用于提高病毒感染性的方法
【专利摘要】本发明提供使用用炔烃修饰的生物分子，诸如脂肪酸、碳水化合物和脂质标记的病毒来治疗感染有病毒的植物、昆虫或动物或者来提高病毒，诸如人免疫缺陷病毒的感染性的方法。还提供了用炔烃修饰的生物分子，诸如脂肪酸、碳水化合物或类异戊二烯脂质标记病毒，诸如人免疫缺陷病毒的方法。用炔烃修饰的生物分子标记的病毒可以与药学上可接受的赋形剂组合以产生药物组合物，其任选地含有另一种抗病毒剂和/或递送剂，诸如脂质体。
【专利说明】用于提高病毒感染性的方法
[0001] 交叉引用 本申请要求2012年1月26日提交的序列号为61/591，047的美国临时申请的优先权 权益，该临时申请通过引用以其整体并入本文。
[0002] 背景 感染人、动物、植物和昆虫的病毒为大家所熟知。这些宿主被病毒感染可以导致疾病， 除非合适的免疫应答可以获得以中和该感染。能够引起免疫应答所必需的免疫组分的疫苗 已经开发出来以预防在人和动物中被病毒感染，其中值得注意的实例分别是流感疫苗和狂 犬病疫苗。
[0003] 疫苗通常含有类似于引起疾病的病毒的药剂。该药剂可以是弱化的（减毒的）或 被杀死的（灭活的）形式的病毒。全病毒疫苗的生产一般从病毒在原代细胞（例如流感病 毒）中或者在诸如培养的人或者动物细胞（例如脊髓灰质炎病毒）的连续细胞系中的生长 开始。为了在这样的细胞中繁殖病毒，病毒必须首先感染细胞。因此，需要提高用于制备疫 苗的病毒的感染性的方法。
[0004] 病毒还用于制备由研究人员使用的病毒载体，该病毒载体在研究或者基因治疗环 境中将遗传物质递送到细胞和生物体中。这样的病毒载体是非天然存在的病毒。为了将遗 传物质递送到细胞中，该载体需要感染细胞。因此，需要具有增加的感染性的病毒载体，以 改进可以被递送到靶细胞或生物体的遗传物质的量。
[0005] 概述 本发明的一个方面是增强人免疫缺陷病毒的感染性的方法，所述方法包括使所述病毒 与以有效增强病毒的感染性的量的炔烃修饰的脂肪酸、炔烃修饰的碳水化合物、炔烃修饰 的类异戊二烯脂质或其生理学上可接受的盐接触。
[0006] 在一些实施方案中，所述病毒是在细胞中。在这些的一些中，所述细胞是人动物细 胞或非人动物细胞。
[0007] 在一些实施方案中，所述人免疫缺陷病毒是HIV-1。
[0008] 在一些实施方案中，所述炔烃修饰的脂肪酸或其生理学上可接受的盐具有下式： y-ch2-x-co2h [I] 其中，Y是Η或乙炔基；以及当Y是乙炔基时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链， 其中所述碳中的一个或多个可以独立地被氧、硒、硅、硫、SO、S02 替代，或其中所述碳 中彼此邻接的一对或多对可以通过双键或三键彼此连接；或者，当Υ是Η时，X是包含6到 28个碳的直链或支链碳链，其中用乙炔基替代在所述碳之一上的至少一个氢，并且其中所 述碳中不具有与其相连的乙炔基的一个或多个可以独立地被氧、硒、硅、硫、S0、S0 2 替 代，或其中所述碳中彼此邻接并且不具有与其相连的乙炔基的一对或多对可以通过双键或 三键彼此连接；其中，心是Η或包含1到6个碳的烷基。
[0009] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，Υ是乙炔基。
[0010] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，X是直链碳链。
[0011] 在包括使所述病毒与[I 1]接触的某些实施方案中，X是包含8到15个碳的碳链。
[0012] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，X是碳链，其中所述碳链的所有 碳均为碳。
[0013] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，X是碳链，其中在所述碳链的碳 之间的所有键均是单键。
[0014] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，所述炔烃修饰的脂肪酸是 15-乙炔基十五烷酸或其生理学上可接受的盐。
[0015] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，所述炔烃修饰的脂肪酸是 12-乙炔基十二烷酸或其生理学上可接受的盐。
