专利名称：离子液体溶胶－凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法
技术领域：
本发明属于离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法技术背景溶胶-凝胶包埋法是迄今应用最普遍的固定化酶的方法，利用这种方法可在低温下对有机硅烷化物水解、聚合形成网络状的膜，制得的含酶凝胶膜具有物理刚性，化学惰性和可忽略的溶涨性等优点。目前已报道的溶胶-凝胶膜固定酶的生物传感器主要集中在凝胶/聚合物的体系。B.A.Gregg，A.Heller，在J.Phys.Chem.，1991，95，5976中公开了一种电极表面用长链双环交联聚4-乙烯基吡啶并同时固定化酶的方法，所得酶凝胶能牢固固定于电极表面并有较快的响应，但是在聚合物的交联过程中会造成酶的失活。在Analysis 1992，20，543中，Lev公开了一种以表面活性剂搀杂到溶胶中制备了一种无开裂的溶胶-凝胶膜。但是表面活性剂会破坏膜中酶的活性进而影响生物传感器的性能。
发明内容
本发明的目的是提供一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法本发明选用了一种新型固定化酶载体-离子液体溶胶-凝胶。由于1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼是一种粘稠的导电性离子液体，具有超分子结构，它成功的避免了传统溶胶-凝胶载体容易干裂、溶涨的缺点；同时由于离子液体良好的生物相容性及模板作用，固定化酶具有良好的生物活性而且使得其与被检测物的接触更容易。
本发明一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法，其步骤和条件为a)将1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，四乙氧基硅，水，0.1mol L-1的盐酸按照1-2∶2-4∶1-2∶0.05-0.1的体积比例在室温下混合，磁力搅拌3小时，室温下放置1-2小时，得到溶胶A；b)将酶与0.05mol L-1的pH＝6-7的磷酸缓冲溶液按照质量体积(毫克/微升)比为1-3∶50的比例混合均匀得溶液B，所述酶是辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶或多酚氧化酶；c)将溶胶A和溶液B按照体积比1∶1-2.5混合均匀，均匀涂覆到电极表面，厚度为0.5-500微米，于0-4℃下放置24-48小时，得生一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器。
上述步骤c)之前，也可以增加步骤在整个电极表面，按照二茂铁乙醇溶液的涂覆量为70-140微升/1平方厘米的比例，均匀涂覆重量百分比浓度为7.5-15毫克/毫升的二茂铁乙醇溶液，放置干燥；本发明采用的电极为本领域公知的基底电极。
本发明制备的生物传感器响应快，响应时间为5-20秒；使用寿命长，1-2个月；适合于检测各种酶底物。
具体实施例方式
实施例1 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面按照70-140微升∶1平方厘米的比例均匀滴加7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将1毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，2毫升四乙氧基硅，1毫升水和0.05毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将1毫克的辣根过氧化物酶加入50微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度约为10微米，然后再在4℃下放置24小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为2×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
实施例2 制备葡萄糖氧化酶传感器2毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，4毫升四乙氧基硅，2毫升水和0.1毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2小时；另将3毫克的葡萄糖氧化酶，加入50微升0.05mol L-1的pH6的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到基底电极表面，厚度约为100微米然后再在0℃下放置36小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测葡萄糖。该生物传感器平衡时间在6分钟以内；响应时间为15秒；稳定性，1.5-2个月。
实施例3 制备多酚氧化酶传感器将1.5毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，3毫升四乙氧基硅，1.5毫升水和0.075毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将10毫克的酶，即葡萄糖氧化酶、辣根过氧化物酶、多酚氧化酶中的一种，加入500微升0.05mol L-1的pH7的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到基底电极表面，厚度约为500微米，然后再在4℃下放置24小时，即制得多酚氧化酶生物传感器，可用于水相中测定苯酚，儿茶酚等物质。该生物传感器平衡时间在6分钟以内；响应时间为15秒；稳定性，1-2个月。
实施例4 制备葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面按照140微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂15微升15毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将2毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，4毫升四乙氧基硅，2毫升水和0.1毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将2毫克的葡萄糖氧化酶，加入50微升0.05mol L-1的pH6的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取溶胶A和溶液B的混合液均匀滴涂到基底电极表面，厚度约为50微米，然后于4℃下放置48小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测葡萄糖。该生物传感器平衡时间在6分钟以内；响应时间为14秒；稳定性，1-1.5个月。
实施例5 制备辣根过氧化物酶传感器先在面积为0.073平方厘米的基底电极表面先滴涂15微升10毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液到表电极表面，放置至干燥；再将1.5毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，2毫升四乙氧基硅，1毫升水和0.05毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将12毫克的辣根过氧化物酶加入500微升0.05mol L-1的pH6的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度约为200微米，然后再在0℃下放置48小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在6分钟以内；响应时间为15秒；稳定性，1-1.5个月。
实施例6 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面按照100微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂12毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置至干燥；将1.5毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，3毫升四乙氧基硅，1.5毫升水和0.075毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将100毫克的多酚氧化酶，加入5毫升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到基底电极表面，厚度约为80微米，然后再在4℃下放置30小时，即制得多酚氧化酶生物传感器，可用于水相中测定苯酚，儿茶酚等物质。该生物传感器平衡时间在6分钟以内；响应时间为16秒；稳定性，1-2个月。
