化合物的制作方法

相关申请本申请请求保护在2014年1月29日向中华人民共和国国家知识产权局提交的PCT国际申请号PCT/CN2014/000140的优先权权益，将其全部内容引入本文作为参考。发明领域本发明涉及抑制LRRK2激酶活性的新化合物、它们的制备方法、含有它们的组合物及它们在治疗以LRRK2激酶活性为特征的疾病中的用途，例如，帕金森氏病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)和阿尔茨海默氏病。

背景技术：
帕金森氏病(PD)是一种神经变性疾病，其特征在于在脑黑质区域的多巴胺能神经元的选择性变性和细胞死亡。帕金森氏病通常被认为是散发性的且病因不明，但是，在过去的15年中，对这一疾病的遗传基础和相关致病机制的理解已经有了重要的发展。该研发的一个领域是了解富含亮氨酸的重复激酶2(LRRK2)蛋白。在家族性研究中，LRRK2基因中的一些错义突变与常染色体显性帕金森氏病密切相关(参见WO2006068492和WO2006045392；Trinh和Farrer2013，NatureReviewsinNeurology9：445-454；Paisan-Ruiz等人，2013，J.Parkinson’sDisease3：85-103)。LRRK2中的G2019S突变是最常见的错义突变并且与临床表型相关，其非常类似于散发性帕金森氏病。所述LRRK2G2019S突变也存在于大约1.5％的散发性帕金森氏病病例中(参见Gilks等人，2005，Lancet，365：415-416)。除了在LRRK2中已知的致病编码突变，已鉴定了额外的LRRK2氨基酸编码变体，其也与发展帕金森氏病的风险有关(参见Ross等人，2011LancetNeurology10：898-908)。此外，全基因组关联研究(GWAS)已将LRRK2确定为帕金森氏病易感基因座，这表明LRRK2可能也与不具有导致LRRK2蛋白中氨基酸置换的突变的散发性帕金森氏病的病例有关。(参见Satake等人，2009NatureGenetics41:1303-1307；Simon-Sanchez等人2009NatureGenetics41:1308-1312)LRRK2是ROCO蛋白家族的一个成员且该家族的所有成员共享5个保守结构域。最常见的致病突变G2019S发生在LRRK2的高度保守的激酶结构域。这一突变在重组LRRK2蛋白的体外酶测试(参见Jaleel等人，2007，BiochemJ，405：307-317)以及在从G2019SPD患者来源的细胞中纯化的LRRK2蛋白(参见Dzamko等人，2010Biochem.J.430：405-413)中使得LRRK2激酶活性升高。使得在不同的残基(R1441)上氨基酸置换的不太常见的LRRK2致病突变也已显示出通过降低LRRK2的GTP酶结构域水解GTP的速率来提高LRRK2激酶活性(参见Guo等人，2007ExpCellRes.313：3658-3670；West等人，2007Hum.MolGen.16：223-232)。因此，该证据表明，所述激酶以及LRRK2的GTP酶活性对于发病机制至关重要，且所述LRRK2激酶结构域可调节整体LRRK2的功能(参见Cookson，2010Nat.Rev.Neurosci.11：791-797)。有证据表明，增加的LRRK2激酶活性与细胞培养模型中的神经元毒性相关(参见Smith等人，2006NatureNeuroscience9：1231-1233)并且激酶抑制剂化合物防止LRRK2介导的细胞死亡(参见Lee等人，2010Nat.Med.16：998-1000)。已经发现，来源于LRRK2G2019S帕金森氏病患者的诱导性多功能干细胞(iPSC)呈现在轴突生长(neuriteoutgrowth)上的缺陷和对鱼藤酮增加的易感性，其可通过G2019S突变的遗传校正或用LRRK2激酶活性的小分子抑制剂处理细胞进行改善(参见Reinhardt等人，2013CellStemCell12：354-367)。与iSPC中LRRK2G2019S突变相关的增加的线粒体损伤也通过G2019S突变的遗传校正得以阻止(参见Sanders等人，2013Neurobiol.Dis.62：381-386)。额外的证据将LRRK2功能与自噬溶酶体通路的功能障碍相联系(参见Manzoni和Lewis，2013FasebJ.27:3234-3429)。LRRK2蛋白导致在侣伴蛋白介导的自噬方面的缺陷，其消极影响了细胞降解α-突触核蛋白的能力(Orenstein等人，2013NatureNeurosci.16394-406)。在其他细胞模型中，选择性LRRK2抑制剂已经显示出刺激大自噬(macroautophagy)(参见Manzoni等人，2013BBAMol.CellRes.1833：2900-2910)。这些数据表明，LRRK2激酶活性的小分子抑制剂可能在治疗以细胞蛋白质稳态的缺陷为特征的疾病中有效，所述疾病由异常自噬/溶酶体降解通路引起，包括以下形式：与GBA突变有关的帕金森氏病(参见Swan和Saunders-Pullman2013Curr.Neurol.NeurosciRep.13：368)、其他α-突触核蛋白病、Tau蛋白病、阿尔茨海默氏病(参见Li等人，2010Neurodegen.Dis.7：265-271)和其他神经变性疾病(参见Nixon2013Nat.Med.19：983-997)和戈谢病(参见Westbroek等人，2011Trends.Mol.Med.17：485-493)。此外，相比于正常受试者的成纤维细胞，在尼曼-皮克C型(NPC)疾病患者的成纤维细胞中也已观察到显著升高的LRRK2mRNA水平，这表明，异常LRRK2功能可能在溶酶体疾病中起作用(参见Reddy等人，2006PLOSOne1(1):e19doi：10.1371/journal.pone.0000019–supportinginformationDatasetS1)。这一观察结果表明，LRRK2抑制剂可能在治疗NPC中有效。所述LRRK2的PD相关的G2019S突变形式也已经报道提高了微管蛋白相关的Tau的磷酸化(参见Kawakami等人，2012PLoSONE7：e30834，doi10.1371)，且已提出了疾病模型，其中LRRK2作用于Tau和α-突触核蛋白的致病作用的上游(参见Taymans&Cookson，2010，BioEssays32：227-235)。为了支持这点，在转基因小鼠模型中，LRRK2的表达已与增加的不溶性Tau的聚集和增加的Tau磷酸化相关(参见Bailey等人，2013ActaNeuropath.126:809-827)。据报道，PD致病突变蛋白LRRK2R1441G的过表达导致在转基因小鼠模型中帕金森氏病症状和Tau的高度磷酸化(参见Li，Y.等人2009，NatureNeuroscience12：826-828)。因此，这些数据表明，激酶催化活性的LRRK2抑制剂可用于治疗以Tau的高度磷酸化为特征的tau蛋白病，例如嗜银颗粒病、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹以及与17号染色体相关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)(参见Goedert，M和Jakes，R(2005)BiochemicaetBiophysicaActa1739，240-250)。此外，LRRK2抑制剂可能在治疗以降低的多巴胺水平为特征的其他疾病(例如与药物成瘾性相关的戒断症状/复发)中有效(参见Rothman等人，2008，Prog.BrainRes，172：385)。其他研究也显示了LRRK2的G2019S突变型的过表达导致在转基因小鼠模型中脑室下区(SVZ)神经祖细胞的细胞增殖和迁移的缺陷(参见Winner等人，2011Neurobiol.Dis.41：706-716)并减少轴突长度和分支的细胞培养模型(参见Dachsel等人，2010Parkinsonism&RelatedDisorders16：650-655)。此外，据报道，在中风的啮齿动物模型中，在局部缺血损伤之后，促进SVZ神经祖细胞细胞增殖和迁移的试剂也提高神经系统预后(参见Zhang等人，2010J.Neurosci.Res.88：3275-3281)。这些结果表明，抑制LRRK2异常活性的化合物可在神经元损伤(如缺血性发作、外伤性脑损伤、脊髓损伤)后用于旨在刺激中枢神经系统功能的恢复的治疗。在LRRK2上的突变也已经得到确定，其在临床上与从轻度认知损伤(MCI)到阿尔茨海默氏病的转变有关(参见WO2007149798)。这些数据表明，LRRK2激酶活性的抑制剂可用于治疗疾病，例如阿尔茨海默氏病、其他痴呆和相关的神经变性疾病。在一些疾病组织和疾病模型中也观察到了正常的LRRK2蛋白的异常调节。miR-205对LRRK2的翻译控制的正常机制在一些散发性PD病例中被扰乱，其中在PD脑样品中miR-205水平的显著降低与这些样品中升高的LRRK2蛋白水平同时发生(参见Cho等人，(2013)Hum.Mol.Gen.22：608-620)。因此，LRRK2抑制剂可用于治疗具有升高的正常LRRK2蛋白水平的散发性PD患者。在狨猴的帕金森氏病试验模型中，LRRK2mRNA的升高是以与诱导运动障碍的L-多巴的水平相关的方式观察到的(参见Hurley，M.J等人，2007Eur.J.Neurosci.26：171-177)。这表明，LRRK2抑制剂可用于改善这种运动障碍。已经报道了在ALS患者肌活检样品中显著升高的LRRK2mRNA水平(参见Shtilbans等人，2011AmyotrophicLateralSclerosis12：250-256)。提出LRRK2激酶活性的升高水平可以是ALS特有的特征。因此，该观察结果表明，LRRK2抑制剂可用于治疗ALS。还有证据表明，LRRK2激酶活性可能在介导小神经胶质促炎症反应中发挥作用(参见Moehle等人，2012，J.Neuroscience32:1602-1611)。这一观察结果表明了LRRK2抑制剂在治疗导致一系列神经变性疾病(包括帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、多发性硬化、HIV-诱导的痴呆、肌萎缩侧索硬化、缺血性发作、外伤性脑损伤和脊髓损伤)的异常神经炎症机制中可能的效用。一些证据还表明，LRRK2在体外调节神经元祖分化中发挥作用(参见Milosevic，J.等人，2009Mol.Neurodegen.4：25)。该证据表明，LRRK2的抑制剂可在体外生成神经元祖细胞中具有效用，其用在CNS障碍的基于细胞的治疗的后续治疗应用中。据报道，具有LRRK2G2019S突变的帕金森氏病患者表现出增加的患非皮肤癌的频率，包括肾癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌以及急性髓性白血病(AML)。因为有证据显示在LRRK2中的G2019S突变提高LRRK2激酶结构域的催化活性，因此，LRRK2的小分子抑制剂可用于治疗癌症，例如肾癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌(例如实体瘤)和血液癌症(参见AML；Saunders-Pullman等人，2010，MovementDisorders，25:2536-2541；Inzelberg等人，2012Neurology78：781-786)。在乳头状肾癌和甲状腺癌中还报道了LRRK2的扩增和过表达，其中LRRK2与MET癌基因之间的协同效应可能促进肿瘤细胞生长和存活(参见Looyenga等人，2011PNAS108：1439-1444)。一些研究表明，常见的LRRK2的遗传关联性随着对强直性脊柱炎(参见DanoyP，等人，2010.PLoSGenet.；6(12):e1001195；和麻风病感染.(参见ZhangFR，等人2009，NEnglJMed.361:2609-18.)的敏感性变化。这些发现表明，LRRK2的抑制剂可用于治疗强直性脊柱炎和麻风病感染。对克罗恩病的三个全基因组相关扫描的荟萃分析确定了许多与该疾病相关的基因座，包括含有LRRK2基因的基因座(参见Barrett等人，2008，NatureGenetics，40：955-962)。也已出现了以下证据，即LRRK2是IFN-γ靶基因，其可参与与克罗恩病的发病机制相关的信号传导通路(参见Gardet等人，2010，J.Immunology，185：5577-5585)。这些发现表明，LRRK2的抑制剂可用于治疗克罗恩病。作为IFN-γ靶基因，LRRK2也在T细胞机制中发挥作用，所述机制是其他免疫系统疾病(例如多发性硬化和类风湿关节炎)的基础。LRRK2抑制剂的其他潜在效用来自以下所报道的发现：B淋巴细胞构成LRRK2表达细胞的主要群体(参见Maekawa等人2010，BBRC392：431-435)。这表明，LRRK2抑制剂可有效治疗免疫系统疾病，其中B细胞耗竭在例如以下疾病中是(或可能是)有效的：例如淋巴瘤、白血病、多发性硬化(参见Ray等人，2011J.Immunol.230：109)、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、单纯红细胞再生障碍、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、埃文斯综合征(Evanssyndrome)、血管炎、大疱性皮肤病、I型糖尿病、干燥综合征、德维克病和炎性肌病(参见Engel等人，2011Pharmacol.Rev.63：127-156；Homam等人，2010J.Clin.Neuromuscular疾病12：91-102)。

技术实现要素：
在第一方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：其中R1为H，R2为C1-5烷基，其任选被一个或多个羟基取代，或R1和R2与它们所连接的氮一起形成：(1)含氮杂环，其中所述杂环任选被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基、-CH2-OCH3、卤素和哌嗪-1-基，所述哌嗪-1-基在4位的氮上任选被C1-3烷基取代，或(2)双环环系统，其选自：其中Ra和Rb每次出现时独立地选自：H、CN、卤素、-CH2OCH3、C1-3烷氧基和C1-3烷基，所述C1-3烷氧基和C1-3烷基任选被一个羟基取代；R3和R6各自独立地选自：H、C1-3烷氧基、-O-C1-3卤代烷基、-O-CH2-C3-6环烷基、卤素和-NRxRy，其中Rx和Ry各自独立地为H或C1-3烷基；R4和R5各自独立地选自：H、卤素、C1-3烷氧基和C1-3烷基，R7为N或CH；R8选自：H、CN、C1-3卤代烷基和C1-3烷基；和R9选自：C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、-O-C1-3卤代烷基和–O-CH2-C3-6环烷基，前提是：式(I)化合物不为N-丙基-4-[[4-[3,3,3-三氟丙基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基]苯甲酰胺(N-propyl-4-[[4-[3,3,3-tris(fluoranyl)propyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-yl]amino]benzamide)。在本发明的其他方面，本发明提供了药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。在其他方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗或预防帕金森氏病或阿尔茨海默氏病。发明详述本发明的前述和其他方面现就本文所提供的说明和方法进行详细描述。应理解，本发明可以不同形式体现并且不应解释为仅限于本文所提及的实施方案。相反地，提供这些实施方案使得本公开充分且完整并将本发明的范围充分传达给本领域技术人员。在本文中用于本发明描述中的术语仅是为了描述具体实施方案而不旨在限制本发明。如在本发明实施方案和所附权利要求的描述中所用，单数形式的“一”、“一个”和“该”旨在包括复数形式，除非上下文中另外明确提及。此外，如本文所用，“和/或”是指和包括一或多个相关的所列项目的任意和所有可能的组合。将进一步理解，当用于本说明书时，术语“包含”和/或“包括”指定所述特征、整数、步骤、操作、元素和/或成分的存在，但不排除一或多个其他特征、整数、步骤、操作、元素、成分和/或它们的组的存在或添加。通常，本文所用命名和在本文所述的有机化学、药物化学、生物学中的实验室操作是本领域熟知的和常用的。除非另外提及，本文所用的全部技术和科学术语与本领域所属技术领域的一般技术人员通常所理解的具有相同的含义。在本文所用术语存在多个定义的情况下，除非另外提及，否则以本节中的那些为准。将本文所提及的所有专利、专利申请和出版物全部引入本文作为参考。在术语有冲突的情况下，以本说明书为准。A.定义如本文所用，“烷基”是指具有指定碳原子数的一价饱和烃链。例如，C1-3烷基是指具有1-3个碳原子的烷基。C1-5烷基是指具有1-5个碳原子的烷基。烷基可为直链或支链的。在一些实施方案中，支链烷基可能具有一个、两个或三个分支。示例性烷基包括，但不限于，甲基、甲基乙基、乙基、丙基(正丙基和异丙基)、甲基丙基、丁基(正丁基、异丁基和叔丁基)、戊基(正戊基、异戊基和新戊基)和己基。如本文所用，“烷氧基”是指基团-O-烷基。例如，C1-5烷氧基含有1-5个碳原子。C1-3烷氧基含有1-3个碳原子。示例性的烷氧基包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和戊氧基。如本文所用，“环烷基”是指3-10个碳原子的饱和单环烃环。例如，C3-6环烷基含有3-6个作为环成员的碳原子。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。如本文所用，“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。“卤”是指卤素基团：氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)或碘(-I)。如本文所用，“卤代烷基”是指本文所定义的烷基，其具有选自F、Cl、Br或I的一或多个卤素原子，其通过替代与碳原子相连的氢原子取代在该烷基的任意或全部碳原子上。例如，C1-3卤代烷基是指被一个或多个卤素原子取代的C1-3烷基。在一些实施方案中，“卤代烷基”是指被一个或多个独立地选自F或Cl的卤素原子取代的烷基。示例性的卤代烷基包括，但不限于，氯甲基、溴乙基、三氟甲基和二氯甲基。如本文所用“含氮杂环”是指5或6元含氮单杂环，其为饱和的且其含有至少一个氮原子。任选地，所述杂环可含有1或2个杂原子，其各自独立地选自O或N。含氮杂环的实例包括，但不限于，吗啉、哌嗪、哌啶、噁唑烷、吡咯烷等。如本文所用，提及基团中的“取代的”是指在基团中与成员原子(例如，碳原子)相连的一或多个氢原子被取代基所替代，所述取代基选自所定义的取代基的基团。应理解，术语“取代的”包括隐含的规定，即这种取代依照取代的原子和取代基允许的化合价并且该取代形成稳定的化合物(即不会自发进行转化的化合物，例如通过重排、环化或消除，且其足够稳定到从反应混合物中分离出来)。当提及一个基团可含有一个或多个取代基时，该基团中的一个或多个(根据需要)成员原子可被取代。此外，在基团中单一成员原子可被超过一种取代基取代，只要这种取代符合该原子允许的化合价。示例性的取代基包括，但不限于，烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、-CH2OCH3、OH和杂环烷基(例如，哌嗪基)。合适的取代基在本文中各取代的或任选取代的基团中定义。如本文所用，“任选取代的”是指基团，例如烷基、苯基、吡唑-4-基和可为未取代的烷氧基，或其可被一个或多个所定义的取代基所取代。如本文所用，术语“疾病”是指身体状态或一些器官的任意改变，中断或干扰其功能的实施和/或引起症状，例如被折磨的人或与人有接触的那些人的不适、功能障碍、疼痛或甚至死亡。疾病还可包括愠怒、病痛、不安、弊病、障碍、不健康、生病、抱怨、interdisposition和/或假象(affectation)。如本文所用，针对疾病的“治疗”或“处理”是指：(1)改善疾病或该疾病的一种或多种生物表现，(2)干扰(a)引起疾病或对该疾病负责的生物学级联的一个或多个点，或(b)该疾病的一种或多种生物表现，(3)减轻一种或多种症状或与该疾病相关的影响，(4)减缓该疾病的进展或该疾病的一种或多种生物表现，和/或(5)降低疾病或该疾病生物表现的严重程度的可能性。如本文所用，“预防”或“防止”是指预防性给药以降低疾病或其生物表现发作的可能性或延迟该疾病或其生物表现的发作。如本文所用，“受试者”是指哺乳动物受试者(例如，狗、猫、马、牛、绵羊、山羊、猴等)和人受试者，包括男性和女性受试者且包括新生儿、婴儿、少年、青少年、成人和老年受试者且还包括各种种族和族裔，包括，但不限于，白人、黑人、亚洲人、美洲印第安人和西班牙裔。如本文所用，“药学上可接受的盐”是指保留目标化合物的所需生物活性并表现出最小的不希望的毒理学效应的盐。这些药学上可接受的盐可在该化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者通过单独地将其游离酸或游离碱形式的纯化的化合物分别与合适的碱或酸反应进行制备。如本文所用，提及本发明化合物或其他药物活性剂的“治疗有效量”是指在合理的医学判断范围内，足以治疗或预防患者疾病但足够低地避免严重副作用(在合理的利益/风险比)的量。化合物的治疗有效量将根据所选择的具体化合物(例如考虑化合物的效力、有效性和半衰期)；所选择的给药途径；所治疗的疾病；所治疗的疾病的严重性；所治疗的患者的年龄、大小、体重和身体疾病；所治疗的患者的医疗史；治疗持续时间；并行疗法的性质；所需的治疗效果；和类似因素而变化，但仍可由本领域技术人员进行常规确定。如本文所用术语“本发明的化合物”或“该发明的化合物”是指如上所定义的式(I)化合物，其呈任意形式，即，任意盐或非盐形式(例如，作为游离酸或游离碱的形式，或作为盐，尤其是其药学上可接受的盐)及其任意物理形式(例如，包括非固体形式(例如，液体或半固体形式)和固体形式(例如，无定形或结晶形式，具体的多晶物形式、溶剂合物形式，包括水合物形式(例如，单-、二-和半-水合物))，以及各种形式的混合物。B.化合物在第一个方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：其中R1为H，R2为C1-5烷基，其任选被一个或多个羟基取代，或R1和R2与它们所连接的氮一起形成：(1)含氮杂环，其中所述杂环任选被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基、-CH2-OCH3、卤素和哌嗪-1-基，所述哌嗪-1-基在4位的氮上任选被C1-3烷基取代，或(2)双环环系统，其选自：其中Ra和Rb每次出现时独立地选自：H、CN、卤素、-CH2OCH3、C1-3烷氧基和C1-3烷基，所述C1-3烷氧基和C1-3烷基任选被一个羟基取代；R3和R6各自独立地选自：H、C1-3烷氧基、-O-C1-3卤代烷基、-O-CH2-C3-6环烷基、卤素和-NRxRy，其中Rx和Ry各自独立地为H或C1-3烷基；R4和R5各自独立地选自：H、卤素、C1-3烷氧基和C1-3烷基，R7为N或CH；R8选自：H、CN、C1-3卤代烷基和C1-3烷基；和R9选自：C1-3烷氧基、C1-3卤代烷基、-O-C1-3卤代烷基和–O-CH2-C3-6环烷基，前提是：式(I)化合物不为N-丙基-4-[[4-[3,3,3-三氟丙基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基]苯甲酰胺。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环任选被一个或两个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基、-CH2-OCH3、卤素和哌嗪，所述哌嗪任选在氮上被C1-3烷基取代，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环任选被一个或两个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基和卤素，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环选自吗啉、哌嗪或哌啶，其任选被一个或两个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基，或其药学上可接受的盐。还在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环是吗啉，其任选被一个或两个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环是没有取代的吗啉基，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环是哌嗪，其任选被一个或两个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成含氮杂环，其中所述杂环是噁唑烷或吡咯烷，其任选被一个或多个各自独立地选自以下的取代基取代：C1-3烷基，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮一起形成其中Ra和Rb每次出现时独立地选自：H、-CH2OCH3、C1-3烷氧基和–CH2OH，或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R3和R6各自独立地选自H和C1-3烷氧基，或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R3和R6各自独立地选自C1-3烷氧基，及其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R3和R6各自独立地选自H和–OCH3，或其药学上可接受的盐。还在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R3和R6是H，或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R4和R5各自独立地选自H和卤素，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R4和R5各自独立地选自H和F，或其药学上可接受的盐。还在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R4和R5是H，或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R7是CH，或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R8选自：H、CH3、CF3和CN，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R8选自：H、CH3和CN，或其药学上可接受的盐。还在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R8选自H和CN，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R8是H或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R9选自：C1-3烷氧基和–O-CH2-C3-6环烷基，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R9是C1-3烷氧基，或其药学上可接受的盐。还在另一实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R9是–OCH2CH3，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物和任意上文适用的实施方案，其中R9是–O-CH2-环丙基，或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，所述式(I)化合物是实施例E1-E66中任一个的化合物，其游离碱、游离酸或其盐(例如，药学上可接受的盐)。除了本文所述化合物的游离碱形式或游离酸形式，该化合物的盐形式也在本发明的范围内。本文所述化合物的盐或药学上可接受的盐可在该化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者通过单独地将其游离酸或游离碱形式的纯化的化合物分别与合适的碱或酸反应进行制备。有关合适的药用的盐的综述参见Berge等人，J.Pharm，Sci.，66，1-19，1977；PLGould，InternationalJournalofPharmaceutics，33(1986)，201-217；和Bighley等人，EncyclopediaofPharmaceuticalTechnology，MarcelDekkerInc，NewYork1996，Volume13，page453-497。在一些实施方案中，本发明化合物可含有酸性官能团，其足够酸以形成盐。代表性的盐包括药学上可接受的金属盐，例如钠、钾、锂、钙、镁、铝和锌盐；药学上可接受的金属阳离子(例如钠、钾、锂、钙、镁、铝和锌)的碳酸盐和碳酸氢盐；药学上可接受的有机伯胺、仲胺和叔胺，包括脂肪胺、芳香胺、脂肪二胺和羟基烷基胺，例如甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺和环己胺。在一些实施方案中，本发明化合物可含有碱性基团并因此能够通过用合适的酸处理形成药学上可接受的酸加成盐。合适的酸包括药学上可接受的无机酸和药学上可接受的有机酸。这些盐可以是结晶的或无定形的。