[0016] 在包括使所述病毒与[I]接触的某些实施方案中，所述炔烃修饰的脂肪酸是：
【权利要求】
1. 增强人免疫缺陷病毒的感染性的方法，所述方法包括使所述病毒与以有效增强所述 病毒的感染性的量的炔烃修饰的脂肪酸、炔烃修饰的碳水化合物、炔烃修饰的类异戊二烯 脂质、或其生理学上可接受的盐接触。
2. 权利要求1的方法，其中所述病毒是在细胞中。
3. 权利要求2的方法，其中所述细胞是人动物细胞或非人动物细胞。
4. 权利要求1的方法，其中所述人免疫缺陷病毒是HIV-1。
5. 权利要求1的方法，其中所述炔烃修饰的脂肪酸或其生理学上可接受的盐具有下 式： Y-CH2-X-CO2H 其中， Y是H或乙炔基；并且 当Y是乙炔基时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中所述碳中的一个或多 个可以独立地被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR1替代，或其中所述碳中彼此邻接的一对或多对 可以通过双键或三键彼此连接；或者 当Y是H时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中用乙炔基替代在所述碳之 一上的至少一个氢，并且其中所述碳中不具有与其相连的乙炔基的一个或多个可以独立地 被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR 1替代，或其中所述碳中彼此邻接并且不具有与其相连的乙炔 基的一对或多对可以通过双键或三键彼此连接； 其中，R1是H或包含1到6个碳的烷基。
6. 权利要求5的方法，其中Y是乙炔基。
7. 权利要求5的方法，其中X是直链碳链。
8. 权利要求5的方法，其中X是包含8到15个碳的碳链。
9. 权利要求5的方法，其中X是碳链，其中所述碳链的所有碳均为碳。
10. 权利要求5的方法，其中X是碳链，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
11. 权利要求5的方法，其中所述炔烃修饰的脂肪酸是15-乙炔基十五烷酸、12-乙炔 基十二烷酸或其生理学上可接受的盐。
12. 权利要求5的方法,其中所述炔烃修饰的脂肪酸是
或其生理学上可接受的盐。
13. 权利要求5的方法，其中Y是乙炔基，X是直链碳链，并且所述直链碳链包含8到15 个碳。
14. 权利要求13的方法，其中所述碳链的所有碳均为碳。
15. 权利要求13的方法，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
16. 权利要求1的方法，其中所述接触在溶液中进行，所述溶液包含动物血清、氨基酸、 缓冲齐?、脂肪酸、葡萄糖、激素、无机盐、脂质、金属离子螯合齐?、肽、表面活性齐?、微量金属和 维生素中的至少一种。
17. 增强人免疫缺陷病毒的感染性的方法，所述方法包括使所述病毒感染的细胞与以 有效增强所述病毒的感染性的量的炔烃修饰的脂肪酸、炔烃修饰的碳水化合物、炔烃修饰 的类异戊二烯脂质或其生理学上可接受的盐接触。
18. 权利要求17的方法，其中所述细胞是人动物细胞或非人动物细胞。
19. 权利要求17的方法，其中所述人免疫缺陷病毒是HIV-1。
20. 权利要求17的方法，其中所述炔烃修饰的脂肪酸或其生理学上可接受的盐具有下 式： Y-CH2-X-CO2H 其中， Y是H或乙炔基；并且 当Y是乙炔基时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中所述碳中的一个或多 个可以独立地被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR1替代，或其中所述碳中彼此邻接的一对或多对 可以通过双键或三键彼此连接；或者 当Y是H时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中用乙炔基替代在所述碳之 一上的至少一个氢，并且其中所述碳中不具有与其相连的乙炔基的一个或多个可以独立地 被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR 1替代，或其中所述碳中彼此邻接并且不具有与其相连的乙炔 基的一对或多对可以通过双键或三键彼此连接； 其中，R1是H或包含1到6个碳的烷基。