实施例7 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面按照70微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，10毫升四乙氧基硅，5毫升水和0.25毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将10毫克的辣根过氧化物酶加入250微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为200微米，然后再在4℃下放置24小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例8 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面按照120微升∶1平方厘米的比例均匀滴加7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，80毫升四乙氧基硅，40毫升水和2毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2小时；另将3毫克的辣根过氧化物酶加入50微升0.05molL-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为300微米，然后再在4℃下放置48小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为5×10-6-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1，稳定性，1-2个月。
实施例9 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面先滴加按照70微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂10毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，20毫升四乙氧基硅，10毫升水和0.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌4小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将0.5毫克的辣根过氧化物酶加入25微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为400微米，然后再在0℃下放置28小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在8分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6molL-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例10 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面按照80微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂12毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将100毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，300毫升四乙氧基硅，150毫升水和7.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3.6小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2.5小时；另将2毫克的辣根过氧化物酶加入50微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为0.5微米然后再在4℃下放置36小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为2×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为3×10-6mol L-1；稳定性，1-1.5个月。
实施例11 制备辣根过氧化物酶传感器先在基底电极表面按照90微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，60毫升四乙氧基硅，30毫升水和1.5毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2.5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将1.5毫克的辣根过氧化物酶加入50微升0.05mol L-1的pH7的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为1微米然后再在3℃下放置48小时，即制得辣根过氧化物酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-1×10-4mol L-1；检测限为2×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
实施例12 制备葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面按照100微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，10毫升四乙氧基硅，5毫升水和0.25毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将10毫克的葡萄糖氧化酶加入200微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为20微米然后再在4℃下放置24小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例13 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面按照115微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，80毫升四乙氧基硅，40毫升水和2毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2小时；另将1.8毫克的多酚氧化酶加入50微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为10微米然后再在2℃下放置48小时，即制得多酚氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为5×10-6-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
实施例14 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面按照85微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂10毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，20毫升四乙氧基硅，10毫升水和0.5毫升0.1molL-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌4小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将20毫克的多酚氧化酶加入500微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为25微米，然后再在4℃下放置28小时，即制得多酚氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在8分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例15 制备葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面按照140微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂12毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将100毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，300毫升四乙氧基硅，150毫升水和7.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3.6小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2.5小时；另将1毫克的葡萄糖氧化酶加入25微升0.05mol L-1的pH7的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为5微米，然后再在4℃下放置36小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为2×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为3×10-6mol L-1；稳定性，1-1.5个月。
