时，加入(R)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙酸酯(382mg，1.16mmol)和另外的二碘(44.2mg，0.17mmol)。在室温下搅拌30min后，通过鼓入N2使反应混合物脱气，然后加入2-(4-溴苯基)-4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑(500mg，1.16mmol)、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦(23.8mg，0.06mmol)、Pd2dba3(26mg，0.03mmol)和DMF(2mL)。将反应混合物加热至50℃反应3h，冷却并通过柱层析(含10-80％EA的异己烷)纯化，得到620mg(96％)的(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C31H40N2O5S的计算值：552.3；没有观察到离子，tR＝3.37min.(方法4)。

使用一般步骤8、7，然后使用一般步骤4，从(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基丙酸酯和4-(叔丁基)苯甲酸制备化合物79。

4-(庚氧基)硫代苯甲酰胺

将2,4-双(4-苯氧基苯基)-1,3,2,4-二硫二磷杂环丁烷-2,4-二硫化物(2.80g，5.29mmol)加入搅拌中的4-(庚氧基)苯甲酰胺(1.24g，5.29mmol)在DME(20mL)和THF(10mL)中的悬浮液。反应混合物在室温下搅拌16h。将反应混合物浓缩至二氧化硅上，并通过柱层析(含0-60％EA的异己烷)纯化，得到1.4g(62％)的4-(庚氧基)硫代苯甲酰胺，为黄色蜡状固体。LCMS-ESI(m/z)，C14H21NOS的计算值：251.4；测量值252.0[M+H]⁺，tR＝3.13min.(方法6)。

4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑

将2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(1.44g，5.17mmol)加入搅拌中的4-(庚氧基)硫代苯甲酰胺(1.30g，5.17mmol)在异丙醇(20mL)中的混合物。通过过滤收集沉淀物，并用EtOH(2x 5mL)洗涤。滤饼用NaHCO3(2x 20mL)、水(2x 20mL)然后用EtOH(2x 5mL)成浆，并干燥，得到926mg(41％)的4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑，为淡黄色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C22H24BrNOS的计算值：429.1；测量值430.0[M+H]⁺，tR＝3.41min.(方法4)。

(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-4-基)苯基)丙酸酯

将二碘(35.4mg，0.14mmol)加入搅拌中的锌(182mg，2.79mmol)在DMF(2mL)中的混合物。当颜色褪去时，加入另外的二碘(35.4mg，0.14mmol)和(R)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙酸酯(306mg，0.93mmol)。30min后，加入DMF(1mL)并通过鼓入N2使混合物脱气。将4-(4-溴苯基)-2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑(400mg，0.93mmol)、Pd2dba3(21mg，0.02mmol)和二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦(19mg，0.05mmol)加入反应混合物，使混合物进一步脱气，然后加热至50℃反应3h。冷却反应混合物并通过柱层析(含10-80％EA的异己烷)纯化。将得到的产物溶于DCM(4mL)并用水(20mL)洗涤，并通过疏水熔块干燥。使有机物悬浮在ACN(4mL)中，并浓缩，得到432mg(83％)的(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-4-基)苯基)丙酸酯，为黄色泡沫。LCMS-ESI(m/z)，C31H40N2O5S的计算值：552.7；没有观察到离子，tR＝3.36min.(方法4)。

使用一般步骤8、7，然后使用一般步骤4，从(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-4-基)苯基)丙酸酯和4-(叔丁基)苯甲酸制备化合物80。

4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯甲醛

在氮气下，将1-溴-4-(庚氧基)苯(500mg，1.84mmol)的DMA(1mL)溶液加入搅拌中的4-(噻唑-2-基)苯甲醛(349mg，1.84mmol)、三环己基膦(27mg，0.07mmol)、特戊酸(64.2μl，0.55mmol)、碳酸钾(382mg，2.77mmol)和乙酸钯(II)(8mg，0.04mmol)在DMA(5.15mL)中的悬浮液。反应混合物排气(evacuate)并用氮气驰放3次，然后在100℃下加热6h。一经冷却，用EA(40mL)稀释反应混合物，用水(3x 40mL)和卤水(40mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到棕绿色固体。通过层析法(含0-50％EA的己烷)纯化粗产物，得到270mg(37％)的4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯甲醛，为亮黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C23H25NO2S的计算值：379.5；测量值380.0[M+H]⁺，tR＝2.99min.(方法8)。

甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙烯酸酯

在-70℃下，在氮气中将搅拌中的1,1,3,3-四甲基胍(86μl，0.69mmol)的混合物加入4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯甲醛(260mg，0.685mmol)和甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸酯(185mg，0.62mmol)在无水THF(10mL)中的悬浮液。反应混合物在-70℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌18h。反应混合物用DCM(50mL)稀释，用水(50mL)洗涤，通过相分离柱，并在真空中浓缩有机相，得到黄色固体。该固体用EA/EtOH(20mL)研磨碎，并用EtOH(10mL)和Et2O洗涤收集的固体，得到284mg(79％)的甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙烯酸酯，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C31H38N2O5S的计算值：550.7；测量值551.0[M+H]⁺，tR＝3.11min.(方法8)。

甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙酸酯

使用H-Cube氢化器(10％Pd/C，30x4mm，全氢，40℃，1mL/min)氢化搅拌中的溶于二氧六环(5mL)的甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙烯酸酯(50mg，0.091mmol)混合物。在真空中浓缩反应混合物，得到21mg(29％)的甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙酸酯，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C31H40N2O5S的计算值：552.7；测量值553.0[M+H]⁺，tR＝1.85min.(方法8)。

使用一般步骤8、3，然后使用一般步骤4，从甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯基)丙酸酯和4-(叔丁基)苯甲酰氯制备化合物81。

按照与化合物81类似的方式，使用4-(2-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-5-基)苯甲醛代替4-(5-(4-(庚氧基)苯基)噻唑-2-基)苯甲醛来制备化合物82。

(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)苯基)丙酸酯

使用INT-3制备：将(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(2-(4-(庚氧基)苯甲酰基)肼羰基)苯基)丙酸酯—INT-3(100.0mg，0.16mmol)加入搅拌中的2,4-双(4-甲氧苯基)-1,3,2,4-二硫二磷杂环丁烷-2,4-二硫化物(65.7mg，0.16mmol)的THF(3mL)溶液，并将混合物加热至65℃。1h后，浓缩反应混合物并通过柱层析(含10-100％EA的异己烷)纯化，得到37.0mg(29％)的(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)苯基)丙酸酯，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O4S的计算值：613.8；没有观察到离子，tR＝3.31min.(方法4)。

使用一般步骤4，从(S)-甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)苯基)丙酸酯制备化合物83。

依次使用一般步骤10、10和8，使用3-溴-5-氯-1,2,4-噻二唑、(4-(庚氧基)苯基)硼酸和INT-13制备化合物84。

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-苯基)丙酸酯(INT-5)

使用一般步骤9制备：用MgSO4(4.01g，33.7mmol)处理搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸酯水合物(25g，64.2mmol)的DCM(100mL)溶液。15min后，过滤混合物并用DCM(2x 20mL)洗涤。用N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(17.41g，134.7mmol)处理有机物并搅拌。用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(26.44g，74.01mmol)处理该溶液，并使混合物在室温下搅拌过夜。用水(50mL)和饱和NaHCO3水溶液(20mL)处理混合物，并强力搅拌10min。分层并再用饱和NaHCO3水溶液(2x 50mL)、水(50mL)和饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤有机层，并浓缩有机层。通过层析法(EA/己烷)纯化化合物，得到26.85g(79％)的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-5。LCMS-ESI(m/z)，C22H24F3NO7S的计算值：503.1；测量值526.1[M+Na]⁺，tR＝4.12min(方法3)。

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯(INT-6)

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-5(26.85g，53.4mmol)、乙酸钾(15.71g，160.1mmol)、双-频那醇硼烷(27.1g，106.7mmol)和DMSO(100mL)的溶液用稳流的氮气脱气5分钟。将PdCl2(dppf)(1.95g，2.67mmol)加入该溶液，使溶液进一步脱气并保持在氮气下。将混合物加热至100℃反应18h，然后冷却至室温并用EA(50mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(20mL)、水(3x 30mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并减压除去溶剂。通过柱层析纯化化合物，得到11.10g(41％)的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-6，为油状物。LCMS-ESI(m/z)，C27H36BNO6的计算值：481.3；测量值504.3[M+Na]⁺，tR＝4.21min(方法3)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.72(d,J＝8.3Hz,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,2H),7.42–7.11(m,6H),4.98(s,2H),4.22–4.08(m,1H),3.03(dd,J＝13.7,5.2Hz,1H),2.85(dd,J＝13.6,10.1Hz,1H),1.36(s,6H),1.30(s,9H),1.22–1.13(m,6H)。

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(INT-7)

使用一般步骤10制备：使(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-6(21.7g，45.0mmol)和5-溴-2-碘嘧啶(15.4g，54.0mmol)在二氧六环(400mL)与碳酸钠十水合物(25.7g，90mmol)水(100mL)溶液中的混合物脱气。加入PdCl2(dppf)(0.99g，1.4mmol)并使混合物进一步脱气，然后加热回流5h。使混合物冷却，同时搅拌过夜。将混合物倒在水(1L)和EA(300mL)上并搅拌30min。过滤混合物并分层。再用EA(2x 200mL)萃取水层，并且用水(2x 100mL)洗涤合并的有机层，然后用卤水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。柱层析(EA/己烷)得到14.84g(63％)的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-7。LCMS-ESI(m/z)，C25H26BrN3O4的计算值：511.1；测量值534.0[M+Na]⁺，tR＝2.97min(方法11)。

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(INT-8)

使用一般步骤10制备：搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-7(759mg，1.48mmol)、(4-(庚氧基)苯基)硼酸(455mg，1.93mmol)和碳酸氢钠(311mg，3.70mmol)在乙腈(5ml)、THF(5ml)和水(4ml)中的溶液用N2脱气5min。加入Pd(dppf)Cl2(108mg，0.15mmol)并在微波中将反应加热至110℃反应50min。用EA和水稀释反应，然后过滤。有机相用MgSO4干燥，过滤，并浓缩。通过在硅胶上层析(EA/己烷)来纯化粗产物，得到591mg(62％)的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-8，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C38H45N3O5的计算值：623.8；无观察到的m/z，tR＝3.42min(方法8)。

(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(INT-9)

将Pd/C(101mg，0.09mmol)加入搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-8(591mg，0.95mmol)的EA(25ml)溶液，并用H2使悬浮液脱气。在H2下，使混合物强力搅拌过夜，然后使其通过硅藻土过滤，并浓缩滤液，得到405mg(83％)的(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-9。LCMS-ESI(m/z)，C30H39N3O3的计算值：489.3；测量值：490.2[M+H]⁺，tR＝2.35min(方法8)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物85)

用HATU(1.09g，2.87mmol)处理搅拌的(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-9(1.34g，2.74mmol)和4-(叔丁基)苯甲酸(0.54g，3.01mmol)在DMF(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(1.01ml，5.47mmol)中的溶液。搅拌1h后，用水(60mL)和异己烷(20mL)处理混合物，并搅拌1h。通过过滤收集产物，用水(3x 10mL)洗涤，然后用异己烷(10mL)洗涤，并在真空干燥箱中干燥。将酯溶于DCM(5mL)，并用TFA(5mL)处理。2h后，用甲苯(5mL)处理混合物，并蒸发浓缩。将残留物溶于DMSO(6mL)，然后用水(20mL)处理，并搅拌1h。通过过滤收集产物，用水(3x 15mL)洗涤，然后用乙腈(2x 5mL)洗涤，并在真空干燥箱中干燥，得到1.40g(85％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C37H43N3O4的计算值：593.3；测量值：594.0[M+H]⁺，tR＝11.18min(方法9)，以及97％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.79(br,s,1H),9.16(s,2H),8.66(d,J＝8.2Hz,1H),8.45–8.27(m,2H),7.89–7.69(m,4H),7.57–7.38(m,4H),7.18–7.02(m,2H),4.77–4.62(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.30–3.24(m,1H),3.22–3.12(m,1H),1.80–1.68(m,2H),1.48–1.20(m,17H),0.96–0.82(m,3H)。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-8制备化合物86–102、104–158和296。

(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(INT-10)

使用一般步骤10制备：搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-7(0.96g，1.86mmol)、(4-(叔丁基)苯基)硼酸(0.43g，2.42mmol)和碳酸氢钠(0.39g，4.66mmol)在乙腈(5ml)、THF(5ml)和水(5ml)中的溶液用N2脱气5min。加入Pd(dppf)Cl2(0.136g，0.186mmol)并在微波中将反应加热至110℃反应45min。用EA(50mL)稀释反应，并使其通过硅藻土过滤。有机相用水(100mL)洗涤，并浓缩。通过在硅胶上层析(EA/异己烷)来纯化粗产物，得到757mg(70％)的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-10，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C35H39N3O4的计算值：565.3；无观察到的m/z，tR＝3.39min(方法8)。

(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-丙酸酯(INT-11)

将Pd/C(142mg，0.13mmol)加入搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-10(757mg，1.34mmol)的EA(100ml)溶液，并用H2使该悬浮液脱气。在H2下使混合物强力搅拌过夜，然后使其通过硅藻土过滤，并浓缩滤液，得到532mg(88％)的(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-11。LCMS-ESI(m/z)，C27H33N3O2的计算值：431.3；测量值：432.0[M+H]⁺，tR＝2.01min(方法4)。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(叔丁基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-11制备化合物159-181。

按照与165类似的方式，从(R)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸酯开始制备化合物182。

使用一般步骤13，从(S)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)-2-(4-羟基苯甲酰氨基)丙酸—化合物114制备化合物183。

依次使用一般步骤13和8，从(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-9制备化合物184-190。

按照与85类似的方式，从(R)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸酯开始制备化合物191。

(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物192)

用HATU(4.48g，11.79mmol)分批处理搅拌中的(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-9(5.50g，11.23mmol)和5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(2.13g，11.57mmol)在DMF(50mL)和DIEA(6.22ml，33.70mmol)中的溶液。搅拌1h后，用水(200mL)和异己烷(20mL)处理混合物，并搅拌10min。通过过滤收集产物，用异己烷(2x 30mL)、水(2x 50mL)洗涤，然后用MeOH(20mL)和异己烷(30mL)洗涤。将酯溶于DCM(50mL)并用TFA(10mL)处理。1h后，加入另外的TFA(15mL)。再5h后，用甲苯(20mL)处理混合物，并浓缩。残留物用乙腈(25mL)洗涤，然后溶于DMSO(20mL)，然后用水(100mL)处理并搅拌1h。通过过滤收集产物，用水(4x 50mL)洗涤，然后用乙腈(3x 30mL)洗涤，并在真空干燥箱中干燥，得到5.30g(75％)的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192，为灰白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C35H41N3O4S的计算值：599.3；无观察到的m/z，tR＝11.10min(方法10)。光学纯度为98％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,1H),9.17(s,2H),8.68(d,J＝8.3Hz,1H),8.47–8.17(m,2H),7.96–7.71(m,2H),7.64(d,J＝3.8Hz,1H),7.55–7.29(m,2H),7.26–7.02(m,2H),6.93(d,J＝3.8Hz,1H),4.79–4.48(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.27(dd,J＝13.9,4.5Hz,1H),3.12(dd,J＝13.9,10.6Hz,1H),1.90–1.58(m,2H),1.58–1.01(m,17H),1.01–0.69(m,3H)。

按照与192类似的方式，从(R)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸酯开始制备化合物193。

叔丁基(4-(叔丁基)苯甲酰基)-L-酪氨酸酯

使用一般步骤7制备。将HATU(19.2g，50.6mmol)、TEA(17.6mL，126.4mmol)和(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸酯(10.0g，42.1mmol)加入4-(叔丁基)苯甲酸(8.3g，46.4mmol)的DMF(100mL)溶液。5h后，反应混合物用EA稀释，用饱和NaHCO3水溶液和卤水洗涤，然后干燥(Na2SO4)，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到12.9g(69％)的叔丁基(4-(叔丁基)苯甲酰基)-L-酪氨酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C24H31NO4的计算值：397.5；无观察到的m/z，tR＝3.59min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71–7.65(m,2H),7.47–7.39(m,2H),7.04(t,J＝5.7Hz,2H),6.78–6.70(m,2H),6.59(d,J＝7.5Hz,1H),4.91(dt,J＝7.5,5.6Hz,1H),3.15(qd,J＝14.0,5.6Hz,2H),1.45(s,9H),1.33(s,9H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基丙酸酯(INT-12)

使用一般步骤9制备。将DIEA(3.7mL，1.2mmol)和N-苯基双(三氟甲烷磺酰亚胺)(7.0g，19.7mmol)加入叔丁基(4-(叔丁基)苯甲酰基)-L-酪氨酸酯(8.0g，17.9mmol)的溶液。搅拌36h后，用DCM稀释反应混合物，然后用10％的柠檬酸水溶液和饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩，得到9.5g(100％)叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-12，其在不经过进一步纯化的情况下使用。LCMS-ESI(m/z)，C25H30F3NO6S的计算值：529.6；无观察到的m/z，tR＝4.42min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71–7.65(m,2H),7.49–7.43(m,2H),7.32–7.26(m,2H),7.22–7.16(m,2H),6.69(d,J＝7.0Hz,1H),4.94(dt,J＝6.9,5.9Hz,1H),3.24(t,J＝7.1Hz,2H),1.41(s,9H),1.33(s,9H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯(INT-13)

将Pd(dppf)Cl2(0.87g，1mmol)加入经脱气的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-12(9.5g，24mmol)、KOAc(7.0g，72mmol)和双-频那醇硼烷(9.1g，36mmol)在DMSO(20mL)中的溶液。在N2下，使反应混合物在100℃下加热12h。用EA稀释反应混合物，然后用饱和NaHCO3水溶液和H2O洗涤。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到7.2g(60％)的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13。LCMS-ESI(m/z)，C30H42BNO5的计算值：507.5；无观察到的m/z，tR＝4.53min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(d,J＝8.0Hz,2H),7.72–7.67(m,2H),7.48–7.43(m,2H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),6.59(d,J＝7.4Hz,1H),5.05–4.92(m,1H),3.27(qd,J＝13.7,5.4Hz,2H),1.47(s,9H),1.36(m,21H)。

叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯(INT-14)

使用一般步骤10制备。将Pd(dppf)Cl2(140mg，0.2mmol)加入经脱气的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13(1.0g，2.0mmol)、Na2HCO3(420mg，3.9mmol)和5-溴-2-碘嘧啶(615mg，2.2mmol)在2/2/1的ACN/THF/H2O中的溶液。在微波反应器中，使反应混合物在110℃下加热1h。浓缩反应混合物，溶于DCM并用H2O洗涤。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到630mg(58％)的叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯—INT-14。LCMS-ESI(m/z)，C28H32BrN4O3的计算值：538.5；无观察到的m/z，tR＝4.66min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84–8.78(s,2H),8.31(t,J＝7.0Hz,2H),7.75–7.64(m,2H),7.46–7.38(m,2H),7.30(dd,J＝12.9,7.1Hz,2H),6.65(d,J＝7.2 Hz,1H),5.10–4.94(m,1H),3.43–3.20(m,2H),1.45(s,9H),1.32(s,9H)。

