一种细胞保存液及其制备方法和使用方法与流程

文档序号:11072967阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种细胞保存液,为超纯水配制的溶液,其特征在于:

该溶液为多聚甲醛保存液,溶液中还包括如下浓度范围的组分:

戊二醛 0.4-0.8wt%

枸橼酸钾 0.05-0.1mol/L

双乙酸钠 0.035-0.15mol/L

六水氯化镁 0.1-0.3mol/L

氯化钠 0.08-0.4mol/L

α-硫辛酸 0.003-0.005mol/L

海藻糖 0.08-0.12mol/L

苦参碱 3-5mg/L

所述多聚甲醛保存液的制备方法为:将多聚甲醛溶解于30-40℃氢氧化钠水溶液中,用超纯水定容制成8wt%的多聚甲醛溶液,然后搅拌滴入0.2-0.3%v/v的焦炭酸二乙酯,持续搅拌至溶液清亮,然后加入PB缓冲液至多聚甲醛质量百分含量为4wt%;

所述细胞保存液的pH值为7.1-7.4,渗透压为290-315mmol/L。

2.如权利要求1所述细胞保存液,其特征在于:所述多聚甲醛保存液制备过程中使用的氢氧化钠水溶液浓度为5-10wt%。

3.如权利要求1所述细胞保存液,其特征在于:所述PB缓冲液为0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4以体积比1:1.5-4混合配制而成。

4.如权利要求1所述细胞保存液,其特征在于:所述细胞保存液还包括0.1-0.2wt/L的氨基酸。

5.如权利要求4所述细胞保存液,其特征在于:所述氨基酸为甘氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸中的一种或多种。

6.如权利要求1所述细胞保存液,其特征在于:所述细胞保存液中所用原料为分析纯。

7.一种制备如权利要求1-6任一所述细胞保存液的方法,其特征在于包括如下步骤:

步骤一:按照保存液配方称取多聚甲醛保存液及其他原料;

步骤二:将其他原料倒入多聚甲醛保存液中,搅拌均匀,利用0.2mol/L的NaH2PO4和/或0.2mol/L的Na2HPO4将pH值调整至7.1-7.4;

步骤三:将步骤二中制备得到的溶液灭菌,即得到所需细胞保存液。

8.一种细胞的保存方法,其特征在于:所述方法是利用如权利要求1-6所述细胞保存液密封静置保存。

9.如权利要求8所述细胞保存方法,其特征在于:所述细胞为口腔细胞,细胞浓度为105-108个/ml。

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