[0179] 偏差均在±10%范围内，具体数据见表2。
[0180] 表2准确度实验结果
[0181]
[0182] 3、最低检测限（灵敏度）：
[0183] 用试剂盒中0μg/mL校准品作为待测样本，重复测定20次，得出20次测量结果的 RLU值（相对发光值），计算其平均值（M)和标准差（SD)，得出M+2SD所对应RLU值，根据 零浓度校准品与相邻校准品之间的浓度-RLU值结果进行两点回归拟合得出一次方程，将 M+2SD的RLU值带入上述方程中，求出对应的浓度值。
[0184] 按检测方案中最低检测限检测方法，重复3次实验，具体数据见表3。
[0185] 表3最低检测限实验结果
[0186]
[0187]
[0188] 4、精密度：
[018引批内：使用TG(l0±Wng/mL和（300±60)ng/mL两个浓度范围内的样本作为待测 样本。按说明书的操作方法，用化学发光测定仪器分别对待测样本进行10次重复测定。按 公式做计算重复性（CV)。
[0192] 子；10次测定浓度的平均值
[0193] Xi:每次测定浓度值
[0194] 批间：使用TG浓度为（300±60)ng/mL作为待测样本。使用3个不同批次的试剂 盒，按说明书的操作方法，用化学发光测定仪器对待测样本进行30次重复测定（每批次试 剂盒测定10次）。按公式（4)计算批间差（CV)。
[019引 CV=SD/ 万Xi00% .，，..，，.，.，，..，,，.…（4)
[0196] 式中：
[0197] 著;30次测定浓度的平均值
[019引SD: 30次测定浓度的标准差
[0199] 按检测方案中精密度检测方法检测精密度，具体数据见表4。
[0200] 表4精密度实验结果
[0201]
[020引实施例3、本发明提供的试剂盒与国内、外试剂盒比较
[0204] 1、本发明提供的试剂盒与国内、外试剂盒性能指标比对
[0205] 表5本试剂盒与国外试剂盒性能指标比对
[0206]
[0207] 2、本发明提供的试剂盒与国外试剂盒进行临床样本测值比对
[020引用本发明提供的试剂盒和贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司的检测试剂盒化学 发光法）试剂盒分别对96份人血清样品（患者知情）同时进行检测其检测结果见附图2， 采用本发明提供的试剂盒测得的血清TG浓度为横坐标，W贝克曼库尔特商贸（中国）有限 公司的TG检测试剂盒测定的结果为纵坐标作回归分析，相关方程为：y= 1. 0598X+2. 3965， 相关系数r为：0. 992。经统计学处理结果表明，本发明提供的试剂盒与国外试剂盒测得的 临床样本测值相关性良好。
【主权项】
1. 一种甲状腺球蛋白定量检测试剂盒，为1)或2): 1) 包括异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液和碱性磷酸酶标记的甲 状腺球蛋白单克隆抗体溶液； 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液和所述碱性磷酸酶标记甲 状腺球蛋白单克隆抗体溶液的溶剂均为抗试剂缓冲液； 所述抗试剂缓冲液按照如下方法制备：将溶液A、牛血清、马血清、羊血清、防腐剂混匀 得到抗试剂缓冲液； 所述溶液A由Na+、Mg2+、Zn2+、Trizmabase、动物血清白蛋白和水组成； 2) 包括所述异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体、所述碱性磷酸酶标记的 甲状腺球蛋白单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液。2. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于： 所述动物血清白蛋白为牛血清白蛋白，所述防腐剂为ProcLin-300 ; 所述抗试剂缓冲液中，所述溶液A、所述牛血清、所述马血清、所述羊血清、所述ProcLin-300 的配比为lOOOg:23-28ml:1. 5-2. 5ml:4· 0-5.Oml:0· 5-2.Oml; 所述溶液A中，所述Na+浓度为0. 1-lmol/L，所述Mg2+的浓度为lmmol/L，Zn2+的浓度 为0.lmmol/L,所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0. 2-1. 0%，所述Trizmabase浓度为 0.01-0. 5mol/L〇3. 根据权利要求1或2所述试剂盒，其特征在于： 所述抗试剂缓冲液中，所述溶液A、所述牛血清、所述马血清、所述羊血清、所述ProcLin-300 的配比为 1000g:25ml:2ml:4. 5ml:1ml; 所述溶液A中，所述Na+源于NaCl，所述NaCl浓度为0.lmol/L; 所述Mg2+源于MgCl2,所述MgCl^度为 1. 0mmol/L; 所述Zn2+源于ZnCL2,所述ZnCLj·^度为 0.lmmol/L; 所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0.5% ; 所述Trizmabase的浓度为 0·lmol/L〇4. 根据权利要求1-3中任一所述试剂盒，其特征在于： 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液由异硫氰酸荧光素标记的 甲状腺球蛋白单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球 蛋白单克隆抗体的浓度为〇. 1-0. 