一种快速检测egfr抗体药物的抗药抗体的试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及免疫分析医学领域，具体为一种快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒。
【背景技术】
[0002]EGFR抗体类药物，如爱必妥，帕尼单抗等，均属于生物技术药物。作为异源性物质，EGFR抗体类药物，特别是鼠源性或嵌合性EGFR抗体药物，具有一定的免疫原性，给予到人体内时免疫原性会促使机体的免疫反应从而产生抗药性抗体(ant1-drug antibody, ADA)。ADA 一方面会使机体自发清除EGFR抗体药物，继而导致药物治疗失效；另一方面免疫系统通过ADA清除EGFR抗体药物的过程中可能会引发其它生物反应，从而导致副反应发生。因此，准确而快速地监测接受药物后患者的ADA水平是生物技术药物临床使用过程中必不可少的环节，为评估此类药物的免疫原性建立适当的ADA检测方法十分必要。ADA检测通常采用酶联免疫吸附检测技术(ELISA)进行分析。传统的ADA检测ELISA中，是将药物包被到微孔板上用于捕获，然后加入被测样品和种属抗体进行检测，该方法缺点是只能检测单一类型的ADA，如IgG类型或IgM型的ADA。桥式酶联免疫吸附法(Bridging-ELISA)则是较为先进的ADA检测方法，其原理是利用抗体分子含有2个以上抗原结合位点的特点，将外源性治疗药物(X)包被在酶标板上，随后同时加入针对药物的阳性多克隆抗体(ADAX-P)与生物素标记的外源性药物(B1tin-X)，充分反应并洗涤后加入链亲和素标记的过氧化物辣根酶(SA-HRP)，然后加入过氧化物辣根酶底物进行显色反应，最后用硫酸终止反应并读取光吸收值。这种方法在药物研究过程中专业高效，但在临床上针对用药患者时则效率很低:首先需要将样本送检验科，检验人员再经过标记检测获得结果，耗时较长，且样本运输过程中可能会降解，使检测结果受到影响。
【实用新型内容】
[0003]本实用新型所解决的技术问题在于提供一种用于快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0004]本实用新型所解决的技术问题采用以下技术方案来实现:
[0005]—种用于快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒，包括盒体以及盒盖，盒体底部设有与盒体尺寸相同的塑料托，所述塑料托上表面设有瓶托，用于放置样品处理瓶、酸解溶液试剂瓶、中和溶液试剂瓶，所述塑料托上还设有放置EGFR抗体药物包被的检测卡插槽，所述盒盖和塑料托均为双层设计，内部有放置低温冰袋的夹层，以保持试剂盒内溶液的稳定性。
[0006]有益效果
[0007]本实用新型试剂盒通过采用简便的检测卡和冰袋降温，省去了样本运输以及繁琐的试剂配制和反应过程，大大增加试剂盒使用的便利性，可在床旁或患者家中使用，避免了样本在运输过程中可能发生变化的缺点，提高了抗药抗体的检测效率和准确性。
【附图说明】
[0008]图1为本实用新型试剂盒结构示意图；其中
[0009]1:盒体；2:盒盖；3:塑料托；4:冰袋夹层；5:样品处理瓶；6:酸解溶液瓶；7:中和溶液瓶；8:检测卡卡槽；9:金标检测卡。
[0010]图2为金标检测卡结构示意图；其中
[0011]10:样品垫；11:金标垫；12:硝酸纤维素膜；13:检测线T ；14:质控线C ；15:吸水垫。
[0012]图3为检测结果判定示意图；其中
[0013]9:金标检测卡；16:上样区；17:观测区。
【具体实施方式】
[0014]为了使本实用新型的实现技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本实用新型。
[0015]如图1所示，一种用于快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒，包括盒体I以及盒盖2，盒体I底部设有与盒体I尺寸相同的塑料托3，所述塑料托3上放置样品处理瓶5、酸解溶液试剂瓶6、中和溶液试剂瓶7，所述的塑料托3上还设有插槽8，用于放置EGFR抗体药物包被的检测卡9，所述塑料托3和盒盖2均设有放置低温冰袋的夹层4。