依次使用一般步骤10和8，从叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯—INT-14制备化合物194-236。

叔丁基(5-(叔丁基)噻吩-2-羰基)-L-酪氨酸酯

使用一般步骤7制备。将HATU(4.56 g，12.0 mmol)和TEA(4.18mL，30.0 mmol)加入5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(1.93 g，10.0 mmol)的DMF(20 mL)溶液。使混合物在室温下搅拌30 min，并加入(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸酯(2.37 g，10.0 mmol)。1 h后，将反应混合物倒在400 mL的冰水上，并过滤固体。将固体溶于DCM和EA，用MgSO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到3.6g(89％)的叔丁基(5-(叔丁基)噻吩-2-羰基)-L-酪氨酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C22H29NO4S的计算值：403.2；测量值：426.1[M+Na]⁺，tR＝9.07 min(方法2)。

叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯(INT-15)

使用一般步骤9制备。将DIEA(4.56 mL，26.17 mmol)和N-苯基双(三氟甲烷磺酰亚胺)(3.27g，9.16mmol)加入叔丁基(5-(叔丁基)噻吩-2-羰基)-L-酪氨酸酯(3.52g，8.72mmol)的溶液。搅拌18h后，用DCM稀释反应混合物，然后用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法纯化粗产物，得到4.10g(87.6％)的叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-15。LCMS-ESI(m/z)，C23H28F3NO6S2的计算值：535.1；无观察到的m/z，tR＝4.22min(方法3)。

叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯(INT-16)

将Pd(dppf)Cl2(0.27g，0.36mmol)加入经脱气的叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丙酸酯—INT-15(3.89g，7.26mmol)、KOAc(2.14g，21.79mmol)和双-频那醇硼烷(2.40g，9.44mmol)在DMSO(50mL)中的溶液。在N2下，使反应混合物在100℃下加热18h。将反应混合物倒入600mL的冰水，并过滤固体。沉淀物用EA稀释，用MgSO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到3.68g(99％)的叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-16。LCMS-ESI(m/z)，C28H40BNO5S的计算值：513.3；无观察到的m/z，tR＝4.51min(方法3)。

叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸酯(INT-17)

使用一般步骤10制备。将Pd(dppf)Cl2(30mg，0.4mmol)加入经脱气的叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-16(510mg，1.0mmol)和5-溴-2-碘嘧啶(570mg，2.0mmol)在2/2/1的ACN/THF/饱和NaHCO3水溶液(10mL)中的溶液。在微波反应器中，使反应混合物在120℃下加热1h。用水(100mL)和EA(50mL)稀释反应混合物，并用硅藻土过滤。用EA(3x 30mL)萃取水层，并用MgSO4干燥合并的有机层，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到342mg(63％)的叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸酯—INT-17。LCMS-ESI(m/z)，C26H30BrN3O3的计算值：543.1；测量值：488.0[M-tBu+H]⁺，tR＝10.95min(方法2)。

依次使用一般步骤10和8，从叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸酯—INT-17制备化合物237-247。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)苯基)-丙酸酯(INT-18)

使用一般步骤1制备。将Pd(Ph3)4(2mg，0.002mmol)加入经脱气的(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯—INT-14(100mg，0.190mmol)和Zn(CN)2(44mg，0.370mmol)在NMP(5mL)中的溶液。在微波反应器中，使混合物在80℃下加热45min，然后用DCM和H2O分层。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到75mg(84％)的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-18。LCMS-ESI(m/z)，C29H32N4O3的计算值：484.60；无观察到的m/z，tR＝4.17min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.97(s,2H),8.38(d,J＝7.9Hz,2H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.46–7.35(m,2H),7.33(d,J＝7.9Hz,2H),6.77(d,J＝6.8Hz,1H),4.96(d,J＝6.1Hz,1H),3.27(dd,J＝13.1,8.0Hz,2H),1.37(d,J＝34.5Hz,9H),1.26(d,J＝21.0Hz,9H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(N-羟基甲脒基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤2制备。使(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-18(35mg，0.07mmol)、羟胺(25μL，0.36mmol，50％的H2O溶液)和NEt3(11μL，0.08mmol)在EtOH(5mL)中的溶液在80℃下加热1.5h。浓缩反应混合物，溶于DCM并用H2O洗涤，得到22mg的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(N-羟基甲脒基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C29H35N5O4的计算值：517.6；测量值462.2[M-^tBu+H]⁺，tR＝3.72min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.19(s,2H),8.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.67(dd,J＝8.5,2.1Hz,2H),7.40(dd,J＝9.2,8.0Hz,2H),7.34(dd,J＝10.3,8.4Hz,2H),6.74(dd,J＝7.1,4.7Hz,1H),5.00(q,J＝5.6Hz,1H),2.83(d,J＝5.3Hz,2H),1.44(s,9H),1.28(d,J＝22.0Hz,9H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,2,4-噁二唑-3-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(化合物248)

使用一般步骤5制备。使庚酸(7mg，0.05mmol)、HOBt(12mg，0.09mmol)和EDC(13mg，0.09mmol)的溶液在80℃下加热2h。反应混合物用EtOAc稀释，并用NaHCO3洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。将得到的混合物溶于EtOH(2mL)，并在微波反应器中在80℃下加热45min。浓缩混合物并通过预制备的HPLC纯化，得到1.5mg的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,2,4-噁二唑-3-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C36H45N5O4的计算值：611.8；无观察到的m/z，tR＝5.5min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.45(s,2H),8.44(d,J＝8.3Hz,2H),7.71(d,J＝8.5Hz,2H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),7.38(d,J＝8.3Hz,2H),6.80(d,J＝7.3Hz,1H),5.04(dd,J＝12.7,5.5Hz,1H),3.37(ddd,J＝18.9,13.8,5.5Hz,2H),3.02(t,J＝7.6Hz,2H),1.92(dt,J＝15.3,7.5Hz,2H),1.49(s,9H),1.44–1.28(m,15H),0.93(t,J＝7.1Hz,3H)。

使用一般步骤8将(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,2,4-噁二唑-3-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯脱保护，得到1.4mg(总计6％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,2,4-噁二唑-3-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物248。LCMS-ESI(m/z)，C32H37N5O4的计算值：555.68；无观察到的m/z，tR＝11.03min(方法2)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.41(s,2H),8.47(d,J＝8.2Hz,2H),7.66(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(dd,J＝15.1,8.4Hz,4H),6.60(d,J＝6.8Hz,1H),5.21–4.95(m,1H),3.43(ddd,J＝20.0,14.0,5.6Hz,2H),3.05–2.90(m,2H),1.98–1.76(m,2H),1.55–1.22(m,15H),0.91(t,J＝7.0Hz,3H)。

叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤10制备。将Pd(dppf)Cl2(24mg，0.03mmol)加入经脱气的叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸酯—INT-17(180mg，0.3mmol)、碳酸钠(70mg，0.7mmol)和4-羟基苯基硼酸(55mg，0.4mmol)在5mL 2/2/1的ACN/THF/H2O中的溶液。在微波反应器中，使反应混合物在110℃下加热45min。使混合物通过硅藻土过滤，浓缩，然后溶于DCM，并用H2O洗涤。浓缩有机层并通过预制备的HPLC纯化，得到131mg(78％)的叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C32H35N3O4S的计算值：557.7；无观察到的m/z，tR＝4.08min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.98(s,2H),8.35(d,J＝8.1Hz,2H),7.49(d,J＝8.6Hz,2H),7.40–7.31(m,3H),6.94(d,J＝8.5Hz,2H),6.81(d,J＝3.8Hz,1H),6.51(d,J＝7.5Hz,1H),5.00(dd,J＝12.9,5.8Hz,1H),3.28(qd,J＝13.8,5.6Hz,2H),1.47(s,9H),1.39(s,9.H)。

(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(癸氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物249)

使用一般步骤12制备。将1-溴癸烷(8μL，0.05mmol)和K2CO3(8mg，0.05mmol)加入叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(20mg，0.04mmol)的DMF(0.5mL)溶液。反应混合物在40℃下加热18h，然后用DCM稀释并用H2O洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并浓缩。使用一般步骤8将粗物质脱保护，然后通过预制备的HPLC纯化，得到3.9mg(17％)的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(癸氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物249。LCMS-ESI(m/z)，C38H47N3O4S的计算值：641.9；无观察到的m/z，tR＝13.49min(方法2)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.01(s,2H),8.36(d,J＝8.1Hz,2H),7.56(d,J＝8.7Hz,2H),7.44(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(d,J＝3.8Hz,1H),7.03(d,J＝8.8Hz,2H),6.80(d,J＝3.8Hz,1H),6.54(d,J＝6.8Hz,1H),5.13(d,J＝6.8Hz,1H),4.01(t,J＝6.6Hz,2H),3.44(d,J＝4.9Hz,2H),1.91–1.72(m,2H),1.47(dd,J＝15.0,7.3Hz,2H),1.38(s,9H),1.28(s,12H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯制备化合物250–252。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(叔丁基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物253)

使用一般步骤11制备。将Pd2(dba)3(9mg，0.01mmol)和2-二环己基膦-2’-(N,N-二甲氨基)联苯(6mg，0.015mmol)加入经脱气的INT-14(50mg，0.09mmol)、叔丁醇钠(18mg，0.19mmol)和4-叔丁基哌啶HCl(23mg，0.11mmol)在二氧六环(2.5mL)中的溶液。在微波反应器中，使反应混合物在120℃下加热45min。用EA稀释混合物，并用NaHCO3洗涤。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过预制备的HPLC纯化。使用一般步骤8将分离的中间体脱保护，得到2.9mg(6％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(叔丁基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物253。LCMS-ESI(m/z)，C33H42N4O3的计算值：542.7；测量值543.3[M+H]⁺，tR＝10.79min(纯净)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,2H),8.23(d,J＝8.0Hz,2H),7.72(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(dd,J＝11.3,8.4Hz,4H),6.79(d,J＝6.8Hz,1H),5.18(d,J＝6.5Hz,1H),3.89(d,J＝11.9Hz,2H),3.47(d,J＝5.2Hz,2H),2.83(t,J＝11.5Hz,2H),1.88(d,J＝12.0Hz,2H),1.52–1.37(m,2H),1.34(s,9H),1.24(dd,J＝24.7,12.8Hz,1H),0.92(s,9H)。

使用一般步骤11，然后使用一般步骤8，从INT-14制备化合物254。

叔丁基(S)-3-(4-(5-(2H-四唑-5-基)嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)-苯甲酰氨基)丙酸酯

将NH4Cl(7.5mg，1.4mmol)和NaN3(7mg，0.1mmol)加入叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-18(34mg，0.07mmol)的DMF(2mL)溶液。反应混合物在100℃下加热3h，然后用EA稀释并用NaHCO3洗涤。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过预制备的HPLC纯化，得到4.6mg(12％)的叔丁基(S)-3-(4-(5-(2H-四唑-5-基)嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C29H33N7O3的计算值：527.6；无观察到的m/z，tR＝3.83min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.35(s,2H),8.42(d,J＝8.1Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.5Hz,2H),7.43(d,J＝8.2Hz,2H),7.11(d,J＝7.8Hz,1H),5.13(dd,J＝14.4,7.1Hz,1H),3.28(ddd,J＝21.0,13.6,6.7Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,9H),1.33(s,9H)。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(4-(5-(2H-四唑-5-基)嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯制备化合物255。

使用一般步骤10、12和8，从INT-14和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异吲哚啉-1-酮制备化合物256。

使用一般步骤10、12和8，从INT-14和6-羟基吡啶-3-硼酸频那醇酯制备化合物257。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从INT-13和5-(苄氧基)-2-氯嘧啶制备化合物258。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从INT-14和适当的硼酸制备化合物259和260。叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-3-氧代哌嗪-1-羧酸酯

将3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(330 mg，1.65mmol)、碘化亚铜(31.4 mg，0.17 mmol)、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(234mg，1.65 mmol)和碳酸钾(456 mg，3.30 mmol)加入搅拌中的1-溴-4-(庚氧基)苯(447 mg，1.65 mmol)的二氧六环(5 mL)溶液。反应混合物在120℃下加热16 h。使反应混合物通过硅藻土塞，用EA(50mL)洗脱。有机物用氯化铵(25 mL)、水(25 mL)和卤水(25 mL)洗涤，然后用MgSO4干燥，并浓缩，得到602 mg(89％)的叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-3-氧代哌嗪-1-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C22H34N2O4的计算值：390.5；测量值319.0[M+H]⁺，tR＝2.90 min.(方法4)。

1-(4-(庚氧基)苯基)哌嗪-2-酮

将4M HCl的二氧六环溶液(2.07 mL，8.30 mmol)加入叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-3-氧代哌嗪-1-羧酸酯(540 mg，1.38 mmol)。反应混合物在室温下搅拌2 h。过滤沉淀物，用己烷(5 mL)洗涤并干燥。通过柱层析(79/20/1的DCM/MeOH/NH4)纯化粗产物，得到325 mg(80％)的1-(4-(庚氧基)苯基)哌嗪-2-酮，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C17H26N2O2的计算值：290.4；测量值291.0[M+H]⁺，tR＝1.49min.(方法4)。

使用一般步骤11和8，从INT-12和1-(4-(庚氧基)苯基)哌嗪-2-酮制备化合物261。

使用一般步骤11和8，以类似的方式从INT-12和1-(4-(庚氧基)苯基)咪唑啉-2-酮制备化合物262。

使用一般步骤7、14、15，然后使用一般步骤4，使用(S)-甲基2-氨基-3-(4-硝基苯基)丙酸酯盐酸盐、4-(叔丁基)苯甲酸和1-(4-(庚氧基)苯基)哌啶-4-酮制备化合物263。

叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸酯

在-78℃下，将丁基锂(985μl，2.46mmol)加入搅拌中的1-溴-4-(庚氧基)苯(668mg，2.46mmol)的THF(5mL)溶液。30min后，加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(491mg，2.46mmol)的THF(2mL)溶液。10min后，移除冷浴，并使反应混合物搅拌16h。将反应混合物倒在NH4Cl(50mL)上并用Et2O(3x 20mL)萃取。用水(20mL)洗涤合并的有机物，用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含5-70％AcMe的异己烷)纯化粗产物，得到0.4g(33％)的叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C23H37NO4的计算值：391.5；测量值414.0[M+Na]⁺，tR＝2.24min.(方法4)。

4-(4-(庚氧基)苯基)哌啶(INT-19)

将搅拌中的叔丁基4-(4-(庚氧基)苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸酯(388mg，0.99mmol)和三乙基硅烷(791μl，4.95mmol)在DCM(2mL)中的溶液冷却至-30℃，以逐滴滴加的方式缓慢地加入2,2,2-三氟乙酸(379μl，4.95mmol)。使反应混合物缓慢升温并继续搅拌16h。将反应混合物倒在冰水/NaOH(50mL/5mL，2M)上，并用DCM(3x 20mL)萃取。合并的有机萃取物依次用水(50mL)和NaHCO3(20mL)洗涤，用MgSO4干燥，并蒸发浓缩，得到166mg(58％)的4-(4-(庚氧基)苯基)哌啶—INT-19，为白色、蜡状固体。LCMS-ESI(m/z)，C18H29NO的计算值：275.4；测量值276.0[M+H]⁺，tR＝2.88min.(方法11)。

使用一般步骤11，然后使用一般步骤8，使用INT-12和INT-19制备化合物264。

使用一般步骤11，然后使用一般步骤8，按照与264类似的方式，使用INT-12和3-(4-(庚氧基)苯基)吡咯烷制备化合物265。

使用一般步骤11，然后使用一般步骤8，使用INT-12和1-([1,1’-联苯基]-4-基)哌嗪制备化合物266。

使用一般步骤12、8、11，然后使用一般步骤8，使用INT-12、叔丁基4-(4-羟基苯基)哌嗪-1-羧酸酯和1-溴庚烷制备化合物267。

使用一般步骤11、8、11，然后使用一般步骤8，使用INT-12、1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯和1-溴-4-(庚氧基)苯制备化合物268。

依次使用一般步骤10、10和8，使用5-溴-2-碘吡啶、INT-13和(4-(庚氧基)苯基)硼酸制备化合物269。

依次使用一般步骤10、10和8，使用5-溴-2-碘吡啶、(4-(庚氧基)苯基)硼酸和INT-13制备化合物270。

依次使用一般步骤10、10和8，使用5-溴-2-碘嘧啶、(4-(庚氧基)苯基)硼酸和INT-13制备化合物271。

依次使用一般步骤10、10和8，使用2-溴-5-碘吡嗪、(4-(庚氧基)苯基)硼酸和INT-13制备化合物272。

依次使用一般步骤10、10和8，使用3-氯-6-碘哒嗪、(4-(庚氧基)苯基)硼酸和INT-13制备化合物273。

3-(4-溴苯基)-6-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪(INT-20)

将乙酸(1mL)加入搅拌中的4-溴苯甲酰肼(1.85g，8.62mmol)的乙醇(10mL)溶液。反应混合物在60℃下搅拌30min，然后加入2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮(1.35g，4.31mmol)—INT-4和乙酸钠(0.389g，4.74mmol)，并使混合物加热回流30min。将反应混合物冷却至室温，并过滤得到的沉淀物，并用异己烷(20mL)洗涤，然后干燥。将固体溶于NMP，并加热至120℃反应16h。将粗物质冷却至室温，用Et2O(4mL)稀释，过滤，用乙醇(3x 2mL)研磨碎，过滤并干燥，得到241mg(13％)的3-(4-溴苯基)-6-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪—INT-20，为橙色固体。LCMS-ESI(m/z)，C22H24BrN3O的计算值：425.1；测量值426.3[M+H]⁺，tR＝3.40min(方法8)。

按照与79类似的方式，使用3-(4-溴苯基)-6-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪—INT-20代替2-(4-溴苯基)-4-(4-(庚氧基)苯基)噻唑制备化合物274。

6-(4-溴苯基)-3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪(INT-21)

将乙酸(1mL)加入搅拌中的4-(庚氧基)苯甲酰肼(400mg，1.60mmol)的乙醇(15mL)溶液。反应混合物在60℃下搅拌30min，然后加入2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(222mg，0.80mmol)和乙酸钠(72.1mg，0.88mmol)，并使溶液加热回流2h。将反应混合物冷却至室温，并过滤得到的晶体，用异己烷(20mL)洗涤然后干燥，得到108mg(31％)的6-(4-溴苯基)-3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪—INT-21。LCMS-ESI(m/z)，C22H24BrN3O的计算值：425.1；测量值426.1[M+H]⁺，tR＝3.38min(方法8)。

