专利名称：一种蛹虫草菌丝体的生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于生物学技术领域，具体涉及到ー种蛹虫草菌丝体的生产エ艺。
背景技术：
北冬虫夏草，又称蛹虫草，它是麦角菌科真菌冬虫夏草Cordycrpssinensis (Berk. ) Sacc寄生在幼虫蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体,是ー种传统的名贵滋补中药材，与天然人參、鹿茸并列为三大滋补品。它药性温和，一年四季均可食用，老、少、病、弱、虚者皆宜，比其他种类的滋补品有更广泛的药用价值。自古以来，人们都把其作为滋补品和药用品。天然的野生冬虫夏草主要生长在高海抜、高寒地区，生长环境的构成十分苛刻和复杂，加之人们对虫草的需求量不断増加及不合理的采挖，致使天然的冬虫夏草自然资源逐步減少。因此，为了解决药源，科技人员不得不通过人工栽培蛹虫草来满足市场需求，但多少年来，人工栽培的蛹虫草生产エ艺复杂、生产周期长、产量低等一直困扰着人们。通过科研工作者的努力，一种全新的蛹虫草产品——蛹虫草菌丝体开发出来了，这种菌丝体就是使用生物深层发酵技术获得的。安徽农业大学曾经对蛹虫草菌丝体进行了有效成分的分析，其结果表明菌丝体中氨基酸种类和冬虫夏草生药一致，但氨基酸总量和必需氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药，必需氨基酸占总氨基酸的比例也高于后者，必需氨基酸中苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸的含量更远远高于后者，菌丝体中粗蛋白、总糖及甘露醇的含量均高于冬虫夏草生药；菌丝体的脂肪酸组成中，不饱和脂肪酸占脂肪酸组成的85. 38%，其中亚油酸、亚麻酸等多价不饱和脂肪酸占脂肪酸组成的58. 87%，而亚油酸的含量占整个脂肪酸组成的一半以上(51.04% );发酵菌丝体还含有丰富的对人体健康非常重要的Zn、Fe、Ca等金属元素，尤以Ca的含量为高。用生物深层发酵技术来生产蛹虫草菌丝体，其生产周期短、エ艺简单、生产效率高、稳定等特点，是人工培养蛹虫草产品的主要发展方向。现有的技术中，专利申请号为02134573. 2的巴西虫草菌丝体深层发酵培养方法及专利申请号为93104709. 9的虫草菌丝发酵生产エ艺，都是使用价格昂贵的发酵罐进行培养，发酵条件高，培养基所使用原料复杂、造价高。专利申请号为01141350. 6的ー种冬虫草菌粉类绿色饲料添加剂采用的是固体发酵，生产エ艺简单，但把菌丝培养好需要大概2个月的时间，生产周期长。上述エ艺所生产出来的菌丝体生理性能都不够成熟，不含有虫草特有的虫草素、S0D、虫草多糖等高活性物质。
发明内容
本发明的目的在于克服现有的技术不足而通过调整生产エ艺及配方来改变现有技术中使用价格昂贵的发酵罐导致发酵条件高造价高、液体菌种培养条件高及培养基使用原料复杂等缺点；所提供的エ艺是ー种液体菌种在培养时不用造价昂贵的发酵罐，而是使用旋转式摇床进行培养；使用的原料抛开价格昂贵的矿物元素，大多使用易得、廉价的农作物下脚料；整个エ艺模式培养条件简单、周期短、效率高、稳定等。重要的是菌丝体通过培养至转色后使其生理性能成熟，含有虫草特有的虫草素、SOD、虫草多糖等高活性物质。本发明是通过以下技术方案来实现的I、试管母种的配制方法(I)培养基配比马铃薯100克，玉米粉15克，黄豆粉12克，白糖20克，蚕蛹粉15克，琼脂18克，水1000毫升 ；(2)配制エ艺将马铃薯刨皮后对1000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、白糖、蚕蛹粉、琼脂，然后将溶液加热至沸腾后分装到试管中，分装量为试管的1/4 ；将分装好的试管放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下維持消毒40分钟；把消好毒的试管摆放、冷却成斜面试管；(3)转管筛选符合エ业化生产、菌丝生长旺盛、色泽正常并无感染的ー级蛹虫草斜面母种，在无菌环境下转接入消毒好的斜面试管，接入种块大小为0. 3 0. 5cm2 ；(4)培养把转接好种的试管放置在温度为18 22で、相対湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天；(5)转色当试管里的培养基面长满菌丝时，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌丝转为桔红色。2、液体菌种培养基的配制方法(I)培养基的配比马铃薯1000克，玉米粉50克，黄豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蚕蛹粉150克，水10000毫升；(2)配制エ艺将马铃薯刨皮后对10000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蚕蛹粉，然后将溶液加热至沸腾后分装到到耐高温高压的透明玻璃瓶中，装入量为容具实际容量的一半，然后用棉花将瓶ロ塞紫；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下維持消毒60分钟。