专利名称：一种治疗痛经的中药组合物的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的检测方法，特别是涉及一种治疗痛经的中药组合物的检测方法。
背景技术：
痛经是指妇女在经期及其前后，出现小腹或腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每随月经周期而发，严重者可伴恶心呕吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，直接影响正常工作和生活。目前治疗痛经多采用止痛等西药治疗，长期每月服药，不仅易使机体产生抗药性及成瘾性，而且还会使肝、肾、胃等器官产生病变，副作用十分明显。另外，现有技术公开了一种治疗痛经的中药组合物及其制备方法，专利申请号为200510069315. 2，该产品为纯中药制剂，具有 活血化瘀、行气止痛的功效，对于治疗痛经，尤其是原发性痛经具有显著疗效，但缺少对该制剂的质量控制方法，不能保证临床应用的安全有效，不利于药品的标准化生产，也不符合现代化中药发展的趋势。该制剂的处方为丹参75重量份白苟 75重量份醋炎香附30重量份醋炙延胡索 50重量份炒川楝子25重量份小茴香 12. 5重量份蜜炙甘草 30重量份该制剂的制备方法为以上7味，取香附、小茴香浸泡6小时，水蒸气蒸馏提取挥发油，蒸馏后的挥发油用6倍量的￠-环糊精，于40°C条件下，采用饱和水溶液法包结后，干燥备用，药液滤过；取白芍以50%乙醇，提取二次，每次I小时，每次6倍量；延胡索以70%乙醇，提取三次，每次I小时，每次4倍量；提取液滤过，合并，回收乙醇；丹参以85%乙醇，提取二次，第一次I. 5小时，8倍量，第二次I小时，6倍量，提取液滤过，回收乙醇；丹参醇提后药渣与川楝子、甘草加水煎煮二次，每次I小时，6倍量，药液滤过；与上述四种药液合并，浓缩至相对密度60 65°C测为I. 35 I. 38，0. 08Mpa，60 70°C减压干燥，粉碎为细粉，力口糊精适量及香附与小茴香挥发油的￠-环糊精包结物，混匀，依照本领域常规技术，制成颗粒剂、片剂、胶囊剂。
发明内容
本发明的目的在于克服上述缺点，提供一种治疗痛经的中药组合物的检测方法，以保证药品的安全性和有效性，提高产品质量，便于药品的标准化、现代化生产。为了达到上述目的，本发明提供了一种治疗痛经的中药组合物的检测方法，该方法是通过如下技术方案实现的本组合物制剂的检测方法包括鉴别和含量测定所述组合物由如下原料药制成丹参 50-90重量份白苟50-90重量份醋炎香附15_45重量份醋炙延胡索30-70重量份炒川楝子15-45重量份小茴香10-30重量份蜜炙甘草20-50重量份；鉴别方法包括如下方法鉴别A、取组合物制剂研细，加乙醚超声处理，滤过，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮II A对照品，加醋 酸乙酯制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 ii I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以16-22 : I的为展开剂,展开,取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述苯-醋酸乙酯优选19 : I ;B、取组合物制剂研细，加乙醇超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙溶解，加中性氧化铝，在水浴上搅匀干燥，置于已处理好的中性氧化铝柱上，以1-2 1-2醋酸乙酯-甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一娃胶G薄层板上，以35-45 : 3-8 : 8-12 : 0. 1-0. 5的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸的比例优选为40 5 10 0. 2；C、取组合物制剂，研细，加石油醚超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取a-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以85-98 3-7 3-7的苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同荧光、颜色的斑点；喷以2，4_ 二硝基苯肼乙醇试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色；所述苯-醋酸乙酯-冰醋酸优选为92 : 5 : 5。D、取组合物制剂，研细，加甲醇超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干；残渣加水溶解，加浓氨试液调PH值为10，用乙醚提取，蒸干乙醚，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-13 6-10的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，置氨蒸气饱和的层析缸内，预饱和后，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述石油醚-醋酸乙酯的比例优选10 8. 5；含量测定包括如下方法E、丹参酮IIA的定量检测照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以85-95 8-12甲醇-水为流动相；检测波长为270nm ;理论板数按丹参酮IIA峰计算，应不低于2000 ;对照品溶液的制备精密称取丹参酮IIA对照品加甲醇得每Iml中含丹参酮IIA的溶液16ii g ;供试品溶液的制备取组合物制剂研细，加入甲醇超声处理20-40分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取供试品溶液各5iU，对照品溶液15 yl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含丹参以丹参酮IIA的量应不低于0. 75mg/g ；其中甲醇-水的比例优选90 : 10 ;F、芍药苷的定量检测照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；10-20 80-90的乙腈-水为流动相；检测波长为230nm ;理论板数按芍药苷峰计算，应不低于2500 ；对照品溶液的制备称取芍药苷对照品，加 甲醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取组合物制剂研细，40-60%乙醇超声处理15-35分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOiil，注入液相色谱仪，测定；所述乙腈-水的比例优选为15 85。