实施例16 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照140微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，60毫升四乙氧基硅，30毫升水和1.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2.5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将1毫克的多酚氧化酶加入50微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为50微米然后再在4℃下放置48小时，即制得多酚氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-1×10-4mol L-1；检测限为2×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
实施例17 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照95微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，10毫升四乙氧基硅，5毫升水和0.25毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1小时；另将1.9毫克的多酚氧化酶加入50微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为1微米然后再在4℃下放置24小时，即制得多酚氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例18 葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照80微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，80毫升四乙氧基硅，40毫升水和2毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2小时；另将3毫克的葡萄糖氧化酶加入25微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为100微米，然后再在4℃下放置48小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为5×10-6-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
实施例19 制备葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照95微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂10毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将10毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，20毫升四乙氧基硅，10毫升水和0.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌4小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将0.3毫克的葡萄糖氧化酶加入10微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶1.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为30微米，然后再在4℃下放置28小时，即制得葡萄糖氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在8分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为1×10-6mol L-1；稳定性，0.5-1个月。
实施例20 制备多酚氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照70微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂12毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将100毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，300毫升四乙氧基硅，150毫升水和7.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌3.6小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置2.5小时；另将50毫克的多酚氧化酶加入2.5毫升0.05mol L-1的pH6的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2.5的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为30然后再在4℃下放置36小时，即制得多酚氧化酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为2×10-5-2×10-4mol L-1；检测限为3×10-6molL-1；稳定性，1-1.5个月。
实施例21 制备葡萄糖氧化酶传感器先在基底电极表面先滴加按照140微升∶1平方厘米的比例均匀滴涂7.5毫克/毫升的二茂铁的乙醇溶液，放置10分钟；再将20毫升1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，60毫升四乙氧基硅，30毫升水和1.5毫升0.1mol L-1的盐酸于室温下混合，磁力搅拌2.5小时，即得到均相溶胶A，然后室温下放置1.5小时；另将1毫克的葡萄糖氧化酶加入30微升0.05mol L-1的pH6.86的磷酸缓冲溶液中混合均匀得溶液B；然后将溶胶A和溶液B按照1∶2的比例混合均匀，用微量注射器移取该混合液均匀滴涂到上述基底电极表面，厚度为105微米，然后再在4℃下放置48小时，即制得葡萄糖氧化酶酶传感器，可用于水相中检测过氧化氢。该生物传感器平衡时间在5分钟以内；响应时间为15秒；线形范围为1×10-5-1×10-4mol L-1；检测限为2×10-6mol L-1；稳定性，1-2个月。
权利要求
1.一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤和条件如下a)将1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，四乙氧基硅，水，0.1mol L-1的盐酸按照1-2∶2-4∶1-2∶0.05-0.1的体积比例在室温下混合，磁力搅拌3小时，室温下放置1-2小时，得到溶胶A；b)将酶与0.05mol L-1的pH＝6-7的磷酸缓冲溶液按照质量体积(毫克微升)比为1-3∶50的比例混合均匀得溶液B，所述酶是辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶或多酚氧化酶；c)将溶胶A和溶液B按照体积比1∶1-2.5混合均匀，均匀涂覆到电极表面，厚度为0.5-500微米，于0-4℃下放置24-48小时，得生一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器。
2.一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤和条件如下a)将1-丁基，3-甲基咪唑四氟化硼，四乙氧基硅，水，0.1mol L-1的盐酸按照1-2∶2-4∶1-2∶0.05-0.1的体积比例在室温下混合，磁力搅拌2-5小时，室温下放置1-2小时，得到溶胶A；b)将酶与0.05mol L-1的pH＝6-7的磷酸缓冲溶液按照质量体积比为1-3∶50毫克微升的比例混合均匀得溶液B，所述酶是辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶或多酚氧化酶；c)在整个电极表面，按照二茂铁乙醇溶液的涂覆量为70-140微升/1平方厘米的比例，均匀涂覆重量百分比浓度为7.5-15毫克/毫升的二茂铁乙醇溶液，放置干燥；d)将溶胶A和溶液B按照体积比1∶1-2.5混合均匀，取该混合液均匀涂覆到步骤c)处理后的整个电极表面，厚度为0.5-500微米，于0-4℃下放置24-48小时，得到一种离子液体溶胶-凝胶复合膜包埋酶生物传感器。
全文摘要
一种离子液体溶胶－凝胶复合膜包埋酶制备生物传感器的方法，其主要步骤为将1－丁基，3－甲基咪唑四氟化硼，四乙氧基硅，水，0.1molL
文档编号C12Q1/00GK1928554SQ20061001720
公开日2007年3月14日 申请日期2006年9月22日 优先权日2006年9月22日
发明者刘洋, 杨秀荣, 李景虹, 李迪, 王美佳 申请人:中国科学院长春应用化学研究所