细菌纤维素混合液。用1ml的注射器吸取混合液滴入4mol/LNaOH溶液中，充分反应6h，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗涤，离心，真空干燥，得到细菌纤维素/壳聚糖微球微球；
[0031](2)固定化木聚糖酶的制备:
[0032]a.称取步骤(I)制备的细菌纤维素/壳聚糖微球lg，加入0.5%戊二醛10ml，缓慢搅拌30min，室温下静置过夜，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗去多余的戊二醛，留沉淀，离心、真空干燥，得含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖微球；
[0033]b.用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液溶解木聚糖酶，得浓度为0.25mg/ml的木聚糖酶溶液，量取木聚糖酶溶液10.0ml，加入步骤a制备的含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖微球1.0g，4°C交联反应12h，离心，沉淀，真空干燥，得固定化木聚糖酶；
[0034](3)对制备得到的细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的酶活力、酶活力回收率进行测定，测得细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的相对酶活力为78 %，酶活力回收率为70 %，连续使用5次后，酶活力仍保持80 %。
[0035]实施例2
[0036]本实施例的一种木聚糖酶的固定化方法，以细菌纤维素/壳聚糖复合微球为固定化载体，包括固定化载体的制备和固定化木聚糖酶的制备，步骤如下:
[0037](I)固定化载体的制备:
[0038]a.种子培养:将购自中国工业微生物菌种保藏管理中心的木醋杆菌CGMCCN0.1.1812斜面种子接入装有10ml HS种子培养液中，在30°C下转速为160rpm下振荡培养24h，得到种子培养液；
[0039]b.细菌纤维素的制备:以10% (v/v)的接种量接入装有HS发酵培养基的锥形瓶中，30°C下在培养箱中静置培养2d，形成细菌纤维素凝胶；
[0040]c.细菌纤维素的打浆:取步骤b中制备的细菌纤维素凝胶浸泡于0.lmol/1的NaOH溶液中，100°C煮沸6h，用0.lmol/1的醋酸溶液冲洗，至pH值为7.0，将细菌纤维素凝胶与4%醋酸溶液置于打浆机中，其中细菌纤维素湿重与4%醋酸溶液的体积之比为1:4，置于打浆机中，转速为lOOOr/min，处理时间为5min，得到细菌纤维素混悬液；
[0041]d.细菌纤维素/壳聚糖复合微球的制备:称取壳聚糖2g，加入步骤c制备的细菌纤维素混悬液25ml，用玻璃棒搅拌混合均匀，制备得到壳聚糖-细菌纤维素混合液。用1ml的注射器吸取混合液滴入4mol/L NaOH溶液中，充分反应6h，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗涤，离心，真空干燥，得到细菌纤维素/壳聚糖微球微球；
[0042](2)固定化木聚糖酶的制备
[0043]a.称取步骤(I)制备的细菌纤维素/壳聚糖复合微球2g，加入0.5%戊二醛20ml，缓慢搅拌30min，室温下静置过夜，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗去多余的戊二醛，留沉淀，离心、真空干燥，得含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖微球；
[0044]b.用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液溶解木聚糖酶，得浓度为2mg/ml的木聚糖酶溶液，量取木聚糖酶溶液20ml，加入步骤a制备的含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖复合微球lg，4°C交联反应12h，离心，沉淀，真空干燥，得固定化木聚糖酶；
[0045](3)对制备得到的细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的酶活力、酶活力回收率进行测定，测得细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的相对酶活力为80.5%,酶活力回收率为75.3%，连续使用5次后，酶活力仍保持83.6%。
[0046]实施例3
[0047]本实施例的一种木聚糖酶的固定化方法，以细菌纤维素/壳聚糖复合微球为固定化载体，包括固定化载体的制备和固定化木聚糖酶的制备，步骤如下:
[0048](I)固定化载体的制备:
[0049]a.种子培养:将购自中国工业微生物菌种保藏管理中心的木醋杆菌CGMCCN0.1.1812斜面种子接入装有10ml HS种子培养液中，在30°C下转速为160rpm下振荡培养24h，得到种子培养液；
[0050]b.细菌纤维素的制备:以5% (v/v)的接种量接入装有HS发酵培养基的锥形瓶中，30°C下在培养箱中静置培养4d，形成细菌纤维素凝胶；
[0051]c.细菌纤维素的打浆:取步骤b中制备的细菌纤维素凝胶浸泡于0.lmol/1的NaOH溶液中，100°C煮沸6h，用0.lmol/1的醋酸溶液冲洗，至pH值为7.0，将细菌纤维素凝胶与4%醋酸溶液置于打浆机中，其中细菌纤维素湿重与4%醋酸溶液的体积之比为1:4，置于打浆机中，转速为500r/min，处理时间为lOmin，得到细菌纤维素混悬液；
[0052]d.细菌纤维素/壳聚糖复合微球的制备:称取壳聚糖2g，加入步骤c制备的细菌纤维素混悬液25ml，用玻璃棒搅拌混合均匀，制备得到壳聚糖-细菌纤维素混合液。用1ml的注射器吸取混合液滴入4mol/L NaOH溶液中，充分反应6h，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗涤，离心，真空干燥，得到细菌纤维素/壳聚糖复合微球；
[0053](2)固定化木聚糖酶的制备:
[0054]a.称取步骤(I)制备的细菌纤维素/壳聚糖复合微球2g，加入0.5%戊二醛20ml，缓慢搅拌30min，室温下静置过夜，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗去多余的戊二醛，留沉淀，离心、真空干燥，得含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖复合微球；
[0055]b.用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液溶解木聚糖酶，得浓度为0.25mg/ml的木聚糖酶溶液，量取木聚糖酶溶液20ml，加入步骤a制备的含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖复合微球2g，4°C交联反应12h，离心，沉淀，真空干燥，得固定化木聚糖酶；
[0056](3)对步骤(2)制备得到的细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的酶活力、酶活力回收率进行测定，测得细菌纤维素/壳聚糖复合微球固定化木聚糖酶的相对酶活力为80%，酶活力回收率为75%，连续使用5次后，酶活力仍保持83%。
[0057]实施例4
[0058]本实施例的一种木聚糖酶的固定化方法，以细菌纤维素/壳聚糖复合微球为固定化载体，包括固定化载体的制备和固定化木聚糖酶的制备，步骤如下:
[0059](I)固定化载体的制备:
[0060]a.种子培养:将购自中国工业微生物菌种保藏管理中心的木醋杆菌CGMCCN0.1.1812斜面种子接入装有10ml HS种子培养液中，在30°C下转速为160rpm下振荡培养24h，得到种子培养液；
[0061]b.细菌纤维素的制备:以2% (v/v)的接种量接入装有HS发酵培养基的锥形瓶中，30°C下在培养箱中静置培养6d，形成细菌纤维素凝胶，用0.lmol/1的NaOH溶液煮沸处理6h后，用蒸馏水清洗至细菌纤维素凝胶的pH为7.0，将该细菌纤维素凝胶在105°C下干燥至恒重，得到细菌纤维素干膜；
[0062]c.细菌纤维素打浆:称取步骤b中制备的细菌纤维素干膜，细菌纤维干膜质量与4%醋酸溶液的质量/体积之比为1:40的比例置于打浆机中，转速为lOOOr/min，处理时间为5min，得到细菌纤维素混悬液；
[0063]d.细菌纤维素/壳聚糖复合微球的制备:称取壳聚糖3g，加入步骤c制备的细菌纤维素混悬液75ml，用玻璃棒搅拌混合均匀，制备得到壳聚糖-细菌纤维素混合液。用1ml的注射器吸取混合液滴入4mol/L NaOH溶液中，充分反应6h，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗涤，离心，真空干燥，得到细菌纤维素/壳聚糖复合微球；
[0064](2)固定化木聚糖酶的制备:
[0065]a.称取步骤(I)制备的细菌纤维素/壳聚糖复合微球1.5g，加入0.5%戊二醛15ml，缓慢搅拌30min，室温下静置过夜，用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液洗去多余的戊二醛，留沉淀，离心、真空干燥，得含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖复合微球；
[0066]b.用PH为6.0的Tris-HCl缓冲液溶解木聚糖酶，得浓度为1.5mg/ml的木聚糖酶溶液，量取木聚糖酶溶液15ml，加入步骤a制备的含交联醛基的细菌纤维素/壳聚糖复合微球1.5g，4°C交联反应12h，离心，沉淀，