按照与274类似的方式，使用6-(4-溴苯基)-3-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪—INT-21代替3-(4-溴苯基)-6-(4-(庚氧基)苯基)-1,2,4-三嗪制备化合物275。

使用一般步骤7和8，使用274制备化合物276。

依次使用一般步骤10、10和8，使用INT-16和5-溴-2-碘吡啶制备化合物277和278。

依次使用一般步骤10、10和8，使用INT-16和3-氯-6-碘哒嗪制备化合物279和280。

依次使用一般步骤10、10和8，使用INT-16和2-溴-5-碘吡嗪制备化合物281和282。

依次使用一般步骤7和8，从化合物279和甘氨酸叔丁酯制备化合物283。

依次使用一般步骤7和8，从化合物281和甘氨酸叔丁酯制备化合物284。

依次使用一般步骤7和8，从化合物277和甘氨酸叔丁酯制备化合物285。

2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-溴苯甲酸酯

将TEA(0.72ml，5.2mmol)加入2-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)乙酮—INT-4(1.3g，4.2mmol)和4-溴苯甲酸(0.70g，3.5mmol)在ACN(30mL)中的溶液。搅拌过夜后，将反应混合物倒在柠檬酸水溶液和EA上，然后搅拌10min，之后通过过滤收集固体。滤饼用水和异己烷洗涤，然后干燥，得到905mg(57％)的2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-溴苯甲酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C22H25BrO4的计算值：432.1；测量值433.2[M+H]⁺，tR＝3.24min(方法8)。

2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑

将CH3COONH4(1600mg，20.9mmol)加入2-(4-(庚氧基)苯基)-2-氧代乙基4-溴苯甲酸酯(905mg，2.09mmol)的甲苯(6ml)溶液。在115℃下加热过夜后，用NaHCO3水溶液稀释反应混合物，并用DCM萃取。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，并减压除去溶剂。通过层析法(EA/己烷)纯化粗反应混合物，得到370mg(33％)的2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑。LCMS-ESI(m/z)，C22H25BrN2O的计算值：412.1；测量值413.2[M+H]⁺，tR＝2.33min(方法8)。

2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑

将NaH(40mg，980mmol)加入2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑(370g，900mmol)的DMF(4ml)溶液。2h后，逐滴加入溶于THF(2ml)的2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(160g，990mmol)，并使反应混合物搅拌过夜。反应混合物用EA稀释，并用NaHCO3水溶液洗涤。用MgSO4干燥有机物，过滤，并减压除去溶剂。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到32mg(65％)的2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑，为棕褐色固体。LCMS-ESI(m/z)，C28H39BrN2O2Si的计算值：542.2；测量值543.3[M+H]⁺，tR＝3.35min(方法8)。

(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯

用I2(12mg，0.05mmol)处理搅拌的锌(68mg，1.03mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液。颜色消失后，加入((R)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙酸酯(110mg，0.34mmol)和另外的I2(12mg，0.05mmol)。30min后，使混合物脱气，然后加入2-(4-溴苯基)-5-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑(170mg，0.31mmol)、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-联苯基]-2-基)膦(7mg，0.02mmol)和Pd2(dba)3(8mg，7.8μmol)。进一步脱气后，加入DMF(2mL)并使反应混合物在50℃下加热过夜。通过柱层析(EA/己烷)纯化反应混合物，得到55mg(25％)的(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯，为无色油状物。LCMS-ESI(m/z)，C37H55N3O6Si的计算值：665.9；测量值666.4[M+H]⁺，tR＝3.10min(方法8)。

(S)-甲基2-氨基-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)-丙酸酯

使用一般步骤8，从(S)-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯制备(S)-甲基2-氨基-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C26H33N3O3的计算值：435.6；测量值436.3[M+H]⁺，tR＝1.43min(方法8)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸盐酸盐(化合物286)

将HATU(53mg，0.14mmol)加入4-(叔丁基)苯甲酸(25mg，0.14mmol)、(S)-甲基2-氨基-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯(55mg、0.13mmol)和TEA(53μl，0.38mmol)在DMF(1mL)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌2h，用DCM稀释，并用NaHCO3水溶液洗涤。干燥有机层，浓缩并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到14mg(17％)的甲基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C37H45N3O4的计算值：595.8；测量值596.4[M+H]⁺，tR＝2.33min.(方法8)。

使用一般步骤4使分离的酯中间体脱保护，得到14mg(17.5％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)苯基)丙酸盐酸盐—化合物286，为淡棕色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O4的计算值：581.8；测量值582.4[M+H]⁺，tR＝6.56min(方法9)。

4-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑

将(4-(庚氧基)苯基)硼酸(1.00g，4.24mmol)、4-溴-1H-咪唑(0.31g，2.1mmol)、Cu-(TMEDA)2(OH)2Cl2(0.10g，0.21mmol)和DCM(12ml)加入小瓶。在室温下搅拌42h后，通过层析法(EA/己烷)纯化混合物，得到80mg不纯的产物。通过层析法(CAN/DCM)进一步纯化，得到42mg(6％)的4-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑，为无色油状物。LCMS-ESI(m/z)，C16H21BrN2O的计算值：336.1；值337.1[M+H]⁺，tR＝2.71min(方法8)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丙酸(化合物287)

使用一般步骤10制备。向含有溶于2/2/1的THF/CAN/H2O(3mL)的INT-13(96mg，0.19mmol)和4-溴-1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑(64mg，0.19mmol)的小瓶中加入Na2CO3(40mg，0.38mmol)。使反应混合物脱气，加入Pd(dppf)Cl2(14mg，0.02mmol)。在微波反应器中，在120℃下加热30min后，用EA稀释混合物，用NaHCO3水溶液洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化，得到14mg(12％)的中间体叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丙酸酯，为白色固体。

根据一般步骤8使中间体脱保护，得到9mg(8％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4-(庚氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丙酸—化合物287，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H43N3O4的计算值：581.3；测量值582.2[M+H]⁺，tR＝8.33min(方法9)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4’-甲基-[1,1’-联苯基]-4-基)-1H-吡唑-4-基)苯基)丙酸(化合物288)

使用一般步骤10制备。向含有溶于2/1的ACN/H2O(3mL)的INT-13(100mg，0.20mmol)和4-溴-1-(4’-甲基-[1,1’-联苯基]-4-基)-1H-吡唑(63mg，0.201mmol)的小瓶中加入饱和NaHCO3水溶液(670μL，0.60mmol)。使反应混合物脱气，并加入Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)。在微波反应器中，在120℃下加热60min后，用DCM稀释混合物，用NaHCO3水溶液洗涤，通过相分离柱，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化，得到58mg(47％)的中间体叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4’-甲基-[1,1’-联苯基]-4-基)-1H-吡唑-4-基)苯基)丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C40H43N3O3的计算值：613.8；测量值614.0[M+H]⁺，tR＝3.02min(方法8)。使中间体在4M的HCl/二氧六环中搅拌132h，并过滤。用己烷洗涤得到的固体，得到13mg固体产物。将滤液装载至强阴离子交换(SAX)柱上，用MeOH洗涤，并用含％AcOH的MeOH溶液洗脱。合并洗脱液与研磨碎的固体，并在真空中浓缩，得到18mg(32％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(1-(4’-甲基-[1,1’-联苯基]-4-基)-1H-吡唑-4-基)苯基)丙酸288，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C36H35N3O3的计算值：557.3；测量值558.0[M+H]⁺，tR＝9.37min(方法9)。

甲基2-(4-溴苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸酯

使用一般步骤7制备。将HATU(1090mg，2.9mmol)加入2-氨基-2-(4-溴苯基)乙酸甲酯HCl(730mg，2.6mmol)、5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(480mg，2.6mmol)和TEA(1090μl，7.8mmol)在DMF(10mL)中的溶液。搅拌过夜后，用EA(100mL)稀释反应混合物，并用1M的HCl(100mL)和卤水洗涤。有机层用Mg2SO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到900mg(76％)的甲基2-(4-溴苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸酯，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C18H20BrNO3S的计算值：410.3；测量值412.0[M+2]⁺，tR＝2.71min(方法8)。

甲基2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙酸酯

使用一般步骤10制备。在40℃下，使2-(4-溴苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸酯(900mg，2.2mmol)、KOAc(650mg，6.6mmol)和4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(670mg，2.6mmol)在DMSO(10mL)中的溶液脱气。加入PdCl2dppf(80mg，0.11mmol)，并使混合物在100℃下加热3h。通过层析法(含1％TEA的EA/己烷)纯化反应混合物，得到491mg(41％)的甲基2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C24H32BNO5S的计算值：457.4；测量值458.0[M+H]⁺，tR＝2.89min(方法8)。

2-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸

使用一般步骤10制备。用饱和NaHCO3水溶液(1600μl，1.40mmol)处理甲基2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙酸酯(320mg，0.71mmol)和5-溴-2-碘嘧啶(220mg，0.78mmol)在THF(2mL)和ACN(2mL)中的混合物，并脱气(N2鼓泡)。加入PdCl2dppf(26mg，0.04mmol)，并在微波反应器中使混合物在120℃下加热30min。将混合物倒在H2O(30mL)上，用AcOH酸化并用EA(3x 15mL)萃取。合并的有机物用MgSO4干燥，蒸发浓缩，并通过层析法(含1％AcOH的EA/己烷)纯化，得到160mg(46％)的2-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C21H20BrN3O3S的计算值：473.0；测量值474.0[M+H]⁺，tR＝2.68min(方法8)。

(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物289)

使用一般步骤10制备。使2-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)乙酸(160mg，0.34mmol)、(4-(庚氧基)苯基)硼酸(94mg，0.40mmol)和饱和NaHCO3水溶液(930μl，0.84mmol)在ACN(1.5mL)和THF(1.5mL)中的溶液脱气(N2鼓泡)。加入PdCl2(dppf)(262mg，0.34mmol)，并在微波反应器中使反应混合物在110℃下加热50min。用EA和H2O使反应分层。有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩并通过层析法(含1％AcOH的EA/己烷)纯化，得到113mg(55％)的2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-2-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)乙酸—化合物289，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C34H39N3O4S的计算值：585.3；测量值586.0[M+H]⁺，tR＝3.37min(方法9)。

(S)-N-(1-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-氧代丙-2-基)-4-(叔丁基)苯甲酰胺

用NH4Cl(180mg，3.3mmol)、DIEA(760μl，4.1mmol)和HATU(170mg，0.4mmol)处理化合物85(245mg，0.413mmol)的DMF(5mL)溶液。搅拌过夜后，用EA(50mL)稀释反应混合物，用0.5M的HCl水溶液(100mL)和卤水(20mL)洗涤，然后用MgSO4干燥，并浓缩。用ACN(4mL)使残留物再成浆，得到204mg(77％)的(S)-N-(1-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-氧代丙-2-基)-4-(叔丁基)苯甲酰胺，为细粒的白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C37H44N4O3的计算值：592.3；测量值593.0[M+H]⁺，tR＝3.43min(方法6)。

(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-羟基苯基)丁酸酯

使用一般步骤7制备。用HATU(3.3g，8.5mmol)处理(S)-甲基3-氨基-4-(4-羟基苯基)丁酸酯盐酸盐(2.1g，8.7mmol)、4-(叔丁基)苯甲酸(1.6g，9.0mmol)和DIEA(3.5ml，18.8mmol)在DMF(20mL)和DCM(20mL)中的溶液。1h后，将混合物倒在1M的HCl(100mL)上，并用EA(3x 50mL)萃取。依次用1M的HCl(50mL)、水(50mL)和卤水(20mL)洗涤合并的有机萃取物，然后用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化得到的残留物，得到2.3g(72％)的(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-羟基苯基)丁酸酯，为白色针状结晶。LCMS-ESI(m/z)，C22H27NO的计算值：369.4，测量值370.0[M+H]⁺，tR＝2.52min(方法6)。

(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-苯基)丁酸酯

使用一般步骤9制备。搅拌的(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-羟基苯基)丁酸酯(2.30g，6.3mmol)的DCM(25mL)溶液用DIEA(1.4ml，7.6mmol)处理，然后用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(2.5g，6.9mmol)处理。18h后，用DCM(100mL)、H2O(50mL)和NaHCO3(75mL)稀释反应混合物，并搅拌1h。分离有机层，用NaHCO3(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到2.5g稠油状的(75％)的(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丁酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C23H26F3NO6S的计算值：501.5，测量值502[M+H]⁺，tR＝3.20min(方法6)。

(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丁酸酯

在N2下，将4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(530mg，2.1mmol)、(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)丁酸酯(810mg，1.6mmol)、KOAc(280mg，4.8mmol)和DMSO(14mL)加入小瓶。使溶液脱气。加入Pd(dppf)Cl2(59mg，0.08mmol)，并将溶液加热至80℃反应6h。将反应混合物冷却至室温，用EA(100mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(50ml)和卤水(50mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，浓缩并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到446mg(57％)的(S)-甲基3-(4-叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丁酸酯，为无色晶状固体。LCMS-ESI(m/z)，C28H38BNO5的计算值：479.4，测量值480.3[M+H]⁺，tR＝2.86min(方法6)。

(S)-甲基4-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-丁酸酯

使用一般步骤10制备。将(S)-甲基3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丁酸酯(390mg，0.81mmol)、5-溴-2-碘嘧啶(240mg，0.85mmol)、Na2CO3(170mg，1.6mmol)、THF(1.5mL)、ACN(1.5mL)和H2O(0.75mL)加入小瓶。使溶液脱气并加入PdCl2(dppf)(60mg，0.08mmol)。在微波反应器中使反应混合物在110℃下加热60min。冷却样品，用EA(50mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(30mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到205mg(49％)的(S)-甲基4-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丁酸酯，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C26H28BrN3O3的计算值：510.4，测量值512.2[M+H]⁺，tR＝2.77min(方法6)。

(S)-3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丁酸(化合物291)

使用一般步骤10和4制备。将(S)-甲基4-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丁酸酯(180mg，0.35mmol)、(4-(庚氧基)苯基)硼酸(98mg，0.41mmol)、Na2CO3(73mg，0.69mmol)、ACN(1.2mL)、THF(1.2mL)和H2O(0.7mL)加入小瓶。使溶液脱气，加入Pd(dppf)Cl2(25mg，0.03mmol)，并在微波反应器中使反应混合物在110℃下加热80min。反应混合物用EA(50mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(30mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到44mg的甲酯中间体。将固体溶于THF(1mL)和1M的LiOH(1mL)。使溶液在室温下搅拌1h，浓缩，并加入1M的HCl(1.5mL)。通过过滤收集固体，用水(2x 5mL)和己烷(2x 5mL)洗涤，得到19mg(9％)的(S)-3-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-4-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丁酸—化合物291，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C38H45N3O4的计算值：607.8，测量值608.4[M+H]⁺，tR＝10.99min(方法10)。

5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶

将30％的甲醇钠溶液(0.40mL，2.26mmol)加入搅拌的5-溴-2,4-二氯嘧啶(500mg，2.19mmol)的MeOH(5mL)溶液。使反应混合物在室温下搅拌2h，然后浓缩。将残留物溶于水(5mL)中，并用EA(3x 5mL)萃取。合并的有机层用卤水洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩，得到432mg(88％)的5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C5H4BrClN2O的计算值：223.4；测量值224.2[M+H]⁺，tR＝7.66min.(方法2)。

5-溴-2-碘代-4-甲氧基嘧啶

使用一般步骤16制备：将碘化钠(125mg，0.838mmol)加入搅拌的5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶(100mg，0.447mmol)在57％的HI水溶液(1.0mL)中的溶液。使反应混合物在40℃下搅拌16h，冷却，然后用NaHCO3(5mL)淬灭，并用EA(3x 5mL)萃取。用卤水洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，并浓缩，得到22.0mg(16％)的5-溴-2-碘代-4-甲氧基嘧啶，为灰白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C5H4BrIN2O的计算值：314.9；测量值315.9[M+H]⁺，tR＝8.22min.(方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.25(s,1H),4.07(s,3H)。

叔丁基(S)-3-(4-(5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯

使用一般步骤10制备：使叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13(30.0mg，0.06mmol)、5-溴-2-碘基-4-甲氧基嘧啶(22.3mg，0.07mmol)和碳酸钠(12.5mg，0.12mmol)在乙腈(0.80mL)、THF(0.80mL)和H2O(0.40mL)中的混合物脱气10min。加入Pd(dppf)Cl2:CH2Cl2(5mg，0.005mmol)，并在微波中使反应混合物在110℃下加热30min。一经冷却，用NaHCO3(5mL)稀释反应，用EA(3x 5mL)萃取，并且用MgSO4干燥合并的有机物，并浓缩。通过柱层析(EA/己烷)纯化残留物，得到20.0mg(60％)的叔丁基(S)-3-(4-(5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C29H34BrN3O4的计算值：568.5；测量值514.2[M-tBu+H]⁺，tR＝11.0min.(方法2)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤10制备：使叔丁基(S)-3-(4-(5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯(18.0mg，0.031mmol)、(4-(庚氧基)苯基)硼酸(10.0mg，0.042mmol)和碳酸钠(8.97mg，0.084mmol)在乙腈(0.80mL)、THF(0.80mL)和H2O(0.40mL)中的混合物脱气10min。加入Pd(dppf)Cl2:CH2Cl2(3.09mg，0.003mmol)，并在微波中使反应混合物在110℃下加热30min。一经冷却，用NaHCO3(5mL)稀释反应，并用EA(3x 5mL)萃取。合并的有机物用MgSO4干燥，并浓缩。通过柱层析(EA:己烷)纯化残留物，得到20.0mg(60％)的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯，为淡黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C42H53N3O5的计算值：679.8；没有观察到离子，tR＝13.83min.(方法2)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物292)

使用一般步骤8制备：用TFA(0.350mL)处理叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(20.0mg，0.029mmol)的DCM(1mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌12h。浓缩溶剂并通过制备型HPLC纯化，得到15.0mg(82％)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-4-甲氧基嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物292，为淡黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C38H45N3O5的计算值：623.8；没有观察到离子，tR＝12.17min.(方法2)。

依次使用一般步骤10、10和8，使用叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13和5-溴-2-氯-N,N-二甲基嘧啶-4-胺制备化合物293。

依次使用一般步骤10、10和8，使用叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13和5-溴-2-碘基-4-甲基吡啶制备化合物294。

