野黄芩素衍生物及其制备方法和应用与流程

本发明属于药物合成领域，涉及野黄芩素衍生物及其制备方法和用途，具体涉及一类A环具有苯并二氧六环结构，B环4’位连接脂溶性基团和水溶性基团的野黄芩素衍生物及其制备方法和应用。

背景技术：

恶性肿瘤又称为癌症，癌症目前已成为人类生命的第二大杀手，仅位居心血管疾病之后，尽管人类平均寿命延长，恶性肿瘤对人类健康的威胁日益明显，世界的癌症发病率每年都在递增，全世界每年约760万人死于癌症，有1010余万人患恶性肿瘤，癌症现已成为人类死亡的常见原因之一。肿瘤的化学预防是降低癌症发病率的最直接方法之一。虽然市场上已有很多抗癌药物，但是许多由于其毒副作用大而限制了在临床上的使用。因此研发出活性更高，而且毒副作用更小的抗癌药物已成为当务之急。

野黄芩苷(Scutellarin)是从菊科飞蓬草属植物短亭飞蓬[Erigeron breviscapus(vant)Hand Mass]的干燥全草中提取得到的黄酮类化合物。野黄芩苷虽然在临床应用中取得了良好的效果，但由于野黄芩苷存在溶解性差、生物利用度低、体内代谢快等缺陷，使其在制剂及临床应用上受到限制。对野黄芩苷的体内代谢研究发现，口服野黄芩苷后在体内的吸收形式为其苷元野黄芩素，其结构式如式II所示。研究表明野黄芩素可通过抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞侵袭和转移以及诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。基于以上背景，本发明合成了一系列A环具有苯并二氧六环结构，B环4’位连接脂溶性基团和水溶性基团的野黄芩素衍生物，并进行了体外抗肿瘤活性研究。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一系列野黄芩素衍生物，并对这些化合物进行抗肿瘤活性测试，从而提供具有一定药用价值的野黄芩素衍生物。

本发明的目的可通过以下措施达到：

如式I所示的野黄芩素衍生物：

其中，R选自

R₁选自苯基、单取代或多取代苯基、含1-2个N的5-6元杂环基团；

R₂选自含1-2个N的5-6元杂环基团；

R₃选自C₁-C₆烷基、苯基、单取代或多取代苯基；

R₄、R₅选自C₁-C₆烷基；

含1-2个N的5-6元杂环基团选自吡咯烷基、吗啉基、4-羟基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的单取代或多取代苯基的取代基选自C₁-C₆烷基、烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基选自C₁-C₆烷基、苯基、卤素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

优选的，R₁选自苯基、单取代或多取代苯基、含1-2个N的5-6元杂环基团；R₂选自含1-2个N的5-6元杂环基团；

其中，R₃选自C₁-C₅烷基、单取代或多取代苯基；

R₄、R₅选自C₁-C₅烷基；

含1-2个N的5-6元杂环基团选自吡咯烷基、吗啉基、4-羟基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的单取代或多取代苯基的取代基选自C₁-C₅烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基选自C₁-C₅烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

进一步优选的，R₁选自苯基、单取代或多取代苯基、含1-2个N的5-6元杂环基团；R₂选自含1-2个N的5-6元杂环基团；

其中，R₃选自C₁-C₄烷基、单取代或多取代苯基；

R₄、R₅选自C₁-C₄烷基；

含1-2个N的5-6元杂环基团选自吡咯烷基、吗啉基、4-羟基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的单取代或多取代苯基的取代基选自C₁-C₄烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基选自C₁-C₄烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

本发明中，所述的单取代或多取代苯基的取代基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、异丁基、甲氧基、氟、氯、溴；选自乙胺基、丙胺基、异丙胺基、丁胺基、对异丙基苯胺基；选自二乙胺基、乙二醇胺基；含1-2个N的5-6元杂环基团选自吡咯烷基、吗啉基、4-羟基哌啶基、N-甲基哌嗪基、N-乙基哌嗪基、N-羟乙基哌嗪基、1-(4-吡啶基)哌嗪基、1-(2-吡啶基)哌嗪基、1-(2-嘧啶基)哌嗪基、1-(4-氟苯基)哌嗪基、1-(2-氟苯基)哌嗪基。

本发明中所述的野黄芩素衍生物具体选自：10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟-7-(4’-(2-氧代-2-对异丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-邻氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吗啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-异丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吗啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-羟乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(4-羟基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

