本发明属于医药化学领域，涉及具有抗乙肝病毒(hbv)活性的替诺福韦双-l-氨基酸酯类化合物及其制备方法，以及含有它们的抗乙肝药物组合物；更具体地说，本发明涉及9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-氨基酸酯类化合物及9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代氨基酸酯类化合物。
背景技术：
核苷类化合物是一类重要的临床抗病毒(hiv，hbv,hcv,流感病毒，疱疹病毒等)药物，但其耐药性逐年增大，已成为全球关注的重大公共卫生问题和社会问题。与环状核苷类逆转录酶抑制剂相比，非环核苷药物替诺福韦[(r)-pmpa]在防治病毒耐药性问题上具有显著优势。例如，替诺福韦可有效对付环状核苷类药物的耐药病毒株，而本身耐药发生率很低，且毒性相对较小，可用于治疗同时感染hiv-1和hbv的患者。但由于替诺福韦结构中膦酸酯基带负电荷，极性太强，生物膜透过性差，导致其口服生物利用度很低，同时替诺福韦也存在明显的肾毒性，使其临床使用受到很大限制。美国吉利德公司开发的替诺福韦的双酯性前药-替诺福韦双异丙酰氧基甲酯富马酸盐(tdf)其生物利用度得到改善，于2001年被美国fda批准上市。tdf疗效确切，适用性好，剂量合适，已成为多个治疗指南推荐使用的一线抗hiv药物，tdf及其复方制剂也是目前销售额最大的抗艾滋病药物。令人兴奋的是，在大量临床试验的基础上，欧盟和美国fda分别于2008年4月和8约批准tdf用于治疗乙型肝炎(乙肝)，并被业内誉为最好的抗乙肝药物之一，其销售额显著增大。作为前药，tdf本身没有抗病毒活性，必须游离出原药才能发挥药效，但部分药物在吸收进入血液前即被水解。此外，释放出的原药同样由于膜透过性差而迅速排出体外，难以在感染部位保持足够的药物浓度，致使其人体生物利用度也仅为28％左右。因此，对替诺福韦进行科学的结构修饰以增强抗病毒活性、提高人体生物利用度，进一步发挥其抗病毒临床疗效仍具有重要价值。为了克服上述现有技术所存在的缺陷，本发明人进行了广泛的研究，向替诺福韦膦酸结构片段上引入l-氨基酸，设计合成了一系列替诺福韦双-l-氨基酸酯类化合物，并测定了它们的体外抗hbv活性。最终发现，不同于以往文献报道的9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-氨基酸酯类化合物具有意想不到的强抗hbv活性，与替诺福韦和替诺福韦酯相比，具有更加优越的抗hbv活性。技术实现要素：本发明的目的是提供一类由通式(i)表示的替诺福韦双-l-氨基酸酯类化合物或其药用盐，其中：r代表异丙基、异丁基、仲丁基或苄基；x代表氧或硫；n代表1-3。本发明的式(i)化合物在药学上可接受的非毒性的药用盐，包括与无机酸，如盐酸、硫酸形成的盐，与有机酸，如乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸、苹果酸甲磺酸、对甲苯磺酸形成的盐。优选的本发明药用盐为盐酸盐、富马酸盐、苹果酸盐。优选的，本发明具体包括以下化合物：9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-亮氨酸丙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-异亮氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-异亮氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸丙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代亮氨酸丙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代异亮氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代亮异氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸丙酯。进一步优选的，本发明的化合物为：9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸乙酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸甲酯；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸乙酯；本发明的另一个目的在于提供式(i)化合物或其药用盐的制备方法。反应路线如下所示：在反应路线1中，x、n、r如前述的定义。y代表氯或溴。在偶极非质子溶剂中加入缚酸剂，使式(ii)化合物与式(iii)化合物发生缩合反应，所生成的中间体式(iv)化合物无需分离，直接用三氟乙酸或氯化氢脱去boc保护基，即得到式(i)化合物。优选的，本发明的制备方法，包括以下步骤：在偶极非质子溶剂中加入缚酸剂，将式(ⅱ)化合物与式(iii)化合物加入到上述溶剂中进行缩合反应，用过量的式(iii)化合物来满足反应需要，在-5℃～100℃，有或无压力条件下搅拌反应2.5～30小时，所生成的中间体式(iv)化合物无需分离，直接用三氟乙酸或氯化氢脱去boc保护基，得到式(i)化合物，其中，所述的偶极非质子溶剂选自：n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲基亚砜；所述的缚酸剂选自：三乙胺、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或n,n/-二环己基-4-吗啉脒。