5-溴-2-碘代-4-(三氟甲基)吡啶

使用一般步骤17制备：将碘化钠(518mg，3.45mmol)加入搅拌的5-溴-2-氯-4-(三氟甲基)吡啶(150mg，0.576mmol)的乙腈(2mL)溶液。将反应混合物加热至40℃并加入乙酰氯(26.0mg，0.345mmol)。使反应混合物在40℃下搅拌90min。一经冷却，用NaHCO3(5mL)淬灭反应，并用EA(3x 5mL)萃取。合并的有机物用卤水(10mL)洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩，得到80.0mg(40％)的5-溴-2-碘代-4-(三氟甲基)吡啶，为白色晶状固体，其不经过纯化用于后续步骤。LCMS-ESI(m/z)，C6H2BrF3IN的计算值：351.9；测量值352.5[M+H]⁺，tR＝3.91min.(方法1)。

依次使用一般步骤10、10和8，使用叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-13和5-溴-2-碘基-4-(三氟甲基)吡啶制备化合物295。

(S)-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)甘氨酸(化合物297)

使用一般步骤7和8制备：将HATU(124mg，0.327mmol)加入(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85(185mg，0.312mmol)、2-氨基乙酸叔丁酯盐酸盐(52.2mg，0.312mmol)和DIEA(163μl，0.935mmol)在DMF(3mL)中的溶液。混合物在室温下搅拌1h。粗物质用EA(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和卤水(20mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，并减压除去溶剂。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到中间体叔丁酯(110mg)。

将叔丁酯溶于DCM(1mL)，并加入TFA(2mL)。溶液在室温下搅拌3h，并减压除去溶剂。将粗混合物溶于DMSO(0.8mL)，并通过加入水(3mL)来沉淀。过滤沉淀物，用水(3mL)和己烷(2x 2mL)洗涤，得到58mg(28％)的(S)-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)甘氨酸—化合物297，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C39H46N4O5的计算值：650.4；测量值651.4[M+H]⁺，tR＝10.43min(方法10)。计算得到的光学纯度为92％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.62(s,1H),9.15(s,2H),8.60(d,J＝8.6Hz,1H),8.49–8.40(m,1H),8.35–8.25(m,2H),7.84–7.70(m,4H),7.58–7.49(m,2H),7.48–7.41(m,2H),7.16–7.02(m,2H),4.90–4.75(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.93–3.75(m,2H),3.25(dd,J＝13.8,3.8Hz,1H),3.09(dd,J＝13.7,11.2Hz,1H),1.79–1.68(m,2H),1.51–1.21(m,17H),0.94–0.80(m,3H)。

(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸(化合物298)

使用一般步骤7和8制备：将HATU(116mg，0.31mmol)加入搅拌中的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85(173mg，0.29mmol)、3-氨基丙酸叔丁酯盐酸盐(53mg，0.29mmol)和DIEA(153μl，0.87mmol)在DMF(3mL)中的溶液。粗物质用EA(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和卤水(20mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，并减压除去溶剂。通过层析法(EA/己烷)纯化粗产物，得到中间体叔丁酯(122mg)。

将叔丁酯溶于DCM(1mL)，并加入TFA(2mL)。反应混合物在室温下搅拌3h，并减压除去溶剂。将粗混合物溶于DMSO(0.8mL)，并通过加入水(3mL)来沉淀。过滤沉淀物，用水(3mL)和己烷(2x 2mL)洗涤，得到48mg(25％)的(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸—化合物298，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C40H48N4O5的计算值：664.4；测量值665.4[M+H]⁺，tR＝10.36min(方法10)。计算得到的光学纯度为92％的e.e.(手性方法，流动相为40％的溶剂A、60％的溶剂B)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.26(s,1H),9.15(s,2H),8.51(d,J＝8.5Hz,1H),8.40–8.25(m,2H),8.25–8.14(m,1H),7.96–7.65(m,4H),7.65–7.36(m,4H),7.28–6.99(m,2H),4.84–4.64(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.32–3.24(m,2H),3.17(dd,J＝13.7,4.4Hz,1H),3.06(dd,J＝13.7,10.4Hz,1H),2.41(t,J＝6.9Hz,2H),1.81–1.68(m,2H),1.50–1.20(m,17H),0.88(t,J＝6.7Hz,3H)。

(S)-4-(叔丁基)-N-(3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-(甲磺酰胺基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺(化合物299)

将EDC(40.3mg，0.21mmol)加入(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85(78.0mg，0.13mmol)、甲烷磺酰胺(20.0mg，0.21mmol)和DMAP(16.1mg，0.13mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液，并使溶液在室温下搅拌过夜。反应混合物用EA(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(2x 20mL)和卤水(20mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，并减压除去溶剂。通过层析法(己烷/EA)纯化粗产物，得到36mg(40％)的(S)-4-(叔丁基)-N-(3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-(甲磺酰胺基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺—化合物299，为无色固体。LCMS-ESI(m/z)，C38H46N4O5S的计算值：670.3；测量值671.3[M+H]⁺，tR＝11.01min(方法10)。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85制备化合物300-304。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从(S)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-异丙基苯甲酰氨基)丙酸—化合物94制备化合物305-317。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(己氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物225制备化合物318。

(S)-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)甘氨酸(化合物319)

使用一般步骤7和4制备：将TEA(93μl，0.67mmol)加入(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192(100mg，0.167mmol)、2-氨基乙酸甲酯盐酸盐(23.03mg，0.18mmol)和HATU(76mg，0.20mmol)在DMF(2mL)中的溶液。溶液在室温下搅拌18h。反应混合物用EA(25mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(2x 25mL)和1M的HCl(2x 25mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥，过滤，并浓缩。通过层析法(EA/己烷)纯化固体，得到甲酯中间体，为无色固体。

将固体溶于THF(3mL)，并加入1M的LiOH(333μl，0.33mmol)。使得到的黄色溶液在室温下搅拌1h。使用1M的HCl将反应混合物酸化至pH值为1，并在真空中除去THF。使残留物悬浮在水中并减压抽滤混合物。固体与MeOH共沸，并在真空干燥箱中干燥，得到48mg(44％)的(S)-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)甘氨酸—化合物319，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C37H44N4O5S的计算值：656.3；测量值657.0[M+H]⁺，tR＝10.34min(方法10)。计算得到的光学纯度为95％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.61(s,1H),9.16(s,2H),8.62(d,J＝8.7Hz,1H),8.51–8.41(m,1H),8.36–8.26(m,2H),7.84–7.75(m,2H),7.68(d,J＝3.8Hz,1H),7.55–7.43(m,2H),7.14–7.05(m,2H),6.92(d,J＝3.8Hz,1H),4.84–4.72(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.89–3.73(m,2H),3.22(dd,J＝13.9,3.7Hz,1H),3.10–2.96(m,1H),1.78–1.66(m,2H),1.31(s,17H),0.94–0.81(m,3H)。

((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-谷氨酰胺(化合物320)

使用一般步骤7和8制备：将HATU(190mg，0.50mmol)加入搅拌的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192(250mg，0.42mmol)、(S)-叔丁基2,5-二氨基-5-氧代戊酸酯盐酸盐(109mg，0.46mmol)和TEA(145μl，1.04mmol)在DMF(4mL)中的溶液，并使反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用EA(50mL)稀释，用1M的HCl(50mL)和卤水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩。

将粗产物溶于DCM(5mL)中，并加入TFA(3mL)。3h后，加入甲苯(10mL)并除去溶剂。通过制备型HPLC纯化化合物，得到78mg(25％)的((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-谷氨酰胺—化合物320，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C40H49N5O6S的计算值：727.3；测量值728.0[M+H]⁺，tR＝10.71min(方法10)。光学纯度为90％的d.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(s,2H),8.56(d,J＝8.6Hz,1H),8.42–8.34(m,1H),8.34–8.27(m,2H),7.84–7.75(m,2H),7.66(d,J＝3.9Hz,1H),7.54–7.48(m,2H),7.32(s,1H),7.12–7.04(m,2H),6.90(d,J＝3.8Hz,1H),6.77(s,1H),4.81-4.65(m,1H),4.19-4.11(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.20(dd,J＝14.1,3.5Hz,1H),3.07-2.96(m,1H),2.24-2.09(m,2H),2.06-1.93(M,1H),1.90-1.79(m,1H),1.78-1.68(m,2H),1.47-1.20(m,17H),0.93-0.82(m,3H)。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从化合物192制备化合物321-326。

(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(INT-22)

使用一般步骤8制备。将TFA(20mL)加入搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-8(6.4g，10.26mmol)的DCM(30mL)溶液，并使混合物在室温下搅拌3h。加入甲苯(加入50mL，然后加入2x 30mL)并在真空下除去溶剂。使物质在DCM(20mL)中超声处理，并加入乙腈(30mL)。在空气流下除去一部分DCM，直到开始出现沉淀，使悬浮液再搅拌2h，并通过过滤分离黄色固体，并用另外的异己烷(100mL)洗涤。将固体抽干，然后在40℃的真空中过夜，得到5.5g(90％)(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—INT-22，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C34H37N3O5的计算值：567.3；测量值568.3[M+H]⁺，tR＝10.11min(方法10)。

叔丁基((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-23)

使用一般步骤7制备。搅拌的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(1000mg，1.762mmol)和(R)-叔丁基2-氨基丙酸酯HCl(352mg，1.938mmol)在DMF(8mL)中的溶液。将该溶液冷却至0℃并加入TEA(737μl，5.28mmol)。经5mins将HATU(804mg，2.114mmol)缓慢加入该混合物，然后使反应混合物升温至室温。反应混合物用EA(150mL)稀释，并用1M的HCl(100mL)洗涤，然后用卤水(100mL)洗涤。分离有机层并用MgSO4干燥。除去溶剂得到白色固体，加入ACN(50mL)并超声处理悬浮液。将细颗粒的悬浮液搅拌30mins然后过滤，并用异己烷洗涤，得到881mg(70.5％)的叔丁基((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-23，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C41H50N4O6的计算值：694.4；无观察到的m/z，tR＝3.39min(方法11)。计算得到的光学纯度为>99％的e.e.(手性方法)。

叔丁基((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-24)

使用一般步骤18制备：将混于EtOH(4mL)中的钯碳(10wt％)加入搅拌的叔丁基((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(860mg，1.238mmol)的THF(30mL)溶液。将乙酸(1mL)加入该混合物，并在室温下，在4bar的压力下使反应混合物氢化。反应混合物用THF(50mL)稀释，并通过硅藻土过滤。将粗产物装载到在含5％AcOH的MeOH/THF中的柱上。用MeOH/THF/DCM冲洗柱，然后用含0.7M氨的MeOH/THF/DCM溶液洗脱产物。在真空中浓缩得到的混合物，得到565mg(77％)的叔丁基((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-24，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C33H44N4O4的计算值：560.3；无观察到的m/z，tR＝2.61min(方法11)。

叔丁基((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯

使用一般步骤7制备。将TEA(208μl，1.49mmol)加入搅拌的叔丁基((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(418mg，0.75mmol)、5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(137mg，0.75mmol)在DMF(8mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并经5mins将HATU(298mg，0.78mmol)分2批加入。混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用EA(150mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(100mL)、1N的HCl(100mL)和卤水(100mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，然后浓缩。通过层析法(含0-30％ACN的DCM)纯化粗产物，得到382mg(69％)的叔丁基((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C42H54N4O5S的计算值：726.4；无观察到的m/z，tR＝3.47min(方法11)。

((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸(化合物327)

使用一般步骤8制备。将TFA(4mL)加入搅拌的叔丁基((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(375mg，0.495mmol)的DCM(8mL)溶液，并使混合物在室温下搅拌3h。反应混合物用甲苯(2x 30mL)共沸，得到粘性油状固体。加入DMSO(5mL)并超声处理溶液。将水(60mL)加入该溶液，并将混合物超声处理5mins，然后在室温下搅拌20mins。通过过滤分离白色固体，并用另外的水(20mL)和异己烷(30mL)洗涤。物质在真空下干燥，悬浮在ACN(20mL)中，然后用乙醚(30mL)稀释并搅拌20mins。过滤悬浮液，并在真空下干燥湿的固体，得到189.3mg(55％)的((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸—化合物327，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C38H46N4O5S的计算值：670.3；测量值671.0[M+H]⁺，tR＝13.32min(方法10)。计算得到的光学纯度为>99％的e.e.(手性方法)。¹NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.64(s,1H),9.16(s,2H),8.56(d,J＝8.8Hz,1H),8.48(d,J＝7.4Hz,1H),8.35–8.26(m,2H),7.84–7.76(m,2H),7.70(d,J＝3.9Hz,1H),7.54–7.45(m,2H),7.13–7.05(m,2H),6.92(d,J＝3.8Hz,1H),4.86–4.77(m,1H),4.29–4.18(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.20–3.10(m,1H),3.08–2.94(m,1H),1.80–1.68(m,2H),1.51–1.22(m,20H),0.94–0.83(m,3H)。

(S)-叔丁基1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯(INT-25)

使用一般步骤7制备。将搅拌的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(419mg，0.738mmol)、(S)-叔丁基吡咯烷-2-羧酸酯HCl(153mg，0.738mmol)和TEA(257μl，1.845mmol)在DMF(6mL)中的溶液冷却至0℃，并经5分钟将HATU(295mg，0.775mmol)缓慢加入。反应在室温下搅拌2h，然后用1M的柠檬酸(30mL)和异己烷(20mL)稀释。加入EA(100mL)并分离有机层，用卤水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂并通过层析法(含0-20％ACN的DCM)纯化粗产物，得到436mg(81％)的(S)-叔丁基1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯—INT-25，为粘性油状物。LCMS-ESI(m/z)，C43H52N4O6的计算值：720.4；无观察到的m/z，tR＝11.45min(方法10)。

(S)-叔丁基1-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯(INT-26)

使用一般步骤18制备：在H-Cube中，在60℃下使用10％的Pd/C CatCart将(S)-叔丁基1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯(436mg，0.6mmol)的THF(25mL)溶液氢化(全氢，1mL/min)。在65℃下，使反应混合物第二次通过催化剂。除去溶剂，得到307mg(83％)的(S)-叔丁基1-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯—INT-26，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C35H46N4O4的计算值：586.4；测量值587.4[M+H]⁺，tR＝6.99min(方法10)。

(S)-叔丁基1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯

使用一般步骤7制备：将TEA(145μl，1.043mmol)加入搅拌的(S)-叔丁基1-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯(306mg，0.522mmol)和5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(106mg，0.574mmol)在DMF(6mL)中的溶液，冷却至0℃，然后经5分钟将HATU(218mg，0.574mmol)缓慢加入。反应在室温下搅拌2h，然后用EA(70mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(70mL)和卤水(100mL)洗涤。用MgSO4干燥溶剂，并除去溶剂。通过层析法(含0-30％ACN的DCM)纯化粗产物，得到363mg(92％)的(S)-叔丁基1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯，为粘性固体。LCMS-ESI(m/z)，C44H56N4O5S的计算值：752.4；无观察到的m/z，tR＝11.99min(方法10)。

(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸(化合物328)

使用一般步骤8制备。将TFA(5mL)加入搅拌的(S)-叔丁基1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸酯(350mg，0.465mmol)的DCM(5mL)溶液，并在室温下搅拌2h。用甲苯(10mL)稀释反应混合物，并除去溶剂。将残留物溶于EA(50mL)、THF(5mL)和丙酮(10mL)，并用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和卤水(40mL)的混合物洗涤。除去水层并加入乙酸(5mL)。有机层用卤水(50mL)洗涤并用MgSO4干燥。除去溶剂，并在高真空下过夜除去残留的乙酸。将物质溶于DCM(5mL)，并加入ACN(5mL)。物质在空气流下搅拌1小时，过滤悬浮液，并用另外的ACN(5mL)和异己烷(20mL)洗涤固体，得到134mg(41％)的(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸—化合物328，为黄色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C40H48N4O5S的计算值：696.3；测量值697.3[M+H]⁺，tR＝10.59min(方法10)。计算得到的光学纯度为>93％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),9.17(s,2H),8.74(d,J＝8.3Hz,1H),8.38–8.27(m,2H),7.86–7.76(m,2H),7.71(d,J＝3.9Hz,1H),7.57–7.48(m,2H),7.14–7.02(m,2H),6.92(d,J＝3.9Hz,1H),4.94–4.86(m,1H),4.33–4.27(m,1H),4.04(t,J＝6.5Hz,2H),3.86–3.74(m,1H),3.69–3.59(m,1H),3.19–3.01(m,2H),2.24–2.13(m,1H),2.01–1.84(m,3H),1.80–1.68(m,2H),1.52–1.23(m,17H),0.93–0.85(m,3H)。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从化合物192制备化合物329 350。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4或8，从化合物165制备化合物351 368。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物139制备化合物369。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物167制备化合物370。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物142制备化合物371。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物143制备化合物372。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物182制备化合物373。

使用一般步骤3或7，然后使用一般步骤4或8，从化合物193制备化合物374–379。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物191制备化合物380。

(S)-4-(叔丁基)-N-(3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-((2-(甲磺酰胺基)-2-氧代乙基)氨基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺(化合物381)

将TEA(32.1μl，0.23mmol)加入(S)-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)甘氨酸—化合物297(75.0mg，0.11mmol)、甲烷磺酰胺(12.1mg，0.13mmol)、HATU(52.6mg，0.14mmol)和DMAP(1.41mg，0.01mmol)在DCM(2mL)中的悬浮液。使得到的黄色悬浮液在室温下搅拌3h。用饱和NaHCO3水溶液(2mL)洗涤反应混合物，并使混合物通过相分离柱。在真空中浓缩有机相，得到黄色固体。通过层析法(EA/含1％AcOH的己烷)纯化粗产物，得到9mg(11％)(S)-4-(叔丁基)-N-(3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-1-((2-(甲磺酰胺基)-2-氧代乙基)氨基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺—化合物381，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C40H49N5O6S的计算值：727.3；测量值728.0[M+H]⁺，tR＝10.51min(方法10)。

按需要使用适当的一般步骤4、7和8的组合，从化合物192制备化合物382–390。

乙基2-氨基-3-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯

在-78℃下，将0.5M的KHMDS甲苯溶液(2.46mL，1.23mmol)加入搅拌的2-((二苯亚甲基)氨基)乙酸乙酯(300mg，1.12mmol)的无水THF(3mL)溶液。搅拌15min后，加入2-(4-(溴甲基)-2-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(353mg，1.12mmol)。使反应混合物在-78℃下搅拌3h，并升温至-20℃。将6N的盐酸(0.5mL)加入混合物，并使混合物在室温下搅拌过夜。用水(5mL)和1N的HCl(5mL)稀释反应混合物，然后用乙醚萃取。水层用1N的NaOH碱化，然后用EtOAc(3x 10mL)萃取。合并的有机萃取物用水、卤水洗涤，然后用MgSO4干燥。过滤并浓缩，得到177mg(46％)的乙基2-氨基-3-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯，其不经过纯化用于下一步。LCMS-ESI(m/z)，C17H25BFNO4的计算值：337.2；测量值338.2[M+H]⁺，tR＝2.78min(方法1)。