本发明的另一个目的在于提供野黄芩素衍生物的制备方法。

R为时，制备方法为：(1)野黄芩素和碳酸钾溶于N，N-二甲基甲酰胺中，与1，2-二溴乙烷加热反应生成10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸钾和碘化钾，充分搅拌30分钟后加入室温或加热反应得到野黄芩素衍生物；其中，步骤(1)中所述的野黄芩素、1，2-二溴乙烷、碳酸钾的摩尔比为1∶1～2∶1～2，优选为1∶1.5∶1.5；步骤(2)中所述的10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、碳酸钾、碘化钾的摩尔比为1∶1～2∶1～2∶1，优选为1∶1.2∶2∶1。

R为时，制备方法为：(1)野黄芩素和碳酸钾溶于N，N-二甲基甲酰胺中，与1，2-二溴乙烷加热反应生成10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸钾、碘化钾，充分搅拌30分钟后加入氯代环氧丙烷，加热反应得到10-羟基-7-(4’-环氧丙烷基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(3)10-羟基-7-(4’-环氧丙烷基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮和R₁H溶于无水乙醇中，加热回流反应得到野黄芩素衍生物；其中，步骤(2)中所述的10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、氯代环氧丙烷、碳酸钾、碘化钾的摩尔比为1∶1～2∶1～2∶1，优选为1∶1.2∶2∶1；步骤(3)中所述的10-羟基-7-(4’-环氧丙烷基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、R₁H的摩尔比为1∶1～2，优选为1∶1.2。

其中，R₁选自苯基、单取代或多取代苯基、含1-2个N的5-6元杂环基团；

R₂选自含1-2个N的5-6元杂环基团；

R₃选自C₁-C₆烷基、苯基、单取代或多取代苯基；

R₄、R₅选自C₁-C₆烷基；

含1-2个N的5-6元杂环基团选自吡咯烷基、吗啉基、4-羟基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的单取代或多取代苯基的取代基选自C₁-C₆烷基、烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基选自C₁-C₆烷基、苯基、卤素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

发明人对合成的野黄芩素衍生物进行体外三种癌细胞：肺癌A549细胞、黑色素瘤B16F10细胞和乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒实验测试，与野黄芩素相比，表现出不同程度的细胞毒活性，其中大多数化合物对黑色素瘤B16F10细胞具有最强的抗肿瘤活性，表明这类化合物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖的作用。因此，本发明的另一个目的是提供所述的野黄芩素衍生物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。所述的肿瘤为肺癌、黑色素瘤、乳腺癌。

本发明的有益效果：

本发明以野黄芩素为起始原料，合成了一系列A环具有苯并二氧六环结构，B环4’位连接脂溶性和水溶性基团的野黄芩素衍生物，该合成方法简单，具有较好的可操作性和反应收率。这些合成的野黄芩素衍生物在抗肿瘤方面表现出不同程度的活性，对于抗肿瘤药物的开发具有重要意义。

具体实施方式

结合具体实例对本发明的技术方案作进一步的说明，但本发明并不限于以下实例。

实施例1 10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物2)的制备

将野黄芩素(286.24mg，1mmol)溶于5mL无水DMF中，室温加入碳酸钾(207.3mg，1.5mmol)和二溴乙烷(129.87μL，1.5mmol)，N₂保护下110℃反应2h。反应结束后，反应液倾入40mL水中，有大量黄色固体析出，抽滤，滤饼用甲醇重结晶，得黄色粉末90mg，产率29％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-羟基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：335.1[M+Na]⁺，313.1[M+H]⁺，311.1[M-H]^-，相对分子质量为312。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ13.03(s，1H，10-OH)，10.39(s，1H，4’-OH)，7.93(d，2H，J＝8.6Hz，2’，6’-OH)，6.91(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-OH)，6.81(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(each t，2×2H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例2 10-羟基-7-(4’-环氧丙烷基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物3)的制备