示例性的药学上可接受的酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、甲基硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氨基磺酸盐、磷酸盐、乙酸盐、羟基乙酸盐、苯基乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、异丁酸盐、戊酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙烯酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、水杨酸盐、对氨基水杨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、庚酸盐、邻苯二甲酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、邻乙酰氧基苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、扁桃酸盐、鞣酸盐、甲酸盐、硬脂酸盐、抗坏血酸盐、棕榈酸盐、油酸盐、丙酮酸盐、双羟萘酸盐、丙二酸盐、月桂酸盐、戊二酸盐、谷氨酸盐、丙酸酯月桂硫酸盐(estolate)、、甲磺酸盐(methanesulfonate，mesylate)、乙磺酸盐(ethanesulfonate，esylate)、2-羟基乙磺酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate，besylate)、对氨基苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐(p-toluenesulfonate，tosylate)和萘-2-磺酸盐。在一些实施方案中，所述药学上可接受的盐包括L-酒石酸盐、乙二磺酸盐(ethanedisulfonate，edisylate)、硫酸盐、磷酸盐、对甲苯磺酸盐(p-toluenesulfonate，tosylate)、盐酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、苯磺酸盐、马来酸盐、氢溴酸盐、L-乳酸盐、丙二酸盐和S-樟脑-10-磺酸盐。在一些实施方案中，这些盐中的一些形成溶剂合物。在一些实施方案中，这些盐中的一些是结晶的。式(I)化合物、其盐(例如，药学上可接受的盐)可以立体异构体形式存在(例如，其含有一个或多个不对称碳原子)。单一立体异构体(对映体和非对映体)和这些的混合物包括在本发明的范围内。本发明还涵盖式(I)化合物的单一异构体、其盐(例如，药学上可接受的盐)，作为与一个或多个手性中心被翻转的其异构体的混合物。同样地，应理解，式(I)化合物、其盐(例如，药学上可接受的盐)可以除式中所示之外的互变异构体形式存在且这些也包括在本发明的范围内。应理解，本发明包括上述定义的具体基团的所有组合和子集。本发明的范围包括立体异构体以及纯化的对映体的混合物或对映体/非对映体富集的混合物。本发明的范围范围内还包括的是式(I)化合物的单一异构体、其盐(例如，药学上可接受的盐)，以及它们任意全部或部分平衡的混合物。本发明还包括式(I)化合物的单一异构体、其盐(例如，药学上可接受的盐)以及与一个或多个手性中心被翻转的其异构体的混合物。应理解，本发明包括上文定义的具体基团的全部组合和子集。不同的异构体形式可通过常规方法彼此分离或拆分或者任意给定的异构体可通过常规合成方法或通过立体特异性或不对称合成获得。本发明还包括同位素标记的化合物和盐，其与式(I)化合物或其盐相同，除了以下事实不同：一个或多个原子被具有与自然界中最常见的原子质量或质量数不同的原子替代。可掺入式(I)化合物或其盐的氢、碳、氮、氟的同位素的实例，例如3H、11C、14C和18F。这种同位素标记的式(I)化合物或其盐用于药物和/或底物组织分布测定。例如，11C和18F同位素用于PET(正电子发射断层扫描)。PET用于脑部成像。同位素标记的式(I)化合物及其盐通常可通过进行下文公开的操作制备，用易得的同位素标记试剂替代非同位素标记的试剂。在一个实施方案中，式(I)化合物或其盐不是同位素标记的。一些式(I)化合物或其盐可以固体或液体形式存在。在固体状态下，式(I)化合物或盐可以结晶或非结晶形式或其混合物的形式存在。对于结晶形式的式(I)化合物或盐，本领域技术人员将理解，可形成药学上可接受的溶剂合物，其中在结晶过程中溶剂分子被掺入晶格中。溶剂合物可包括非水溶剂，例如乙醇、异丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺和乙酸乙酯，或它们可包括水作为掺入该晶格中的溶剂。其中水是被掺入到该晶格的溶剂的溶剂合物通常被称为“水合物”。水合物包括化学计量的水合物以及含有可变量的水的组合物。本发明包括所有这样的溶剂合物。本领域技术人员还将理解，以结晶形式存在的一些式(I)化合物、其药学上可接受的盐或其溶剂合物(包括其各种溶剂合物)可呈现多态性(即能够以不同的晶体结构存在)。这些不同的结晶形式通常被称为“多晶型物”。多晶型物具有相同的化学组成，但是在堆积、几何排列和结晶固态的其他描述性性质上不同。因此，多晶型物可具有不同的物理性质，例如形状、密度、硬度、可变形性、稳定性和溶出性质。多晶型物通常呈现出不同的熔点、IR光谱和X射线粉末衍射图，其可用于鉴定。本领域技术人员将理解，例如通过改变或调整在制备化合物中所用的反应条件或试剂，可产生不同的多晶型物。例如，温度、压力或溶剂的改变可导致多晶型物。此外，一种多晶型物可在一定条件下自发地转化成另一多晶型物。本发明包括所有这样的多晶型物。本领域技术人员也理解，本发明可含有式(I)化合物或其药学上可接受的盐的各种氘代形式。与碳原子相连的各可用氢原子可独立地被氘原子替代。本领域技术人员将知道如何合成式(I)化合物或其药学上可接受的盐的氘代形式。市售可得的氘代起始原料可用于制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐的氘代形式，或它们可使用采用了氘代试剂(例如氘代氢化锂铝)的常规技术进行合成。本文所述化合物、它们的盐(例如，药学上可接受的盐)、其氘代形式、其溶剂合物或其水合物，可以一种或多种多晶型存在。因此，在其他方面，本发明提供了本文所述化合物、它们的盐(例如，药学上可接受的盐)的多晶型物或本文所述化合物或其盐(例如，药学上可接受的盐)的溶剂合物或水合物的多晶型物。因此，本发明化合物包括式(I)化合物或其盐，例如其药学上可接受的盐。本发明代表性的化合物包括所述具体化合物。C.使用方法所述式(I)化合物或其药学上可接受的盐是LRRK2激酶活性抑制剂并因此被认为在治疗或预防神经性疾病中具有潜在用途。示例性的神经性疾病包括，但不限于，帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、痴呆(包括路易体痴呆和血管性痴呆、HIV-诱导的痴呆)、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知损伤、嗜银颗粒病、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体有关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)、药物成瘾相关的戒断症状/复发、L-多巴诱导的运动障碍、缺血性发作、外伤性脑损伤和脊髓损伤。其他障碍包括，但不限于，溶酶体疾病(例如，尼曼-皮克C型疾病、戈谢病)、克罗恩病、甲状腺癌、肾癌(包括乳头状肾癌)、乳腺癌、肺癌和前列腺癌、白血病(包括急性髓性白血病(AML))、淋巴瘤、白血病、多发性硬化、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、单纯红细胞再生障碍、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、埃文斯综合征、血管炎、大疱性皮肤病、I型糖尿病、干燥综合征、德维克病和炎性肌病。本发明的一个方面提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。在一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗或预防帕金森氏病。在一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗帕金森氏病。本发明的其他方面提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防帕金森氏病的药物中的用途。本发明的其他方面提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗帕金森氏病的药物中的用途。本发明的另一方面提供了治疗或预防帕金森氏病的方法，其包括向有此需要的受试者给药治疗有效量式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，所述受试者是人。在本发明的上下文中，治疗帕金森氏病是指治疗散发性帕金森氏病和/或家族性帕金森氏病。在一个实施方案中，家族性帕金森氏病包括表达具有G2019S突变或R1441G突变的LRRK2激酶的患者。在其他实施方案中，家族性帕金森氏病包括表达具有帕金森氏病的G2019S突变、N1437H突变、R1441G突变、R1441C突变、R1441H突变、Y1699C突变、S1761R突变或I2020T突变的LRRK2激酶的患者。在另一实施方案中，散发性帕金森氏病包括表达具有帕金森氏病的G2019S突变、N1437H突变、R1441G突变、R1441C突变、R1441H突变、Y1699C突变、S1761R突变或I2020T突变的LRRK2激酶的患者。在另一实施方案中，帕金森氏病包括表达具有其他编码突变(例如G2385R)或在与帕金森氏病相关的LRRK2基因座上的非编码单核苷酸多态性的LRRK2激酶的患者。在一个实施方案中，治疗帕金森氏病是指治疗家族性帕金森氏病，其包括表达具有G2019S突变的LRRK2激酶的患者。在另一实施方案中，帕金森氏病包括表达异常高水平的正常LRRK2激酶的患者。治疗帕金森氏病可以是对症的或可为缓和疾病的。在一个实施方案中，治疗帕金森氏病是指对症治疗。在一个实施方案中，治疗帕金森氏病是指缓和疾病的。本发明化合物也可用于治疗根据以下的一种或多种与疾病进展相关的精细特征被确定为易于进展成重症帕金森病的患者：例如家族史、嗅觉障碍、便秘、认知缺陷、步态或从分子、生化、免疫或成像技术中获得的疾病进展的生物指示。在上下文中，治疗可以是对症的或缓和疾病的。在本发明的上下文中，治疗阿尔茨海默氏病是指治疗散发性阿尔茨海默氏病和/或家族性阿尔茨海默氏病。治疗阿尔茨海默氏病可以是对症的或可以是缓和疾病的。在一个实施方案中，治疗阿尔茨海默氏病是指对症治疗。同样地，治疗痴呆(包括路易体痴呆、血管性痴呆和HIV-诱导的痴呆)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知损伤、嗜银颗粒病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体有关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)、缺血性发作、外伤性脑损伤、脊髓损伤、溶酶体疾病(例如，尼曼-皮克C型疾病、戈谢病)、克罗恩病、甲状腺癌、肾癌(包括乳头状肾癌)、乳腺癌、肺癌和前列腺癌、白血病(包括急性髓性白血病(AML))、淋巴瘤、白血病、多发性硬化、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、单纯红细胞再生障碍、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、埃文斯综合征、血管炎、大疱性皮肤病、I型糖尿病、干燥综合征、德维克病和炎性肌病可以是对症的或缓和疾病的。在一些实施方案中，治疗痴呆(包括路易体痴呆、血管性痴呆和HIV-诱导的痴呆)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知损伤、嗜银颗粒病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体有关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)、缺血性发作、外伤性脑损伤、脊髓损伤、溶酶体疾病(例如，尼曼-皮克C型疾病、戈谢病)、克罗恩病、甲状腺癌、肾癌(包括乳头状肾癌)、乳腺癌、肺癌和前列腺癌、白血病(包括急性髓性白血病(AML))、淋巴瘤、白血病、多发性硬化、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、单纯红细胞再生障碍、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、埃文斯综合征、血管炎、大疱性皮肤病、I型糖尿病、干燥综合征、德维克病和炎性肌病是指对症治疗。在一个实施方案中，本发明还提供了治疗强直性脊柱炎和/或麻风病感染的方法，其包括向有此需要的受试者给药治疗有效量式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述受试者是人。在本发明的上下文中，治疗与药物成瘾相关的戒断症状/复发和L-多巴诱导的运动障碍是指对症治疗。在其他方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗上述障碍，例如帕金森氏病。在一些实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于预防帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、痴呆(包括路易体痴呆、血管性痴呆和HIV-诱导的痴呆)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知损伤、嗜银颗粒病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体有关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)、溶酶体疾病(例如，尼曼-皮克C型疾病、戈谢病)或肾癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌以及急性髓性白血病(AML)。在一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于预防帕金森氏病。本发明还提供了治疗上述障碍(例如哺乳动物，包括人的帕金森氏病)的方法，其包括向有此需要的受试者给药治疗有效量式(I)化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗上述障碍的药物中的用途，例如，帕金森氏病。本发明还提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防以下疾病的药物中的用途：帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、痴呆(包括路易体痴呆和血管性痴呆)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知损伤、嗜银颗粒病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、皮克氏病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体有关的遗传性额颞性痴呆及帕金森综合症(FTDP-17)或肾癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌以及急性髓性白血病(AML)、溶酶体疾病(例如，尼曼-皮克C型疾病、戈谢病)。在一些实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防帕金森氏病的药物中的用途。本发明还提供了LRRK2抑制剂在体外生成神经元祖细胞中的用途，其用在CNS障碍的基于细胞的治疗的后续治疗应用中。本发明还提供了LRRK2抑制剂在神经元损伤(包括，但不限于，缺血性发作、外伤性脑损伤和或脊髓损伤)后刺激CNS功能恢复中的用途。本发明还提供了LRRK2抑制剂在治疗异常神经炎症机制中的用途，所述异常神经炎症机制导致一系列神经变性疾病，包括帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、多发性硬化、HIV-诱导的痴呆、肌萎缩侧索硬化、缺血性发作、外伤性脑损伤和脊髓损伤。当式(I)化合物或其药学上可接受的盐旨在用于治疗帕金森氏病时，其可与宣称用于对症治疗帕金森氏病的药物组合使用。这种其他治疗剂的合适的实例包括L-多巴和多巴胺激动剂(例如普拉克索、罗匹尼罗)。当式(I)化合物或其药学上可接受的盐旨在用于治疗阿尔茨海默氏病时，其可与宣称用于缓和疾病的或对症治疗阿尔茨海默氏病的药物组合使用。这种其他治疗剂的合适的实例可以是对症药物，例如已知改变胆碱能传递的那些，例如M1毒蕈碱性受体激动剂或变构调节剂、M2毒蕈碱性拮抗剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如四氢氨吖啶、多奈哌齐盐酸盐和利凡斯的明)、烟碱性受体激动剂或变构调节剂(例如α7激动剂或变构调节剂或α4β2激动剂或变构调节剂)、PPAR激动剂(例如PPARγ激动剂)、5-HT4受体部分激动剂、5-HT6受体拮抗剂或5HT1A受体拮抗剂和NMDA受体拮抗剂或调节剂或疾病缓和剂(例如β或γ-分泌酶抑制剂)、线粒体稳定剂、微管稳定剂或Tau病理的调节剂，例如Tau聚集抑制剂(例如亚甲基蓝和REMBERTM)。当式(I)化合物或其药学上可接受的盐与其他治疗剂组合使用时，所述化合物可以任意方便的途径依次或同时给药。在其他方面，本发明还提供了组合，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及其他治疗剂或药剂。上文提及的组合可方便地用在药物制剂的形式中并因此包含上述组合以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物制剂构成了本发明的其他方面。这种组合的单一组分可在单独或组合的药物制剂中依次或同时给药。当式(I)化合物或其药学上可接受的盐与治疗同一疾病状态的第二治疗活性剂组合使用时，各化合物的剂量可能与该化合物单独使用时的量不同。适当的剂量将由本领域技术人员容易地理解。D.组合物可在给药受试者前将本发明化合物配制成药物组合物。根据一个方面，本发明提供了药物组合物，其包含本发明化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。根据另一方面，本发明提供了制备药物组合物的方法，其包括将式(I)化合物或其盐、或其溶剂合物等与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合。药物组合物可以每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型存在。这种单位可含有，例如，0.1mg、0.5mg或1mg-50mg、100mg、200mg、250mg、500mg、750mg或1g的本发明化合物，其取决于所治疗的疾病、给药途径和受试者的年龄、体重和症状，或者药物组合物可以每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型存在。在另一实施方案中，所述单位剂量组合物是含有本文所述的每日剂量或亚剂量或其适当分数的活性成分的那些。此外，这种药物组合物可通过本领域技术人员熟知的任意方法制备。本发明化合物的治疗有效量将取决于许多因素，包括，例如，预期接受者的年龄和体重、需要治疗的精确症状及其严重性、制剂的性质和给药途径且最终将由开具药品处方的医务人员决定。但是，用于治疗本发明所述疾病的本发明化合物的治疗有效量通常将在每天0.1至100mg/kg接受者体重的范围内和更通常在每天1-10mg/kg体重的范围内。因此，对于70kg成人哺乳动物，每日的实际量通常为70至700mg且该量以每天单一剂量进行给药或以每天若干亚剂量进行给药，例如每天给药2、3、4、5或6个剂量。或者所述给药可间歇进行，例如每隔一天一次、每周一次或每月一次。盐或溶剂合物等的治疗有效量可确定为式(I)化合物本身的治疗有效量的比例。可以设想，类似的剂量将适用于治疗上文提及的其他疾病。本发明的药物组合物可含有一种或多种本发明化合物。在一些实施方案中，所述药物组合物可含有一种以上的本发明化合物。例如，在一些实施方案中，所述药物组合物可含有两种或多种本发明化合物。此外，所述药物组合物可任选地还包含一种或多种额外的药物活性化合物。如本文所用，“药学上可接受的赋形剂”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，其参与提供药物组合物形状和硬度。混合时，各赋形剂可与该药物组合物的其他成分相容，使得避免当给药至受试者时显著降低本发明化合物功效的相互作用和将形成不是药学上可接受的药物组合物的相互作用。可将本发明化合物和药学上可接受的赋形剂或赋形剂配制成适于以所需给药途径给药至受试者的剂型。例如，剂型包括适于以下的那些：(1)口服给药(包括口腔或舌下)，例如片剂、胶囊剂、小胶囊剂、丸剂、锭剂、粉剂、糖浆剂、酏剂、混悬液、溶液、乳液、囊剂和扁囊剂；(2)胃肠外给药(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)，例如无菌溶液、混悬液和用于重构的粉剂；(3)经皮给药，例如透皮贴剂；(4)直肠给药，例如栓剂；(5)经鼻吸入，例如干粉、气雾剂、混悬液和溶液；和(6)局部给药(包括口腔、舌下或透皮)，例如乳膏剂、软膏剂、洗剂、溶液、糊剂、喷雾剂、泡沫剂和凝胶剂。这种组合物可以本领域已知的任意方法进行制备，例如通过将式(I)化合物与载体或赋形剂结合。适于口服给药的药物组合物可作为离散单元存在，例如胶囊剂或片剂；粉剂或颗粒剂；在水性或非水液体中的溶液或混悬液；可食用泡沫剂或搅打剂(whip)；或水包油液体乳液或油包水液体乳液。合适的药学上可接受的赋形剂将根据所选具体的剂型而变化。此外，可根据在组合物中所起的具体功能来选择合适的药学上可接受的赋形剂。例如，可根据促进制备均一剂型的能力来选择某些药学上可接受的赋形剂。可根据促进制备稳定的剂型的能力来选择某些药学上可接受的赋形剂。可根据在给药至受试者后促进本发明的一种或多种化合物从身体的一个器官或部分携带或运输至身体的另一器官或部分的能力来选择某些药学上可接受的赋形剂。某些药学上可接受的赋形剂可根据其提高患者顺应性的能力进行选择。合适的药学上可接受的赋形剂包括下列赋形剂类型：稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、粒化剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、共溶剂、助悬剂、乳化剂、增甜剂、调味剂、掩味剂、着色剂、防结块剂、保湿剂、螯合剂、增塑剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。本领域技术人员将理解，某些药学上可接受的赋形剂可以以多于一种功能和以替代性功能来使用，取决于所述赋形剂在制剂中存在多少和在制剂中存在何种其它成分。具有本领域的知识和技术的技术人员能够选择出以适当量用于本发明的合适的药学上可接受的赋形剂。此外，有许多本领域技术人员可用的资源，这些资源描述了药学上可接受的赋形剂且其可用于选择合适的药学上可接受的赋形剂。实例包括Remington'sPharmaceuticalSciences(MackPublishingCompany)，TheHandbookofPharmaceuticalAdditives(GowerPublishingLimited)，和TheHandbookofPharmaceuticalExcipients(theAmericanPharmaceuticalAssociationandthePharmaceuticalPress)。本发明的药物组合物使用本领域技术人员已知的技术和方法制备。通常用于本领域的一些方法描述在Remington'sPharmaceuticalSciences(MackPublishingCompany)中。一方面，本发明涉及固体口服剂型，例如片剂或胶囊剂，其包含治疗有效量的本发明化合物以及稀释剂或填充剂。合适的稀释剂和填充剂包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、淀粉(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、纤维素及其衍生物(例如微晶纤维素)、硫酸钙和磷酸氢钙。口服固体剂型还可包含粘合剂。合适的粘合剂包括淀粉(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸、西黄蓍胶、瓜尔胶、聚维酮和纤维素及其衍生物(例如微晶纤维素)。口服固体剂型还可包含崩解剂。合适的崩解剂包括交聚维酮、淀粉羟乙酸钠、交联羧甲基纤维素、海藻酸和羧甲基纤维素钠。口服固体剂型还可包含润滑剂。合适的润滑剂包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石。在一些实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包含0.01-1000mg的一种或多种本文所述化合物或其药学上可接受的盐和0.01-5g的一种或多种药学上可接受的赋形剂。E.制备化合物的方法在制备本文所述化合物中所用的方法取决于所需化合物。作为选择特定取代基以及特定取代基的各种可能的位点的这种因素在制备本发明特定化合物所遵循的路径中均发挥作用。本领域技术人员很容易鉴定出那些因素。一般而言，本发明化合物可通过本领域已知的标准技术和已知的类似方法进行制备。用于制备本发明化合物的一般方法如下所述。下文中总的实验方案中所述的起始原料和试剂是市售可得的或可通过本领域技术人员已知的方法进行制备。本领域技术人员将理解，如果本文所述取代基与本文所述的合成方法不相容，则可将该取代基用对该反应条件稳定的合适的保护基进行保护。所述保护基可在该反应顺序的合适的点脱除，得到所需的中间体或目标化合物。使用这种合适的保护基来保护和脱保护不同的取代基的合适的保护基和方法是本领域技术人员熟知的；其实例可见于T.Greene和P.Wuts，ProtectingGroupsinChemicalSynthesis(第3版)，JohnWiley&Sons，NY(1999)。在一些情况下，可特异性地选择在所用反应条件下反应性的取代基。在这些情况下，该反应条件将所选取代基转化成另一取代基，其可用作中间体化合物或为目标化合物的所需取代基。一般方案1-3提供制备本发明化合物的示例性合成方法。一般方案1一般方案1提供了制备化合物VIII和IX的示例性合成。所述保护基可为任意合适的保护基，例如，4-甲基苯-1-磺酰基(Ts)。在一般方案1中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R9如式(I)所定义且R8选自：H、C1-3卤代烷基(除了CF3)和C1-3烷基。在步骤(i)中，中间体II可从中间体I，通过与胺的氨基偶联反应，在缩合试剂(例如HATU)和合适的碱(例如DIPEA)的存在下，在适当的溶剂(例如DMF)中，在合适的温度(例如室温)获得。中间体IV可通过在步骤(ii)中将化合物II与合适的试剂(例如EtOH)，在合适的碱(例如NaH)的存在下，在适当的溶剂(例如DMF)中，在合适的温度(例如大约0℃-25℃)反应而获得。中间体IV也可通过将中间体III与胺在缩合试剂(例如HATU)和合适的碱(例如DIPEA)的存在下，在适当的溶剂(例如DMF)中，在合适的温度(例如大约0℃-25℃)，在步骤(iii)中反应获得。氨基化合物V可通过将中间体IV与合适的还原剂(例如氢)，在合适的催化剂(例如Pd/C)的存在下，在极性溶剂中(例如MeOH)，在适当的温度(例如大约25℃-80℃)，在步骤(iv)中反应而获得。步骤(v)可通过以下实现：将中间体VI与烷氧基钠在合适的极性溶剂(例如EtOH)的存在下，在合适的温度(例如大约70℃-90℃)反应，得到中间体VII。步骤(vi)可为Buchwald偶联反应，其通过将中间体VII与中间体V反应，使用适当的钯催化剂，例如Pd2(dba)3，在合适的碱(例如K2CO3)和合适的配体(例如xantphos)的存在下，在适当的溶剂(例如1,4-二噁烷)中，在合适的温度(例如大约90℃-120℃)进行，以提供化合物VIII。当Z＝PG时，化合物IX可通过以下获得：将化合物VIII与合适的碱(例如NaOH)，在合适的溶剂(例如异丙醇)中，在合适的温度(例如25℃-60℃)，在步骤(viii)中反应。一般方案2一般方案2提供了制备化合物VIII和IX的另一示例性合成。所述保护基可为任意合适的保护基，例如，4-甲基苯-1-磺酰基(Ts)。在一般方案2中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R9如式(I)所定义，且R8选自：H、C1-3卤代烷基(除了CF3)和C1-3烷基。中间体XI可通过中间体VI与中间体X的Buchwald偶联反应获得，其在步骤(viii)中，使用适当的钯催化剂(例如PdCl2(dppf))，在适当的碱(例如K2CO3)和适当的配体(例如X-Phos)的存在下，在适当的溶剂(例如2-丁醇)中，在合适的温度(例如大约90℃-120℃)进行。中间体VIII可通过在步骤(ix)中将中间体XI与胺反应获得：其在缩合试剂(例如HATU)和合适的碱(例如DIPEA)的存在下，在适当的溶剂(例如DMF)，在合适的温度(例如大约0℃-25℃)进行。当Z＝PG时，化合物IX可通过如下获得：将化合物VIII与合适的碱(例如NaOH)，在合适的溶剂(例如异丙醇)，在合适的温度(例如大约25℃-60℃)，在步骤(viii)中反应。