使用乙基2-氨基-3-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯和5-(叔丁基)噻吩-2-碳酰氯进行一般步骤3，然后用5-(4-(叔丁基)苯基)-2-碘嘧啶处理并进行一般步骤10来制备化合物391。

按需要使用适当的一般步骤4、7和8的组合，从化合物192制备化合物392–396。

(S)-2-(4-(3-(叔丁氧基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-氧代丙基)苯基)嘧啶-5-羧酸

使用一般步骤10制备。将DIEA(400μL，2.2mmol)和乙酸酐(210μL，2.2mmol)加入烘干的含有甲酸锂(58mg(1.1mmol)，溶于DMF(5mL))的小瓶。搅拌1h后，通过N2鼓泡使反应混合物脱气。第二步，通过插管(cannula)加入经脱气的含有(S)-叔丁基3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸酯—INT-14(200mg，0.4mmol)和PdCl2(dppf)(27mg，0.04mmol)的DMF(5mL)溶液。在微波反应器中，将得到的混合物在120℃下加热1h。反应混合物用10％的柠檬酸稀释，并用EA萃取。干燥有机萃取物(Na2SO4)，浓缩，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到166mg(88％)的(S)-2-(4-(3-(叔丁氧基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-氧代丙基)苯基)嘧啶-5-羧酸，为棕色固体。LCMS-ESI(m/z)，C29H33BN3O5的计算值：503.6；测量值504.2[M+H]⁺，tR＝3.87min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.24(s,2H),8.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(t,J＝11.9Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),6.91(t,J＝11.5Hz,1H),5.12(dd,J＝12.9,5.5Hz,1H),3.32(qd,J＝13.8,5.4Hz,2H),1.50(s,9H),1.29(d,J＝29.8Hz,9H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(2-庚酰基肼-1-羰基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯

使用一般步骤7制备。将EDC(34mg，0.20mmol)、DMAP(3mg，0.02mmol)和庚烷酰肼(16mg，0.11mmol)加入搅拌中的(S)-2-(4-(3-(叔丁氧基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-氧代丙基)苯基)嘧啶-5-羧酸(50mg，0.10mmol)的DCM(2mL)溶液。18h后，反应混合物用NaHCO3稀释，并用DCM(2X)萃取。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到38mg(61％)的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(2-庚酰基肼-1-羰基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C36H47BN5O5的计算值：629.8；无观察到的m/z，tR＝3.84min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.17(s,2H),8.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),6.70(d,J＝7.3Hz,1H),5.01(dd,J＝12.6,5.8Hz,1H),3.41–3.20(m,2H),2.35(t,J＝7.5Hz,2H),1.81–1.61(m,2H),1.59(d,J＝14.0Hz,2H),1.45(s,4H),1.42–1.22(m,18H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。

叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,3,4-噻二唑-2-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯

将2,4-双(4-甲氧苯基)-1,3,2,4-二硫二磷杂环丁烷-2,4-二硫化物(24mg，0.06mmol)加入叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(2-庚酰基肼-1-羰基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(38mg，0.06mmol)的THF(1.5mL)溶液。1.5h后，浓缩反应混合物并通过制备型HPLC纯化，得到10mg(27％)的叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,3,4-噻二唑-2-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C36H45N5O5S的计算值：627.9；无观察到的m/z，tR＝3.89min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.29(s,2H),8.44(d,J＝8.2Hz,2H),7.75–7.66(m,2H),7.50–7.41(m,2H),7.35(d,J＝8.3Hz,2H),6.68(d,J＝7.3Hz,1H),5.02(dd,J＝12.7,5.6Hz,1H),3.33(qd,J＝13.8,5.5Hz,2H),3.26–3.15(m,2H),1.87(dt,J＝15.3,7.6Hz,2H),1.46(d,J＝5.1Hz,10H),1.41–1.23(m,14H),0.96–0.85(m,3H)。

(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,3,4-噻二唑-2-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(化合物397)

使用一般步骤8，从叔丁基(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(5-己基-1,3,4-噻二唑-2-基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯制备。LCMS-ESI(m/z)，C32H37N5O3S的计算值：571.4；测量值571.7[M+H]⁺，tR＝10.66min(方法2)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.30(d,J＝2.6Hz,2H),8.48(d,J＝8.2Hz,2H),7.67(d,J＝8.4Hz,2H),7.43(dd,J＝13.7,8.3Hz,4H),6.61(d,J＝6.8Hz,1H),5.20–5.04(m,1H),3.45(ddd,J＝36.2,13.9,5.6Hz,2H),3.20(t,J＝7.6Hz,2H),1.95–1.75(m,2H),1.54–1.36(m,2H),1.39–1.19(m,13H),0.91(t,J＝7.0Hz,3H)。

(R)-叔丁基2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯

使用一般步骤7制备。将搅拌的(R)-叔丁基2-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯(122 mg，0.218 mmol)、4-(叔丁基)苯甲酸(38.8 mg，0.218 mmol)和TEA(60.7μl，0.435 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液冷却至0℃，并经5分钟将HATU(87 mg，0.228 mmol)缓慢加入。使反应在室温下搅拌2 h，然后用EA(100 mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(100 mL)和卤水(100mL)洗涤。用MgSO4干燥溶剂，并除去溶剂。通过层析法(含0-30％ACN的DCM)纯化粗产物，得到123 mg(78％)的(R)-叔丁基2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C44H56N4O5的计算值：720.4；无观察到的m/z，tR＝3.47 min(方法11)。

(R)-2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸(化合物398)

使用一般步骤8制备。将TFA(3 mL)加入搅拌的(R)-叔丁基2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯(120mg，0.166mmol)的DCM(4mL)溶液，并搅拌2h。用甲苯(15mL)稀释反应混合物，并除去溶剂。加入DMSO(3mL)并超声处理溶液。将该溶液加入强力搅拌中的水(30mL)，通过过滤分离白色固体，并用另外的ACN(10mL)洗涤。物质在高真空下干燥24h，得到75mg(66％)的(R)-2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸—化合物398，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C40H48N4O5的计算值：664.4；测量值665.0[M+H]⁺，tR＝12.33min(方法10)。计算得到的光学纯度为>99％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.64(s,1H),9.15(s,2H),8.52(d,J＝8.7Hz,1H),8.45(d,J＝7.4Hz,1H),8.35–8.20(m,2H),7.85–7.68(m,4H),7.56–7.50(m,2H),7.49–7.39(m,2H),7.14–7.03(m,2H),4.93–4.80(m,1H),4.38–4.17(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.22–3.12(m,1H),3.12–3.02(m,1H),1.81–1.67(m,2H),1.53–1.24(m,20H),0.95–0.80(m,3H)。

按需要使用适当的一般步骤4、7、8和18的组合来制备化合物399–409。

(S)-4-氨基-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丁酸(化合物410)

使用一般步骤7、4和8制备：在0℃下，用溶于DMF(1mL)的HATU(17mg，0.046mmol)处理搅拌中的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192(25mg，0.042mmol)、(S)-甲基2-氨基-4-((叔丁氧羰基)氨基)丁酸酯盐酸盐(12mg，0.042mmol)和TEA(0.015mL，0.105mmol)的溶液。使溶液在室温下搅拌18h。反应混合物用DCM(5mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(5mL)、水(5mL)和卤水(5mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥，过滤，并浓缩得到甲酯中间体。将酯溶于THF(2mL)和MeOH(1mL)，并加入1N的NaOH(0.1ml，0.1mmol)水溶液。使溶液在60℃下搅拌5h。浓缩反应混合物，然后溶于DCM(0.5mL)，并用1N的HCl醚溶液(0.42mL，0.42mmol)处理。使反应在27℃下搅拌18h。通过制备型HPLC纯化化合物，得到21mg(60.0％)的(S)-4-氨基-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丁酸，为三氟乙酸盐，LCMS-ESI(m/z)，C39H49N5O5S的计算值：699.4；测量值700.3[M+H]⁺，tR＝9.24min(方法12)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ12.95(s,1H),9.15(s,2H),8.63–8.55(m,2H),8.32(d,J＝8.1Hz,2H),7.78(d,J＝8.7Hz,2H),7.76–7.63(m,4H),7.51(d,J＝8.2Hz,2H),7.09(d,J＝8.7Hz,2H),6.91(d,J＝3.7Hz,1H),4.87–4.66(m,1H),4.50–4.31(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.23–3.12(m,1H),3.12–3.00(m,1H),2.95–2.77(m,2H),2.18–2.02(m,1H),2.02–1.84(m,1H),1.83–1.64(m,2H),1.50–1.38(m,2H),1.38–1.14(m,15H),0.87(t,J＝6.7Hz,3H)。

按需要使用适当的一般步骤4、7、8和18的组合来制备化合物411–418。

按照与化合物381类似的方式制备化合物419–423和435。

按需要使用适当的一般步骤4、7、8和18的组合来制备化合物424–433。

使用一般步骤4，从化合物422制备化合物434。

按需要使用适当的一般步骤4、7、8和18的组合来制备化合物436–440。

使用一般步骤3和8，从化合物192制备化合物441和442。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备化合物443。

按需要使用适当的一般步骤4、7、8和18的组合来制备化合物444–455。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备化合物456–458。

按需要使用适当的一般步骤4、7和8的组合，从化合物192制备化合物459–464。

按需要使用适当的一般步骤4、7和8的组合，从化合物85制备化合物465–466。

2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙酸(化合物467)

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4制备。将TEA(52.8μl，0.379mmol)加入溶于DMF(2.5mL)的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸(90mg，0.152mmol)和(S)-甲基2-氨基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙酸酯(25.8mg，0.152mmol)，然后冷却至0℃。将HATU(57.6mg，0.152mmol)加入该混合物，并置于室温下2h。通过加入0.1M的柠檬酸(水溶液，15mL)淬灭反应混合物，并使沉淀的固体成浆30mins。过滤固体，用水(10mL)、异己烷(10mL)洗涤，然后干燥。然后将固体溶于THF(4mL)和MeOH(2mL)的混合物。将2M的NaOH水溶液(380μL，0.76mmol)加入该溶液，并使混合物在室温下强力搅拌1h。用0.1M的柠檬酸水溶液(20mL)稀释反应混合物，并搅拌1h。过滤形成的固体，并用水(10mL)和异己烷(10mL)洗涤。通过柱层析(含0-20％MeOH的EA)纯化粗产物，得到12mg(11％)的2-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙酸，为白色粉末。LCMS-ESI(m/z)，C42H49N7O5的计算值：731.9；无观察到的m/z，tR＝9.75min(方法10)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),9.20(s,2H),8.70(d,J＝8.1Hz,0.5H),8.60(dd,J＝8.4,4.6Hz,1H),8.56(d,J＝7.8Hz,0.5H),8.52(d,J＝7.1Hz,1H),8.37-8.34(m,2H),8.01(d,J＝6.9Hz,1H),7.85-7.82(m,2H),7.80-7.78(m,2H),7.56-7.49(m,4H),7.14(d,J＝8.9Hz,2H),4.87-4.74(m,2H),4.71-4.55(m,2H),4.08(t,J＝6.5Hz,2H),3.24-2.97(m,2H),1.82-1.75(m,2H),1.51-1.29(m,17H),0.95-0.91(m,3H)。

按需要使用适当的一般步骤4、7和8的组合，从化合物85制备化合物468和469。

使用一般步骤7和8，从(S)-叔丁基2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯—INT-9制备化合物470。

(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸(INT-27)

使用一般步骤8制备。LCMS-ESI(m/z)，C24H24BrN3O3的计算值：482.3；测量值481.1[M-H]⁺，tR＝2.6min(方法15)，以及98.7％的e.e.(手性方法，流动相为2％的溶剂A、98％的溶剂B)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.87(s,2H),8.32(d,J＝8.3Hz,2H),7.64(d,J＝8.5Hz,2H),7.45(d,J＝8.5Hz,2H),7.36(d,J＝8.3Hz,2H),6.64(d,J＝6.9Hz,1H),5.16(dd,J＝12.7,5.7Hz,1H),3.42(ddd,J＝38.8,14.0,5.7Hz,2H),1.32(s,9H)。

叔丁基(S)-3-(3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酰胺基)丙酸酯(INT-28)

使用一般步骤7制备。将搅拌中的β-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(4.9g，27.4mmol)、(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸(12.0g，24.9mmol)和DIEA(11.1mL，62.0mmol)在DMF(200mL)中的溶液冷却至0℃。将HATU(9.9g，26.1mmol)的DMF(75mL)溶液逐滴加入20min。使反应混合物升温至室温反应2h，然后用EA稀释并用NaHCO3(饱和水溶液)洗涤。用EA反萃水相部分。干燥合并的有机部分(Na2SO4)，然后将其浓缩至硅藻土上，并通过柱层析(EA/己烷)纯化，得到11g(65％)的叔丁基(S)-3-(3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酰胺基)丙酸酯—INT-28。LCMS-ESI(m/z)，C31H37BrN4O4的计算值；609.6；测量值610.2[M+H]⁺，tR＝3.99min(方法15)，以及87.1％的e.e.(手性方法，流动相为20％的溶剂A、80％的溶剂B)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.80(s,2H),8.32(t,J＝6.5Hz,2H),7.74–7.62(m,2H),7.41(d,J＝8.5Hz,2H),7.35(t,J＝7.9Hz,2H),6.91(d,J＝7.7Hz,1H),6.53(t,J＝5.9Hz,1H),4.93–4.81(m,1H),3.52–3.34(m,2H),3.34–3.14(m,2H),2.46–2.24(m,2H),1.34(d,J＝5.2Hz,9H),1.31(d,J＝5.2Hz,9H)。

叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯(INT-29)

使用一般步骤10，从叔丁基(S)-3-(3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酰胺基)丙酸酯和4-羟基苯基硼酸制备。LCMS-ESI(m/z)，C37H42BN4O5的计算值：622.8；测量值621.3[M-H]⁺，tR＝3.53min.(方法15)，以及80.1％的e.e.(手性方法，流动相为20％的溶剂A、80％的溶剂B)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(s,2H),8.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝8.2Hz,2H),7.56–7.32(m,6H),6.95(d,J＝8.2Hz,2H),6.82(d,J＝7.6Hz,1H),6.35(s,1H),4.88(d,J＝6.9Hz,1H),3.46(s,2H),3.39–3.12(m,2H),2.48–2.15(m,2H),1.36(s,9H),1.33(s,9H)。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备化合物471。

叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-((5-甲基己基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯

使用一般步骤12，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯和1-溴-5-甲基己烷制备。LCMS-ESI(m/z)，C44H56N4O5的计算值：720.9；测量值721.4[M+H]⁺，tR＝5.39min.(方法16)。

(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-((5-甲基己基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸(化合物472)

使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-((5-甲基己基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备。LCMS-ESI(m/z)，C40H45N4O5的计算值：664.9；测量值664.8[M+H]⁺，tR＝10.32min.(方法14)。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-丙酸酯制备化合物473。

叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(2-环己基乙氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯

使用一般步骤12，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯和(2-溴乙基)环己烷制备。LCMS-ESI(m/z)，C45H56N4O5的计算值：732.9；测量值733.5[M+H]⁺，tR＝5.59min.(方法16)。

(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(2-环己基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸(化合物474)

使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(2-环己基乙氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备。LCMS-ESI(m/z)，C41H48N4O5的计算值：676.9；测量值677.4[M+H]⁺，tR＝10.61min.(方法14)。

使用一般步骤7、4，然后使用一般步骤8，从化合物85制备化合物475和476。

4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯(INT-30)

使用一般步骤7制备：将DIEA(554μl，3.00mmol)加入搅拌的(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85(594mg，1.00mmol)、L-天冬氨酸β-苄酯α-叔丁酯盐酸盐(398.4mg，1.20mmol)在DMF(6mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并经5mins加入溶于DMF(4mL)的HATU(418mg，1.10mmol)。使混合物在0℃下搅拌1h。将反应混合物加入水(200mL)中，并过滤沉淀物。将沉淀物溶于DCM(20mL)，用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(含0-100％EA的己烷)纯化粗产物，得到751mg(88％)的4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯—INT-30，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C52H62N4O7的计算值：854.5；测量值855.5[M+H]⁺，tR＝6.22min(方法16)。

(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸(INT-31)

使用一般步骤18制备：将10％的Pd/C(10mg)加入溶于THF(2mL)的4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯(50mg，0.058mmol)。将氢气通入反应容器，并使反应在室温下的氢气中强力搅拌2h。过滤反应混合物除去催化剂，并除去溶剂，得到38mg(86％)的(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸—INT-31，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C45H56N4O7的计算值：764.4；测量值765.4[M+H]⁺，tR＝4.24min(方法16)。

N²-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-N⁴-甲基-L-天冬酰胺(化合物477)

使用一般步骤7和8制备：将DIEA(13.8μl，0.075mmol)加入搅拌的(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸(19mg，0.025mmol)、甲胺(40wt％水溶液，5.8μL，0.075mmol)在DMF(0.25mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并加入HATU(19mg，0.05mmol)。使混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物加入水(2mL)中，并过滤沉淀。将沉淀溶于DCM(2mL)，用MgSO4干燥，并浓缩。将粗的酯溶于DCM(1mL)，并加入TFA(0.2mL)。使反应搅拌过夜。除去溶剂，并通过制备型HPLC纯化粗物质，得到5mg(25％)的N²-((s)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-N⁴-甲基-L-天冬酰胺。LCMS-ESI(m/z)，C42H51N5O6的计算值；721.4；测量值722.4[M+H]⁺，tR＝8.67min(方法14)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ12.62(s,1H),9.14(s,2H),8.53(d,J＝8.5Hz,1H),8.36(d,J＝7.9Hz,1H),8.29(d,J＝8.2Hz,2H),7.86(d,J＝4.6Hz,1H),7.78(d,J＝8.7Hz,2H),7.72(d,J＝8.3Hz,2H),7.51(d,J＝8.3Hz,2H),7.44(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),4.89–4.73(m,1H),4.66–4.53(m,1H),4.03(t,J＝6.5Hz,3H),3.26–3.18(m,1H),3.11–3.00(m,1H),2.64–2.53(m,5H),1.80–1.67(m,2H),1.51–1.38(m,2H),1.38–1.21(m,15H),0.87(t,J＝6.8Hz,3H)。

使用一般步骤7和8，从(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸制备化合物478─487。

使用一般步骤7和4，从化合物85制备化合物488。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从叔丁基(S)-3-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯制备化合物489和490。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从化合物85制备化合物491。

叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-32)

