本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一类含有苯磺酰胺的吡咯并嘧啶类衍生物及其在肿瘤治疗领域的用途。
背景技术：
周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase,cdk)是一类属于ser/thr家族的细胞周期调节性激酶，是细胞周期调节的核心，它与cyclins、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(ckis)组成细胞周期调控网络系统，调节细胞周期的进程。目前已发现cdk家族有20个成员，即cdk1-20。部分cdk家族激酶的表达上调与肿瘤的发生发展有密切的关系。例如，cdk2、cdk4、cdk6、cdk8、cdk11的上调与乳腺癌、直肠癌的发展与恶化正相关(c.r.coxon,j.med.chem.2017,60,1746-1767；p.czodrowski,etal.,j.med.chem.2016,59,9337-9349)。因此，选择性地抑制cdk的活性，阻止肿瘤细胞的异常增殖，是肿瘤治疗的重要思路之一。
总体上说，目前针对cdk开发的药物大体上分为两类：活性肽段和小分子抑制剂(c.sánchez-martínez,etal.,bioorganic&medicinalchemistryletters25(2015)3420–3435)。目前已上市和处于临床研究中的cdk抑制剂中，主要是小分子抑制剂。具体的讲，辉瑞公司开发的cdk4/6双重抑制剂palbociclib，诺华公司开发的cdk4/6抑制剂ribociclib，分别于2015年2月和2017年6月获fda批准，用于联合来曲唑治疗er+/her2-的晚期乳腺癌。除了已上市的这两个药物，十多个靶向于cdk的活性小分子目前处于临床试验中。此类药物的开发对于肿瘤的分子靶向治疗具有重要的意义。
技术实现要素：
本发明目的在于提供一种对肿瘤细胞具有增殖抑制作用的吡咯并嘧啶类衍生物。
本发明的另一个目的是提供上述吡咯并嘧啶类衍生物在肿瘤治疗中的用途。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供的吡咯并嘧啶类衍生物，或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物或其药学上可接受的盐，具有如下式(i)所示的结构：
其中，x、y各自独立的代表n、o、s或so(亚砜基)；
r1代表氢或烷基(如可以是：羟基烷基、氰基烷基、芳基烷基、环烷基或杂环烷基等)；
r2代表氢或烷基(如可以是：羟基烷基、氰基烷基、芳基烷基、环烷基或杂环烷基等)；
本发明提供的吡咯并嘧啶类衍生物，或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物或其药学上可接受的盐，其中：
r1选自于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、环丁基、环戊基或环己基等；
r2选自于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、乙酰基、丙酰基、羟乙基或羟丙基等。
本发明提供的吡咯并嘧啶类衍生物，或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物或其药学上可接受的盐，可选自于下述任一化合物：
本发明提供了上述吡咯并嘧啶类衍生物，或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物或其药学上可接受的盐，在制备抗癌药物中的应用。
本发明还提供了上述吡咯并嘧啶类衍生物，或其立体异构体、互变异构体、溶剂化物或其药学上可接受的盐，在制备预防和治疗食管癌药物中的应用。
和现有技术相比，本发明的有益效果：本发明所述吡咯并嘧啶类衍生物结构新颖，制备方法简便。经试验发明：其对食管癌细胞具有较强的增殖抑制作用，可用于制备抗癌药物，尤其是抗食管癌药物。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步地详细介绍，但本发明的保护范围并不局限于此。
实施例1：2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)
将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(600mg，3.19mmol)放入圆底烧瓶中，加四氢呋喃thf(20ml)使之溶解，再分别加入环丙胺(218mg，3.83mmol)和n-n-二异丙基乙胺diea(823mg，6.38mmol)，30℃反应24h。处理：减压去除反应液，对剩余物用进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)，得白色固体。收率：63％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.90(s,1h),7.66(s,1h),7.53(t,j＝3.0hz,1h),6.35–6.30(m,1h),2.99–2.86(m,1h),0.87–0.79(m,2h),0.58–0.52(m,2h)。esi-msm/z:209[m+h]+。
实施例2：2-氯-n-环丁基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(2)
制备方法参照实施例1，其中，用环丁胺替代环丙胺，反应温度由30℃提高至回流。得白色固体。收率：80％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.69(s,1h),7.32(t,j＝2.9hz,1h),7.16(d,j＝7.3hz,1h),6.33–6.28(m,1h),4.33–3.15(m,1h),1.80–1.40(m,6h)。esi-msm/z:223[m+h]+。
实施例3：2-氯-n-环戊基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(3)
制备方法参照实施例1，其中，用环戊胺替代环丙胺，反应温度由30℃提高至回流。得白色固体。收率：85％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.00(s,1h),7.59–7.45(m,1h),7.36(d,j＝6.9hz,1h),6.30(dd,j＝2.9,2.1hz,1h),4.44–4.30(m,1h),2.09–1.95(m,2h),1.81–1.67(m,2h),1.66–1.56(m,2h),1.56–1.41(m,2h)。esi-msm/z:237[m+h]+。
实施例4：2-氯-n-环己基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(4)
制备方法参照实施例1，其中，用环己胺替代环丙胺，反应温度由30℃提高至回流。得白色固体。收率：91％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.05(s,1h),7.52(t,j＝2.9hz,1h),7.25(d,j＝7.6hz,1h),6.34–6.25(m,1h),4.07–3.87(m,1h),2.05–1.91(m,2h),1.81–1.68(m,2h),1.67–1.55(m,1h),1.46–1.20(m,5h)。esi-msm/z:251[m+h]+。
