本发明涉及一种温敏型壳聚糖/氧化石墨烯材料的制备方法。
背景技术：
目前，生物材料快速发展，主要针对某些生物相容性好的材料进行生物方面的应用。以壳聚糖/氧化石墨烯材料为例来说，由于壳聚糖生物相容性好、免疫排斥反应小、无细胞毒性、易降解同时具有抗菌消炎的优点被广泛应用于生物技术领域，例如作为生物传感器、组织工程支架、药物缓释载体等等，同时在复合氧化石墨烯材料以后，该材料的机械应力、电传导性得以增强，进一步扩大了壳聚糖/氧化石墨烯的应用范围。
然而，作为生物材料，壳聚糖/氧化石墨烯材料往往要作用在细胞培养体系中，如何能让细胞均匀分布在壳聚糖/氧化石墨烯材料中以便实现该材料的载药、传感功能成为当前研究的难题。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种温敏型壳聚糖/氧化石墨烯材料的制备方法，以便壳聚糖/氧化石墨烯复合材料在低于37℃时能以液态和细胞充分混匀，使得材料和细胞更加均匀、充分接触，进一步实现壳聚糖/氧化石墨烯材料的功能。
本发明的技术方案：
一种温敏型壳聚糖/氧化石墨烯材料的制备方法，步骤如下：
制备浓度为100-600mg/l的氧化石墨烯水溶液，超声20min，向氧化石墨烯水溶液中加入壳聚糖粉末，使得壳聚糖/氧化石墨烯的质量比为0.1～0.6，冰水浴条件下磁力搅拌，并逐滴滴入冰醋酸，使得冰醋酸/水的体积比为0.1％～0.6％，持续搅拌2h，得到澄清透明的溶液；配置β-甘油膦酸二钠盐溶液，在冰水浴条件下，向澄清透明的溶液中逐滴滴入β-甘油磷酸二钠盐溶液，使得β-甘油磷酸二钠盐的浓度在0.1-0.2mol/l，充分搅拌30min，即得到温敏型壳聚糖/氧化石墨烯；保存在4℃条件下，待用时取出，置于37℃水浴10-15min，即得温敏型壳聚糖/氧化石墨烯材料。
本发明的有益效果：本发明能够拓宽壳聚糖/氧化石墨烯材料在生物技术方面的应用，以该方法制备的壳聚糖/氧化石墨烯材料能够在进行生物利用之前在低温条件下先和目的细胞充分混合。
具体实施方式
以下结合技术方案，进一步说明本发明的具体实施方式。
实施例1：
取100mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴条件下，向其中加入200mg壳聚糖粉末，搅拌成乳浊液，由于壳聚糖不溶于水，向混合的乳浊液中逐滴加入60微升冰醋酸，边加边搅拌，待乳浊液逐渐澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二钠盐溶液，逐滴滴入置于磁力搅拌器，充分搅拌0.5小时，存放于4℃冰箱，待用时取出，37℃水浴10-15min，即得100mg/l壳聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯浓度为基准)。
实施例2：
采用200mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴条件下，向其中加入200mg壳聚糖粉末，搅拌成乳浊液，向混合的乳浊液中逐滴加入60微升冰醋酸，边加边搅拌，待乳浊液逐渐澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二钠盐溶液，逐滴滴入置于磁力搅拌器，充分搅拌0.5小时，存放于4℃冰箱，待用时取出，37℃水浴10-15min，即得200mg/l壳聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯浓度为基准)。
实施例3：
取400mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴条件下，向其中加入200mg壳聚糖粉末，搅拌成乳浊液，由于壳聚糖不溶于水，向混合的乳浊液中逐滴加入60微升冰醋酸，边加边搅拌，待乳浊液逐渐澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二钠盐溶液，逐滴滴入置于磁力搅拌器，充分搅拌0.5小时，存放于4℃冰箱，待用时取出，37℃水浴10-15min，即得400mg/l壳聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯浓度为基准)。
实施例4：
取600mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴条件下，向其中加入200mg壳聚糖粉末，搅拌成乳浊液，由于壳聚糖不溶于水，向混合的乳浊液中逐滴加入60微升冰醋酸，边加边搅拌，待乳浊液逐渐澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二钠盐溶液，逐滴滴入置于磁力搅拌器，充分搅拌0.5小时，存放于4℃冰箱，待用时取出，37℃水浴10-15min，即得600mg/l壳聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯浓度为基准)。
本发明方法的磁力搅拌过程是处于紫外灯照射下进行，经过紫外灯持续照射，可以营造一种无菌环境，同时减少支架材料内部的微生物。
本发明优选包括在制备壳聚糖/氧化石墨烯复合支架时不采用交联剂。