纳米微粒双膦酸盐组合物的制作方法

专利名称：：纳米微粒双膦酸盐组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及纳米微粒双膦酸盐组合物，包括含纳米微粒双膦酸盐的多颗粒或整体式口服控释组合物和可注射制剂。该组合物可用于治疗哺乳动物尤其是人的与异常骨吸收有关的疾病。
背景技术：
：A.关于双膦酸盐的背景本发明的方法和组合物包含双膦酸盐。本发明的双膦酸盐也可替换地称为"双膦酸盐化合物"。双膦酸盐是用于强化骨骼的一类药物。骨处于骨再塑的恒定状态中，其中新骨由称为成骨细胞的细胞生成，而旧骨被称为破骨细胞的细胞除去。双膦酸盐抑制破骨细胞的骨去除(再吸收)。双膦酸盐用于治疗骨质疏松和诸如转移性乳腺癌、多发性骨髓瘤和佩吉特氏病等疾病导致的骨痛。双膦酸盐包括FOSAMAX(阿仑膦酸钠)、AREDIA⑧(帕米膦酸钠)、ACTONEL⑧(利塞膦酸钠)、B0NIVA⑧(伊班膦酸钠)、DIDRONEL(依替膦酸盐)和ZOMETA(唑来膦酸)。该化合物也用于治疗皮质类固醇治疗引起的骨质疏松。1.关于阿仑膦酸盐的背景阿仑膦酸钠，它在商业上以FOSAMAX⑧出售，是一种作为破骨细胞-介导的骨吸收特异性抑制剂起作用的双膦酸盐。双膦酸盐是与骨内发现的羟磷灰石结合的焦磷酸盐的合成类似物。阿仑膦酸钠在化学上被称为(4-氨基-l-羟基亚丁基)二膦酸单钠盐三水合物。阿仑膦酸钠的实验式是C4H12NNa07P2'3H20，它的分子量是325.12。结构式是<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage8</formula>阿仑膦酸钠是白色结晶的不吸湿性粉末。它在水中可溶，在乙醇中极微溶解，在氯仿中几乎不溶。用于口月l纟合药的FOSAMAX⑧片(Merck&Co.Railway,NewJersey)含有6.53、13.05、45.68、52.21或91.37mg阿仑膦酸单钠盐三水合物，它们分别是游离酸的5、10、35、40和70mg摩尔当量，还含有下列非活性成分微晶纤维素、无水乳糖、交联羧曱基纤维素钠和硬脂酸镁。FOSAMAX10mg片还含有巴西棕榈蜡。FOSAMAX的缺点包括极差的生物利用度，在吸收上有进食/禁食的可变性，和显著的胃肠刺激。关于阿仑膦酸钠的临床药理学机制，动物研究已经揭示了下列作用模式。在细胞水平上，阿仑膦酸盐优先定位在骨吸收部位，尤其在破骨细胞下。破骨细胞通常粘附在骨表面上，但却没有皱褶缘，所述皱褶缘标志着积极吸收。阿仑膦酸盐不千扰-皮骨细胞补充或附着，但它的确抑制破骨细胞活性。在小鼠中对放射性[3H]阿仑膦酸盐在骨内的定位所进大约10倍。在大鼠和小鼠中施用卩H;阿仑膦酸盐后6天和49天;别检查骨，显示在阿仑膦酸盐之上形成了正常骨，所述阿仑膦酸盐掺入到了骨基质内部。虽然掺到了骨基质内，但阿仑膦酸盐也不是药理学活性的。因此，阿仑膦酸盐必需持续施用以在新形成的吸收表面上抑制破骨细胞。在狒狒和大鼠中的组织形态测定表明阿仑膦酸盐治疗减少了骨周转(即骨再塑位置的数量)。另外，在这些骨再塑位置上骨形成超过了骨吸收，导致骨量的递增。关于阿仑膦酸盐吸收的药代动力学，相对于静脉内注射(IV)的参考剂量，在妇女中，剂量范围为5-70mg时，在通宵禁食后和标准早餐前2小时给药时，阿仑膦酸盐的平均口服生物利用度是0.64%。在通宵禁食后和早餐前2小时给药时，10mg片剂在男性中的口服生物利用度(0.59%)类似于在妇女中的口服生物利用度。在49名绝经后妇女中进行了研究，调查定时就餐对阿仑膦酸盐生物利用度的影响。相对于吃饭前2小时给药，当在标准早餐前0.5或1小时施用10mg阿仑膦酸盐时，生物利用度降低了大约40%。在治疗和预防骨质疏松的研究中，当在早餐前至少30分钟给药时，阿仑膦酸盐是有效的。无论阿仑膦酸盐在标准早餐后2小时给药或至多2小时给药，生物利用度都可忽略不计。与咖啡或橙汁同时施用阿仑膦酸盐降低生物利用度大约60%。如果想要进行双膦酸盐的口服给药，必须施用相对高的剂量以补偿胃肠道给药的低的生物利用度。为了弥补这种低生物利用度，通常推荐患者空腹服用双膦酸盐，并在此后禁食至少30分钟。然而，很多患者发现每天需要这样禁食很不方便。而且，口服给药伴随着胃肠道副作用，尤其是与食道相关的那些副作用。参见Fleisch,S/W/^oy/^o""/^Bo/7eZ)&etwe，Frow丄"Zw/y^or少fof/e尸a"ew/1,第2片反，PantheonPublishing(199"。这些作用似乎与双膦酸盐在食道内的刺激的可能性有关，这个问题被回流的胃酸的存在所加剧。例如，一种双膦酸盐，帕米膦酸盐伴随着食道溃疡。参见E.G.Lufkin等，；^頻^o"a化爿w/"化r憩ho，/,4:320-322(1994),其被全文引入作为参考。尽管不经常出现，但是阿仑膦酸盐的使用仍伴随着食管炎和/或食管溃疡。参见P.C.DeGroen等，i^(9//z"g他」mo"'"/^附//2772e仏e(9/j/e"(iraw"fe，vV，^g/顯dJowtw/o/Me&""e,第335巻，第124期，第1016-1021页(1996),D.〇.Castell,Pz'〃i^0p/2ag他一T72eOweq/"爿/ew(irawate，￡wg/a/7t/Jow簡/o/她血一第335巻，第124期，第1058-1059页(1996),和U.A.Liberman等，i^o//zag〃^j/ewt/row"^,7Vew￡Vzg/<2/7<iJow謹/o/M^/cz."e,第335巻,第124期，第1069-1070页(1996),其被全文引入作为参考。双膦酸盐的胃肠道副作用的程度已经显示出随着增力口的剂量而增力口。参见CH.Chestnut等，J/em/ro"a"7Ve^me"/1o/Aei^e"o/Mw/印/eDamagesonBone第144-152页，1995年8月，其被全文引入作为参考。并且，这些食管副作用在不用足量液体服用双膦酸盐的患者中，或在给药后立即躺下、从而增大了食管反流机会的患者中似乎更普遍。阿仑膦酸钠的生物利用度被干扰是由吃饭和饮水引起的，并且双膦酸盐的胃肠道副作用表现在被通知每周一次服用FOSAMAX⑧片剂的患者中。指导方针建议患者吞服FOSAMAX⑧片剂以后，在当天吃饭、喝饮料或服用其它药物之前必须等待至少30分钟。指导方针进一步要求FOSAMAX⑧片剂不能在睡前或一天起床前服用。另外，在服用FOSAMAX^^之后至少30分钟和当天第一次进食之后，患者必须保持完全直立。全部授予Daifotis等的美国专利第5,616，571、5,994,329、6,015,801、6,225,294、6,333,316、6,432,932、6,465,443和6,544,967号，授予Rosoni等的美国专利第4,621,077号，全部授予Bechard等的美国专利第5,358,941、5,681,590、6,0卯,410和6,194,004号，和都授予Brenner等的美国专利第5,849,726和6,008,207号涉及双膦酸盐在治疗异常骨吸收中的应用。这些美国专利都引入本文作为参考。2.关于帕米膦酸盐的背景帕米膦酸二钠，它在商业上以AREDIA⑧出售，是一种以^mg、60mg或90mg管形瓶提供用于静脉内给药的骨吸收抑制剂。每个30mg、60mg和90mg管形瓶分别含有30mg、60mg和90mg无菌冻千的帕米膦酸二钠和470mg、400mg和375mg甘露醇，USP。帕米膦酸二钠在蒸馏水中的1%溶液的pH大约是8.3。AREDIA,它是被称为双膦酸盐的化合物组中的一个，是焦磷酸盐的类似物。帕米膦酸二钠在化学上被称为(3-氨基-l-羟基亚丙基)二膦酸二钠盐五水合物(APD),其结构式是<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage10</formula>帕米膦酸二钠是白色-到-几乎白色的粉末。它可溶于水和2N氬氧化钠中，略溶于O.IN盐酸和O.IN醋酸，几乎不溶于有机溶剂。它的分子式是C3H9N07P2Na2'5H20，它的分子量是369.1。AREDIA⑧的非活性成分包括甘露醇，USP,和磷酸(用于在冻干前调节至pH6.5)。帕米膦酸盐的副作用包括导管插入位置处疼痛(包括发红、肺胀或碩:结，和触摸疼痛)。副作用还包括胃肠道疼痛，其包括腹痛、厌食、便秘、恶心、呕吐、腹渴、消化不良、胃肠出血和口炎。3.关于利塞膦酸盐的背景ACTONEL(利塞膦酸钠片)是抑制破骨细胞介导的骨吸收和调节骨代谢的吡啶双膦酸盐。每个用于口服给药的ACTONEL⑧片都含有半五水合物形式的5、30或35mg当量的无水利塞膦酸钠和少量一水合物。利塞膦酸钠半-五水合物的实验式是C7H!。N07P2Na'2.5H20。利塞膦酸钠的化学名是[l-羟基-2-(3-吡啶基)亚乙基]双[膦酸]单钠盐。利塞膦酸钠半-五水合物的化学结构如下2.5HP利塞膦酸钠是一种细微的、白色到灰白色的、无味的、结晶粉末。它溶于水和水性溶液，基本不溶于普通有机溶剂。ACTONEI^中的惰性成分包括交聚维酮、氧化铁红(仅3S-mg片剂)、氧化铁黄(仅5和3Smg片剂)、羟丙基纤维素、羟丙曱基纤维素、乳糖一水合物、硬脂酸镁、微晶纤维素、聚乙二醇、二氧化硅和二氧化钛。利塞膦酸盐的副作用包括胃肠刺激。4.关于伊班膦酸盐的背景伊班膦酸钠在商业上以BONTVA⑧出售。BONIVA⑧是抑制破骨细胞介导的骨吸收的含氮双膦酸盐。伊班膦酸钠的化学名是3-(N-甲基-N-戊基)氨基-1-羟基丙烷-U-二膦酸单钠盐一水合物，分子式是C9H22N07P2Na'H20,分子量是359.24。伊班膦酸钠是白色到灰白色粉末。它易溶于水，几乎不溶于有机溶剂。伊班膦酸钠具有下列结构式<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage12</formula>对于每天一次的口服给药来说，BONIVA⑧以白色长椭圆形的2.5-mg薄膜包衣片提供，或者对于每月一次的口服给药来说，以白色长椭圓形的150-mg薄膜包衣片提供。一个2.5-mg薄膜包衣片含有2.813mg伊班膦酸盐一钠一水合物，相当于2.5mg游离酸。一个150-mg薄膜包衣片含有168.75mg伊班膦酸盐一钠一水合物，相当于1S0mg游离酸。BONIVA⑧还含有下列非活性成分乳糖一水合物、聚维酮、微晶纤维素、交聚维酮、纯化硬脂酸、胶体二氧化硅和纯净水。片剂薄膜衣含有羟丙甲基纤维素、二氧化钛、滑石粉、聚乙二醇6000和纯净水。伊班膦酸盐的副作用包括胃肠刺激。5.关于依替膦酸盐的背景依替膦酸盐在商业上以DIDRONEI^(依替膦酸二钠)出售。DIDRONELA含有200mg或400mg依替膦酸二钠，用于口服给药的(l-羟基亚乙基)二膦酸的二钠盐。该化合物也被称为EHDP，它调节骨代谢。它是一种白色粉末，高度溶于水，分子量是250,具有下列结构式:<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage12</formula>DIDRONEI^片中的非活性成分包括硬脂酸镁、微晶纤维素和淀粉。DIDRONEI^的副作用包括胃肠刺激，这可以影响可以施用的剂量。而且由于可能的胃肠刺激，患者还被建议在给药的2小时内避免饮食。6.关于唑来膦酸盐的背景唑来膦酸盐在商业上以ZOMETA(唑来膦酸)提供。ZOMETA⑧含有唑来膦酸，它是作为破坏骨的骨吸收抑制剂的二膦酸。唑来膦酸在化学上被称为(l-羟基-2-咪唑-l-基-膦酰基乙基)膦酸一水合物，其结构式是<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage13</formula>唑来膦酸是白色结晶粉末。其分子式是C5Hk)N207P2'H20,其分子量是290.1g/Mol。唑来膦酸高度溶于0.1N氢氧化钠溶液，略溶于水和0.1N盐酸，几乎不溶于有机溶剂。0.7。/。唑来膦酸水溶液pH的大约是2.0。ZOMETA(唑来膦酸)注射液提供在管形瓶中，作为无菌液体浓缩液用于静脉内注射。每个5-mL管形瓶含有4.264mg唑来膦酸一水合物，相当于4mg无水唑来膦酸。ZOMETAt的非活性成分包括作为填充剂的甘露醇、USP,注射用水，和作为緩冲液的柠檬酸钠USP。ZOMETA⑧的静脉内给药通常大部分与发热有关。在ZOMETA给药之后已经报道了胃肠刺激如恶心和呕吐。也观察到了输注部位的局部反应如发红或胂胀。B.关于纳米微粒活性剂组合物的背景纳米微粒活性剂组合物，首次描述在美国专利第5,145,684号("第'684号专利")中，它含有吸附在非交联的表面稳定剂表面上的或与之相关的难溶性治疗剂或诊断剂颗粒。'684号专利还描述了制备这种纳米微粒活性剂组合物的方法，但没有描述包含纳米微粒形式的双膦酸盐的组合物。制备纳米微粒活性剂组合物的方法描述在，例如，名称均为"研磨药学物质的方法"的美国专利第5,518,187和5,862,999号;名为"研磨药学物质的连续方法"的美国专利第5,718,388号；和名为"制备含纳米微粒的治疗组合物的方法"的美国专利第5,510,118号中。