实施例5：2,4-二氯-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(5)
将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(600mg，3.19mmol)放入圆底烧瓶中，加入n，n-二甲基甲酰胺dmf(5ml)使其溶解，再依次加入碘甲烷(544mg，3.83mmol)和碳酸铯(520mg，1.60mmol)，常温下搅拌反应24h。处理：将反应液加入水中，并用乙酸乙酯萃取，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩。得黄色固体。
收率：91％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.08(d,j＝3.1hz,1h),6.69(d,j＝3.1hz,1h),4.10(s,3h)。esi-msm/z:202[m+h]+。
实施例6：2-氯-n-环丙基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(6)
制备方法参照实施例1。将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶替换为2,4-二氯-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(5)。得白色固体，收率：80％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.44(d,j＝3.0hz,1h),6.41(d,j＝7.8hz,1h),6.24(d,j＝3.0hz,1h),3.98(s,3h),3.25–2.12(m,1h),0.90–0.48(m,4h)。esi-msm/z:223[m+h]+。
实施例7：2-氯-n-环丁基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(7)
制备方法参照实施例1。分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(5)和环丁胺。得白色固体，收率：82％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.40(d,j＝3.0hz,1h),6.32(d,j＝7.8hz,1h),6.19(d,j＝3.0hz,1h),4.33–4.12(m,1h),4.01(s,3h),2.01–1.53(m,6h)。esi-msm/z:237[m+h]+。
实施例8：2-氯-n-环戊基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(8)
制备方法参照实施例1。分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(5)和环戊胺。得白色固体，收率：84％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.40(d,j＝3.0hz,1h),6.34(d,j＝7.8hz,1h),6.21(d,j＝3.0hz,1h),4.23–4.05(m,1h),4.00(s,3h),2.10–1.90(m,2h),179–1.64(m,2h),1.61–1.50(m,2h),1.52–1.37(m,2h)。esi-msm/z:251[m+h]+。
实施例9：2-氯-n-环己基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(9)
制备方法参照实施例1。分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(5)和环己胺。得白色固体，收率：87％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.45(d,j＝3.0hz,1h),6.44(d,j＝7.8hz,1h),6.31(d,j＝3.0hz,1h),4.21–4.02(m,1h),3.98(s,3h),2.60–1.40(m,6h),1.25–1.10(m,4h).esi-msm/z:265[m+h]+。
实施例10：2,4-二氯-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(10)
制备方法同实施例5。将碘甲烷替换为溴乙烷。得白色固体，收率：97％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.18(d,j＝3.2hz,1h),6.73(d,j＝3.2hz,1h),4.52(q,j＝7.2hz,2h),1.50–1.32(m,3h)。esi-msm/z:216[m+h]+。
实施例11：2-氯-n-环丙基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(11)
制备方法同实施例1。将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶替换为2,4-二氯-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(10)。得白色固体，收率：77％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.44(d,j＝3.0hz,1h),6.54(d,j＝7.8hz,1h),6.35(d,j＝3.0hz,1h),4.53–4.20(m,3h),1.48-1.28(m3h),0.91–0.73(m,2h),0.60–0.51(m,2h)。esi-msm/z:237[m+h]+。
实施例12：2-氯-n-环丁基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(12)
制备方法参照实施例1。分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(10)和环丁胺。得白色固体，收率：74％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.42(d,j＝3.0hz,1h),6.44(d,j＝7.8hz,1h),6.25(d,j＝3.0hz,1h),4.55–4.22(m,3h),2.00–1.59(m,6h),1.50-1.32(m,3h).esi-msm/z:251[m+h]+。
实施例13：2-氯-n-环戊基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(13)
制备方法参照实施例1，分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(10)和环戊胺。得白色固体。收率：75％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.46(d,j＝3.0hz,1h),6.42(d,j＝7.8hz,1h),6.20(d,j＝3.0hz,1h),4.45–4.20(m,3h),2.09–1.95(m,2h),1.81–1.67(m,2h),1.66–1.56(m,2h),1.56–1.30(m,5h)。esi-msm/z:265[m+h]+。
