一种组培金线莲培养基及其制备方法和应用_2

文档序号:9894477阅读:来源:国知局
br>[0050] 其中,食用菌罐藏加工预煮液的制备方法如下:
[0051] a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水;
[0052] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离屯、,离屯、机的转速 枉制在11500巧m,罔心溫度为15 C ,罔心时间为IOmin,罔心之后取上清液;
[0053] C.将所得的上清液利用降膜蒸发器,降膜蒸发浓缩,得浓缩液;
[0054] d.在浓缩液中添加变性剂,对浓缩液进行变性,其中所述的变性剂为80%的乙醇, 且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为2:1;
[0055] e.对变性后的浓缩液进行过滤,收集滤液;
[0056] f.将滤液进行旋转蒸发除去乙醇;
[0057] g.将旋转蒸发后所得的溶液利用5K的滤膜进行切向流过滤,收集滤出液;
[0058] h.将步骤g中所得的滤出液进行旋转蒸发浓缩,浓缩至溶液折光率达到35%即可。
[0059] 2. IL组培金线莲的有机培养基(MS+1000化的食用菌罐藏加工预煮液巧Og薦糖+ 250g香蕉+?琼脂+2. Og活性炭)的制备,每1000毫升的有机培养基制备步骤如下:
[0060] (1)制备食用菌罐藏加工预煮液,并量取1000 iiL的食用菌罐藏加工预煮液待用;
[0061] (2)按照配制1*MS基本培养基所需的各种母液的体积,依次量取:
[0062] MS大量元素母液SOmL
[0063] MS微量元素母液5mL
[0064] MS铁盐母液 5mL
[0(?日]MS有机物母液 5mL待用;
[0066] (3)将步骤(1)中量取的食用菌罐藏加工预煮液与步骤(2)中量取的MS培养基母液 进行混合后溶解于蒸馈水中;
[0067] (4)称取250g香蕉W及2.Og活性炭,并将香蕉娠成泥后加入步骤(3)中所得的溶液 中,揽拌混匀,之后加入称好的活性炭,揽拌均匀;
[006引(5)在烧杯中加入300mL的蒸馈水,将蒸馈水加热至90°C后加入称好的Sg琼脂,边 揽拌边加热至沸腾后琼脂溶解,待琼脂溶解之后,继续加入称好的50g薦糖,边揽拌边加热 至薦糖溶解,然后将得到的琼脂与薦糖的混合溶液加入步骤(4)所得的混合溶液中,揽拌均 匀后加蒸馈水定容至1000毫升并加入0.5mol/L的NaO聞尋PH值调至6.0;
[0069] (6)将步骤(5)所得到的培养基分装于组培瓶中,进行高溫高压灭菌,之后冷却凝 固即可,其中高溫高压灭菌溫度控制在125°C,压力控制在115千帕,灭菌时间为20分钟。
[0070] 其中,食用菌罐藏加工预煮液的制备方法如下:
[0071] a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水;
[0072] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离屯、,离屯、机的转速 枉制在12000巧m,罔心溫度为20 C ,罔心时间为15min,罔心之后取上清液;
[0073] C.将所得的上清液利用降膜蒸发器,降膜蒸发浓缩,得浓缩液;
[0074] d.在浓缩液中添加变性剂,对浓缩液进行变性,其中所述的变性剂为80%的乙醇, 且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为3:1;
[0075] e .对变性后的浓缩液进行过滤,收集滤液;
[0076] f.将滤液进行旋转蒸发除去乙醇;
[0077] g.将旋转蒸发后所得的溶液利用8K的滤膜进行切向流过滤,收集滤出液;
[0078] h.将步骤g中所得的滤出液进行旋转蒸发浓缩,浓缩至溶液折光率达到50%即可。
[0079] 3. IL组培金线莲的有机培养基(1/4*MS+10化的食用菌罐藏加工预煮液+IOg薦糖+ SOg香蕉+6g琼脂+1.Og活性炭)的制备,每10毫升的有机培养基制备步骤如下:
[0080] (1)制备食用菌罐藏加工预煮液,并量取10化的食用菌罐藏加工预煮液待用;
[0081] (2)按照配制1/4*MS基本培养基所需的各种母液的体积,依次量取:
[0082] MS大量元素母液 12.5mL
[0083] MS微量元素母液1.25mL
[0084] MS 铁盐母液 1.25mL
[00化]MS有机物母液 1.25mL待用;
[0086] (3)将步骤(1)中量取的食用菌罐藏加工预煮液与步骤(2)中量取的MS培养基母液 进行混合后溶解于蒸馈水中;
[0087] (4)称取50g香蕉W及1. Og活性炭,并将香蕉娠成泥后加入步骤(3)中所得的溶液 中,揽拌混匀,之后加入称好的活性炭,揽拌均匀;