在本发明中用作起始物的式(ii)化合物为已知化合物,国内有商品供应。式(iii)化合物也为已知化合物,并参考现有出版物中已知的方法可容易地制得，例如haradan等，syn.comm.,1994,24(6)：767；傅晓钟等，药学学报，2008，43(5)：495。本发明的另一个目的在于提供式(i)所示化合物或其药用盐在制备治疗乙肝的药物中的应用。本发明的另一个目的在于以式(i)所示化合物或其药用盐为活性成分的药物组合物。本发明的药物组合物中，式(i)所示化合物或其药用盐的重量比为0.1～99.9％，药物可接受的载体在组合物中的重量比为0.1～99.9％。本发明的药物组合物以适合药用的制剂形式存在。本发明的药物组合物可以制备成任何可药用的剂型。优选的，药用的制剂为片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、缓释片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、缓释胶囊剂、散剂。本发明的药物组合物，作为制剂形式，每剂中含有的本发明化合物的有效量为0.1～1000mg，所述每剂指的是，每一制剂单位，如片剂的每片，胶囊的每粒，也可指每次服用剂量，如每次服用100mg。本发明的药物组合物可以制备成任何可药用的剂型。优选的，本发明的药用剂型选自：片剂、胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、粉针剂、注射剂。在制备成粉剂、片剂、可分散粉剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和软膏形式的固体或半固体药物制剂时，可使用固体载体。可使用的固体载体优选为选自稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、膨胀剂等中的一种或多种物质，或可为包封物质。在粉状制剂中，在载体中含有5～70％的微粒化活性成分。适宜的固体载体包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、蔗糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低沸点蜡、可可脂等。由于它们易于给药，片剂，粉剂、扁囊剂和胶囊等代表最有利的口服固体制剂。本发明的液体制剂包括溶液、悬液和乳液。例如，非胃肠道给药的注射制剂可为水或水-丙二醇溶液形式，调节其等渗度，ph等使适于活体的生理条件。液体制剂还可制成在聚乙二醇、水溶液中的溶液形式。可通过将活性成分溶解在水中，再加入适量的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂，来制备口服水溶液。可将微粒化的活性成分分散在粘性物质如天然和合成胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它已知悬浮剂中制备适于口服的水悬液。为了易于给药及剂量均一，将上述药物制剂配制成剂量单位形式是特别有利的。制剂的剂量单位形式指适于作为单一剂量的物理分离单位，每个单位含有产生所期望的治疗效果的计算好的预定量的活性成分。这种剂量单位形式可为包装形式，如片剂、胶囊或装在小管或小瓶中的粉剂，或装在管或瓶中的软膏、凝胶或霜剂。虽然剂量单位形式中所含活性成分的量可以变化，但一般根据所选择活性成分的效力，调节在1～800mg范围内。本领域技术人员可按常规方法确定适于某种情况的优选剂量。一般，开始治疗的量低于活性成分的最佳剂量，然后逐渐增加给药剂量，直到达到最佳治疗效果。为治疗需要，总的日剂量可一次给药或分数次给药。本发明式(i)所示替诺福韦双-l-氨基酸酯类化合物，与替诺福韦和替诺福韦酯相比，具有更加优越的抗hbv活性。而且，本发明的药物具有更高的安全性和稳定性，有效的降低药物的毒副作用，保证药品的质量。本发明的制备工艺简单，用时比较短，大大降低成产成本，提高效率，适合大规模生产。具体实施方式以下实施例用于进一步解释和说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。具体实施方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的保护范围。实施例1、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸甲酯将替诺福韦(0.50g,1.74mmol)、n-boc-l-缬氨酸-1-溴甲酯(1.85g,6.96mmol)和n,n-二环己基-4-吗啉脒(1.23g,4.18mmol)溶于5ml干燥的dmf中，室温搅拌8h后，80℃继续搅拌6h，tlc检测原料反应完全。减压浓缩，向残余物中加入1％柠檬酸30ml，室温搅拌1h，乙酸乙酯萃取3次，合并有机层，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得白色泡沫状固体并将其溶于5ml干燥二氧六环中，通入氯化氢气体，室温搅拌4h。