一般方案3一般方案3提供了制备化合物IX的另一示例性合成。所述保护基可为任意合适的保护基，例如，4-甲基苯-1-磺酰基(Ts)。在一般方案I中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9如式(I)所定义。中间体XIII可通过如下获得：在步骤(xi)中，将中间体XII与合适的试剂(例如NIS)在合适的溶剂(例如DMF)中，在合适的温度(例如大约25℃-60℃)反应。步骤(xii)可为中间体XIII与合适的试剂(例如氰化亚铜(I))间的交叉偶联反应，其在合适的溶剂中，在合适的温度(例如大约90℃-130℃)进行，以提供中间体XIV，所述中间体XIV可与中间体V在步骤(xiii)中反应，其使用适当的钯催化剂(例如Pd2(dba)3)，在合适的碱(例如K2CO3)和合适的配体(例如X-phos)的存在下，在适当的溶剂(例如2-丁醇)，在合适的温度(例如约90℃-120℃)反应，以提供化合物IX。中间体XV可在步骤(xiv)中获得，其通过将中间体XIII与合适的试剂(例如TsCl)，在合适的碱(例如NaH)的存在下，在适当的溶剂(例如DMF)中，在合适的温度(例如大约0℃-25℃)反应。步骤(xv)可为交叉偶联反应，其通过将中间体XV与合适的试剂(例如2,2-二氟-2-(氟磺酰基)-乙酸酯)在合适的铜催化剂(例如CuI)的存在下，在适当的溶剂中，在合适的温度(例如约80℃-120℃)反应，以提供中间体XVI，所述中间体XVI可与中间体V在步骤(xvi)中，使用适当的钯催化剂(例如Pd2(dba)3)，在合适的碱(例如K2CO3)和合适的配体(例如X-Phos)的存在下，在适当的溶剂(例如2-丁醇)中，在合适的温度(例如约90℃-120℃)反应，以提供化合物IX。步骤(xvii)可为Suzuki偶联反应，其通过将中间体XV与合适的硼酸或硼酸酯，使用适当的钯催化剂(例如Pd(PPh3)4)，在适当的碱(例如Na2CO3)的存在下，在适当的溶剂(例如1,4-二噁烷)中，在合适的温度(例如约80℃-120℃)反应，以提供中间体XVII，所述中间体XVII可与中间体V在步骤(xviii)中，使用适当的钯催化剂(例如Pd2(dba)3)，在适当的碱(例如K2CO3)和适当的配体的存在下，在适当的溶剂中，在合适的温度(例如约90℃-120℃)反应，以提供中间体XVIII。化合物IX可通过以下获得：将中间体XVIII与合适的碱(例如NaOH)在合适的溶剂(例如甲醇)中，在合适的温度(例如约25℃-60℃)，在步骤(xix)中进行反应。如上反应式所述的起始原料和试剂是市售可得的或可使用本领域技术人员已知的操作由市售可得的化合物容易制备。实施例一般实验方法以下描述和实施例阐明了本发明。这些实施例不旨在限制本发明的范围，而是为本领域技术人员制备和使用本发明化合物、组合物和方法提供指导。尽管描述了本发明的具体实施方案，但是本领域技术人员将理解，在不脱离本发明的精神和范围的前提下可作出各种变化和修改。用微波照射加热反应混合物是在SmithCreator(购自PersonalChemistry，Forboro/MA，现属于Biotage)、EmrysOptimizer(购自PersonalChemistry)或Explorer(由CEMDiscover提供，Matthews/NC)微波上实现的。常规技术可在本文中用于反应的后处理和实施例产品的纯化。提及有关有机层或有机相的干燥的下述实施例可以是指用硫酸镁或硫酸钠干燥所述溶液并根据常规技术过滤掉所述干燥剂。产品通常可通过减压蒸发除去溶剂而获得。在实施例中化合物的纯化可通过常规方法实现，例如色谱法和/或使用合适的溶剂进行重结晶。色谱方法是本领域技术人员已知的且包括例如柱色谱、快速色谱、HPLC(高效液相色谱)和MDAP(质量定向的自动制备，也称为质量定向的LCMS纯化)。MDAP描述于例如W.Goetzinger等人，Int.J.MassSpectrom.，2004，238，153-162。Analtech硅胶GF和E.Merck硅胶60F-254薄层板用于薄层色谱。无论快速色谱还是重力色谱均是在E.MerckKieselgel60(230-400目)硅胶上进行的。制备型HPLC使用Gilson制备系统进行，其使用Luna5uC18(2)100A反相柱，用10-80梯度(0.1％TFA的乙腈溶液/0.1％的TFA水溶液)或10-80梯度(乙腈/水)洗脱。在本申请中用于纯化的CombiFlash系统购自Isco，Inc。CombiFlash纯化使用预填充的SiO2柱、具有在254nm处UV波长的检测器和混合的溶剂来实施。本文所用术语“CombiFlash”、“Biotage75”和“Biotage”是指市售可得的使用预填充的硅胶筒的自动化纯化系统。最终化合物用LCMS(下文所列条件)或NMR进行表征。1H-NMR光谱使用BrukerAvance400MHz光谱仪记录。CDCl3是氘代氯仿，DMSO-d6是六氘代二甲亚砜，和CD3OD(或MeOD)是四氘代甲醇。化学位移以内标物四甲基硅烷(TMS)或NMR溶剂的低磁场百万分之一(ppm)记录。NMR数据的缩写如下：s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，dd＝双二重峰，dt＝双三重峰，app＝表观，br＝宽峰。J是指NMR偶合常数，以赫兹计量。质谱在仪器上采集，其使用电喷雾(ES)离子化技术。所有的温度以摄氏度记录。所有其他的缩写描述于ACSStyleGuide(AmericanChemicalSociety，Washington，DC，1986)中。绝对立体化学可通过本领域技术人员已知的方法测定，例如X射线或振动圆二色性(VCD)。在后续的操作中，各起始原料之后，通常提供所涉及的中间体。这仅仅是为本领域技术人员提供帮助。该起始原料未必是从所提及的批次制备的。LCMS条件：条件1：流动相：含有0.05％TFA/0.05％乙腈的水柱：AgilentSB-C184.6x30mm-1.8微米检测：MS和光电二极管阵列检测器(PDA)条件2：流动相：含有10mmolNH4HCO3的水/乙腈柱：XBridgeTMC184.6x50mm-3.5微米检测：MS和光电二极管阵列检测器(PDA)MDAP条件：1)酸性条件：仪器：Waters仪器柱：SunfirePrepC18柱(5um，19x50mm)流动相：含有0.05％TFA的水/乙腈。2)碱性条件：仪器：Waters仪器柱：XbridgePrepC18柱(5um，19x50mm)流动相：含有0.04％氨水的水/乙腈。制备型-HPLC条件仪器：Waters仪器柱：XbridgePrepC18柱OBD(10um，19x250mm)流动相：含有0.08％氨水的水/乙腈。缩写和原料来源在本文中使用如下的缩写和原料：Aq.–水溶液Boc2O–二碳酸二叔丁酯DCM–二氯甲烷DEA-二乙醇胺DIPEA–N,N-二异丙基乙胺DMA–N,N-二甲基乙酰胺DMF–二甲基甲酰胺DMSO–二甲基亚砜EA–乙酸乙酯；EDC–1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐EtOH–乙醇EtOAc–乙酸乙酯HATU–2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐HOBT–羟基苯并三唑NIS–N-碘代琥珀酰亚胺TEA–三乙胺TFA–三氟乙酸TFAA–三氟乙酸酐THF–四氢呋喃TsCl-4-甲苯磺酰氯PE–石油醚描述D12-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(D1)将2,4-二氯-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(13g，69.1mmol)、乙醇钠(5.65g，83mmol)和乙醇(100mL)的混合物在90℃加热过夜。将该混合物冷却至室温然后加入水(500mL)。将所形成的固体过滤并干燥，得到标题化合物D1(10.0g，50.6mmol，73.2％产率)，其为白色固体。LCMS:198[M+1]+。tR＝1.348。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.23(宽单峰，1H)，7.38(d，J＝3.4Hz，1H)，6.50(d，J＝3.4Hz，1H)，4.51(q，J＝7.1Hz，2H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)。描述D22-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D2)向2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D1制备)(8g，40.5mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入氢化钠(1.619g，40.5mmol)。将该反应混合物在室温搅拌5min。然后向这个混合物中加入4-甲基苯-1-磺酰氯(7.72g，40.5mmol)并将该反应混合物在室温再搅拌1小时。将该混合物用水(450mL)稀释并过滤。将所过滤的固体用水(90mL)洗涤并干燥，得到标题化合物D2(10g，26.2mmol，64.6％产率)，其为白色固体。LCMS:352[M+H]+。tR＝1.871。(LCMS条件2)对于D3-D21的氨基偶联反应的一般步骤1将酸(1.0当量)、胺(1.0当量)、DIPEA(1.2当量)和HATU(1.2当量)在DMF(2mL)中的混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物冷却至室温并将挥发物在真空下除去。将残余物用DCM蒸发两次，用醚研磨并最终用硅胶色谱(PE:EA＝1:2)纯化，得到所需产物D3-D21。描述D223-(二氟甲氧基)-4-硝基苯甲酸甲酯(D22)在室温，向3-羟基-4-硝基苯甲酸甲酯(1g，5.07mmol)在DMF(15mL)中的溶液中依次加入K2CO3(1.052g，7.61mmol)和2-氯-2,2-二氟乙酸甲酯(0.803mL，7.61mmol)。随后，将该混合物的温度升高至100℃，并将该混合物搅拌2小时。将该混合物冷却至室温，并加入水(10mL)，然后用EA(40mL)萃取一次。将有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物D22(0.69g，2.62mmol，51.7％产率)，其为黄色油。LCMS:248[M+H]+。tR＝3.154。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ6.75-6.77(m，2H)，6.73(s，1H)，5.77(t，1H)，2.66-2.71(m，3H)。描述D233-(二氟甲氧基)-4-硝基苯甲酸(D23)向3-(二氟甲氧基)-4-硝基苯甲酸甲酯(其可根据D22制备)(690mg，2.79mmol)在甲醇(30mL)和水(30.0mL)中的溶液中加入氢氧化钠(893mg，22.33mmol)。然后将该混合物在60℃搅拌2小时。将甲醇蒸发，并将2NHCl溶液加至该混合物中直至pH＝3。将所形成的固体过滤并干燥，得到标题化合物D23(428mg，1.836mmol，65.8％产率)，其为黄色固体。LCMS:234[M+H]+。tR＝2.302。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.93(宽单峰，1H)，8.19(d，J＝8.6Hz，1H)，7.92-8.02(m，2H)，7.30-7.70(m，1H)。描述D24(3-(二氟甲氧基)-4-硝基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(D24)将3-(二氟甲氧基)-4-硝基苯甲酸(其可根据D23制备)(318mg，1.364mmol)、DIPEA(0.357mL，2.046mmol)和HATU(622mg，1.637mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌30min。然后加入1-甲基哌嗪(0.206mL，2.046mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用乙酸乙酯和水稀释，并分离。将有机层真空浓缩，并将粗产物用硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物D24(150mg，0.476mmol，34.9％产率)，其为黄色油。LCMS:316[M+H]+。tR＝1.845。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ7.90(d，J＝8.3Hz，1H)，7.28-7.40(m，2H)，6.34-6.80(m，1H)，3.74(宽单峰，2H)，3.33(宽单峰，2H)，2.44(宽单峰，2H)，2.30(宽单峰，2H)，2.27(s，3H)。描述D253-(环丙基甲氧基)-4-硝基苯甲酸甲酯(D25)在0℃，向3-羟基-4-硝基苯甲酸甲酯(1g，5.07mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入氢化钠(0.304g，7.61mmol)。在室温搅拌30min后，然后加入(溴甲基)环丙烷(0.738mL，7.61mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该混合物用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物D25(360mg，1.333mmol，26.3％产率)，其为黄色固体。LCMS:250[M-H]-。tR＝4.191。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ7.79-7.87(m，2H)，7.69(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，4.08(d，J＝6.8Hz，2H)，3.95(s，3H)，1.27-1.32(m，1H)，0.61-0.71(m，2H)，0.36-0.45(m，2H)。描述D263-(环丙基甲氧基)-4-硝基苯甲酸(D26)向3-(环丙基-甲氧基)-4-硝基苯甲酸甲酯(其可根据D25制备)(360mg，1.433mmol)在甲醇(30mL)和水(30.0mL)中的溶液中加入NaOH(459mg，11.46mmol)。然后将该混合物在60℃搅拌1.5小时。将甲醇蒸发，然后将2NHCl溶液加至该混合物中直至pH＝3。将所形成的固体过滤并干燥，得到标题化合物D26(250mg，1.054mmol，73.6％产率)，其为黄色固体。LCMS:238[M+H]+。tR＝2.940。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ7.80-7.86(m，2H)，7.72(d，J＝1.2Hz，1H)，4.09(d，J＝6.8Hz，2H)，1.32-1.37(m，1H)，0.63-0.70(m，2H)，0.43(q，J＝4.9Hz，2H)。描述D27(3-(环丙基甲氧基)-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D27)将3-(环丙基甲氧基)-4-硝基苯甲酸(其可根据D26制备)(252mg，1.062mmol)、DIPEA(0.278mL，1.594mmol)和HATU(485mg，1.275mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌30min。然后加入1-甲基哌嗪(0.267mL，2.66mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤。将有机层真空浓缩，并将粗产物用硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物D27(480mg，0.812mmol，76％产率)，其为黄色油。LCMS:320.1[M+H]+。tR＝2.068。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ7.76(d，J＝8.1Hz，1H)，7.03(s，1H)，6.84-6.96(m，1H)，3.93(d，J＝6.8Hz，2H)，3.74(宽单峰，2H)，3.34(宽单峰，2H)，2.46(宽单峰，2H)，2.29-2.35(m，2H)，2.29(s，3H)，1.60-1.62(m，1H)，1.34-1.45(m，2H)，1.14-1.30(m，2H)。描述D28(3-甲氧基-4-硝基苯基)(噁唑烷-3-基)-甲酮(D28)将2-氨基乙醇(0.310g，5.07mmol)和甲醛(0.210mL，7.61mmol)在EtOH(5mL)中的溶液在60℃加热2小时。根据混合物浓缩并将残余物加至DIPEA(1.311g，10.14mmol)、HATU(3.86g，10.14mmol)和3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(1.0g，5.07mmol)在DMF(10mL)中的混合物中。然后将该反应混合物在室温搅拌过夜。将该混合物浓缩并用制备型-HPLC直接纯化，得到标题化合物D28(700mg，0.916mmol，18.06％产率)，其为黄色油。LCMS:253[M+H]+。tR＝1.057。(LCMS条件2)描述D29(3-(二甲基氨基)-4-硝基苯基)(吗啉代)-甲酮(D29)向(3-氟-4-硝基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D21制备)(600mg，2.360mmol)和二甲基胺盐酸盐(231mg，2.83mmol)在DMF(5.0mL)中的溶液中加入碳酸铯(2307mg，7.08mmol)。将该混合物在90℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物D29(500mg，1.762mmol，74.7％产率)，其为黄色油。LCMS:280.1[M+H]+。tR＝1.07。(LCMS条件2)描述D30(3-乙氧基-4-硝基苯基)(吗啉代)-甲酮(D30)在0℃，向(3-氟-4-硝基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D21制备)(600mg，2.360mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入氢化钠(104mg，2.60mmol)。在0℃搅拌30min后，加入乙醇(120mg，2.60mmol)。然后将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用NaHCO3水溶液淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物D30(500mg，1.701mmol，72.1％产率)，其为黄色油。LCMS:281.1[M+H]+。tR＝1.09。(LCMS条件2)描述D31(3-异丙氧基-4-硝基苯基)(吗啉代)-甲酮(D31)在0℃，向(3-氟-4-硝基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D21制备)(600mg，2.360mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入氢化钠(104mg，2.60mmol)。在0℃搅拌30min后，加入丙-2-醇(156mg，2.60mmol)。然后将该混合物在25℃搅拌过夜。将该反应混合物用NaHCO3水溶液淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将有机层合并并用Na2SO4干燥。将该溶液过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物D31(400mg，1.029mmol，43.6％产率)，其为黄色油。LCMS:295.1[M+H]+。tR＝1.65。(LCMS条件2)描述D32(3-异丙氧基-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D32)向(3-氟-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D12制备)(400mg，1.497mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入丙-2-醇(0.228mL，2.99mmol)和碳酸铯(975mg，2.99mmol)。将该反应混合物在室温搅拌过夜。将该混合物倾倒至EtOAc(25mL)中并用水(30mL×3)洗涤。将有机层干燥并真空蒸发，得到标题化合物D32(500mg，0.732mmol，48.9％产率)，其为黄色油。LCMS:308[M+H]+。tR＝1.47。(LCMS条件2)描述D33(3-乙氧基-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D33)向(3-氟-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D12制备)(400mg，1.497mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入EtOH(0.874mL，14.97mmol)和碳酸铯(975mg，2.99mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(25mL)中并用水(30mL×3)洗涤。将有机层干燥并真空蒸发，得到标题化合物D33(300mg，1.023mmol，68.3％产率)，其为黄色油。LCMS:294[M+H]+。tR＝1.41。(LCMS条件2)描述D34(3-(二甲基氨基)-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D34)向(3-氟-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D12制备)(400mg，1.497mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入二甲基胺盐酸盐(122mg，1.497mmol)和碳酸铯(975mg，2.99mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(25mL)中并用水(30mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到标题化合物D34(380mg，1.300mmol，87％产率)，其为黄色油。LCMS:293[M+H]+。tR＝1.38。(LCMS条件2)描述D356-羧基-2-羟基-3-硝基重氮苯(D35)在-10℃，向2-氨基-4-硝基苯甲酸(5g，27.5mmol)在硫酸(10ml，188mmol)中的溶液中加入硝酸(0.8mL，18.79mmol)。将该混合物搅拌直至析出沉淀。将该混合物倾倒至冰中并用乙醚萃取。将该乙醚溶液用水洗涤并经Na2SO4干燥，蒸发，得到标题化合物D35(7.0g，24.27％产率)，将其直接用于下一步。LCMS:211[M+H]+。tR＝0.389。(LCMS条件2)描述D362-氯-3-羟基-4-硝基苯甲酸(D36)向6-羧基-2-羟基-3-硝基重氮苯(其可根据D35制备)(1.2g，5.71mmol)和氯化氢(10ml，120mmol)的溶液中加入氯化亚铜(I)(0.594g，6.00mmol)。将该反应混合物在70℃搅拌4小时。蒸发溶剂并将残余物用Biotage纯化，得到标题化合物D36(400mg，1.839mmol，32.2％产率)，其为黄色固体。LCMS:218[M+H]+。tR＝0.669。(LCMS条件2)描述D372-氯-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯(D37)在氮气下，向2-氯-3-羟基-4-硝基苯甲酸(其可根据D36制备)(150mg，0.689mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入氢化钠(66.2mg，2.76mmol)。将该反应混合物在20℃搅拌0.5小时。然后加入碘甲烷(391mg，2.76mmol)并将该混合物在室温再搅拌3小时。将该混合物分配于乙酸乙酯和水之间。将有机层用Na2SO4干燥并蒸发，得到标题化合物D37(120mg，0.342mmol，49.6％产率)。LCMS:246[M+H]+。tR＝1.332。(LCMS条件1)描述D382-氯-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(D38)将2-氯-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯(其可根据D37制备)(130mg，0.529mmol)、氢氧化钠(1mL，2.0mmol，2M在水中)在甲醇(3mL)中的溶液在室温搅拌3小时。蒸发溶剂并将该粗产物溶于水中，用乙酸乙酯洗涤。将水层调节至pH＝3并用乙酸乙酯萃取。将有机层干燥并蒸发，得到标题化合物D38(126mg，0.506mmol，96％产率)，其为黄色固体。LCMS:232[M+H]+。tR＝0.857。(LCMS条件2)描述D39(2-氯-3-甲氧基-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D39)向2-氯-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(其可根据D38制备)(200mg，0.864mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(112mg，0.864mmol)和1-甲基哌嗪(86mg，0.864mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入HATU(328mg，0.864mmol)。将该反应混合物在室温搅拌3小时。将该混合物用Biotage柱纯化，得到标题化合物D39(200mg，0.637mmol，73.8％产率)，其为白色固体。LCMS:314[M+H]+。tR＝0.701。(LCMS条件2)描述D40(3-甲氧基-4-硝基苯基)(2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-7-基)-甲酮(D40)在室温，向7-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(其可根据D9制备)(250mg，0.617mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入TFA(0.238mL，3.08mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将DCM在真空下除去。将残余物溶于水中并用1MNaOH溶液调节至pH＝9。然后将该混合物用EA萃取两次。然后将合并的有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到标题化合物D40(157mg，0.514mmol，83％产率)，将其直接用于下一步而无需进一步纯化。LCMS:306[M+H]+。tR＝1.643。(LCMS条件1)描述D41(3-甲氧基-4-硝基苯基)(2-甲基-2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-7-基)甲酮(D41)向(3-甲氧基-4-硝基苯基)(2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-7-基)-甲酮(其可根据D40制备)(157mg，0.514mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入乙酸(0.029mL，0.514mmol)。将该反应混合物在室温搅拌1小时。然后向这个混合物中分批加入三乙氧基硼氢化钠(218mg，1.028mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭并蒸发。将该粗产物通过反相色谱(BiotageSNAP柱，KP-C18-HS120g，5％～95％MeCN/H2O(0.05％氨))直接纯化，得到标题化合物D41(69mg，0.216mmol，42.0％产率)，其为黄色油。LCMS:320[M+H]+。tR＝1.630。(LCMS条件1)描述D42(S)-4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D42)向HOBT(0.777g，5.07mmol)、EDC(0.972g，5.07mmol)、TEA(0.707mL，5.07mmol)和3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(1g，5.07mmol)在DMF(20mL)中的溶液中加入(S)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.016g，5.07mmol)。将该反应混合物在室温搅拌3小时。将该混合物分配于乙酸乙酯(50mL)和水(25mL)之间。将有机层用水(25mL)、饱和NaHCO3(25mL)和盐水(25mL)洗涤，用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到标题化合物D42(1.78g，3.61mmol，71.2％产率)，其为橙色油。LCMS:380[M+H]+。