本发明属于食品加工领域，涉及一种香菇多糖的提取方法，具体涉及一种超微粉粹处理协同微波高压提取香菇多糖的提取方法。
背景技术：
香菇(Lentinus edodes)属于担子菌纲，伞菌目，侧耳科，又称香蕈、冬菰、花茹等，是世界上第二大食用菌种，其营养丰富，味道鲜美，具有很高的药用价值，是一种药食两用真菌，被誉为“山珍之王”，“植物性食品的顶峰”，“天然的保健食品”，是人类理想的食品。香菇主要成份有香菇多糖(Leniinan)、香菇嘿吟(Eriadenine)、核苷酸、蛋白质、多种矿物质及膳食纤维素等。
香菇多糖(Leniinan,简称LNT)是从香菇的子实体中分离纯化得到的高分子葡聚糖，是一种重要的生物反应调节剂，有很高的药用价值，具有抗肿瘤、抗病毒、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。80年代开始将其作为生物反应调节剂应用于临床，其可增加天然杀伤细胞(NK细胞)活性和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)的产生，并能恢复和提高宿主细胞对淋巴因子、激素及其它生理活性因子的反应性，从而增强机体免疫力，提高抗肿瘤效果。目前，香菇多糖已经作为提高免疫力、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射等的辅助治疗方法广泛应用于人的临床治疗。
香菇多糖的提取方法主要有热水提取、稀酸提取、稀碱提取、酶解提取等，随着对香菇研究的不断深入和现代高新技术不断涌现，又出现超声波提取、微波辅助提取、超滤提取、发酵提取、加压溶剂提取等。传统的提取方法是热水提取，此法时间长、提取率低，从而导致成本高，但是此法很容易把香菇里面的溶于水的蛋白质等大分子也提取出来，这样提取液溶于腐败变质，对保存要求条件高，为后续的分离纯化增加困难。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种简单、高效的提取香菇多糖的方法，该方法简单、快速、高效，不会对多糖结构造成影响，并且超微粉碎后，提取的香菇多糖有效成分含量更高，活性更高、提取率更高。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇经中药粉碎机粗粉碎得40-60目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤(1)所得香菇粗粉进行超微粉碎，得到800-1000目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：将步骤(2)所得香菇超细粉加入去离子水，在压力0.12-0.15mpa，温度110-121℃，协同微波法提取1-2h，得提取液；
(4)抽滤、浓缩：将步骤(3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/3-1/4；
(5)将步骤(4)所得浓缩液经醇沉、干燥得香菇多糖。
进一步地，步骤(1)中所述粗粉碎是将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，转速为2000-3000r/min，粉碎10-15min。
进一步地，步骤(2)中，所述超微粉碎是将粗粉碎的香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速5000-6000r/min，粉碎时间20-30min。
进一步地，步骤(3)中，所述香菇超细粉/去离子水料液比1:20-1:30(g/ml)，微波提取的功率250w-300w。
进一步地，步骤(5)中，所述醇沉、干燥，具体为加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀经真空冷冻干燥得到香菇多糖。
本发明的有益效果是：
1、本发明的提取工艺将超微粉碎技术和协同微波高压提取法相结合，物料经超微粉碎使其细胞破壁，且对物料中原有的功效成分破坏小，使其最大限度的保留物料中功效成分的活性，同时超微粉碎后的物料比表面积增大，使其溶解性增大，提高了功效成分的提取率。协同微波高压提取法，微波提取通过电磁波感应转化成分子的动能，可以破坏细胞结构，加速功效物质的溶出，具有快速、高效、安全的特点；高压提取是将物料的组织细胞结构破坏解体，使细胞内的功效成分与溶解介质充分接触而溶出。微波协同高压提取法综合了2种提取法的优点，其特点是缩短提取时间、提高提取率、降低成本。
2、本发明采用超微粉碎处理协同微波高压提取香菇多糖的工艺，比传统的热水浸提法提取香菇多糖提取时间短、提取率高、功效成分活性高，且生产成本低、节能降耗、操作简便。获得的粗香菇多糖中，香菇多糖的纯度高。
具体实施方式
实施例1
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，粉碎机转速为2000r/min，粉碎10min，得40目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤1)所得香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速5000r/min，粉碎时间20min得到800目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：取香菇超细粉加入去离子水，在压力0.12mpa，温度110℃，协同微波法提取1h，微波提取的功率250w，得提取液；所述香菇超细粉/去离子水料液比1:20(g/ml)；
(4)抽滤、浓缩：将步骤3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/3；