实施例14：2-氯-n-环己基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(14)
制备方法参照实施例1，分别将2,4-二氯-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶、环丙胺替换为2,4-二氯-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶(10)和环己胺。得白色固体。收率：70％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.44(d,j＝3.0hz,1h),6.40(d,j＝7.8hz,1h),6.21(d,j＝3.0hz,1h),4.40–4.10(m,3h),2.10–1.90(m,2h),1.84–1.68(m,2h),1.67–1.53(m,1h),1.50–1.20(m,8h)。esi-msm/z:279[m+h]+。
实施例15：4-[(4-环丙氨基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ia)
将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)(79mg，0.38mmol)，4-氨基苯磺酰胺(78mg，0.46mmol)溶于5ml正丁醇中，再滴加1滴浓盐酸，反应液升温至120℃反应10h。处理：减压浓缩反应液，浓缩物用柱色谱分离(洗脱剂：ch2cl2:meoh＝100:10)，得白色固体，收率33％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.72(s,1h),9.89(s,1h),8.78(s,1h),8.02(d,j＝8.9hz,2h),7.74(d,j＝8.9hz,2h),7.49(t,j＝2.8hz,1h),7.24–7.12(m,2h),6.31–6.22(m,1h),3.09–2.98(m,1h),0.95–0.84(m,2h),0.71–0.64(m,2h)。esi-msm/z:345[m+h]+。
实施例16：4-[(4-环丁氨基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ib)
制备方法参照实施例15，将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环丁基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(2)。得白色固体。收率：31％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.00(s,1h),10.12s,1h),9.07(s,1h),7.97(d,j＝8.9hz,2h),7.64(d,j＝8.9hz,2h),7.30(t,j＝2.8hz,1h),7.25–7.10(m,2h),6.38–6.32(m,1h),3.10–2.94(m,1h),2.05-1.50(m,6h).esi-msm/z:359[m+h]+。
实施例17：4-[(4-环戊氨基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ic)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环戊基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(3)。得白色固体，收率49％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.74(s,1h),10.61(s,1h),9.68(s,1h),7.87–7.79(m,4h),7.59(t,j＝2.8hz,1h),7.30(s,2h),6.32(t,j＝2.2hz,1h),4.55–4.42(m,1h),2.09–1.96(m,2h),1.84–1.68(m,4h),1.68–1.59(m,2h)。esi-msm/z:373[m+h]+。
实施例18：4-[(4-环己氨基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(id)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环己基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(4)。得白色固体，收率：33％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.67(s,1h),10.63(s,1h),9.55(s,1h),7.90–7.78(m,4h),7.59(t,j＝2.9hz,1h),7.32(s,2h),6.36–6.30(m,1h),4.11–3.97(m,1h),2.11–1.99(m,2h),1.89–1.78(m,2h),1.50–1.35(m,4h),1.32–1.23(m,2h)。esi-msm/z:387[m+h]+。
实施例19：4-[(4-环丙氨基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ie)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环丙基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(6)。得白色固体，收率：34％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.52(s,1h),10.00(s,1h),7.83–7.51(m,4h),7.46(d,j＝2.9hz,1h),7.26(s,2h),6.09(d,j＝2.9hz,1h),4.08–3.93(m,1h),3.89(s,3h),1.00–0.74(m,2h),0.69–0.60(m,2h)。esi-msm/z:359[m+h]+。
实施例20：4-[(4-环丁氨基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(if)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环丁基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(7)。得白色固体，收率：25％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.22(s,1h),10.60(s,1h),7.94–7.41(m,4h),7.36(d,j＝2.9hz,1h),7.25(s,2h),6.48(d,j＝2.9hz,1h),4.58–4.23(m,1h),4.19(s,3h),2.02–1.49(m,6h)。esi-msm/z:373[m+h]+。