21. 权利要求20的方法，其中Y是乙炔基。
22. 权利要求20的方法，其中X是直链碳链。
23. 权利要求20的方法，其中X是包含8到15个碳的碳链。
24. 权利要求20的方法，其中X是碳链，其中所述碳链的所有碳均为碳。
25. 权利要求20的方法，其中X是碳链，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
26. 权利要求20的方法，其中所述炔烃修饰的脂肪酸是15-乙炔基十五烷酸、12-乙炔 基十二烷酸或其生理学上可接受的盐。
27. 权利要求20的方法，其中所述炔烃修饰的脂肪酸是
或其生理学上可接受的。
28. 权利要求20的方法，其中Y是乙炔基，X是直链碳链，并且所述直链碳链包含8到 15个碳。
29. 权利要求28的方法，其中所述碳链的所有碳均为碳。
30. 权利要求28的方法，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
31. 权利要求17的方法，其中所述接触在溶液中进行，所述溶液包含动物血清、氨基 酸、缓冲齐?、脂肪酸、葡萄糖、激素、无机盐、脂质、金属离子螯合齐?、肽、表面活性齐?、微量金 属和维生素中的至少一种。
32. 人免疫缺陷病毒，其包含炔烃修饰的脂肪酸部分、炔烃修饰的碳水化合物部分、或 炔烃修饰的类异戊二烯脂质部分；其中所述部分是非天然存在的。
33. 权利要求32的病毒，其中所述病毒是HIV-1。
34. 权利要求32的病毒，其中所述病毒是灭活的。
35. 权利要求32的病毒，其中所述病毒是减毒的。
36. 权利要求32的病毒，其中所述炔烃修饰的脂肪酸部分具有下式： Y-CH2-X-CO- 其中， Y是H或乙炔基；并且 当Y是乙炔基时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中所述碳中的一个或多 个可以独立地被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR1替代，或其中所述碳中彼此邻接的一对或多对 可以通过双键或三键彼此连接；或者 当Y是H时，X是包含6到28个碳的直链或支链碳链，其中用乙炔基替代在所述碳之 一上的至少一个氢，并且其中所述碳中不具有与其相连的乙炔基的一个或多个可以独立地 被氧、硒、硅、硫、SO、SO2或NR 1替代，或其中所述碳中彼此邻接并且不具有与其相连的乙炔 基的一对或多对可以通过双键或三键彼此连接； 其中，R1是H或包含1到6个碳的烷基。
37. 权利要求36的病毒，其中Y是乙炔基。
38. 权利要求36的病毒，其中X是直链碳链。
39. 权利要求36的病毒，其中X是包含8到15个碳的碳链。
40. 权利要求36的病毒，其中X是碳链，其中所述碳链的所有碳均为碳。
41. 权利要求36的病毒，其中X是碳链，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
42. 权利要求36的病毒，其中所述炔烃修饰的脂肪酸部分是15-乙炔基十五烷基或 12-乙炔基十二烷基。
43. 权利要求36的病毒，其中所述炔烃修饰的脂肪酸部分是
44. 权利要求36的病毒，其中Y是乙炔基，X是直链碳链，并且所述直链碳链包含8到 15个碳。
45. 权利要求44的病毒，其中所述碳链的所有碳均为碳。
46. 权利要求44的病毒，其中在所述碳链的碳之间的所有键均是单键。
47. 权利要求36的病毒，其中所述炔烃修饰的脂肪酸部分通过酰胺或硫酯键与所述病 毒连接。
48. 组合物，其包含权利要求32的病毒。
49. 权利要求48的组合物，其进一步包含药学上可接受的赋形剂。
【文档编号】C12N7/00GK104245925SQ201380006669
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年1月25日 优先权日:2012年1月26日
【发明者】阿纽 B., 格雷厄姆 D. 申请人:生命科技公司, 约翰斯·霍普金斯大学