(5)将步骤4)所得浓缩液，加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀，经真空冷冻、干燥、得到香菇多糖。
实施例2
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，粉碎机转速为3000r/min，粉碎15min，得60目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤1)所得香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速6000r/min，粉碎时间30min得到1000目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：取香菇超细粉加入去离子水，在压力0.15mpa，温度121℃，协同微波法提取2h，微波提取的功率300w，得提取液；所述香菇超细粉/去离子水料液比1:30(g/ml)；
(4)抽滤、浓缩：将步骤3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/4；
(5)将步骤4)所得浓缩液，加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀、经真空冷冻干燥得到香菇多糖。
实施例3
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，粉碎机转速为2500r/min，粉碎12min，得50目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤1)所得香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速5500r/min，粉碎时间25min得到900目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：取香菇超细粉加入去离子水，在压力0.13mpa，温度115℃，协同微波法提取1.5h，微波提取的功率280w，得提取液；香菇超细粉/去离子水料液比1:25(g/ml)；
(4)抽滤、浓缩：将步骤3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/3；
(5)将步骤4)所得浓缩液，加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀经真空冷冻干燥得到香菇多糖。
实施例4
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，粉碎机转速为2200r/min，粉碎12min，得45目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤1)所得香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速5400r/min，粉碎时间24min得到850目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：取香菇超细粉加入去离子水，在压力0.14mpa，温度114℃，协同微波法提取1.2h，微波提取的功率260w，得提取液；所述香菇超细粉/去离子水料液比1:24(g/ml)；
(4)抽滤、浓缩：将步骤3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/3-1/4；
(5)将步骤4)所得浓缩液，加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀经真空冷冻干燥得到香菇多糖。
实施例5
一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)粗粉碎，将干香菇置于中药粉碎机中进行粗粉碎，粉碎机转速为2400r/min，粉碎13min，得48目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：将步骤1)所得香菇粗粉置于超微粉碎机中，进行超微粉碎，转速5400r/min，粉碎时间24min得到840目的香菇超细粉；
(3)高压协同微波法提取：取香菇超细粉加入去离子水，在压力0.14mpa，温度120℃，协同微波法提取1.6h，微波提取的功率270w，得提取液；所述香菇超细粉/去离子水料液比1:26(g/ml)；
(4)抽滤、浓缩：将步骤3)所得提取液经抽滤，减压浓缩至原体积的1/3；
(5)将步骤4)所得浓缩液，加入4倍于浓缩液体积的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后离心，去除上清液，沉淀经真空冷冻干燥得到香菇多糖。
对照组：
采用传统的热水提取法提取香菇多糖，主要操作为：准确称取干香菇500g，放于中药粉碎机中粉碎10min，按料液比1:20加入去离子水，在温度80℃水浴锅中恒温提取2h，提取液经抽滤、浓缩、醇沉、干燥等处理后得粗多糖，再经烘干、称重。
表1.香菇多糖的提取率及其纯度
其他方法提取香菇多糖的同时会对多糖产生降解作用，研究发现，长时间的高温提取等会对对香菇多糖的结构造成破坏，导致香菇多糖的结构的变化，从而使得香菇多糖的活性降低，研究数据表明本发明中香菇多糖中的纯香菇多糖的含量在80-95％之间，远远高于现有提取方法所获得的粗多糖中纯香菇多糖的含量。
通过上表可以明显看出，本发明的方法提取多糖的提取率明显高于对照组，这说明，此方法提取香菇多糖具有时间短、提取率高、节约成本等特点。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。