专利名称：盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法
技术领域：
本发明涉及一种盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，属于药物制剂分析检测领域。
背景技术：
盐酸美金刚为N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂，通过延缓兴奋性神经递质谷氨酸盐的释放，主要用于治疗阿尔茨海默症(老年痴呆症)。阿尔茨海默症是老年人的常见病之一，主要表现为记忆力减弱及识别能力障碍等，是一种渐进性的神经功能退化性失调。该产品是目前唯一一个开发用于阿尔茨海默病的NMDA拮抗剂。由于盐酸美金刚原料药结构比较稳定，没有发色基团，在紫外可见光区难以进行有效的检测。将盐酸美金刚供试品溶解并配制成每1ml含5.0mg的溶液，并选择205nm检测波长，其检测灵敏度仍然较低。因此，为更好的控制产品质量，我们选用了高效液相色谱-蒸发光散射检测器来进行本品溶出度的检查。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用蒸发光散射检测器对盐酸美金刚相关制剂进行溶出度检查的液相色谱测定方法。
本发明溶出度检查方法的实现包括以下步骤(1)色谱条件检测器采用蒸发光散射检测器，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由甲醇-0.05％五氟丙酸溶液组成，其最佳配比为(70∶30)；色谱柱温度为室温，流速为1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算不低于1500。
(2)供试品溶液的制备取盐酸美金刚相关制剂6个单位，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，采用中国药典2005年版二部附录XC第三法，转速为每分钟75转，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
(3)对照品溶液的制备另精密称取干燥至恒重的对照品适量，加水制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。
(4)测定方法分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见附
图1)。按外标法以峰面积计算盐酸美金刚的溶出度。
本发明盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，上述(1)中色谱条件具体是检测器采用蒸发光散射检测器，漂移管温度范围为70-130℃，最佳检测温度为100℃；氮气流速为2.0-2.5L/min，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相由甲醇-0.05％五氟丙酸溶液组成，其最佳配比为(70∶30)；色谱柱温度为室温，流速为1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算不低于1500。
本发明盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，上述(2)中供试品溶液的制备具体是采用0.1mol/L盐酸溶液为溶剂。试验前后了选择水和不同体积的0.1mol/L盐酸溶液作为比较，由于单纯选择水为溶剂时对蒸发光散射器要求温度较高，而选用0.1mol/L盐酸溶液为溶剂时对HPLC蒸发光检测器影响较小；同时考虑到本品规格较小，为满足检测时药物浓度的需要，最终确定选用0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶出介质，并采用中国药典2005年版二部附录XC第三法进行溶出度的测定。
本发明盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，上述(3)中对照品溶液的制备具体是精密称取盐酸美金刚对照品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。当盐酸美金刚的0.1mol/L盐酸溶液在25～200μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，其线性相关系数为0.9999，回收率为99.79％(见附图2)。
本发明盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，其每个相关制剂单位含盐酸美金刚(C12H21N·HCl)应为9～11mg，其含量限度为标准含量的90％～110％。其批内六份间的累积释放百分率在30分钟时均一，数批样品30分钟溶出度均在80％以上(见附图3)。
本发明盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，适用于各种需要进行溶出度检测的盐酸美金刚相关制剂，如片剂、胶囊剂、控释和缓释制剂以及各种盐酸美金刚的复方制剂。
本发明与已有技术相比的积极效果在于1、使用蒸发光散射检测器对本品进行溶出度检测，克服了本品原料药结构稳定，没有发色基团，用紫外检测器难以检测的缺点。传统方法常用衍生化反应，本发明采用蒸发光散射，无需进行复杂的衍生化反应，并有效提高了其检测灵敏度。
2、本发明适用于各种剂型的盐酸美金刚相关制剂，如片剂、胶囊剂、控释和缓释制剂以及各种盐酸美金刚的复方制剂。
3、本发明检测方法准确，操作简捷，重现性好，灵敏度高，在工作中实用性强。
具体实施例方式
实施例一1、色谱条件与系统适用性试验1.1、检测仪器的选择由于本品结构比较稳定，没有发色基团，因此本品在紫外区没有吸收。将盐酸美金刚供试品以甲醇溶解并配制成每1ml含5.0mg的溶液，并选择205nm检测波长，其检测灵敏度仍然较低，因此，为更好的检出杂质，更好的控制产品质量，我们选用了蒸发光散射检测器。
1.2、色谱条件的选择仪器SHIMADZU LC-10AT VP，Alltech ELSD 2000，717 Plus Auto sampler。ELSD漂移管温度范围为70-130℃，其最佳检测温度为100℃；氮气流速为2.0-2.5L/min。液相色谱柱用十八烷基键烷硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)，参照相关文献并结合试验具体情况，先后选用甲醇-水、甲醇-水-冰醋酸、甲醇-乙腈-异丙醇-水、乙腈-0.25％三氟乙酸溶液等多种条件，最终确定选用甲醇-0.05％五氟丙酸溶液(70∶30)，流速1.0ml/min，柱温为室温，进样量20ul。
在该色谱条件下，盐酸美金刚主峰保留时间适中，峰形较好。
1.3、灵敏度测定 取盐酸美金刚对照品适量，用流动相配制成浓度为每1ml含0.3mg的溶液，再分别用流动相稀释成一系列不同浓度的溶液，分别进样20μl，使之产生主峰为基线噪音三倍的信号。经试验，最小检知量为0.6ng(S/N≥3)，若以有关物质检查时的浓度0.3mg/ml计算，其检出限度为0.2％。结果证明，该方法灵敏度高，可以充分满足溶出度检查测定的要求。
以上试验结果表明，此方法简便灵敏，重现性好，可较好地对样品中盐酸美金刚的溶出进行较好的检测。
2、对照品溶液的制备 精密称取盐酸美金刚对照品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。当盐酸美金刚的0.1mol/L盐酸溶液在25～200μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，其线性相关系数为0.9999，回收率为99.79％。
3、供试品溶液的制备取本品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第三法)，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