tR＝1.325。(LCMS条件2)描述D43(S)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-(3-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D43)向(S)-4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(其可根据D42制备)(1.78g，4.69mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入TFA(2mL)。将该反应混合物在室温搅拌过夜。将该混合物分配于DCM(25mL)和水(20mL)之间。将有机层用水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到标题化合物D43(700mg，1.679mmol，75％产率)，其为白色固体。LCMS:280[M+H]+。tR＝1.095。(LCMS条件1)描述D44(S)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-甲酮(D44)向K2CO3(129mg，2.148mmol)、(S)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-(3-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D43制备)在乙腈(20mL)中的溶液中滴加碘甲烷(0.067mL，1.074mmol)。将该反应混合物在室温搅拌3小时。将该混合物过滤并将溶液分配于乙酸乙酯(25mL)和水(10mL)之间。将有机层用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到标题化合物D44(200mg，0.682mmol，63.5％产率)，其为黄色油。LCMS:294[M+H]+。tR＝1.054。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ7.88(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34(s，1H)，7.11(d，J＝8.0Hz，1H)，4.42(宽单峰，1H)，3.99(s，3H)，3.49(m，1H)，3.35-3.40(m，1H)，2.90-3.22(m，1H)，2.79(d，J＝11.3Hz，1H)，2.09-2.42(m，5H)，0.82-1.27(m，3H)。描述D45(R)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-(3-甲基哌嗪-1-基)甲酮(D45)将(R)-4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(其可根据D15制备)(1.5g，3.95mmol)和HCl(5mL，20.00mmol，4M在二噁烷中)在甲醇(5mL)中的混合物在60℃加热2小时。将该混合物浓缩，得到标题化合物D45(1.0g，3.44mmol，87％产率)。LCMS:280[M+H]+。tR＝1.272。(LCMS条件2)描述D46(R)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)甲酮(D46)将甲醛(0.108g，3.58mmol)和(R)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-(3-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D45制备)(1.0g，3.58mmol)在甲醇中的混合物在60℃搅拌1小时。然后将该混合物冷却至0℃并加入NaCNBH4(0.225g，3.58mmol)。将该反应混合物在室温搅拌过夜。将该混合物浓缩并用制备型-HPLC直接纯化，得到标题化合物D46(600mg，2.046mmol，57.1％产率)，其为油。LCMS:294[M+H]+。tR＝1.371。(LCMS条件2)描述D47(±)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-1-基甲醇，三氟乙酸盐(D47)向1-(羟基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己-3-甲酸叔丁酯(220mg，1.032mmol)(其可根据在KoreanJournalofMedicinalChemistry，4(2)，119-25；1994中描述的操作进行制备)在DCM(20mL)中的溶液中加入TFA(0.397mL，5.16mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。然后将该混合物浓缩，得到标题化合物D47(235mg，1.034mmol，100％产率)，其为黄色油，其用于下一步而无需进一步纯化。LCMS:114[M+H]+。tR＝0.247(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ3.80-3.89(m，1H)，3.67-3.73(m，1H)，2.86-3.10(m，4H)，1.27-1.34(m，1H)，0.65(dd，J＝7.8，5.1Hz，1H)，0.49-0.56(m，1H)。描述D48(±)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-5-基甲醇(D48)向5-(羟基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛烷-6-甲酸叔丁酯(450mg，1.865mmol)(其可根据在PCT国际申请2011006960中描述的操作进行制备)在DCM(10.0mL)中的溶液中加入TFA(1063mg，9.32mmol)。将该混合物在室温搅拌3小时。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(PE:EA＝4:1)纯化，得到标题化合物D48(250mg，1.770mmol，95％产率)，其为油。LCMS:142[M+H]+。tR＝0.819(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ4.62(s，1H)，3.27(m，3H)，2.94(m，1H)，2.66(m，2H)，1.74(m，1H)，1.45(m，1H)，0.77(m，2H)，0.26(m，4H)。描述D49(±)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-1-基甲醇(D49)向6-氮杂螺-[2.5]-辛烷-1-甲酸乙酯(3g，16.37mmol)(其可根据在PCT国际申请2008147314中描述的操作进行制备)在THF(3mL)中的溶液中加入LiAlH4(0.932g，24.56mmol)。将该混合物在室温搅拌2小时。加入饱和Na2SO4溶液(1mL)。将该混合物过滤并将溶液用EA洗涤，用Na2SO4干燥，真空蒸发，得到标题化合物D49(2.5g，10.27mmol，62.7％产率)，其为黄色油。LCMS:142.2[M+H]+。tR＝0.46(LCMS条件2)描述D50(±)-(1-(羟基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)甲酮(D50)向(±)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-1-基甲醇(其可根据D49制备)(2.5g，17.70mmol)和3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(3.14g，15.93mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入HATU(13.46g，35.4mmol)和DIPEA(4.58g，35.4mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌1小时。将该混合物倾倒至水(50mL)中并用EtOAc(40mL)萃取两次。将有机层合并，干燥并真空蒸发。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物D50(370mg，1.074mmol，6.07％产率)，其为黄色油。LCMS:321[M+H]+。tR＝1.466(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ7.87(d，J＝8.0Hz，1H)，7.14(s，1H)，7.01(d，J＝8.0Hz，1H)，5.30(s，1H)，3.26-4.10(m，9H)，1.67-1.84(m，1H)，1.18-1.51(m，3H)，0.54-0.73(m，1H)，0.21-0.39(m，1H)。描述D51(±)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)(1-(甲氧基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)甲酮(D51)在0℃氮气氛下，向(±)-(1-(羟基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)甲酮(其可根据D50制备)(350mg，1.093mmol)在THF(3mL)中的溶液中加入氢化钠(52.4mg，1.311mmol)。在0℃搅拌10min后，加入碘甲烷(775mg，5.46mmol)。然后将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用冰水淬灭并用乙酸乙酯(50mL)稀释。将该乙酸乙酯层用水(30mL×2)、盐水(30mL)洗涤并用Na2SO4干燥。真空蒸发溶剂，得到标题化合物D51(150mg，0.426mmol，39.0％产率)，其为黄色油。LCMS:335[M+H]+。tR＝1.668(LCMS条件2)用于硝基还原的一般步骤2(D52-D79)向硝基产物(1.0当量)在甲醇(20mL)中的溶液中加入Pd/C(0.03当量)，将该混合物在室温氢气下搅拌过夜。将该混合物过滤并将溶液真空浓缩，得到该粗产物胺D52-D79，其用于下一步而无需进一步纯化。描述D80(4-氨基-3-(二氟甲氧基)-苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D80)将(3-(二氟甲氧基)-4-硝基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据制备D24)(150mg，0.476mmol)、铁(80mg，1.427mmol)在乙酸(2mL)中的溶液在70℃搅拌2小时。将该混合物用EA(10mL)稀释并过滤。然后将该溶液用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到标题产物D80(100mg，0.351mmol，73.7％产率)，其为黄色油。LCMS:286[M+H]+。tR＝1.024(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ6.97-7.08(m，2H)，6.42-6.86(m，2H)，3.56(宽单峰，4H)，2.40(d，J＝4.4Hz，4H)，2.24(s，3H)。描述D81(4-氨基-3-(环丙基甲氧基)-苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D81)将(3-(环丙基甲氧基)-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D27制备)(480mg，0.812mmol)、铁(136mg，2.435mmol)在乙酸(2mL)中的溶液在70℃搅拌2小时。将该反应混合物用EA(10mL)稀释并过滤。然后将该溶液用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到标题化合物D81(210mg，0.726mmol，89％产率)，其为黄色油。LCMS:290[M+H]+。tR＝1.435(LCMS条件1)描述D82(R)-(4-氨基-3-甲氧基苯基)(3-甲基吗啉代)-甲酮(D82)将(R)-(3-甲氧基-4-硝基苯基)(3-甲基吗啉代)甲酮(其可根据D16制备)(50mg，0.178mmol)、氨盐酸盐(ammoniahydrochloride)(9.54mg，0.178mmol)和铁(49.8mg，0.892mmol)在乙醇(10mL)中的混合物在70℃氮气下搅拌过夜。将该混合物过滤并将溶液浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(DCM:MeOH＝10:1)纯化，得到标题化合物D82(30mg，0.120mmol，67.2％产率)，其为油。LCMS:251[M+H]+。tR＝1.248(LCMS条件2)描述D83(4-氨基-2-氯-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D83)将(2-氯-3-甲氧基-4-硝基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D39制备)(108mg，0.344mmol)和铁(96mg，1.721mmol)在乙醇(2.0mL)和水(2.0mL)中的混合物在65℃氮气下搅拌过夜。将该混合物浓缩并将残余物溶于EtOH并过滤。将该溶液蒸发，得到标题化合物D83(100mg，0.247mmol，71.7％产率)，其为黄色油，将其直接用于下一步。LCMS:284[M+H]+。tR＝1.24(LCMS条件1)描述D842-氯-4-乙氧基-5-碘代-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D84)向2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)(600mg，3.04mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入NIS(751mg，3.34mmol)。将该混合物在25℃搅拌3小时。将该反应混合物用水(30mL)淬灭并用DCM(80mL)萃取。将有机层用10％Na2SO4溶液(80mL)洗涤并真空浓缩，得到标题化合物D84(700mg，1.861mmol，61.3％产率)，其为黄色固体。LCMS:324[M+H]+。tR＝1.400(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.59(d，J＝2.4Hz，1H)，4.51(q，J＝7.1Hz，2H)，1.40(t，3H)。描述D852-氯-4-乙氧基-5-碘代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D85)在0℃，向2-氯-4-乙氧基-5-碘代-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D84制备)(600mg，1.855mmol)在DMF(30mL)中的溶液中加入NaH(89mg，3.71mmol)。将该混合物搅拌30min，然后加入TsCl(707mg，3.71mmol)。将该混合物温热至室温并再搅拌4小时。将该反应混合物用水(30mL)淬灭，用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，真空浓缩，得到标题化合物D85(800mg，1.574mmol，85％产率)，其为黄色固体。LCMS:478[M+H]+。tR＝1.733(LCMS条件2)描述D862-氯-4-乙氧基-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D86)向2-氯-4-乙氧基-5-碘代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D85制备)(800mg，1.675mmol)、甲基硼酸(200mg，3.35mmol)、K2CO3(694mg，5.02mmol)在1,4-二噁烷(100mL)和水(10.00mL)中的溶液中加入Pd(Ph3P)4(194mg，0.167mmol)。将该混合物在90℃氮气下搅拌过夜。将该混合物冷却至室温并加入H2O(80mL)，用EtOAc萃取。将有机层浓缩并用硅胶柱色谱(PE:EA＝5:1)纯化，得到标题化合物D86(40mg，0.109mmol，6.53％产率)，其为黄色固体。LCMS:366[M+H]+。tR＝1.687(LCMS条件2)描述D872-氯-4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D87)在0℃，向环丙基甲醇(1.151g，15.96mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入氢化钠(0.638g，15.96mmol)。将该混合物在0℃搅拌30min。然后加入2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(3.00g，15.96mmol)。将该混合物在70℃搅拌过夜然后真空浓缩。将残余物倾倒至水中并用DCM(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(PE:EA＝4:1)纯化，得到标题化合物D87(3.2g，13.84mmol，87％产率)。LCMS:224.2[M+H]+。tR＝1.44(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.20(s，1H)，7.37(d，J＝4.0Hz，1H)，6.51(d，J＝4.5Hz，1H)，4.29(d，J＝9.0Hz，2H)，1.29(m，1H)，0.57(m，2H)，0.40(m，2H)。描述D882-氯-4-(环丙基甲氧基)-5-碘代-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D88)向2-氯-4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D87制备)(700mg，3.13mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入NIS(775mg，3.44mmol)。将所得混合物在25℃搅拌3小时。将该混合物用水(30mL)淬灭并用DCM(80mL)萃取水层。将有机层用10％Na2SO4溶液(80mL)洗涤并真空浓缩，得到标题化合物D88(1g，2.60mmol，83％产率)，其为黄色固体。LCMS:350[M+H]+。tR＝1.572(LCMS条件2)描述D892-氯-4-(环丙基甲氧基)-5-碘代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D89)向2-氯-4-(环丙基甲氧基)-5-碘代-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D88制备)(1g，2.86mmol)在DMF(20mL)中的冰冷溶液中加入氢化钠(0.137g，5.72mmol)。将该混合物搅拌30min，然后加入TsCl(707mg，3.71mmol)。将该混合物在室温搅拌3小时。将该反应混合物用水(30mL)淬灭并用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤并浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(PE:EA＝15:1)纯化，得到标题化合物D89(600mg，1.191mmol，41.6％产率)，其为黄色固体。LCMS:504[M+H]+。tR＝1.815(LCMS条件2)描述D902-氯-4-(环丙基甲氧基)-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D90)向2-氯-4-(环丙基甲氧基)-5-碘代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D89制备)(1g，1.985mmol)、甲基硼酸(0.238g，3.97mmol)和K2CO3(0.823g，5.96mmol)在1,4-二噁烷(100mL)和水(10.00mL)中的溶液中加入Pd(Ph3P)4(194mg，0.167mmol)。将该混合物在90℃氮气下搅拌过夜。蒸发溶剂，将残余物用硅胶柱色谱(PE:EA＝20:1)纯化并用制备型-HPLC进一步纯化，得到标题化合物D90(28mg，0.071mmol，3.60％产率)，其为黄色固体。LCMS:392[M+H]+。tR＝1.795(LCMS条件2)描述D916-氯-4-乙氧基-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶(D91)在冰水浴中，向乙醇(100mg，2.180mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入氢化钠(134mg，3.35mmol)。搅拌15min后，加入4,6-二氯-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶(317mg，1.677mmol)。将该混合物逐渐升高至室温并搅拌过夜。将该反应混合物用水(5mL)淬灭，过滤，浓缩以除去溶剂，用乙酸乙酯(80mL)稀释并用水(30mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用硅胶柱色谱(PE:EA＝20:1)纯化，得到标题化合物D91(229mg，52.4％产率)，其为白色固体。LCMS:199[M+H]+。tR＝2.487(LCMS条件1)描述D926-氯-4-乙氧基-3-甲基-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶(D92)在冰浴中，向乙醇(0.227g，4.93mmol)在THF(60mL)中的溶液中加入氢化钠。搅拌20min后，加入4,6-二氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(1g，4.93mmol)。将该混合物逐渐升高至室温并在室温搅拌过夜。然后将该混合物用水(20mL)稀释，浓缩以除去溶剂并用乙酸乙酯(220mL)稀释。将有机层用水(60mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将该粗产物(900mg，86％产率)直接用于下一步。LCMS:213[M+H]+。tR＝2.775(LCMS条件1)描述D936-氯-4-(环丙基甲氧基)-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶(D93)在冰浴中，向环丙基甲醇(1.908g，26.5mmol)在THF(200mL)中的溶液中加入氢化钠(3.17g，79mmol)。搅拌30min后，加入4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(5g，26.5mmol)。将该反应混合物逐渐升高至室温并搅拌过夜。然后将该混合物用水(80mL)稀释，浓缩以除去溶剂并用乙酸乙酯(220mL)稀释。将有机层用水(80mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将该粗产物(5g，84％产率)直接用于下一步。LCMS:225[M+H]+。tR＝2.918(LCMS条件1)描述D942-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-5-甲腈(D94)向2-氯-4-乙氧基-5-碘代-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D84制备)(610mg，1.886mmol)在DMA(5mL)中的溶液中加入氰化亚铜(I)(507mg，5.66mmol)。将该反应混合物在120℃微波中照射2小时。将该混合物用乙酸乙酯稀释并加入水。将有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(PE:EA＝3:2)纯化，得到标题化合物D94(200mg，0.898mmol，47.6％产率)，其为黄色固体。LCMS:223[M+H]+。tR＝2.777(LCMS条件1)描述D952-氯-4-乙氧基-5-(三氟甲基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(D95)在干燥氮气的正压下，向干燥的三颈圆底烧瓶中加入2-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D2制备)(800mg，1.675mmol)和DMF(20mL)。然后加入更多的碘化亚铜(I)(63.8mg，0.335mmol)和2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(643mg，3.35mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌1.5小时。LCMS显示未反应。然后，加入碘化亚铜(I)(63.8mg，0.335mmol)和2,2-二氟-2-(氟磺酰基)-乙酸甲酯(643mg，3.35mmol)。将该混合物在100℃搅拌2小时。然后再加入碘化亚铜(I)(63.8mg，0.335mmol)并将该混合物在100℃再搅拌1.5小时。将该反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭。然后将水(50mL)加至将该混合物中并用EA(15mL×3)萃取。将该合并的有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。过滤并浓缩后，将残余物用硅胶柱色谱(PE:EA＝3:1)纯化，得到标题化合物D95(245.3mg，0.924mmol，55.1％产率)，其为白色固体。LCMS:266[M+H]+。tR＝3.483(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.96(宽单峰，1H)，8.06(s，1H)，4.53(q，J＝7.1Hz，2H)，1.37(t，3H)对于Buchwald反应的一般步骤3(D96-D121)向2-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D2制备)(1.0当量)、胺(1.0当量)和xantphos(0.1当量)在1,4-二噁烷(2.0mL)和水(0.2mL)中的溶液中加入碳酸钾(2.0当量)和PdCl2(pddf)(0.1当量)。将该反应混合物在90℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝25:1)纯化，得到所需产物D96-D121。描述D122(3-氯-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D122)向在室温氮气下搅拌的碳酸钾(140mg，1.012mmol)、2-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(其可根据D2制备)(178mg，0.506mmol)和4-氨基-3-氯苯甲酸(104mg，0.607mmol)在1,4-二噁烷(3mL)和水(0.300mL)中的溶液中加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(41.3mg，0.051mmol)和xantphos(36.2mg，0.076mmol)。将该反应容器密封并在BiotageInitiator中以90℃加热2小时。冷却后，将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题产物D122(150mg，0.308mmol，60.9％产率)，其为黄色固体。LCMS:487[M+H]+。tR＝1.49。(LCMS条件2)描述D123(3-氯-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D123)向(3-氯-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D122制备)(200mg，0.411mmol)、DIPEA(106mg，0.821mmol)和1-甲基哌嗪(49.4mg，0.493mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入HATU(187mg，0.493mmol)。将该反应混合物在室温搅拌3小时。将该混合物用Biotage直接纯化，得到标题化合物D123(200mg，0.351mmol，86％产率)，其为白色固体。LCMS:570[M+H]+。tR＝1.585。(LCMS条件2)描述D1244-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(D124)向2-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(其可根据D2制备)(2.0g，5.68mmol)和4-氨基-3-甲氧基苯甲酸(1.140g，6.82mmol)在1,4-二噁烷(1.5mL)和水(0.2mL)中的溶液中加入xantphos(0.493g，0.853mmol)、K2CO3(2.357g，17.05mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.464g，0.568mmol)。