纳米微粒活性剂组合物还描述在下列文献中，例如，名为"在灭菌过程中离子浊点调节剂防止颗粒聚集的用途"的美国专利第5,298,262号；名为''在冷冻干燥过程中减小粒径增长的方法''的美国专利第5,302,401号；名为"用于医学成像的X-射线造影组合物"的美国专利第5，318,767号；名为"利用高分子量非离子型表面活性剂的纳米微粒X-射线血池造影剂的新剂型"的美国专利第5,326,552号；名为"利用碘化芳香族丙二酸酯的X-射线影像方法"的美国专利第5,328,404号；名为"荷电磷脂类减少纳米微粒聚集的方法"的美国专利第5,336,507号；名为"防止颗粒聚集和增加稳定性的含Olm10-G的制剂"的美国专利第5,340,564号；名为"在灭菌过程中非离子浊点调节剂使纳米微粒聚集最小化的用途"的美国专利第5,346,702号；名为"极小的磁性-右旋糖酐颗粒的制备和磁力性质"的美国专利第5,349,957号；名为"在灭菌过程中纯化的表面修饰剂防止颗粒聚集的用途"的美国专利第5,352,459号；名称均为"表面修饰的抗癌纳米微粒"的美国专利第5,399,363和5,494,683号；名为"作为磁共振增强剂的水不溶性非磁性锰颗粒"的美国专利第5,401,492号；名为"泰洛沙泊作为纳米微粒稳定剂的用途"的美国专利笫5,429,824号；名为"用高分子量非离子型表面活性剂制备纳米微粒X-射线血池造影剂的方法"的美国专利第5,447,710号；名为"用于医学成像的X-射线造影组合物〃的美国专利第5,451,393号；名为"胃肠诊断X-射线造影剂与药学可接受的粘土组合的口服制剂"的美国专利第5,466,440号；名为"制备减小聚集的含荷电磷脂类纳米微粒组合物的方法"的美国专利第5,470,583号；名为"作为X-射线造影剂用于血池和淋巴系统成像的混合了氨基甲酸酐的纳米微粒诊断剂"的美国专利第5，472，683号；名为"作为X-射线造影剂用于血池和淋巴系统成像的納米微粒诊断剂二聚体"的美国专利第5,500,204号；名为"纳米微粒NSAID制剂"的美国专利第5,518,738号；名为"用作X-射线造影剂的纳米微粒碘二帕胺(Iododipamide)衍生物"的美国专利第5,521,218号；名为"用于血池和淋巴系统成像的纳米微粒诊断Diatrizoxy酯X-射线造影剂"的美国专利第5,525,328号；名为"制备含纳米微粒的X-射线造影组合物的方法"的美国专利第5,543,133号；名为"表面修饰的NSAID纳米微粒"的美国专利第5,552,160号；名为"作为可消化的油或脂肪酸中的纳米微粒分散体的化合物制剂"的美国专利第5,560,931号；名为"作为纳米微粒表面修饰剂的聚烯基嵌段共聚物"的美国专利第5,565,188号；名为"作为稳定剂涂层用于纳米微粒组合物的硫酸化非离子嵌段共聚物表面活性剂"的美国专利第5,569,448号；名为"作为可消化的油或脂肪酸中的纳米微粒分散体的化合物制剂"的美国专利第5,571,536号；名为"与羧酸酐混合作为X-射线造影剂用于血池和淋巴系统成像的纳米微粒诊断剂"的美国专利第5,573,749号；名为"诊断性影像学X-射线造影剂"的美国专利第5,573,750号；名为"具有防护性外涂层的可再分散的纳米微粒薄膜基质"的美国专利第5,573,783号；名为"在胃肠道内利用被高分子量线性聚氧乙烯聚合物稳定化的纳米微粒的位置特异性粘附"的美国专利第5,580，579号；名为"与药学可接受的粘土合用的胃肠治疗剂口服制剂"的美国专利第5,585,108号；名为"作为纳米微粒组合物的稳定剂包衣的环氧丁烷-环氧乙烷嵌段共聚物表面活性剂"的美国专利第5,587,143号；名为"用羟丙基纤维素作为分散体稳定剂的磨碎的萘普生"的美国专利第5,591,456号；名为''被非离子和阴离子稳定剂稳定化的新的钡盐制齐'r的美国专利第5,593,657号；名为"用于纳米晶体的基于糖的表面活性剂"的美国专利第5,622,938号；名为"口服胃肠诊断X-射线造影剂和口服胃肠治疗剂的改进剂型"的美国专利第5,628,981号；名为"作为X-射线造影剂用于血池和淋巴系统成像的与碳酸酐混合的纳米微粒诊断剂"的美国专利第5,643,552号；名为"研磨药学物质的连续方法"的美国专利第5,718，388号；名为"含布洛芬R(-)对映体的纳米微粒"的美国专利第5,718,919号;名为"含倍氯米松纳米微粒分散体的气雾剂"的美国专利第5,747,001号；名为"减少静脉内施用纳米微粒制剂引起的不良生理反应"的美国专利第5,834,025号；名为"利用纤维质表面稳定剂的人类免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶抑制剂的纳米晶体制剂"的美国专利第6,045,829号；名为"利用纤维质表面稳定剂制备人类免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶抑制剂纳米晶体制剂的方法"的美国专利第6,068,858号；名为"纳米微粒萘普生的可注射制剂"的美国专利第6,153,225号；名为"纳米微粒萘普生的新的固体剂型"的美国专利第6，165，506号;名为"利用人类免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶抑制剂纳米晶体制剂治疗哺乳动物的方法"的美国专利第6,221,400号；名为"含有纳米微粒分散体的喷雾气雾剂"的美国专利第6,264,922号；名为''防止纳米微粒组合物中晶体生长和颗粒聚集的方法"的美国专利第6,267,989号；名为"PEG-衍生的脂质作为纳米微粒组合物的表面稳定剂的应用"的美国专利第6,270,806号；名为"快速崩解的固体口服剂型"的美国专利第6，316,029号；名为"含有聚合物表面稳定剂和磺琥辛酯钠的协同组合的固体剂量纳米微粒组合物"的美国专利第6,375,986号；名为"具有阳离子表面稳定剂的生物粘附纳米微粒组合物"的美国专利第6,428,814号;名为"小规模研磨机"的美国专利第6，431,478号；名为"輩巴向药物递送至上和/或下胃肠道的方法"的美国专利第6,432,381号；名为"清洁湿磨装置"的美国专利第6,582,285号；和名为"含有聚合物表面稳定剂和磺琥辛酯钠的协同组合的纳米微粒分散体"的美国专利第6，592,903号；名为"含有无定形环孢菌素的纳米微粒组合物"的6,656,504号；名为"研磨物质的系统和方法"的6J42,734;名为"小规模研磨机及其方法"的6,745,962;名为"纳米微粒药物的液体小滴气雾剂"的6,811，767;名为"具有速释和控释组合特征的组合物"的6,卯8,6^;名为"含有乙烯吡咯烷酮和醋酸乙烯共聚物作为表面稳定剂的纳米微粒组合物"的6,969,529;名为"研磨物质的系统和方法"的6,976,647;和名为"使用小规模研磨机的方法"的6,991,191;所有这些文献都明确引入作为参考。另外，2002年1月31日公布的名为"控释纳米微粒组合物"的美国专利申请第20020012675Al号描述了纳米微粒组合物，被具体引入作为参考。这些文献中没有一篇描述了纳米微粒双膦酸盐、纳米微粒阿仑膦酸盐、纳米微粒帕米膦酸盐或纳米微粒利塞膦酸盐组合物。无定形小颗粒组合物描述在下列文献中，例如，名为"颗粒组合物及其作为抗微生物剂的应用"的美国专利第4,783,484号；名为"从水不溶性有机化合物制备均匀大小颗粒的方法"的美国专利第4,826,689号；名为"从水不溶性化合物制备均匀大小颗粒的方法"的美国专利第4,997,454号；名为"用于捕捉气泡入内的均匀大小的、特别小的、非聚集的多孔颗粒和方法"的美国专利第5,741,522号；和名为"用于增强超声反向散射的特别小的多孔颗粒"的美国专利第5,776,496号，所有这些文献都具体引入作为参考。对于具有提高的生物利用度和减小的不利副作用，包括减小的胃肠刺激的双膦酸盐如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐和利塞膦酸盐的组合物存在需求。本发明满足了这些需求。发明概述本发明目的是提供纳米微粒双膦酸盐组合物。示例性的双膦酸盐包括但不限于阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸。纳米^:粒双膦酸盐具有小于约2000nm的有效平均颗粒大小。本发明的组合物含有至少一种双膦酸盐和纳米微粒双膦酸盐的至少一种表面稳定剂。本发明的组合物可以制成任何药学可接受的剂型。该组合物也可以含有一种或多种在与异常骨吸收相关疾病的治疗中有用的其它化合物。在一个实施方案中，纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，被制成适合于通过肌内或皮下方式给药的可注射剂型。在一个实施方案中，可注射剂型含有纳米微粒双膦酸盐和多价阳离子如Ca"的复合物，连同至少一种表面稳、定剂。在本发明又一个实施方案中，提供了稳定的纳米微粒双膦酸盐如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐或唑来膦酸的可注射剂型，其中双膦酸盐经过一段时间从可注射贮库中释放。该剂型有益于患有与异常骨吸收有关的疾病的患者，因为该剂型提供了延长时间的治疗效果，从而提高了效力和患者顺应性。在本发明的一个实施方案中，可注射的贮库剂型提供了药物的治疗水平达大约5年。该可注射的剂型可以含有例如另外的成分，包括生物可降解聚合物、脂质复合物和/或油溶液，它们螯合双膦酸盐，然后从注射部位緩慢释放药本发明的另一个目的是提供纳米微粒双膦酸盐制剂的口服剂型，它克服了生物利用度问题和与先前的普通双膦酸盐制剂如FOSAMAX、八11￡01八@和ACTONEL^有关的其它问题，包括胃肠刺激问题。口服剂型可以另外包含渗透促进剂如辛酸钠、螯合剂、pH敏感性包衣或其组合。本发明的另一个目的是提供含有多颗粒或整体式组合物的固体口服剂型，所述组合物含有至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐或唑来膦酸，和至少一种表面稳定剂，其中，与常规双膦酸盐相比，该组合物具有改善的生物利用度和减小的胃肠副作用。本发明的另一个目的是纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，与至少一种表面稳定剂的多颗粒或整体式口服组合物，其中，患者可以在即将睡觉前或早晨起床前服用该组合物。本发明的另一个目的是纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，与至少一种表面稳定剂的多颗粒或整体式口服组合物，其中，该组合物可以由患者服用，而不需要患者直坐来避免遭受双膦酸盐的胃肠副作用。常规的双膦酸盐组合物，>FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL、DIDRONEL⑧、BONIVA⑧和ZOMETA,不能在即将睡觉前或早晨起床前服用。这些常规的双膦酸盐组合物也要求患者给药后直坐至少30分钟，以避免遭受双膦酸盐的胃肠副作用。这些限制影响了患者按照给药说明的顺应'性和随后的药物效力。通过含有至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，至少一种表面稳定剂，和辛酸钠的多颗粒或整体式组合物实现了以上目的。该组合物可进一步含有螯合剂。双膦酸盐颗粒优选被pH-敏感性涂层所包衣。口服递送以后，该组合物在肠内释放双膦酸盐纳米微粒，从而避免了胃肠刺激。本发明另一方面提供了制备纳米孩吏粒双膦酸盐组合物的方法。该方法包括(l)将至少一种双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，分散在双膦酸盐难溶于其中的液体分散介质中；和(2)用机械方法将双膦酸盐的颗粒大小减小到想要的有效平均粒径，例如小于约2000nm。在双膦酸盐粒径减小之前、期间或之后，可以将一种或多种表面稳定剂添加到组合物中。在一个实施方案中，双膦酸盐与多价阳离子如。&++复合，以减小双膦酸盐的水溶性。这种复合能使双膦酸盐在水性介质中粒径减小。在粒径减小以后，纳米微粒双膦酸盐组合物可以制成任何药学可接受的剂型，如注射剂型或口服剂型。在一个实施方案中，本发明进一步公开了制备本发明纳米微粒双膦酸盐组合物的多颗粒或整体式口服组合物的方法，包括将纳米微粒双膦酸盐、至少一种表面稳定剂、辛酸钠、和优选的螯合剂，如EDTA或EGTA混合，接着用pH-敏感性涂层将药物颗粒包衣的步骤。本发明还涉及使用本发明纳米微粒双膦酸盐组合物的治疗方法，包括但不限于治疗与异常骨吸收有关的疾病。该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明纳米微粒双膦酸盐组合物。上述一般性叙述和下列详细说明都只是示例性和解释性的，旨在提供权利要求请求保护的发明的进一步的解释。