减压蒸干，残余物中加入乙醇，0℃下搅拌15min，然后加入乙醚，0℃下继续搅拌30min，抽滤，滤饼用少量乙醚淋洗，35℃真空干燥，得白色泡沫状固体。将上述固体溶于50％的乙醇水溶液(10ml)，然后加入20％氢氧化钠水溶液(0.8ml)，室温搅拌1.5h。减压蒸干，残余物经色谱柱纯化，即得标题化合物270mg(收率27.6％)。1hnmr(500mhz,cd3od)8.40(s,1h,8-h),8.35(s,1h,2-h),6.22(s,4h),4.55(d,j＝6.0hz,2h),4.31(m,2h)，3.81-4.06(m,3h),2.33(m,2h),1.20(m,3h),1.13,1.09(d,j＝7.0hz,6h).ms-esi(m/z):546.52(m+h).实施例2、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-缬氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.37(s,1h,2-h),4.55(d,j＝6.0hz,2h),4.30-4.50(m,10h)，3.81-4.09(m,3h),2.31(m,2h),1.21(m,3h),1.13(d,j＝7.0hz,6h),1.09(d,j＝6.5hz,6h).ms-esi(m/z):574.53(m+h).将标题化合物(70mg,0.13mmol)溶于5ml干燥二氧六环中，通入氯化氢气体，室温搅拌4h。减压蒸干，残余物中加入乙醇，0℃下搅拌15min，然后加入乙醚，0℃下继续搅拌30min，抽滤，滤饼用少量乙醚淋洗，35℃真空干燥，得9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯盐酸盐78mg，产率为83.9％。元素分析测试：c23h40n7o8p.3hcl.2h2ochnpcl计算值(％)38.416.5413.634.3114.82实测值(％)38.476.6013.584.3614.78类似地也可以制备下述的盐，例如：9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯富马酸盐；9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-缬氨酸乙酯苹果酸盐。实施例3、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-亮氨酸丙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-亮氨酸-3-溴丙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.35(s,1h,2-h),4.52(d,j＝7.0hz,2h),4.30-4.50(m,6h)，3.81-4.19(m,7h),2.35(m,4h),2.20(m,2h),1.25(m,3h),1.22(m,4h),1.08(d,j＝7.5hz,6h),1.01(d,j＝6.5hz,6h).ms-esi(m/z):630.54(m+h).实施例4、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-异亮氨酸甲酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-异亮氨酸-1-溴甲酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.35(s,1h,2-h),6.25(s,4h),4.52(d,j＝7.0hz,2h),4.31-4.57(m,2h)，3.81-4.20(m,3h),1.72(m,4h),1.22,1.26(m,3h),1.13(m,4h),0.89(t,j＝7.5hz,6h).ms-esi(m/z):574.54(m+h).实施例5、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-异亮氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-异亮氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,)8.39(s,1h,8-h),8.32(s,1h,2-h),4.50(d,j＝7.5hz,2h),4.40-4.52(m,10h)，3.81-4.23(m,3h),1.71(m,4h),1.22,1.25(m,3h),1.15(m,4h),0.89(t,j＝7.5hz,6h).ms-esi(m/z):602.34(m+h).实施例6、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸甲酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-苯丙氨酸-1-溴甲酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.40(s,1h,8-h),8.35(s,1h,2-h),7.21-7.30(m,10h),6.21(s,4h),5.01(d,j＝7.5hz,4h),4.52(d,j＝7.0hz,2h),4.31-4.39(m,2h)，3.81-4.20(m,3h),1.23(m,3h).ms-esi(m/z):642.40(m+h).