将该混合物在90℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物D124(2.60g，5.39mmol，95％产率)，其为黄色固体。LCMS:483[M+H]+。tR＝1.13。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.74(s，1H)，8.64(d，J＝10.0Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.69(m，2H)，7.69(d，J＝12.0Hz，1H)，7.53(m，3H)，7.38(m，2H)，6.66(d，J＝5.0Hz，1H)，4.49(dd，J＝9.0Hz，2H)，3.95(s，3H)，2.31(s，3H)，1.35(t，J＝9.0Hz，3H)。对于酰胺偶联反应的一般步骤4(D125-D129)向4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(其可根据D124制备)(1当量)、HATU(1当量)和DIPEA(2当量)在DMF(3mL)中的溶液中加入胺(2当量)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该混合物用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到所需产物D125-D129。描述D1304-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(D129)向4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(其可根据D124制备)(250mg，0.518mmol)在异丙醇(3.0mL)中的溶液中加入氢氧化钠(0.518mL，1.036mmol)。将该反应混合物在60℃搅拌过夜。加入2NHCl直至pH＝3。将该混合物用EtOAc(20mLx2)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥并真空浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(DCM:MeOH＝15:1)纯化，得到标题化合物E130(166mg，0.506mmol，98％产率)，其为黄色固体。LCMS:329[M+H]+。tR＝1.089。(LCMS条件2)描述D1317-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-2-甲酸叔丁酯(D131)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D1制备)(80mg，0.405mmol)、7-(4-氨基-3-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(其可根据D58制备)(167mg，0.445mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(20.07mg,0.042mmol)、Pd2(dba)3(18.53mg，0.020mmol)和碳酸钾(168mg，1.214mmol)在2-丁醇(6mL)中的溶液在120℃微波下搅拌45min。将该混合物通过硅藻土(Celite)过滤并将溶液浓缩。将该粗产物用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物D131(142mg，0.265mmol，65.4％产率)，其为黄色固体。LCMS:564[M+H]+。tR＝3.637。(LCMS条件1)描述D132(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)(3-甲氧基-4-硝基-苯基)-甲酮(D132)向3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(523mg，2.65mmol)、HATU(1210mg，3.18mmol)和DIPEA(0.708mL，3.98mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入(±)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-1-基甲醇，三氟乙酸盐(其可根据D47制备)(0.097mL，2.65mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该混合物用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用硅胶色谱(DCM:CH3OH＝14:1)纯化，得到标题化合物D132(487.6mg，1.568mmol，59.1％产率)，其为黄色油。LCMS:293[M+H]+。tR＝2.139。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.96(s，1H)，7.39(d，J＝2.0Hz，1H)，7.08-7.19(m，1H)，4.56-4.80(m，1H)，3.84-3.98(m，4H)，3.37-3.72(m，4H)，1.37-1.54(m，1H)，0.68-0.81(m，1H)，0.27-0.44(m，1H)。描述D133(3-甲氧基-4-硝基苯基)(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)甲酮(D133)向(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)(3-甲氧基-4-硝基-苯基)-甲酮(其可根据D132制备)(483mg，1.652mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入NaH(99mg，2.479mmol)。搅拌30min后，然后加入碘甲烷(0.310mL，4.96mmol)。然后将该混合物在室温搅拌3小时。加入甲醇并蒸发溶剂。将该粗产物用EA稀释，用水洗涤。将有机层浓缩并通过硅胶色谱(DCM:CH3OH＝14:1)纯化，得到标题化合物D133(340mg，0.877mmol，53.1％产率)，其为黄色油。LCMS:307[M+H]+。tR＝2.662。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.92(dd，J＝4.0，8.2Hz，1H)，7.39(s，1H)，7.15(d，J＝8.1Hz，1H)，4.10(q，J＝5.2Hz，1H)，3.95(s，3H)，3.84-3.92(m，1H)，3.58-3.75(m，1H)，3.40-3.50(m，2H)，3.25(d，J＝12.0Hz，1H)，3.17(d，3H)，1.40-1.59(m，1H)，0.71-0.81(m，1H)，0.39-0.52(m，1H)。描述D134(4-氨基-3-甲氧基苯基)(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]己-3-基)甲酮(D134)将(3-甲氧基-4-硝基苯基)(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)甲酮(其可根据D133制备)(340mg，0.877mmol)、铁(147mg，2.63mmol)在乙酸(2mL)中的溶液在70℃搅拌2小时。将该反应混合物溶于EA(10mL)并过滤。然后将该溶液用饱和NaHCO3溶液和盐水萃取。将有机相用Na2SO4干燥并浓缩，得到标题化合物D134(240mg，0.521mmol，59.4％产率)，其为黄色油。LCMS:277[M+H]+。tR＝1.752。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ6.83-6.93(m，2H)，6.59(d，J＝8.1Hz，1H)，5.15(s，1H)，3.83-3.98(m，1H)，3.77(s，3H)，3.45-3.54(m，2H)，3.39(m，1H)，3.13-3.28(m，5H)，0.72(dd，J＝4.9，7.6Hz，1H)，0.28(t，J＝4.4Hz，1H)。描述D135(1S,3S,5S)-3-氰基-2-氮杂二环-[3.1.0]-己-2-甲酸叔丁酯(D135)在-20℃，向(1S,3S,5S)-3-氨基甲酰基-2-氮杂二环[3.1.0]己-2-甲酸叔丁酯(1.6g，7.07mmol)在无水吡啶(20mL)中的溶液中滴加TFAA(4.00mL，28.3mmol)。然后将该混合物在-20℃搅拌约1小时并温热至室温再持续8小时。加入水并将该混合物搅拌30分钟。然后将该混合物用乙酸乙酯萃取并将有机层用1MHCl溶液、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到标题化合物D136(1.473g，7.07mmol，100％产率)，其为黄色油。LCMS:209[M+H]+。tR＝2.817。(LCMS条件1)描述D136(1S,3S,5S)-2-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-甲腈(D136)将(1S,3S,5S)-3-氰基-2-氮杂二环-[3.1.0]-己-2-甲酸叔丁酯(其可根据D135制备)(1.473g，7.07mmol)和1M盐酸在乙醚(14.15ml，14.15mmol)中的溶液在室温搅拌过夜。形成沉淀，然后减压除去溶剂。将残余物在溶于无水乙醚，然后过滤。将固体用无水乙醚洗涤，真空干燥，得到标题化合物D136(620mg，4.29mmol，60.6％产率)，其为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ5.02(dd，J＝2.2，9.8Hz，1H)，3.42(td，J＝2.8，6.1Hz，1H)，2.58-2.53(m，0H)，2.30(dd，J＝2.1，13.8Hz，1H)，1.82-1.97(m，1H)，0.88-1.06(m，2H)。描述D137(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(D137)在氮气下，向2-氯-4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D2制备)(200mg，0.568mmol)、碳酸钾(157mg，1.137mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(49.3mg，0.085mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(46.4mg，0.057mmol)在1,4-二噁烷(0.8mL)和水(0.2mL)中的溶液中加入(4-氨基-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(170mg，0.682mmol)。将该反应混合物在90℃搅拌过夜。将该反应混合物分配于乙酸乙酯(25mL)和水(10mL)之间。将该有机相用水、NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到标题化合物D137(100mg，0.131mmol，23.05％产率)，其为黄色油。LCMS:565[M+H]+。tR＝1.482分钟。(LCMS条件1)用于Buchwald反应的一般步骤5向管中加入2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶D1(1.0当量)、胺(1.2当量)和Xphos(0.1当量)、2-丁醇(3.0mL)、Pd2(dba)3(0.05当量)和K2CO3(3当量)。将该管密封，并通入氮气2min。将该反应混合物在120℃微波下搅拌45min。冷却后，将该混合物过滤，浓缩，并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题产物。实施例1(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E1)标题化合物E1是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据在PCT国际申请WO2012097682中描述的步骤制备)，其为810mg的灰白色固体。产率:35.4％。LCMS:398[M+H]+。tR＝3.420分钟。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ8.62(d，J＝8.0Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.93-7.15(m，3H)，6.34(d，J＝3.5Hz，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.94(s，3H)，3.45-3.70(m，8H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例2(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-2-氟-5-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E2)标题化合物E2是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据在JournalofMedicinalChemistry，55(22)，9416-9433；2012中描述的操作制备)，其为125mg的灰白色固体。产率:47.1％。LCMS:416[M+H]+。tR＝2.999分钟。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.50-11.83(m，1H)，8.59(d，J＝12.5Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.10(宽单峰，1H)，7.01(d，J＝6.1Hz，1H)，6.36(宽单峰，1H)，4.52(q，J＝7.1Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.50-3.70(m，6H)，3.37-3.43(m，2H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例3(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(E3)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D137制备)(100mg，0.177mmol)和氢氧化钠(2mL，4.00mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物蒸发并加入2NHCl直至pH＝7。将该混合物用EA萃取。将有机层用MgSO4干燥并蒸发。将残余物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E3(25mg，0.061mmol，34.4％产率)，其为白色固体。LCMS:411[M+H]+。tR＝1.259。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.93-7.13(m，3H)，6.33(宽单峰，1H)，4.51(d，J＝7.0Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.52(宽单峰，4H)，2.33(宽单峰，4H)，2.20(s，3H)，1.40(t，J＝6.9Hz，3H)。实施例4(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-(4-甲基哌嗪-1-基)-哌啶-1-基)-甲酮(E4)标题化合物E4是根据对于Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-甲氧基苯基)(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)甲酮(其可根据D52制备)，其为16mg的白色固体。产率:8.01％。LCMS:494[M+H]+。tR＝2.139。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.62-8.70(m，1H)，8.27-8.38(m，1H)，7.59-7.65(m，1H)，6.97-7.07(m，2H)，6.88(dd，J＝2.2，3.4Hz，1H)，6.46(dd，J＝2.2，3.4Hz，1H)，4.58(q，J＝7.1Hz，2H)，3.95(s，3H)，2.77-3.05(m，2H)，2.56-2.72(m，4H)，2.39-2.54(m，4H)，2.29(s，3H)，1.78-2.00(m，2H)，1.46-1.51(m，3H)。实施例5(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2-氟-5-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(E5)标题化合物E5是根据对于Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D53制备)，其为39mg的白色固体。产率:3.95％。LCMS:429[M+H]+。tR＝1.148。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.68(宽单峰，1H)，8.57(d，J＝12.5Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.09(宽单峰，1H)，6.97(d，J＝6.0Hz，1H)，6.36(宽单峰，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.92(s，3H)，3.63(宽单峰，2H)，3.29-3.31(m，2H)，2.23-2.41(m，4H)，2.20(s，3H)，1.40(t，3H)。实施例6(S)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(六氢吡咯并-[1,2-a]-吡嗪-2(1H)-基)甲酮(E6)标题化合物E6是根据对于Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(S)-(4-氨基-3-甲氧基苯基)(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)甲酮(其可根据D54制备)，其为39mg的白色固体。产率:25.2％。LCMS:437[M+H]+。tR＝2.301。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.66(d，J＝8.8Hz，1H)，8.49-8.60(m，1H)，7.67-7.57(m，1H)，7.04(s，2H)，6.86(dd，J＝2.2，3.4Hz，1H)，6.46(dd，J＝2.2，3.4Hz，1H)，4.58(q，J＝7.1Hz，2H)，3.95(s，3H)，3.12(t，J＝8.3Hz，3H)，2.18(d，J＝9.0Hz，2H)，2.04-1.59(m，7H)，1.49(t，J＝7.1Hz，3H)，1.31-1.45(m，1H)。实施例7(3-(二氟甲氧基)-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(E7)标题化合物E7是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-(二氟甲氧基)-苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D80制备)，其为41mg的白色固体。产率:30.2％。LCMS:447[M+H]+。tR＝2.519。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.74(d，J＝8.3Hz，1H)，7.16-7.27(m，2H)，6.63-7.07(m，2H)，6.29(d，J＝3.4Hz，1H)，4.43-4.50(m，2H)，3.47-3.71(m，4H)，2.40(宽单峰，4H)，2.24(s，3H)，1.37(t，3H)。实施例8(3-(环丙基甲氧基)-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(E8)标题化合物E8是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-(环丙基甲氧基)-苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D81制备)，其为41mg的白色固体。产率:22.48％。LCMS:451[M+H]+。tR＝2.710。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.65(d，J＝8.1Hz，1H)，6.90-7.00(m，2H)，6.85(d，J＝3.7Hz，1H)，6.28(d，J＝3.4Hz，1H)，4.48(q，J＝7.1Hz，2H)，3.89(d，J＝7.1Hz，2H)，3.59(宽单峰，4H)，2.39(宽单峰，4H)，2.24(s，3H)，1.39(t，J＝7.1Hz，3H)，1.27-1.34(m，1H)，0.60(q，2H)，0.30-0.37(m，2H)。实施例9(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(吗啉代)甲酮(E9)标题化合物E9是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基苯基)(吗啉代)-甲酮(其可根据在PCT国际申请WO2008018426中描述的步骤制备)，其为52mg的白色固体。产率:20.44％。LCMS:368[M+H]+。tR＝2.511。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ9.33(s，1H)，7.92(d，J＝8.3Hz，2H)，7.35(d，J＝8.3Hz，2H)，7.02(d，J＝3.4Hz，1H)，6.32(d，J＝3.2Hz，1H)，4.55(q，J＝7.1Hz，2H)，3.61(宽单峰，4H)，3.52(宽单峰，4H)，1.42(t，J＝7.1Hz，3H)。实施例10(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺-[3.3]庚-6-基)甲酮(E10)标题化合物E10是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)甲酮(其可根据D55制备)，其为20.4mg的白色固体。产率:15.75％。LCMS:410[M+H]+。tR＝2.38。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.63(宽单峰，1H)，8.65(d，J＝8.3Hz，1H)，7.69(s，1H)，7.21-7.28(m，2H)，6.98-7.11(m，1H)，6.35(dd，J＝3.2，2.0Hz，1H)，4.67-4.73(m，4H)，4.52(q，J＝7.1Hz，4H)，4.13-4.27(m，2H)，3.95(s，3H)，1.36-1.46(m，3H)。实施例11((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(E11)标题化合物E11是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-甲氧基苯基)((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)甲酮(其可根据D56制备)，其为49mg的白色固体。产率:18.97％。LCMS:426[M+H]+。tR＝3.025。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.62-8.72(m，1H)，8.41-8.55(m，1H)，7.57-7.70(m，1H)，6.97–7.07(m，2H)，6.90-6.80(m，1H)，6.40-6.53(m，1H),4.58(q，J＝6.9Hz，2H)，3.96(s，3H)，3.47-3.71(m，2H)，2.39-2.96(m，2H)，1.61-1.64(m，2H)，1.49(t，J＝7.1Hz，3H)，0.97–1.35(m，6H)。实施例12(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺-[3.4]-辛-6-基)-甲酮(E12)标题化合物E12是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和(4-氨基-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)甲酮(其可根据D57制备)，其为15.3mg的白色固体。产率:11.33％。LCMS:424[M+H]+。tR＝2.38。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.53(宽单峰，1H)，8.49-8.60(m，1H)，7.51-7.62(m，1H)，7.05-7.14(m，2H)，6.94-7.01(m，1H)，6.27(宽单峰，1H)，4.56(宽单峰，1H)，4.31-4.49(m，5H)，3.89(s，3H)，3.58-3.73(m，2H)，3.35-3.53(m，2H)，2.03-2.16(m，2H)，1.33(t，3H)。实施例13(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-甲基-2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-7-基)甲酮(E13)标题化合物E13是根据Buchwald反应的一般步骤5制备的，其起始于2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)和7-(4-氨基-3-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(其可根据D58制备)，其为24.3mg的白色固体。产率:29.2％。LCMS:451[M+H]+。tR＝2.06。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.59(宽单峰，1H)，8.59(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.96-7.07(m，3H)，6.33(dd，J＝3.3，1.8Hz，1H)，4.51(q，J＝7.1Hz，2H)，3.92(s，3H)，3.40-3.50(m，4H)，3.01(s，4H)，2.51(s，8H)，2.26(s，3H)，1.69(宽单峰，4H)，1.40(t，3H)。实施例144-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基-2-甲基丙基)-3-甲氧基苯甲酰胺(E14)将4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基-2-甲基丙基)-3-甲氧基苯甲酰胺(其可根据D96制备)(150mg，0.271mmol)和氢氧化钠(0.558mL，1.116mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E14(77mg，0.193mmol，71.1％产率)，其为白色固体。LCMS:400[M+H]+。tR＝1.251。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.60(宽单峰，1H)，8.64(d，J＝8.3Hz，1H)，8.18(t，J＝5.9Hz，1H)，7.68(s，1H)，7.44-7.61(m，2H)，7.07(d，J＝3.0Hz，1H)，6.34(d，J＝1.8Hz，1H)，4.60(s，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.98(s，3H)，3.27(d，J＝6.0Hz，2H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)，1.12(s，6H)。实施例15(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E15)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D97制备)(250mg，0.468mmol)和氢氧化钠(0.23mL，0.47mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将残余物倾倒至水中并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得到标题化合物E15(56mg，0.147mmol，31.5％产率)，其为白色固体。LCMS:381.1[M+H]+。tR＝1.148。