从本发明的下列详细说明,其他目的,优点和新的特征对于本领域技术人员来说将是明显的.发明的详细描述本发明涉及含有至少一种双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，和至少一种表面稳定剂的纳米微粒双膦酸盐组合物，其中双膦酸盐颗粒具有小于约2000nm的有效平均粒径。双膦酸盐的常规片剂，如FOSAMAX⑧、ACTONEL、DIDRONEL和BONIVA⑧，都具有有限的生物利用度。虽然双膦酸盐如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸盐是水溶性的(水溶性通常与高生物利用度有关)，但是通过给药，常规的双膦酸盐经常与周围环境中的阳离子复合和沉淀，从而抑制了双膦酸盐的细胞扩散，而细胞扩散对于药物吸收来说是必需的。而且，由于化合物的高度极性，常规双膦酸盐不能很好地扩散通过肠壁。本发明包括另外包含螯合剂的纳米微粒双膦酸盐组合物。认为螯合剂通过与胃肠道内的阳离子结合提高了双膦酸盐的生物利用度，也就是说，螯合剂与双膦酸盐竟争结合胃肠道内的阳离子，从而减少了与胃肠道内阳离子结合的双膦酸盐的量。通常预期这些螯合剂的存在将进一步降低双膦酸盐剂型的生物利用度。然而，将双膦酸盐的粒径减小到纳米微粒大小，这极大地增大了药物的表面积，导致与常规双膦酸盐剂型相比，该双膦酸盐组合物具有显著提高的生物利用度。在本发明的另一个实施方案中，纳米微粒双膦酸盐可以与多价阳离子如Ca+、或难溶于水的其它盐，或难溶于水的酯或前药复合。这种复合能使水性介质中的双膦酸盐粒径减小。通过将双膦酸盐颗粒与辛酸钠颗粒混合，从而使较小剂量在体内达到相同的血中浓度(过去需要较大的剂量)，可以进一步提高双膦酸盐的生物利用度。而且，对于口服剂型来说，双膦酸盐颗粒可以被pH-壽文感性涂层所包衣，该涂层延迟颗粒内容物扩散，直至颗粒达到肠道。相应地，包衣颗粒减小了由目前使用的常规双膦酸盐在胃肠道内释放所带来的可能存在的不希望的副作用。本发明的方法和组合物对于抑制骨吸收和对于治疗和预防异常骨吸收和与其相关的病症是有用的。这些病症包括全身骨丢失和局部骨丟失。并且，具有异常结构的骨的建立，如在佩吉特氏病(paget，sdisease)中，可以与异常骨吸收有关。术语"全身骨丟失"指的是在多个骨骼位置处或在整个骨骼系统中都有骨丢失。术语"局部骨丢失"指的是在一个或多个特定的、明确的骨骼部位有骨丢失。全身骨丟失常常与骨质疏松有关。骨质疏松在雌激素生产已经大大地减少了的绝经后妇女中是最常见的。然而，骨质疏松也可以是类固醇引起的，并且由于年龄因素在男性中也已经观察到了。骨质疏松可以由疾病引起，例如类风湿性关节炎，它可以由继发性原因引起，例如糖皮质激素治疗，或者它可以与不明确的原因有关，即骨质疏松。在本发明中，优选的方法包括在骨质疏松患者中治疗或预防异常骨吸收。局部骨丢失与牙周病、骨折、和与假体周围骨溶解(换句话说，在假体性植入物周围发生了骨吸收)有关。全身或局部骨丟失可以由废用引起，废用是被局限在床上或轮椅上的人经常存在的问题，或者是在模型或在肌肉牵引中具有固定四肢装置的人存在的问题。有用的骨质疏松，它可以包括绝经后骨质疏松、类固醇引起的骨质疏松、男性骨质疏松、疾病引起的骨质疏松、特发性骨质疏松；佩吉特氏病；异常增加的骨循环；牙周病；与假体周围骨溶解有关的局部骨丢失；和骨折。当与普通双膦酸盐剂型如FOSAMAX、AREDIA⑧、ACTONEL⑧、DIDRONEL、BONIVA⑧和ZOMETA⑧相比时，本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物的优点包括但不限于(l)提高的生物利用度；(2)减小的胃肠刺激；(3)通过施用本发明的双膦酸盐注射剂型有降低的疼痛；(4)更小的片剂或其它固体剂型大小；(5)获得相同的药理学效果需要较小剂量的双膦酸盐；(6)改善的药代动力学分布；("当在进食条件下施用时本发明的双膦酸盐组合物具有与禁食条件相当的生物等效性；(8)增大的溶出速率；(9)本发明的生物粘附双膦酸盐组合物；和(10)本发明的组合物可以与其它活性剂联合使用，用于治疗与异常骨吸收相关的病症。本发明还包括含有一种或多种无毒生理学可接受的载体、辅剂或赋形剂(统称为载体)的纳米微粒双膦酸盐组合物。该组合物可以制成用于胃肠外注射(例如肌内或皮下贮库)、固体、液体、或气雾剂形式的口服给药、阴道、鼻、耳、直肠、眼内、局部(粉末、膏剂或滴剂)、面颊、脑池内、腹膜内、或局部给药，等等。虽然本发明的示例性剂型是固体剂型和注射剂型，但也可以利用任何药学可接受的剂型。示例性的固体剂型包括但不限于片剂、胶囊、囊剂、锭剂、散剂、丸剂、或颗粒剂，并且固体剂型可以是例如速溶剂型、控释剂型、冻干剂型、緩释剂型、延时释放剂型、或其组合。固体剂量片剂是优选的。在优选形式中，注射剂型的量维持在贮库中，以通过肌内或皮下注射持续释放给人类患者。A.定义如下所列和在整篇申请中，用多个定义在本文中描述本发明。当用在本文中时，本领域普通技术人员可以理解"大约"的含义，在它所用的上下文中可以有一定程度的改变。如果使用了该术语，而本领域普通技术人员不清楚该术语在其使用的上下文中的含义，"大约"将指代至多加或减特定术语的10%。当用在本文中涉及双膦酸盐颗粒时，"稳定"表示双膦酸盐颗粒不会由于颗粒内吸引力而可观地絮凝或成团，或者在其它方面自发地粒径增大。术语"小于约2000nm的有效平均粒径"当用在本文中时，表示当用例如疏松度场流分级法、光子相关光谱学、光散射、圆盘离心法和本领域技术人员已知的其它技术测量时，至少50%双膦酸盐颗粒具有按重量计小于约2000nm的^i径。术语"常规"或"非-纳米微粒"双膦酸盐表示溶解的或具有大于约2000nm有效平均粒径的双膦酸盐。本文定义的纳米微粒活性剂具有小于约2000nm的有效平均粒径。当用在本文中时，短语"治疗有效量"表示在需要该治疗的大量患者中施用药物时，提供特定的药理学响应的药物剂量。它强调的是，在特定情况下对患者个体施用的药物的治疗有效量不一定总能有效治疗本文所述的病症/疾病，即使本领域技术人员^人为该剂量是治疗有效量。术语"异常骨吸收"当用在本文中时表示骨吸收的程度超过骨形成的程度，或者在局部，或者是全身骨骼。可选择地，"异常骨吸收"可以与具有异常结构的骨的形成有关。术语"抑制骨吸收"当用在本文中时表示通过直接或间接改变破骨细胞生成或其活性来治疗或预防骨吸收。抑制骨吸收指的是治疗或预防骨丟失，尤其是通过直接或间接改变破骨细胞生成或其活性来抑制来自矿物相和/或有机基质相的现有骨的丢失。术语"颗粒"当用在本文中时指的是物质的状态，其特征是存在离散的微粒、团粒、珠粒或颗粒，而不论它们的大小、形状或形态怎样。术语"多颗粒"当用在本文中时表示大量离散的或聚集的微粒、团粒、珠粒或颗粒或其混合物，而不论它们的大小、形状或形态怎样。B.本发明的双膦酸盐组合物的优选特性1.提高的生物利用度纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，本发明的组合物，包括口服剂型，被认为表现出了提高的生物利用度，且需要更小的剂量，当与现有的普通双膦酸盐组合物，如FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA⑧和ZOMETA⑧相比时。对于含有螯合剂的纳米微粒双膦酸盐组合物来说，螯合剂颗粒通过与胃肠道内的阳离子结合提高了双膦酸盐的生物利用度。对于某些剂型如口服剂型来说，纳米微粒双膦酸盐的生物利用度也可通过加入辛酸钠来提高。另外，对于某些剂型如口服剂型来说，用pH敏感性包衣材料给双膦酸盐颗粒包衣防止双膦酸盐在达到小肠之前溶出，这减小了对食管和胃的不良反应。更小的双膦酸盐剂量，例如纳米微粒双膦酸盐组合物所能提供的剂量，通过减小产生胃肠不良反应的可能性而对患者有益，其中的胃肠不良反应可以由常规非纳米微粒双膦酸盐的给药引起，尤其是阿仑膦酸钠。这些作用可能发生在食管、胃、肠和直肠中，尤其是上胃肠道，即食管和胃。常规双膦酸盐如FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL⑧、DIDRONEL、BONIVA⑧和ZOMETA的胃肠不良反应的非限制性实例包括但不限于GERP、食管炎、消化不良、溃疡、食管刺激、食管穿孔、腹痛和便秘。2.本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物的药代动力学曲线不受摄取组合物的患者进食或禁食状态影响。本发明的组合物包含纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，其中，双膦酸盐的药代动力学曲线基本上不受摄取组合物的患者进食或禁食状态影响。这意味着当包含纳米微粒双膦酸盐如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的纳米^:粒组合物在进食或禁食状态下施用时，所吸收的双膦酸盐的量或药物吸收速度有很小的区别或没有可察觉的区别。基本上可消除食物影响的剂型的益处包括给患者增加便利，从而提高患者的顺应性，因为患者不需要确保他们与食物一起或不与食物一起服用药剂。由于极少患者可顺应双膦酸盐、阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸，因此这是显著的，可观察到所述药物浮皮开处方的医学病症的增加。本发明还优选提供了当给哺乳动物患者施用时具有所希望的药代动力学曲线、含有至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物。所希望的含有至少一种双膦酸盐组合物的药代动力学曲线优选包括但不限于(l)双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的Cmax,当症合药后分析哺乳动物患者血浆时，优选大于以相同剂量给药的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA⑧和Z〇META》々Cmax;和/或(2)双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的AUC，当给药后分析哺乳动物患者血浆时，优选大于以相同剂量给药的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如FOSAMAX，AREDIA，ACTONEL,DIDRONEL,BONIVA⑧和ZOMETA⑧)的AUC;和/或(3)双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的Tmax，当给药后分析哺乳动物患者血浆时，优选大于以相同剂量给药的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA⑧和ZOMETA⑧)的Tmax。所希望的药代动力学曲线，当用在本文中时，是起始剂量双膦酸盐之后测量的药代动力学曲线。在一个实施方案中，包含至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物，在与相同剂量施用的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如F〇SAMAX、AREDIA⑧、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA⑧和ZOMETAt,进行比较的药代动力学试验中，表现出Tmax不大于非-纳米微粒双膦酸盐制剂所表现出的Tmax的约90%、不大于约80%、不大于约70%、不大于约60%、不大于约50%、不大于约30%、不大于约25%、不大于约20%、不大于约15%、不大于约10%或不大于约5%。在另一个实施方案中，包含至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物，在与相同剂量施用的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如FOSAMAX、AREDIA、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA和ZOMETA)进行比较的药代动力学试验中，表现出Cmax大于非-纳米微粒双膦酸盐制剂所表现出的Cmax至少约50%、至少约100%、至少约200%、至少约300%、至少约400%、至少约500%、至少约600%、至少约700%、至少约800%、至少约900%、至少约1000%、至少约1100%、至少约1200%、至少约1300%、至少约1400%、至少约1500%、至少约1600%、至少约1700%、至少约1800%或至少约1900%。