化合物2(120.00mg，0.4mmol)溶于4mL DMF中，依次加入碳酸钾(110.56mg，0.8mmol)，碘化钾(66.40mg，0.4mmol)，室温反应30min后加入氯代环氧丙烷(37.63μL，0.48mmol)，85℃反应5h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷，得黄色粉末56.00mg，产率38.00％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-环氧丙烷基苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：391.1[M+Na]⁺，369.1[M+H]⁺，367.1[M-H]^-，相对分子质量为368。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.96(s，1H，10-OH)，7.86(d，2H，J＝8.9Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.9Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.40(t，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.35(d，1H，overlap，J＝2.8Hz，3”a-H)，4.03(dd，1H，J＝11.0，5.8Hz，3”b-H)，3.42(m，1H，2”-H)，2.97(t，1H，J＝4.5Hz，1”α-H)，2.82(dd，1H，J＝4.7，2.6Hz，1”β-H)。

实施例3 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物4)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶20)，得淡黄色粉末56.00mg，产率50.45％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：469.1[M+K]⁺，431.1[M+H]⁺，429.1[M-H]^-，相对分子质量为430。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝7.5Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.67(dd，1H，J＝14.9，7.5Hz，4”-H)，7.55(dd，2H，J＝14.9，7.5Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.41(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例4 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物5)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对甲氧基苯乙酮(66.31mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末59.12mg，产率49.43％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.2[M+Na]⁺，461.2[M+H]⁺，459.2[M-H]^-，相对分子质量为460。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，8.02(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.84(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.6Hz，3”，5”-H)，7.03(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.92(s，3H，-OCH₃)。

实施例5 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物6)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末48.70mg，产率41.81％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：449.1[M+H]⁺，相对分子质量为448。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，5-OH)，8.08(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.23(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，3”，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例6 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物7)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对氯苯乙酮(67.55mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶200)，得淡黄色粉末54.86mg，产率45.47％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：487.9[M+Na]⁺，465.1[M+H]⁺，463.1[M-H]^-，相对分子质量为464。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.98(d，2H，J＝8.4Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝8.4Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例7 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物8)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对溴苯乙酮(81.18mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黄色粉末43.56mg，产率32.92％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：508.0[M-H]^-，相对分子质量为509。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.98(d，2H，J＝8.2Hz，2’，6’-H)，7.82(d，2H，J＝8.2Hz，3”，5”-H)，7.17(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-H)，6.90(s，1H，11-H)，6.76(s，1H，8-H)，5.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.34(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例8 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物9)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对异丁基苯乙酮(74.40mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末54.02mg，产率42.75％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：509.2[M+Na]⁺，487.2[M+H]⁺，485.2[M-H]^-，相对分子质量为486。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.94(d，2H，J＝8.0Hz，2”，6”-H)，7.81(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.31(d，2H，J＝8.0Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.57(d，2H，J＝7.0Hz，-CH₂CH(CH₃)₂)，1.93(m，1H，-CH₂CH(CH₃)₂)，0.93(d，2×3H，-CH₂CH(CH₃)₂)。

实施例9 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物10)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对异丙基苯乙酮(70.06mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末50.79mg，产率41.19％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：473.0[M-H]^-，相对分子质量为474。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，7.97(d，2H，J＝8.7Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝9.0Hz，2’，6’-H)，7.40(dd，2H，J＝18.6，8.7Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝9.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.01(m，1H，4-CH(CH₃)₂)，1.31(d，2×3H，4-CH(CH₃)₂)。

实施例10 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物11)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代对甲基苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末50.21mg，产率43.49％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.0[M+Na]⁺，443.1[M-H]^-，相对分子质量为444。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.92(d，2H，J＝7.3Hz，2”，6”-H)，7.82(d，2H，J＝7.9Hz，2’，6’-H)，7.34(d，2H，J＝7.3Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝7.9Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.37(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.46(s，3H，-CH₃)。

实施例11 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-邻氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物12)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代邻氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黄色粉末45.01mg，产率为38.64％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-邻氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.1[M+Na]⁺，449.1[M+H]⁺，相对分子质量为448。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.95，7.75，7.41(m，4H，3”，4”，5”，6”-H)，7.14(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.53(s，2H，-OCH₂CO-)，4.35(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

实施例12 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物13)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-溴代-3’，4’-二甲氧基苯乙酮(75.63mg，0.31mmol)，室温反应12h。待反应结束后，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用硅胶柱色谱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黄色粉末49.62mg，产率为38.95％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：513.1[M+Na]⁺，491.1[M+H]⁺，相对分子质量为490。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.67(d，1H，J＝8.1Hz，6”-H)，7.58(s，1H，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.95(d，1H，J＝8.1Hz，2”-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.99(s，3H，-OCH₃)，3.97(s，3H，-OCH₃)。