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.49(s，1H)，9.37(s，1H)，7.91(d，2H)，7.31(d，2H)，7.01(d，1H)，6.31(d，1H)，4.53(dd，J＝9.0Hz，2H)，3.49(s，3H)，2.30(s，4H)，2.18(s，3H)，1.40(t，J＝9.0Hz，3H)。实施例16(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(6-氮杂螺-[2.5]辛-6-基)甲酮(E16)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(其可根据D98制备)(150mg，0.261mmol)和氢氧化钠(0.558mL，1.116mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E16(90mg，0.214mmol，82％产率)，其为白色固体。LCMS:422[M+H]+。tR＝1.456。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.59(d，J＝8.3Hz，1H)，7.62(s，1H)，6.92-7.11(m，3H)，6.33(s，1H)，4.51(d，J＝7.0Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.39-3.74(m，4H)，1.10-1.60(m，7H)，0.36(s，4H)。实施例17(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(噁唑烷-3-基)甲酮(E17)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(噁唑烷-3-基)甲酮(其可根据D99制备)(200mg，0.372mmol)和氢氧化钠(0.558mL，1.116mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E17(33mg，0.082mmol，22.09％产率)，其为白色固体。LCMS:384[M+H]+。tR＝1.572。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.62(宽单峰，1H)，8.65(d，J＝8.8Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.13-7.32(m，2H)，7.06(d，J＝1.8Hz，1H)，6.33(d，J＝2.8Hz，1H)，4.98(s，2H)，4.51(q，J＝7.0Hz，2H)，4.00(t，J＝6.4Hz，2H)，3.95(s，3H)，3.55-3.73(m，2H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例18(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E18)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D100制备)(170mg，0.308mmol)和氢氧化钠(0.770mL，1.541mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将残余物倾倒至水中并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E18(20mg，0.050mmol，16.13％产率)，其为白色固体。LCMS:398[M+H]+。tR＝1.497。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.47(宽单峰，1H)，9.30(s，1H)，7.82(s，1H)，7.30-7.49(m，1H)，6.94-7.14(m，2H)，6.31(d，J＝1.3Hz，1H)，4.55(q，J＝7.2Hz，2H)，3.82(s，3H)，3.60(宽单峰，6H)，3.19(宽单峰，2H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例19(3-(二甲基氨基)-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-(吗啉代)甲酮(E19)将(3-(二甲基氨基)-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D101制备)(250mg，0.443mmol)和氢氧化钠(0.221mL，0.442mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物E19((62mg，0.151mmol，34.1％产率)，其为白色固体。LCMS:411[M+H]+。tR＝1.32。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.57(s，1H)，8.64(d，1H，J＝10.5Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.28(s，1H)，7.19(d，J＝8.5Hz，1H)，7.04(s，1H)，6.33(s，1H)，4.51(dd，J＝8.5Hz，9.0Hz，2H)，.59(s，4H)，3.52(s，4H)，2.65(s，6H)，1.39(t，J＝9.0Hz，3H)。实施例20(3-乙氧基-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(吗啉代)甲酮(E20)将(3-乙氧基-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D102制备)(250mg，0.442mmol)和氢氧化钠(0.221mL，0.442mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物E20(96mg，0.233mmol，52.8％产率)，其为白色固体。LCMS:412.1[M+H]+。tR＝1.31。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.57(s，1H)，8.61(d，J＝10.0Hz，1H)，7.60(s，1H)，7.04(m，3H)，6.32(s，1H)，4.53(dd，J＝8.0Hz，9.0Hz，2H)，4.17(dd，J＝8.0Hz，9.0Hz，2H)，3.59(s，4H)，3.51(s，4H)，1.41(m,6H)。实施例21(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-异丙氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E21)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-异丙氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D103制备)(200mg，0.345mmol)和氢氧化钠(0.173mL，0.345mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物用水淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:CH3OH＝20:1)纯化，得到标题化合物E21(67mg，0.157mmol，45.6％产率)，其为白色固体。LCMS:426.2[M+H]+。tR＝1.36。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.57(s，1H)，8.63(d，J＝10.0Hz，1H)，7.57(s，1H)，7.04(m，3H)，6.32(s，1H)，4.73(m，1H)，4.51(dd，J＝8.0Hz，9.0Hz，2H)，3.59(s，4H)，3.51(s，4H)，1.39(,t，J＝8.5Hz，3H)，1.35(d，J＝7.5Hz，6H)。实施例22(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-氟苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E22)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-氟苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D104制备)(100mg，0.181mmol)和氢氧化钠(0.181mL，0.362mmol，2M在水中)在THF(10mL)中的溶液在50℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)萃取。将有机层真空蒸发并将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E22(16mg，0.039mmol，21.30％产率)，其为白色固体。LCMS:399[M+H]+。tR＝1.513。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.51(宽单峰，1H)，8.55(s，1H)，8.22(s，1H)，7.26(d，J＝11.3Hz，1H)，7.20(d，J＝8.5Hz，1H)，6.98-7.04(m，1H)，6.27-6.34(m，1H)，4.46-4.53(m，2H)，3.50(宽单峰，4H)，2.32(宽单峰，4H)，2.20(s，3H)，1.38(t，J＝7.1Hz，3H)。实施例23(3-氯-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E23)将(3-氯-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(其可根据D123制备)(40mg，0.070mmol)和氢氧化钠(1mL，2.0mmol，2M在水中)在甲醇(3mL)中的溶液在20℃搅拌2小时。将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E23(18mg，0.042mmol，59.9％产率)，其为白色固体。LCMS:415[M+H]+。tR＝1.582。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.85(d，J＝8.8Hz，1H)，7.54(d，J＝1.8Hz，1H)，7.40(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，7.00(d，J＝3.5Hz，1H)，6.41(d，J＝3.5Hz，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，3.68(宽单峰，4H)，2.50(宽单峰，4H)，2.35(s，3H)，1.48(t，J＝7.2Hz，3H)。实施例24(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-异丙氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E24)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-异丙氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D105制备)(100mg，0.169mmol)和氢氧化钠(0.169mL，0.337mmol，2M在水中)在THF(10mL)中的溶液在50℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)萃取。将有机层真空蒸发并将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E24(45mg，0.100mmol，59.0％产率)，其为黄色固体。LCMS:437[M+H]+。tR＝1.626。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.57(宽单峰，1H)，8.62(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(s，1H)，6.91-7.10(m，3H)，6.34(d，J＝1.3Hz，1H)，4.67-4.82(m，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.51(宽单峰，4H)，2.32(宽单峰，4H)，2.20(s，3H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)，1.36(d，J＝6.0Hz，6H)。实施例25(3-乙氧基-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E25)将(3-乙氧基-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D106制备)(100mg，0.173mmol)和氢氧化钠(0.173mL，0.346mmol，2M在水中)在THF(10mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)萃取。将有机层真空蒸发并将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E25(60mg，0.140mmol，81％产率)，其为黄色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.583。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.61(d，J＝8.0Hz，1H)，7.61(s，1H)，6.92-7.12(m，3H)，6.34(d，J＝2.0Hz，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，4.19(q，J＝7.0Hz，2H)，3.52(宽单峰，4H)，2.32(宽单峰，4H)，2.20(s，3H)，1.42(m，6H)。实施例26(3-(二甲基氨基)-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E26)向(3-(二甲基氨基)-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D107制备)(100mg，0.173mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入NaOH(0.173mL，0.346mmol)。将该反应混合物在60℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)洗涤。将有机层真空蒸发并将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E26(50mg，0.116mmol，66.8％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.59。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.63(d，J＝8.3Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.26(d，J＝1.3Hz，1H)，7.12-7.22(m，1H)，6.99-7.10(m，1H)，6.34(d，J＝1.5Hz，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.52(宽单峰，4H)，2.66(s，6H)，2.32(宽单峰，4H)，2.20(s，3H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例27(S)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(3-甲基吗啉代)甲酮(E27)将(S)-(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(3-甲基吗啉代)甲酮(其可根据D108制备)(250mg，0.442mmol)和氢氧化钠(0.221mL，0.442mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将残余物倾倒至盐水中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。然后将有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物E27(80mg，0.194mmol，44.0％产率)，其为白色固体。LCMS:412[M+H]+。tR＝1.305。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.57(s，1H)，8.60(d，J＝10.5Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.00(m，3H)，6.32(d，J＝4.0Hz，1H)，4.52(dd，J＝9.0Hz，2H)，4.17(s，1H)，3.92(s，3H)，3.79(m，2H)，3.59(2H，m)，3.42(m,1H)，3.26(m，1H)，1.38(t，J＝9.0Hz，3H)，1.26(d，J＝8.0Hz，3H)。实施例28(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-2-甲基苯基)(吗啉代)甲酮(E28)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-2-甲基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D109制备)(250mg，0.442mmol)和氢氧化钠(0.221mL，0.442mmol，2M在水中)在异丙醇(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将残余物倾倒至盐水中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。然后将有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(PE:EA＝1:1)纯化，得到标题化合物E28(125mg，0.304mmol，68.7％产率)，其为白色固体。LCMS:412[M+H]+。tR＝1.248。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.53(s，1H)，8.38(d，J＝10.5Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.02(m，1H)，6.95(d，J＝10.5Hz，1H)，6.31(m，1H)，4.51(dd，J＝9.0Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.63(m，4H)，3.49(m，2H)，3.18(m，2H)，2.16(s，3H)，1.38(t，J＝9.0Hz，3H)。实施例29(R)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(E29)将(R)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(其可根据D110制备)(150mg，0.259mmol)和氢氧化钠(0.389mL，0.778mmol)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E29(15mg，0.035mmol，13.63％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.572。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.36-11.72(m，1H)，8.59(d，J＝7.8Hz，1H)，7.62(宽单峰，1H)，6.78-7.20(m，3H)，6.32(宽单峰，1H)，4.50(d，J＝6.5Hz，2H)，3.92(宽单峰，3H)，2.61-2.86(m，1H)，2.18(宽单峰，3H)，2.07(宽单峰，2H)，1.39(t，J＝6.4Hz，3H)，0.77-1.10(m，3H)。实施例30(R)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(3-甲基吗啉代)甲酮(E30)将(R)-(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(3-甲基吗啉代)甲酮(其可根据D111制备)(40mg，0.071mmol)和氢氧化钠(1mL，2.0mmol，2M在水中)在甲醇(3mL)中的溶液在20℃搅拌2小时。将该混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E30(17mg，0.041mmol，58.4％产率)，其为白色固体。LCMS:412[M+H]+。tR＝1.610。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.75(d，J＝8.3Hz，1H)，7.00-7.11(m，2H)，6.95(d，J＝3.5Hz，1H)，6.38(d，J＝3.5Hz，1H)，4.57(q，J＝7.0Hz，2H)，4.20-4.46(m，1H)，3.99(s，3H)，3.80-3.97(m，2H)，3.60-3.76(m，2H)，3.38-3.59(m，2H)，1.48(t，J＝7.0Hz，3H)，1.40(d，J＝6.8Hz，3H)。实施例31(4-((4-乙氧基-5-甲基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E31)将(4-((4-乙氧基-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D112制备)(60mg，0.104mmol)和氢氧化钠(2mL，4.00mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E31(10mg，0.024mmol，22.72％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.333。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.12-11.27(m，1H)，8.58(d，J＝8.3Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.89-7.08(m，2H)，6.75(s，1H)，4.47(q，J＝7.0Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.50(宽单峰，4H)，2.31(宽单峰，4H)，2.25(s，3H)，2.19(s，3H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例32(4-((4-乙氧基-5-甲基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E32)将(4-((4-乙氧基-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D113制备)(150mg，0.265mmol)和氢氧化钠(2mL，4.00mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E32(9mg，0.022mmol，8.25％产率)，其为白色固体。LCMS:412[M+H]+。tR＝1.311。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.22(宽单峰，1H)，8.45-8.70(m，1H)，7.59(s，1H)，7.06(s，2H)，6.76(s，1H)，4.48(q，J＝7.0Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.61(宽单峰，4H)，3.49-3.56(m，4H)，2.26(s，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例33(4-((4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E33)将2-氯-4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D87制备)(150mg，0.671mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(201mg，0.805mmol)、xantphos(39.2mg，0.068mmol)、Pd2(dba)3(31.3mg，0.034mmol)和K2CO3(282mg，2.039mmol)在2-丁醇(2.0mL)中的溶液在120℃微波下照射45min。将该反应混合物用水淬灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得到标题化合物E33(80mg，0.183mmol，27.3％产率)，其为白色固体。LCMS:437[M+H]+。tR＝1.292。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.59(s，1H)，8.60(d，J＝10.5Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.03(m，3H)，8.35(d，J＝4.0Hz，1H)，4.29(d，J＝9.0Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.52(m，8H)，1.31(m，1H)，0.58(m，2H)，0.38(m，2H)。实施例34(4-((4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E34)将2-氯-4-(环丙基甲氧基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶(其可根据D87制备)(150mg0.671mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(190mg，0.805mmol)、xantphos(39.2mg，0.068mmol)、Pd2(dba)3(31.3mg，0.034mmol)和K2CO3(282mg，2.039mmol)在2-丁醇(2.0mL)中的溶液在120℃微波下照射45min。将该反应混合物用水淬灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得到标题化合物E34(107mg，0.253mmol，37.7％产率)，其为白色固体。LCMS:424[M+H]+。tR＝1.32。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.59(1H，s)，8.60(1H，d，J＝10.5Hz)，7.62(1H，s)，7.03(3H，m)，8.35(1H，d，J＝4.0Hz)，4.29(2H，d，J＝9.0Hz)，3.91(3H，s)，3.52(8H，m)，1.31(1H，m)，0.58(2H，m)，0.38(2H，s)。实施例35(R)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(E35)将(R)-(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(其可根据D125制备)(160mg，0.276mmol)和NaOH(166mg，4.14mmol)在异丙醇(5mL)和水(5.00mL)中的溶液在60℃搅拌4小时。将该混合物用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E35(51mg，0.120mmol，43.4％产率)，其为白色固体。LCMS:426[M+H]+。tR＝3.213。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.56-8.71(m，1H)，8.32-8.52(m，1H)，7.60-7.72(m，1H)，7.08-7.24(m，2H)，6.78-6.96(m，1H)，6.33-6.58(m，1H)，4.58(d，J＝7.1Hz，2H)，4.38-4.51(m，1H)，3.96(s，3H)，3.53-3.77(m，4H)，3.25-3.49(m，3H)，1.88-2.14(m，3H)，1.68-1.83(m，1H)，1.49(t，J＝7.1Hz，3H)。