将D-丙氨酸叔丁酯(680.0mg，3.73mmol)和Et3N(802.3mg，6.2mmol)加入搅拌中的(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酸—INT-27(1.50g，3.10mmol)的DMF(15mL)溶液。反应在0℃下搅拌1小时，然后加入溶于2mL DMF的HATU(877.5mg，3.37mmol)。使反应在0℃下搅拌1小时，然后升温至室温搅拌18小时。用NaHCO3水溶液(3x 20mL)萃取反应溶液。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含50％EA的己烷)纯化粗产物，得到1.44g(76％)的叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-叔丁基)苯甲酰氨基)-丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-32，为固体粉末。LCMS-ESI(m/z)，C31H37BrN4O4的计算值：609.6；测量值610.2[M+H]⁺，tR＝4.05min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.03(s,2H),8.49(d,J＝8.7Hz,1H),8.41(d,J＝7.2Hz,1H),8.24(d,J＝8.2Hz,2H),7.73(t,J＝7.4Hz,2H),7.54–7.37(m,4H),4.85(td,J＝10.1,4.6Hz,1H),4.16(t,J＝7.2Hz,1H),3.24–2.97(m,2H),1.50–1.29(m,9H),1.32–1.17(m,12H)。

(S)-2-(4-(3-((3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基)氨基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-氧代丙基)苯基)嘧啶-5-羧酸(INT-33)

使用一般步骤19制备。在N2中，将烘干的甲酸锂(136mg，2.6mmol)、DIEA(700μL，3.9mmol)和Ac2O(370μL，3.9mmol)溶于直火干燥的烧瓶中的无水DMF(10mL)。搅拌30min后，通过N2鼓泡使溶液脱气。在不同的烧瓶中，将INT-28(400mg，0.7mmol，从THF共沸干燥)溶于DMF(10mL)，并通过N2鼓泡脱气。将PdCl2(dppf)(48mg，0.07mmol)加入INT-28的溶液，并通过插管将得到的溶液转移至甲酸锂溶液中。将烧瓶密封，并在微波反应器中，在120℃下加热4h。反应混合物用EA(250mL)稀释，并用10％的柠檬酸(250mL)洗涤，然后用H2O(250mL)洗涤，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到400mg(99％)的(S)-2-(4-(3-((3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基)氨基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-氧代丙基)苯基)嘧啶-5-羧酸—INT-33。LCMS-ESI(m/z)，C32H38N4O6的计算值：574.7；测量值575.3[M+H]⁺，tR＝2.41min.(方法15)。

甲基2-(4-溴苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)乙酸酯

使用一般步骤7制备。将搅拌中的2-氨基-2-(4-溴苯基)乙酸甲酯(421mg，1.5mmol)、4-(叔丁基)苯甲酸(321mg，1.8mmol)和DIEA(831μl，4.5mmol)在DMF(3mL)中的溶液冷却至0℃，以逐滴滴加的方式缓慢加入HATU(380mg，1.65mmol)的DMF(1.5mL)溶液。使反应混合物缓慢升温，并继续搅拌4h。将反应混合物倒在冰水上，并过滤固体。将固体溶于DCM(10mL)，用MgSO4干燥，并蒸发浓缩，得到532mg(88％)的甲基2-(4-溴苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)乙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C20H22BrNO3的计算值：403.0；测量值404.1[M+H]⁺，tR＝3.61min.(方法16)。

甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙酸酯(INT-34)

使用一般步骤10制备。使甲基2-(4-溴苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)乙酸酯(202mg，0.5mmol)、KOAc(147mg，1.5mmol)和4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(165mg，0.65mmol)在DMSO(3mL)中的溶液脱气。加入PdCl2dppf(18mg，0.025mmol)，并使混合物在90℃下加热1.5h。将粗反应混合物倒在冰水上，并过滤固体。将固体溶于DCM(5mL)，用MgSO4干燥，蒸发浓缩并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到71mg(31％)的甲基2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙酸酯—INT-34。LCMS-ESI(m/z)，C26H34BNO5的计算值：451.3；测量值452.2[M+H]⁺，tR＝3.83min(方法16)。

(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-丙酸

用TFA(30.0g，263.1mmol)处理搅拌中的叔丁基(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸酯—INT-17(15.7g，28.8mmol)的DCM(30mL)溶液。使反应混合物在室温下搅拌18小时，使反应完成。蒸干溶剂，然后与甲苯(3x 20mL)共蒸发以除去痕量的TFA。使化合物在真空下干燥过夜，得到13.7g(97％)的(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸粉末。LCMS-ESI(m/z)，C22H22BrN3O3S的计算值：487.1；测量值488.1[M+H]⁺，tR＝2.55min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.05(d,J＝5.0Hz,2H),8.64(d,J＝8.4Hz,1H),8.25(d,J＝8.1Hz,2H),7.62(d,J＝3.8Hz,1H),7.45(d,J＝8.2Hz,2H),6.92(d,J＝3.8Hz,2H),4.64(td,J＝10.5,4.5Hz,1H),3.26(dd,J＝13.8,4.4Hz,1H),3.11(dd,J＝13.7,10.7Hz,1H),1.32(s,9H)。

甲基(S)-1-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯(INT-35)

将DIEA(465.26mg，3.60mmol)和(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸(700.0mg，1.44mmol)加入搅拌中的(S)-吡咯烷-3-羧酸甲酯(357.0mg，2.16mmol)的DMF(10mL)溶液。在冰浴中使溶液冷却至0℃，然后缓慢加入HATU(677.55mg，2.88mmol)的DMF(2mL)溶液。使反应在0℃下搅拌1小时，然后升温至RT搅拌2小时。用DCM(3x 20mL)和NaHCO3水溶液(3x 10mL)萃取反应溶液。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含40％DCM的己烷)纯化最终的化合物，得到501.0mg(58％)的甲基(S)-1-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯—INT-35粉末。LCMS-ESI(m/z)，C28H31BrN4O4S的计算值：598.1；测量值599.3[M+H]⁺，tR＝3.553min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.05(d,J＝1.1Hz,2H),8.77(dd,J＝11.5,8.3Hz,1H),8.25(d,J＝7.7Hz,2H),7.72(d,J＝3.5Hz,1H),7.46(d,J＝8.3Hz,2H),6.92(d,J＝3.8Hz,1H),4.98–4.73(m,1H),3.88(dd,J＝10.3,8.0Hz,1H),3.71(dd,J＝15.5,7.5Hz,1H),3.50(ddd,J＝18.3,12.2,5.4Hz,2H),3.38(dd,J＝17.3,7.6Hz,1H),3.23(ddd,J＝28.0,15.0,8.7Hz,1H),3.18–2.85(m,3H),2.17–1.96(m,2H),1.87(td,J＝15.2,7.4Hz,1H),1.32(s,9H)。

叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)-D-丙氨酸酯

将DIEA(8.29g，64.18mmol)和(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸(12.5g，25.67mmol)加入搅拌中的D-丙氨酸叔丁酯(5.60g，30.80mmol)的DMF(50mL)溶液。在冰浴中使溶液冷却至0℃，然后缓慢加入HATU(9.06g，38.50mmol)的DMF(15mL)溶液。反应在0℃下搅拌1小时，然后升温至RT搅拌2小时。用DCM(3x 50mL)和NaHCO3水溶液(3x 30mL)萃取反应溶液。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含40％DCM的己烷)纯化最终的化合物，得到14.7g(94％)的叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)-D-丙氨酸酯，为固体粉末。LCMS-ESI(m/z)，C29H35BRN4O4S的计算值：614.2；测量值615.3[M+H]⁺，tR＝3.914min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.83(d,J＝3.6Hz,2H),8.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),7.34(d,J＝3.8Hz,1H),6.81(d,J＝3.8Hz,1H),6.66(d,J＝7.6Hz,1H),6.34(d,J＝7.2Hz,1H),4.88(d,J＝5.9Hz,1H),4.41(t,J＝7.2Hz,1H),3.31(dd,J＝13.6,5.8Hz,1H),3.20(dd,J＝13.6,7.8Hz,1H),1.51–1.32(m,18H),1.27(d,J＝7.1Hz,3H)。¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ172.02,171.31,162.28,162.13,161.42,158.55,142.27,136.34,134.66,130.20,128.82,127.92,123.07,118.63,80.90,54.45,48.86,39.59,39.38,32.39,28.04,17.68。

叔丁基((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-36)

将(4-羟基苯基)硼酸(224.6mg，1.6mmol)、碳酸钠十水合物(96.0mg，1.6mmol)、叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(500.0mg，1.6mmol)、Pd(dppf)Cl2(58.5mg，0.08mmol)、THF(2.0mL)、CH3CN(2.0ml)和水(1.0mL)加入100ml的烧瓶。用N2鼓泡10min使溶液脱气。将反应混合物加热至80℃反应2小时。减压干燥反应混合物以除去溶剂，并用DCM(20mL)稀释。用DCM(3x 20mL)和NaHCO3水溶液(3x 10mL)萃取混合物。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含40％DCM的己烷)纯化最终的化合物，得到462.3mg(91％)的叔丁基((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-36固体。LCMS-ESI(m/z)，C35H40N4O5S的计算值：628.3；测量值629.3[M+H]⁺，tR＝3.447min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.79(s,1H),9.12(s,2H),8.55(t,J＝16.2Hz,1H),8.43(d,J＝7.2Hz,1H),8.30(d,J＝8.1Hz,2H),7.69(t,J＝7.5Hz,3H),7.50(dd,J＝15.4,8.3Hz,2H),7.00–6.85(m,2H),6.75(t,J＝9.9Hz,1H),4.80(td,J＝9.7,4.7Hz,1H),4.15(p,J＝7.2Hz,1H),3.10(ddd,J＝39.3,19.4,11.8Hz,2H),1.40(d,J＝6.6Hz,9H),1.31(s,9H),1.23(t,J＝11.1Hz,3H)。

甲基(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯(INT-37)

将(4-羟基苯基)硼酸(60.7mg，0.44mmol)、碳酸钠十水合物(26.4mg，0.44mmol)、甲基(S)-1-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯—INT-35(130.0mg，0.44mmol)、Pd(dppf)Cl2(16.09mg，0.022mmol)、THF(2.0mL)、CH3CN(2.0ml)和水(1.0mL)加入10ml的烧瓶。用N2鼓泡10min使溶液脱气。将反应混合物加热至80℃反应2小时。减压干燥反应混合物以除去溶剂，并用DCM(20mL)稀释。用DCM(3x 10mL)和NaHCO3水溶液(3x 10mL)萃取混合物。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含50％DCM的己烷)纯化最终的化合物，得到102.0mg(76％)的甲基(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯—INT-37，为固体粉末。LCMS-ESI(m/z)，C34H36N4O5S的计算值：612.3；测量值613.3[M+H]⁺，tR＝3.138min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.81(s,1H),9.13(d,J＝1.5Hz,2H),8.77(dd,J＝11.4,8.1Hz,1H),8.31(d,J＝8.2Hz,2H),7.73(d,J＝3.8Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.3Hz,2H),6.99–6.84(m,3H),4.88(s,1H),3.72(d,J＝8.9Hz,1H),3.62(s,1H),3.59(d,J＝6.4Hz,1H),3.50(ddd,J＝18.7,12.0,5.8Hz,1H),3.36(d,J＝7.5Hz,1H),3.27–3.16(m,1H),3.18–2.97(m,3H),2.15–1.95(m,2H),1.88(dd,J＝12.5,7.5Hz,1H),1.32(s,9H)。

叔丁基(S)-1-(3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(INT-38)

将DIEA(169.6mg，1.31mmol)和(S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酸(100.0mg，0.21mmol)加入搅拌中的氮杂环丁烷-3-羧酸叔丁酯(64.55mg，0.41mmol)的DMF(1mL)溶液。在冰浴中将溶液冷却至0℃，然后缓慢加入HATU(74.11mg，1.31mmol)的DMF(1mL)溶液。使反应在0℃下搅拌1小时，然后升温至RT搅拌2小时。用DCM(3x 10mL)和NaHCO3水溶液(3x 10mL)萃取反应溶液。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩，得到117.6mg(85％)的叔丁基(S)-1-(3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯—INT-38，为固体粉末，其不经过进一步纯化用于下一步。LCMS-ESI(m/z)，C30H35BrN4O4S的计算值：626.2；测量值627.2[M+H]⁺，tR＝3.884min.(方法16)。

甲基(S)-1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯

使用一般步骤7制备。将搅拌中的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—INT-22(2082mg，2.75mmol)、(S)-吡咯烷-3-羧酸甲酯HCl(545mg，3.30mmol)和DIEA(1523μl，8.25mmol)在DMF(6mL)中的溶液冷却至0℃，以逐滴滴加的方式缓慢加入HATU(1254mg，3.30mmol)的DMF(5mL)溶液。使反应混合物缓慢升温，并继续搅拌4h。将反应混合物倒在冰水上，并过滤固体。将固体溶于EA(50mL)，用MgSO4干燥，蒸发浓缩并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到932mg(52％)的甲基(S)-1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C40H46N4O6的计算值：678.3；测量值679.3[M+H]⁺，tR＝4.50min(方法16)。

甲基(S)-1-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯(INT-39)

使用一般步骤18制备：将钯碳(10wt％，150mg)加入搅拌的甲基(S)-1-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯(962mg，1.42mmol)的MeOH(10mL)溶液。将氢气通入反应混合物，并在室温下的氢气中搅拌1.5h。使反应混合物通过硅藻土过滤，并浓缩得到752mg(97％)的甲基(S)-1-((S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-3-羧酸酯—INT-39。LCMS-ESI(m/z)，C32H40N4O4的计算值：544.3；测量值545.3[M+H]⁺，tR＝3.61min(方法16)。

(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸

使用一般步骤8制备：将TFA(5mL)加入搅拌的(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸酯(1.08g，2.11mmol)INT-7的DCM(10mL)溶液。16h后，用甲苯(10mL)稀释混合物，并蒸发浓缩。再从残留物蒸出甲苯(2x 10mL)，得到962mg(100％)的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸，为灰白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C21H18BrN3O4的计算值：455.1；测量值456.0[M+H]⁺，tR＝5.81min(方法10)。

叔丁基((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-42)

使用一般步骤7制备：将DIEA(1.2mL，6.32mmol)加入搅拌的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酸(962mg，2.11mmol)和(R)-叔丁基2-氨基丙酸酯盐酸盐(383mg，2.11mmol)在DMF(20mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并分批加入HATU(802mg，2.11mmol)。移除冷浴，并使混合物升温至室温。1h后，将混合物倒在柠檬酸(100mL，0.1M的水溶液)和异己烷(20mL)上，并通过过滤收集得到的沉淀物，依次用水(2x 10mL)、ACN(3mL)和异己烷(2x 5mL)洗涤，得到1.1g(89％)的叔丁基((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯INT-42，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C28H31BrN4O5的计算值：582.2；测量值605.2[M+Na]⁺，tR＝7.94min(方法10)。

2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸盐酸盐

在50℃下，将氰化钾(177mg，2.72mmol)的水(3.8mL)溶液逐滴加入搅拌的2,5-二甲基噁唑-4-甲醛(272mg，2.17mmol)和碳酸铵(564mg，5.87mmol)在EtOH(6mL)和水(2mL)中的溶液，滴加20分钟。使溶液在60℃下搅拌16h。在80℃下蒸出EtOH，并加入HCl(0.2mL，37％的水溶液)。使混合物冷却至室温，并通过过滤收集沉淀物，依次用水(5mL)和异己烷(2x 5mL)洗涤。将所述沉淀物搅拌溶于MeOH(14mL)，并用氢氧化钾(5.2mL，2.5M的水溶液，13.1mmol)处理，并使溶液在60℃下搅拌100h。使混合物冷却，并用HCl酸化。蒸出溶剂，并用MeOH(10mL)处理残留物。过滤混合物并蒸发浓缩滤液，得到205mg(55％)的2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸盐酸盐，为橙色油状物。LCMS-ESI(m/z)，C7H10N2O3的计算值：170.1；测量值171.1[M+H]⁺，tR＝0.23min(方法11)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.71(br s,3H),5.13(s,1H),2.38(s,3H),2.34(s,3H)。

甲基2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸酯盐酸盐(INT-43)

使用一般步骤22制备：将HCl(1.2mL，37％的水溶液，14.5mmol)加入搅拌的2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸盐酸盐(150mg，0.726mmol)的MeOH(5mL)溶液，并将混合物加热回流4h。使混合物冷却，并蒸出溶剂。用MeOH(12mL)处理残留物并过滤。蒸发浓缩滤液，得到135mg(84％)的甲基2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸酯盐酸盐—INT-43。LCMS-ESI(m/z)，C8H12N2O3的计算值：184.1；测量值185.1[M+H]⁺，tR＝0.23min(方法11)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.94(br s,3H),5.35(s,1H),3.73(s,3H),2.38(s,3H),2.36(s,3H)。

4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯(INT-47)

使用一般步骤7制备：将DIEA(554μl,3.00mmol)加入搅拌的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192(600mg，1.00mmol)、L-天冬氨酸β-苄酯α-叔丁酯盐酸盐(398.4mg，1.20mmol)在DMF(6mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并经5mins将溶于DMF(4mL)的HATU(418mg，1.10mmol)加入。使混合物在0℃下搅拌0.5h。将反应混合物加入水(250mL)中，并过滤沉淀物。将沉淀物溶于DCM(20mL)，用MgSO4干燥，并浓缩。通过层析法(含0-100％EA的己烷)纯化粗产物，得到789mg(92％)的4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯—INT-47，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C50H60N4O7S的计算值：860.4；测量值861.4[M+H]⁺，tR＝6.028min(方法16)。

(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸(INT-44)

使用一般步骤18制备：将10％的Pd/C(60mg)加入溶于THF(5mL)的4-苄基1-(叔丁基)((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-L-天冬氨酸酯—INT-47(345mg，0.4mmol)。将氢气通入反应容器，并使反应在室温下的氢气中强力搅拌过夜。过滤反应混合物除去催化剂，除去溶剂，并通过层析法(含0-100％EA的己烷)纯化粗产物，得到228mg(66％)的(S)-4-(叔丁氧基)-3-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-4-氧代丁酸—INT-44，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C43H54N4O7S的计算值：770.4；测量值771.3[M+H]⁺，tR＝4.21min(方法16)。

叔丁基((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯(INT-45)

将(4-羟基苯基)硼酸(317.23mg，2.30mmol)、碳酸钠十水合物(138.0mg，2.3mmol)、叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-32(700.0mg，1.15mmol)、Pd(dppf)Cl2(87.8mg，0.12mmol)、THF(10mL)、CH3CN(10ml)和水(5mL)加入10ml的烧瓶。用N2鼓泡10min使溶液脱气。将反应混合物加热至80℃反应2小时。用DCM(3x 20mL)和NaHCO3水溶液(3x 10mL)萃取混合物。合并的有机物用MgSO4干燥，并蒸发浓缩。通过柱层析(含40％DCM的己烷)纯化最终的化合物，得到595.0mg(83％)的叔丁基((S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-D-丙氨酸酯—INT-45固体。LCMS-ESI(m/z)，C37H42N4O5的计算值：622.3；测量值623.3[M+H]⁺，tR＝3.635min.(方法16)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.79(s,1H),9.11(s,2H),8.50(d,J＝8.7Hz,1H),8.41(d,J＝7.2Hz,1H),8.30(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.68(d,J＝8.6Hz,2H),7.51(d,J＝8.2Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝8.6Hz,2H),4.85(td,J＝9.9,4.6Hz,1H),4.17(p,J＝7.1Hz,1H),3.24–3.00(m,2H),1.46–1.34(m,9H),1.32–1.19(m,12H)。