在又一个实施方案中，本发明包含至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物，在与相同剂量施用的相同双膦酸盐的非纳米微粒制剂(如FOSAMAX⑧、AREDIA⑧、ACTONEL、DIDRONEL、BONIVA⑧和20\1￡丁八@)进行比较的药代动力学试验中，表现出AUC大于非-纳米微粒双膦酸盐制剂所表现出的AUC至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约100%、至少约125%、至少约150%、至少约175%、至少约200%、至少约225%、至少约250%、至少约275%、至少约300%、至少约350%、至少约400%、至少约450%、至少约500%、至少约550%、至少约600%、至少约750%、至少约700%、至少约750%、至少约800%、至少约850%、至少约900%、至少约950%、至少约1000%、至少约1050%、至少约1100%、至少约1150%或至少约1200%。3.与禁食状态相比，在进食状态下施用本发明双膦酸盐组合物的生物等效性。本发明还包括含至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物，其中，组合物向禁食状态患者给药与组合物向进食状态患者具有给药生物等效性。当在进食状态下给药相对于在禁食状态下给药时，含纳米微粒双膦酸盐的组合物吸收的区别优选小于约35%、小于约30%、小于约25%、小于约20%、小于约15%、小于约10%、小于约5%或小于约3%。在本发明的一个实施方案中，本发明包括含至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的组合物，其中，组合物向禁食状态患者给药与组合物向进食状态患者具有给药生物等效性，尤其是如美国食品与药品监督管理局和相关的欧洲管理局(Europeanregulatoryagency)(EMEA)纟会出的Cmax和AUC指导方针所定义的那样。在美国FDA指导方针中，如果AUC和Cmax的卯％置信区间(CI)介于0.80到1.25之间，那么两种产品或方法就是生物等效的(就管理目的来说，Tmax测量结果与生物等效性无关)。按照欧洲的EMEA指导方针，为了显示两个化合物或给药条件之间的生物等效性，AUC的90%CI必需介于0.80到1.25之间，Cmax的90%CI必需介于0.70到1.43之间。4.本发明双膦酸盐组合物的溶出曲线含有至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的本发明的组合物具有出乎意料的引人注目的溶出曲线。所施用的双膦酸盐快速溶出是优选的，因为更快的溶出通常会导致更快的起效和更大的生物利用度。为了提高含有至少一种纳米微粒双膦酸盐组合物的溶出曲线和生物利用度，提高药物的溶出以使它能够达到接近100%的水平是有用的。含有至少一种纳米微粒双膦酸盐的本发明的组合物优选具有如下溶出曲线，其中在大约5分钟内，至少约20%的组合物溶出，在本发明其它实施方案中，至少约30%或至少约40%的含有至少一种纳米微粒双膦酸盐的组合物在大约5分钟内溶出，在本发明的又一个实施方案中，优选至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%或至少约80%含有至少一种纳米微粒双膦酸盐的组合物在约IO分钟内溶出。最后，在本发明的另一个实施方案中，优选至少约70%、至少约80%、至少约90%或至少约100%含有至少一种纳米微粒双膦酸盐的组合物在约20分钟内溶出。优选在有差别的介质中测量溶出度。这样的溶出介质将为在胃液中具有非常不同的溶出曲线的两种产品产生两种极为不同的溶出曲线，即溶出介质可预言组合物的体内溶出。一种示例性的溶出介质是含0.025M表面活性剂月桂基硫酸钠的水性介质。溶出的量的测定可以用分光光度法来进行。转篮法(欧洲药典)可以用于测量溶出度。5.本发明纳米微粒双膦酸盐组合物的再分散曲线在本发明的一个实施方案中，本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物被制成固体剂型，包括散剂，该剂型重新分散使得再分散的双膦酸盐颗粒的有效平均粒径小于约2微米。这是重要的，因为如果通过给药，纳米微粒双膦酸盐组合物不能再分散成纳米微粒粒径，那么剂型就可能失去将双膦酸盐配制成纳米微粒粒径所得的益处。的确，本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物从双膦酸盐的小粒径中获益；如果双膦酸盐通过给药不能再分散成小粒径的话，那么由于纳米微粒系统极高的表面自由能和热力学驱动力就会形成"团块"或聚集的双膦酸盐颗粒，以全部降低自由能。随着这样的聚集颗粒的形成，双膦酸盐剂型的生物利用度可能下降。而且，本发明的纳米孩丈粒双膦酸盐组合物通过向哺乳动物如人或动物给药，显示出了纳米微粒双膦酸盐颗粒引人注目的再分散性能，如在生物体相关的水性介质中由重构/再分散所证明的那样，再分散的双膦酸盐颗粒的有效平均粒径小于约2微米。这样的生物相关的水性介质可以是表现出所需的离子强度和pH的任何水性介质，它构成了介质的生物相关性的基础。所需的pH和离子强度是代表在人体中发现的生理学条件的那些pH和离子强度。这样的生物相关的水性介质可以是，例如，表现出所需的pH和离子强度的水性电解质溶液，或任何盐、酸或碱的水溶液或其组合。在生物相关介质中的这种再分散可预言双膦酸盐剂型的体内,支力。生物相关的pH是本领域公知的。例如在胃中，pH范围是略微小于2(但又通常大于1)直至4或5。在小肠中，pH范围是4到6，在结肠中，该范围是6到8。生物相关的离子强度也是领域公知的。禁食状态的胃液具有约0.1M的离子强度，而禁食状态的肠液具有约0.14的离子强度。参见,J戈口Lindahl等，"CharacterizationofFluidsfromtheStomachandProximalJejunuminMenandWomen,"Pharm.Res.,14(4):497-502(1997)。据信试验溶液的pH和离子强度比具体的化学内容物更关键。相应地，通过强酸、强石咸、盐、单个或多个共辄酸碱对(即弱酸和该酸相应的盐)、一元和多元电解质等的很多组合可以获得适当的pH和离子强度值。典型的电解质溶液可以是，但不限于，浓度范围从约0.001到约0.1N的HC1溶液，和浓度范围从约0.001到约0.1M的NaCl溶液，及其混合物。例如，电解质溶液可以是，但不限于，约0.1NHC1或更小、约0.01NHC1或更小、约0.001NHC1或更小、约0.1MNaCl或更小、约0.01MNaCl或更小、约0.001MNaCl或更小、及其混合物。在这些电解质溶液中，0.01NHC1和/或0.1MNaCl是最具代表性的禁食人生理学条件，由于近端胃肠道的pH和离子强度条件的关系。0.001NHCl、0.01NHCl和0.1NHC1的电解质浓度分别相应于pH3、pH2和pHl。因此，0.01NHCl溶液才莫拟胃内的典型酸性条件。0.1MNaCl溶液提供合理近似的全身离子强度条件，包括胃肠液，尽管高于0.1M的浓度也可用于模拟人胃肠道内的禁食条件。具有所需的pH和离子强度的盐、酸、碱或其组合的典型溶液包括但不限于磷酸/磷酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钓，醋酸/醋酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钓，碳酸/碳酸氢盐+氯化钠、氯化钾和氯化钙，和柠檬酸/柠檬酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钩。在本发明的其它实施方案中，本发明的再分散双膦酸盐颗粒(再分散在水性介质、生物相关的介质、或任何其它合适的介质中)具有小于约2000nm、小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约IOOnm、小于约75nm或小于约50nm的有效平均粒径，如光散射法、显微镜检查法或其它适当方法所测量的。适合于测量有效平均粒径的这些方法是本领域普通技术人员已知的。可以用现有技术已知的任何适当的方法测量再分散性。参见例如名为"包含聚合物表面稳定剂和磺琥辛酯钠的协同组合的固体剂量纳米微粒组合物"的美国专利第6,375,986号的实施例部分。6.与其它活性剂联合使用的纳米微粒双膦酸盐组合物含有至少一种纳米微粒双膦酸盐，如阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸的本发明组合物可以另外包含在治疗骨吸收或相关病症中有用的一种或多种化合物。本发明的组合物可以与这些其它活性剂共同配制，或者本发明的组合物可以与这些活性剂共同给药或顺序给药。示例性的其它活性剂包括但不限于钙补充剂、选择性雌激素受体调节剂(例如雷洛昔芬(EVISTA))、激素类如降钙素(CALCIMAR或MIACALCIN)、和/或甲状旁腺素(包括PTH(l-84)和PTH(1-34)(例如特立帕肽(FORTE0⑧))。C.组合物本发明提供了含有至少一种纳米微粒双膦酸盐和至少一种表面稳定剂的组合物。表面稳定剂优选吸附到膦酸盐颗粒表面上或与双膦酸盐颗粒表面相联。如果双膦酸盐颗粒存在于与阳离子的复合物中，那么表面稳定剂就吸附到双膦酸盐复合物表面上或与双膦酸盐复合物表面相联。在本文中有用的表面稳定剂不与双膦酸盐颗粒发生化学反应或者它本身不发生化学反应。优选地，表面稳定剂的个体分子基本上不存在分子间交联。在另一个实施方案中，本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物可以含有两种或多种表面稳定剂。本发明还包括与多价阳离子复合的纳米微粒双膦酸盐，如Ca—或难溶于水的其它盐，或难溶于水的酯类或前药。这样的复合物能使水性介质中的双膦酸盐粒径减小。纳米微粒双膦酸盐组合物可以包含一种或多种无毒的生理学可接受的载体、辅剂或f武形剂，它们统一称为载体。该组合物可以配制成任何药学可接受的剂型，包括但不限于口服剂型和可注射剂型。1.双膦酸盐本发明的方法和组合物包含双膦酸盐，包括但不限于阿仑膦酸盐、帕米膦酸盐、利塞膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐和唑来膦酸。当施混合物(外消旋混合物或其它方面的混合物)的形式存在。本发明的双膦酸盐也可交换地称为"双膦酸盐化合物"。本发明的双膦酸盐符合如下化学式<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage29</formula>其中A和X独立地选自H、OH、卣素、NH2、SH、苯基、C1-C30烷基、C1-C30取代的烷基、C1-C10烷基或二烷基取代的NH2、C1-C10烷氧基、C1-C10烷基或苯基取代的硫代、C1-C10烷基取代的苯基、吡啶基、呋喃基、处咯烷基、imidazonyl和苯甲基。在以上化学式中，烷基可以是直链的、支链的或或环状的，条件是为化学式选择足够的原子。C1-C30取代的烷基可以包括很多取代基，其非限制性实例包括选自如下的那些苯基、吡啶基、呋喃基、吡咯烷基、imidazonyl、NH2、C1-C10烷基或二烷基取代的NH2、OH、SH和Cl-C10烷氧基。上述化学式也打算包括A和/或X取代基的复杂碳环、芳香结构和杂原子结构，其非限制性实例包括萘基、喹啉基、异喹啉基、金刚烷基和氯苯基碌u代。优选的结构是那些，其中，A选自H、OH和卣素，X选自C1-C30烷基、Cl-C30取代的烷基、卣素、和C1-C10烷基或苯基取代的硫代。更优选的结构是那些，其中，A选自H、OH和Cl,X选自Cl-C30烷基、Cl-C30取代的烷基、Cl、和氯苯基硫代。最优选的是当A是OH时，X是3-氨基丙基部分，以使所得的化合物是4-氨基-l,-羟基亚丁基-U-双膦酸盐，即阿仑膦酸盐。双膦酸盐的药学可接受的盐和衍生物在本文中也是有用的。盐的非限制性实例包括选自下组的那些碱金属、碱土金属(alkalinemetal)、铵和单-、二-、三-或四-Cl-C30-烷基-取代的铵。优选的盐是选自下列的那些盐钠、钾、钩、镁和铵盐。衍生物的非限制性实例包括选自酯类、水合物和酰胺的那些。"药学可接受的"当用于本文中时表示双膦酸盐的盐和衍生物具有和它们衍生自的游离酸同样的一般药理学性质，从毒性观点来看是可接受的。术语"双膦酸盐(bisphosphonate)"和"双膦酸盐类"当用于本文中指代本发明的治疗剂时，还打算包括二膦酸盐(disphosphonates)、双膦酸和二膦酸，以及这些物质的盐和书t生物。在4是及双膦酸盐或双膦酸盐类时，特定命名法的使用并不打算限制本发明的范围，除非特别指出。由于本领域普通技术人员当前使用的混杂命名法，在本发明中提及双膦酸盐化合物的特定重量或百分数是基于酸的活性重量基础，除非在本文中特别指出。例如，术语"约70mg选自阿仑膦酸盐、其药学可接受的盐、及其混合物的骨吸收抑制剂双膦酸盐，基于阿仑膦酸的活性重量基础"表示所选择的双膦酸盐化合物的量是基于70mg阿仑膦酸计算的。