的方法的一些实施例中，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽 与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至 少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性，
[0186] 3.在段落1所述的方法的一些实施例中，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽 包括SEQ ID NO:2的成熟多肽的10或9或8或7或6或5或4或3或2或1个氨基酸的 取代、缺失、和/或插入。
[0187] 4.在段落1-3中任一项所述的方法的一些实施例中，其中这种具有内切葡聚糖酶 活性的多肽是获得自粪壳菌属，优选获得自粪生粪壳菌。
[0188] 5.在段落1-4中任一项所述的方法的一些实施例中，其中SEQ ID NO:2的片段不 少于200个氨基酸，优选不少于220个氨基酸。
[0189] 6.在段落1-5中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法是在以下的温度 范围下进行的：15°C -65°C，优选15°C -45°C，更优选20°C -40°C，更优选25°C -35°C。
[0190] 7.在段落1-6中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法是在pH4至约pH 8,优选在从约pH 5至约pH 7. 5的范围，或在从约pH 5. 5至约pH7. 0的范围下进行。
[0191] 8.在段落1-7中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法应用于生物抛光 工艺。
[0192] 9.在段落1-8中任一项所述的方法的一些实施例中，其中在将该纺织品用一种具 有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽进行处理之前，该方法进一步包括使一种纺织品接触一 种过氧化氢酶的步骤。
[0193] 10.在段落9所述的方法的一些实施例中，其中使纺织品接触一种过氧化氢酶的 步骤，并且将纺织品用一种具有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽进行处理的步骤在相同的 浴中顺序地或同时地进行。
[0194] 11.在段落1-10中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法进一步包括将 一种染料添加到包含该纺织品的相同溶液中的步骤。
[0195] 12.在段落11所述的方法的一些实施例中，其中该染料和这种具有内切葡聚糖酶 活性的多肽被顺序地或同时地添加到相同的包含纺织品的浴中。
[0196] 13.在段落12所述的方法的一些实施例中，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多 肽是在该染料之前添加的。
[0197] 14.在段落11-13中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法进一步包括 在添加一种染料之后将该纺织品孵育10分钟至1小时、优选20-50分钟、更优选的30-40 分钟并且随后用盐补充该溶液的步骤。
[0198] 15.在段落8-14中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法是在以下的温 度范围下进行的：15°C -65°C，优选15°C -45°C，更优选20°C -40°C，更优选25°C -35°C。
[0199] 16.在段落8-15中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法是在pH 4至约 pH 8,优选在从约pH 5至约pH 7. 5的范围，或在从约pH 5. 5至约pH 7. 0的范围下进行。
[0200] 17.在段落14-16中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该盐时NaCl或 Na2SO40
[0201] 18.在段落11-17中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该染料是反应性染 料。
[0202] 19.在段落18所述的方法的一些实施例中，其中当在如在实例7中指定的条件下 将具有内切葡聚糖酶活性的多肽与5%黑色5的染料和80g/L Na2SO4-起使用时，该起球 记录保持为当使用相同的内切葡聚糖酶而不使用染料和盐时的至少80%、更优选85%。
[0203] 20.在段落1-7中任一项所述的方法的一些实施例中，其中该方法应用于生物磨 砂工艺。
[0204] 21.在段落20所述的方法的一些实施例中，其中该方法进一步包括选自下组的一 种或多种酶，该组由以下各项组成：过氧化氢酶、蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、半纤维素 酶、果胶酶、纤维素酶和过氧化物酶。
[0205] 22.在段落20所述的方法的一些实施例中，其中在将该纺织品用一种具有内切葡 聚糖酶活性的分离的多肽进行处理之前，该方法进一步包括对该织物进行脱浆的步骤。
[0206] 23.在以上段落中任一项所述的方法的一些实施例中，其中处理纺织品是制造该 纺织品。
[0207] 本发明进一步通过以下实例进行描述，这些实例不应被解释成限制本发明的范 围。
[0208] 实例
[0209] MM
[0210] 用作缓沖液和底物的化学品是至少试剂等级的商品。该染料反应性黑色5和反应 性红色195购于阿格斯（Argus)，中国。
[0211] 企质
[0212] COVE-山梨醇板是由182g山梨醇（西格马85529生物超99. 5%纯；西格玛-奥 德里奇丹麦A/S，哥本哈根，丹麦）、20g琼脂粉、20ml COVE盐溶液以及去离子水至1升组 成。该介质通过在15psi下高压杀菌15分钟来进行灭菌（细菌学分析手册，第8版，修订 A，1998)。将该介质冷却至60°C并且添加 IOmM的乙酰胺、15mM的CsCl、TRITON? X-100 (50 μl/500ml)。
[0213] COVE 盐溶液由 26g 的 MgS04 ·7Η20、268 的 KCl、26g 的 KH2P04、50ml 的 COVE 痕量金 属溶液以及去离子水至1升组成。
[0214] COVE 痕量金属溶液由以下组成：0. 04g 的 Na2B4O7 ·10Η20、0. 4g 的 CuSO2 ·5Η20、1. 2g 的 FeSO4 · 7Η20、0· 7g 的 MnSO4 · Η20、0· 8g 的 Na2MoO4 · 2H20、IOg 的 ZnSO4 · 7H20、以及去离子 水至1升。