3、液体菌种的培养方法(I)接种把消好毒的瓶装液体培养基在无菌环境下接入转过色的试管母种，每瓶接入4 6块菌块，并静止培养3 5天；(2)培养把菌种萌发好、无污染的瓶装液体培养基移到旋转式摇床进行动态培养，摇床旋转速度为150 300转/分，摇床的转动使液体培养基也随之转动，菌种在液体培养基的转动及培养基里面的渣块碰撞下不断的被分撕成若干个菌球(片、丝)，3天后获得有丰富菌球(片、丝)的液体菌种。4、固体菌丝体的配制方法(I)培养基的配比大米30斤、米糠30斤、麸皮30斤、玉米粉3斤、黄豆粉3斤、糖4斤、水130斤；(2)将上述各种物料混合均匀后分装到塑料袋里，分装量为塑料袋实际容量的一半，然后扎紧袋ロ ；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下維持消毒90分钟；(3)把消好毒的袋装培养基在无菌环境下接入培养好的液体菌种，液体菌种的接入量为固体料的3 5% ；
(4)把接好种的袋装培养基放置在温度为18 22°C、相対湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天；(5)当袋里的培养基被菌丝吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌丝转为桔红色。5、菌丝体的处理方法将培养至转色的菌丝体在60°C环境下自然或机械烘干至固体物含水量在10%以下，即得到优质的蛹虫草菌丝体。与现有的技术相比，本发明既有如下优点 1、本发明使用的原料简单、易购、成本低。2、本发明使用的容具亦简单、易购、成本低。3、本发明采用旋转式摇床进行液体菌种培养，同时液体菌种在培养过程不需多级培养，不但缩短生产周期，同时也降低了因多级转接菌种培养而容易感染之风险。4、本发明所培养的是菌丝体是通过培养至转色后使其生理性能成熟，含有虫草特有的虫草素、S0D、虫草多糖等高活性物质。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明的方法进ー步说明。ー种蛹虫草菌丝体的生产エ艺，具体实施方式
如下I、试管母种的配制方法(I)培养基配比马铃薯100克，玉米粉15克，黄豆粉12克，白糖20克，蚕蛹粉15克，琼脂18克，水1000毫升；(2)配制エ艺将马铃薯刨皮后对1000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、白糖、蚕蛹粉、琼脂，然后将溶液加热至沸腾后分装到试管中，分装量为试管的1/4 ；将分装好的试管放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下維持消毒40分钟；把消好毒的试管摆放、冷却成斜面试管；(3)转管筛选符合エ业化生产、菌丝生长旺盛、色泽正常并无感染的ー级蛹虫草斜面母种，在无菌环境下转接入消毒好的斜面试管，接入种块大小为0. 3 0. 5cm2 ；(4)培养把转接好种的试管放置在温度为18 22で、相対湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天；(5)转色当试管里的培养基面长满菌丝时，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌丝转为桔红色。2、液体菌种培养基的配制方法(I)培养基的配比马铃薯1000克，玉米粉50克，黄豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蚕蛹粉150克，水10000毫升；(2)配制エ艺将马铃薯刨皮后对10000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蚕蛹粉，然后将溶液加热至沸腾后分装到到耐高温高压的透明玻璃瓶中，装入量为容具实际容量的一半，然后用棉花将瓶ロ塞紧；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下維持消毒60分钟。3、液体菌种的培养方法
(I)接种把消好毒的瓶装液体培养基在无菌环境下接入转过色的试管母种，每瓶接入4 6块菌块，并静止培养3 5天；(2)培养把菌种萌发好、无污染的瓶装液体培养基移到旋转式摇床进行动态培养，摇床旋转速度为150 300转/分，摇床的转动使液体培养基也随之转动，菌种在液体培养基的转动及培养基里面的渣块碰撞下不断的被分撕成若干个菌球(片、丝)，3天后获得有丰富菌球(片、丝)的液体菌种。