实施例7、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-苯丙氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.40(s,1h,8-h),8.34(s,1h,2-h),7.21-7.31(m,10h),6.20(s,4h),5.00(d,j＝7.0hz,4h),4.5(d,j＝7.5hz,2h),4.31-4.35(m,10h)，3.81-4.25(m,3h),1.22(m,3h).ms-esi(m/z):670.32(m+h).实施例8、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-苯丙氨酸丙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-苯丙氨酸-3-溴丙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.39(s,1h,8-h),8.34(s,1h,2-h),7.21-7.31(m,10h),6.20(s,4h),5.01(d,j＝7.0hz,4h),4.4(d,j＝7.0hz,2h),4.31-4.35(m,4h)，4.21-4.30(m,4h),3.81-4.10(m,3h),1.22(m,3h),1.18(m,4h).ms-esi(m/z):698.42(m+h).实施例9、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸甲酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l硫代缬氨酸-1-甲酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.43(s,1h,8-h),8.37(s,1h,2-h),6.20(s,4h),4.51(d,j＝6.0hz,2h),4.28(m,2h)，3.91(m,3h),2.28(m,2h),1.18(m,3h),1.13(m,12h).ms-esi(m/z):578.41(m+h).实施例10、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代缬氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-硫代缬氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.44(s,1h,8-h),8.39(s,1h,2-h),4.51(d,j＝7.0hz,2h),4.30-4.45(m,6h)，3.81-4.04(m,7h),2.30(m,2h),1.22(m,3h),1.13(d,j＝7.0hz,6h),1.09(d,j＝6.5hz,6h).ms-esi(m/z):606.34(m+h).实施例11、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代亮氨酸丙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-硫代亮氨酸-3-溴丙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.37(s,1h,2-h),4.53(d,j＝7.5hz,2h),4.35(m,4h)，3.81-4.19(m,9h),2.32(m,4h),2.21(m,2h),1.22(m,3h),1.20(m,4h),1.04(d,j＝7.0hz,6h),1.01(d,j＝7.0hz,6h).ms-esi(m/z):662.32(m+h).实施例12、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代异亮氨酸甲酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-硫代异亮氨酸-1-溴甲酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.36(s,1h,2-h),6.23(s,4h),4.53(d,j＝7.5hz,2h),4.43(m,2h)，3.80-4.21(m,3h),1.72(m,4h),1.23,1.27(m,3h),1.12(m,4h),0.89(t,j＝7.5hz,6h).ms-esi(m/z):606.42(m+h).