[0215] 具有50mM磷酸盐的pH 6. 5缓冲液：5. 642g十二水合磷酸氢二钠 （NaJPO, · 12H20) 和5. 344g二水合磷酸二氢钠（NaH2PO4 ·2Η20)溶于1升去离子水中。对于包含盐的缓冲液， 将80g硫酸钠（Na2SO 4)或80g氯化钠（NaCl)与如h所沭的十二水合磷酸氢二钠 和二水合 磷酸二氢钠一起溶于IL去离子水中，并检测pH。
[0216] 具有50mM乙酸盐的pH 5. 0缓冲液：2. 873g乙酸钠和0. 901g乙酸溶于IL去离子 水中；
[0217] 具有50mM磷酸盐的pH 6. 0缓冲液：2. 2〇g十二水合磷酸氢二钠 （NaJPO, · 12H20) 和6. 84g二水合磷酸二氢钠（NaH2PO4 · 2H20)溶于IL去离子水中。
[0218] 具有50mM磷酸盐的pH 7. 5缓冲液：15. 05g十二水合磷酸氢二钠 （NaJPa · 12札0) 和I. 25g二水合磷酸二氢钠（NaH2PO4 · 2H20)溶于IL去离子水中。
[0219] 酶
[0220] Cellusoft CR? (-种单组分土生梭孢壳GH45内切葡聚糖酶产物，可商购自诺 维信A/S，描述于WO 96/29397中）
[0221] Biotouch XC 300_? (-种中性纤维素酶产物，可商购自AB酶，描述为WO 2010/076388 中的 SEQ ID NO: 13 毡状地丝霉（Geomyces pannorum)RF6293Cel45A)
[0222] 织物
[0223] 双罗纹棉（cotton interlock) :40S，漂白的，HM-A0008,可购自HM棉有限公司，广 州，中国。
[0224] Tffe
[0225] 重量损失确宙
[0226] 将这些小块布样在编号之前置于控制室（65% +/-5%湿度，21°C +/_1°C )中24小 时，通过分析天平称重（对于IOOg以下的样品）记录。在处理之后，将所有样品滚动干燥 (AEG，LAVATHERM 37700,德国）1小时并在如上提到的控制室中调节24小时。对于每份样 品，重量损失定义如下：
[0227]
【主权项】
1. 一种用于将纺织品用选自下组的一种具有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽进行处 理的方法，该组由以下各项组成： (a) -种与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%序列一致性的多肽； (b) -种由在中、中-高、高、或非常高严谨度条件下与（i)SEQ ID NO: 1的成熟多肽编 码序列或（ii) (i)的全长互补链杂交的多核苷酸编码的多肽； (c) 一种由与SEQ ID NO: 1的成熟多肽编码序列具有至少80%序列一致性的多核苷酸 编码的多肽； (d) -种在一个或多个（例如若干个）位置处包括一个取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO: 2的成熟多肽的变体；以及 (e) -个（a)、（b)、（c)或（d)的多肽的片段，该片段具有内切葡聚糖酶活性； (f) 其中该方法是在15°C -65°C的温度范围下进行。
2. 如权利要求1所述的方法，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽与SEQ ID NO: 2 的成熟多肽具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性。
3. 如权利要求1所述的方法，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽的10或9或8或7或6或5或4或3或2或1个氨基酸的取代、缺失、和 /或插入。
4. 如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽是获 得自粪壳菌属，优选地获得自粪生粪壳菌。
5. 如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中该方法是在以下的温度范围进行的： 15°C -65°C，优选20°C -60°C，更优选25°C -55°C，更优选25°C -50°C，并且甚至更优选 30°C -45°C。
6. 如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中该方法是在pH 4至约pH 8,优选在从约 pH 5至约pH 7. 5的范围，或在从约pH 5. 5至约pH 7. 0的范围内进行。
7. 如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中该方法应用于生物抛光工艺。
8. 如权利要求7所述的方法，其中该方法进一步包括使一种纺织品接触一种过氧化氢 酶的步骤，并且将纺织品用一种过氧化氢酶和用一种具有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽 进行处理的步骤是在相同的浴中顺序地或同时地进行。
9. 如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中该方法进一步包括使该纺织品接触一种 染料的步骤，其中该染料和这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽被顺序地或同时地添加到相 同的包含纺织品的浴中。
10. 如权利要求9所述的方法，其中这种具有内切葡聚糖酶活性的多肽是在该染料之 前添加的。
11. 如权利要求7-10中任一项所述的方法，其中该方法进一步包括在添加一种染料之 后将该纺织品孵育10分钟至1小时、优选20-50分钟、更优选30-40分钟并且随后用盐补 充该溶液的步骤。
12. 如权利要求11所述的方法，其中该盐是NaCl或Na 2S04。
13. 如权利要求9-12中任一项所述的方法，其中该染料是反应性染料。
14. 如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中该方法应用于生物磨砂工艺。
15.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中处理纺织品是制造该纺织品。
【专利摘要】本发明涉及尤其在生物磨砂和生物抛光工艺中，用于通过将纺织品用一种具有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽进行处理来制造纺织品的方法。
【IPC分类】C12N9-42, D06M16-00, C11D3-386
【公开号】CN104583394
【申请号】CN201380040665
【发明人】赖伟坚, 汤岚, K·M·施诺尔, L·安德森
【申请人】诺维信公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年8月16日