叔丁基N²-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N⁴-甲基-D-天冬酰胺酯

使用一般步骤7制备：在0℃下，将HATU(380mg，1.0mmol)加入溶于DMF(5mL)的(R)-3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(叔丁氧基)-4-氧代丁酸(205.7mg，0.5mmol)。搅拌3min后，加入DIEA(277μL，1.5mmol)和甲胺(40wt％的水溶液，116μL，1.5mmol)。使反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物加入水(75mL)中，并过滤沉淀物，干燥得到201mg(95％)的叔丁基N²-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N⁴-甲基-D-天冬酰胺酯，为无色半固体。LCMS-ESI(m/z)，C24H28N2O5的计算值：424.2；测量值425.2[M+H]⁺，tR＝3.22min(方法16)。

叔丁基N⁴-甲基-D-天冬酰胺酯(INT-46)

将哌啶(233μL，2.35mmol)加入溶于DCM(0.93mL)的叔丁基N²-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N⁴-甲基-D-天冬酰胺酯(200mg，0.47mmol)。使反应混合物在室温下搅拌1h。除去所有溶剂，得到215mg的叔丁基N⁴-甲基-D-天冬酰胺酯，其为含有1-((9H-芴-9-基)甲基)哌啶的混合物。该混合物不经过纯化用于下一步反应。LCMS-ESI(m/z)，C9H18N2O3的计算值：202.1；测量值203.1[M+H]⁺，tR＝0.534min(方法16)。

叔丁基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(INT-48)

使用一般步骤10制备。将碳酸钠十水合物(60mg，0.2mmol)、4-羟基苯基硼酸(17mg，0.1mmol)和PdCl2(dppf)(7mg，0.01mmol)加入INT-38(60mg，0.1mmol)在二氧六环(2mL)和H2O(1mL)中的溶液。混合物在80℃下加热2.5h，然后冷却至室温，用H2O(100mL)稀释，并萃入EA(2x 100mL)中。合并得到的有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到75mg(117％)的粗叔丁基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(INT-48)，其在不经过进一步纯化的情况下使用。LCMS-ESI(m/z)，C36H40N4O5S的计算值：640.8；测量值341.3[M+H]⁺，tR＝3.42min.(方法15)。

依次使用一般步骤7、18、7、4和8，从(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—INT-22和(S)-甲基2-氨基-6-((叔丁氧羰基)氨基)己酸酯盐酸盐制备化合物492。

依次使用一般步骤7和4，从(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸—化合物328制备化合物493、494和500。

使用一般步骤7，从(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)吡咯烷-2-羧酸—化合物328制备化合物495和496。

依次使用一般步骤7和8，从(S)-1-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-吡咯烷-2-羧酸—化合物328制备化合物497。

依次使用一般步骤7、18、7和8，从(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—INT-22制备化合物498和499。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从化合物192制备化合物501、592–602、604、607–621、625–629、631、633、634、636–641、644、655、668和669。

使用一般步骤8，从INT-30制备化合物502。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤18，从化合物502制备化合物503–507、579和580。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从INT-31制备化合物508–511。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从INT-44制备化合物512–523。

使用一般步骤8，从INT-47制备化合物524。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤18，从化合物524制备化合物525–533。

使用一般步骤7、18，然后使用一般步骤8，从化合物524制备化合物534。

使用一般步骤3，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物535。

依次使用一般步骤7和4，从(S)-2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物85和2-氨基-2-(2,5-二甲基噁唑-4-基)乙酸盐酸盐—INT-43制备化合物536。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物85制备化合物537和554。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从化合物85制备化合物538–553、555–578、583–588、622–624、632和660–662。

使用一般步骤7、4，然后使用一般步骤18，从化合物85制备化合物581。

使用一般步骤7、8，然后使用一般步骤4，从化合物85制备化合物582。

叔丁基(R)-3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯

使用一般步骤7制备。将搅拌中的(R)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(叔丁氧基)-4-氧代丁酸(308mg，0.75mmol)、甲胺(40wt％的水溶液，174μL，2.25mmol)和DIEA(415μl，2.25mmol)在DMF(7.5mL)中的溶液冷却至0℃，加入HATU(569mg，1.5mmol)。使反应混合物缓慢升温，并继续搅拌18h。将反应混合物倒在冰水上，并过滤固体。将固体溶于DCM(10mL)，用MgSO4干燥并蒸发浓缩。通过柱层析纯化粗产物，得到226mg(71％)的叔丁基(R)-3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C24H28N2O5的计算值：424.2；测量值447.1[M+Na]⁺，tR＝3.12min.(方法16)。

叔丁基(R)-3-氨基-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯

将哌啶(263μL，2.7mmol)加入搅拌中的叔丁基(R)-3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯(226mg，0.53mmol)的DCM(1.05mL)溶液。使反应混合物在室温下搅拌1h。蒸出溶剂，得到250mg(100％)的叔丁基(R)-3-氨基-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯，为含有1-((9H-芴-9-基)甲基)哌啶的混合物。该混合物不经过纯化用于下一步反应。LCMS-ESI(m/z)，C9H18N2O3的计算值：202.1；测量值225.1[M+Na]⁺，tR＝0.50min.(方法15)。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物85和叔丁基(R)-3-氨基-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯制备化合物589。

叔丁基(S)-1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯

使用一般步骤7制备：在0℃下，用分批加入的HATU(0.703g，1.85mmol)处理搅拌的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—INT-22(1g，1.76mmol)、氮杂环丁烷-3-羧酸叔丁酯(0.554g，1.76mmol)和DIEA(1.30mL，7.05mmol)在DMF(20mL)中的溶液。10min后，将冷浴移除。又1h后，将混合物倒在0.2M的HCl(100mL)上，并用EA(3x 30mL)萃取。合并的有机萃取物用卤水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥并蒸发浓缩。柱层析(EA/DCM/异己烷)得到708mg(58％)的叔丁基(S)-1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯，为灰白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C42H50N4O6的计算值：706.4；测量值707.1[M+H]⁺，tR＝3.60min(方法6)。叔丁基(S)-1-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯

使用一般步骤18和7制备：将乙酸钯(22.5mg，0.100mmol)和三乙胺(43μL，0.30mmol)在DCM(2mL)中的溶液加入搅拌的(S)-叔丁基1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(708mg，1.00mmol)和三乙基硅烷(352μL，2.20mmol)在DCM(10mL)中的溶液。16h后，将混合物通过硅藻土过滤，并蒸干溶剂。将残留物溶于DMF(6mL)，并将得到的溶液加入搅拌的通过HATU(399mg，1.05mmol)和DIEA(0.55mL，3.00mmol)对溶于DMF(5mL)的4-(叔丁基)苯甲酸(196mg，1.10mmol)作用10min制备的活性酯的溶液。1h后，将混合物倒在0.5M的HCl(100mL)上，并用EA(3x 50mL)萃取。合并的有机萃取物用卤水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥并蒸发浓缩。柱层析(EA/DCM/异己烷)得到583mg(80％)的叔丁基(S)-1-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C45H56N4O5的计算值：732.4；无观察到的m/z，tR＝3.99min(方法11)。

(S)-1-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸(化合物590)

使用一般步骤8制备：将TFA(2mL)加入搅拌的(S)-叔丁基1-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(580mg，0.791mmol)的DCM(6mL)溶液。3h后，用甲苯(20mL)稀释混合物，并蒸出溶剂。柱层析(乙酸/EA/DCM/异己烷)得到中等纯的产物。通过用DCM/ACN再成浆然后用乙酸异丙酯再成浆来进一步纯化该产物。得到的固体再次通过柱层析(乙酸/EA/DCM/异己烷)纯化，然后用乙醚再成浆，得到212mg(40％)的(S)-1-(2-(4-(叔丁基)苯甲酰氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸—化合物590。LCMS-ESI(m/z)，C41H48N4O5的计算值；676.4；无观察到的m/z，tR＝10.23min(方法10)。光学纯度为>95％的e.e(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,1H),9.16(d,J＝1.5Hz,2H),8.75(dd,J＝8.1,3.7Hz,1H),8.36–8.31(m,2H),7.85–7.75(m,4H),7.49–7.46(m,4H),7.11–7.05(m,2H),4.74–4.68(m,1H),4.45(t,J＝8Hz,0.5H),4.33-4.30(m,0.5H),4.24–4.16(m,1H),4.06–4.00(m,3H),3.47-3.40(m,1H),3.90(ddd,J＝13.5,9.7,6.0Hz,1H),3.18-3.05(m,2H),1.77–1.70(m,2H),1.46–1.24(m,17H),0.89–0.86(m,3H)。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物85和INT-46制备化合物591。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物603、605、645–648、652、653、656–659和664。

使用一般步骤7、4，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物606。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192和叔丁基(R)-3-氨基-4-(甲氨基)-4-氧代丁酸酯制备化合物630。

(S)-甲基1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯

使用一般步骤7制备：将DIEA(2.7mL，15.5mmol)加入搅拌的(S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-丙酸—INT-22(2.2g，3.88mmol)和氮杂环丁烷-3-羧酸甲酯HCl(0.705g，4.65mmol)在DMF(25mL)中的溶液，并将混合物冷却至0℃。经10分钟分批加入HATU(1.621g，4.26mmol)。3h后，再加入氮杂环丁烷-3-羧酸甲酯HCl(0.223g，1.938mmol)和HATU(0.456g，1.938mmol)。使混合物在室温下搅拌100h。用柠檬酸(50mL，0.1M的水溶液)和水(20mL)处理混合物，并用EA(2x 100mL)萃取。合并的有机萃取物用卤水(80mL)洗涤，用MgSO4干燥并蒸出溶剂。柱层析(EA/异己烷)得到1.45g(56％)的(S)-甲基1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯，为无色玻璃状物。LCMS-ESI(m/z)，C39H44N4O6的计算值：664.3；测量值665.3[M+H]⁺，tR＝3.37min(方法6)。

(S)-甲基1-(2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)-氮杂环丁烷-3-羧酸酯

使用一般步骤18制备：在65℃下，使(S)-甲基1-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(1.2g，1.81mmol)的MeOH(150mL)溶液以2.1mL/min通过Thales Nanotechnology H-Cube反应器中的10％的Pd/C CatCart(55x4mm)。蒸干溶剂，并通过柱层析(氨/MeOH/DCM)纯化残留物，得到604mg(63％)的(S)-甲基1-(2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C31H38N4O4的计算值：530.3；测量值531.0[M+H]⁺，tR＝1.60min(方法6)。

甲基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯

将DIEA(0.47mL，2.71mmol)加入搅拌的(S)-甲基1-(2-氨基-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(360mg，0.678mmol)和5-(叔丁基)噻吩-2-羧酸(125mg，0.678mmol)在DMF(6mL，77mmol)中的溶液，并将混合物冷却至0℃。分批加入HATU(284mg，0.746mmol)并使反应在室温下搅拌1h。将混合物倒在柠檬酸(70mL，10％w/w的水溶液)上，并用EA(2x100mL)萃取。合并的有机萃取物用卤水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥并蒸干溶剂。柱层析(EA/异己烷)得到389mg(82％)的(S)-甲基1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯，为淡黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C40H48N4O5S的计算值：696.3；测量值697.0[M+H]⁺，tR＝3.60min(方法6)。

(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸(化合物635)

将硫酸(3mL，5M的水溶液，15mmol)加入搅拌的(S)-甲基1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(341mg，0.489mmol)的THF(10mL)溶液。24h后，用水(100mL)稀释混合物，并用EA(2x 100mL)萃取。合并的有机萃取物用卤水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥并蒸干溶剂。柱层析(AcOH/EA/DCM/异己烷)得到233mg(70％)的(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸—化合物635，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C39H46N4O5S的计算值：682.3；无观察到的m/z，tR＝10.17min(方法10)。光学纯度为>98％的e.e.(手性方法)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.75(s,1H),9.17(d,J＝1.8Hz,2H),8.77(app dd,J＝8.3,2.7Hz,1H),8.32(dd,J＝8.2,4.7Hz,2H),7.79(d,J＝8.7Hz,2H),7.70(d,J＝3.9Hz,1H),7.47–7.52(m,2H),7.11–7.07(m,2H),6.93(app dd,J＝3.9,1.4Hz,1H),4.70–4.63(m,1H),4.43(t,J＝9.0Hz,0.5H),4.30(dd,J＝8.7,6.0Hz,0.5H),4.21(t,J＝8.9Hz,0.5H),4.15(dd,J＝8.5,6.3Hz,0.5H),4.08-3.99(m,3H),3.47-3.40(m,1H),3.93-3.87(m,1H),3.15–3.01(m,2H),1.77-1.70(m,2H),1.49–1.16(m,17H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。

依次使用一般步骤26、7和8，从(2S,3R)-2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸和(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192制备化合物642。

使用一般步骤7，从化合物635制备化合物650和654。

使用一般步骤4，从化合物654制备化合物649。

苏式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯HCl

使用一般步骤22制备：将三甲基氯硅烷(19.8mL，155mmol)加入搅拌的苏式-2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸(7g，38.6mmol)的MeOH(20mL)溶液。将混合物加热回流16h，然后蒸干溶剂，得到8.95g(100％)的苏式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯HCl。LCMS-ESI(m/z)，C10H13NO3的计算值；195.1；测量值196.0[M+H]⁺，tR＝0.18min(方法10)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,3H),7.42–7.31(m,5H),5.03(d,J＝5.4Hz,1H),4.18(app t,J＝5.4Hz,1H),3.63(s,3H)。

苏式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤23制备：将二碳酸二叔丁酯(1.451g，6.65mmol)加入搅拌的苏式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯HCl(1.1g，4.75mmol)、MeOH(10mL)和NaHCO3(8.44mL，0.9M的水溶液，7.60mmol)的混合物。3h后，减压蒸发大部分MeOH，并用乙醚(2x 40mL)萃取水相。合并的有机萃取物用MgSO4干燥，并蒸干溶剂。残留物用异己烷再成浆，并通过过滤收集固体，得到1.1g(78％)的苏式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C15H21NO5的计算值：295.1；测量值318.0[M+Na]⁺，tR＝4.45min(方法10)。

甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤24制备：在-78℃下将DMSO(0.77mL，10.8mmol)加入搅拌的草酰氯(0.47ml，5.42mmol)的DCM(50mL)溶液，并将反应搅拌10mins。然后用预冷却的苏式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯(1g，3.39mmol)的DCM(20mL)溶液对其进行处理。2h后，加入DIEA(2.96mL，16.93mmol)并使混合物升温至0℃。1h后，用NH4Cl(2x 20mL，饱和水溶液)洗涤混合物，并用MgSO4干燥有机物，并蒸干溶剂得到964mg(97％)的甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C15H19NO5的计算值：293.1；测量值316.0[M+Na]⁺，tR＝2.15min(方法11)。

赤式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤25制备：在-78℃下，将硼氢化钠(0.045g，1.193mmol)加入甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸酯(0.5g，1.705mmol)的MeOH(10mL)溶液。0.5h后，用NH4Cl(8mL，饱和水溶液)淬灭反应，并减压蒸干MeOH。用DCM(2x 30mL)萃取混合物，并用MgSO4干燥合并的有机萃取物，并蒸干溶剂。通过柱层析(EA/异己烷)纯化残留物，得到312mg(62％)的赤式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C15H21NO5的计算值：295.1；测量值318.0[M+Na]⁺，tR＝1.84min(方法11)。赤式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤8制备：将TFA(1.57mL，20.32mmol)加入搅拌的赤式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯(0.3g，1.02mmol)的DCM(15mL)溶液。3h后，蒸干溶剂，并通过强阳离子交换的离子交换层析法纯化残留物，得到195mg(98％)的赤式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，的计算值C10H13NO3：195.2；测量值196.0[M+Na]⁺，tR＝0.19min(方法11)。

依次使用一般步骤7和4，从赤式-2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸和(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192制备化合物651。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192和INT-46制备化合物663。

依次使用一般步骤7和4，然后制备手性HPLC，从赤式-2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸和(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192制备化合物665。

甲基(2,3-赤式)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤7制备：将DIEA(503μL，2.89mmol)加入搅拌的(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)-丙酸—化合物192(578mg，0.963mmol)和赤式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯(188mg，0.963mmol)在DMF(8mL)中的溶液。将混合物冷却至0℃，并用分批加入的HATU(384mg，1.01mmol)处理。移除冷浴，并使反应搅拌2h。用柠檬酸(100mL，10％w/v的水溶液)处理混合物，并用EA(3x 20mL)萃取。合并的有机萃取物用MgSO4干燥，并蒸干溶剂。柱层析(EA/异己烷)得到654mg(87％)的甲基(2,3-赤式)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯，为白色固体。LCMS-ESI(m/z)，C45H52N4O6S的计算值：776.4；无观察到的m/z，tR＝3.24min(方法11)。

(2R,3R)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸(化合物666)

使用一般步骤4制备：将LiOH(231μL，2M的水溶液，0.463mmol)加入搅拌的甲基(2,3-赤式)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)-苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯(327mg，0.421mmol)的THF(5mL)溶液。30分钟后，将混合物倒入柠檬酸(25mL，10％w/v的水溶液)，并用DCM(3x30mL)萃取。合并的有机萃取物用MgSO4干燥，并蒸干溶剂。通过柱层析(AcOH/MeOH/DCM)，然后制备手性HPLC来纯化残留物，得到15mg(5％)的(2R,3R)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)-苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸—化合物666。LCMS-ESI(m/z)，C44H50N4O6S的计算值：762.4；无观察到的m/z，tR＝10.68min(方法10)。光学纯度为>70％的d.e.(手性方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.71(s,1H),9.15(s,2H),8.51(d,J＝9.3Hz,1H),8.42(d,J＝9.0Hz,1H),8.27–8.23(m,2H),7.80–7.77(m,2H),7.61(d,J＝3.9Hz,1H),7.42–7.37(m,4H),7.27–7.20(m,3H),7.10–7.08(m,2H),6.89(d,J＝3.9Hz,1H),5.81(s,1H),4.80(d,J＝8.8Hz,1H),4.68–4.62(m,1H),4.55(t,J＝9.0Hz,1H),4.04(t,J＝6.5Hz,2H),2.59–2.52(m,2H),1.80–1.68(m,2H),1.43-1.29(m,17H),0.94–0.83(m,3H)。

(2R,3S)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸(化合物667)