在本文中有用的双膦酸盐的非限制性实例包括下列.阿仑膦酸，4-氨基-1-羟基亚丁基-1,1-二膦酸。-阿仑膦酸盐(也称为阿仑膦酸钠或一钠三水合物)，4-氨基-l-羟基亚丁基-l,l-二膦酸一钠三水合物。-阿仑膦酸和阿仑膦酸盐描述在1990年5月1日发行的授予Kieczykowski等的美国专利第4,922,007号中，和1991年5月28曰发行的授予Kieczykowski的美国专利第5,019,651号中，这两篇专利都全文引入本文作为参考。环庚基氨基亚甲基-l,l-二膦酸，YM175，Yamanouchi(cimad腦ate)，如美国专利第4,970,335号中所述。.l,l-二氯亚甲基-U-二膦酸(氯膦酸)，和二钠盐(氯膦酸盐，Procter和Gamble)，描述在比利时专利672,205(1966)和丄C/zew32,4111(1967)中。'l-羟基-3-(l-吡咯烷基)-亚丙基-l,l-二膦酸(EB-1053)。-l-羟基乙烷-l,l-二膦酸(依替膦酸)。-l-羟基-3-(N-甲基-N-戊基氨基)亚丙基-l,l-二膦酸，也称为BM-2-210955，Boehrmger-Mannhdm(伊班膦酸盐)，描述在美国专利第4,927,814号中。-[(环庚基-氨基)亚曱基]二膦酸(英卡膦酸)。-6-氨基-l-羟基亚己基-l,l-二膦酸(奈立膦酸盐)。-3-(二甲基氨基)-l-羟基亚丙基-l，l-二膦酸(奥帕膦酸盐)。.3-氨基-l-羟基亚丙基-U-二膦酸(帕米膦酸盐)。.[2-(2-吡啶基)亚乙基]-l,l-二膦酸(吡膦酸盐(pindronate)),如美国专利第4,761,406号所述。-l-羟基-2-(3-吡啶基)-亚乙基-l,l-二膦酸(利塞膦酸盐)。(4-氯苯基)硫甲烷-l,l-双膦酸(替鲁膦酸盐)，如美国专利第4,876,248号所述。.1-羟基-2-(1H-咪唑-l-基)亚乙基-l,l-二膦酸(唑来膦酸盐)。-示例性双膦酸盐包括但不限于阿仑膦酸盐、英卡膦酸盐、奥帕膦酸盐、cimadronate、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、依替膦酸盐、奈立膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、吡膦酸盐、帕米膦酸盐、唑来膦酸盐、其药学可接受的盐、如阿仑膦酸钠和阿仑膦酸一钠三水合物，及其混合物。2.表面稳定剂多于一种表面稳定剂的组合可以用于本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物。适宜的表面稳定剂包括但不限于已知的有机和无机药学赋形剂。这些赋形剂包括各种聚合物、低分子量寡聚物、天然产物和表面活性剂。表面稳定剂包括非离子、离子、阴离子、阳离子和两性离子表面活性剂。表面稳定剂的代表性实例包括但不限于羟丙基甲基纤维素(现在称为羟丙甲基纤维素)，羟丙基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，月桂基硫酸钠，二辛基琥珀酰磺酸钠，明胶，酪蛋白，卵磷脂(磷脂)，右旋糖酐，阿拉伯胶，胆固醇，黄蓍胶，硬脂酸，苯扎氯铵，硬脂酸钩，单硬脂酸甘油酯，鲸蜡硬脂醇(cetostearylalcohol),聚西托醇乳化蜡，脱水山梨糖醇酯，聚氧乙烯烷基醚(例如聚乙二醇醚，如cetomacrogol1000),聚氧乙烯荒麻油衍生物，聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如商业上可得的Tween⑧，例如Tween20⑧和Tween80(ICISpecialityChemicals));聚乙二醇(例如Carbowaxes3550⑧和934(UnionCarbide)),聚氧乙烯硬—脂酸酯，胶体二氧化硅，磷酸盐，羧甲基纤维素钙，羧曱基纤维素钠，曱基纤维素，羟乙基纤维素，羟丙甲基纤维素酞酸酯，非晶体纤维素，硅酸镁铝，三乙醇胺，聚乙烯醇(PVA)，与环氧乙烷和甲醛的4-(1,1，3，3-四曱基丁基)-苯酚聚合物(也称为泰洛沙泊、supenone和tnton),泊洛沙姆(例如Pluromcs68@和F108,它是环氧乙烷和环氧丙烷的嵌賴二共聚物)；poloxamines(例如Tetronic908，也称为Poloxamine908,它是环氧丙烷和环氧乙烷连续加成到乙二胺上生成的四官能团嵌段共聚物(BASFWyandotteCorporation,Parsippany,NJ.));Tetronic1508(T-1508)(BASFWyandotteCorporation),TritonsX-200,它是烷基芳基聚醚磺酸酯(RohmandHaas);CrodestasF-l10，它是蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物(CrodaInc.);对异壬基苯氧基聚-(缩水甘油)，也称为01m-IOG⑧或Surfactant10-G(OlinChemicals,Stamford,CT);CrodestasSL-40(Croda，Inc.);和SA90HCO，它是C18H37CH2(CON(CH3)-CH2(CHOH)4(CH20H)2(EastmanKodakCo.);癸酰基-N-曱基葡萄糖酰胺；正-癸基(-D-吡喃葡萄糖苷；正-癸基(-D-吡喃麦芽糖苷；正-十二烷基(-D-吡喃葡萄糖苷；正-十二烷基(-D-麦芽苷；庚酰基-N-甲基葡萄糖酰胺；正-庚基-(-D-吡喃葡萄糖苷；正-庚基(-D-硫葡萄糖苷；正-己基(-D-吡喃葡萄糖苷；壬酰基-N-曱基葡萄糖酰胺；正-壬基(-D-吡喃葡萄糖苷；辛酰基-N-曱基葡萄糖酰胺；正-辛基-(-D-吡喃葡萄糖苷；辛基(-D-硫代吡喃葡萄糖苷；PEG-磷脂，PEG-胆固醇，PEG-胆固醇衍生物，PEG-维生素A，PEG-维生素E,溶菌酶，乙烯基吡咯烷酮和醋酸乙烯的无规则共聚物，等等。有用的阳离子表面稳定剂的实例包括但不限于聚合物、生物聚合物、多糖、纤维质、藻酸盐、磷脂和非聚合化合物，如两性离子稳定剂，聚-正-甲基吡咬锡，anthryul吡咬镥氯化物，阳离子磷脂，壳聚糖，聚赖氨酸，聚乙烯咪唑，聚凝胺，聚甲基丙烯酸甲酯三曱基溴化铵溴化物(PMMTMABr)，己基二苯乙酮基(desyl)三曱基溴化铵(HDMAB)，和聚乙烯吡咯烷酮-2-二曱氨基乙基曱基丙烯酸酯二曱基硫酸酯。其它有用的阳离子稳定剂包括但不限于，阳离子脂质，锍，辚，和季铵化合物，如硬脂酰三甲基氯化铵，苯甲基-二(2-氯乙基)乙基溴化铵，椰子三曱基氯化或溴化铵，椰子甲基二羟乙基氯化或溴化铵，癸基三乙基氯化铵，癸基二甲基羟乙基氯化或溴化铵，C12-15二甲基羟乙基氯化或溴化铵，椰子二曱基羟乙基氯化或溴化铵，肉豆蔻基三甲基铵甲基硫酸酯，月桂基二曱基苯甲基氯化或溴化铵，月桂基二甲基(乙烯氧基)4氯化或溴化铵，N-烷基(C^)二甲基苯甲基氯化铵，N-烷基(d4-!8)二甲基-苯甲基氯化铵，N-十四烷基二曱基苯甲基氯化铵一水合物，二甲基二癸基氯化铵，N-烷基和(。12-14)二甲基1-萘基曱基氯化铵，三甲基卣化铵，烷基-三曱基铵盐和二烷基-二曱基铵盐，月桂基三曱基氯化铵，乙氧基化烷酰氨基烷基二烷基铵盐和/或乙氧基化三烷基铵盐，二烷基苯二烷基氯化铵，N-二癸基二甲基氯化铵，N-十四烷基二曱基苯甲基氯化铵一水合物，N-烷基(dw4)二甲基1-萘基甲基氯化铵和十二烷基二曱基苯甲基氯化铵，二烷基苯烷基氯化铵，月桂基三甲基氯化铵，烷基苯曱基曱基氯化铵，烷基苯曱基二甲基溴化铵，C12、C15、Cn三甲基溴化铵，十二烷基苯甲基三乙基氯化铵，聚-二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)，二曱基氯化铵，烷基二甲基闺化铵，三鯨蜡基甲基氯化铵，癸基三甲基溴化铵，十二烷基三乙基溴化铵，十四烷基三甲基溴化铵，甲基三辛基氯化铵(ALIQUAT336)，POLYQUAT，四丁基浃化铵，苯甲基三甲基溴化铵，胆碱酯(如脂肪酸胆碱酯)，苯扎氯铵，硬脂基二甲基千基氯化铵(steamlkonmmchloride)合计勿(》口stearyltrimoniumchloride禾口distearyldimoniumchloride),鲸蜡基溴化吡咬锡或鲸蜡基氯化吡啶镥，四元聚氧乙基烷基胺的卣盐，MIRAPOL和ALK1AQUAT(AlkanlChemicalCompany),烷基吡啶镥盐；胺，如烷基胺，二烷基胺，烷醇胺，聚乙烯聚胺，N,N-二烷基氨基烷基丙烯酸酯，和乙烯吡啶，胺盐，如月桂酰胺醋酸酯，硬脂酰胺醋酸酯，烷基吡咬镜盐，和烷基咪唑镜盐，和胺氧化物；imideazolinmm盐；质子化季丙烯酰胺；甲基化四元聚合物，如聚[二烯丙基二甲基氯化铵]和聚-[N-曱基乙烯基氯化吡啶條];和阳离子瓜尔胶。这些示例性的阳离子表面稳定剂和其它有用的阳离子表面稳定剂4苗述在J.CrossandE.Singer,CationicSurfactants:AnalyticalandBiologicalEvaluation(MarcelDekker,1994);P.andD.Rubingh(编辑)，CationicSurfactants:PhysicalChemistry(MarcelDekker,1991);和J.Richmond,CationicSurfactants:OrganicChemistry,(MarcelDekker,1990)中。非聚合的表面稳定剂是任何非聚合化合物，如苯扎氯铵，碳徵化合物，辚化合物，氧镜化合物，halonmm化合物，阳离子有机金属化合物，季磷化合物，吡。定像化合物，苯胺离子(amlinium)化合物，铵化合物，羟基铵化合物，伯铵化合物，仲铵化合物，叔铵化合物，和式NRlR2R3R4(+)的季铵化合物。对于式NRlR2R3R4(+)化合物来说(i)没有一个R1-R4是CH3;(ii)Rl-R4中的一个是CH3;(iii)Rl-R4中的三个是CH3;(iv)所有R1-R4是CH3;(v)Rl-R4中的两个是CH3,Rl-R4中的一个是C6H5CH2，和Rl-R4中的一个是7个碳原子或更少碳原子的烷基链；(vi)Rl-R4中的两个是CH3，Rl-R4中的一个是C6H5CH2，和Rl-R4中的一个是十九个碳原子或更多个碳原子的烷基链；(vii)Rl-R4中的两个是CH3，和Rl-R4中的一个是基团C6H5(CH2)n,其中n〉l;(viii)Rl-R4中的两个是CH3,Rl-R4中的一个是C6H5CH2，和Rl-R4中的一个包含至少一个杂原子；(ix)Rl-R4中的两个是CH3，Rl-R4中的一个是C6H5CH2，和Rl-R4中的一个包含至少一个卣素；(x)Rl-R4中的两个是CH3,Rl-R4中的一个是C6H5CH2，和Rl-R4中的一个包含至少一个环状片段；(xi)Rl-R4中的两个是CH3，和Rl-R4中的一个是苯环；或(xii)Rl-R4中的两个是CH3，和Rl-R4中的两个是纯脂肪族片段。这些化合物包括但不限于behenalkoniumchloride,千索氯铵，鲸蜡基氯化吡啶嗡，二十二烷基三甲基氯化铵，劳拉氯铵，西他氯铵，西曲溴铵，西曲氯铵，氢氟酸十六烷胺，氯化氯烯丙基乌洛托品(Quaternium-15),氯化二硬脂基二甲基铵(Quaternium-5),氯化十二烷基二甲基乙基苯曱基4耍(Quaternium-14),Quaternium-22，Quaternium-26,Quatemmm-18锂蒙脱石，盐酸二甲基氨基乙基氯，盐酸半胱氨酸，磷酸二乙醇铵POE(10)oletyl醚，磷酸二乙醇铵POE(3)oleyl醚，牛油基烷铵氯化物(tallowalkoniumchloride),二甲基双十八烷基铵膨润土，硬脂烷铵氯化物，度米芬浃化物，苯甲地那铵，myristalkoniumchloride,laurtrimonmmchloride,二盐酸乙二胺，盐酸胍，盐酸吡,醇，盐酸石典非他胺，盐酸葡甲胺，曱基千索氯铵，myrtrimoniumbromide,oleyltrimomumchloride,polyquaternium-l,盐酉菱普鲁卡因，初卩油基《计菜碱(cocobetaine),硬脂基二曱基千基氯化铵和膨润土的反应产物(stearalkoniumbentonite)，stearalkonmmhectonite，二氢氟酉交石更月旨酰三,冬基乙基丙亚胺，牛油基三甲基氯化铵(tallowtrimoniumchloride),和十六烷基三甲基溴化铵。这些表面稳定剂中的大部分都是已知的药学赋形剂，详细描述在由美国药学会和大不列颠药学会联合出版(ThePharmaceuticalPress,2000)的HandbookofPharmaceuticalExcipients中,特另'J引入本文作为参考。果攀薪果合參聚维酮聚合物是用于配制可注射纳米微粒双膦酸盐组合物的示例性的表面稳定剂。聚维酮聚合物，也称为聚乙烯吡咯烷酮(polyvidonce)、povidonum、PVP牙口聚乙錄p比口各酉同，以商口口口名Kollidon(BASFCorp.)