本发明涉及一种微生物粉剂及其制备方法和应用，具体涉及一种宛氏拟青霉粉剂及其制备方法和应用，属于农业微生物
技术领域：
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背景技术：
：近年来，由于连作面积的不断扩大，以及不科学用药，致使线虫发展蔓延速度较快，抗性增强，作物死苗率不断增加，从而造成了作物严重减产，甚至绝产，品质降低，已经严重影响了农作物生产。市场上存在多种防治线虫的菌剂，但是这些菌剂杀线虫效率低，保质期短，孢子含量低。技术实现要素：为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种杀线虫效率高、孢子含量高、保质期长、能够有效防治线虫的宛氏拟青霉粉剂及其制备方法。为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：一种宛氏拟青霉粉剂，其特征在于，由保藏编号为cgmccno.13772的宛氏拟青霉在玉米粉培养基上发酵得到。前述的宛氏拟青霉粉剂，其特征在于，粉剂中宛氏拟青霉的孢子含量≥300亿/克。前述的宛氏拟青霉粉剂，其特征在于，制备方法如下：step1：将保藏编号为cgmccno.13772的宛氏拟青霉接种在pda平板培养基上，27℃暗培养7d，将培养好的平板作为原种；step2：将step1培养好的原种接种在pda液体培养基上，27℃、121rpm暗培养4d，将发酵好的液体作为种子液；step3：将玉米粉加水控制湿度在20％，121℃灭菌30min，作为发酵培养基；step4：将step2培养好的种子液加入到step3制得的发酵培养基中，27℃静置暗培养，待孢子含量≥300亿/克时停止发酵；step5：将step4制得的发酵液烘干，粉碎，过100目筛子，得到孢子含量≥300亿/克的宛氏拟青霉粉剂。本发明的有益之处在于：(1)宛氏拟青霉可以寄生线虫卵，分泌次生代谢产物抑制线虫生长，经试验验证，本发明的宛氏拟青霉粉剂能够有效防治线虫，具有非常积极的使用效果；(2)本发明的宛氏拟青霉粉剂，其孢子含量≥300亿/克，孢子含量高，杀线虫效率高，并且保质期长；(3)本发明的宛氏拟青霉粉剂，其制备工艺简单，适合工厂化生产。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。第一部分：获取宛氏拟青霉1、筛选分离菌株从有线虫发病的大棚采集土壤，将土壤用水冲洗，然后显微镜下观察水样，挑取死亡长有菌丝的线虫，并将其转移到pda平板上培养。2、鉴定菌株利用28s进行分子检测，检测结果显示菌株为宛氏拟青霉。3、菌株保藏我们将筛选分离得到的宛氏拟青霉于2017年03月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为cgmccno.13772，拉丁文名称为paecilomycesvariotii。第二部分：制备宛氏拟青霉粉剂1、培养原种将保藏编号为cgmccno.13772的宛氏拟青霉接种在pda平板培养基上，27℃暗培养7d，将培养好的平板作为原种。2、培养种子液将前面培养好的原种接种在pda液体培养基上，27℃、121rpm暗培养4d，将发酵好的液体作为种子液。3、制作发酵培养基将玉米粉加水控制湿度在20％左右，121℃灭菌30min，作为宛氏拟青霉的发酵培养基，待用。4、发酵将前面培养好的种子液加入到前面制得的玉米粉发酵培养基中，27℃静置暗培养，待孢子含量≥300亿/克时停止发酵。5、制成粉剂将前面制得的发酵液烘干，粉碎，过100目筛子，即得到孢子含量≥300亿/克的宛氏拟青霉粉剂。第三部分：研究宛氏拟青霉粉剂的作用在山东临沂某南瓜大棚，选取两亩地，一亩地使用本发明的宛氏拟青霉粉剂1kg(作为实验组)，施用方法是对根部土壤进行冲施，一亩地不使用任何处理(作为对照组)。比较结果如下：得病率防效实验组33％66.0％对照组97％——在山东青岛某黄瓜大棚，选取两亩地，一亩地使用本发明的宛氏拟青霉粉剂1kg(作为实验组)，施用方法是对根部土壤进行拌土施用，一亩地不使用任何处理(作为对照组)。比较结果如下：得病率防效实验组30％69.4％对照组98％——由此可见，本发明的宛氏拟青霉粉剂可以有效防治线虫。宛氏拟青霉可以寄生线虫，同时产生多种次生代谢产物抑制线虫生长，所以本发明的宛氏拟青霉粉剂可以有效防治线虫。由于本发明的宛氏拟青霉粉剂中宛氏拟青霉的孢子含量≥300亿/克，含量高，所以杀线虫效率也高。需要说明的是，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。当前第1页12