一种霉菌毒素检测棒的制作方法

本发明涉及一种检测试纸，特别是一种霉菌毒素检测棒。

背景技术：

霉菌毒素是一种由真菌产生的次级有毒代谢产物，普遍存在于饲料与食物中，主要通过食物供应环节对人体或动物产生伤害，包括引起普通的炎症反应如肠胃病，改变巨噬细胞表型及DNA的损伤，甚至高度致癌性，并且会对人体或动物的生殖系统造成伤害，对儿童生长发育会有严重影响。霉菌毒素污染范围较广，可以是农作物如小麦、玉米，也可以是鲜活水产品，亦或者是日常生活中人们使用的牛奶、咖啡等。现有的对霉菌毒素的检测主要有色谱法、质谱法、LC-MS/MS等，这些方法虽然具有高的特异性和灵敏度，但普遍存在样品前处理复杂繁琐、耗时长、不适合现场操作等不足之处。

技术实现要素：

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种方便使用，快速灵敏，无需对样品进行复杂前处理，能够快速对样品中是否含有赭曲霉毒素进行检测，检测灵敏度较高，检测限量可1.4ng/mL的霉菌毒素检测棒。

本发明采用的技术方案如下：

本发明的一种霉菌毒素检测棒，包括外壳，所述外壳底部设有进样端，所述外壳内部设有检测区，所述进样端与检测区通过感应区相连，所述感应区内填充有少量感应团聚粒子，所述检测区内设有检测试纸。

由于采用了上述技术方案，通过进样端将样品采集，再经团聚粒子对霉菌毒素进行放大，最后通过检测试纸对霉菌毒素进行适配体筛选，从而实现快速灵敏的对赭曲霉毒素进行检测。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述感应区内设有两条通道，分别为通道一和通道二，所述通道一内存有团聚粒子A，所述通道二内存有团聚粒子B，所述团聚粒子A和团聚粒子B均通过淀粉胶黏接在通道壁上。

由于采用了上述技术方案，赭曲霉毒素经过团聚粒子将团聚粒子迅速团聚，从而实现对赭曲霉毒素放大，通过两种不同的团聚粒子，保证对毒素的团聚效果，避免漏检。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述进样端内设有吸样管，所述吸样管包括设于顶部的气囊，所述气囊与吸管相连，所述气囊由弹性材料制成，所述气囊内存有去离子水；所述吸样管底部设有两出口，所述两出口分别与通道一和通道二相契合。

由于采用了上述技术方案，通过吸样管前段对样品进行采集，挤压气囊即可将气囊中存储的去离子水将样品稀释，从而便于团聚粒子与赭曲霉毒素进行团聚，在将样品稀释后，静置10～15min再次按压气囊，将样品推送经过感应区，达到检测区，完成检测显色。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述检测试纸具有层状结构，所述检测试纸包括置于底部的基体，所述基体上方中间设有检测垫所述检测垫呈杯状，所述检测垫一侧设有防溢垫，所述检测垫另一侧设有浸样垫，所述检测垫上端边缘均覆于防溢垫和浸样垫上表面，所述防溢垫上表面覆有显色膜，所述显色膜与检测垫的上端边缘处于同一水平面上，所述显色膜与检测垫间隔，所述浸样垫上表面覆有吸样条，所述吸样条与感应区相连。

由于采用了上述技术方案，通过吸样条将样品液吸收后，再通过浸样垫吸收样品液，从而对样品液中的样品进行简单的分离，将较大体积的组织细胞等进行过滤，避免组织细胞对检测结果造成影响，同时经过浸样垫的浸润作用能够保证样本流过检测垫时的流速均匀，使得样本与适配体充分结合，混合均匀，再通过浸润作用最终流入显色膜，从而完成均匀显色，避免在显色膜上得到的测试结果出现颜色差异，同时保证检测精度和观测精度。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述团聚粒子A以纳米铜为内芯，表面均匀包裹有碳化细菌纤维素，所述团聚粒子B以纳米钴为内芯，表面均匀包裹有阿霉素。

由于采用了上述技术方案，团聚粒子的团聚效果良好，探测灵敏度高，同时团聚粒径大小适宜，不会颗粒过大在检测区被浸样垫过滤掉。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述检测垫表面均匀涂有适配体层，所述适配体层由质量份37份核酸适配体，22份氯金酸，27份柠檬酸三钠和16份丁沙胺醇组成，所述核算适配体序列为5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAAGAAATGCCACA-3’。

由于采用了上述技术方案，该适配体对赭曲霉毒素的亲和力高，链端具有链霉亲和素，能够迅速捕获赭曲霉毒素。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述检测试纸表面覆盖有隔膜，所述隔膜一端固定于基体下表面，所述隔膜的另一端于于吸样条前端固定连接。

由于采用了上述技术方案，隔膜由防水材料制成，从而保证空气中的水分子不会影响检测显色结果。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述显色膜由质量份13份纳米金粒子，０.７份凝血酶抗体，１份石英晶体，８份巯基硅烷偶联剂和８份叶酸制成，所述纳米金粒子的直径为16nm。

由于采用了上述技术方案，显色膜在普通状态呈红色，当检测到赭曲霉毒素时将变成蓝色，通过偶联剂将叶酸，石英晶体与纳米金粒子进行交联，能够加强纳米金粒子的显色效果，显色效果较现有技术能够提高10倍，颜色变化明显，提高检测极限。