5μg/mL; 所述碱性磷酸酶标记甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液由碱性磷酸酶标记甲状腺球蛋白 单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述碱性磷酸酶标记甲状腺球蛋白单克隆抗体的浓 度为 0. 5-1μg/mL; 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体中的甲状腺球蛋白单克隆抗体 和所述碱性磷酸酶标记甲状腺球蛋白单克隆抗体中甲状腺球蛋白单克隆抗体不同。5. 根据权利要求1-4中任一所述试剂盒，其特征在于： 所述试剂盒还包括磁分离试剂； 所述磁分离试剂为将抗异硫氰酸荧光素抗体共价连接在磁珠表面，得到磁分离试剂； 所述抗异硫氰酸荧光素抗体为多克隆抗体； 所述抗异硫氰酸焚光素抗体和所述磁微粒的配比为30μg-200μg:lmg; 所述磁微粒的直径为0. 5-1. 5μm。6. 根据权利要求1-5中任一所述试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括校准品； 所述校准品由η个不同浓度的校准品溶液组成，所述校准品溶液由甲状腺球蛋白抗原 和校准品缓冲液组成，且所述甲状腺球蛋白抗原在所述校准品中为不同浓度； 所述校准品缓冲液由Na+、蛋白类保护剂、防腐剂、Trizmabase、动物血清和水组成，所 述Na+浓度为0. 1-lmol/L，所述蛋白类保护剂的质量百分含量为0.2-1.0%，所述防腐剂体 积百分含量为〇· 05-0. 2%，所述Trizmabase浓度为0· 01-0. 5mol/L，所述动物血清的体积 百分含量为0.05-1.0%。7. 根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于： 所述Na+源于NaCl，所述NaCl浓度为0· 10mol/L; 所述蛋白类保护剂为牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白质量百分含量为〇. 5 % ; 所述防腐剂为Proclin-300,所述Proclin-300体积百分含量为0. 1% ; 所述Trizmabase的浓度为 0·lmol/L; 所述动物血清为羊血清，所述羊血清体积百分含量为〇. 2%。8. 根据权利要求6或7所述的试剂盒，其特征在于： 所述校准品由η个不同浓度的校准品溶液组成，η小于等于6 ; 所述试剂盒还包括质控品、样本稀释液、清洗液和底物溶液； 所述质控品为2个不同浓度的校准品； 所述清洗液由吐温-20、氯化钠和浓度为0. 15Μ、pH为8. 0±0. 05的Tris-HCl缓冲液 组成，其中，所述吐温-20的体积百分含量为0. 04%，所述氯化钠的浓度为0. 25mol/L; 所述底物溶液由二氢吖啶和浓度为〇. 25M、pH为8. 0±0. 05的Tris-HCl缓冲液组成， 其中，所述二氢吖啶终浓度为〇. 25mg/mL; 所述样本稀释液由牛血清白蛋白、trizmabase和水组成，其中，所述牛血清白蛋白的 质量百分含量为〇· 2% -5%，所述trizmabase的浓度为0·lmol/L〇9. 一种制备权利要求1-8中任一所述的试剂盒的方法，包括如下步骤：将权利要求 1-8中任一所述试剂盒中8种组分均独立包装；再整体包装为试剂盒。10. 权利要求1-8中任一所述的试剂盒在甲状腺球蛋白定量检测中的应用； 或权利要求1-8中任一所述的试剂盒在制备甲状腺球蛋白定量检测产品中的应用； 或权利要求1-8中任一所述的试剂盒中8种组分在制备甲状腺球蛋白定量检测产品中 的应用； 或一种待测样本中甲状腺球蛋白定量检测方法，包括如下步骤： 1) 将权利要求1-8中任一所述的试剂盒中的校准品、质控品和待测样本分别与权利要 求1-8中任一所述的试剂盒中的异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液和 碱性磷酸酶标记甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液混匀，反应，得到免疫反应产物； 2) 将所述免疫反应产物与权利要求1-8中任一所述的试剂盒中的磁分离试剂混匀，反 应，得到反应产物，将所述反应产物中的沉淀与磁珠清洗液混悬，收集沉淀，即为磁分离产 物； 3) 将所述磁分离产物和权利要求1-8中任一所述的试剂盒中的底物溶液混勾，得到混 合产物，用化学发光仪检测所述混合产物的发光强度，通过发光强度计算待测样本中全量 程甲状腺球蛋白定量； 所述磁珠清洗液为将权利要求1-8中任一所述的试剂盒中清洗液与水按1:7混匀，得 到溶液； 或权利要求1-8中任一所述的试剂盒中磁分离试剂在甲状腺球蛋白定量检测中的应 用。
【专利摘要】本发明公开了一种甲状腺球蛋白的定量检测试剂盒。本发明提供了一种甲状腺球蛋白定量检测试剂盒，包括异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液、碱性磷酸酶标记的甲状腺球蛋白单克隆抗体溶液和磁分离试剂；本发明所采用的检测方法是磁微粒分离化学发光免疫检测，酶标记技术，磁分离技术和化学发光技术相结合，其操作方便、简单，反应条件温和，发光值稳定且受外界条件影响较小。相比于现有检测方法，本发明具有样本处理过程简单，检测成本低，检测快速，测试结果准确、重复性好等优点。
【IPC分类】G01N33/68
【公开号】CN105277717
【申请号】CN201510627200
【发明人】关锐, 郭健夫, 杨振军, 邢婉丽
【申请人】成都博奥新景医学科技有限公司, 博奥生物集团有限公司
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2015年9月28日