4、盐酸美金刚相关制剂溶出度的检测
取上述盐酸美金刚对照品溶液与供试品溶液，分别进样20μl，记录色谱图，按外标法计算每单位样品的溶出度(n＝6)。
实施例二盐酸美金刚片溶出度的测定取本品三批各六片，照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录XC第三法)，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另精密称取盐酸美金刚对照品适量，同法制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下HPLC-ELSD检测器(SHIMADZU LC-10AT VP，Alltech ELSD 2000，717 Plus Auto sampler)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05％五氟丙酸溶液(70∶30)为流动相，流速1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算应不低于1500。分别精密吸取上述两种溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算出每片的溶出量。结果见表1。
表1.盐酸美金刚片溶出度测定结果
实施例三盐酸美金刚胶囊溶出度的测定取本品三批各六粒，照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录XC第三法)，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另精密称取盐酸美金刚对照品适量，同法制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下HPLC-ELSD检测器(SHIMADZU LC-10AT VP，Alltech ELSD 2000，717 Plus Auto sampler)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05％五氟丙酸溶液(70∶30)为流动相，流速1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算应不低于1500。分别精密吸取上述两种溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算出每粒的溶出量。结果见表2。
表2.盐酸美金刚胶囊溶出度测定结果
实施例四盐酸美金刚缓释片溶出度的测定取本品3批各6片，照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录XC第三法)，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，在1小时、4小时与10小时分别取溶液5ml滤过，并即时在操作容器中补液5ml，取续滤液作为供试品溶液。另精密称取盐酸美金刚对照品适量，同法制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下HPLC-ELSD检测器(SHIMADZU LC-10AT VP，AlltechELSD 2000，717 Plus Auto sampler)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05％五氟丙酸溶液(70∶30)为流动相，流速1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算应不低于1500。分别精密吸取上述两种溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算出每粒的溶出量。结果见表3。
表3.盐酸美金刚缓释片溶出度测定结果
图例说明图1对照品溶液和供试品溶液的HPLC图谱1、对照品溶液2、供试品溶液图2盐酸美金刚溶出度浓度与峰面积线性关系3供试品批间溶出度均一性图谱
权利要求
1.一种盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，其特征在于检测方法包括以下步骤(1)色谱条件本品原料药结构比较稳定，没有发色基团，因此选用蒸发光散射检测器。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05％五氟丙酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min。理论塔板数按盐酸美金刚峰计算不低于1500。(2)供试品溶液的制备取盐酸美金刚相关制剂6个单位，以0.1mol/L盐酸溶液100ml为溶剂，采用中国药典2005年版二部附录XC第三法，转速为每分钟75转，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(3)对照品溶液的制备另精密称取干燥至恒重的对照品适量，加水制成每1ml约含盐酸美金刚0.1mg的溶液作为对照品溶液。(4)测定方法分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算盐酸美金刚的溶出度。
2.根据权利要求1所述的盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，其特征在于，其中(1)检测器采用蒸发光散射检测器，漂移管温度范围为70-130℃，最佳检测温度为100℃；氮气流速为2.0-2.5L/min，色谱条件的流动相由甲醇-0.05％五氟丙酸溶液组成，其最佳配比为(70∶30)；色谱柱温度为室温，流速为1.0ml/min。
3.根据权利要求1所述的盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，其特征在于其中(2)供试品溶液的制备由于盐酸美金刚相关制剂中主要成分含量较低，为满足在溶出量测定时药物浓度的需要，溶出介质选用0.1mol/L的盐酸溶液100ml，并采用中国药典2005年版二部附录XC第三法，转速为每分钟75转，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
4.根据权利要求1、2、3所述的盐酸美金刚相关制剂溶出度的检测方法，其特征在于，每个盐酸美金刚相关制剂单位含盐酸美金刚(C12H21N·HCl)应为9～11mg，其含量限度为标准含量的90％～110％。
5.根据权利要求1、2、3、4所述的盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，其特征在于该方法适用于各种需要进行溶出度检测的盐酸美金刚相关制剂，如片剂、胶囊剂、控释和缓释制剂以及各种盐酸美金刚的复方制剂。
全文摘要
本发明公开了一种盐酸美金刚相关制剂的溶出度检测方法，具体是采用高效液相色谱仪－蒸发光散射检测器，以甲醇－0.05％五氟丙酸溶液为流动相。取盐酸美金刚相关制剂6个单位，以0.1mol/l盐酸溶液100ml为溶剂，经30分钟时，取溶液适量滤过，作为供试品溶液。另取对照品加水制成0.1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。取两种溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算盐酸美金刚的溶出度。本发明克服了盐酸美金刚结构比较稳定、在紫外区没有吸收难以进行有效检测的缺点，使用简单的流动相条件便可准确检测出其相关制剂中盐酸美金刚的溶出度情况，具有简捷、快速、准确的优点。
文档编号G01N33/15GK101034084SQ20071001402
公开日2007年9月12日 申请日期2007年3月23日 优先权日2007年3月23日
发明者张岱州, 李玉基, 王功霞, 梁大连, 朱春花 申请人:山东省医药工业研究所