[0016]所述如图2所示，检测卡由PVC板制成，检测卡的两端分别设有样品垫10和吸收垫15，中部设有硝酸纤维素膜检测层12。硝酸纤维素膜检测层12与样品垫10交界处，设有包被金标记的EGFR抗体药物(Au-X)的金标垫11，金标垫11 一端部分设置在样品垫I之下，另一端部分设置在硝酸纤维素膜检测层12之上。在与样品垫10延续的检测层12上，设有检测线T13和质控线C14，检测线13上包被有EGFR抗体药物(X)，质控线14上包被有抗EGFR抗体药物的阳性抗体(ADA-P)。金标垫11设置在样品垫10之下，与样品垫设有5mm的重叠区；金标垫11设置在硝酸纤维素膜检测层12之上，与硝酸纤维素膜检测层设有2_的重叠区。
[0017]使用本实用新型试剂盒检测EGFR抗药抗体的实施例
[0018]1.样本采集:指尖采血，滴于含有HJTA-K2抗凝剂的样品处理瓶中。
[0019]2.检测方法:
[0020]向样品处理瓶中，滴加5滴醋酸水解液，反应半小时后，再滴加入5滴Tris中和液，摇勾。然后将检测卡平放，取瓶中溶液，滴加4?5滴于检测卡的加样区16中(尽量滴加于加样区中部，以保证测试结果准确)，静置等待5分钟。在吸水材料的作用下，待检样品缓慢移动到检测区和质控区，膜反应体系启动。无论待检样本中有抗药抗体，质控区C处都应显现一条颜色条带，这是重要的判断标准，可以确定是否加入足够量的样品，层析过程是否正常，同时也可以作为判断检测卡是否合格的质控标准。
[0021]3.结果判定:
[0022]若待检样品中抗药抗体浓度高于检测阈值时，则样品中的EGFR抗药抗体与固定在膜上的检测区内的药物结合，因而在观测区17的T线处会出现一条红色检测带，表示阳性(+)结果，如图3.a所示。(注意:由于待检样品中抗药抗体的浓度有所不同，因而测试区内的颜色条带可能出现颜色深浅的现象。但在一定时间内不论测试区内的颜色条带颜色深浅均判定为阳性；若待检样品中抗药抗体浓度低于检测下限，则检测区内不会出现检测带，表示阴性(-)结果，即仅在质控区内出现一条颜色带，如图3.b所示。
[0023]若质控区未出现颜色条带，则检测过程失败。可能的原因为操作过程不正确、试剂盒已变质损坏或出现质量问题，如图3.c或3.d所示。
[0024]本实用新型通过采用金标检测卡和冰袋低温装置，加大了试剂盒的应用范围，便于临床上床旁检测，或者患者在家中自行使用，避免了样本在运输过程中可能发生变化的缺点，提高了抗药抗体的检测效率和准确性。
[0025]以上显示和描述了本实用新型的基本原理和主要特征和本实用新型的优点。本行业的技术人员应该了解，本实用新型不受上述实施例的限制，上述实施例中描述的只是说明本实用新型的结构，在不脱离本实用新型精神和范围的前提下，本实用新型还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本实用新型范围内。本实用新型的要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
【主权项】
1.一种快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒，其包括盒体以及盒盖，其特征是:盒体底部设有与盒体尺寸相同的双层塑料托，所述塑料托上表面设有瓶托，用于放置酸解溶液试剂瓶、中和溶液试剂瓶和HJTA-K2抗凝剂的检测小瓶，所述塑料托上还设有放置EGFR抗体药物包被的检测卡插槽，检测卡，所述检测卡由PVC板制成，检测卡的两端分别设有样品垫和吸收垫，中部设有硝酸纤维素膜检测层，硝酸纤维素膜检测层与样品垫交界处，设有包被金标记的EGFR抗体药物的金标垫，金标垫一端部分设置在样品垫之下，另一端部分设置在硝酸纤维素膜检测层之上，在与样品垫延续的检测层上，设有检测线和质控线，检测线上包被有EGFR抗体药物，质控线上包被有抗EGFR抗体药物的阳性抗体；所述盒盖与塑料托内还设有放置低温冰袋的夹层。
【专利摘要】本实用新型涉及免疫分析医学领域，具体为一种快速检测EGFR抗体药物的抗药抗体的试剂盒。该试剂盒包括盒体以及盒盖，其特征是：盒体底部设有与盒体尺寸相同的双层塑料托，所述塑料托上表面设有瓶托，用于放置酸解溶液试剂瓶、中和溶液试剂瓶和EDTA-K2抗凝剂的检测小瓶，所述塑料托上还设有放置EGFR抗体药物包被的检测卡插槽，所述盒盖与塑料托内还设有放置低温冰袋的夹层。本实用新型试剂盒通过采用简便的检测卡和冰袋降温，省去了样本运输以及繁琐的试剂配制和反应过程，大大增加试剂盒使用的便利性，可在床旁或患者家中使用，避免了样本在运输过程中可能发生变化的缺点，提高了抗药抗体的检测效率和准确性。
【IPC分类】G01N33/558
【公开号】CN205120720
【申请号】CN201520382279
【发明人】谢新遥, 欧伦, 王变珍, 王艳梅, 刘彪, 习娜娜
【申请人】军科正源（北京）药物研究有限责任公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年6月5日