专利名称：微生物催化制备(2s, 3r)-2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯及菌株的制作方法
技术领域：
本发明涉及唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)ZJB-12126，及其在微生物转化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制备式(I) (2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯中的应用。
背景技术：
4-乙酰氧基氮杂环丁酮(简称为4AA)，是一种重要的手性合成子，是合成碳青霉烯和青霉烯类新型广谱抗生素的重要中间体，如用于合成亚胺培南、法罗培南、美罗培南
等4AA的化学结构式如式(I)所示。4AA的分子骨架特征是一个四元内酰胺环，共含有3个手性中心，存在8 种立体异构体，如何高选择性地建立手性中心，是合成4AA的关键所在。日本Noyori和Takasago公司采用以乙酰乙酸乙酯为起始原料的路线,各步的收率和立体选择性都很好，总收率高达50%，是一条非常具有工业化前景的路线，该工艺路线如式
(I)所示，其中R是含有1-6个碳原子的饱和低级烷基。在该路线中，乙酰乙酸乙酯首先与卤化后N-羟甲基苯甲酰胺反应，生成2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯(式11 )，然后利用手性催化剂(R) -BINAP-Ru经过羰基不对称还原反应，生成(2S，3R) -2-苯甲酰氨甲基_3_羟基丁酸酯(式III)，再经过脱保护基、分子内成酰胺键、叔丁基二甲硅基保护、三氯化钌催化下的乙酰氧基化得到4AA。
权利要求
1.唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderiagladioli)ZJB-12126，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号CCTCC No M 2012379，保藏日期2012年9月25日。
2.如权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌ZJB-12126，其特征在于该菌株的16SrDNA序列如SEQ ID No.1所示。
3.如权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌ZJB-12126在微生物转化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制备式(I)所示(2S，3R) -2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯中的应用
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述微生物转化在2(T45°C、pH5.(T9. O下进行。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述微生物转化在ρΗ6.(Γ7. 5的缓冲液中进行。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述缓冲液中还添加有2(Tl00g/L的辅助底物，所述辅助底物为下列之一甲醇、乙醇、异丙醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘油。
7.如权利要求5或6所述的应用，其特征在于所述缓冲液中还添加有占缓冲液体积2 20%的助溶剂，所述助溶剂为下列之一甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、乙酸乙酯。
全文摘要
本发明提供了一株能够催化羰基不对称还原的新菌株——唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 ZJB-12126，及其在微生物转化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制备(2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号CCTCC NoM 2012379，保藏日期2012年9月25日。本发明菌株用于生物转化合成(2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羟基丁酸酯，反应条件温和，环境友好，更重要的是，产物构型主要为(2S，3R)-构型，省去了再用化学法翻转产物构型的步骤，因而操作流程简单，具有良好的工业应用前景。
文档编号C12P41/00GK103045504SQ20121052774
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月5日 优先权日2012年12月5日
发明者郑裕国, 孙丽慧, 陈翔, 张国海, 沈寅初 申请人:浙江工业大学