实施例13 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物14)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入1-(2-氯乙酰基)吡咯烷(45.59mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得黄色粉末46.07mg，产率41.89％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，424.1[M+H]⁺，422.1[M-H]^-，相对分子质量为423。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.83(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.55(m，4H，-N(CH₂)₂-)，2.01(m，2H，-CH₂-)，1.89(m，2H，-CH₂-)。

实施例14 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吗啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物15)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入1-(2-氯乙酰基)吗啉(50.54mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得黄色粉末45.73mg，产率40.07％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-吗啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，440.1[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相对分子质量为439。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.80(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.68(m，8H，-N(CH₂)₂-，-O(CH₂)₂-)。

实施例15 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物16)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N，N-二乙基-2-氯乙酰胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得黄色粉末39.23mg，产率35.50％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：464.1[M+K]⁺，448.1[M+Na]⁺，426.1[M+H]⁺，424.1[M-H]^-，相对分子质量为425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.82(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，4.78(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.41(q，4H，-(CH₃CH₂)₂N-)，1.18(t，6H，-(CH₃CH₂)₂N-)。

实施例16 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物17)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-氯-1-(4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.11mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末49.65mg，产率37.08％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：516.2[M+H]⁺，相对分子质量为515。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.20(s，1H，3”-H)，7.83(d，2H，J＝7.0Hz，2’，6’-H)，7.52(dd，1H，J＝15.0，7.5Hz，5”-H)，7.09(d，2H，J＝7.0Hz，3’，5’-H)，6.68(dd，2H，J＝15.0，7.5Hz，4”，6”-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，4.58(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.76(m，2H，-NCH₂-)，3.72(m，2H，-NCH₂-)，3.65(m，2H，-NCH₂-)，3.53(m，2H，-NCH₂-)。

实施例17 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物18)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-氯-1-(4-(2-嘧啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.42mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末52.89mg，产率39.42％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.1[M+K]⁺，539.1[M+Na]⁺，517.2[M+H]⁺，515.2[M-H]^-，相对分子质量为516。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，8.35(d，2H，J＝4.7Hz，3”，5”-H)，7.86(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，4”-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.86(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.87(m，2H，-NCH₂-)，3.85(m，2H，-NCH₂-)，3.73(m，2H，-NCH₂-)，3.67(m，2H，-NCH₂-)。

实施例18 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物19)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-氯-1-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末51.32mg，产率37.10％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相对分子质量为532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，7.05(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.84(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.83(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

实施例19 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物20)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入2-氯-1-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末54.56mg，产率39.44％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相对分子质量为532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.08(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.95(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.85(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.82(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

实施例20 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并

[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物21)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N-(2-氯乙酰基)-4-异丙基苯胺(65.43mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末58.33mg，产率46.07％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-对异丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：510.2[M+Na]⁺，m/z 488.2[M+H]⁺，m/z 486.2[M-H]^-，相对分子质量为487。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，8.16(brs，1H，-NH-)，7.92(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝6.0Hz，2”’，6”’-H)，7.25(d，2H，J＝6.0Hz，3”’，5”’-H)，7.14(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.61(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.71(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.92(m，1H，-CH(CH₃)₂)，1.26(d，6H，-CH(CH₃)₂)。

实施例21 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物22)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N-(2-氯乙酰基)乙胺(37.52mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末53.09mg，产率51.43％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：420.1[M+Na]⁺，398.1[M+H]⁺，396.1[M-H]^-，相对分子质量为397。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.90(s，1H，10-OH)，7.87(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.56(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.43(q，2H，-NHCH₂CH₃)，1.23(t，3H，-NHCH₂CH₃)。

实施例22 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物23)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N-(2-氯乙酰基)正丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末53.14mg，产率49.73％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，412.1[M+H]⁺，410.1[M-H]^-，相对分子质量为411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，4.59(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，1.60(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，0.96(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₃)。

实施例23 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-异丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物24)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N-(2-氯乙酰基)异丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末52.30mg，产率48.94％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-异丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，410.1[M-H]^-，相对分子质量为411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，6.35(brs，1H，-NH-)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.24(s，1H，-NHCH(CH₃)₂-)，1.24(d，6H，-NHCH(CH₃)₂)。