实施例21：4-[(4-环戊氨基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ig)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环戊基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(8)。得白色固体，收率：28％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.62(s,1h),10.73(s,1h),7.89–7.42(m,4h),7.24(d,j＝2.9hz,1h),7.21(s,2h),6.32(d,j＝2.9hz,1h),4.43–4.13(m,1h),4.24(s,3h),2.04–1.89(m,2h),1.82–1.63(m,4h),1.55–1.43(m,2h)。esi-msm/z:387[m+h]+。
实施例22：4-[(4-环己氨基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ih)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环己基-5-甲基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(9)。得白色固体，收率：26％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.72(s,1h),10.93(s,1h),7.69–7.23(m,4h),7.05(d,j＝2.9hz,1h),7.19(s,2h),6.22(d,j＝2.9hz,1h),4.52–4.20(m,1h),4.18(s,3h),2.10–1.89(m,2h),1.84–1.67(m,2h),1.59–1.50(m,2h),1.49–1.24(m,4h)。esi-msm/z:401[m+h]+。
实施例23：4-[(4-环丙氨基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ii)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环丙基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(11)。得白色固体，收率：37％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.40(s,1h),7.83(d,j＝8.9hz,2h),7.53(d,j＝8.9hz,2h),7.24(d,j＝3.0hz,1h),7.15(s,2h),6.32(d,j＝3.0hz,1h),6.09(d,j＝7.9hz,1h),4.53–4.27(m,3h),1.33–1.28(m,3h),1.02–0.92(m,2h),0.87–0.63(m,2h)。esi-msm/z:373[m+h]+。
实施例24：4-[(4-环丁氨基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ij)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环丁基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(12)。得白色固体，收率：34％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.70(s,1h),7.63(d,j＝8.9hz,2h),7.43(d,j＝8.9hz,2h),7.21(d,j＝3.0hz,1h),7.17(s,2h),6.35(d,j＝3.0hz,1h),6.18(d,j＝7.9hz,1h),4.43–4.21(m,3h),1.94–1.32(m,9h)。esi-msm/z:387[m+h]+。
实施例25：4-[(4-环戊氨基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(ik)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环戊基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(13)。得白色固体，收率：36％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.50(s,1h),7.82(d,j＝8.9hz,2h),7.53(d,j＝8.9hz,2h),7.32(d,j＝3.0hz,1h),7.24(s,2h),6.47(d,j＝3.0hz,1h),6.21(d,j＝7.9hz,1h),4.52–4.26(m,3h),2.12–1.86(m,2h),1.74–1.63(m,4h),1.59–1.46(m,2h)，1.32–1.19(m,3h)。esi-msm/z:401[m+h]+。
实施例26：4-[(4-环己氨基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(il)
制备方法同实施例15。将2-氯-n-环丙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(1)替换为2-氯-n-环己基-5-乙基-5h-吡咯[3,2-d]嘧啶-4-胺(14)。得白色固体，收率：30％。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.21(s,1h),7.86(d,j＝8.9hz,2h),7.58(d,j＝8.9hz,2h),7.26(d,j＝3.0hz,1h),7.14(s,2h),6.25(d,j＝3.0hz,1h),6.13(d,j＝7.9hz,1h),4.63–4.28(m,3h),2.23–2.02(m,2h),1.96–1.68(m,2h),1.47–1.42(m,4h),1.39–1.20(m,5h)。esi-msm/z:415[m+h]+。
生物学试验实施例：
测试所得化合物在对人食管癌细胞ec109和kyse150的抑制率和(或)ic50值。
实验方法：
(1)细胞株：选用人食管癌细胞ec109、kyse150；
(2)将对数生长期的细胞消化后，吹打成单细胞悬液，接种于96孔培养板；ec109、kyse150均3×103细胞/孔。每孔加入含10％血清的rpmi-1640完全培养基至总体积为100μl，放在二氧化碳培养箱中于37℃进行培养；
(3)待培养至细胞贴壁后，加入不同浓度的待测化合物，继续培养72h；
(4)采用溴化四氮唑蓝(mtt)法测定化合物对两种食管癌细胞的增殖抑制能力；
(5)酶标仪检测各孔od值(检测波长：520nm)，并记录结果。按下述公式计算抑制率：
细胞生长抑制率＝(od对照-od给药-od空白)/(od对照-od空白)×100％。
实验结果：化合物在不同浓度(50或10μm)下对ec109、kyse150细胞的生长抑制率如表1所示。
表1.化合物对ec109和kyse150细胞的生长抑制率
实验结论：本发明实施例中制备的具有结构式(i)所示的化合物对人食管癌细胞(ec109、kyse150)具有显著的增殖抑制活性，此类化合物可用于抗肿瘤药物的制备，尤其是抗食管癌药物的制备，为临床治疗药物提供了新的选择。