[008引(5)在烧杯中加入250mL的蒸馈水,将蒸馈水加热至85 °C后加入称好的6g琼脂,边 揽拌边加热至沸腾后琼脂溶解,待琼脂溶解之后,继续加入称好的IOg薦糖,边揽拌边加热 至薦糖溶解,然后将得到的琼脂与薦糖的混合溶液加入步骤(4)所得的混合溶液中,揽拌均 匀后加蒸馈水定容至1000毫升并加入0.1mol/L的肥1将PH值调至5.5;
[0089] (6)将步骤(5)所得到的培养基分装于组培瓶中,进行高溫高压灭菌,之后冷却凝 固即可,其中高溫高压灭菌溫度控制在122°C,压力控制在113千帕,灭菌时间为18分钟。
[0090] 其中,食用菌罐藏加工预煮液的制备方法如下:
[0091] a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水;
[0092] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离屯、,离屯、机的转速 枉制在12500巧m,罔心溫度为25 C ,罔心时间为20min,罔心之后取上清液;
[0093] C.将所得的上清液利用降膜蒸发器,降膜蒸发浓缩,得浓缩液;
[0094] d.在浓缩液中添加变性剂,对浓缩液进行变性,其中所述的变性剂为80 %的乙醇, 且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为6:1;
[00M] e.对变性后的浓缩液进行过滤,收集滤液;
[0096] f.将滤液进行旋转蒸发除去乙醇;
[0097] g.将旋转蒸发后所得的溶液利用IOK的滤膜进行切向流过滤,收集滤出液;
[0098] h.将步骤g中所得的滤出液进行旋转蒸发浓缩,浓缩至溶液折光率达到55%即可。
[0099] 按照上述制备方法或原理,制备W下60组(Al~A20;B1~B20;C1~C20)培养基(每 种培养基的体积均为1L):
[0100] 一、W〇*MS,l/4*MS,l/巧MS,MS分为四大组处理,食用菌罐藏加工预煮液的取量分 别为化L,25化^ 50化L,1000化,200化L,另外薦糖30g、香蕉lOOg、琼脂7g、1.5g活性炭。其中 0*MS表示未加入基本培养基母液。
[0101] ( -)〇*MS 处理
[0102] Al :0*MS+化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0103] A2:0*MS+25化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0104] A3:0*MS+50化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭 [01化]A4: 0*MS+1000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0106] A5:0*MS+2000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0107] (二)1/4*MS 处理
[0108] A6:1/4*MS+化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0109] A7: l/4*MS+25化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0110] A8: l/4*MS+50化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0111] A9:1/4*MS+1000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0112] A10: l/4*MS+2000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0113] (S)1/2*MS 处理
[0114] All: l/2*MS+0化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0115] A12: l/2*MS+25化L磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0116] A13: l/2*MS+500化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭
[0117] A14:1/2*MS+1000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g活性炭 [011引 A15: l/2*MS+2000化磨茹罐藏预煮液+30g薦糖+100g香蕉巧g琼脂+1.5g
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