使用一般步骤7和4制备：将DIEA(122μL，0.699mmol)加入搅拌的苏式-甲基2-氨基-3-羟基-3-苯基丙酸酯(50mg，0.256mmol)和(S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酸—化合物192(140mg，0.233mmol)在DMF(3mL)中的溶液，并将混合物冷却至0℃。分批加入HATU(97mg，0.256mmol)，并使混合物升温至室温反应2h。用柠檬酸(40mL，5％w/v的水溶液)处理混合物，并滗析液体。用EA(50mL)萃取水相，并用其溶解固体残留物。用甲苯(5mL)稀释该溶液，并蒸干溶剂。通过柱层析(ACN/DCM)纯化残留物。将由此得到的中间体酯溶于THF/MeOH(1:1，3mL)，并使其与LiOH(0.23mL，2M的水溶液，0.46mmol)搅拌。16h后，再加入LiOH(0.58mL，2M的水溶液，1.17mmol)。又1h后，用柠檬酸(20mL，10％w/v的水溶液)处理混合物，并通过过滤收集沉淀物。通过制备手性HPLC纯化，得到5mg(3％)的(2R,3S)-2((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-(庚氧基)苯基)嘧啶-2-基)-苯基)丙酰胺基)-3-羟基-3-苯基丙酸—化合物667。LCMS-ESI(m/z)，C44H50N4O6S的计算值：762.4；无观察到的m/z，tR＝10.63min(方法10)。光学纯度为<80％的d.e.(手性方法2)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.71(s,1H),9.08(s,2H),8.30(dd,J＝17.6,9.1Hz,2H),8.24–8.13(m,2H),7.78–7.66(m,2H),7.53(d,J＝3.9Hz,1H),7.32(app ddd,J＝16.7,7.6,1.8Hz,4H),7.25–7.08(m,3H),7.08–6.90(m,2H),6.83(d,J＝3.8Hz,1H),5.81(d,J＝4.6Hz,1H),5.17(s,1H),4.72(ddd,J＝11.0,9.0,3.9Hz,1H),4.50(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),3.96(t,J＝6.5Hz,2H),2.78(dd,J＝13.8,3.7Hz,1H),2.68–2.54(m,1H),1.75–1.59(m,2H),1.42–1.12(m,17H),0.89–0.75(m,3H)。

使用一般步骤10，从INT-34和5-(4-(庚氧基)苯基)-2-碘嘧啶制备化合物670。

使用2-氯-6-羟基喹啉和1-溴庚烷进行一般步骤12，使用INT-13进行一般步骤10，然后进行一般步骤8来制备化合物671。

使用3-氯-7-羟基喹啉和1-溴庚烷进行一般步骤12，使用INT-13进行一般步骤10，并进行一般步骤8来制备化合物672。

使用2-氯-6-羟基喹唑啉和1-溴庚烷进行一般步骤12，使用INT-13进行一般步骤10，然后进行一般步骤8来制备化合物673。

使用一般步骤11，然后使用一般步骤8，从INT-28制备化合物674和693。

使用一般步骤10和8，从INT-28制备化合物675–691、694、695和696。

使用市售的腈进行一般步骤2，然后使用INT-33进行一般步骤5，并进行一般步骤8来制备化合物692、744–748、751–755、758–760。

通过使用一般步骤10偶联市售的酚硼酸和INT-28，然后使用一般步骤12和8来制备化合物697–705。

使用一般步骤12和8，从INT-29制备化合物706–716和803。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从INT-32制备化合物717–742和800。

使用一般步骤5和8，从INT-33制备化合物743、749、750、756和757。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤4，从INT-35制备化合物761–769。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从INT-36制备化合物770和771。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤4，从INT-37制备化合物772–774。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从INT-38制备化合物775。

使用(3-甲基-4-羟基苯基)硼酸和INT-38进行一般步骤10，然后使用1-溴庚烷进行一般步骤12，然后进行一般步骤8来制备化合物776。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从INT-38制备化合物777–789。

依次使用一般步骤10、12、18、7和8，从(4-羟基-2-甲基苯基)硼酸和(R)-叔丁基2-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯—INT-42制备化合物790。

依次使用一般步骤12、27、10、18、7和8，从4-溴-3,5-二甲基苯酚和(R)-叔丁基2-((S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)丙酸酯—INT-42制备化合物791。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从INT-45制备化合物792–794。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从INT-48制备化合物795–797和799。

叔丁基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-((4-甲基苯基)氧基)苯基-)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯

使用一般步骤12制备：将Cs2CO3(197mg，0.58mmol)和1-溴-4-甲基戊烷(158mg，0.96mmol)加入搅拌的INT-48(300mg，0.479mmol)的DMF(5mL)溶液。使反应混合物在65℃下搅拌18h，然后用NaHCO3水溶液(100ml，饱和)稀释，并用EA(2X 100mL)萃取。干燥合并的有机层(Na2SO4)，浓缩，并通过柱层析(EA/己烷)纯化，得到188mg(54％)的叔丁基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-((4-甲基苯基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C42H52N4O5S的计算值：724.96；测量值725.3[M+H]⁺，tR＝12.71min(方法16)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.97(d,J＝7.5Hz,2H),8.45(d,J＝5.5Hz,2H),7.55(s,2H),7.49–7.31(m,3H),7.05(d,J＝6.6Hz,2H),6.82(s,1H),6.68(d,J＝28.8Hz,1H),4.82(s,1H),4.30(s,0.5H),4.07(m,5.5H),3.56(s,0.5H),3.31–3.09(m,2H),2.91(s,0.5H),1.83(s,2H),1.60(d,J＝25.3Hz,1H),1.40(s,16H),1.29(s,4H),0.95(s,6H)。

(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-((4-甲基苯基)氧基)苯基)-嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸(798)

使用一般步骤8制备：将TFA(2mL)加入搅拌的叔丁基(S)-1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-((4-甲基苯基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸酯(188mg，0.26mmol)的DCM(2mL)溶液。将混合物搅拌4h，然后浓缩。将得到的固体溶于DCM(10mL)并浓缩(5X)，以除去过量的TFA，得到169mg(98％)的1-(2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-((4-甲基苯基)氧基)苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰基)氮杂环丁烷-3-羧酸—798，为黄色固体。LCMS-ESI(m/z)，C38H44N4O5S的计算值：668.85；测量值669.3[M+H]⁺，tR＝9.121min(方法16)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.17(s,2H),8.12(d,J＝7.8Hz,2H),7.58(m,3H),7.45(m,1H),7.42(m,2H),7.06(m,2H),6.84(m,1H),4.71(d,J＝7.7Hz,1H),4.33–4.14(m,2H),4.08(dd,J＝19.8,9.1Hz,2H),4.03(t,J＝6.6Hz,2H),3.30(dd,J＝12.5,4.2Hz,1H),3.06(t,J＝11.9Hz,1H),2.91(s,1H),1.91–1.76(m,2H),1.64(dt,J＝13.0,6.6Hz,1H),1.43–1.33(m,11H),0.95(d,J＝6.6Hz,6H)。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物2制备化合物801。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物83制备化合物802。

使用一般步骤7和8，从化合物267制备化合物804。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物671制备化合物806和807。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物672制备化合物808。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从673制备化合物809和810。

依次使用一般步骤10、10、8、7、18、7和8，从(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-6和5-溴-2-碘吡啶制备化合物811。

依次使用一般步骤10、10、8、7、18、7和8，从2-溴-5-碘基-3-甲基吡啶和(S)-叔丁基2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙酸酯—INT-6制备化合物812。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从INT-24制备化合物813–830和832–843。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从INT-39制备化合物844–853和855–868。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物90制备化合物869和870。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物871–879。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从化合物192制备化合物880–882和888。

使用一般步骤7、4，然后使用一般步骤8，从化合物192和甲基(2S,3S)-2-氨基-3-((叔丁氧羰基)氨基)-3-苯基丙酸酯制备化合物883。

使用一般步骤7，从化合物349制备化合物884、885和887。

使用一般步骤7，从化合物192制备化合物886。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物889。

甲基2-氨基-3-甲氧基-3-苯基丙酸酯

将质子海绵(430μL，2.0mmol)、分子筛(520mg)和三甲基氧鎓四氟硼酸(260mg)加入搅拌中的苏式-甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羟基-3-苯基丙酸酯(148mg，0.5mmol)的DCM(5mL)溶液。使反应混合物在室温下强力搅拌24小时，并通过过滤除去固体。用10％的硫酸铜水溶液(10mL)、饱和氯化铵水溶液(10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)和卤水(10mL)洗涤滤液。有机层用硫酸镁干燥，并浓缩。通过柱层析(含0-100％EA的己烷)纯化粗化合物，得到86mg的甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲氧基-3-苯基丙酸酯，将其溶于DCM(1mL)并用TFA(425μL)处理。1小时后，除去所有溶剂，得到96mg(59％)的甲基2-氨基-3-甲氧基-3-苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C11H15NO3的计算值：209.1；测量值210.1[M+H]⁺，tR＝1.46min(方法16)。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从甲基2-氨基-3-甲氧基-3-苯基丙酸酯和化合物192制备化合物890。

使用一般步骤7、4，然后使用一般步骤8，从1-叔丁基3-甲基哌嗪-1,3-二羧酸酯和化合物192制备化合物891。

使用1,3-吡咯烷二羧酸，5-甲基-,1-(1,1-二甲基乙基)酯进行一般步骤22，然后进行一般步骤8，并使用化合物192进行一般步骤7，然后进行一般步骤4来制备化合物892。

使用一般步骤22、8、7，然后使用一般步骤4，从化合物85和1,3-吡咯烷二羧酸，5-甲基-,1-(1,1-二甲基乙基)酯制备化合物893。

使用一般步骤7，从3-(氨基甲基)-3-羟基-1-甲基吡咯烷和化合物192制备化合物894。

依次使用一般步骤7、28和29，从化合物192和(2R,3R)-甲基2-氨基-3-羟基丁酸酯盐酸盐制备化合物895。

使用2-氨基-3-苯基丁酸进行一般步骤22，并使用INT-22依次进行一般步骤7、18、7和4来制备化合物896–899。

从使用一般步骤30制备的适合的氨基醇，和依次使用一般步骤7和8的化合物192制备化合物900–908和911–918。

从使用一般步骤22的(2S,3S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-苯基丁酸和依次使用一般步骤7和4的化合物192制备化合物909。

从使用一般步骤22的(2R,3R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-苯基丁酸和依次使用一般步骤7和4的化合物192制备化合物910。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从INT-48制备化合物919–922、944和945。

叔丁基2-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰胺基)-3-(叔丁氧基)-3-苯基丙酸酯

使用一般步骤7制备。将DIEA(267μL，1.54mmol)和INT-17(300mg，0.6mmol)加入搅拌中的叔丁基2-氨基-3-(叔丁氧基)-3-苯基丙酸酯(198mg，0.7mmol)的DMF(5mL)溶液。在冰浴中将溶液冷却至0℃，然后加入HATU(245mg，0.6mmol)。使反应在0℃下搅拌1小时，然后升温至RT搅拌2小时。用NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应溶液，并用EA(3x 50mL)萃取。合并的有机物用Na2SO4干燥，并通过层析法(EA/己烷)纯化，得到308mg(67％)的叔丁基2-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰胺基)-3-(叔丁氧基)-3-苯基丙酸酯。LCMS-ESI(m/z)，C39H47BrN4O5S的计算值：763.79；测量值764.2[M+H]+，tR＝4.64min.(方法15)。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从叔丁基2-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰胺基)-3-(叔丁氧基)-3-苯基丙酸酯制备化合物925–934和943。

叔丁基3-(叔丁氧基)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-苯基丙酸酯(INT-51)

将(4-羟基苯基)硼酸(63mg，0.5mmol)、碳酸钠十水合物(217mg，0.8mmol)、叔丁基2-((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰胺基)-3-(叔丁氧基)-3-苯基丙酸酯(290mg，0.4mmol)、Pd(dppf)Cl2(28mg，0.04mmol)、二氧六环(10.0mL)和水(2.0mL)加入100ml的烧瓶。将反应混合物加热至80℃过夜。减压干燥反应混合物以除去溶剂，并用DCM(20mL)稀释。用NaHCO3水溶液(3x 10mL)洗涤混合物。合并的有机物用Na2SO4干燥，并蒸发浓缩，得到309mg(106％)的粗叔丁基3-(叔丁氧基)-2-((S)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)-3-(4-(5-(4-羟基苯基)嘧啶-2-基)苯基)丙酰胺基)-3-苯基丙酸酯—INT-51，其在不经过进一步纯化的情况下使用。LCMS-ESI(m/z)，C45H52N4O6S的计算值：776.9；测量值721[M-^tBuO]+，tR＝11.03min.(方法14)。

使用一般步骤12，然后使用一般步骤8，从INT-51制备化合物923、924和935–942。

使用2-溴-5-碘基-3-甲基吡啶和4-(庚氧基)苯基硼酸进行一般步骤10，然后使用INT-6依次进行一般步骤10、18、7和8来制备化合物946。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤4，从INT-49制备化合物947–960。

使用一般步骤7，从化合物192制备化合物961–978。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物984–989、991和1047。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物24制备化合物979–983和990。

使用一般步骤10，然后使用一般步骤8，从叔丁基((S)-3-(4-(5-溴嘧啶-2-基)苯基)-2-(5-(叔丁基)噻吩-2-甲酰胺基)丙酰基)-D-丙氨酸酯制备化合物992–1046和1050–1055。

使用一般步骤7，然后使用一般步骤8，从化合物192制备化合物1048和1049。

表1中示出了所选化合物和其相应的分析数据，其中，使用表明的方法收集LCMS数据。

表1

生物实验

实验步骤

GLP-1 PAM转换cAMP测定：在固定浓度的化合物存在下，肽配体的剂量应答。

表达GLP-1R的CRB-bla CHO-K1细胞系购自Invitrogen。将细胞植入白色384孔平底板，5000个细胞/孔/20μL生长培养基(DMEM-高葡萄糖,10％透析过的FBS,0.1mM NEAA,25mM Hepes,100U/mL青霉素/100μg/mL链霉素,5μg/mL杀稻瘟菌素,600μg/mL潮霉素)，于37℃在5％CO2孵育18h。用12μL测定缓冲液(Hanks平衡盐溶液,10mM Hepes,0.1％BSA,pH 7.4)代替生长培养基。在含有1.5mM IBMX、12.5％DMSO和50μM化合物的测定缓冲液中生成5×肽剂量应答曲线(12-点)。肽配体为GLP-1(9-36)。加入5×肽剂量应答以及化合物混合物(3μL)，在37℃孵育细胞30min。使用DiscoveRx HitHunter cAMP试剂盒根据生产商的说明书进行cAMP的直接检测，使用SpectraMax M5读板仪读取发光。通过非线性回归分析发光，以确定EC50和Emax。包括GLP-1(7-36)剂量应答以确定最大效力。

EC20GLP-1(9-36)PAM cAMP测定：在固定浓度的GLP-1(9-36)存在下，化合物的剂量应答。

将在生长培养基(DMEM-高葡萄糖,10％透析过的FBS,0.1mM NEAA,25mM Hepes,100U/mL青霉素/100μg/mL链霉素,5μg/mL杀稻瘟菌素,600μg/mL潮霉素)中培养的GLP-1R CRE-bla CHO-K1细胞用胰蛋白酶处理，并以5000个细胞/孔，悬浮置于白色384孔平底板中的12μL测定缓冲液中(Hanks平衡盐溶液,10mM Hepes,0.1％BSA,pH 7.4)。在含有1.5mM IMBX、4％DMSO的测定缓冲液中生成5×化合物剂量应答曲线(12-点)。将GLP-1(9-36)在含有1.5mM IBMX和4％DMSO的测定缓冲液中稀释至4.2μM。加入5×化合物剂量应答(3μL)，然后加入0.5μL的GLP-1(9-36)，在37℃孵育细胞30min。使用DiscoveRx HitHunter cAMP试剂盒根据生产商的说明书进行cAMP的直接检测，使用SpectraMax M5检测仪读取发光。使用cAMP标准曲线将发光转化为总cAMP，并使用非线性回归分析数据以确定EC50和Emax。

肽序列

GLP-1(7-36)(SEQ ID NO:2):HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH2。GLP-1(9-36)(SEQ ID NO:3):EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH2。GLP-1(7-36)购自GenScript。GLP-1(9-36)购自Biopeptide Co.,Inc.。

报告的GLP-1活性

选定的GLP-1调节剂的活性数据示于表2中。EC20GLP-1(9-36)PAM活性范围按以下表示：+表示活性<0.8μM,++表示活性为0.8-2.5μM,+++表示活性为2.5-5μM,以及++++表示活性为5-10μM。

表2

体内实验

体内实验步骤

C57Bl/6小鼠的口服葡萄糖耐受实验

空腹的C57BL/6雌性小鼠为8-10周龄。在oGTT前至少1h给予西格列汀、化合物或媒介物。灌胃使小鼠接受葡萄糖丸(3g/kg)(时间0)。频繁地从尾尖端采集血样，以用于血糖测定(BD血糖仪；Becton-Dickinson，Lincoln Park，NJ)。

ob/ob小鼠的口服葡萄糖耐受实验

空腹的ob/ob雌性小鼠为7-10周龄。在oGTT之前至少1h给予西格列汀、化合物或媒介物。灌胃使小鼠接受葡萄糖丸(0.2g/kg)(时间0)。频繁地从尾尖端采集血样，以用于血糖测定(BD血糖仪；Becton-Dickinson，Lincoln Park，NJ)。

fa/fa大鼠的口服葡萄糖耐受实验

使用Pederson等人(Diabetes，第47卷，1998年8月，1253-1258)描述的方案来评估这些化合物在大鼠中的降血糖用途。过夜禁食后，通过注射器和饲管以40％的溶液(重量/体积)向瘦或肥胖动物口服给予葡萄糖(1g/kg)。将化合物与葡萄糖一起溶解后给予。在对照试验中，将赋形剂与口服葡萄糖一起给予。在给予葡萄糖后的0、5、10、20、30和60分钟，从清醒无拘束大鼠的尾静脉采集血样，装入肝素化的毛细管中。在4℃离心血样，将血浆在-20℃储存，直至用于分析葡萄糖和测量胰岛素。使用葡萄糖氧化酶方案(Beckman血糖仪；Fullerton,CA)测量葡萄糖水平。

能将上述各种实施方案进行组合以提供其他实施方案。通过引用方式将本说明书引用的和/或申请数据单中列出的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、国外专利、国外专利申请和非专利出版物以其整体并入本文。若必要，则实施方案的多个方面可以被修改以采用各种专利、申请和出版物的概念从而提供其他实施方案。根据上述详细描述，能对实施方案进行这些和其他的改变。一般而言，在所附权利要求中，使用的术语不应解释为将权利要求限制在本说明书和权利要求中公开的具体实施方案，但应解释为包括所有可能的实施方案连同这类权利要求所包含的等同物的所有范围。因此，权利要求不受本公开的限制。