和Plasdone(ISPTechnologies,Inc.)出售。它们是化学名为l-乙烯基(ethenyl)-2-吡咯烷酮聚合物和1-乙烯基(vinyl)-L吡咯烷酮聚合物的多元分散体大分子。聚维酮聚合物在商业上作为平均分子量为约10，000到约700,000道尔顿的系列产品生产。为了能用作向哺乳动物施用的药物化合物的表面调节剂，聚维酮聚合物必须具有小于约40,000道尔顿的分子量，因为大于40,000道尔顿的分子量在清洁身体方面存在困难。聚维酮聚合物可通过例如Reppe's法制备，包括(l)通过Reppe丁二烯合成从乙炔和曱醛获得1,4-丁二醇；(2)在200。下用铜使1,4-丁二醇脱氢，形成Y-丁内酯；和(3)将y-丁内酯与氨水反应，生成吡咯烷酮。随后用乙炔处理，得到乙烯基吡咯烷酮单体。在H20和NH3的存在下通过加热进行聚合反应。参见默克索引，第10版，第7581页(Merck&Co.,Rahway,NJ,1983)。子量S聚:-。对于各个特定可商供的级二，分子的分子量可在:二的中值或平均数范围内变化。由于很难直接测定聚合物的分子量，因此划分不同分子量级别的最常用的方法是基于粘度测量结果，通过K-值来划分。不同级別聚维酮聚合物的K-值代表了平均分子量的功能，是从粘度测量得到的，根据Fikentscher's/>式计算。重均分子量Mw是通过测量各个分子的重量的方法来测量的，如通过光散射。表1提供了几个可商供的聚维酮聚合物的分子量数据，所有的这些聚维酮聚合物都是可溶的。表1<table>complextableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>*由于分子量大于40,000道尔顿，因此该聚维酮聚合物不能用作肠胃外给药(即注射)的药物化合物的表面稳定剂。"Mv是粘度-平均分子量，Mn是数均分子量，Mw是重均分子量。Mw和Mn是用光散射和超速离心测定的，Mv是用粘度测定法测定的。根据表l中提供的数据，示例性的有用的可商供的聚维酮聚合物包括但不限于PlasdoneC-15、Kollidon]2PF、Kollidon17PF⑧和Kollidon3.其它药学赋形剂本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物也可包含一种或多种粘合剂、填充剂、渗透促进剂、润滑剂、助悬剂、甜味剂、调味剂、防腐剂、緩冲剂、润湿剂、崩解剂、泡腾剂和其它赋形剂。这些赋形剂是本领域已知的。典型的粘合剂或黏合剂(binder)是淀粉糊或甲基纤维素。填充剂的实例是乳糖一水合物、无水乳糖和各种淀粉。粘合剂的实例是各种纤维素和交联聚乙烯吡咯烷酮，微晶纤维素，如AvicelPH101和AvicelPH102，微晶纤维素，和硅化微晶纤维素(ProSolvSMCC)。适宜的润滑剂，包括作用于粉末流动性以利于压片的试剂，是胶体二氧化硅，如Aerosil200、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和硅胶。含有纳米微粒双膦酸盐的水性混悬剂可以与适合于制造水性混悬剂的赋形剂混合在一起。这些赋形剂是助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、雍丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯月交。甜味剂的实例是任何天然或人工甜味剂，如蔗糖、木糖醇、糖精钠、环己烷氨基磺酸盐、阿司帕坦和acsulfame。调味剂的实例是Magnasweet(MAFCO的商标)、泡泡糖香料和水果香料等。防腐剂的实例是山梨酸钾，对羟基苯曱酸甲酯，对羟基苯曱酸丙酯，苯曱酸及其盐，对羟基苯甲酸的其它酯，如对羟基苯曱酸丁酯，醇，如乙醇或苯甲醇，酚类化合物，如苯酚，或季铵化合物，如苯扎氯铵。緩冲液的实例是磷酸盐緩冲液，柠檬酸盐緩冲液，和用其它有机酸制成的緩冲液。润湿剂或分散剂的实例是天然存在的磷脂，如卵磷脂，或正-环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七烷乙烯-氧基十六醇(heptadecaethylene-oxycetanol),或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的缩合产物，如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的部分酯的缩合产物，例如聚乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。适宜的稀释剂包括药学可接受的惰性填充剂，如微晶纤维素、乳糖、磷酸氢钙、糖类和/或上述任何物质的混合物。稀释剂的实例包括微晶纤维素，如AvicerPH101和AvicerPH102;乳糖，如乳糖一水合物、无水乳糖和Pharmatose⑧DCL21;磷酸氬钩，如Emcompress;甘露醇；淀粉；山梨醇；蔗糖；和葡萄糖。适宜的崩解剂包括稍微交联的聚乙烯吡咯烷酮、谷物淀粉(cornstarch)、马铃薯淀粉、玉米淀粉(maizestarch)和改性淀粉、交联羧曱基纤维素钠、交聚维酮、淀粉羟乙酸钠及其混合物。泡腾剂的实例是泡腾剂对，如有机酸和碳酸盐或碳酸氢盐。适宜的有机酸包括，例如，柠檬酸、酒石酸、苹果酸、富马酸、己二酸、琥珀酸、和海藻酸和酐和酸式盐。适宜的碳酸盐和碳酸氢盐包括，例如，碳酸钠、碳酸氬钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、甘氨酸碳酸钠(sodiumglycinecarbonate)、L-赖氨酸碳酸盐和精氨酸碳酸盐。可选择地，可只存在泡腾剂对的碳酸氲钠组分。4.复合剂纳米微粒双膦酸盐可以与多价或二价阳离子如Ca++、Zn2+、Mn2+，或难溶于水的其它盐，或难溶于水的酯或前药复合。这样的复合能使水性介质中的双膦酸盐粒径减小。5.增强剂组合物的双膦酸盐组分可伴随着例如增强剂化合物，以调节活性成分的生物利用度或治疗效果。当用在本文中时，术语"增强剂"指的是通过促进净输送穿过动物如人的胃肠道能够增加活性剂的吸收和/或生物利用度的化合物。增强剂包括但不限于中链脂肪酸；盐，酯，醚及其衍生物，包括甘油酯和甘油三酯；非离子型表面活性剂，如可以通过将环氧乙烷与脂肪酸、脂肪醇、烷基苯酚或山梨聚糖或甘油脂肪酸酯反应制备的那些表面活性剂；细胞色素P450抑制剂，P-糖蛋白抑制剂等；以及两种或多种这些试剂的混合物。6.纳米微粒双膦酸盐的固体剂型本发明的多颗粒或整体式口服纳米微粒双膦酸盐组合物优选包括至少一种螯合剂、辛酸钠和pH-敏感性包衣。常规双膦酸盐片剂，如FOSAMAX⑧、ACTONEL，DIDRONEL⑧和BONIVA,具有有限的生物利用度。虽然双膦酸盐是水溶性的(水溶性通常与高生物利用度有关)，但是通过给药，普通双膦酸盐常常与周围环境中的阳离子复合并沉淀，从而抑制了细胞扩散。本发明口服剂型中螯合剂的存在被认为通过代替双膦酸盐与胃肠道内的阳离子结合而提高了活性成分的生物利用度。典型的螯合剂是ot-羟基脂肪酸，棕榈酸，植酸，(乳铁蛋白)，a-羟基酸(例如柠檬酸、乳酸、苹果酸)，腐殖酸，胆汁酸，胆汁提取物，胆红素，胆绿素，乙二胺四乙酸("EDTA")和乙二醇双-(P-氨基乙基醚)-n,n,n,nL四乙酸("egta")及其衍生物，不饱和脂肪酸及其衍生物(例如"亚麻酸、亚油酸、油酸)，叶酸及其书f生物，和丙氨酸二乙酸(alaninediaceticacid)。优选的螯合剂是EDTA和EGTA。最优选的螯合剂是EDTA。在本发明实践中有用的pH-敏感性涂层优选是甲基丙烯酸、曱基丙烯酸酯及其酞酸酯的阴离子聚合物，在商业上以￡11(11:吗"@系列聚合物及其混合物提供。通过将双膦酸盐颗粒与辛酸钠颗粒混合可进一步^^高双膦酸盐的生物利用度，从而可施用较小剂量来达到与过去需要的较大剂量一样的体内血浆浓度。而且，双膦酸盐可以用pHH感性涂层包衣，这延迟了双膦酸盐颗粒的扩散，直至组合物到达肠内。相应地，包衣颗粒减小了目前使用的双膦酸盐在胃肠道内释放所产生的不希望的副作用。本发明的多颗粒或整体式口服调节释放组合物可掺到任何适合的剂型内。典型地，剂型是用于治疗与异常骨吸收相关病症的双膦酸盐颗粒、辛酸钠颗粒和螯合剂颗粒的不同群体的混合物。颗粒优选被pH-敏感性涂层包衣。颗粒可混合，混合物可填装到适宜的胶嚢，如硬或软明胶胶嚢内。包含成分的颗粒可压制(任选与另外的赋形剂一起)成迷你片剂。本发明的组合物可包含含双膦酸盐颗粒的至少两个群体，该颗粒具有不同的体外溶出曲线。例如通过改变两个或多个群体中存在的组分，或者通过改变各个群体中存在的双膦酸盐颗粒的粒径，可以改变这些溶出曲线。优选地，在操作中，本发明组合物和含该组合物的固体口服剂型不释放双膦酸盐，直至活性成分达到肠内。如上所述，通过在活性成分上使用pH敏感性包衣、辛酸钠和优选地螯合剂，双膦酸盐的释放被延迟。7.本发明可注射的纳米微粒双膦酸盐剂型本发明可注射的纳米微粒双膦酸盐组合物剂型优选包含至少一种纳米微粒双膦酸盐和至少一种表面稳定剂，其中纳米微粒双膦酸盐与盐或难溶于水的前药复合。复合物也可以包含多价阳离子，优选二价阳离子，如Ca卩、Zn2、lMn2+。多价或二价阳离子的存在显著地减小了所施用组合物的副作用和刺激性。在一个实施方案中，组合物被配制成可注射剂型，用于肌内或皮下注射，其中，组合物中双膦酸盐的浓度范围是约0.1%直至约60%(w/v)。在一个示例性的实施方案中，本发明提供了在小注射体积中可以包含高浓度药物的纳米微粒双膦酸盐。示例性的组合物包含(基于％w/w):双膦酸盐5-50%表面稳定剂0.1-50%防腐剂0.05-0.25%pH调节剂pH约6至约7注射用水适量。示例性的防腐剂包括对羟基苯曱酸甲酯(约0.18%，基于Q/。w/w)，对羟基苯曱酸丙酯(约0.02%,基于％w/w)，苯酚(约0.5%，基于％w/w)，和苯曱醇(至多2%v/v)。示例性的pH调节剂是氢氧化钠，和示例性的液体载体是灭菌注射用水。其它有用的防腐剂、pH调节剂和液体载体是本领域/^知的。在本发明的一个实施方案中，提供了可注射的纳米微粒双膦酸盐组合物，它形成皮下或肌内贮库，以使药物在一段时间内持续释放给哺乳动物。时间期间可以直至约l周，直至约2周，直至约3周，直至约4周，直至约1个月，直至约2个月，直至约3个月，直至约4个月，直至约5个月，直至约6个月，直至约7个月，直至约8个月，直至约9个月，直至约10个月，直至约ll个月，直至约12个月，直至约18个月，直至约2年，直至约30个月，直至约3年，直至约3年半，直至约4年，直至约4年半，或直至约5年，或一生给药一次。8.纳米孩i粒双膦酸盐粒径当用在本文中时，粒径是根据重均粒径来测量的，如本领域技术人员/>知的常规粒径测量技术所测量的那样。这些技术包括，例如，疏松度场流分级分离法、光子相关光谱学、光散射法和圆盘离心法。本发明的组合物包含至少一种双膦酸盐，其有效平均粒径小于约2000nm(即2孩i米)，在本发明的其它实施方案中，双膦酸盐纳米^鼓粒的有效平均粒径小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm或小于约50nm，如光散射法、显微镜法或其它适当方法所测量的。"小于约2000nm的有效平均粒径"表示至少50%的双膦酸盐颗粒具有按重量计小于有效平均数的粒径，即小于约^00nm。如果"有效平均粒径"小于约1900nm，那么至少约50。/。的双膦酸盐颗粒具有小于约1900nm的尺寸，当用上述技术测量时。以上其它粒径也是一样的。在其它实施方案中，至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、至少约95%或至少约99%的双膦酸盐颗粒具有小于有效平均数的粒径，即小于约2000nm、小于约1900nm、小于约1800nm等。在本发明中，纳米微粒双膦酸盐组合物的D50值是按重量计50%的双膦酸盐颗粒低于该值的粒径。类似地，D90是按重量计90。/。的双膦酸盐颗粒低于该值的粒径。9.纳米微粒双膦酸盐化合物和表面稳定剂的浓度双膦酸盐和一种或多种表面稳定剂的相对量可以在很大范围内改变。各个组分的最佳量例如取决于特定的双膦酸盐，和所选表面稳定剂的物理化学性质，例如亲水亲脂平衡值(HLB)、熔点、和稳定剂水溶液的表面张力等。优选地，双膦酸盐的浓度可以是按重量计约99.5%到约0.001%,约95%到约0.1%,或约90%到约0.5%，基于双膦酸盐和至少一种表面稳定剂的总联合重量，不包括其它赋形剂。从剂量和成本效率的观点来看，较高浓度的双膦酸盐通常是优选的。优选地，表面稳定剂的浓度可以是按重量计约0.5%到约99.999%，约5.0%到约99.9%,或约10%到约99.5%,基于双膦酸盐和至少一种表面稳定剂的总联合干重，不包括其它赋形剂。D.制备纳米微粒双膦酸盐组合物的方法纳米微粒双膦酸盐组合物可以用本领域已知的任何适当的方法制备，例如，研磨、均化、沉淀、或超临界流体质点生成技术。