实施例24 10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物25)的制备

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL无水DMF中，依次加入碳酸钾(70.87mg，0.51mmol)，碘化钾(43.16mg，0.26mmol)，室温反应30min后加入N-(2-氯乙酰基)正丁胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反应6h。反应结束后冷至室温，反应液用40mL乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗3次，每次20mL，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，产物用制备TLC纯化得淡黄色粉末56.19mg，产率50.85％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：448.1[M+Na]⁺，426.2[M+H]⁺，424.2[M-H]^-，相对分子质量为425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.87(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.03(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(brs，1H，-NH-)，6.53(s，2H，8，11-H)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.37(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.54(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，0.94(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)。

实施例25 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物26)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和吡咯烷(15.88μL，0.19mmol)溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末35.00mg，产率49.83％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：440.2[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相对分子质量为439。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.04(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.51(brs，1H，2”-OH)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，2H，3”-H)，3.04(m，1H，2”-H)，3.10(t，1H，J＝6.85Hz，1”α-H)，2.94(m，5H，1”β-H and-N(CH₂)₂-)，1.82(m，4H，-CH₂CH₂-)。

实施例26 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吗啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物27)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和吗啉(16.54μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末42.50mg，产率58.38％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-吗啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：494.2[M+K]⁺，478.2[M+Na]⁺，456.2[M+H]⁺，454.2[M-H]^-，相对分子质量为455。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，5.01(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.57(t，4H，-CH₂OCH₂-)，2.44(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例27 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物28)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和二乙胺(13.89μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末44.47mg，产率63.02％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：442.2[M+H]⁺，相对分子质量为441。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.05(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.80(s，1H，11-H)，6.78(s，1H，8-H)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.62(s，4H，-N(CH₂CH₃)₂)，0.99(t，6H，-N(CH₂CH₃)₂)。

实施例28 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(4-羟基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物29)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和4-羟基哌啶(19.21μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末43.20mg，产率57.57％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(4-羟基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：492.3[M+Na]⁺，470.3[M+H]⁺，468.2[M-H]^-，相对分子质量为469。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，7.99(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.94(brs，1H，2”-OH)，4.58(brs，1H，-CHOH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.06(m，1H，2”-H)，3.96(m，2H，3”-H)，3.42(m，1H，-CH₂CH-)，2.42(m，6H，3×-NCH₂-)，1.58(m，4H，-CH₂CH(OH)CH₂-)。

实施例29 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物30)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-甲基哌嗪(19.02μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末42.82mg，产率56.18％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：491.2[M+Na]⁺，469.2[M+H]⁺，467.2[M-H]^-，相对分子质量为468。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.72(s，1H，8-H)，4.91(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.98(m，2H，3”-H)，2.30(m，10H，5×-NCH₂-)，2.13(s，3H，-NCH₃)。

实施例30 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物31)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-乙基哌嗪(21.68μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末42.21mg，产率54.73％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.3[M+H]⁺，481.2[M-H]^-，相对分子质量为482。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.86(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.37(m，10H，5×-NCH₂-)，1.88(q，2H，-CH₂CH₃)，0.97(t，3H，-CH₂CH₃)。

实施例31 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-羟乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物32)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-羟乙基哌嗪(24.72μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末43.25mg，产率54.28％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-羟乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：521.3[M+Na]⁺，499.3[M+H]⁺，497.3[M-H]^-，相对分子质量为498。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，4.93(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.45(m，2H，-CH₂OH)，2.41(m，12H，6×-NCH₂-)。

实施例32 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物33)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末45.72mg，产率53.81％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.2[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相对分子质量为531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.09(s，1H，3”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.51(dd，1H，J＝7.5，15.0Hz，5”’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.81(m，2H，4”’，6”’-H)，6.71(s，1H，11-H)，6.62(s，1H，8-H)，5.03(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.46(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例33 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物34)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末45.62mg，产率53.70％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.3[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相对分子质量为531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.14(d，2H，J＝5.6Hz，2”’，6”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.79(d，2H，J＝5.6Hz，3”’，5”’-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.29(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例34 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物35)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-嘧啶基)哌嗪(31.18μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末45.75mg，产率53.75％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.3[M+Na]⁺，533.3[M+H]⁺，531.2[M-H]^-，相对分子质量为532。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.34(d，2H，J＝4.5Hz，3”’，5”’-H)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，6.60(dd，1H，J＝8.9，4.5Hz，4”’-H)，5.04(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.71(m，4H，2×-NCH₂-)，2.50(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例35 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物36)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末44.67mg，产率50.95％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.3[M+Na]⁺，549.3[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相对分子质量为548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.98(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.68(s，1H，8-H)，4.97(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.02(m，4H，2×-NCH₂-)，2.64(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例36 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物37)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末45.80mg，产率52.24％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.2[M+Na]⁺，549.2[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相对分子质量为548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，7.02(dd，2H，J＝17.4，8.7Hz，2”’，6”’-H)，6.93(d，2H，J＝8.0Hz，3”’，5”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，5.00(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.06(m，4H，2×-NCH₂-)，2.61(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例37 10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物38)的制备