本发明采用了专属性较高的高效液相色谱法对丹参酮IIA和芍药苷的含量进行测定及丹参、白芍、香附、延胡索的薄层色谱法进行定性鉴别，质量控制方法简单易行，准确可靠，精确度高。本发明能很好的控制该组合物的质量，保证用药的安全性，从而确保其临床疗效。实验例I :丹参的定量检测I.仪器与试剂惠普1050型高效液相色谱仪，DAD检测器，化学工作站及超声波清洗机(CX-250型250W 40KHz北京医疗设备厂)。流动相用水为双蒸馏水，甲醇为色谱纯。丹参丽II A对照品购自中国药品生物制品检定所2.色谱条件色谱柱(YWGC18 (250 X 4. 6mm, 10 y m)。柱温为室温，甲醇-水(90 10)为流动相，检测波长为270nm，理论塔板数按丹参酮II A计算，应不低于2000。3.试验条件的选择(I)提取溶剂及提取方法的考察根据文献及丹参酮II A的性质可知，丹参酮II A在脂溶性溶媒中有较好的溶解性能。取本发明适量，精密称定，加100倍溶剂，超声提取测定，试验结果见表I。表I提取溶剂考察结果
权利要求
1.一种治疗痛经的中药组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和含量测定方法 所述组合物由如下原料药制成 丹参50-90重量份白苟50-90重量份醋炎香附15-45重量份 醋炙延胡索30-70重量份炒川楝子15-45重量份小茴香10-30重量份蜜炙甘草20-50重量份 鉴别方法包括如下方法 鉴别 A、取组合物制剂研细，加乙醚超声处理，滤过，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮II A对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种 溶液各5 ii I,分别点于同一娃胶G薄层板上，以16-22 : I的为展开剂,展开,取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； B、取组合物制剂研细，加乙醇超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇提取，用水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙溶解，加中性氧化铝，在水浴上搅匀干燥，置于已处理好的中性氧化铝柱上，以1-2 1-2醋酸乙酯-甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以35-45 3-8 8-12 0. 1-0. 5的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； C、取组合物制剂，研细，加石油醚超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取a-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以85-98 3-7 3-7的苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同荧光、颜色的斑点；喷以2，4_ 二硝基苯肼乙醇试液，放置片刻，斑点渐变为橙红色； D、取组合物制剂，研细，加甲醇超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干；残渣加水溶解，加浓氨试液调PH值为10，用乙醚提取，蒸干乙醚，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-13 6-10的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，置氨蒸气饱和的层析缸内，预饱和后，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 含量测定包括如下方法 E、丹参酮IIA的定量检测 照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以85-95 8-12甲醇-水为流动相；检测波长为270nm ;理论板数按丹参酮II A峰计算，应不低于2000 ;对照品溶液的制备精密称取丹参酮IIA对照品加甲醇得每Iml中含丹参酮IIA的溶液16ii g ;供试品溶液的制备取组合物制剂研细，加入甲醇超声处理20-40分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取供试品溶液各5 yl，对照品溶液15 iU，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含丹参以丹参酮IIA的量应不低于0. 75mg/g ；其中甲醇-水的比例优选90 : 10 ； F、芍药苷的定量检测 照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；10-20 80-90的乙腈-水为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算，应不低于 2500 ； 对照品溶液的制备称取芍药苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取组合物制剂研细，40-60%乙醇超声处理15-35分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOiil，注入液相色谱仪，测定。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于鉴别A中苯-醋酸乙酯的比例优选19 I。
3.如权利要求I所述的方法，其特征在于鉴别B中所述氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸的比例优选为40 : 5 : 10 : 0. 2。
4.如权利要求I所述的方法，其特征在于鉴别C中所述苯-醋酸乙酯-冰醋酸优选为92 : 5 : 5。
5.如权利要求I所述的方法，其特征在于鉴别D中所述石油醚-醋酸乙酯的比例优选10 8. 5。
6.如权利要求I所述的方法，其特征在于芍药苷的定量检测中所述乙腈-水的比例优选为15 85。
全文摘要
本发明公开了一种治疗痛经的中药组合物的检测方法，该中药组合物原料药为丹参、白芍、醋炙香附、醋炙延胡索、炒川楝子、小茴香、蜜炙甘草。本发明采用了专属性较高的高效液相色谱法对丹参酮II A和芍药苷的含量进行测定及丹参、白芍、香附、延胡索的薄层色谱法进行定性鉴别，方法简单易行，准确可靠，精确度高。
文档编号G01N30/02GK102788862SQ201110129359
公开日2012年11月21日 申请日期2011年5月18日 优先权日2011年5月18日
发明者付建家, 付立家 申请人:北京亚东生物制药有限公司