当双膦酸盐颗粒要在水性介质中减小粒径时，那么双膦酸盐首先与多价或二价阳离子如0&++、Zi^+或Mi^+，或其它难溶于水的盐，或难溶于水的酯或前药复合，以减小药物的水溶性。制备纳米微粒活性剂组合物的示例性方法描述在美国专利第5,145,684号中。制备纳米孩i粒活性剂组合物的方法也描述在名为"研磨药学物质的方法"的美国专利第5,518,187号；名为"研磨药学物质的连续方法"的美国专利第5,718,388号；名为"研磨药学物质的方法"的美国专利第5,862,999号；名为"纳米微粒药剂与晶体生长调节剂的共同微量沉淀"的美国专利第5,665,331号；名为"纳米微粒药剂与晶体生长调节剂的共同微量沉淀"的美国专利第5,662,883号；名为"纳米微粒药剂的微量沉淀"的美国专利第5,560,932号；名为"制备含纳米微粒的X-射线造影组合物的方法"的美国专利第5,543,133号；名为"制备稳定的药物纳米微粒的方法"的美国专利第5,534,270号;为"制备含纳米微粒的治疗组合物的方法"的美国专利第5,510,118号；和名为"制备含荷电磷脂的纳米微粒组合物以减小聚集的方法"的美国专利第5,470,583号，所有这些专利都引入本文作为参考。为了在水性介质中减小粒径，双膦酸盐与多价或二价阳离子如Ca++、Zn"或Mn"复合，以减小药物的水溶性。所得的纳米微粒双膦酸盐组合物或分散体可以以固体、半固体或液体剂型的形式利用，例如液体分散体、凝胶剂、气雾剂、膏剂、霜剂、控释制剂、速熔制剂、冻干制剂、片剂、胶嚢、緩释制剂、延迟释放制剂、脉冲式释放制剂、混合的速释和控释制剂，等。制备本发明纳米微粒双膦酸盐制剂的示例性方法包括下列步骤(1)将所需剂量的双膦酸盐复合物分散在药物难溶的液体分散介质中；和(2)将双膦酸盐复合物的粒径用机械方法减小至有效平均粒径小于约2000nm。可以在双膦酸盐复合物的粒径减小之前、过程中或之后将表面稳定剂添加到分散介质中。可以在粒径减小过程中将液体分散介质维持在生理pH，例如，在约3.0到约8.0的范围内；更优选地，在粒径减小过程中维持在约5.0到约7.5范围内。优选地，用于粒径减小过程的分散介质是水性的，尽管可以使用双膦酸盐难溶于其中的任何分散介质，如红花油、乙醇、叔丁醇、甘油、聚乙二醇(PEG)、己烷或乙二醇。使用粒径减小方法，将双膦酸盐的粒径减小到有效平均粒径小于约2000nm。为双膦酸盐的粒径减小提供机械力的有效方法包括球磨、介质磨(mediamilling)和匀化，例如，用Microfluidizer(MicrofluidicsCorp.)。3求磨是使用研磨介质、药物、稳定剂和液体的低能研磨方法。材料被放在研磨容器中，容器以最佳速度旋转，使得介质分级，并通过压紧减小药物粒径。所用的介质必须具有高密度，因为用于颗粒减小的能量是通过重力和研磨介质的质量提供的。1.使用研磨减小双膦酸盐粒径介质磨是一种高能研磨方法。将双膦酸盐复合物、表面稳定剂和液体放在容器中，在含研磨介质和旋转柄/搅拌叶轮的舱内将它们反复循环。旋转柄搅拌研磨介质和剪切力，研磨介质使双膦酸盐复合物压紧，从而减小双膦酸盐复合物粒径。双膦酸盐复合物可以加到液体介质中，它在其中基本不溶，以形成预混合料。表面稳定剂可以存在在预混合料中，或者在粒径减小后它可以添加到双膦酸盐复合物分散体中。通过将预混合料用机械方法处理，减小分散体中双膦酸盐复合物的平均粒径到小于约2000nm,预混合料就可以直接使用。当使用球磨进行磨损时，优选直接使用预混合料。可选择地，使用适当的搅拌器，例如Cowles型混合器，双膦酸盐复合物和至少一种表面稳定剂可以分散在液体介质中，直到观察到形成了其中不存在肉眼可见的大附聚物的均质分散体。当使用再循环介质磨进行磨损时，优选用这样的预研磨分散步骤处理预混合料。用来减小双膦酸盐复合物粒径的机械方法可以采用分散磨(dispersionmill)的形式。合适的分散磨包4舌3求磨、立式3求磨(attritormill)、振动磨和介质磨(mediamill),如砂磨(sandmill)和珠磨(beadmill)。由于提供所需的粒径减少需要相对较短的研磨时间，因此介质磨是优选的。对于介质研磨来说，预混合料的表观粘度优选是约IOO到约1000厘泊，对于球磨研磨来说，预混合料的表观粘度优选是约1直至约100厘泊。该范围趋向于在有效粒径减小和介质磨蚀之间提供最佳的平衡。磨损时间可以在很大范围内改变，这主要取决于所选的特定机械方式和加工条件。对于球磨来说，可能需要直至5天或更长的加工时间。可选择地，使用高剪切介质磨，少于1天的加工时间(l分钟直至几小时的停留时间)是可能的。双膦酸盐复合物颗粒可以在不显著分裂双膦酸盐复合物分子的温度下减小粒径。通常优选低于约30到低于约40。C的加工温度。如果需要的话，可以用常规冷却装置冷却加工装置。可考虑进行温度控制，例如通过将研磨舱套入或浸入冰水中。一般来说，本发明的方法适宜在室温条件下和在对于研磨操作来说安全有效的加工压力下进行操作。环境加工压力通常是球磨、立式3求磨和震动磨的加工压力。粒径减小步骤的研磨介质可以选自坚硬的介质，优选是平均粒径小于约3mm、更优选小于约1mm形式的球体或孩i粒。这样的介质可以理想地为本发明颗粒提供较短的加工时间和较小地磨损研磨设备。不认为研磨介质材料的选择是关键性的。氧化锆，如被镁稳定的95%ZrO，硅酸锆，陶瓷制品，不锈钢，钛，铝，被钇稳定的95。/。ZrO，玻璃研磨介质，和聚合物研磨介质是示例性的研磨材料。研磨介质可以包含优选基本上是球形的颗粒，例如珠粒，它们基本上由聚合物树脂或其它合适的材料组成。可选择地，研磨介质可以包含具有粘附在其上面的聚合物树脂包衣的核。聚合物树脂可以具有约0.8到约3.0g/cm3的密度。一般而言，适宜的聚合物树脂是化学和物理惰性的，基本上不含金属、溶剂和单体，具有足够的硬度和脆性，以使它们在研磨过程中能避免碎裂或压碎。适宜的聚合物树脂包括交联聚苯乙烯，如与二乙烯基苯交联的聚苯乙烯；苯乙烯共聚物；聚碳酸酯；缩醛树脂，如Delnn(E丄duPontdeNemoursandCo.);氯乙烯聚合物和共聚物；聚氨酯；聚酰胺；聚(四氟乙烯)，例如Teflon(E丄duPontdeNemoursandCo.),和其它氟聚合物；高密度聚乙烯；聚丙烯；纤维素醚和酯，如醋酸纤维素；聚羟基曱基丙烯酸酯；聚羟乙基丙烯酸酯；和含硅酮的聚合物，如聚硅氧烷等。聚合物可以是生物可降解的。示例性的生物可降解聚合物包括丙交酯和乙交酯的聚(丙交酯)、聚(乙交酯)共聚物，聚肝，聚(羟乙基曱基丙烯酸酯)，聚(亚胺基碳酸酯)，聚(N-酰基羟基脯氨酸)酯，聚(N-椋榈酰羟基脯氨酸)酯，乙烯-醋酸乙烯共聚物，聚(原酸酯)，聚(己内酯)，和聚(phosphazenes)。对于生物可降解聚合物来说，来自介质本身的污染可以研磨介质的大小优选从约0.01到约3mm。对于细微研磨来说，研磨介质的大小优选从约0.02到约2mm,更优选从约0.03到约1mm。在优选的研磨过程中连续制备双膦酸盐复合物颗粒。该方法包括将双膦酸盐复合物持续地引入研磨舱，将化合物与研磨介质接触，同时在抢内减小粒径，并从研磨抢中不断地取出纳米微粒双膦酸盐复合物。用常规的分离技术在接下来的过程中从磨损的纳米微粒双膦酸盐复合物中分离研磨介质，例如通过筒单过滤，通过过滤筛或滤网过筛，等等。也可采用其它分离技术如离心分离。可注射组合物的开发需要生产无菌产品。本发明的制造过程类似于通常已知的无菌混悬剂的制造过程。典型的无菌混悬剂制造流程图如下(介质调节)丄配料丄粒径减小丄灌注管形瓶丄(冻干)和/或(最终灭菌)如括弧中的任选步骤所表明的，一些加工过程取决于减小粒径的方法和/或灭菌方法。例如，对于不使用介质的研磨方法来说就不需要介质调节。如果由于化学和/或物理不稳定性而导致最终灭菌不可行，那么可以使用无菌加工过程。2.用均化作用减小双膦酸盐粒径均化作用是一项不使用研磨介质的技术。双膦酸盐复合物、表面稳定剂和液体(或药物和液体与粒径减小之后加入的表面稳定剂)构成了推进到加工区中的加工流，这在Microflmdize^中被称为相互作用舱。要处理的产品被引入泵内，然后被强制泵出。Microfluidize^的初始阀将空气清除出泵外。一旦泵中充满了产品，就关闭初始阀，产品就被用力推通过相互作用舱。相互作用舱的几何位置产生了强大的剪切力、碰撞力和空泡形成力，这些力负责粒径减小。特别地，在相互作用舱内，力口压产品被分成两股流，并加速到极大的速度。然后成形喷嘴相互指向，并在相互作用舱内碰撞。所得的产品具有非常细微的和均匀的粒径或小滴大小。Microflmdize^还提供了热交换器，以冷却产品。美国专利第5，510,118号涉及使用Microfluidize^的方法，其被特别引入作为参考。3.用沉淀法减小双膦酸盐粒径形成想要的纳米微粒双膦酸盐分散体的另一种方法是通过微量沉淀反应。这是在一种或多种表面稳定剂和一种或多种胶体稳定性增强表面活性剂的存在下，在不存在任何痕量有毒溶剂或溶解的重金属杂质的情况下制备本发明组合物的纳米微粒稳定分散体的方法。该方法包括，例如(l)用混合操作将本发明的双膦酸盐組合物溶解在适当的溶剂中；(2)用混合操作将步骤(1)的制剂添加到含至少一种表面稳定剂的溶液中，以形成澄明溶液；和(3)用混合操作，使用适当的非溶剂沉淀步骤(2)的制剂。该方法可以接着通过透析或渗滤将任何形成的盐(如果存在的话)除去，并通过常规方法浓缩分散体。所得的本发明纳米微粒双膦酸盐组合物可以以药学可接受的剂型使用。E.使用本发明的制剂和组合物的方法
技术领域：
：本发明的纳米微粒双膦酸盐组合物在多个治疗中是有用的，包括但不限于与异常骨吸收相关的病症的治疗。本发明的方法和组合物对于抑制骨吸收和对于治疗和预防异常骨吸收及与之相关的病症是有用的。这些病症包括全身和局部骨丢失。全身骨丟失常常与骨质疏松有关。骨质疏松在雌激素生产已经大大地减少了的绝经后妇女中是最常见的。然而，骨质疏松也可以是类固醇引起的，并且由于年龄因素在男性中也已经观察到了。骨质疏松可以由疾病引起，例如类风湿性关节炎，它可以由继发性原因引起，例如糖皮质激素治疗，或者它可以与不明确的原因有关，即骨质疏松。在本发明中，优选的方法包括在骨质疏松患者中治疗或预防异常骨吸收。局部骨丢失与牙周病、骨折、和与假体周围骨溶解(换句话说，在假体性植入物周围发生了骨吸收)有关。全身或局部骨丢失可以由废用引起，废用是被局限在床上或轮椅上的人经常存在的问题，或者是在模型或在肌肉牵引中具有固定四肢装置的人存在的问题。本发明的方法和组合物对于治疗和/或预防下列病症或疾病状况是有用的骨质疏松，它可以包括经绝后骨质疏松、类固醇引起的骨质疏松、男性骨质疏松、疾病引起的骨质疏松、特发性骨质疏松；佩吉特氏病(paget，sdisease);异常增加的骨循环；牙周病；与假体周围骨溶解有关的局部骨丢失；和骨折。适用于胃肠外注射剂的纳米微粒双膦酸盐组合物可包括生理学可接受的无菌水溶液或非水溶液、分散体、混悬剂或乳剂，以及用于重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。适当的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括水，乙醇，多元醇(丙二醇、聚乙二醇和甘油等)，其适当的混合物，植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯如油酸乙酯。例如通过使用包衣材料如卯磷脂，对于分散体来说通过维持所需的粒径，和通过使用表面活性剂，可以维持适当的流动性。制剂也可包括生物可降解聚合物和脂质复合物。可注射制剂也可包含辅剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗菌剂和抗真菌剂，如对羟基笨甲酸类、氯代丁醇、苯酚和山梨酸等，可以确保抑制微生物的生长。也希望包括等渗剂，如糖和氯化钠等。通过使用延迟吸收的试剂如单硬脂酸铝和明胶，可以制成延迟吸收的可注射药剂。本发明的组合物和制剂可以通过常规方法向患者施用，包括但不限于，口服、经直肠、目艮用、肠胃夕卜(例如静脉内、肌内或皮下)、脑池内、经肺、阴道内、腹膜内、局部(例如散剂、膏剂或滴剂)给药，或作为口腔或鼻腔喷雾。当用在本文中时，术语"受试者(subject)"用于表示动物，优选哺乳动物，包括人或非人类。术语"患者"和"受试者"可互换使用。用于口服给药的固体剂型包括但不限于胶嚢、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，双膦酸盐、辛酸钠和优选地螯合剂的多颗粒可与至少一种下列成分混合(a)—种或多种惰性赋形剂(或载体)，如柠檬酸钠或磷酸二4丐；(b)填充剂或增充剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(c)粘合剂，如羧甲基纤维素、alignates、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(d)保湿剂，如甘油；(e)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些复合硅酸盐和碳酸钠；(f)溶解阻滞剂，如石蜡；(g)吸收加速剂，如季铵类化合物；(h)润湿剂，如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(i)吸附剂，如高呤土和膨润土；和(j)润滑剂，如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠或其混合物。