化合物3(60mg，0.16mmol)和乙二醇胺(19.97μL，0.19mmol)，溶于4mL无水乙醇中，100℃反应3h。反应结束后，反应液冷至室温，减压蒸去溶剂，得黄色油状液体，制备TLC纯化得黄色粉末42.00mg，产率55.50％。经鉴定为10-羟基-7-(4’-(2-羟基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氢-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：496.2[M+Na]⁺，474.2[M+H]⁺，472.2[M-H]^-，相对分子质量为473。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.71(s，1H，8-H)，4.92(brs，1H，2”-OH)，4.41(brs，2×1H，-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，3.99(m，2H，3”-H)，3.44(m，4H，-CH₂CH₂OH)，2.59(m，6H，3×-NCH₂-)。

实施例38 野黄芩素衍生物体外抑制肿瘤细胞增殖实验(MTT法)

1.细胞培养和给药

人非小细胞肺癌A549、人黑色素瘤细胞B16F10和乳腺癌细胞MCF-7以适量浓度接种于培养瓶中，用含10％胎牛血清的DMEM培养液，在湿度为95％空气并且含有5％CO₂的孵箱中于37℃条件下静置培养。取对数生长期的细胞，消化、计数，配制成浓度为5×10⁴个/ml的细胞悬液接种于96孔细胞培养板，每孔100μL(含5000个肿瘤细胞)。培养24h后吸出培养基，给药组每孔加入100μL不同浓度的野黄芩素及其衍生物和藤黄酸，浓度分别为0.1、1、5、10、25μM，每组设3个复孔。对照组加入与给药组等体积的含1％胎牛血清的完全培养基。96孔板置于5％CO₂孵箱中于37℃培养48h。

2.细胞活力检测

细胞活力通过MTT比色法来进行检测。在药物作用结束后每孔加入10μL MTT(5mg/mL)溶液，在培养箱中继续培养4h，弃去培养液，每孔加入100μL DMSO溶解甲瓒颗粒，轻度震荡后，用酶标仪于490nm处测定每孔吸光度(OD值)，所得数据用于计算药物对肿瘤细胞的抑制率，结果见表2。并且对25μM浓度时抑制率高于50％的化合物测定了IC₅₀值，结果见表3。

细胞抑制率(％)＝(正常组OD值-测试组OD值)/正常组OD值×100％，其中测试组指给药组或阳性对照组，正常组的细胞存活率为100％。

应用GraphPad Prism 5软件计算IC₅₀。

3.实验结果

表2 化合物1和4-38在25μM时对A549、B16F10、MCF-7的抑制率(％)

表3 部分野黄芩素衍生物对A549、B16F10、MCF-7的IC₅₀(μM)值

注：“-----”表明化合物IC₅₀＞25μM。

对合成的野黄芩素衍生物进行抗肿瘤活性研究发现，化合物4-38对肺癌A549细胞、黑色素瘤B16F10细胞、乳腺癌MCF-7细胞均有一定程度的抑制作用，大多数化合物的抗肿瘤作用优于野黄芩素，其中化合物21的抗肿瘤作用具有选择性，对A549抑制作用最为明显，IC₅₀值为3.36μM，而对MCF-7、B16F10的抑制作用次之，IC₅₀值分别为20.46μM和18.80μM。化合物20对A549、MCF-7、B16F10的抑制率分别为80.60％、16.57％和83.33％，对B16F10的抑制作用最优，IC₅₀值为1.74μM，对MCF-7几乎无抑制作用。化合物26，28，29对三种细胞株均具有较好的抑制作用，可能是由于其结构中羟基的引入，极大的提高了化合物的亲水性。因此，本发明提供的野黄芩素衍生物具有一定的抗肿瘤作用，对于抗肿瘤药物的研究与开发具有重要意义。