本发明的一种霉菌毒素检测棒，所述基体由质量份45份SiO₂，12份4-(4-氨基苯氧基)吡啶，22份聚酯酰胺和16份N,N-二甲基丙烯酰胺制成，所述浸样垫和防溢垫由质量份72份丙烯乳酸，78份淀粉接枝聚丙烯腈，3份ZnO和9份聚乙烯醋酸乙烯酯组成，所述吸样条由30份淀粉接枝聚丙烯腈，47份乙二醇二甲基丙烯酸酯，16份聚丙烯酸甲酯，20份甲基丙烯酸甲酯，13份醋酸乙烯和7份十二烷基硫酸钠制成。

由于采用了上述技术方案，基体性质稳定，浸样垫和防溢垫的浸润性能良好，能够保证样本不会流溢，吸样条灵敏度高，能够迅速将样本吸收避免样品在感应区内存留，影响检测限量。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：

1、方便使用，快速灵敏，无需对样品进行复杂前处理，能够快速对样品中是否含有赭曲霉毒素进行检测，检测灵敏度较高，检测限量可1.4ng/mL。

2、能够对样品液中的样品进行简单的分离，将较大体积的组织细胞等进行过滤，避免组织细胞对检测结果造成影响，样本流过检测垫时的流速均匀，显色均匀，避免在显色膜上得到的测试结果出现颜色差异，同时保证检测精度和观测精度。

附图说明

图1是一种霉菌毒素检测棒结构示意图；

图2是检测试纸结构示意图。

图中标记：1为外壳，2为进样端，3为气囊，4为吸样管，5为感应区，6为检测区，7为基体，8为防溢垫，9为浸样垫，10为吸样条，11为显色膜，12为检测垫，13为隔膜。

具体实施方式

下面结合附图，对本发明作详细的说明。

为了使发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

如图1至图2所示，一种霉菌毒素检测棒，包括外壳1，外壳1底部设有进样端2，外壳1内部设有检测区6，进样端2与检测区6通过感应区5相连，感应区5内填充有少量团聚粒子，检测区6内设有检测试纸。感应区5内设有两条通道，分别为通道一和通道二，通道一内存有团聚粒子A，通道二内存有团聚粒子B，团聚粒子A和团聚粒子B均通过淀粉胶黏接在通道壁上。进样端2内设有吸样管4，吸样管4包括设于顶部的气囊3，气囊3与吸管相连，气囊3由弹性材料制成，气囊3内存有去离子水；吸样管4底部设有两出口，两出口分别与通道一和通道二相契合。

检测试纸具有层状结构，检测试纸包括置于底部的基体7，基体7上方中间设有检测垫12所述检测垫呈杯状，检测垫12一侧设有防溢垫8，所述检测垫12另一侧设有浸样垫9，所述检测垫12上端边缘均覆于防溢垫8和浸样垫9上表面，防溢垫8上表面覆有显色膜11，显色膜11与检测垫12的上端边缘处于同一水平面上，显色膜11与检测垫12间隔，浸样垫9上表面覆有吸样条10，吸样条10与感应区5相连。检测试纸表面覆盖有隔膜13，隔膜13一端固定于基体9下表面，隔膜13的另一端于于吸样条10前端固定连接。

团聚粒子A以纳米铜为内芯，表面均匀包裹有碳化细菌纤维素，团聚粒子B以纳米钴为内芯，表面均匀包裹有阿霉素。检测垫12表面均匀涂有适配体层，适配体层由质量份37份核酸适配体，22份氯金酸，27份柠檬酸三钠和16份丁沙胺醇组成，所述核算适配体序列为5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAAGAAATGCCACA-3’。 显色膜11由质量份13份纳米金粒子，０.７份凝血酶抗体，１份石英晶体，８份巯基硅烷偶联剂和８份叶酸制成，纳米金粒子的直径为16nm。基体由质量份45份SiO₂，12份4-(4-氨基苯氧基)吡啶，22份聚酯酰胺和16份N,N-二甲基丙烯酰胺制成，所述浸样垫和防溢垫由质量份72份丙烯乳酸，78份淀粉接枝聚丙烯腈，3份ZnO和9份聚乙烯醋酸乙烯酯组成，所述吸样条由30份淀粉接枝聚丙烯腈，47份乙二醇二甲基丙烯酸酯，16份聚丙烯酸甲酯，20份甲基丙烯酸甲酯，13份醋酸乙烯和7份十二烷基硫酸钠制成。

实施例2

团聚粒子A的制备方法：

将洗净的细菌纤维素浸渍在4%的硫酸铜溶液中12h后取出，其中细菌纤维素与硫酸铜物质的量的比为8：1，在搅拌条件下投入到氮气保护的硼酸钠溶液中，硼酸钠溶液将阿霉素完全浸泡，按照物质的量之比硫酸铜：硼酸钠：抗坏血酸=1：1：0.7向溶液中缓慢滴加硼酸钠，在35℃反应30min后，向溶液中加入抗坏血酸，静置1~2h后，将上述产物用去离子水漂洗数次，冷冻干燥过夜制备得到样品。

实施例3

团聚粒子B的制备方法如下：

将阿霉素浸渍在4%的氯化钴溶液中12h后取出，其中阿霉素与氯化钴物质的量的比为12：1，在搅拌条件下投入到氮气保护的氢氧化钠溶液中，氢氧化钠溶液将阿霉素完全浸泡，按照物质的量之比氯化钴：氢氧化钠：抗坏血酸=1：1：0.7向溶液中缓慢滴加氢氧化钠，在35℃反应30min后，向溶液中加入抗坏血酸，静置1~2h后，将上述产物用去离子水漂洗数次，冷冻干燥过夜制备得到样品。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。