4、固体菌丝体的配制方法(I)培养基的配比大米30斤、米糠30斤、麸皮30斤、玉米粉3斤、黄豆粉3斤、糖4斤、水130斤；(2)将上述各种物料混合均匀后分装到塑料袋里，分装量为塑料袋实际容量的一半，然后扎紧袋ロ ；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121 °C的高压、高温条件下維持消毒90分钟；(3)把消好毒的袋装培养基在无菌环境下接入培养好的液体菌种，液体菌种的接入量为固体料的3 5% ；(4)把接好种的袋装培养基放置在温度为18 22°C、相対湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天；(5)当袋里的培养基被菌丝吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌丝转为桔红色。5、菌丝体的处理方法将培养至转色的菌丝体在60°C环境下自然或机械烘干至固体物含水量在10%以下，即得到优质的蛹虫草菌丝体。
权利要求
1.一种蛹虫草菌丝体的生产工艺，其特征在于试管母种的配制方法如下 (1)培养基配比马铃薯100克，玉米粉15克，黄豆粉12克，白糖20克，蚕蛹粉15克，琼脂18克，水1000毫升； (2)配制工艺将马铃薯刨皮后对1000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、白糖、蚕蛹粉、琼脂，然后将溶液加热至沸腾后分装到试管中，分装量为试管的1/4 ;将分装好的试管放置于高压容器 里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下维持消毒40分钟；把消好毒的试管摆放、冷却成斜面试管； (3)转管筛选符合工业化生产、菌丝生长旺盛、色泽正常并无感染的一级蛹虫草斜面母种，在无菌环境下转接入消毒好的斜面试管，接入种块大小为0. 3 0. 5cm2 (4)培养把转接好种的试管放置在温度为18 22°C、相对湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天； (5)转色当试管里的培养基面长满菌丝时，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天，菌丝转为桔红色。
2.根据权利要求I所述的一种蛹虫草菌丝体的生产工艺，其特征在于液体菌种培养基的配制方法如下 (1)培养基的配比马铃薯1000克，玉米粉50克，黄豆粉120克，面粉100克，白糖200克，酵母粉(膏)80克，蚕蛹粉150克，水10000毫升； (2)配制工艺将马铃薯刨皮后对10000毫升水打成浆，再依次按量添加入玉米粉、黄豆粉、面粉、白糖、酵母粉(膏)、蚕蛹粉，然后将溶液加热至沸腾后分装到到耐高温高压的透明玻璃瓶中，装入量为容具实际容量的一半，然后用棉花将瓶口塞紧；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下维持消毒60分钟。
3.根据权利要求I所述的一种蛹虫草菌丝体的生产工艺,其特征在于液体菌种的培养方法如下 (1)接种把消好毒的瓶装液体培养基在无菌环境下接入转过色的试管母种，每瓶接入4 6块菌块，并静止培养3 5天； (2)培养把菌种萌发好、无污染的瓶装液体培养基移到旋转式摇床进行动态培养，摇床旋转速度为150 300转/分，摇床的转动使液体培养基也随之转动，菌种在液体培养基的转动及培养基里面的渣块碰撞下不断的被分撕成若干个菌球(片、丝)，3天后获得有丰富菌球(片、丝)的液体菌种。
4.根据权利要求I所述的一种蛹虫草菌丝体的生产工艺,其特征在于固体菌丝体的配制方法如下 (1)培养基的配比大米30斤、米糠30斤、麸皮30斤、玉米粉3斤、黄豆粉3斤、糖4斤、水130斤； (2)将上述各种物料混合均匀后分装到塑料袋里，分装量为塑料袋实际容量的一半，然后扎紧袋口 ；接下来放置于高压容器里在I. 5公斤/cm2压力、温度为121°C的高压、高温条件下维持消毒90分钟； (3)把消好毒的袋装培养基在无菌环境下接入培养好的液体菌种，液体菌种的接入量为固体料的3 5% ； (4)把接好种的袋装培养基放置在温度为18 22°C、相对湿度为75 85%的暗光环境下培养4 5天； (5)当袋里的培养基被菌丝吃透后，即在100 200勒克斯的光度下曝光3 4天,菌丝转为桔红色。
5.根据权利要求I所述的一种蛹虫草菌丝体的生产工艺,其特征在于菌丝体的处理方法如下 将培养至转色的菌丝体在60°C环境下自然或机械烘干至固体物含水量在10%以下，即得到优质的蛹虫草菌丝体。
全文摘要
本发明公开了一种蛹虫草菌丝体的生产工艺，它主要包括试管母种的配制、液体菌种的培养基配制及培养方式、菌丝体的培养基配制及培养方式等工序。本发明主要解决的是通过调整配方及工艺来改变现有技术中培养基使用原料复杂、造价高及液体菌种培养条件高等缺点；菌丝体通过培养至转色后，使其主要成分、药理与天然蛹虫草更接近。该工艺方法简单、生产综合成本底，可进行大规模生产，具有较高的开发价值。
文档编号C05G1/00GK102612985SQ20121006986
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月2日 优先权日2011年8月29日
发明者何寒, 吴烈秋 申请人:何寒, 吴烈秋