对于胶嚢、片剂和丸剂来说，剂型也可包含緩沖剂。除了这些惰性稀释剂以外，组合物也可以包括辅剂，如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。"治疗有效量"当用于本文中涉及双膦酸盐化合物、其药学可接受的盐、其酯及其混合物时，表示在需要治疗与异常骨吸收相关病症和相关疾病的大量患者中施用药物时，提供特定的药理学响应的药物剂量。它强调的是，在特定情况下向特定患者施用的"治疗有效量"不一定总能有效治疗本文所述的疾病，即本领域技术人员认定该剂量是"治疗有效量"。普通技术人员应当理解的是，双膦酸盐的有效量可以凭经验确定，并且可以以纯净物形式(当这种形式存在时)，或以药学可接受的盐、酯或前药形式施用。可改变本发明纳米微粒组合物中双膦酸盐的确切剂量水平以获得对于用特定组合物和给药方法获取所需的治疗响应有效的双膦酸盐的量。因此所选的剂量水平取决于想要的治疗效果、给药途径、所施用的本发明组合物的效力、想要的治疗持续时间及其它因素。单位剂量组合物可含有可用于构成日剂量的约数的量。然而可以理解的是，对任何特定患者来说，特定剂量水平将取决于多个因素要获得的细胞或生理应答的类型和程度；所采用的具体药剂或组合物的活性；所采用的具体药剂或组合物；患者的年龄、体重、全身健康状况、性别和饮食；给药时间、给药途径和药剂排泄速度；治疗的持续时间；用于与特定药剂组合或同时给药的药物；和医学领域公知的类似因素。因此，精确的药学有效量不可能预先指定，可以由护理工作者或临床医生很容易地确定。可以通过常规实验从动物才莫型和人类临床研究中测定适当的量。一般而言，要选择双膦酸盐的适当的量来获得骨吸收抑制效果，即施用骨吸收抑制量的双膦酸盐。对人类来说，双膦酸盐的有效口服剂量通常是从约1.5到约6,000pg/kg体重，优选约10到约2,000|ag/kg体重。对于人用的含阿仑膦酸盐、其药学可接受的盐或其药学可接受的衍生物的口服组合物来说，单位剂量通常含有约8.75mg到约140mg阿仑膦酸盐化合物，基于阿仑磷酸的有效重量。本发明进一步提供了治疗患有与异常骨吸收相关病症的患者的方法，包括施用治疗有效量的本发明制剂，以提供双膦酸盐脉冲式给药。这种类型剂型的优点包括减小常规多次IR给药方案所需的给药频率，同时仍然维持从脉动式血浆曲线得到的益处。以患者顺应性的观点来看，这种减小的给药频率是有利的，获得了可以减小的频率施用的制剂。通过利用本发明组合物而使给药频率减小成为可能，这通过减少卫生保健工作者对施用IR剂量双膦酸盐、尤其是阿仑膦酸钠用于与异常骨吸收相关疾病的时间花费量而促成了保健花费的减少。对于本领域技术人员显而易见的是，在本发明方法和组合物中可以进行各种修饰和改变而不背离本发明的精神和范围。因此，本发明要覆盖本发明的各种修饰和改变，只要它们落在所附权利要求及其等价技术方案的范围之内。权利要求1.双膦酸盐组合物，包含(a)有效平均粒径小于约2000nm的至少一种双膦酸盐颗粒；和(b)至少一种表面稳定剂。2.权利要求1的组合物，其中，双膦酸盐选自阿仑膦酸盐、cimadronate、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、依替膦酸盐、伊班膦酸盐、英卡膦酸盐、奥帕膦酸盐、奈立膦酸盐、利塞膦酸盐、peridronate、帕米膦酸盐、唑来膦酸盐，其药学可接受的盐，其药学可接受的酸，及其混合物。3.权利要求2的组合物，其中，双膦酸盐是阿仑膦酸钠或阿仑膦酸钠三水合物。4.制成可注射剂型的权利要求1到3任一的组合物，其中，双膦酸盐与多价阳离子复合。5.权利要求4的组合物，其中，多价阳离子选自二价阳离子，其中，阳离子选自Ca++、211++或Mn++等，难溶于水的盐，难溶于水的酯，和难〉容于水的前药。6.制成可注射剂型的权利要求1到5任一的组合物，其中，组合物通过注射形成了用于延緩双膦酸盐释放的皮下或肌内贮库。7.制成可注射剂型用于肌内或皮下注射的权利要求1到6任一的组合物，其中，组合物中双膦酸盐的浓度范围从约0.1%直至约60%(w/v)。8.权利要求1到7任一的组合物，其中，双膦酸盐剂量是约1.5到约6，000pg/kg体重。9.权利要求6的组合物，其中，延緩释放经历的时间选自直至约l周，直至约2周，直至约3周，直至约4周，直至约l个月，直至约2个月，直至约3个月，直至约4个月，直至约5个月，直至约6个月，直至约7个月，直至约8个月，直至约9个月，直至约10个月，直至约ll个月，直至约12个月，直至约18个月，直至约2年，直至约30个月，直至约3年，直至约3年半，直至约4年，直至约4年半，和直至约5年。10.权利要求1到9任一的组合物，其中，双膦酸盐颗粒大小选自小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm或小于约50nm。11.权利要求1到10任一的组合物，进一步包含生物可降解聚合物，脂质复合物，油溶液，或其组合。12.权利要求1到11任一的组合物，进一步包含螯合剂。13.权利要求12的组合物，其中，螯合剂选自a-羟基脂肪酸，棕榈酸，植酸，(乳铁蛋白)，a-羟基酸，腐殖酸，胆汁酸，胆汁提取物，胆红素，胆绿素，乙二胺四乙酸和乙二醇双-((3-氨基乙基醚)-N,N,N,Nl-四乙酸("EGTA"),EDTA衍生物，EGTA衍生物，不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸衍生物，叶酸，叶酸书f生物，和丙氨酸二乙酸。14.权利要求1到13任一的组合物，其中，当口服施用时，双膦酸盐颗粒被延迟双膦酸盐溶出的pH-敏感性涂层包衣。15.权利要求1到14任一的组合物，进一步包含辛酸钠。16.权利要求1到15任一的组合物，包含至少两种不同群体的双膦酸盐颗粒的混合物，它们具有不同的体外溶出曲线。17.权利要求1到16任一的组合物，其中，组合物进一步包含一种或多种药学可接受的赋形剂、载体或其组合。18.权利要求1到17任一的组合物，其中，至少一种表面稳定剂的存在量选自约0.5%到约99.999%重量，约5.0%到约99.9%重量，和约10%到约99.5%重量，基于双膦酸盐和至少一种表面稳定剂的总组合干重，不包括其它赋形剂。19.权利要求l到18任一的组合物，其中，双膦酸盐的存在量选自约99.5%到约0.001%，约95%到约0.1%,和约90%到约0.5%重量，基于双膦酸盐和至少一种表面稳定剂的总组合重量，不包括其它赋形剂。20.权利要求1到19任一的组合物，包含至少两种表面稳定剂。21.权利要求1到20任一的组合物，其中，表面稳定剂选自阴离子表面稳定剂、阳离子表面稳定剂、两性离子表面稳定剂、非离子表面稳定剂和离子表面稳定剂。22.权利要求1到21任一的组合物，其中，至少一种表面稳定剂选自鯨蜡基氯化吡啶徵，明胶，酪蛋白，磷脂，右旋糖酐，甘油，阿拉伯胶，胆固醇，黄蓍胶，硬脂酸，苯扎氯铵，硬脂酸钩，单硬脂酸甘油酯，鲸蜡硬脂醇，聚西托醇乳化蜡，脱水山梨糖醇酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯蓖麻油衍生物，聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，聚乙二醇，十二烷基三曱基溴化铵，聚氧乙烯硬脂酸酯，胶体二氧化硅，磷酸盐，十二烷基硫酸钠，羧甲基纤维素钓，羟丙基纤维素，羟丙甲基纤维素，羧曱基纤维素钠，曱基纤维素，轻乙基纤维素，羟丙甲基纤维素酞酸酯，非晶体纤维素，硅酸镁铝，三乙醇胺，聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，与环氧乙烷和曱醛的4-(l,l,3,3-四甲基丁基)-苯酚聚合物，泊洛沙姆；poloxamines，荷电磷脂，二辛基石黄基琥珀酸盐，石黄基琥珀酸钠的二烷基酯，月桂基硫酸钠，烷基芳基聚醚磺酸酯，蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物，对-异壬基苯氧基聚-(缩水甘油)，癸酰基-N-甲基葡萄糖酰胺；正-癸基(3-D-吡喃葡萄糖苷；正-癸基P-D-吡喃麦芽糖苷；正-十二烷基(3-D-吡喃葡萄糖苷；正-十二烷基P-D-麦芽糖苷；庚酰基-N-曱基葡萄糖酰胺；正-庚基-卩-D-他喃葡萄糖苷；正-庚基卩-D-硫代葡糖苷；正-己基p-D-吡喃葡萄糖苷；壬酰基-N-甲基葡萄糖酰胺；正-壬基P-D-吡喃葡萄糖苷；辛酰基-N-甲基葡萄糖酰胺；正-辛基-(3-D-处喃葡萄糖苷；辛基(3-D-硫代吡喃葡萄糖苷；溶菌酶，PEG-磷脂，PEG-胆固醇，PEG-胆固醇衍生物，PEG-维生素A，PEG-维生素E,醋酸乙烯和乙烯基吡咯烷酮的无规则共聚物，阳离子聚合物，阳离子生物聚合物，阳离子多糖，阳离子纤维质，阳离子藻酸盐，阳离子非聚合化合物，阳离子磷脂，阳离子脂质，聚甲基丙烯酸甲酯三甲基溴化铵，锍化合物，聚乙烯吡咯烷酮-2-二甲基氨基乙基甲基丙烯酸酯二曱基硫酸酯，十六烷基三曱基溴化铵，辚化合物，季铵化合物，苯曱基-二(2-氯乙基)乙基淡化铵，椰子三曱基氯化铵，椰子三甲基渙化铵，椰子甲基二羟乙基氯化铵，椰子甲基二羟乙基溴化铵，癸基三乙基氯化铵，癸基二甲基羟乙基氯化铵，癸基二曱基羟乙基氯溴化铵，(:12-15二甲基羟乙基氯化铵，(:12-15二甲基羟乙基氯溴化铵，椰子二曱基羟乙基氯化铵，椰子二曱基羟乙基溴化铵，肉豆蔻基三甲基铵曱基硫酸酯，月桂基二曱基苯甲基氯化铵，月桂基二曱基苯甲基溴化铵，月桂基二曱基(乙烯氧基)4氯化铵，月桂基二曱基(乙烯氧基)4溴化铵，N-烷基(dw8)二曱基苯曱基氯化铵，N-烷基(d^8)二曱基-苯曱基氯化铵，N-十四烷基二甲基苯曱基氯化铵一水合物，二曱基二癸基氯化铵，N-烷基和(dw4)二曱基1-萘基曱基氯化铵，三曱基卤化铵，烷基-三甲基铵盐，二烷基-二曱基铵盐，月桂基三甲基氯化铵，乙氧基化烷酰氨基烷基二烷基铵盐，乙氧基化三烷基铵盐，二烷基苯二烷基氯化铵，N-二癸基二甲基氯化铵，N-十四烷基二甲基苯曱基氯化铵一水合物，N-烷基(d^4)二曱基l-萘基甲基氯化铵，十二烷基二曱基苯曱基氯化铵，二烷基苯烷基氯化铵，月桂基三曱基氯化铵，烷基苯甲基曱基氯化铵，烷基苯曱基二曱基溴化铵，Cu三甲基溴化铵，C^三甲基溴化铵，Cn三曱基溴化铵，十二烷基苯曱基三乙基氯化铵，聚-二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)，二甲基氯化铵，烷基二曱基卣化铵，三鲸蜡基曱基氯化铵，癸基三甲基溴化铵，十二烷基三乙基溴化铵，十四烷基三甲基溴化铵，曱基三辛基氯化铵，POLYQUAT10，四丁基溴化铵，苯曱基三甲基溴化铵，胆碱酯，苯扎氯铵，硬脂基二甲基千基氯化铵化合物，鲸蜡基溴化吡啶镜，鯨蜡基氯化吡啶镜，四元聚氧乙基烷基胺的卣盐，MIRAPOL,ALK1AQUAT,烷基吡咬餘盐；胺，胺盐，胺氧化物，imideazolinmm盐，质子化季丙烯酰胺，甲基化四元聚合物，和阳离子瓜尔胶。23.权利要求1到22任一的组合物，含有作为表面稳定剂的分子量约40,000道尔顿或更小的聚维酮聚合物。24.权利要求1到23任一的组合物，另外包含一种或多种非双膦酸盐活性剂。25.权利要求1到24任一的组合物，其中，组合物再分散在生物学相关介质中，使得双膦酸盐颗粒的有效平均粒径选自小于约2微米、小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm和小于约50nm。26.制备纳米孩i粒双膦酸盐组合物的方法，包括(a)将至少一种双膦酸盐与多价阳离子复合；(b)将双膦酸盐粒径减小至有效平均粒径小于约2000nm;其中在粒径减小之前、过程中或之后，至少一种表面稳定剂与双膦酸盐复合。27.在有这种需求的哺乳动物中抑制骨吸收的方法，包括施用含下列成分的双膦酸盐组合物(a)至少一种有效平均粒径小于约2000nm的双膦酸盐颗粒；和(b)至少一种表面稳定剂。28.权利要求27的方法，其中，组合物是在给药后形成贮库的可注射剂型。29.权利要求27或28的方法，其中，以大于l周直至和包括l年和直至一生一次的频率间隔向需要该治疗的哺乳动物给药。30.权利要求27到29任一的方法，其不产生由双膦酸盐给药导致的显著的食管和上胃肠道不适。全文摘要描述了有效平均粒径小于2000nm的纳米微粒双膦酸盐组合物。该组合物在治疗哺乳动物骨吸收中是有用的。文档编号A61K9/51GK101198316SQ200680017268公开日2008年6月11日申请日期2006年3月17日优先权日2005年3月17日发明者G·利弗西奇,S·詹金斯申请人:伊兰制药国际有限公司