1.一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)工程菌的活化和表达:取Stoffel片段Taq DNA聚合酶工程菌接种在LB培养基中,于37℃培养过夜;
2)按照比例,取菌液接种于LB培养基中,于37℃继续培养至OD600为0.4,加入IPTG至终浓度为0.5mM,继续培养12-16小时;
3)于4000g离心5min,收集菌体,用4×Taq storage buffer重悬菌体,菌体被置于沸水浴中,煮沸裂解;
4)裂解后在4℃下16000g离心10min除去细胞残体和变性后的蛋白,上清液采用水相/有机磷酸系统处理后备用。
2.根据权利要求1所述的一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于:所述的LB培养基中含有100μg/ml的Kan。
3.根据权利要求1所述的一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于:所述的菌液与LB培养基按照体积比1:100接种。
4.根据权利要求1所述的一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于:所述的Taq storage buffer具体为:20mM Tris-H Cl pH 8.0,10mM DTT,0.1mM EDTA,100mM KCl,0.5%Non idet P40,0.5%Tween 20。
5.根据权利要求1所述的一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于:所述的沸水浴加热条件为:每4min一个循环,共两个循环,加热8min。
6.根据权利要求1所述的一种快速纯化Stoffel片段Taq酶的方法,其特征在于:步骤(4)所述的上清液处理方法具体为:加入10%无菌平衡磷酸二氢钾混匀,加等体积的无水乙醇混匀,2000g离心2min,在含有Taq酶的上层有机相中加入等体积无菌甘油,贮于-20℃。