基于红色荧光碳纳米材料的细胞探针的合成与应用的制作方法

文档序号:11935269阅读:来源:国知局

技术特征:

1.基于红色荧光碳纳米材料的细胞探针的合成与应用,其包括以下步骤:

(1)将实验所需要的有机试剂进行蒸馏纯化;

(2)合成亲水性的红色荧光碳纳米材料;

(3)将合成的亲水性的红色荧光碳纳米材料上分别连接上聚乙二醇、精氨酸、组氨酸、葡萄糖进行功能化;

(4)将功能化的红色荧光碳纳米材料修饰上叶酸和维生素H,细胞探针合成完毕;

(5)将培养好的不同细胞分别与细胞探针混合培养,利用细胞成像仪观察细胞成像情况。

2.基于红色荧光碳纳米材料的细胞探针的合成与应用,其特征是,所述合成与应用包括如下步骤:

(1)将1 g抗坏血酸溶解到盛有12 mL油酰胺的三口瓶中,将溶液加热到200℃,冷凝回流4 h,然后停止反应冷却至室温,用丙酮和三氯甲烷分别洗涤有机相,得到产品1,即疏水性的红色荧光碳纳米材料;

(2)通过声波降解法将20 mg聚顺丁烯二酸酐溶解到1 mL三氯甲烷中,加入纯化的产品1,声波处理直至得到澄清的溶液,然后蒸发除去三氯甲烷,将得到的固体分散到pH为9.5的盐酸盐缓冲溶液中,磁力搅拌5 h,得到产品2,即亲水性的红色荧光碳纳米材料;

(3)分别将1 mg聚乙二醇、精氨酸、组氨酸、葡萄糖加入到产品2中,加热到40℃,冷凝回流12 h,分别得到聚乙二醇、精氨酸、组氨酸、葡萄糖功能化的亲水性红色荧光碳纳米材料;

(4)取1 mg叶酸和1 mg N-羟基丁二酰亚胺溶解到2 mL N,N’-二甲基甲酰胺中,搅拌反应2 h,得到溶液3叶酸/N-羟基丁二酰亚胺;

(5)取1 mg维生素H、1 mg N-羟基丁二酰亚胺和0.5 mg N,N’-二环己基碳二亚胺溶解到2 mL N,N’-二甲基甲酰胺中,搅拌反应2 h,得到溶液4维生素H/N-羟基丁二酰亚胺;

(6)分别取1 mL步骤(3)得到的聚乙二醇、精氨酸、组氨酸、葡萄糖功能化的疏水性红色荧光碳纳米材料,分别加入30 μL步骤(4)所得的溶液3和30 μL步骤(5)所得的溶液4的混合溶液,室温下反应5 h,离心分离得到的悬浮液,将固体分散到pH为9.0的盐酸盐缓冲溶液中,保存在4℃的冰箱中,四种细胞探针合成完毕;

(7)将培养好的不同细胞分别与四种细胞探针混合培养,30 min后,利用细胞成像仪观察细胞成像情况。

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