实施例13、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代异氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-硫代异亮氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,)8.44(s,1h,8-h),8.34(s,1h,2-h),4.49(d,j＝7.0hz,2h),4.40-4.52(m,6h)，4.30(m,4h),4.12(m,3h),1.74(m,4h),1.21,1.28(m,3h),1.14(m,4h),0.89(t,j＝6.5hz,6h).ms-esi(m/z):634.56(m+h)实施例14、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸甲酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-硫代苯丙氨酸-1-溴甲酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.44(s,1h,8-h),8.36(s,1h,2-h),7.21-7.31(m,10h),6.22(s,4h),5.05(d,j＝6.0hz,4h),4.51(d,j＝7.5hz,2h),4.35(m,2h)，3.81-4.21(m,3h),1.22(m,3h).ms-esi(m/z):674.36(m+h).实施例15、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸乙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-苯丙氨酸-2-溴乙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.334(s,1h,2-h),7.22-7.33(m,10h),6.20(s,4h),5.01(d,j＝7.0hz,4h),4.53(d,j＝7.0hz,2h),4.31-4.35(m,10h)，3.81-4.25(m,3h),1.21(m,3h).ms-esi(m/z):702.32(m+h).实施例16、9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]腺嘌呤双-l-硫代苯丙氨酸丙酯制备方法同实施例1，替诺福韦和n-boc-l-苯丙氨酸-3-溴丙酯反应，得白色泡沫状固体。1hnmr(500mhz,cd3od)8.41(s,1h,8-h),8.32(s,1h,2-h),7.21-7.30(m,10h),6.21(s,4h),5.02(d,j＝7.0hz,4h),4.41(d,j＝7.0hz,2h),4.33(m,4h)，4.21-4.30(m,6h),3.90(m,3h),1.22(m,3h),1.18(m,4h).ms-esi(m/z):730.28(m+h).生物实施例1体外抗hbv-dna活性试验以hepg22.2.15细胞为乙型肝炎病毒载体，测定目标化合物对hbv-dna的抑制活性及细胞毒性，并与替诺福韦、替诺福韦酯作对照，结果见表1.测定结果列于表1。表1部分实施例化合物对hbv-dna的体外活性由表1可见，本申请的式(ⅰ)化合物中的实施例1、2、6、7、9、10、14、15化合物(均为实施例标题所述的化合物)对hbv-dna的体外活性(ic50：0.16-0.71μm)分别是母药替诺福韦和对照药替诺福韦酯的22-100倍和1-5倍，而选择性指数(si:)则分别是替诺福韦和替诺福韦酯的3-22倍和3-25倍。上述表中仅列举本发明部分化合物的体外活性，本发明其他化合物结构相似，也具有和上述化合物相同或者相近的体外活性效果，在此不一一列举。生物实施例2口服急性毒性试验为测定本发明化合物的口服急性毒性，对实施例1化合物和实施例4化合物进行了急性毒性实验，将含不同浓度的这两个化合物的溶液口服给于雄性小鼠，剂量为0.1ml/10g体重，7日后分别记数死鼠量，用bliss程序计算各化合物的半数致死量(ld50)。结果列于表2中。表2实施例1和4化合物的小鼠口服急性毒性实验化合物ld50(mg/kg)实施例1>2000实施例4>2000实验结果表明，这些化合物毒性很低，非常适合药用。上述表中仅列举本发明部分化合物的毒性试验，本发明其他化合物结构相似，也具有和上述化合物相同或者相近的体外活性效果，在此不一一列举。组合物实施例实施例1包衣片片芯处方：取上述成分混合均匀，制粒后过筛整粒，干燥、压片制成100片片芯。包衣液处方：欧巴代(opadry)5g，80％乙醇适量包衣。实施例2胶囊处方：制备方法：取处方量原辅料，分别过筛，加入5％聚乙烯吡咯烷酮醇液和吐温80制软材，用20目筛制粒，在室温15℃下晾干，加入十二烷基硫酸钠，混合均匀，按0.27g/s装入0号胃溶胶囊，取样化验，溶出限度为q＝80％，含量应为标示量的90～110％。实施例3颗粒剂取实施例9的化合物100g，加入适量糊精、甜菊素，干式制粒，整粒，分装，即得。实施例4注射剂取实施例10的化合物150g加水溶解，另氯化钠、对羟基苯甲酸乙酯加热水溶解，混匀，调ph值5-7。注射用水稀释至1000ml,用中空纤维膜滤过，灌装，灭菌，即得。实施例5冻干粉针取实施例14的化合物150g加水溶解，另加甘露醇500g加热水溶解，混匀，注射用水稀释至5000ml,用中空纤维膜滤过，灌装，灭菌，冻干即得冻干粉针。实施例6滴丸取实施例15的化合物20g作为原料药备用；称取滴丸基质200g，加热至80℃融化，搅拌均匀；边搅拌边将原料加入辅料基质中，搅拌30min使之均匀，保持药液温度不低于60℃；将配制好的药液注入滴丸机中，滴成滴丸，即可。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12