实施例36(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-氟哌啶-1-基)甲酮(E36)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)(60mg，0.304mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(4-氟哌啶-1-基)甲酮(其可根据D74制备)(122mg，0.334mmol)、Pd2(dba)3(13.90mg，0.015mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(15.05mg，0.032mmol)和碳酸钾(126mg，0.911mmol)在2-丁醇(6mL)中的溶液在120℃微波下照射45min。将该混合物通过硅藻土过滤并将该溶液浓缩。将该粗产物用MADP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E36(30.5mg，0.070mmol，23.08％产率)，其为白色固体。LCMS:414[M+H]+。tR＝3.19。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.52(宽单峰，1H)，8.53(d，J＝8.1Hz，1H)，7.56(s，1H)，6.85-7.07(m，3H)，6.26(dd，J＝3.2，1.7Hz，1H)，4.72-5.03(m，1H)，4.44(q，J＝7.1Hz，2H)，3.76-4.00(m，3H)，3.54(宽单峰，4H)，1.67(宽单峰，4H)，1.33(t，3H)。实施例37(S)-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(E37)将(S)-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(其可根据D114制备)(100mg，0.173mmol)和氢氧化钠(0.259mL，0.518mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E37(7mg，0.016mmol，9.54％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.262。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.80-7.17(m，3H)，6.10-6.47(m，1H)，4.52(q，J＝7.0Hz，2H)，3.94(s，3H)，3.75-3.92(m，1H)，3.19(宽单峰，1H)，2.58-2.83(m，2H)，2.17(s，3H)，2.04(dd，J＝11.3，3.5Hz，1H)，1.87(d，J＝3.0Hz，1H)，1.41(t，J＝7.2Hz，3H)，1.29(d，J＝6.8Hz，3H)。实施例38(2-氯-4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E38)将(2-氯-4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D115制备)(100mg，0.167mmol)和氢氧化钠(1mL，2.000mmol，2M在水中)在甲醇(3mL)中的溶液在20℃搅拌2小时。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E38(6mg，0.013mmol，8.08％产率)，其为白色固体。LCMS:412[M+H]+。tR＝1.564。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.69-8.79(m，1H)，7.04-7.11(m，1H)，6.87-7.01(m，1H)，6.39(d，J＝3.5Hz，1H)，4.51-4.61(m，2H)，3.94(s，3H)，3.80(宽单峰，2H)，3.33-3.39(m，2H)，2.37-2.60(m，4H)，2.33(s，3H)，1.48(t，3H)实施例39(R)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)甲酮(E39)将(R)-(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)甲酮(其可根据D116制备)(250mg，0.423mmol)和氢氧化钠(16.93mg，0.423mmol)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该反应混合物真空浓缩。将残余物倾倒至水中并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的萃取物用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝30:1)纯化，得到标题化合物E39(60mg，0.137mmol，32.5％产率)，其为白色固体。LCMS:437[M+H]+。tR＝1295。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.45-11.70(m，1H)，8.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，7.04(s，3H)，6.33(d，J＝3.3Hz，1H)，4.51(q，J＝7.2Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.33(s，4H)，2.99(t，J＝7.4Hz，2H)，2.06(q，J＝8.5Hz，2H)，1.87(d，J＝2.8Hz，1H)，1.60-1.80(m，3H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)，1.17-1.34(m，1H)。实施例40(R)-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)-氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(E40)将(R)-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(其可根据D117制备)(150mg，0.259mmol)和氢氧化钠(0.389mL，0.778mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E40(27mg，0.064mmol，24.54％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.305。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.59(d，J＝8.3Hz，1H)，7.62(s，1H)，6.80-7.16(m，3H)，6.32(宽单峰，1H)，4.49(q，J＝7.0Hz，2H)，4.15-4.40(m，1H)，3.91(s，4H)，3.16(d，J＝5.0Hz，1H)，2.56-2.79(m，2H)，2.15(s，3H)，1.73-2.06(m，2H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H)，1.26(d，J＝6.8Hz，3H)。实施例41(S)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(E41)将(S)-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)甲酮(其可根据D118制备)(220mg，0.371mmol)和氢氧化钠(0.069mL，0.138mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌3小时。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E41(50mg，0.118mmol，85％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝1.575。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.59(宽单峰，1H)，8.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.64(s，1H)，6.98-7.09(m，3H)，6.33(宽单峰，1H)，4.51(q，J＝7.0Hz，2H)，3.93(s，3H)，2.60-2.85(m，1H)，2.51-2.55(m，4H)，2.19(s，3H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)，0.86-1.10(m，3H)。实施例42(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲酮(E42)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲酮(其可根据D127制备)(220mg，0.371mmol)和氢氧化钠(4mL，8.00mmol，2M在水中)在异丙醇(5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E42(45mg，0.102mmol，27.6％产率)，其为白色固体。LCMS:440[M+H]+。tR＝1.383。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.58(宽单峰，1H)，8.59(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.95-7.09(m，3H)，6.33(d，J＝3.0Hz，1H)，4.51(q，J＝6.9Hz，2H)，3.93(s，3H)，3.34(s，2H)，3.24(s，3H)，3.21(d，J＝6.0Hz，2H)，2.67-3.11(m，2H)，1.58-1.92(m，3H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)，0.96-1.27(m，2H)。实施例43(S)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(E43)将(S)-(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(其可根据D126制备)(100mg，0.173mmol)和氢氧化钠(104mg，2.59mmol)在异丙醇(5.0mL)和水(5.0mL)中的溶液在60℃搅拌4小时。将该混合物用EA稀释并用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用反相色谱(BiotageSNAP柱，KP-C18-HS120g，5％～95％MeCN/H2O，0.05％氨)纯化，得到标题化合物E43(41mg，0.096mmol，55.9％产率)，其为黄色固体。LCMS:426[M+H]+。tR＝3.213.(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.52-8.81(m，2H)，7.64(s，1H)，7.12-7.23(m，2H)，6.70-6.95(m，1H)，6.29-6.55(m，1H)，4.58(q，J＝7.1Hz，2H)，4.34-4.53(m，1H)，3.95(s，3H)，3.52-3.77(m，4H)，3.40(s，3H)，2.03-2.14(m，1H)，1.90-2.03(m，2H)，1.75-1.82(m，1H)，1.49(t，J＝7.1Hz，3H)。实施例44(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺-[3.5]壬-6-基)甲酮(E44)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2-氧杂-6-氮杂螺[3.5]壬-6-基)甲酮(其可根据D129制备)(150mg，0.254mmol)和氢氧化钠(0.254mL，0.507mmol，2M在水中)在THF(10mL)中的溶液在60℃搅拌18小时。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)萃取。将有机层真空蒸发并用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E44(30mg，0.069mmol，27.0％产率)，其为白色固体。LCMS:437.8[M+H]+。tR＝1.396。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ9.20-9.45(m，1H)，8.65(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(s，1H)，6.93-7.06(m，2H)，6.81(d，J＝2.0Hz，1H)，6.44(宽单峰，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，4.24-4.50(m，4H)，3.94(s，3H)，3.74-3.90(m，2H)，3.52(宽单峰，2H)，1.89-1.95(m，2H)，1.56(宽单峰，2H)，1.49(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例45(±)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)甲酮(E45)将(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)甲酮(其可根据D128制备)(110mg，0.190mmol)和氢氧化钠(114mg，2.86mmol)在异丙醇(5mL)和水(5.00mL)中的溶液在60℃搅拌4小时。将该混合物用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用反相色谱(BiotageSNAP柱，KP-C18-HS120g，5％～95％MeCN/H2O，0.05％氨)纯化，得到标题化合物E45(71mg，0.168mmol，88％产率)，其为黄色固体。LCMS:424[M+H]+。tR＝2.737.(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.57(d，J＝8.8Hz，2H)，7.56(s，1H)，7.02(s，2H)，6.75-6.84(m，1H)，6.33-6.42(m，1H)，4.51(q，J＝7.1Hz，2H)，4.11-4.30(m，1H)，3.87(s，3H)，3.37-3.79(m，5H)，1.38-1.47(m，4H)，0.71(d，J＝5.4Hz，1H)，0.42(t，J＝4.6Hz，1H)。实施例46和47对映异构体1:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)甲酮(E46)对映异构体2:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(羟基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-基)甲酮(E47)手性分离E45得到标题化合物E46(18.0mg，30.0％产率)和E47(20.0mg，33.3％产率)，为灰色固体。(手性-HPLC：共溶剂：MeOH；柱AS-H(4.6*250mm，5um)；移动相；正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20；流速：1.0ml/min；温度:40；波长:214nm&254nm)E46:LCMS:424[M+H]+。tR＝1.18分钟。(LCMS条件2)手性HPLC:tR＝12.863分钟。(条件：柱AS-H(4.6*250mm，5um)；移动相:正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20)未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.56(1H，s)，8.58(d，J＝10.5Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.04(m,3H)，6.32(m，1H)，4.63(m，1H)，4.49(dd，J＝10.0Hz，2H)，4.01(m，4H)，3.96(m，1H)，3.50(m，2H)，3.41(m，2H)，1.39(t。J＝10.0Hz，4H)，0.71(m，1H)，0.27(m，1H)。E47:LCMS:424[M+H]+。tR＝1.18分钟。(LCMS条件2)手性HPLC:tR＝16.540分钟。(条件：柱AS-H(4.6*250mm，5um)；移动相:正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20)未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.56(s，1H)，8.58(d，J＝10.5Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.07(m，3H),6.32(m，1H)，4.64(m，1H)，4.49(dd，J＝10.0Hz，2H)，3.91(m，4H)，3.76(m，1H)，3.50(m，2H)，3.43(m，2H)，1.39(t，J＝10.0Hz，4H)，0.71(m，1H)，0.27(m，1H)。实施例48(±)-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(5-(羟基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)甲酮(E48)向4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(D129)(其可根据D130制备(58.1mg，0.177mmol)和6-氮杂螺-[2.5]-辛-5-基甲醇(其可根据D48制备)(25mg，0.177mmol)在DMF(2.0mL)中的的溶液中加入DIPEA(68.6mg，0.531mmol)和HATU(135mg，0.354mmol)。将该反应混合物在室温搅拌2小时。将该混合物用水稀释并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得到标题化合物E48(58mg，0.128mmol，72.6％产率)，其为白色固体。LCMS:452[M+H]+。tR＝1.44。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.55(s，1H)，8.56(d，J＝10.5Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.04(m，3H),6.31(s，1H)，4.78(s，1H)，4.50(dd，J＝9.0Hz，2H)，3.91(s，3H)，3.77(s，1H)，3.59(s，1H)，3.01(s，1H)，1.85(m，2H)，1.38(t，J＝9.0Hz，3H)，1.04(s，1H)，0.86(s，1H)，0.40(m，2H)，0.22(m，2H)。实施例49和50对映异构体1:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(5-(羟基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(E49)对映异构体2:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(5-(羟基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(E50)通过手性分离E48得到标题化合物E49(7.0mg，14.0％产率)和E50(7.0mg，14.0％产率)，为白色固体。(手性-HPLC：共溶剂:MeOH；柱IC(4.6*250mm，5um)；柱温度38.3；CO2流速1.95；共溶剂流速1.05；共溶剂％35；反压118；总流量3；PDA起始波长214；PDA终止波长359)。E49:LCMS:452[M+H]+。tR＝1.31分钟。(LCMS条件2)手性HPLC:tR＝8.37分钟。(条件：IC(4.6*250mm，5um)；共溶剂:MeOH；共溶剂:35％)未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ7.12(m，2H)，6.90(s，1H)，6.48(s，1H)，4.64(dd，J＝10.0Hz，2H)，4.13(s，1H)，3.95(s，3H)，3.75(s，1H)，3.20(s，1H)，2.12(m，2H)，1.51(t，3H，J＝10.0Hz)，1.07(m，1H)，0.92(m，1H)，0.38(m，4H)。E50:LCMS:452[M+H]+。tR＝1.31分钟。(LCMS条件2)手性HPLC:tR＝6.66分钟。(条件：IC(4.6*250mm，5um)；共溶剂:MeOH；共溶剂:35％)未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ7.91(s，1H)，7.12(m，2H)，6.90(s，1H)，6.48(s，1H)，4.62(dd，J＝10.0Hz，2H)，4.16(s，1H)，3.96(s，3H)，3.76(s，1H)，3.25(s，1H)，2.11(m，1H)，2.03(m，1H)，1.51(t，J＝10.0Hz，3H)，1.07(m，1H)，0.91(m，1H)，0.40(m，4H)。实施例51(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2,7-二氮杂螺-[3.5]壬-7-基)甲酮(E51)在室温，向7-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺-[3.5]-壬-2-甲酸叔丁酯(其可根据D131制备)(142mg，0.265mmol)在DCM(10mL)中的溶液中缓慢加入TFA(0.102mL，1.323mmol)。将该反应混合物在室温搅拌过夜。然后将该混合物浓缩并将残余物再溶于甲醇中，用氨水溶液调节至pH＝9并用反相色谱(BiotageSNAP柱，KP-C18-HS120g，5％～95％MeCN/H2O，0.05％氨)纯化，得到标题化合物E51(63mg，0.137mmol，51.8％产率)，其为白色固体。LCMS:437.8[M+H]+。tR＝2.00.(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.28-11.65(m，1H)，8.52(d，J＝8.3Hz，1H)，7.55(s，1H)，6.88-7.00(m，3H)，6.26(d，J＝3.4Hz，1H)，4.44(q，J＝7.1Hz，2H)，3.85(s，3H)，3.25-3.53(m，8H)，1.64(宽单峰，4H)，1.33(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例52和53对映异构体1:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(甲氧基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)甲酮(E52)对映异构体2:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(甲氧基甲基)-6-氮杂螺-[2.5]-辛-6-基)甲酮(E53)向(4-((4-乙氧基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(1-(甲氧基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(其可根据D119制备)(170mg，0.274mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入氢氧化钠(0.274mL，0.549mmol，2M在水中)。将该反应混合物在50℃搅拌1小时。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)萃取。将有机层真空蒸发，得到粗产物，将其用手性-HPLC纯化，得到标题化合物E52(30mg，0.064mmol，23.49％产率)和E53(30mg，0.064mmol，23.49％产率)，其为白色固体。(手性-HPLC共溶剂:MeOH；柱IC(4.6*250mm，5um)；柱温度39.1；CO2流速2.25；共溶剂流速0.75；共溶剂％25；反压119；总流量3；PDA起始波长214；PDA终止波长359)。E52:LCMS:466[M+H]+。(LCMS条件2)tR＝1.49分钟。手性HPLC:tR＝5.66分钟。(条件：IC(4.6*250mm，5um)；共溶剂:MeOH；共溶剂:25％)。未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.65(d，J＝8.3Hz，1H)，8.38(宽单峰，1H)，7.61(s，1H)，6.96-7.09(m，2H)，6.87(dd，J＝3.3，2.0Hz，1H)，6.26-6.62(m，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，3.95(s，3H)，3.42-3.83(m，3H)，3.35(s，3H)，3.25(t，J＝9.5Hz，1H)，1.40-1.57(m，9H)，1.03(宽单峰，1H)，0.63(dd，J＝8.5，4.8Hz，1H)，0.29(t，J＝4.8Hz，1H)。E53:LCMS:466[M+H]+。tR＝1.49分钟。(LCMS条件2)手性HPLC:tR＝7.89分钟。(条件：IC(4.6*250mm，5um)；共溶剂:MeOH；共溶剂:35％)。未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.65(d，J＝8.3Hz，1H)，8.43(宽单峰，1H)，7.61(s，1H)，6.93-7.14(m，2H)，6.86(dd，J＝3.3，2.0Hz，1H)，6.32-6.56(m，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，3.95(s，3H)，3.53(dd，3H)，3.35(s，3H)，3.25(t，J＝9.4Hz，1H)，1.21-1.57(m，9H)，0.97-1.11(m，1H)，0.63(dd，J＝8.4，4.6Hz，1H)，0.29(t，J＝4.9Hz，1H)。实施例54(R)-(4-((4-(环丙基甲氧基)-5-甲基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2,4-二甲基哌嗪-1-基)甲酮(E54)将(R)-(4-((4-(环丙基甲氧基)-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(2,4-二甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D120制备)(20mg，0.032mmol)、氢氧化钠(2mL，4.00mmol，2M在水中)在异丙醇(2mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E54(5mg，10.76μmol，33.3％产率)，其为白色固体。LCMS:465[M+H]+。tR＝1.582。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.16(宽单峰，1H)，8.55(d，J＝8.0Hz，1H)，7.56(s，1H)，6.92-7.00(m，2H)，6.74(s，1H)，4.29(d，J＝7.0Hz，2H)，3.90(s，3H)，3.69(m，1H)，3.10-3.23(m，1H)，2.56-2.77(m，3H)，2.26(s，3H)，2.15(s，3H)，2.02(dd，J＝11.3，3.5Hz，1H)，1.75-1.91(m，1H)，1.23-1.30(m，4H)，0.49-0.62(m，2H)，0.32-0.43(m，2H)。实施例55(4-((4-(环丙基甲氧基)-5-甲基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(E55)将(4-((4-(环丙基甲氧基)-5-甲基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D1制备21)(30mg，0.050mmol)和氢氧化钠(2mL，4.00mmol，2M在水中)在异丙醇(2mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。将该混合物浓缩并加入2NHCl直至pH＝7。然后将该混合物用EA萃取。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E55(3mg，6.66μmol，13.42％产率)，其为白色固体。LCMS:451[M+H]+。tR＝1.511。(LCMS条件2)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ11.17(宽单峰，1H)，8.58(d，J＝8.3Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.97-7.05(m，1H)，6.76(s，1H)，4.30(d，J＝6.8Hz，2H)，3.92(s，3H)，3.53(宽单峰，4H)，2.33(宽单峰，4H)，2.28(s，3H)，2.20(s，3H)，0.79-0.89(m，1H)，0.53-0.63(m，2H)，0.40(q，J＝4.8Hz，2H)。