一种用于检测HLA‑B*1502等位基因的引物组及试剂盒的制作方法

技术特征：

1.一种用于检测HLA-B*1502等位基因的PCR扩增引物组和Taqman探针，其特征在于，所述的PCR扩增引物组和Taqman探针包含两对根据HLA-B*1502特异性序列设计的引物及相应两条探针，序列如下：

名称序列引物15’-CGAGTCCGAGGATGGC-3’引物25’-TCTGTGTGTTGGTCTTG-3’探针15’-TGTTGCGGTCCCAATAC-3’引物35’-CATCATCCAGAGGATGT-3’引物45’-TGCGGTCGTATGAGGA-3’探针25’-TACACGCGGATGAGGC-3’

所述的PCR扩增引物组和Taqman探针还包含一对用于筛除HLA-B*1502假阳性的引物及相应一条探针，序列如下：

名称序列引物55’-CCGGAACACACAGATCT-3’引物65’-CTCTGGTTGTAGTAGCCG-3’探针35’-CGATCGGCAGGTTCTCT-3’

所述的PCR扩增引物组和Taqman探针还包含一对内对照引物及相应一条探针，用于监控仪器故障、试剂因素、聚合酶活性或样本中的抑制物等因素造成的假阴性结果，序列如下：

2.根据权利要求1所述的PCR扩增引物组和Taqman探针，其特征在于，所述的Taqman探针5’端的报告基团为FAM、HEX或VIC，3’端的淬灭基团为BHQ-1。

3.如权利要求1或2所述PCR扩增引物组和Taqman探针在制备检测HLA-B*1502等位基因的试剂盒中的应用。

4.含有如权利要求1或2所述用于检测HLA-B*1502等位基因的PCR扩增引物组和Taqman探针的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括PCR反应试剂。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的PCR反应试剂包括PCR反应混合液和Taq酶。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的PCR反应混合液包括：0.18mM脱氧核苷酸(dNTP)、1.8mM氯化镁(MgCl2)、60.3mM氯化钾(KCl)，18.9mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)、甘油(glycerol)0.6％(v/v)、二甲基亚砜(DMSO)5％(v/v)和甲酰胺2.5％(v/v)，DMSO和甲酰胺同时作为PCR反应增强剂及稳定剂。