实施例56(4-((4-乙氧基-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶-6-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E56)将6-氯-4-乙氧基-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶(其可根据D91制备)(180mg，0.906mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(278mg，1.178mmol)、Pd2(dba)3(41.5mg，0.045mmol)、碳酸钾(376mg，2.72mmol)和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(43.2mg，0.091mmol)的溶液在120℃微波下照射1小时。过滤后，将滤液浓缩并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E56，其为白色固体。产率:26.3％。LCMS:399[M+H]+。tR＝2.687。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.62(d，J＝8.3Hz，1H)，7.80(s，1H)，6.89-7.04(m，2H)，4.51(q，J＝6.9Hz，3H)，3.89(s，3H)，3.61(宽单峰，8H)，1.39(t，3H)。实施例57(4-((4-乙氧基-3-甲基-1H-吡唑并-[3,4-d]-嘧啶-6-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E57)将6-氯-4-乙氧基-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(其可根据D92制备)(100mg，0.470mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(111mg，0.470mmol)、Pd2(dba)3(33mg，0.036mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(35mg，0.073mmol)和碳酸钾(195mg，1.411mmol)在2-丁醇(12mL)中的溶液在120℃微波下照射1小时。过滤后，将滤液浓缩并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E57(25mg，0.061mmol，12.89％产率)，其为白色固体。LCMS:413[M+H]+。tR＝2.717。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.57(s，1H)，6.75-7.08(m，2H)，4.32-4.56(m，2H)，3.87(s，3H)，3.60(宽单峰，8H)，2.37(s，3H)，1.37(m，3H)。实施例58(4-((4-(环丙基甲氧基)-1H-吡唑并-[3,4-d]嘧啶-6-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E58)将6-氯-4-(环丙基甲氧基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(其可根据D93制备)(100mg，0.445mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(105mg，0.445mmol)、Pd2(dba)3(20.38mg，0.022mmol)、碳酸钾(185mg，1.335mmol)和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(21.22mg，0.045mmol)在2-丁醇(10mL)中的溶液在120℃微波下照射1小时。过滤后，将滤液浓缩并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E58(20mg，0.047mmol，10.59％产率)，其为白色固体。LCMS:425[M+H]+。tR＝2.911。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，甲醇-d4):δ8.56-8.65(m，1H)，7.83(s，1H)，6.90-7.04(m，2H)，4.22-4.33(m，2H)，4.00(q，J＝7.1Hz，2H)，3.90(s，3H)，3.61(宽单峰，8H)，1.24-1.36(m，1H)，1.14(t，J＝7.1Hz，3H)，0.50-0.62(m，1H)，0.23-0.40(m，2H)。实施例594-乙氧基-2-((2-甲氧基-4-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(E59)向2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(其可根据D94制备)(100mg，0.449mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(26.0mg，0.045mmol)、碳酸钾(124mg，0.898mmol)和Pd2(dba)3(20.57mg，0.022mmol)在2-丁醇(2mL)中加入(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(106mg，0.449mmol)。将该混合物在120℃微波下照射45min。将该反应混合物倾倒至EtOAc(20mL)中并用水(3×30mL)洗涤。将有机层真空蒸发并用制备型-HPLC纯化，得到标题化合物E59(7mg，0.013mmol，2.95％产率)，其为黄色固体。LCMS:423[M+H]+。tR＝1.722。(LCMS条件3)1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ9.14(宽单峰，1H)，8.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.41(s，1H)，6.97-7.10(m，2H)，4.61(q，J＝7.0Hz，2H)，3.95(s，3H)，3.72(宽单峰，8H)，1.52(t，3H)。实施例604-乙氧基-2-((2-异丙氧基-4-(吗啉-4-羰基)-苯基)氨基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-5-甲腈(E60)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(其可根据D94制备)(50mg，0.225mmol)、(4-氨基-3-异丙氧基苯基)(吗啉代)甲酮(其可根据D68制备)(65.3mg，0.247mmol)、碳酸钾(93mg，0.674mmol)、Pd2(dba)3(10.28mg，0.011mmol)和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(10.71mg，0.022mmol)在2-丁醇(5mL)中的溶液在120℃微波下照射1小时。过滤后，将滤液浓缩并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E60(9mg，0.020mmol，8.90％产率)，其为白色固体。LCMS:451[M+H]+。tR＝3.089。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ8.41(d，J＝8.3Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.75(s，1H)，7.02(s，1H)，6.95(d，J＝8.3Hz，1H)，4.60-4.74(m，1H)，4.50(q，J＝7.1Hz，2H)，3.50-3.56(m，8H)，1.35(t，J＝7.0Hz，3H)，1.28(d，J＝6.1Hz，6H)。实施例614-乙氧基-2-((2-异丙氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-苯基)-氨基)-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(E61)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(其可根据D94制备)(100mg，0.449mmol)、(4-氨基-3-异丙氧基苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(其可根据D66制备)(137mg，0.494mmol)、碳酸钾(186mg，1.348mmol)、Pd2(dba)3(20.57mg，0.022mmol)和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(21.41mg，0.045mmol)在2-丁醇(5mL)中的溶液在120℃微波下照射1小时。过滤后，将滤液浓缩并用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E61(16mg，0.035mmol，7.68％产率)，其为白色固体。LCMS:464[M+H]+。tR＝2.506。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ8.49(d，1H)，7.98(s，1H)，7.76(s，1H)，7.04(s，1H)，6.98(d，1H)，4.73(m，1H)，4.55(q，2H)，3.50(m，4H)，2.32(m，4H)，2.19(s，3H)，1.41(t，3H)，1.34(d，6H)。实施例62(4-((4-乙氧基-5-(三氟甲基)-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(E62)在氮气下，将2-氯-4-乙氧基-5-(三氟甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(其可根据D95制备)(50mg，0.188mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮(66.7mg，0.282mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(17.95mg，0.038mmol)、碳酸钾(78mg，0.565mmol)和Pd2(dba)3(17.24mg，0.019mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的溶液在120℃搅拌1小时。冷却至室温后，加入水(30mL)并将该混合物用EA(15mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤然后用Na2SO4干燥。过滤并浓缩后，将该粗产物用硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝4:1)纯化并用MDAP(碱性移动相)进一步纯化，得到标题化合物E62(4.2mg，9.02μmol，4.79％产率)，其为白色固体。LCMS:466[M+H]+。tR＝3.555。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.24(宽单峰，1H)，8.49(d，J＝8.3Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.67(s，1H)，7.08(s，1H)，7.04(d，J＝8.3Hz，1H)，4.51(q，J＝6.9Hz，2H)，3.92(s，3H)，3.61(宽单峰，4H)，3.47-3.57(m，4H)，1.37(t，3H)。实施例634-乙氧基-2-((4-(4-氟哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)-氨基)-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(E63)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-5-甲腈(其可根据D94制备)(180mg，0.809mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(4-氟哌啶-1-基)甲酮((其可根据D74制备)(245mg，0.970mmol)、碳酸钾(335mg，2.426mmol)、Pd2(dba)3(37.0mg，0.040mmol)和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(38.5mg，0.081mmol)在2-丁醇(5mL)中的溶液在120℃微波下照射4小时。过滤后，将滤液浓缩并将该粗产物用反相柱色谱(BiotageSNAP柱，KP-C18-HS120g，5％～95％MeCN/H2O，0.05％氨)纯化，得到标题化合物E63(42mg，0.096mmol，11.85％产率)，其为白色固体。LCMS:466[M+H]+。tR＝3.315.(LCMS条件1)1HNMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.29-12.63(m，1H)，8.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.85(s，1H)，7.01(d，J＝1.5Hz，1H)，6.96(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，4.73-4.97(m，1H)，4.48(q，J＝7.1Hz，2H)，3.85(s，3H)，3.30-3.63(m，4H)，1.57-1.95(m，4H)，1.34(t，J＝7.0Hz，3H)。实施例64和65对映异构体1:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)甲酮(E64)对映异构体2:(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)-(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己-3-基)甲酮(E65)将2-氯-4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶(其可根据D1制备)(103mg，0.521mmol)、(4-氨基-3-甲氧基苯基)(1-(甲氧基甲基)-3-氮杂二环-[3.1.0]己-3-基)甲酮(其可根据D134制备)(120mg，0.434mmol)、碳酸钾(180mg，1.303mmol)、Pd2(dba)3(19.88mg，0.022mmol)和xantphos(21.53mg，0.045mmol)在2-丁醇(6mL)中的溶液在120℃微波下照射45min。过滤后，将滤液浓缩并将该粗产物用MDAP(碱性移动相)纯化，得到外消旋产物，将其用手性-HPLC进一步纯化，得到标题化合物E64(11mg)和E65(7mg)，其为黄色固体。(手性-HPLC：共溶剂:MeOH；柱AD-H(4.6*250mm，5um)；移动相:正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20；流速：1.0ml/min；温度:40；波长:214nm&254nm)E64:LCMS:438[M+H]+。tR＝1.32分钟。(LCMS条件3)手性HPLC:tR＝4.44分钟。(条件：柱AD-H(4.6*250mm，5um)；移动相:正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20)。未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.64(d，J＝8.3Hz，1H)，8.42(宽单峰，1H)，7.64(s，1H)，7.08(s，2H)，6.87(dd，J＝2.1，3.4Hz，1H)，6.40-6.54(m，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，4.11-4.35(m，1H)，3.95(s，3H)，3.61-3.84(m，2H)，3.22-3.60(m，4H)，1.53-1.37(m，4H)，0.68-0.83(m，1H)，0.50(t，J＝4.4Hz，1H)。E65:LCMS:438[M+H]+。tR＝1.32分钟。(LCMS条件3)手性HPLC:tR＝6.15分钟。(条件：柱AD-H(4.6*250mm，5um)；移动相:正己烷(0.1％DEA):EtOH(0.1％DEA)＝80:20)。未知单一异构体的绝对立体化学1HNMR(400MHz，氯仿-d):δ8.64(d，J＝8.5Hz，1H)，8.43(宽单峰，1H)，7.63(s，1H)，7.04-7.13(m，2H)，6.87(dd，J＝2.3，3.3Hz，1H)，6.42-6.51(m，1H)，4.58(q，J＝7.0Hz，2H)，4.15-4.36(m，1H)，3.94(s，3H)，3.28-3.82(m，8H)，1.36-1.53(m，4H)，0.67-0.85(m，1H)，0.50(t，J＝4.4Hz，1H)。实施例66(1S,3S,5S)-2-(4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰基)-2-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-甲腈(E66)向4-((4-乙氧基-7H-吡咯并-[2,3-d]-嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(其可根据D129制备)(186mg，0.567mmol)、HATU(237mg，0.623mmol)和DIPEA(0.297mL，1.700mmol)在DMF(5mL)中的的溶液中加入(1S,3S,5S)-2-氮杂二环-[3.1.0]-己-3-甲腈盐酸盐(其可根据D136制备)(82mg，0.567mmol)。将该混合物在室温搅拌5小时。将该溶液用EA稀释，用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将该粗产物用MDAP(碱性移动相)纯化，得到标题化合物E66(82.7mg，0.190mmol，33.5％产率)，其为灰白色固体。LCMS:419[M+H]+。tR＝3.307分钟。(LCMS条件1)1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.63(宽单峰，1H)，8.73(d，J＝8.3Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.30-7.47(m，2H)，7.02-7.10(m，1H)，6.35(dd，J＝1.8，3.3Hz，1H)，5.34(宽单峰，1H)，4.47-4.59(m，2H)，3.98(s，3H)，3.62(宽单峰，1H)，2.60-2.72(m，1H)，2.27(dd，J＝2.9，13.7Hz，1H)，1.87(dd，J＝5.7，7.9Hz，1H)，1.41(t，J＝7.1Hz，3H)，1.13-1.05(m，1H)，0.89-0.98(m，1H)。F.生物学数据如上所述，本发明化合物是LRRK2激酶抑制剂并用于治疗由LRRK2介导的疾病。本发明化合物的生物学活性可通过使用用于确定作为LRRK2激酶抑制剂的候选化合物的活性的任意合适的测试方法以及组织和体内模型进行确定。6His-Tev-LRRK2(1326-2527)的生产LRRK2cDNA编码的残基1326-2527获自Dundee大学(描述于M.Jaleel等人，2007，BiochemJ，405：407-417)。将该基因片段使用BamHI和NotI限制酶切位点亚克隆至pFB-HTb(Invitrogen)中。将所述LRRK2质粒根据Invitrogen描述的BAC-到-BAC方案重组到杆状病毒基因组中。转染到草地夜蛾(Spodopterafrugiperda)(Sf9)昆虫细胞是使用Cellfectin(Invitrogen)，根据制造商的生产P1和P2杆状病毒原液(stock)的方案完成的。在27℃，80rpm的摇瓶中，将Sf9细胞在HyCloneSFX(ThermoScientific)生长培养基中进行生长直至足够量接种生物反应器。在27℃，50％溶解氧和22摇动/分钟的搅动速率、10度摇动角度、200ml/min空气，以及大约6×e6细胞/ml的细胞浓度下，该细胞在20升工作体积的Wave生物反应器(GEHealthcare)中生长。将该细胞用P2杆状病毒，以3的感染复数(MOI)进行感染。该培养持续48小时表达相。通过使用SorvallRC3CPlus离心机以2500g离心20分钟将所感染的细胞从生长培养基中移出。将该细胞沉淀物立即冷冻并用于随后的纯化。用800ml裂解缓冲液/缓冲液A(50mmTris-HClpH8.5，300mMNaCl，1mmDTT，10％甘油，1ml/Lcalbiochem完全蛋白酶抑制剂混合物(cocktail)和全能核酸酶(benzonase)(50ul/800ml))将260g沉淀物在27℃水浴中解冻，然后使用每100ml20次击打(stroke)将所述沉淀物在冰上进行杜恩斯均质化。将该悬浮液填充在冰中并使用3/4”探针以50％振幅超声3min，10秒开/关。然后将悬浮液在4℃以100,000g离心90分钟。将该裂解液(700ml)从该不溶性沉淀物中滗出，并通过颠倒式(endoverend)混合，用10mlHis结合NiNTA树脂在4℃接触3h。将该树脂通过在4℃处以3000g离心5分钟回收并装载到XK16柱上。然后将该柱用10个柱体积的缓冲液A、10个柱体积的缓冲液B(缓冲液A+1MNaCl)和10个柱体积的缓冲液C(缓冲液A+20mM咪唑)洗涤。然后将该柱用15个柱体积的缓冲液D(缓冲液A+300mM咪唑)洗脱，收集到2ml的级分。全部洗涤和洗脱均以4ml/min进行。将通过SDS-PAGE鉴定为含有感兴趣蛋白的级分汇集并直接装载至320mlSECSuperdex200pg柱上，将其用缓冲液E(50mMTris-HClpH8.5，300mMNaCl，10％甘油，1mMDTT)预平衡。填充该柱并用1.2个柱体积的缓冲液E以2ml/min洗脱，收集到2ml级分。对通过SDS-PAGE鉴定为含有感兴趣蛋白的级分的活性进行测试。生物素-较长LRRKtide的生产在ACT357MPS自动肽合成器上，使用FMOC固相肽合成，以0.2mM规格组装该肽(生物素-RLGRDKYKTLRQIRQGNTKQR-OH)。所得粗制肽是使用95:2.5:2.5的三氟乙酸:三异丙基硅烷:水的混合物从该树脂上断裂的。将该粗制断裂肽用反相HPLC纯化，用5-35％梯度的在0.1％三氟乙酸/水中的0.1％三氟乙酸/乙腈洗脱。重组LRRK2酶肽底物TR-FRET测试用于LRRK2抑制的测试是基于使用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定检测该肽‘较长LRRKtide’(生物素-RLGRDKYKTLRQIRQGNTKQR-OH)的磷酸化。其使用抗体标记的铕螯合物供体，W-1024(Eu)和链亲和素-SurelightAPC受体(APC)。当非常接近时，Eu在330nm处的激发导致能量转移至APC，产生在665nm处发光。分析方案1.将10mM测试化合物溶于100％DMSO中并以1:4连续稀释。然后将100nL加至384孔低容积黑色板中，不包括第6和18列。将100nLDMSO加至作为对照孔的第6和18列。测试稀释提供测试化合物166.67μM的最高最终测试浓度。2.使用多点组合式分配器将在测试缓冲液(50mMHepes(pH7.2)，10mMMgCl2，150mMNaCl，5％甘油，0.0025％tritonX-100和1mMDTT)中的含有120nM纯化的重组6HIS-Tev-LRRK2(1326-2527)的3uL‘酶溶液’加至所有孔中，除了第18列，得到60nM最终测试浓度的LRRK2酶。使用多点组合式分配器仅将3uL测试缓冲液加至第18列，作为100％抑制的无酶对照。第6列(酶加上DMSO)得到0％抑制。然后将测试板在室温培养30分钟。3.使用多点组合式分配器将含有2uM生物素-较长LRRKtide肽底物和20uMATP的3uL‘底物溶液’加至该板的全部孔中，得到1uM最终测试浓度的生物素-较长LRRKtide和10uMATP。然后将测试板在室温培养2小时。(培养可根据与不同批次酶的反应速率和线性而变化)。4.使用多点组合式分配器将在‘停止’测试缓冲液(50mMHepes(pH7.2)，60mMEDTA，10mMMgCl2，150mMNaCl，5％甘油和0.0025％tritonX)中的含有200nM链亲和素APC、2nMEu-W1024标记的抗-兔IgG抗体和1:500稀释的磷酸化埃兹蛋白(Thr567)/根蛋白(Thr564)/膜突蛋白(Thr558)多克隆抗体的6uL‘测试溶液’加至该板的所有孔中。然后将测试板在室温再培养2小时，然后在合适的板读取器上进行读数(激发330nm，发射620nm(Eu)和665nm(APC))。使用ActivityBase软件(IDBS)分析数据。依据具体的批次情况确定试剂的稀释度和浓度。重组细胞LRRK2AlphaScreen测试为了确定在细胞中化合物抑制LRRK2激酶活性的活性，采用观测到的LRRK2Ser935磷酸化的LRRK2激酶-依赖性调节(Dzamko等人，2010，Biochem.J.430：405-413)以开发在人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中的LRRK2Ser935磷酸化的定量的基于384孔板的免疫测定，所述细胞系被设计用以过表达重组全长LRRK2蛋白。表达全长重组LRRK2的BacMam病毒购自Invitrogen并通过在补充有3％胎牛血清的Sf-900IIISFM培养基中以0.3的MOI培养SF-9细胞4-5天进行扩增。然后将感染的细胞培养物以2000g离心20分钟，通过抗-gp64菌斑试验确定病毒上清液滴度并在4℃储存。通过标准方法(PerkinElmer)将亲和纯化的抗-磷酸化LRRK2Ser935羊多克隆抗体(Dzamko等人，2010，Biochem.J.430：405-413)进行生物素化。抗-LRRK2兔多克隆抗体购自NovusBiologicals。AlphaScreen蛋白AIgG试剂盒(包含受体和供体珠粒)购自PerkinElmer。SH-SY5Y细胞在含10％透析的胎牛血清的DMEM/F12培养基中生长并通过用0.5％胰蛋白酶-EDTA在37℃处理5分钟进行收集，然后以1000rpm离心4分钟。将该细胞沉淀物以200,000细胞/ml再悬于Opti-MEM减血清培养基(Invitrogen)中并与BacMamLRRK2病毒以MOI＝50进行混合。然后将50μl细胞溶液分散于384孔板的各孔中并在37℃，5％CO2培养24小时。将连续稀释的测试化合物在Opti-MEM减血清培养基(Invitrogen)中制备并将5.6ul从化合物板转移至细胞测试板以实现10uM的最高最终测试浓度。在一些孔中使用DMSO作为对照。将细胞在37℃，5％CO2培养60分钟。然后除去该培养基并将细胞通过加入20ul细胞裂解缓冲液(CellSignalingTechnology)裂解并在4℃培养20分钟。然后将10ul的抗体/受体珠粒混合物[(1/1000生物素化-pS935LRRK2抗体，1/1000总-LRRK2抗体，1/100受体珠粒在AlphaScreen检测缓冲液(25mMHepes(pH7.4)，0.5％TritonX-100，1mg/ml葡聚糖500和0.1％BSA)中]加至各孔并将板在环境温度避光培养2小时。然后将10μl的供体珠粒溶液(1/33.3供体珠粒在AlphaScreen检测缓冲液中)加至各孔。在环境温度避光培养额外的2小时后，将该板在EnVisionTM板读取器上在发射520-620nm和激发680nm处进行读取。剂量响应曲线数据基于S形剂量-响应模型。药理学数据将实施例E1-E66的化合物在重组LRRK2酶肽底物TR-FRET测试和/或重组细胞LRRK2alphaScreen测试中进行测定。在其中一个或这两个测试中发现实施例E1-E66的化合物抑制LRRK2激酶活性。各化合物的pIC50值在至少一个试验中进行报告或报告为多个试验的平均值。应理解，本文中所描述的数据根据实施试验的人员所用的具体条件和步骤可能具有合理的变化。实施例E1-E66的化合物在重组细胞LRRK2alphaScreen测试中进行测定并呈现出pIC50≥5.0。实施例E4、E6、E9、E13、E15、E18、E27、E30-E34、E40和E59的化合物呈现出pIC50≥7.0。实施例E1-E31、E33-E36、E39-E44、E46、E47、E51-E53、E56、E61、E63、E64和E66的化合物在重组LRRK2酶肽底物TR-FRET测试中进行测定并呈现出pIC50≥5.0。实施例E2-E9、E13、E20、E24、E25、E27、E29、E31、E35、E36、E39-E42、E44、E46、E52、E53、E64和E66的化合物呈现出≥8.0。例如，以下实施例在重组细胞LRRK2alphaScreen测试和重组LRRK2酶肽底物TR-FRET测试中的pIC50值是：